JPH07501045A - ヘルペスによる病変部の治癒を促進する局所用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ヘルペスによる病変部の治癒を促進する局所用組成物発明の背景 単純ヘルペスウィルス（ＨＳ　Ｖ）は、口および生殖器の皮膚や粘膜の炎症を特 徴とする感染を引き起こす。口および顔の部分での病変に極めて普通に関与する Ｈ８Ｖの種類は■型Ｈ３Ｖである。ＩＩ型Ｈ３Ｖは、大抵の場合には生殖器の領 域の病変に関与している。

Ｈ８Ｖの症状には、一般的には炎症、痛みおよび病変が挙げられる。症状は、ま ず感染部位でのうずき、痛み、および腫張に始まり、そののち病変（細胞死）を 生じ、約１０〜１４日間で治癒する。最初の感染後、体温の変化、ストレス、紫 外線照射、および化学薬品に対する暴露などの様々な刺激に応答して、存命期間 を通じて再発が起こる可能性がある。

Ｈ３Ｖの治療には、有効性において限界がある。様々な組成物が市販されている が、現時点では治療薬は知られていない。アシクロビル（アシクログアノシン） は、Ｈ３Ｖ治療のために全身投与されており、ある程度の効果を得ている。局所 用アシクロビルは、最初の病変に対しては多少有効であることが見出されている が、再発性の病変に対しては有効ではなかった。インターフェロンについても、 Ｈ８Ｖに対する全身投与および局所投与が試験されてきたが、限られた有効性し か示さなかった。

抗ウィルス剤の全身投与には多数の副作用が伴うため、局所投与が非常に好まし い。残念なことに、全身投与された場合にある程度の有効性を示す化合物さえ、 局所投与では一般的に効果がなく、そのため病変は通常、乾燥剤および／または 局所麻酔薬で治療されるのみである。

従って、本発明の目的は、単純ヘルペス感染または他のウィルスによる病変に伴 う症状の軽減のための、局所用組成物およびその使用法を提供することである。

本発明のもう一つの目的は、Ｈ３Ｖ感染の症状軽減のための局所用組成物であっ て、副作用が極めて少なく、ウィルスによる病変に通常伴う炎症および痛みを軽 減する組成物を提供することである。

発明の要約 活性成分として、抗ウィルス活性を持つ麻酔薬および界面活性剤を有する組成物 の毎日多数回適用することにより、単純ヘルペスウィルスによる病変の治癒期間 が約１０日から５日に短縮され、炎症および痛みが軽減される。本組成物は、本 来は市販の局所用クリームとインターフェロンを含有する錠剤との併用物として 処方された。

錠剤は、１，０ＯＯＩＵ　ヒト白血球Ａ型インターフェロンを、１０００１Ｕ　 ビタミンＡ１微量元素、および場合によってはカタラーゼおよびスーパーオキシ ドジスムターゼ活性物中に含有する。インターフェロンは、１゜５オンスの体積 のクリームに対し４錠の割合でクリームに添加した。現在、インターフェロンが 本組成物の必須要素ではないということが明らかになってきた。麻酔薬および界 面活性剤は、インターフェロンの非存在下において、治癒を促進しウィルス感染 の症状を最小限にするのに有効である。しかしながら、インターフェロンは、そ れらの活性を増強することができる。

本組成物は、毎日、約４時間毎に病変部に適用するものであり、感染の初期また は前駆期から開始することが好ましい。はとんど直ちに改善が認められ、この改 善は痛み、腫張の軽減、および未治療病変と比較して治癒がより早いことを特徴 とする。

発明の詳細な説明 Ｈ８Ｖ病変の症状の軽減のための処方は、局所用または局部用の麻酔薬および界 面活性剤という２つの必須成分を含み、これを病変部に対する局所適用に適当な 安定剤、緩衝剤および保存剤を含有する従来の担体であるクリーム、軟膏、溶液 またはゲルに添加するのである。

適当な局所用または局部用の麻酔薬 好ましい麻酔薬はテトシカインである（塩酸塩または他の塩として、または遊離 塩基として）。局所用麻酔薬は、便宜上エステル、エーテルまたはアミドに分類 することができる。

