JPH07322877A - レオウイルス株２１７７及び該株を含むワクチン - Google Patents
レオウイルス株２１７７及び該株を含むワクチンInfo
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 非病原性であり、ニワトリの体内に残存せ
ず、マレック病ワクチンに干渉せず、従って１日齢で投
与することが可能なワクチンを提供する。 【構成】 ニワトリに投与するワクチン製剤中に有効量
で配合され、病原性ニワトリレオウイルスによる攻撃に
対する防御を提供し、同時投与したマレック病ワクチン
の活性に干渉しない非病原性ニワトリレオウイルス、及
び該ウイルスを含むワクチン。
ず、マレック病ワクチンに干渉せず、従って１日齢で投
与することが可能なワクチンを提供する。 【構成】 ニワトリに投与するワクチン製剤中に有効量
で配合され、病原性ニワトリレオウイルスによる攻撃に
対する防御を提供し、同時投与したマレック病ワクチン
の活性に干渉しない非病原性ニワトリレオウイルス、及
び該ウイルスを含むワクチン。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は２１７７株と呼称される
非病原性レオウイルス及び２１７７株を含むワクチンに
関する。
非病原性レオウイルス及び２１７７株を含むワクチンに
関する。
【０００２】
【従来技術及び発明が解決しようとする課題】ニワトリ
レオウイルスは商業用家禽の種々の疾病に関連付けられ
ている。経済的に最も重要なレオウイルス疾患は関節炎
／腱滑膜炎症候群である。この症状の特徴は踝関節の直
上の中足腱の腱鞘の腫張とそれに起因する種々の程度の
跛行である。腫張が進行すると、ニワトリは運動を厭う
ようになる。患部腱は硬化し、繊維症になり、腱鞘及び
皮膚に癒着すると腱の部分的機能障害をもたらす［Ｊｏ
ｈｎｓｏｎら，Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．１５：８２９−８
３４ （１９７１）］。高齢のニワトリでは腱断裂に至
る恐れがある［Ｊｏｎｅｓ，Ｖｅｔ．Ｒｅｃ．，９６：
１５３−１５４（１９７５）］。
レオウイルスは商業用家禽の種々の疾病に関連付けられ
ている。経済的に最も重要なレオウイルス疾患は関節炎
／腱滑膜炎症候群である。この症状の特徴は踝関節の直
上の中足腱の腱鞘の腫張とそれに起因する種々の程度の
跛行である。腫張が進行すると、ニワトリは運動を厭う
ようになる。患部腱は硬化し、繊維症になり、腱鞘及び
皮膚に癒着すると腱の部分的機能障害をもたらす［Ｊｏ
ｈｎｓｏｎら，Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．１５：８２９−８
３４ （１９７１）］。高齢のニワトリでは腱断裂に至
る恐れがある［Ｊｏｎｅｓ，Ｖｅｔ．Ｒｅｃ．，９６：
１５３−１５４（１９７５）］。
【０００３】レオウイルスは吸収不良又は虚弱ニワトリ
症候群にも関連付けられている［Ｐａｇｅら，Ａｖｉａ
ｎ Ｄｉｓ．，２６：６１８−６２４（１９８２）］。
この腸管症状は発育阻害、羽毛生育不良、色素減少、前
胃肥大、腸炎及び足弱化により特徴付けられる。この疾
患はレオウイルス感染の結果として飼料栄養の吸収不良
に起因すると考えられていた［Ｈｉｅｒｏｎｙｍｕｓ
ら，Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．，２７：２４６−２５４（１
９８３）］。
症候群にも関連付けられている［Ｐａｇｅら，Ａｖｉａ
ｎ Ｄｉｓ．，２６：６１８−６２４（１９８２）］。
この腸管症状は発育阻害、羽毛生育不良、色素減少、前
胃肥大、腸炎及び足弱化により特徴付けられる。この疾
患はレオウイルス感染の結果として飼料栄養の吸収不良
に起因すると考えられていた［Ｈｉｅｒｏｎｙｍｕｓ
ら，Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．，２７：２４６−２５４（１
９８３）］。
【０００４】レオウイルスに起因すると考えられる他の
疾病は肝炎、心膜水腫、腹水、腎臓虚弱、小脾臓、心膜
炎及び心筋炎である。
疾病は肝炎、心膜水腫、腹水、腎臓虚弱、小脾臓、心膜
炎及び心筋炎である。
【０００５】これらの諸症状は、ブロイラーの品質低下
及び種畜の繁殖能の低下をもたらし、控えめに見積もっ
ても年間１５，０００，０００ドルの経済的損失を招い
ている。
及び種畜の繁殖能の低下をもたらし、控えめに見積もっ
ても年間１５，０００，０００ドルの経済的損失を招い
ている。
【０００６】米国では、ｖａｎ ｄｅｒ Ｈｅｉｄｅに
より腱滑膜炎のフィールド症例から単離及び特徴付けさ
れたニワトリレオウイルス株であるＳ１１３３の種々の
継代段階から生ワクチンが開発されている。該株は漿尿
膜（ＣＡＭ）で３７℃で２３５代、次いでニワトリ胚フ
ィブロブラスト（ＣＥＦ）で３２℃で６５代連続増殖さ
れた。ＣＥＦで３７℃で更に１３５代継代された［ｖａ
ｎ ｄｅｒ Ｈｅｉｄｅら，Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．，２
７：６９８−７０６（１９８３）］。
より腱滑膜炎のフィールド症例から単離及び特徴付けさ
れたニワトリレオウイルス株であるＳ１１３３の種々の
継代段階から生ワクチンが開発されている。該株は漿尿
膜（ＣＡＭ）で３７℃で２３５代、次いでニワトリ胚フ
ィブロブラスト（ＣＥＦ）で３２℃で６５代連続増殖さ
れた。ＣＥＦで３７℃で更に１３５代継代された［ｖａ
ｎ ｄｅｒ Ｈｅｉｄｅら，Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．，２
７：６９８−７０６（１９８３）］。
【０００７】現用の種畜ワクチン接種プログラムは、高
代のＳ１１３３に由来する低毒性ワクチンを幼齢（７〜
１４日）のニワトリに接種し、該ワクチンよりもやや毒
性の低代Ｓ１１３３ワクチンウイルスを６〜１１週齢で
生ワクチン接種し、場合によりこのやや毒性のＳ１１３
３ワクチンで第３の生ワクチン接種を行った後、不活化
ワクチンを接種することを推奨している。
代のＳ１１３３に由来する低毒性ワクチンを幼齢（７〜
１４日）のニワトリに接種し、該ワクチンよりもやや毒
性の低代Ｓ１１３３ワクチンウイルスを６〜１１週齢で
生ワクチン接種し、場合によりこのやや毒性のＳ１１３
３ワクチンで第３の生ワクチン接種を行った後、不活化
ワクチンを接種することを推奨している。
【０００８】ブロイラーの場合もできるだけ早期に低毒
性ワクチンを接種する。
性ワクチンを接種する。
【０００９】レオウイルスはマレック病ワクチン接種に
干渉する恐れがあるので、現用ワクチンを１日齢で接種
するのは推奨されない。公知レオウイルスワクチンはマ
レック病ワクチンに干渉するため、他の免疫感作と同時
に公知レオウイルスワクチンを投与することができず、
二次ワクチン接種が必要であった。Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ
ｅｒ，Ｊ．Ｋ．，Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｐｏｕｌｔｒｙ Ｄ
ｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ Ｐｒｏｃｅｅｄ
ｉｎｇｓ，ｐｐ．５０−５１，（１９８３）。
干渉する恐れがあるので、現用ワクチンを１日齢で接種
するのは推奨されない。公知レオウイルスワクチンはマ
レック病ワクチンに干渉するため、他の免疫感作と同時
に公知レオウイルスワクチンを投与することができず、
二次ワクチン接種が必要であった。Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ
ｅｒ，Ｊ．Ｋ．，Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｐｏｕｌｔｒｙ Ｄ
ｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ Ｐｒｏｃｅｅｄ
ｉｎｇｓ，ｐｐ．５０−５１，（１９８３）。
【００１０】更に、現用ワクチンは接種動物の腱に残存
することが判明し（Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ，Ｒ．Ｄ．及
びＭａｓｌｉｎ，Ｗ．Ｒ．，Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．，Ｖ
ｏｌ．３２，ｐｐ．４６１−４６８，１９８８）、増殖
して関節炎や他の足障害を誘発し、卵を介して子孫に伝
播（感染）される恐れがあった。
することが判明し（Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ，Ｒ．Ｄ．及
びＭａｓｌｉｎ，Ｗ．Ｒ．，Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．，Ｖ
ｏｌ．３２，ｐｐ．４６１−４６８，１９８８）、増殖
して関節炎や他の足障害を誘発し、卵を介して子孫に伝
播（感染）される恐れがあった。
【００１１】理想的なワクチンとは、非病原性であり、
ニワトリの体内に残存せず、マレック病ワクチンに干渉
