JPH0731467A - 糸状菌の培養法 - Google Patents
糸状菌の培養法Info
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- JPH0731467A JPH0731467A JP5179417A JP17941793A JPH0731467A JP H0731467 A JPH0731467 A JP H0731467A JP 5179417 A JP5179417 A JP 5179417A JP 17941793 A JP17941793 A JP 17941793A JP H0731467 A JPH0731467 A JP H0731467A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 糸状菌を液体培地中でペレット状に培養す
る。 【構成】 糸状菌をローズベンガル、ソルボース、デオ
キシコール酸ナトリウムなどの菌糸伸長阻害物質を添加
した液体培地中でペレット状に培養する。
る。 【構成】 糸状菌をローズベンガル、ソルボース、デオ
キシコール酸ナトリウムなどの菌糸伸長阻害物質を添加
した液体培地中でペレット状に培養する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は糸状菌の培養法に関す
る。更に詳しくは糸状菌を液体培養する際に菌糸伸長阻
害物質を添加した液体培地を用いペレット状に培養する
ことを特徴とする糸状菌の培養法に関する。
る。更に詳しくは糸状菌を液体培養する際に菌糸伸長阻
害物質を添加した液体培地を用いペレット状に培養する
ことを特徴とする糸状菌の培養法に関する。
【０００２】
（ペレットの定義）液体培養における糸状菌の形態は、
大きな球状の菌糸塊、小さな不整形の菌糸塊及び均一に
分散した繊維状の菌糸群、あるいはそれらの混合した状
態等、多種多様であるが、それらの諸形態はペレット状
とパルプ状との２つの代表的な形態に大別できる。ペレ
ット状とは、１個ずつ完全に独立した菌糸塊で、球状ま
たは球状に近く、肉眼で容易に認め得る大きさのもので
あり、パルプ状とは、多数の分岐のある繊維状の菌糸群
で、液中にほぼ均一に分散しているものであると考えら
れている［カビ応用開発研究会”カビの分離・培養・同
定と有用物質の生産・応用,テクノアイ出版部,p.249(19
85)］。 （ペレット化の意義）一般的に糸状菌や放線菌を培養し
て菌体・抗生物質・酵素・有機酸・糖類・生理活性物質
などの生産物を得ようとする時、好気的深部培養を行う
が、この際溶存酸素濃度が目的とする生産物の収率に及
ぼす影響は非常に大きい。一方、糸状菌の形態と培養液
の粘度との間には密接な関係があり、菌糸形態が均一な
パルプ状になる程培養液の粘度は著しく増大し［日本農
芸化学会誌,Vol.33,p.707(1959)］、菌糸の分散や培養
装置内の均一化ができなかったり、酸素を液中に十分供
給できなくなる。これに対し、菌糸形態がペレット状に
なる場合、培養液の粘性が増加せず、液の混合や均一
化、さらに酸素の供給も容易になる。例えば、気泡塔型
培養装置により、ペレット状菌糸形態を比較的とりやす
いアスペルギルス・ニガー(Aspergillus niger)をペレ
ット状に培養し、ビート糖蜜からクエン酸を高収率で得
ることができる［Ind. Eng. Chem.,Vol.44,p.2229(195
2)］。又、K.Gbewonyo らは、ペニシリウム・クリソゲ
ナム(Penicillium chrysogenum)の胞子を直径３００か
ら５００μｍのセライトのビーズに吸着させ、ビーズ上
で増殖させることにより微細なペレット状菌体と同じ菌
糸形態を得ることに成功した。液量３Ｌの気泡塔型培養
装置で、ビーズ上吸着菌糸とビーズを用いないパルプ状
菌糸を培養し結果を比較したところ、ビーズ上吸着菌糸
は菌体濃度(g/L)が１．７倍、ペニシリンＧ生産量(g/L)
が１１倍であった。パルプ状菌糸の場合生産性が低下す
る原因は、酸素供給能が低下し培養液中の溶存酸素濃度
レベルが臨界値以下になった為であった［Biotechnol.