エステル　アミド　エーテル テトシカイン　ジブ力イン　ジクロニンベンゾ力イン　リドカイン　プラモキシ ンコカイン（合衆国では合法的な薬物ではない）ブタンビンピクレート（トリニ トロフェノール＝２−ブチル−ｐ−アミノベンゾエート） を髄麻酔薬のような注射として用いられる他の麻酔薬があり、これらは通常局所 用としては挙げられないが、正常な皮膚が障壁として存在しない病変部において は、十分に機能することが予想される。例として、下記のようなものが挙げられ る。

クロロプロ力イン　ブピバカイン テトシカインは、効果的に皮膚に浸透することが初めて試験され証明された麻酔 薬であるプロ力インに構造的に近く、イン・ビトロにおいてウィルスの杭抜製活 性を有し、１〜２重量％の濃度において熱性庖疹および唇ヘルペス用の一般用（ ＯＴＣ）製品としての市販を認可されてＦＤＡモノグラフリストに掲載されてい るので、好ましい麻酔薬である。

好ましい態様では、麻酔薬は、１〜２重量％の濃度範囲で担体と結合するが、麻 酔薬は約０．１５〜１５重量％の濃度で含まれることもできる。

界面活性剤 界面活性剤がイン・ビトロで強力な抗ウィルス活性を有し、極めて毒性が低いこ とが見出されている。界面活性剤はウィルスを物理的に不活性化し、麻酔薬の細 胞レセプターへの浸透を促進することができ、通常は効果がない濃度において化 合物の有効性を増加させるものと考えられる。

本来の処方中の材料は、ｒＳＬＳＪと呼ばれるラウリル（またはドデシル）硫酸 ナトリウムであり、これは練り歯磨きおよび他の化粧用調製物に見られる一般的 な界面活性剤であって、蛋白質の３次構造を［広げる（ｕｎｌｏｌｄｌＪことが 知られているが、これまでは実際に抗ウィルス活性を有するということは知らて いなかった。ＳＬＳは、負に帯電した硫酸基を有する陰イオン界面活性剤である 。

ＳＬＳは、正常な皮膚に極めて効果的に浸透することもできる。

他の含硫界面活性剤、例えばアルキルアリールおよびアリールスルホン酸ナトリ ウムおよびアルキルスルホネートをＳＬＳの代わりに用いることができる。

対応する陽イオン界面活性剤は、単独またはＳＬＳとの組合せで活性を示すこと ができる。例としては、トリメチルドデシルアンモニウムクロライドがあり、こ れは抗微生物特性を有する正に帯電した第四級アンモニウム錯体である。界面活 性を付与するための長鎖の残基を有するあるいは有さない他の第四級塩を用いる こともできる。

最も一般的な非イオン界面活性剤はノンオキシツールであり、ある程度の抗ウィ ルス活性を有することが知られており、これを用いることもできる。一般的な非 イオン界面活性剤は、ノンオキシツール、ポリオキシエチレンおよびポリオキシ エチレン−ポリオキシプロピレン共重合体などである。

好ましい態様では、界面活性剤は、約０．５〜２重量％の濃度範囲で担体と結合 するが、界面活性剤は重量比で約０．１〜１０重量％の濃度で存在することもで きる。

異なる性質を有する界面活性剤を、約０．１〜２０重量％の濃度で配合すること も可能である。

他の抗菌剤 本組成物は、抗生物質、抗真菌剤および他の抗ウイルス性化合物などの他の抗菌 剤を含有することができ、これらにより基本組成物の活性を補足または補充する ことができる。適当な抗生物質には、テトラサイクリン、ポリミキシンＢまたは 局所用組成物、特に一般用の処方中に用いられる他の一般的な抗生物質などがあ る。有用な抗真菌剤の例には、トルナフテートおよびミカチンなどがある。抗ウ ィルス剤の例には、天然または組換えインターフェロン、およびアシクロビルの ようなヌクレオシド類似体がある。