せず、従って１日齢でも投与することが可能なワクチン
であると考えられる。
ニワトリの体内に残存せず、マレック病ワクチンに干渉
せず、従って１日齢でも投与することが可能なワクチン
であると考えられる。
【００１２】
【課題を解決するための手段】レオウイルス疾患を有す
るニワトリから単離された新規ニワトリレオウイルス株
が茲に発見された。この新規ウイルスは米国、Ｒｏｃｋ
ｖｉｌｌ，ＭａｒｙｌａｎｄのＡＴＣＣに１９９４年３
月１０日付けで寄託され、寄託番号ＶＲ２４９９を付さ
れた。このウイルスの特性は非病原性であることと、ニ
ワトリに接種するとレオウイルスの病原株に対する防御
を提供することである。
るニワトリから単離された新規ニワトリレオウイルス株
が茲に発見された。この新規ウイルスは米国、Ｒｏｃｋ
ｖｉｌｌ，ＭａｒｙｌａｎｄのＡＴＣＣに１９９４年３
月１０日付けで寄託され、寄託番号ＶＲ２４９９を付さ
れた。このウイルスの特性は非病原性であることと、ニ
ワトリに接種するとレオウイルスの病原株に対する防御
を提供することである。
【００１３】この発見に鑑み、本発明はレオウイルスに
起因する疾病に対する家禽の防御のための、レオウイル
ス株２１７７を含むワクチンを提供する。本発明は更に
単離株２１７７に関し、該株は本質的に非病原性である
ことが判明し、この株を接種した家禽の体内に残存せ
ず、幼齢(例えば１日齢)で投与することが可能である。
起因する疾病に対する家禽の防御のための、レオウイル
ス株２１７７を含むワクチンを提供する。本発明は更に
単離株２１７７に関し、該株は本質的に非病原性である
ことが判明し、この株を接種した家禽の体内に残存せ
ず、幼齢(例えば１日齢)で投与することが可能である。
【００１４】本発明のワクチンは株２１７７を単独で含
んでもよいし、マレック病ウイルス、伝染性ファブリシ
ウス嚢病ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、伝染性
気管支炎ウイルス、ニワトリ脳脊髄炎ウイルス、鶏痘ウ
イルス及びニワトリ貧血因子のワクチン等、他の家禽用
ワクチンと併用してもよい。
んでもよいし、マレック病ウイルス、伝染性ファブリシ
ウス嚢病ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、伝染性
気管支炎ウイルス、ニワトリ脳脊髄炎ウイルス、鶏痘ウ
イルス及びニワトリ貧血因子のワクチン等、他の家禽用
ワクチンと併用してもよい。
【００１５】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇｅｒは、大腿頭骨壊死
及び踝関節の炎症により主に特徴付けられる症状を有す
る商業的に飼育された幼齢ブロイラーからの１０９個の
レオウイルス単離株の単離を開示している（Ｐｒｏｃ．
Ｉｎｔｅｒｎａｔｌ．Ｕｎｉｏｎ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏ
ｌ．Ｓｏｃ．，Ｎｏ．６６，Ｄｉｓｅａｓｅ Ｐｒｅｖ
ｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ Ｐｏｕ
ｌｔｒｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，Ｓｙｄｎｅｙ ＮＳ
Ｗ，Ａｕｓｔｒａｌｉａ Ａｕｇ．３１−Ｓｅｐｔ．
２，１９８３）。ウイルス単離は、臨床症状を有する１
日齢〜約４週齢のニワトリから抽出した足関節スワブ及
び均質化組織（骨髄、肝臓、脾臓及び腱）を５〜７日齢
胚形成卵の卵黄嚢に接種することにより行われた。レオ
ウイルス単離株は、死滅した胚からの漿尿膜を回収し、
群特異的レオウイルス抗原の存在を立証することによ
り、接種した胚で同定された。レオウイルスを含む卵黄
を集め、トリプトースリン酸ブロスで希釈し、−７０℃
で保存した。
及び踝関節の炎症により主に特徴付けられる症状を有す
る商業的に飼育された幼齢ブロイラーからの１０９個の
レオウイルス単離株の単離を開示している（Ｐｒｏｃ．
Ｉｎｔｅｒｎａｔｌ．Ｕｎｉｏｎ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏ
ｌ．Ｓｏｃ．，Ｎｏ．６６，Ｄｉｓｅａｓｅ Ｐｒｅｖ
ｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ Ｐｏｕ
ｌｔｒｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，Ｓｙｄｎｅｙ ＮＳ
Ｗ，Ａｕｓｔｒａｌｉａ Ａｕｇ．３１−Ｓｅｐｔ．
２，１９８３）。ウイルス単離は、臨床症状を有する１
日齢〜約４週齢のニワトリから抽出した足関節スワブ及
び均質化組織（骨髄、肝臓、脾臓及び腱）を５〜７日齢
胚形成卵の卵黄嚢に接種することにより行われた。レオ
ウイルス単離株は、死滅した胚からの漿尿膜を回収し、
群特異的レオウイルス抗原の存在を立証することによ
り、接種した胚で同定された。レオウイルスを含む卵黄
を集め、トリプトースリン酸ブロスで希釈し、−７０℃
で保存した。
【００１６】肉趾経路で感受性１日齢ブロイラーニワト
リに接種することにより１０９個のレオウイルス単離株
の病原性をスクリーニングした。単離株の１１個は接種
後３〜１４日の間に肉趾と足の他の部分に炎症を生じ
た。これらの１１個の単離株を選択して更に試験した。
リに接種することにより１０９個のレオウイルス単離株
の病原性をスクリーニングした。単離株の１１個は接種
後３〜１４日の間に肉趾と足の他の部分に炎症を生じ
た。これらの１１個の単離株を選択して更に試験した。
【００１７】これらの１１個の単離株の卵黄シードプー
ルを一次ニワトリ胚フィブロブラスト（ＣＥＦ）に接種
した。１個の単離株（単離株２１７７）はＣＥＦに接種
した場合に細胞変性作用を生じないことが判明した。そ
の後、細胞変性が観察されるまでこのウイルスを反復継
代（１４代）した。細胞及び細胞培養液を集め、凍結及
び融解し、遠心分離により清澄化し、ＣＥＦ中で成長す
るのに適した２１７７レオウイルス単離株を含む上清を
アリコートに分割し、−７０℃で保存した。
ルを一次ニワトリ胚フィブロブラスト（ＣＥＦ）に接種
した。１個の単離株（単離株２１７７）はＣＥＦに接種
した場合に細胞変性作用を生じないことが判明した。そ
の後、細胞変性が観察されるまでこのウイルスを反復継
代（１４代）した。細胞及び細胞培養液を集め、凍結及
び融解し、遠心分離により清澄化し、ＣＥＦ中で成長す
るのに適した２１７７レオウイルス単離株を含む上清を
アリコートに分割し、−７０℃で保存した。
【００１８】標準プラークアッセイシステムを使用して
細胞培養に適したレオウイルス２１７７をＣＥＦ細胞培
養物で増殖させた。個別プラーク選択によりウイルスを
プラーク精製した。プラーク精製したレオウイルス２１
７７を６日齢ニワトリ胚形成卵の卵黄嚢に接種した。接
種後２４時間以上経過後に死滅した胚から卵黄を集め、
レオウイルス２１７７の精製培養ストックとして使用し
た。
細胞培養に適したレオウイルス２１７７をＣＥＦ細胞培
養物で増殖させた。個別プラーク選択によりウイルスを
プラーク精製した。プラーク精製したレオウイルス２１
７７を６日齢ニワトリ胚形成卵の卵黄嚢に接種した。接
種後２４時間以上経過後に死滅した胚から卵黄を集め、
レオウイルス２１７７の精製培養ストックとして使用し
た。
【００１９】このクローン化精製２１７７レオウイルス
の遺伝子特徴及びニワトリにおける病原性をｉｎ ｖｉ
ｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏで特徴付けた。一般に、２１
７７レオウイルスはニワトリにおいて本質的に非病原性
であることが判明した。従って、このウイルス株は生ワ
クチンとして使用するのに理想的である。
の遺伝子特徴及びニワトリにおける病原性をｉｎ ｖｉ
ｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏで特徴付けた。一般に、２１
７７レオウイルスはニワトリにおいて本質的に非病原性
であることが判明した。従って、このウイルス株は生ワ
クチンとして使用するのに理想的である。
【００２０】本発明のワクチンは生きた形態、弱毒形態
又は不活化形態の２１７７ウイルスを含む。もっとも、
好ましくはワクチンは生きたウイルスを含み、非病原性
であるため、弱毒化又は不活化は不要である。
又は不活化形態の２１７７ウイルスを含む。もっとも、
好ましくはワクチンは生きたウイルスを含み、非病原性
であるため、弱毒化又は不活化は不要である。
【００２１】生ワクチンを製造するためには、（ＣＥＦ
で１４代継代後、ニワトリ胚で５〜６代継代することに
より調製した）シードウイルスを細胞培養物、例えばＣ
ＥＦ培養物もしくは他の哺乳動物細胞培養物（例えばＶ
ＥＲＯ細胞）又は胚形成卵で増殖させる。こうして増殖
したウイルスを組織培養液及び／又は細胞又は胚形成卵
の組織もしくは液から回収する。生ワクチンは懸濁液と
して調製してもよいし、凍結乾燥してもよい。懸濁液形
態を凍結保存してもよい。凍結乾燥形態では１種以上の
安定剤を加えるのが好ましい。適切な安定剤としては例
えば炭水化物（例えばソルビトール、マンニトール、澱