Bioeng.,Vol.25,p.2873(1983)］。又、特開平３−６３
３５０号には植物由来粉末を含有する液体培地中でペニ
シリウム(Penicillium)属、アスペルギルス(Asperugill
us)属、セフアロスポリウム(Cephalosporium)属、又は
リゾープス(Rhizopus)属に属する糸状菌を培養する方法
が開示されている。この方法を用いれば、大きな菌糸塊
に生育してしまうところを微細な菌糸塊に培養でき、培
地の攪拌効率も改善され、有機酸、抗生物質、Ｌ−アミ
ノ酸、プロテアーゼ、グルコアミラーゼ、グルコースオ
キシダーゼなどの酵素類の生産が促進されることが報告
されている。これらの結果のように菌糸形態がペレット
状になる場合、培養液の粘性が増加しないために、液の
混合や均一化が容易になり、酸素の供給が効率的に行わ
れ、有用物質生産が高収率となる。 （従来のペレット化法とその問題点）従来、糸状菌を微
細化したペレット状に培養する方法については、ペレッ
ト状菌体の核となる物質を加えた培地で培養する方法が
知られている。例えば、K.Gbewonyo らは、胞子を直径
３００から５００μｍのセライトのビーズに吸着させ、
ビーズ上で増殖させることにより微細なペレット状菌体
と同じ菌糸形態を得ることに成功している［Biotechno
l. Bioeng.,Vol.25,p.2873(1983)］。又、特開平３−６
３３５０号には植物由来粉末を含有する液体培地中でペ
ニシリウム(Penicillium)属、アスペルギルス(Asperugi
llus)属、セフアロスポリウム(Cephalosporium)属、又
はリゾープス(Rhizopus)属に属する糸状菌を培養する方
法が開示されている。この方法を用いれば、大きな菌糸
塊に生育してしまうところを微細な菌糸塊に培養でき
る。しかし、これらの従来技術は比較的ペレット状にな
りやすい性質を有している糸状菌に対しては有効である
が、発明者自らの検討によれば、ドレクスレラ(Drechsr
ela)属の糸状菌のようにペレット状になりにくい糸状菌
では微細なペレット状に培養することが困難であること
が発明者自らの検討によって明かとなっているし、また
実際そのような技術は知られていない。ところで、土壌
からの糸状菌の分離の際などにコロニーを小さくするた
め、あるいは菌糸伸長阻害剤の阻害活性の強さを測定す
るために寒天培地に菌糸伸長阻害剤を加えることは行わ
れている［例えば獅山慈考”植物病理学実験マニュア
ル”,養賢堂,p125(1989)］。しかし、菌糸伸長阻害剤を
液体培地を用いた糸状菌の培養に供した例はなく、況や
糸状菌の培養形態をペレット状に制御する目的で菌糸伸
長阻害剤を使用した例もこれまで全く知られていなかっ
た。
大きな球状の菌糸塊、小さな不整形の菌糸塊及び均一に
分散した繊維状の菌糸群、あるいはそれらの混合した状
態等、多種多様であるが、それらの諸形態はペレット状
とパルプ状との２つの代表的な形態に大別できる。ペレ
ット状とは、１個ずつ完全に独立した菌糸塊で、球状ま
たは球状に近く、肉眼で容易に認め得る大きさのもので
あり、パルプ状とは、多数の分岐のある繊維状の菌糸群
で、液中にほぼ均一に分散しているものであると考えら
れている［カビ応用開発研究会”カビの分離・培養・同
定と有用物質の生産・応用,テクノアイ出版部,p.249(19
85)］。 （ペレット化の意義）一般的に糸状菌や放線菌を培養し
て菌体・抗生物質・酵素・有機酸・糖類・生理活性物質
などの生産物を得ようとする時、好気的深部培養を行う
が、この際溶存酸素濃度が目的とする生産物の収率に及
ぼす影響は非常に大きい。一方、糸状菌の形態と培養液
の粘度との間には密接な関係があり、菌糸形態が均一な
パルプ状になる程培養液の粘度は著しく増大し［日本農
芸化学会誌,Vol.33,p.707(1959)］、菌糸の分散や培養
装置内の均一化ができなかったり、酸素を液中に十分供
給できなくなる。これに対し、菌糸形態がペレット状に
なる場合、培養液の粘性が増加せず、液の混合や均一
化、さらに酸素の供給も容易になる。例えば、気泡塔型
培養装置により、ペレット状菌糸形態を比較的とりやす
いアスペルギルス・ニガー(Aspergillus niger)をペレ
ット状に培養し、ビート糖蜜からクエン酸を高収率で得
ることができる［Ind. Eng. Chem.,Vol.44,p.2229(195
2)］。又、K.Gbewonyo らは、ペニシリウム・クリソゲ
ナム(Penicillium chrysogenum)の胞子を直径３００か
ら５００μｍのセライトのビーズに吸着させ、ビーズ上
で増殖させることにより微細なペレット状菌体と同じ菌
糸形態を得ることに成功した。液量３Ｌの気泡塔型培養
装置で、ビーズ上吸着菌糸とビーズを用いないパルプ状
菌糸を培養し結果を比較したところ、ビーズ上吸着菌糸
は菌体濃度(g/L)が１．７倍、ペニシリンＧ生産量(g/L)
が１１倍であった。パルプ状菌糸の場合生産性が低下す
る原因は、酸素供給能が低下し培養液中の溶存酸素濃度
レベルが臨界値以下になった為であった［Biotechnol.