他の成分 樟脳およびメントールのような反対刺激剤、ベンジルアルコール、レゾルシノー ルおよびフェノールのような乾燥剤、および硫酸亜鉛およびタンニン酸のような 収斂剤も、本組成物に添加することができる。

他の種類の薬剤も本処方へ添加することができる。例えば、唇ヘルペスは紫外線 照射によって誘発されることが知られているので、ＰＡＢＡのような遮光薬を本 処方へ添加することができる。

許容可能な医薬用担体 本組成物は、はとんど総ての比較的不活性な局所用担体中で調製することができ る。そのような担体の多くは、日常的に用いられ、また薬学教科書を参照するこ とによって得ることができる。例には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポ リプロピレン共重合体（プルロエックス）およびある種の水溶性ゲルがある。好 ましい担体は乳化したクリームであるが、その代わりにある種のワセリンまたは 鉱油を基剤とした軟膏のような、界面活性剤および麻酔薬を分散することができ る他の一般的な担体を用いることができる。

この時、ウィルスによる病変部の治癒を高めるのに最も有効な組成物の好ましい 組成は、下記の通りである（総てのパーセントは重量によるものである）。

メチルパラベン、０．２５％（０，２５〜０．５％）ホウ砂、０．５％（０，３ 〜０．６％）ラウラミドＤＥＡ、４％（０，３〜０．４％）ステアリン酸、２０ ％（１５〜２５％）蜜蝋、０．８％（０，５〜１．５％） テトシカイン、１．８％（１〜２％） ラウリル硫酸ナトリウム、０．８％（０，１〜３％）ユーカリ浦　０．０２５％ （０，０１〜Ｏ，０，５％）ＰＣＭＸ０．４％（０，３〜０．５％）水を加えて 総重量を１００グラムとする。

はとんど場合において、活性成分を含有する担体のｐＨをホウ砂のような緩衝剤 成分として用いて約６〜８のｐＨに調整するのが好ましいが、許容される緩衝剤 を用いることもできる。

他の添加物には、酸化防止剤、芳香剤、色素、水、保存剤（酸化防止剤または抗 微生物剤のいずれか）、潤滑剤、保湿剤または乾燥剤などを追加することができ る。

適用方法　□ 本組成物は、患者が病変部に毎日１〜６回適用するものであり、前駆症状が感知 された直後に開始することが最も好ましい。病変部または前駆症状部分を覆うの に十分な組成物を適用する。

本処方は、Ｈ８ＶＩ　（唇ヘルペスおよび熱性庖疹）およびＨＳＶ２　（生殖器 ヘルペス）両方に対して活性を示すことが明らかにされてきた。しかし、本処方 は（帯状庖疹を引き起こす）帯状庖疹および水痘を引き起こす水痘ウィルスなど 、構造または感染機序が類似している他のウィルスに対しても活性を示すことが できる。

本発明は、下記の例を参照することによって更に理解することができる。

例１ ２型単純ヘルペスウイルスの複製を直接不活化するまたは阻害するために選択し た組成物成分の効力の測定細胞 ヒト胎児肺細胞の連続培養株（ｃｏｎｔｉｎｕｏａｓ　ｌｉｎｅ）（ＭＲＣ−５ ）を、Ｌ−グルタミン２ｍＭ、ゲンタマイシン１０　ｍ　ｇ　／　ｍｌ　、アン ホテリシンＢ（フンギソン）０．２５ｍｇ／ｍｌ、および１０％の熱不活性化ウ シ胎児血清（成長培地）を補ったイーグルの塩類中のイーグルの最少必須培地（ Ｍ　Ｅ　Ｍ）中で生育させた。細胞は、加湿した５％ＣＯ２気相中または密閉し たフラスコ中で３７℃で生育させた。保存培地は、ウシ胎児血清の濃度を２％と したこと以外は基本組成と同じものを用いた。