粉、スクロース、デキストラン、グルコース）、タンパ
ク質（例えばアルブミン又はカゼイン）又はその分解生
成物、及び緩衝液（例えばアルカリ金属リン酸塩）を挙
げることができる。任意に、アジュバント活性を有する
１種以上の化合物も添加し得る。本発明のワクチンには
任意の従来の安定剤及びアジュバントを添加し得る。
で１４代継代後、ニワトリ胚で５〜６代継代することに
より調製した）シードウイルスを細胞培養物、例えばＣ
ＥＦ培養物もしくは他の哺乳動物細胞培養物（例えばＶ
ＥＲＯ細胞）又は胚形成卵で増殖させる。こうして増殖
したウイルスを組織培養液及び／又は細胞又は胚形成卵
の組織もしくは液から回収する。生ワクチンは懸濁液と
して調製してもよいし、凍結乾燥してもよい。懸濁液形
態を凍結保存してもよい。凍結乾燥形態では１種以上の
安定剤を加えるのが好ましい。適切な安定剤としては例
えば炭水化物（例えばソルビトール、マンニトール、澱
粉、スクロース、デキストラン、グルコース）、タンパ
ク質（例えばアルブミン又はカゼイン）又はその分解生
成物、及び緩衝液（例えばアルカリ金属リン酸塩）を挙
げることができる。任意に、アジュバント活性を有する
１種以上の化合物も添加し得る。本発明のワクチンには
任意の従来の安定剤及びアジュバントを添加し得る。
【００２２】ワクチンが凍結乾燥形態であるか懸濁液形
態であるかを問わず、ワクチンはウイルスを回収する細
胞培地から調製することができ、このような培地は例え
ばウイルス、胎児、新生又は子ウシ血清及び抗生物質を
含む。使用される細胞培地の型は制限されず、ウイルス
を増殖する細胞培養に従来使用されている任意の培地及
び助剤であり得る。凍結乾燥製剤は更に、上述のように
ウイルスと安定剤を単独又は培地助剤と共に含む。不活
化ウイルスを含むワクチンは例えば、油エマルジョン又
はトコールエマルジョン製剤中にウイルス、胎児、新生
又は子ウシ血清、抗生物質を含有する細胞培地から構成
され得る。
態であるかを問わず、ワクチンはウイルスを回収する細
胞培地から調製することができ、このような培地は例え
ばウイルス、胎児、新生又は子ウシ血清及び抗生物質を
含む。使用される細胞培地の型は制限されず、ウイルス
を増殖する細胞培養に従来使用されている任意の培地及
び助剤であり得る。凍結乾燥製剤は更に、上述のように
ウイルスと安定剤を単独又は培地助剤と共に含む。不活
化ウイルスを含むワクチンは例えば、油エマルジョン又
はトコールエマルジョン製剤中にウイルス、胎児、新生
又は子ウシ血清、抗生物質を含有する細胞培地から構成
され得る。
【００２３】ワクチン接種は任意の年齢で実施すること
ができる。一般に生ワクチンは１２週齢までに接種し、
不活化ワクチンは１４〜１８週齢で接種する。ｉｎ ｏ
ｖｏワクチン接種は胚発生の最後の４分の１に実施す
る。ワクチンは皮下、スプレー、経口、眼内、気管内、
鼻側又はｉｎ ｏｖｏのいずれの経路で投与してもよ
い。好ましくは、１日齢のニワトリにワクチン接種す
る。それ以後のニワトリは加齢耐性を生じると思われる
が、ブリーダーニワトリは例えば８及び３０週（２回接
種）でもワクチン接種することができる。２１７７を接
種した場合にはウイルスは残存せず、子孫に垂直伝播
（感染）しないことが判明した。これに対して、Ｓ１１
３３株は子孫に伝播される。
ができる。一般に生ワクチンは１２週齢までに接種し、
不活化ワクチンは１４〜１８週齢で接種する。ｉｎ ｏ
ｖｏワクチン接種は胚発生の最後の４分の１に実施す
る。ワクチンは皮下、スプレー、経口、眼内、気管内、
鼻側又はｉｎ ｏｖｏのいずれの経路で投与してもよ
い。好ましくは、１日齢のニワトリにワクチン接種す
る。それ以後のニワトリは加齢耐性を生じると思われる
が、ブリーダーニワトリは例えば８及び３０週（２回接
種）でもワクチン接種することができる。２１７７を接
種した場合にはウイルスは残存せず、子孫に垂直伝播
（感染）しないことが判明した。これに対して、Ｓ１１
３３株は子孫に伝播される。
【００２４】一般に、ワクチン中の２１７７ウイルスの
力価は１．０〜９．０ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50／用量、より
好ましくは２．０〜７．５ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50／用量、
最適には約４．０ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50／用量である。
力価は１．０〜９．０ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50／用量、より
好ましくは２．０〜７．５ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50／用量、
最適には約４．０ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50／用量である。
【００２５】２１７７株を含むワクチンの固有の特徴の
１つは、干渉を生じることなく他のレオウイルスも含め
た他のウイルスと組み合わせて多価ワクチンを形成でき
ることである。レオウイルスはワクチン中で他のウイル
スの活性に干渉することが示されているので、この特徴
は固有である。これはマレック病ワクチンの場合に特に
問題であった。例えばＰｏｕｌｔｒｙ Ｓｃｉｅｎｃ
ｅ，Ｖｏｌ．６２：１４８８，１９８３を参照された
い。２１７７ウイルスは以下のワクチン製剤：（ａ）血
清型１（例えばＣＶＩ ９８８）、血清型２（例えばＳ
Ｂ−１）及び血清型３（ＨＶＴ）の全３種の血清型のマ
レック病ワクチン；（ｂ）従来株（例えばＤ７８）、デ
ラウェア変異株（例えば変異株Ｅ，８９−０３）及び他
の変異株（例えばＧＬＳ）を含む伝染性ファブリシウス
病ウイルス（ＩＢＤＶワクチン）；（ｃ）マレック病及
びＩＢＤＶ両者のワクチン；（ｄ）ニューカッスル病ウ
イルス（ＮＤＶ）／伝染性ファブリシウス嚢病ウイルス
（ＩＢＶ）ワクチン；（ｅ）ニワトリ脳脊髄炎（Ａ
Ｅ）；（ｆ）鶏痘；並びに（ｇ）ニワトリ貧血因子と組
み合わせることができる。
１つは、干渉を生じることなく他のレオウイルスも含め
た他のウイルスと組み合わせて多価ワクチンを形成でき
ることである。レオウイルスはワクチン中で他のウイル
スの活性に干渉することが示されているので、この特徴
は固有である。これはマレック病ワクチンの場合に特に
問題であった。例えばＰｏｕｌｔｒｙ Ｓｃｉｅｎｃ
ｅ，Ｖｏｌ．６２：１４８８，１９８３を参照された
い。２１７７ウイルスは以下のワクチン製剤：（ａ）血
清型１（例えばＣＶＩ ９８８）、血清型２（例えばＳ
Ｂ−１）及び血清型３（ＨＶＴ）の全３種の血清型のマ
レック病ワクチン；（ｂ）従来株（例えばＤ７８）、デ
ラウェア変異株（例えば変異株Ｅ，８９−０３）及び他
の変異株（例えばＧＬＳ）を含む伝染性ファブリシウス
病ウイルス（ＩＢＤＶワクチン）；（ｃ）マレック病及
びＩＢＤＶ両者のワクチン；（ｄ）ニューカッスル病ウ
イルス（ＮＤＶ）／伝染性ファブリシウス嚢病ウイルス
（ＩＢＶ）ワクチン；（ｅ）ニワトリ脳脊髄炎（Ａ
Ｅ）；（ｆ）鶏痘；並びに（ｇ）ニワトリ貧血因子と組
み合わせることができる。
【００２６】
【実施例】以下、実施例により本発明を説明する。
【００２７】実施例１．レオウイルス２１７７病原性 Ａ．ブロイラーにおける特徴付け １．３経路でブロイラーに接種することによる特徴付け ａ．手順 腹腔内、大脳内及び肉趾経路で１日齢ニワトリに接種す
ることにより上記１１個の単離株のｉｎ ｖｉｖｏ特徴
付けを行った。
ることにより上記１１個の単離株のｉｎ ｖｉｖｏ特徴
付けを行った。
【００２８】ｂ．結果 単離株のうちの数個は全経路で病原性が高く、壊死、炎
症、出血及び肝周囲炎を含む肝障害により特徴付けられ
る有意死亡率を生じることが判明した。２週間以上生存
したニワトリの多くは肝周囲炎を発症した。他の単離株
の病原性は多様であり、ただ１個のウイルス（２１７
７）のみが比較的非病原性であった。
症、出血及び肝周囲炎を含む肝障害により特徴付けられ
る有意死亡率を生じることが判明した。２週間以上生存
したニワトリの多くは肝周囲炎を発症した。他の単離株
の病原性は多様であり、ただ１個のウイルス（２１７
７）のみが比較的非病原性であった。
【００２９】これらの結果を表１に示す。
【００３０】
【表１】
【００３１】２．体重減少、死亡率及び抗体産生 ａ．手順 上記レオウイルス単離株をｉｎ ｖｉｖｏで更に特徴付
けるために、より自然な感作経路（経口及び気管内）で
１日齢及び２週齢のブロイラーニワトリにウイルスを接
種した。体重、死亡率及び抗体産生を接種後数週間モニ
ターした。
けるために、より自然な感作経路（経口及び気管内）で
１日齢及び２週齢のブロイラーニワトリにウイルスを接
種した。体重、死亡率及び抗体産生を接種後数週間モニ
ターした。
【００３２】ｂ．結果 結果は、２１７７が比較的非病原性であるという最初の
分類を裏付けるものであった。病原性の高い殆どのウイ
ルス単離株はレオウイルス２１７７に比較して死亡率が
高く（表２）、平均体重が低く（表３）、高頻度の抗体
応答を誘発した（表４）。これとは対照的に、２１７７
を注射したニワトリの死亡率及び平均体重は対照の死亡