Bioeng.,Vol.25,p.2873(1983)］。又、特開平３−６３
３５０号には植物由来粉末を含有する液体培地中でペニ
シリウム(Penicillium)属、アスペルギルス(Asperugill
us)属、セフアロスポリウム(Cephalosporium)属、又は
リゾープス(Rhizopus)属に属する糸状菌を培養する方法
が開示されている。この方法を用いれば、大きな菌糸塊
に生育してしまうところを微細な菌糸塊に培養でき、培
地の攪拌効率も改善され、有機酸、抗生物質、Ｌ−アミ
ノ酸、プロテアーゼ、グルコアミラーゼ、グルコースオ
キシダーゼなどの酵素類の生産が促進されることが報告
されている。これらの結果のように菌糸形態がペレット
状になる場合、培養液の粘性が増加しないために、液の
混合や均一化が容易になり、酸素の供給が効率的に行わ
れ、有用物質生産が高収率となる。 （従来のペレット化法とその問題点）従来、糸状菌を微
細化したペレット状に培養する方法については、ペレッ
ト状菌体の核となる物質を加えた培地で培養する方法が
知られている。例えば、K.Gbewonyo らは、胞子を直径
３００から５００μｍのセライトのビーズに吸着させ、
ビーズ上で増殖させることにより微細なペレット状菌体
と同じ菌糸形態を得ることに成功している［Biotechno
l. Bioeng.,Vol.25,p.2873(1983)］。又、特開平３−６
３３５０号には植物由来粉末を含有する液体培地中でペ
ニシリウム(Penicillium)属、アスペルギルス(Asperugi
llus)属、セフアロスポリウム(Cephalosporium)属、又
はリゾープス(Rhizopus)属に属する糸状菌を培養する方
法が開示されている。この方法を用いれば、大きな菌糸
塊に生育してしまうところを微細な菌糸塊に培養でき
る。しかし、これらの従来技術は比較的ペレット状にな
りやすい性質を有している糸状菌に対しては有効である
が、発明者自らの検討によれば、ドレクスレラ(Drechsr
ela)属の糸状菌のようにペレット状になりにくい糸状菌
では微細なペレット状に培養することが困難であること
が発明者自らの検討によって明かとなっているし、また
実際そのような技術は知られていない。ところで、土壌
からの糸状菌の分離の際などにコロニーを小さくするた
め、あるいは菌糸伸長阻害剤の阻害活性の強さを測定す
るために寒天培地に菌糸伸長阻害剤を加えることは行わ
れている［例えば獅山慈考”植物病理学実験マニュア
ル”,養賢堂,p125(1989)］。しかし、菌糸伸長阻害剤を
液体培地を用いた糸状菌の培養に供した例はなく、況や
糸状菌の培養形態をペレット状に制御する目的で菌糸伸
長阻害剤を使用した例もこれまで全く知られていなかっ
た。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、糸状
菌を菌糸伸長阻害剤を添加した液体培地中でペレット状
に培養する方法を提供することにある。
菌を菌糸伸長阻害剤を添加した液体培地中でペレット状
に培養する方法を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らはこの課題を
解決するために、菌糸伸長阻害物質をある濃度加えた寒
天培地上で糸状菌を培養すると菌糸が密集したコロニー
を形成することからヒントを得て鋭意検討の結果、液体
培地への菌糸伸長阻害物質の添加が糸状菌のペレット状
増殖に有効であることを見い出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は糸状菌を菌糸伸長阻害物質を添加し
た液体培地中でペレット状に培養することを特徴とする
糸状菌の培養法を提供するものである。
解決するために、菌糸伸長阻害物質をある濃度加えた寒
天培地上で糸状菌を培養すると菌糸が密集したコロニー
を形成することからヒントを得て鋭意検討の結果、液体
培地への菌糸伸長阻害物質の添加が糸状菌のペレット状
増殖に有効であることを見い出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は糸状菌を菌糸伸長阻害物質を添加し
た液体培地中でペレット状に培養することを特徴とする
糸状菌の培養法を提供するものである。
【０００５】本発明において用いる糸状菌としては、例
えばドレクスレラ・モノセラスＭＨ５０１８（微工研菌