Ｖｅｒｏ細胞（緑サル腎細胞の連続培養株）は、ＭＲＣ−５細胞と同じ方法で生 育させた。

ウィルス 単純ヘルペスウィルス（ＨＳＶ−２）型の生殖器病変部からの臨床単離味を用い た。

ウィルスのストックを、ＭＲＣ−５細胞に細胞当り０．０１プラ一ク形成単位（ ＰＦＵ）の多重度で感染させることにより生育させ、保存培地に集めた。ウィル スは、−７０℃での凍結と解凍を３サイクル行い、４℃、１１０００Ｘで１５分 間遠心分離を行って細胞の破片を除去することによって回収した。得られたウィ ルスストックを一定量ずつに分け、−７０℃で凍結した。

化学薬品 塩酸リドカイン、ナイアシン、ラウリル硫酸ナトリウムおよびテトシカインの保 存溶液は、市販の試薬から調製した。保存溶液は、成分補足していないイーグル のＭＥＭ中で調製し、４℃で保存した。

細胞毒性試験 細胞毒性の測定は、ＭＲＣ−５細胞およびＶｅｒｏ細胞で実施した。試験化合物 を、選択した濃度で保存培地に溶解し、９６穴の組織培養プレート中のＭＲＣ− ５またはＶｅｒｏ細胞に接種した。各濃度についてトリプリケートで接種した。

プレートを５％ＣＯ２気相中において３７℃でインキュベーションし、接種後２ ４．４８および７２時間目に細胞毒性を等級付けした。７２時間後に５０％の細 胞毒性を示す化合物の最高濃度をエンドポイントとした。

これらの結果を以下に示す。

塩酸プロカイン プロ力インＨＣＩは、０．２５％を上回る濃度で、２４時間のインキュベーショ ン後に、ＭＲＣ−５細胞において有意な細胞毒性を示す。プロ力インＨＣＩは、 Ｖｅｒｏ細胞においてはＭＲＣ−５細胞はどには細胞毒性を示さず、２．０％よ り大きい濃度でのみ有意な毒性を示した。

テトシカインＨＣＩ テトシカインＨＣＩも、ＭＲＣ−５細胞に対してより毒性が強く、０，０３％を 上回る濃度で２４時間目に有意な毒性を示したが、Ｖｅｒｏ細胞では示さなかっ た。

ナイアシン ナイアシンは、ＭＲＣ−５細胞において０１２５％の濃度まで毒性を示さない。

ラウリル硫酸ナトリウム（Ｓ　Ｌ　５）ＳＬＳは、ＭＲＣ−５細胞に対し０．０ ０２５％を上回る濃度で強い毒性を示す。

不活化試験 試験化合物がＨＳＶ−２を直接不活化するかどうかを検討するため、試験化合物 の一連の希釈液０．５ｍｌを、ストックＨ８ｖ−２（力価＝５．０ｘｌＯＰＦＵ ／ｍ１）０．５ｍｌと混合し、室温で３０分間インキュベーションした。３０分 後、化合物とウィルスの混合物を維持培地中でｉｏ、ｏｏｏ倍に希釈し、ＭＲＣ −５細胞に播種することによってウィルスの回収率を測定した。細胞を、２４時 間、４８時間、および７２時間後に、細胞変性効果について等級付けした。

プロ力インＨＣＩ プロカインＨＣＩは、４％までの試験濃度でＨＳＶ−２を直接不活化しない。

テトシカインＨＣＩ テトシカインＨＣＩは、２％までの試験濃度でＨＳＶ−２を直接不活化しない。

ナイアシン ナイアシンは、０．２５％までの試験濃度でＨＳＶ−２を直接不活化しない。

ラウリル硫酸ナトリウム ＳＬＳは、３０％から０．０２％までの濃度範囲でＨＳＶ−２を直接不活化し、 それより以下０．００２５％までの濃度でこのウィルスを部分的に不活化する。

０．０００３２％の濃度では不活化は起こらない。

抗ウイルス試験 抗ウィルス活性、すなわち化合物が細胞におけるウィルスの感染または複製を阻 害する能力を、１２Ｘ１００ｍｍ培養チューブ中でコンフルエントな単層となっ たＭＲＣ−５細胞に、保存培地を除去することによりＨＳＶ−２が細胞当り３． ０プラ一ク形成単位（ＰＦＵ）の感染多重度（ＭＯＩ）となるように感染させ、 単層をリン酸緩衝液（Ｐ　Ｂ　Ｓ）で３回洗浄し、ＰＢＳに懸濁したＨｓｖ−１ を０．１ｍｌ添加することによって測定した。