率及び平均体重と同等であった。更に、２１７７を注射
したニワトリにおける血清抗体応答は、より毒性の単離
株を注射したニワトリにおける抗体応答より低頻度であ
った。この実験及び結果は、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇｅｒ
ら，Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．３３：５３５−５４４（１９
８９）に報告されている。
分類を裏付けるものであった。病原性の高い殆どのウイ
ルス単離株はレオウイルス２１７７に比較して死亡率が
高く（表２）、平均体重が低く（表３）、高頻度の抗体
応答を誘発した（表４）。これとは対照的に、２１７７
を注射したニワトリの死亡率及び平均体重は対照の死亡
率及び平均体重と同等であった。更に、２１７７を注射
したニワトリにおける血清抗体応答は、より毒性の単離
株を注射したニワトリにおける抗体応答より低頻度であ
った。この実験及び結果は、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇｅｒ
ら，Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．３３：５３５−５４４（１９
８９）に報告されている。
【００３３】
【表２】
【００３４】
【表３】
【００３５】
【表４】
【００３６】３．組織向性及び組織病理 ａ．手順 感染組織の組織向性とそれに続く組織病理試験の結果も
同様に、２１７７が他の単離株よりも非病原性であるこ
とを示した。１日齢ブロイラーニワトリに経口及び気管
内経路で種々のレオウイルス単離株を接種した。接種後
（ＰＩ）４、７、１０及び１４日目に各接種材料群から
のニワトリを殺し、膵臓、肝臓、気管、腓腹筋及び腸の
３領域の切片を採取し、ウイルス単離及び組織病理評価
を行った。
同様に、２１７７が他の単離株よりも非病原性であるこ
とを示した。１日齢ブロイラーニワトリに経口及び気管
内経路で種々のレオウイルス単離株を接種した。接種後
（ＰＩ）４、７、１０及び１４日目に各接種材料群から
のニワトリを殺し、膵臓、肝臓、気管、腓腹筋及び腸の
３領域の切片を採取し、ウイルス単離及び組織病理評価
を行った。
【００３７】ｂ．結果 結果によると、より毒性な単離株である１７３３及び２
４０８は１４日間のサンプリング期間を通して全組織か
ら単離された。２１７７単離株は接種後１７日目に肝
臓、気管及び腸から回収されたが、１０及び１４日目に
はウイルスが単離される器官とされない器官があった。
２１７７単離株は腱からはどの時点でも単離されなかっ
た（表５参照）。
４０８は１４日間のサンプリング期間を通して全組織か
ら単離された。２１７７単離株は接種後１７日目に肝
臓、気管及び腸から回収されたが、１０及び１４日目に
はウイルスが単離される器官とされない器官があった。
２１７７単離株は腱からはどの時点でも単離されなかっ
た（表５参照）。
【００３８】これらの組織の組織病理評価の結果、２１
７７を除く全レオウイルス単離株は顕微的病変を誘発す
ることが判明した（表６）。単離株２１７７を接種した
ニワトリでは顕微的病変は検出されなかったので、同単
離株は表から省略した。
７７を除く全レオウイルス単離株は顕微的病変を誘発す
ることが判明した（表６）。単離株２１７７を接種した
ニワトリでは顕微的病変は検出されなかったので、同単
離株は表から省略した。
【００３９】
【表５】
【００４０】
【表６】
【００４１】実施例２：ＳＰＦレグホンにおける２１７
７の特徴付け １．３種の異なる経路でレグホンに接種することによる
特徴付け ａ．手順 ＳＰＦレグホンで同様にレオウイルス２１７７のｉｎ
ｖｉｖｏ特徴付けを行った。これは、レオウイルス２１
７７、２０３５、Ｓ１１３３、２４０８及び１７３３の
連続希釈液を調製し、経口、気管内又は肉趾経路で１日
齢ニワトリに接種することにより実施した。ニワトリの
肉趾炎症、死亡率及び体重減少の相違を観察した。
７の特徴付け １．３種の異なる経路でレグホンに接種することによる
特徴付け ａ．手順 ＳＰＦレグホンで同様にレオウイルス２１７７のｉｎ
ｖｉｖｏ特徴付けを行った。これは、レオウイルス２１
７７、２０３５、Ｓ１１３３、２４０８及び１７３３の
連続希釈液を調製し、経口、気管内又は肉趾経路で１日
齢ニワトリに接種することにより実施した。ニワトリの
肉趾炎症、死亡率及び体重減少の相違を観察した。
【００４２】ｂ．結果 １）肉趾炎症 結果は、肉趾炎症を生じさせるために必要なウイルスの
量が非常に少量であることを示した。２１７７を除く全
単離株は１．０ｌｏｇ10胚致死量（ＥＬＤ）50未満で炎
症を誘発した。レオウイルス２１７７で炎症を誘発する
には２．２ｌｏｇ10ＥＬＤ50が必要であった（表７参
照）。
量が非常に少量であることを示した。２１７７を除く全
単離株は１．０ｌｏｇ10胚致死量（ＥＬＤ）50未満で炎
症を誘発した。レオウイルス２１７７で炎症を誘発する
には２．２ｌｏｇ10ＥＬＤ50が必要であった（表７参
照）。
【００４３】２）死亡率 ニワトリの死亡率の結果によると、一定した死亡率パタ
ーンをもたらした唯一の接種経路は肉趾接種経路であっ
た。また、２１７７は高ウイルス濃度（４．３ｌｏｇ10
ＥＬＤ50）で接種したニワトリで死亡が生じなかったの
で、非病原性であることが判明した。他のレオウイルス
単離株の場合には、ニワトリ５０％致死量は１．６〜
３．７ｌｏｇ10ＥＬＤ50であった（表８参照）。
ーンをもたらした唯一の接種経路は肉趾接種経路であっ
た。また、２１７７は高ウイルス濃度（４．３ｌｏｇ10
ＥＬＤ50）で接種したニワトリで死亡が生じなかったの
で、非病原性であることが判明した。他のレオウイルス
単離株の場合には、ニワトリ５０％致死量は１．６〜
３．７ｌｏｇ10ＥＬＤ50であった（表８参照）。
【００４４】３）体重減少 気管内及び肉趾経路で接種したニワトリで成長率の低下
が生じた。経口接種したニワトリでは１７３３を最高濃
度で接種した場合のみに体重減少を生じた。体重減少が
最も顕著であったのは肉趾経路で接種したニワトリであ
った。レオウイルス単離株２４０８及び１７３３は夫々
＜０．７及び１．０ｌｏｇ10ＥＬＤ50で２６％もの体重
減少を生じた。単離株２０３５及びＳ１１３３も体重減
少を生じた。単離株２１７７は試験ウイルス濃度では全
く体重減少を生じなかった（表９参照）。
が生じた。経口接種したニワトリでは１７３３を最高濃
度で接種した場合のみに体重減少を生じた。体重減少が
最も顕著であったのは肉趾経路で接種したニワトリであ
った。レオウイルス単離株２４０８及び１７３３は夫々
＜０．７及び１．０ｌｏｇ10ＥＬＤ50で２６％もの体重
減少を生じた。単離株２０３５及びＳ１１３３も体重減
少を生じた。単離株２１７７は試験ウイルス濃度では全
く体重減少を生じなかった（表９参照）。
【００４５】
【表７】
【００４６】
【表８】
【００４７】
【表９】
【００４８】２．ＳＰＦレグホンにおける２１７７感染
の組織向性及び組織病理試験 ａ．手順 ３種のレオウイルス単離株２１７７、２０３５及び１７
３３を使用して気管内（ＩＴ）経路で１日齢ＳＰＦレグ
ホンに接種した。接種後種々の時点で各ウイルス群から
の３羽のニワトリから採血し、殺して胸腺（ｔｈ）、気
管（ｔｒ）、肝臓（ｌｉ）、腸（ｉｎ）、盲腸扁桃（ｃ
ｔ）、脾臓（ｓｐ）、ファブリシウス嚢（ｂｕ）、腱
（ｔｅ）、赤血球（ＲＢＣ）、白血球（ＷＢＣ）及び血
漿（ｐ）を取り出した。組織を処理してウイルス単離及
び組織病理を試験した。
の組織向性及び組織病理試験 ａ．手順 ３種のレオウイルス単離株２１７７、２０３５及び１７
３３を使用して気管内（ＩＴ）経路で１日齢ＳＰＦレグ
ホンに接種した。接種後種々の時点で各ウイルス群から
の３羽のニワトリから採血し、殺して胸腺（ｔｈ）、気
管（ｔｒ）、肝臓（ｌｉ）、腸（ｉｎ）、盲腸扁桃（ｃ
ｔ）、脾臓（ｓｐ）、ファブリシウス嚢（ｂｕ）、腱
（ｔｅ）、赤血球（ＲＢＣ）、白血球（ＷＢＣ）及び血
漿（ｐ）を取り出した。組織を処理してウイルス単離及
び組織病理を試験した。
【００４９】ｂ．結果 １）肉眼的病変及び死亡率 剖検における肉眼的病変の出現及び死亡率百分率は１７
３３を接種したニワトリで最大であった（表１０参
照）。１７３３及び２０３５の両者は感染及び致死性の
兆候を示したが、２１７７接種群では際立った致死性又
は病変は観察されなかった。
３３を接種したニワトリで最大であった（表１０参
照）。１７３３及び２０３５の両者は感染及び致死性の
兆候を示したが、２１７７接種群では際立った致死性又
は病変は観察されなかった。
【００５０】２）ウイルス単離 １日齢で３種の疾病型を接種したニワトリからのウイル
ス単離の結果、１７３３は感染組織数が多く、最も毒性
であることが判明した（表１１参照）。他方、２１７７
はウイルスが主に盲腸扁桃から再単離されたので、非毒
性であった。
ス単離の結果、１７３３は感染組織数が多く、最も毒性
であることが判明した（表１１参照）。他方、２１７７
はウイルスが主に盲腸扁桃から再単離されたので、非毒
性であった。
【００５１】３）残存性 高毒性単離株である１７３３は最も長期間残存すること
が立証された。ウイルスは接種後２２週目にもニワトリ
の腱から再回収された。単離株２０３５も腱に残存する