寄１１９９４号）、ＭＨ９０１１（微工研菌寄第１２１
２９号）、ＭＨ５５１１（微工研菌寄第１２１３０号）
などがある。本発明において使用する液体培地は菌糸伸
長阻害剤を添加する以外は糸状菌が生育する液体培地で
あればどのような培地でも使用できる。例えば Czapek
培地［Catalogue of Strains (American Type Culture
Collection),Vol.10,p.230(1972)］、Leonian 培地［Ca
talogue of Strains (American Type Culture Collecti
on),Vol.10,p.254(1972)］、ポテト・デキストロース培
地［Catalogue of Strains (American Type Culture Co
llection),Vol.10,p.244(1972)］で寒天を加えない液体
培地、あるいは第２表［表２］、第４［表４］〜６表
［表６］に記載の培地が使用される。本発明における菌
糸伸長阻害剤とは胞子からの発芽を阻害せず菌糸伸長の
みを阻害する物質であり、例えば ローズベンガル, ソ
ルボース, デオキシコール酸ナトリウム を例示するこ
とができる。ローズベンガル の培地への添加濃度範囲
は通常 0.0001%〜0.1% であり、好ましくは 0.00025%〜
0.008% である。ソルボース の培地への添加濃度範囲は
通常 0.001%〜10% であり、好ましくは 0.01%〜1% であ
る。デオキシコール酸ナトリウム の培地への添加濃度
範囲は通常 0.01%〜1% であり、好ましくは 0.04%〜0.4
% である。本発明においてはこれら菌糸伸長阻害剤を液
体培地へ単独或いは２種以上の組み合せて添加すればよ
い。培養温度は糸状菌が生育できる温度であればどのよ
うな温度でもよい。培養法は、三角フラスコによる回転
振盪培養、通気攪拌型培養槽による培養、気泡塔型培養
槽による培養など何れの培養法でもよい。
えばドレクスレラ・モノセラスＭＨ５０１８（微工研菌
寄１１９９４号）、ＭＨ９０１１（微工研菌寄第１２１
２９号）、ＭＨ５５１１（微工研菌寄第１２１３０号）
などがある。本発明において使用する液体培地は菌糸伸
長阻害剤を添加する以外は糸状菌が生育する液体培地で
あればどのような培地でも使用できる。例えば Czapek
培地［Catalogue of Strains (American Type Culture
Collection),Vol.10,p.230(1972)］、Leonian 培地［Ca
talogue of Strains (American Type Culture Collecti
on),Vol.10,p.254(1972)］、ポテト・デキストロース培
地［Catalogue of Strains (American Type Culture Co
llection),Vol.10,p.244(1972)］で寒天を加えない液体
培地、あるいは第２表［表２］、第４［表４］〜６表
［表６］に記載の培地が使用される。本発明における菌
糸伸長阻害剤とは胞子からの発芽を阻害せず菌糸伸長の
みを阻害する物質であり、例えば ローズベンガル, ソ
ルボース, デオキシコール酸ナトリウム を例示するこ
とができる。ローズベンガル の培地への添加濃度範囲
は通常 0.0001%〜0.1% であり、好ましくは 0.00025%〜
0.008% である。ソルボース の培地への添加濃度範囲は
通常 0.001%〜10% であり、好ましくは 0.01%〜1% であ
る。デオキシコール酸ナトリウム の培地への添加濃度
範囲は通常 0.01%〜1% であり、好ましくは 0.04%〜0.4
% である。本発明においてはこれら菌糸伸長阻害剤を液
体培地へ単独或いは２種以上の組み合せて添加すればよ
い。培養温度は糸状菌が生育できる温度であればどのよ
うな温度でもよい。培養法は、三角フラスコによる回転
振盪培養、通気攪拌型培養槽による培養、気泡塔型培養
槽による培養など何れの培養法でもよい。
【０００６】
【作用】本発明によれば従来技術では不可能であったパ
ルプ状増殖をする糸状菌の液体培養によるペレット状菌
体の培養が達成できる。その理由は必ずしも明らかでは
ないが、菌糸伸長阻害剤を加えた培地中で糸状菌を培養
すると伸長が抑制され分岐した菌糸が密に絡み合った形