ことが観察されたが、接種後４９日間に過ぎなかった。
単離株２１７７は腱ではどの時点でも検出されず、２８
日齢まで盲腸扁桃で検出されたのみであった。
が立証された。ウイルスは接種後２２週目にもニワトリ
の腱から再回収された。単離株２０３５も腱に残存する
ことが観察されたが、接種後４９日間に過ぎなかった。
単離株２１７７は腱ではどの時点でも検出されず、２８
日齢まで盲腸扁桃で検出されたのみであった。
【００５２】４）顕微的病変 ウイルス単離に陽性であった組織（胸腺、肝臓、脾臓、
ファブリシウス嚢及び腱）を選択し、更に顕微的病変を
評価した。これらの感染組織及び病変評点系で観察され
た病変を表１２に示す。これらの病変の重篤度は単離株
に依存した（表１３参照）。単離株１７３３は胸腺で中
度の病変を示し、脾臓、ファブリシウス嚢及び腱で重度
の病変を示したので、他の単離株よりも毒性であると思
われた。２０３５の重篤度は著しく低く、２１７７は顕
微的病変を生じなかった。
ファブリシウス嚢及び腱）を選択し、更に顕微的病変を
評価した。これらの感染組織及び病変評点系で観察され
た病変を表１２に示す。これらの病変の重篤度は単離株
に依存した（表１３参照）。単離株１７３３は胸腺で中
度の病変を示し、脾臓、ファブリシウス嚢及び腱で重度
の病変を示したので、他の単離株よりも毒性であると思
われた。２０３５の重篤度は著しく低く、２１７７は顕
微的病変を生じなかった。
【００５３】
【表１０】
【００５４】
【表１１】
【００５５】
【表１２】
【００５６】
【表１３】
【００５７】３．ＳＰＦレグホンにおける２１７７の免
疫抑制試験 ａ．手順 １日齢にＳＰＦレグホンに２１７７、２０３５又は１７
３３をＩＴ経路で接種した。７日及び２１日齢に採取し
た末梢血液リンパ球（ＰＢＬ）でマイトジェン刺激アッ
セイを実施した。
疫抑制試験 ａ．手順 １日齢にＳＰＦレグホンに２１７７、２０３５又は１７
３３をＩＴ経路で接種した。７日及び２１日齢に採取し
た末梢血液リンパ球（ＰＢＬ）でマイトジェン刺激アッ
セイを実施した。
【００５８】ｂ．結果 １日齢のレグホンに単離株１７３３を接種後７日目にＰ
ＢＬの芽体発生トランスフォーメーション能の顕著な低
下が観察された（表１４参照）。ニワトリから採取した
ＰＢＬの刺激指数は３８．０に過ぎず、これに対して非
接種対照並びに２１７７及び２０３５からのＰＢＬはい
ずれも８４．４〜１１６．９という著しく高い刺激指数
を示した。
ＢＬの芽体発生トランスフォーメーション能の顕著な低
下が観察された（表１４参照）。ニワトリから採取した
ＰＢＬの刺激指数は３８．０に過ぎず、これに対して非
接種対照並びに２１７７及び２０３５からのＰＢＬはい
ずれも８４．４〜１１６．９という著しく高い刺激指数
を示した。
【００５９】
【表１４】
【００６０】接種後２１日目にニワトリからＰＢＬを採
取した処、１７３３の抑制作用はもはや観察されず、２
０３５又は２１７７を接種したニワトリでは免疫抑制は
観察されなかった。
取した処、１７３３の抑制作用はもはや観察されず、２
０３５又は２１７７を接種したニワトリでは免疫抑制は
観察されなかった。
【００６１】実施例３：分子特徴付け ニワトリレオウイルスは２本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）の
１０セグメントから構成されるゲノムを有する。生化学
的特徴付けによると、種々の単離株の２本鎖セグメント
の泳動パターンには顕著な相違が存在することが立証さ
れている。参考資料として本明細書の一部とするＧｏｕ
ｖｅａ及びＳｃｈｎｉｔｚｅｒ，Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇ
ｙ，４３：４６５−４７１（１９８２）を参照された
い。
１０セグメントから構成されるゲノムを有する。生化学
的特徴付けによると、種々の単離株の２本鎖セグメント
の泳動パターンには顕著な相違が存在することが立証さ
れている。参考資料として本明細書の一部とするＧｏｕ
ｖｅａ及びＳｃｈｎｉｔｚｅｒ，Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇ
ｙ，４３：４６５−４７１（１９８２）を参照された
い。
【００６２】感染細胞からの細胞質ＲＮＡをＳｈａｒｐ
ｅ及びＦｉｅｌｄｓ（Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ３８：３
８９−３９２，１９８１）により記載されているように
抽出した。Ｃｒｏｓｓ及びＦｉｅｌｄｓ（Ｊ．Ｖｉｒｏ
ｌｏｇｙ，１９：１６２−１７３，１９７６）により記
載されているように不連続Ｔｒｉｓ−グリシン緩衝液系
中、スラブゲル中でポリアクリルアミドゲル電気泳動
（ＰＡＧＥ）を実施した。Ｘ−Ｏｍａｔフィルム（Ｋｏ
ｄａｋ）を−７０℃で乾燥ゲルに密着させることにより
ラジオオートグラフィーを実施し、標準写真技術により
現像した。
ｅ及びＦｉｅｌｄｓ（Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ３８：３
８９−３９２，１９８１）により記載されているように
抽出した。Ｃｒｏｓｓ及びＦｉｅｌｄｓ（Ｊ．Ｖｉｒｏ
ｌｏｇｙ，１９：１６２−１７３，１９７６）により記
載されているように不連続Ｔｒｉｓ−グリシン緩衝液系
中、スラブゲル中でポリアクリルアミドゲル電気泳動
（ＰＡＧＥ）を実施した。Ｘ−Ｏｍａｔフィルム（Ｋｏ
ｄａｋ）を−７０℃で乾燥ゲルに密着させることにより
ラジオオートグラフィーを実施し、標準写真技術により
現像した。
【００６３】数年間にわたって採取されたフィールドサ
ンプルである相当数の種々のニワトリレオウイルス単離
株をコネチカット州及びデラウェア州から入手した。更
に、米国内の他の地域、英国、スコットランド及びドイ
ツから入手したレオウイルス単離株並びに原型日本株も
分析した。これらのデータによると、同一地域内から単
離されたウイルスのｄｓＲＮＡ泳動パターンが最もよく
似ていた。他方、単離株２１７７は同一地域内で得られ
た他の単離株と著しく異なる泳動パターンを示した。恐
らく、２１７７に感染したニワトリは他の単離株に感染
したニワトリと同様の育種に由来するものであった。更
に、地理的にすぐ近接する地域以外からのニワトリは最
近は導入されていなかった。
ンプルである相当数の種々のニワトリレオウイルス単離
株をコネチカット州及びデラウェア州から入手した。更
に、米国内の他の地域、英国、スコットランド及びドイ
ツから入手したレオウイルス単離株並びに原型日本株も
分析した。これらのデータによると、同一地域内から単
離されたウイルスのｄｓＲＮＡ泳動パターンが最もよく
似ていた。他方、単離株２１７７は同一地域内で得られ
た他の単離株と著しく異なる泳動パターンを示した。恐
らく、２１７７に感染したニワトリは他の単離株に感染
したニワトリと同様の育種に由来するものであった。更
に、地理的にすぐ近接する地域以外からのニワトリは最
近は導入されていなかった。
【００６４】特に、同一地域から得た他の全単離株から
の同一ＲＮＡバンドに比較して、Ｍ２ ＲＮＡバンドは
ゆっくりと泳動し、Ｓ３ ＲＮＡバンドは迅速に泳動し
た。
の同一ＲＮＡバンドに比較して、Ｍ２ ＲＮＡバンドは
ゆっくりと泳動し、Ｓ３ ＲＮＡバンドは迅速に泳動し
た。
【００６５】実施例４．生レオウイルスワクチンの最小
防御量試験 本試験の目的は、皮下（ＳＣ）経路で１日齢ＳＰＦニワ
トリに接種した場合に生成物継代におけるレオウイルス
単離株２１７７の効力を立証することであった。この試
験及びその後のワクチン試験のために、ＣＥＦで１４代
継代後、ニワトリ胚で５〜６代継代することによりマス
ターシードを調製した。細胞培養物（ＣＥＦ）で更に４
代継代することにより所謂生成物継代を得た。
防御量試験 本試験の目的は、皮下（ＳＣ）経路で１日齢ＳＰＦニワ
トリに接種した場合に生成物継代におけるレオウイルス
単離株２１７７の効力を立証することであった。この試
験及びその後のワクチン試験のために、ＣＥＦで１４代
継代後、ニワトリ胚で５〜６代継代することによりマス
ターシードを調製した。細胞培養物（ＣＥＦ）で更に４
代継代することにより所謂生成物継代を得た。
【００６６】１６１日齢ニワトリを各４０羽ずつの３群
と各２０羽ずつの２群に分け、ステンレス鋼負圧アイソ
レーターユニットに入れた。各４０羽を含む群にＳＣ経
路で接種物（マスターシードウイルスから第４代目の継
代でニワトリ胚フィブロブラストで調製し、トリプトー
スリン酸ブロスで希釈したレオウイルス株２１７７）
０．１ｍｌを接種し、１羽当たり約２．５、３．０及び
３．５ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50の用量の２１７７を与えた。
各２０羽を含む２群は一緒に１つのアイソレーターに入
れ、非ワクチン接種非攻撃対照及び非ワクチン接種攻撃
対照として使用した。
と各２０羽ずつの２群に分け、ステンレス鋼負圧アイソ
レーターユニットに入れた。各４０羽を含む群にＳＣ経
路で接種物（マスターシードウイルスから第４代目の継
代でニワトリ胚フィブロブラストで調製し、トリプトー
スリン酸ブロスで希釈したレオウイルス株２１７７）
０．１ｍｌを接種し、１羽当たり約２．５、３．０及び
３．５ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50の用量の２１７７を与えた。
各２０羽を含む２群は一緒に１つのアイソレーターに入
れ、非ワクチン接種非攻撃対照及び非ワクチン接種攻撃
対照として使用した。
【００６７】ワクチン接種後３週目に全ニワトリをコロ
ニーハウスに移した。ワクチン接種動物と一方の非ワク
チン接種動物群に肉趾経路でＳ１１３３攻撃ウイルス
０．１ｍｌで攻撃した（攻撃ウイルスはＴＰＢで１：１
０，０００に希釈したＵ．Ｓ．Ｄ．Ａ．Ｓ１１３３とし
た）。非ワクチン接種非攻撃対照は攻撃せずにおいた。
ニーハウスに移した。ワクチン接種動物と一方の非ワク
チン接種動物群に肉趾経路でＳ１１３３攻撃ウイルス
０．１ｍｌで攻撃した（攻撃ウイルスはＴＰＢで１：１
０，０００に希釈したＵ．Ｓ．Ｄ．Ａ．Ｓ１１３３とし
た）。非ワクチン接種非攻撃対照は攻撃せずにおいた。
【００６８】攻撃後６〜１４日目の肉趾読み取りを使用
して防御百分率を決定した。レオウイルス攻撃後５日以
内に生じる腫張は非特異的であると見なされるので４及
び５日目の読み取りは使用しなかった。各ニワトリの肉
趾炎症得点の９日間累積を求めた。
して防御百分率を決定した。レオウイルス攻撃後５日以
内に生じる腫張は非特異的であると見なされるので４及
び５日目の読み取りは使用しなかった。各ニワトリの肉
趾炎症得点の９日間累積を求めた。
【００６９】非ワクチン接種攻撃対照の肉趾腫張の平均
及び標準偏差を使用して防御を決定した。肉趾炎症累積
値が非ワクチン接種攻撃対照の肉趾炎症の平均から２つ
の標準偏差を減じた差よりも小さい場合にニワトリは防
御されていると判定した。
及び標準偏差を使用して防御を決定した。肉趾炎症累積
値が非ワクチン接種攻撃対照の肉趾炎症の平均から２つ
の標準偏差を減じた差よりも小さい場合にニワトリは防
御されていると判定した。
【００７０】この試験の結果を下記表１５に示す。デー
タによると、肉趾炎症により判定した場合、ワクチン接
種後３週目にＳ１１３３攻撃ウイルスで攻撃したニワト
リではこの試験で使用したレオウイルス２１７７の最小
用量である２．５ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50で有効である。こ
のデータによると更に、２．５ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50の用
量でレオウイルス２１７７をワクチン接種したニワトリ
の１００％が防御されたことから、レオウイルス２１７
７の最小防御量は＜２．５ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50であると
思われる。
タによると、肉趾炎症により判定した場合、ワクチン接
種後３週目にＳ１１３３攻撃ウイルスで攻撃したニワト
リではこの試験で使用したレオウイルス２１７７の最小
用量である２．５ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50で有効である。こ
のデータによると更に、２．５ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50の用
量でレオウイルス２１７７をワクチン接種したニワトリ
の１００％が防御されたことから、レオウイルス２１７
７の最小防御量は＜２．５ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50であると
思われる。
【００７１】
【表１５】
【００７２】実施例５：レオウイルス単離攻撃モデル、
生レオウイルスワクチン この試験の目的は、ウイルス単離攻撃モデルを分析し、
一般に吸収不良症候群に関連する毒性レオウイルス（１
７３３株）で攻撃した際のレオウイルス単離株２１７７
の効力を立証することであった。
生レオウイルスワクチン この試験の目的は、ウイルス単離攻撃モデルを分析し、
一般に吸収不良症候群に関連する毒性レオウイルス（１
７３３株）で攻撃した際のレオウイルス単離株２１７７
の効力を立証することであった。
【００７３】要約すると、１日齢ニワトリを４群に分
け、群１及び３は皮下経路で０．１ｍｌ用量当たり約
５．０ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50の２１７７をワクチン接種し
た（ワクチン調製物は実施例４と同一とした）。群１の
ニワトリは気管内（ＩＴ）経路で攻撃した。群３のニワ
トリは肉趾経路で攻撃した。群２及び４は対照群として
ワクチン接種しなかった。結果を下記表１６に示す。
け、群１及び３は皮下経路で０．１ｍｌ用量当たり約
５．０ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50の２１７７をワクチン接種し
た（ワクチン調製物は実施例４と同一とした）。群１の
ニワトリは気管内（ＩＴ）経路で攻撃した。群３のニワ
トリは肉趾経路で攻撃した。群２及び４は対照群として
ワクチン接種しなかった。結果を下記表１６に示す。
【００７４】攻撃ウイルスは、０．１ｍｌ用量当たり約
４．０ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50を含有するようにＴＰＢで希
釈したレオウイルス１７３３の調製物とした。
４．０ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50を含有するようにＴＰＢで希
釈したレオウイルス１７３３の調製物とした。
【００７５】ワクチン群１及び２のニワトリは気管内経
路で０．１ｍｌ用量当たり４．０ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50の
レオウイルス１７３３を１６日齢で攻撃した。ワクチン
接種群３及び４のニワトリは肉趾経路で攻撃１７３３レ
オウイルスの同一調製物で攻撃した。
路で０．１ｍｌ用量当たり４．０ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50の
レオウイルス１７３３を１６日齢で攻撃した。ワクチン
接種群３及び４のニワトリは肉趾経路で攻撃１７３３レ
オウイルスの同一調製物で攻撃した。
【００７６】攻撃日にワクチン接種動物（群１）からの
５羽及び非ワクチン接種対照（群２）からの５羽を殺
し、脾臓を取り出してウイルス単離した。この時点で単
離されたウイルスはワクチンウイルスであった。
５羽及び非ワクチン接種対照（群２）からの５羽を殺
し、脾臓を取り出してウイルス単離した。この時点で単
離されたウイルスはワクチンウイルスであった。
【００７７】ＩＴ経路で攻撃したニワトリ（群１及び
２）を攻撃後５日目に殺して脾臓を取り出し、ウイルス
単離した。攻撃後５日目から出発して、肉趾経路で攻撃
したニワトリ（群３及び４）に肉趾の腫張が生じたか否
かを５日間毎日観察した。
２）を攻撃後５日目に殺して脾臓を取り出し、ウイルス
単離した。攻撃後５日目から出発して、肉趾経路で攻撃
したニワトリ（群３及び４）に肉趾の腫張が生じたか否
かを５日間毎日観察した。
【００７８】ニワトリから取り出した脾臓を、０．７５
％ネオマイシンを含有するＴＰＢ１ｍｌ中に置いた。組
織を組織グラインダーで粉砕した。サンプルに更に１．
０ｍｌを加え、５日齢胚形成卵に０．１ｍｌを接種し
た。卵を１０日間毎日明かりに透かして死亡率を調べ
た。１０日間以内に死滅した胚から漿尿膜を取り出し、
寒天ゲル沈殿によりレオウイルス抗原の存在を試験し
た。未知サンプルと陽性公知レオウイルスサンプルとの
間に同一線が形成された場合に組織はレオウイルス陽性
であると判定した。
％ネオマイシンを含有するＴＰＢ１ｍｌ中に置いた。組
織を組織グラインダーで粉砕した。サンプルに更に１．
０ｍｌを加え、５日齢胚形成卵に０．１ｍｌを接種し
た。卵を１０日間毎日明かりに透かして死亡率を調べ
た。１０日間以内に死滅した胚から漿尿膜を取り出し、
寒天ゲル沈殿によりレオウイルス抗原の存在を試験し
た。未知サンプルと陽性公知レオウイルスサンプルとの
間に同一線が形成された場合に組織はレオウイルス陽性
であると判定した。
【００７９】
【表１６】
【００８０】本実験の目的は、吸収不良症候群に一般に
結び付けられるレオウイルスである１７３３株で攻撃し
た場合にレオウイルス２１７７が腱滑膜炎攻撃株（Ｓ１
１３３）よりもニワトリを防御することができたか否か
を判定することであった。実験は、防御を決定するため
の手段として肉趾攻撃の代わりに脾臓からのウイルス単
離を使用するように設計した。胚形成卵に粉砕脾臓サン
プルを接種し、寒天ゲル沈殿試験で漿尿膜にレオウイル
ス抗原が存在するか否かを試験することによりウイルス
単離を実施した。
結び付けられるレオウイルスである１７３３株で攻撃し
た場合にレオウイルス２１７７が腱滑膜炎攻撃株（Ｓ１
１３３）よりもニワトリを防御することができたか否か
を判定することであった。実験は、防御を決定するため
の手段として肉趾攻撃の代わりに脾臓からのウイルス単
離を使用するように設計した。胚形成卵に粉砕脾臓サン
プルを接種し、寒天ゲル沈殿試験で漿尿膜にレオウイル
ス抗原が存在するか否かを試験することによりウイルス