態が観察されるため、これがペレット状増殖を起こす理
由ではないかと推測される。
ルプ状増殖をする糸状菌の液体培養によるペレット状菌
体の培養が達成できる。その理由は必ずしも明らかでは
ないが、菌糸伸長阻害剤を加えた培地中で糸状菌を培養
すると伸長が抑制され分岐した菌糸が密に絡み合った形
態が観察されるため、これがペレット状増殖を起こす理
由ではないかと推測される。
【０００７】
【実施例】以下に実施例で本発明を詳細に説明する。以
下において％は重量基準である。培養菌体の形態は肉眼
観察あるいは顕微鏡観察により評価した。 実施例１ ドレクスレラ・モノセラスＭＨ９０１１（微工研菌寄第
１２１２９号）を第１表［表１］に示す天然寒天培地に
接種し、２５℃にて１４日間培養後、胞子を採取し、１
％ＮａＣｌ溶液に懸濁し、これを接種用胞子懸濁液とし
た。第２表［表２］に示す液体培地にローズベンガルを
0.00025, 0.002, 0.008% となるように加えた培地、ソ
ルボース を 0.01, 0.1, 1.0% となるように加えた培
地、デオキシコール酸ナトリウム を 0.04, 0.16, 0.32
% となるように加えた培地、比較として無添加の培地を
それぞれ５００ｍＬ容三角フラスコに１５０ｍＬ仕込
み、蒸気滅菌した後、接種用胞子懸濁液の一定容量を約
１０個胞子／ｍＬとなるように接種し、２５℃にて７日
間９０ｒｐｍで回転振盪培養を行った。培養後、菌糸の
形態を観察した。その結果を第３表［表３］に示す。ま
た、ペレット状に生育した培養菌糸を第１図［図１］
に、ペレットの倍率８０倍の顕微鏡写真を第２図［図
２］にそれぞれ示す。
下において％は重量基準である。培養菌体の形態は肉眼
観察あるいは顕微鏡観察により評価した。 実施例１ ドレクスレラ・モノセラスＭＨ９０１１（微工研菌寄第
１２１２９号）を第１表［表１］に示す天然寒天培地に
接種し、２５℃にて１４日間培養後、胞子を採取し、１
％ＮａＣｌ溶液に懸濁し、これを接種用胞子懸濁液とし
た。第２表［表２］に示す液体培地にローズベンガルを
0.00025, 0.002, 0.008% となるように加えた培地、ソ
ルボース を 0.01, 0.1, 1.0% となるように加えた培
地、デオキシコール酸ナトリウム を 0.04, 0.16, 0.32
% となるように加えた培地、比較として無添加の培地を
それぞれ５００ｍＬ容三角フラスコに１５０ｍＬ仕込
み、蒸気滅菌した後、接種用胞子懸濁液の一定容量を約
１０個胞子／ｍＬとなるように接種し、２５℃にて７日
間９０ｒｐｍで回転振盪培養を行った。培養後、菌糸の
形態を観察した。その結果を第３表［表３］に示す。ま
た、ペレット状に生育した培養菌糸を第１図［図１］
に、ペレットの倍率８０倍の顕微鏡写真を第２図［図
２］にそれぞれ示す。
【０００８】
【表１】
【０００９】
【表２】
【００１０】
【表３】 無添加の場合糸状菌はパルプ状に生育したが、ローズベ
ンガル, ソルボース,デオキシコール酸ナトリウム を添
加した場合、何れもペレット状に増殖した。
ンガル, ソルボース,デオキシコール酸ナトリウム を添
加した場合、何れもペレット状に増殖した。
【００１１】実施例２ ドレクスレラ・モノセラスＭＨ９０１１（微工研菌寄第
１２１２９号）を第１表［表１］に示す天然寒天培地に
接種し、２５℃にて１４日間培養後、胞子を採取し、１
％ＮａＣｌ溶液に懸濁し、これを接種用胞子懸濁液とし
た。第４表［表４］に示すローズベンガルを 0.003% 添
加した液体培地に炭素源として Glucose、Potato starc
h、Soluble starch、Galactose、Lactose 、Maltose、S
orbitol、Mannitolをそれぞれ添加した培地を調製し、
それぞれ５００ｍＬ用三角フラスコに１５０ｍＬ仕込
み、蒸気滅菌した後、接種用胞子懸濁液の一定容量を約
１０個胞子／ｍＬとなるように接種し、２５℃にて７日
間９０ｒｐｍで回転振盪培養を行った。培養後、菌糸の
形態を観察した。その結果を第５表［表５］に示す。
１２１２９号）を第１表［表１］に示す天然寒天培地に
接種し、２５℃にて１４日間培養後、胞子を採取し、１
％ＮａＣｌ溶液に懸濁し、これを接種用胞子懸濁液とし
た。第４表［表４］に示すローズベンガルを 0.003% 添
加した液体培地に炭素源として Glucose、Potato starc