単離を実施した。
【００８１】その結果、ウイルス単離法で試験したワク
チン接種ニワトリの９０％が防御され、これに対して肉
趾経路で攻撃したニワトリの防御は１００％であった。
非ワクチン接種対照では、ウイルス単離法で試験したニ
ワトリの９５％が感受性であり、これに対して肉趾炎症
法で試験したニワトリでは９１％が感受性であった。
チン接種ニワトリの９０％が防御され、これに対して肉
趾経路で攻撃したニワトリの防御は１００％であった。
非ワクチン接種対照では、ウイルス単離法で試験したニ
ワトリの９５％が感受性であり、これに対して肉趾炎症
法で試験したニワトリでは９１％が感受性であった。
【００８２】この試験の結果は以下の２点を立証するも
のである。（１）レオウイルス２１７７株でワクチン接
種し且つ腱滑膜炎株Ｓ１１３３の代わりにレオウイルス
吸収不良株１７３３で攻撃したニワトリにおける防御を
判定するために、ウイルス単離法を使用することができ
る。（２）２１７７ワクチンは吸収不良１７７３で攻撃
した際にニワトリに防御を提供する。
のである。（１）レオウイルス２１７７株でワクチン接
種し且つ腱滑膜炎株Ｓ１１３３の代わりにレオウイルス
吸収不良株１７３３で攻撃したニワトリにおける防御を
判定するために、ウイルス単離法を使用することができ
る。（２）２１７７ワクチンは吸収不良１７７３で攻撃
した際にニワトリに防御を提供する。
【００８３】実施例６：レオウイルス株２１７７のＨＶ
Ｔ／ＳＢ−１ワクチン接種干渉試験 本試験の目的は、レオウイルス株２１７７がＨＶＴ／Ｓ
Ｂ−１ワクチン接種効力に干渉するか否かを判定するこ
とであった。試験の設計を下記表１７に示す。
Ｔ／ＳＢ−１ワクチン接種干渉試験 本試験の目的は、レオウイルス株２１７７がＨＶＴ／Ｓ
Ｂ−１ワクチン接種効力に干渉するか否かを判定するこ
とであった。試験の設計を下記表１７に示す。
【００８４】
【表１７】
【００８５】ワクチン接種日にＨＶＴのアンプル２個及
びＳＢ−１のアンプル２個を融解し、一緒にしてマレッ
ク希釈剤４００ｍｌに再懸濁した。次いで、この混合物
を１００ｍｌずつ４つのアリコートに分割した。１つの
アリコートはＨＶＴ／ＳＢ−１ワクチン接種群として別
にした。残りのアリコートの１つに１ｍｌのレオウイル
ス２１７７を加え、２１７７／ＨＶＴ／ＳＢ−１群とし
た。残りの２つのアリコートは使用しなかった。
びＳＢ−１のアンプル２個を融解し、一緒にしてマレッ
ク希釈剤４００ｍｌに再懸濁した。次いで、この混合物
を１００ｍｌずつ４つのアリコートに分割した。１つの
アリコートはＨＶＴ／ＳＢ−１ワクチン接種群として別
にした。残りのアリコートの１つに１ｍｌのレオウイル
ス２１７７を加え、２１７７／ＨＶＴ／ＳＢ−１群とし
た。残りの２つのアリコートは使用しなかった。
【００８６】ワクチン接種日に再懸濁ＨＶＴ／ＳＢ−１
組み合わせを１０回反復滴定した。これらの反復滴定の
５回は一次ＣＥＦ細胞で実施してＳＢ−１力価を測定
し、これらの反復滴定の５回は二次ＣＥＦで実施し、Ｔ
ＶＴ力価を測定した。
組み合わせを１０回反復滴定した。これらの反復滴定の
５回は一次ＣＥＦ細胞で実施してＳＢ−１力価を測定
し、これらの反復滴定の５回は二次ＣＥＦで実施し、Ｔ
ＶＴ力価を測定した。
【００８７】レオウイルス２１７７／ＨＶＴ／ＳＢ−１
を含有するワクチンを凍結し、レオウイルス２１７７を
一次ＣＥＦで５回反復滴定した。
を含有するワクチンを凍結し、レオウイルス２１７７を
一次ＣＥＦで５回反復滴定した。
【００８８】用量当たり約５００プラーク形成単位のマ
レック病ウイルスのＲＢ１Ｂ株を使用して５日齢のニワ
トリに腹腔内攻撃した。マレック病はマレック病の肉眼
的病変及び臨床兆候が観察されるまでに約３〜４週間の
インキュベーション期間を有するので、攻撃後第１週以
内に死亡したニワトリは非特異的原因で死亡したと判断
した。これらのニワトリと攻撃前に死亡したニワトリは
防御評価から除外した。この攻撃期間後１週間後に病変
を有するか又は死亡したニワトリの数を攻撃後第１週後
に生存し続けているニワトリの合計数で除して、防御さ
れたニワトリの百分率を決定した。
レック病ウイルスのＲＢ１Ｂ株を使用して５日齢のニワ
トリに腹腔内攻撃した。マレック病はマレック病の肉眼
的病変及び臨床兆候が観察されるまでに約３〜４週間の
インキュベーション期間を有するので、攻撃後第１週以
内に死亡したニワトリは非特異的原因で死亡したと判断
した。これらのニワトリと攻撃前に死亡したニワトリは
防御評価から除外した。この攻撃期間後１週間後に病変
を有するか又は死亡したニワトリの数を攻撃後第１週後
に生存し続けているニワトリの合計数で除して、防御さ
れたニワトリの百分率を決定した。
【００８９】各ウイルスで反復滴定した結果、２種のワ
クチンの調製物は下記ウイルス力価を含むことが判明し
た。
クチンの調製物は下記ウイルス力価を含むことが判明し
た。
【００９０】
【表１８】
【００９１】防御結果から明らかなように、ＨＶＴ／Ｓ
Ｂ−１ワクチン接種動物ではニワトリの８８％が防御さ
れた。２１７７／ＨＶＴ／ＳＢ−１をワクチン接種した
群では８９％が防御された。非ワクチン接種攻撃対照で
はニワトリの４％は病変を示さなかった（下記表１９参
照）。換言するならば、結果はレオウイルス株２１７７
を含むＨＶＴ／ＳＢ−１ワクチンの効力がレオウイルス
２１７７を含まないＨＶＴ／ＳＢ−１の同一調製物と相
違しないことを示す。従って、レオウイルス２１７７を
ＨＶＴ／ＳＢ−１ワクチンに加えてもマレック病ワクチ
ンの効力に干渉しない。
Ｂ−１ワクチン接種動物ではニワトリの８８％が防御さ
れた。２１７７／ＨＶＴ／ＳＢ−１をワクチン接種した
群では８９％が防御された。非ワクチン接種攻撃対照で
はニワトリの４％は病変を示さなかった（下記表１９参
照）。換言するならば、結果はレオウイルス株２１７７
を含むＨＶＴ／ＳＢ−１ワクチンの効力がレオウイルス
２１７７を含まないＨＶＴ／ＳＢ−１の同一調製物と相
違しないことを示す。従って、レオウイルス２１７７を
ＨＶＴ／ＳＢ−１ワクチンに加えてもマレック病ワクチ
ンの効力に干渉しない。
【００９２】
【表１９】
【００９３】更に、ＨＶＴ／ＳＢ−１ワクチンが２１７
７ワクチンの効力を干渉したか否かについて試験した。
その結果、用量当たり４．２ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50のレオ
ウイルス２１７７、用量当たり５６３６ＰＦＵのＨＶＴ
及び５７３３ＰＦＵのＳＢ−１を含有するワクチンを調
製した処、レオウイルス２１７７ワクチンの効力に何ら
影響しなかった。混合ワクチンの防御百分率は９３％で
あり、これに対してレオウイルス２１７７を単独で使用
した場合の防御は１００％であった。
７ワクチンの効力を干渉したか否かについて試験した。
その結果、用量当たり４．２ｌｏｇ10ＴＣＩＤ50のレオ
ウイルス２１７７、用量当たり５６３６ＰＦＵのＨＶＴ
及び５７３３ＰＦＵのＳＢ−１を含有するワクチンを調
製した処、レオウイルス２１７７ワクチンの効力に何ら
影響しなかった。混合ワクチンの防御百分率は９３％で
あり、これに対してレオウイルス２１７７を単独で使用
した場合の防御は１００％であった。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ジヨン・ノツクス・ローゼンバーガー アメリカ合衆国、ペンシルバニア・19350、 ランデンバーグ、スカイ・クレスト・29 (72)発明者 ドナルド・ユージーン・ロエスラー アメリカ合衆国、デラウエア・19958、ル イス、ゴージング・ドライブ・29 (72)発明者 ルドルフ・ジヨージ・ヘイン アメリカ合衆国、デラウエア・19947、ジ ヨージタウン、エバーグリーン・ドライ ブ・25
Claims (21)
- 【請求項１】 ニワトリに投与するワクチン製剤中に有
効量で配合され、病原性ニワトリレオウイルスによる攻
撃に対する防御を提供し、同時投与したマレック病ワク
チンの活性に干渉しない非病原性ニワトリレオウイル
ス。 - 【請求項２】 レオウイルス株２１７７のポリアクリル
アミドゲルＲＮＡ泳動パターンと実質的に同様のＲＮＡ
泳動パターンを有するニワトリレオウイルス。 - 【請求項３】 ＡＴＣＣに寄託番号ＶＲ２４９９で寄託
された２１７７株と呼称される請求項１に記載のニワト
リレオウイルス。 - 【請求項４】 請求項１に記載の非病原性ニワトリレオ
ウイルスを含むワクチン。 - 【請求項５】 レオウイルスが不活化形態である請求項
４に記載のワクチン。 - 【請求項６】 ニワトリレオウイルスがＡＴＣＣに寄託
番号ＶＲ２４９９で寄託された２１７７株と呼称される
請求項４に記載のワクチン。 - 【請求項７】 請求項１に記載の非病原性ニワトリレオ
ウイルスと少なくとも１種のマレック病ワクチンとを含
む混合ワクチン。 - 【請求項８】 少なくとも１種のマレック病ワクチンが
ＳＢ−１、ＨＶＴ及びＣＶＩ ９８８からなる群から選
択される請求項７に記載の混合ワクチン。 - 【請求項９】 少なくとも１種のマレック病ワクチンが
ＳＢ−１及びＨＶＴからなる群から選択される請求項７
に記載の混合ワクチン。 - 【請求項１０】 請求項１に記載の非病原性ニワトリレ
オウイルスと伝染性ファブリシウス嚢病ワクチンとを含