h、Soluble starch、Galactose、Lactose 、Maltose、S
orbitol、Mannitolをそれぞれ添加した培地を調製し、
それぞれ５００ｍＬ用三角フラスコに１５０ｍＬ仕込
み、蒸気滅菌した後、接種用胞子懸濁液の一定容量を約
１０個胞子／ｍＬとなるように接種し、２５℃にて７日
間９０ｒｐｍで回転振盪培養を行った。培養後、菌糸の
形態を観察した。その結果を第５表［表５］に示す。
【００１２】
【表４】
【００１３】
【表５】 何れの炭素源を用いた時もローズベンガルを 0.003% 含
む培地で培養した場合ペレット状に増殖した。比較のた
めローズベンガルを含まない培地で培養した場合、パル
プ状に増殖した。
む培地で培養した場合ペレット状に増殖した。比較のた
めローズベンガルを含まない培地で培養した場合、パル
プ状に増殖した。
【００１４】実施例３ ドレクスレラ・モノセラスＭＨ９０１１（微工研菌寄第
１２１２９号）を第１表［表１］に示す天然寒天培地に
接種し、２５℃にて１４日間培養後、胞子を採取し、１
％ＮａＣｌ溶液に懸濁し、これを接種用胞子懸濁液とし
た。第６表［表６］に示すローズベンガルを 0.003% 含
む液体培地を２０００ｍＬ用通気攪拌型培養槽に１５０
０ｍＬ仕込み、また２０００ｍＬ用気泡塔型培養槽に１
５００ｍＬ仕込み、蒸気滅菌した後、接種用胞子懸濁液
の一定容量を約１０個胞子／ｍＬとなるように接種し
た。通気攪拌型培養槽は２５℃にて７日間５００ｍＬ／
分の通気量、１５０ｒｐｍの攪拌数で培養を行った。気
泡塔型培養槽は２５℃にて７日間１５００ｍＬの通気量
で培養した。培養後、菌糸の形態を観察した。その結果
を第７表［表７］に示す。
１２１２９号）を第１表［表１］に示す天然寒天培地に
接種し、２５℃にて１４日間培養後、胞子を採取し、１
％ＮａＣｌ溶液に懸濁し、これを接種用胞子懸濁液とし
た。第６表［表６］に示すローズベンガルを 0.003% 含
む液体培地を２０００ｍＬ用通気攪拌型培養槽に１５０
０ｍＬ仕込み、また２０００ｍＬ用気泡塔型培養槽に１
５００ｍＬ仕込み、蒸気滅菌した後、接種用胞子懸濁液
の一定容量を約１０個胞子／ｍＬとなるように接種し
た。通気攪拌型培養槽は２５℃にて７日間５００ｍＬ／
分の通気量、１５０ｒｐｍの攪拌数で培養を行った。気
泡塔型培養槽は２５℃にて７日間１５００ｍＬの通気量
で培養した。培養後、菌糸の形態を観察した。その結果
を第７表［表７］に示す。
【００１５】
【表６】
【００１６】
【表７】 Ｖ ローズベンガル0.003% を添加した培地を用いた場
合、通気攪拌型培養槽、気泡塔型培養槽の何れの培養槽
で培養してもペレット状に増殖した。比較のためローズ
ベンガルを含まない培地で培養した場合、パルプ状に増
殖した。
合、通気攪拌型培養槽、気泡塔型培養槽の何れの培養槽
で培養してもペレット状に増殖した。比較のためローズ
ベンガルを含まない培地で培養した場合、パルプ状に増
殖した。
【００１７】
【発明の効果】本発明によれば、従来技術ではペレット
状に培養することが困難であった糸状菌をペレット状に
培養することが可能になる。即ち、従来技術ではパルプ
状型増殖を示す糸状菌をペレット状に培養することはで
きなかったが、本発明培養法によれば、実施例１〜３に
示すとおり本来ペレット状増殖を示さない糸状菌をペレ
ット状に培養することが達成できる。本発明の方法はペ
レット状菌体の培養に好適であり、そのため、有用物質
を生産する糸状菌を効率よく増殖させることができる。
状に培養することが困難であった糸状菌をペレット状に
培養することが可能になる。即ち、従来技術ではパルプ
状型増殖を示す糸状菌をペレット状に培養することはで
きなかったが、本発明培養法によれば、実施例１〜３に
示すとおり本来ペレット状増殖を示さない糸状菌をペレ
ット状に培養することが達成できる。本発明の方法はペ
レット状菌体の培養に好適であり、そのため、有用物質
を生産する糸状菌を効率よく増殖させることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】第１図は実施例１のローズベンガル0.002% を
含む液体培地で培養して得られたペレット状菌体の写真
である。
含む液体培地で培養して得られたペレット状菌体の写真
である。
【図２】第２図は実施例１のローズベンガル0.002% を
含む液体培地で培養して得られたペレット状菌体の倍率
８０倍の顕微鏡写真である。