む混合ワクチン。 - 【請求項１１】 少なくとも１種のマレック病ワクチン
及び少なくとも１種の伝染性ファブリシウス嚢病ワクチ
ンと共に請求項１に記載の非病原性ニワトリレオウイル
スを含む混合ワクチン。 - 【請求項１２】 請求項１に記載の非病原性ニワトリレ
オウイルス、ニューカッスル病ウイルスワクチン及び伝
染性気管支炎ウイルスワクチンを含む混合ワクチン。 - 【請求項１３】 ニワトリ脳脊髄炎、鶏痘及びニワトリ
貧血因子からなる群から選択される１種以上のウイルス
のワクチンと共に請求項１に記載の非病原性ニワトリレ
オウイルスを含む混合ワクチン。 - 【請求項１４】 請求項１に記載の非病原性レオウイル
スを含む有効量のワクチンを投与することからなる、ニ
ワトリレオウイルス感染に対するニワトリの免疫方法。 - 【請求項１５】 ワクチンが有効量の少なくとも１種の
マレック病ワクチンを更に含む請求項１４に記載の方
法。 - 【請求項１６】 少なくとも１種のマレック病ワクチン
がＳＢ−１、ＨＶＴ及びＣＶＩ ９８８からなる群から
選択される請求項１４に記載の方法。 - 【請求項１７】 少なくとも１種のマレック病ワクチン
がＳＢ−１及びＨＶＴからなる群から選択される請求項
１６に記載の方法。 - 【請求項１８】 ワクチンが有効量の伝染性ファブリシ
ウス嚢病ウイルスワクチンを更に含む請求項１４に記載
の方法。 - 【請求項１９】 ワクチンが少なくとも１種のマレック
病ワクチンと少なくとも１種の伝染性ファブリシウス嚢
病ウイルスワクチンを更に含む請求項１４に記載の方
法。 - 【請求項２０】 ワクチンがニューカッスル病ワクチン
及び伝染性気管支炎ウイルスワクチンを更に含む請求項
１４に記載の方法。 - 【請求項２１】 ワクチンがニワトリ脳脊髄炎、鶏痘及
びニワトリ貧血因子からなる群から選択される１種以上
のウイルスのワクチンを更に含む請求項１４に記載の方
法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US247174 | 1994-05-20 | ||
| US08/247,174 US5525342A (en) | 1994-05-20 | 1994-05-20 | Reovirus strain 2177 and vaccine containing same |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07322877A true JPH07322877A (ja) | 1995-12-12 |
| JP3756219B2 JP3756219B2 (ja) | 2006-03-15 |
Family
ID=22933884
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12167395A Expired - Fee Related JP3756219B2 (ja) | 1994-05-20 | 1995-05-19 | レオウイルス株２１７７及び該株を含むワクチン |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5525342A (ja) |
| EP (1) | EP0687728B1 (ja) |
| JP (1) | JP3756219B2 (ja) |
| DE (1) | DE69535981D1 (ja) |
| DK (1) | DK0687728T3 (ja) |
| ES (1) | ES2328300T3 (ja) |
| PT (1) | PT687728E (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000295986A (ja) * | 1999-01-29 | 2000-10-24 | Akzo Nobel Nv | トリレオウイルスの新規抗原クラス |
| WO2017141942A1 (ja) * | 2016-02-16 | 2017-08-24 | 国立大学法人大阪大学 | 線維化を治療するための医薬組成物 |
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|---|---|---|---|---|
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| US6110461A (en) * | 1997-08-13 | 2000-08-29 | Oncolytics Biotech Inc. | Reovirus for the treatment of neoplasia |
| US6136307A (en) | 1997-08-13 | 2000-10-24 | Oncolytics Biotech Inc. | Reovirus for the treatment of cellular proliferative disorders |
| CA2498768A1 (en) * | 2002-10-09 | 2004-04-22 | Akzo Nobel N.V. | Methods of treating and preventing neurological symptoms caused by avian reovirus and novel associated characteristics |
| ES2551306T3 (es) * | 2006-02-13 | 2015-11-17 | Oncolytics Biotech Inc. | Uso de inmunosupresión local de baja dosis para potenciar una terapia viral oncolítica |
| EP3200820B1 (en) | 2014-10-03 | 2023-07-05 | Intervet International B.V. | Broad-spectrum vaccine against avian reovirus |
| KR20210098202A (ko) * | 2020-01-31 | 2021-08-10 | 바이로큐어 주식회사 | 레오바이러스를 유효성분으로 포함하는 대장염의 예방 또는 치료용 조성물 |
| CN116286670A (zh) * | 2021-12-21 | 2023-06-23 | 青岛动保国家工程技术研究中心有限公司 | 一种新型鸭呼肠孤病毒及其在灭活疫苗和卵黄抗体制备中的应用 |
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|---|---|---|---|---|
| PT70556A (en) * | 1978-12-20 | 1980-01-01 | Gist Brocades Nv | Vaccines against diseases caused by reo-virus and process for the preparation of those vaccines |
-
1994
- 1994-05-20 US US08/247,174 patent/US5525342A/en not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-05-17 PT PT95201282T patent/PT687728E/pt unknown
- 1995-05-17 DK DK95201282T patent/DK0687728T3/da active
- 1995-05-17 ES ES95201282T patent/ES2328300T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-17 EP EP95201282A patent/EP0687728B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-17 DE DE69535981T patent/DE69535981D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-19 JP JP12167395A patent/JP3756219B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| JP2000295986A (ja) * | 1999-01-29 | 2000-10-24 | Akzo Nobel Nv | トリレオウイルスの新規抗原クラス |
| WO2017141942A1 (ja) * | 2016-02-16 | 2017-08-24 | 国立大学法人大阪大学 | 線維化を治療するための医薬組成物 |
| US11077157B2 (en) | 2016-02-16 | 2021-08-03 | Osaka University | Medicinal composition for treating fibrosis |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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