含む液体培地で培養して得られたペレット状菌体の倍率
８０倍の顕微鏡写真である。
Claims (8)
- 【請求項１】 糸状菌を菌糸伸長阻害物質を添加した液
体培地中でペレット状に培養することを特徴とする糸状
菌の培養法。 - 【請求項２】 糸状菌がドレクスレラ(Drechslera)属に
属する糸状菌である請求項１記載の培養法。 - 【請求項３】 菌糸伸長阻害物質がローズベンガルであ
る請求項１または２記載の培養法。 - 【請求項４】 菌糸伸長阻害物質がソルボースである請
求項１または２記載の培養法。 - 【請求項５】 菌糸伸長阻害物質がデオキシコール酸ナ
トリウムである請求項１または２記載の培養法。 - 【請求項６】 ローズベンガルの濃度が０．０００１〜
０．１％の範囲である請求項３記載の培養法。 - 【請求項７】 ソルボースの濃度が０．００１〜１０％
の範囲である請求項４記載の培養法。 - 【請求項８】 デオキシコール酸ナトリウムの濃度が
０．０１〜１％の範囲である請求項５記載の培養法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5179417A JPH0731467A (ja) | 1993-07-20 | 1993-07-20 | 糸状菌の培養法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5179417A JPH0731467A (ja) | 1993-07-20 | 1993-07-20 | 糸状菌の培養法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0731467A true JPH0731467A (ja) | 1995-02-03 |
Family
ID=16065507
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5179417A Pending JPH0731467A (ja) | 1993-07-20 | 1993-07-20 | 糸状菌の培養法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0731467A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2017170917A1 (ja) * | 2016-03-31 | 2017-10-05 | 東レ株式会社 | タンパク質の製造方法 |
| CN113717861A (zh) * | 2021-08-11 | 2021-11-30 | 南京师范大学 | 控制羽束梗孢的菌体形态的方法 |
-
1993
- 1993-07-20 JP JP5179417A patent/JPH0731467A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2017170917A1 (ja) * | 2016-03-31 | 2017-10-05 | 東レ株式会社 | タンパク質の製造方法 |
| JPWO2017170917A1 (ja) * | 2016-03-31 | 2018-04-05 | 東レ株式会社 | タンパク質の製造方法 |
| JP2018117620A (ja) * | 2016-03-31 | 2018-08-02 | 東レ株式会社 | タンパク質の製造方法 |
| EP3974527A1 (en) | 2016-03-31 | 2022-03-30 | Toray Industries, Inc. | Description method for producing protein |
| US11453899B2 (en) | 2016-03-31 | 2022-09-27 | Toray Industries, Inc. | Method of producing protein |
| CN113717861A (zh) * | 2021-08-11 | 2021-11-30 | 南京师范大学 | 控制羽束梗孢的菌体形态的方法 |
| CN113717861B (zh) * | 2021-08-11 | 2023-12-05 | 南京师范大学 | 控制羽束梗孢的菌体形态的方法 |
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