感染多重度は、生存している細胞数をデユープリケードのチューブについて計測 し、ストックウィルスを希釈して、１つのウィルス接種物を形成するように、計 測した細胞数の３倍のＰＦＵを含有する０、’１ｍｌの体積中に希釈することに よって計算した。６０分間の吸収期間後、接種物を除去し、保存培地中に適切な 濃度とした試験化合物、または保存培地（対照）を４ｍｌ添加した。このチュー ブを、３７℃で、さらに２３時間インキュベーションした。感染後２４時間目に 、培地を除去し、単層をＰＢＳて２回洗浄し、保存培地１ｍｌ中で凍結溶解を３ 回繰り返した。ウィルスの収率は、ＭＲＣ−５細胞が存在する９６穴の組織培養 プレート中における、一連のエンドポイントでの力価測定によって測定した。全 ての実験はトリプリケートで試験した。５０％エンドポイントを計算し、力価は ＴＣＩＤ５０の単位で表した。抗ウィルス作用は、同一実験中で力価を測定した ＨＳＶ−２ウイルスストツクのＴＣＩＤ５０値から、試験化合物のＴＣＩＤ５０ 値間の差を減じることによって決定し、百分率で計算した。

プロカインＨＣｌ ２％までの濃度のプロ力インＨＣＩは、ＨＳＶ−２の複製を阻害できなかった。

テトシカインＨＣＩ テトシカインＨＣＩは、０，２５％および０．５％でＨＳＶ−２の複製を部分的 に阻害した。より高濃度のテトシカインＨＣＩは、ＨＳＶ−２の複製を完全に阻 害するものと思われる。

ナイアシン ナイアシンはＨＳＶ−２の複製を阻害しない。

ラウリル硫酸ナトリウム ＳＬＳは、０．００２５％〜０．００１３％の濃度でウィルスの複製を阻害しな い。

要約すると、これらの結果は、０．０２％までの濃度範囲ではＳＬＳがＨＳＶ− ２の不活化剤として試験したものの中で最も活性の高い成分であり、テトシカイ ンＨＣ１は０．５％の濃度である程度の抗ウィルス活性を有するが、プロ力イン ＨＣ１は有さないことを示している。

高濃度では、ＳＬＳは病変部における感染細胞を落屑させ、食細胞および洗浄に より速やかな除去を引き起こし、結果として治癒を促進することによっても、作 用する可能性が有る。

例２ モ）Ｌ、モット生殖器への２型単純ヘルペスウイルスの初期感染に対する、組成 物の選択した成分のｉｎ　ｖｉｖ。

における有効性の評価 モルモット生殖器へのＨＳＶ−２初期感染における、いくつかの化合物の抗ウィ ルス活性を試験した。実験はプラセボ対照で行い、非感染の動物に各調製物を投 与して皮膚刺激を評価した。５％アシクロビル投与群を陽性対照として置いた。

材料および方法 モルモットの生殖器へのＨＳＶ−２感染ウイルスおよびウィルスの接種 ＨＳＶ−２のＭＳ株を用いて動物に感染させた。体重２５０〜３００　ｇの雌性 Ｈａｒｔｌｅｙ種モルモット、Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ　Ｂｒｅｅｄｉｎｇ 　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、キックストン、ＮＹ、に１．４Ｘ１０５プラ一ク 形成単位のＨＳＶ−２を、腟分泌物の除去のため綿棒で拭き取った１時間後に膣 内に接種した。

モルモットの治療 １０匹の感染したモルモットから成る群に対し、膣内に０．１ｍｌおよび外生殖 器皮膚上に０．１ｍｌを、Ｈ８ｖ接種６時間後または４８時間後から開始して毎 日３回、約８時間毎に７日間局所投与した。３匹の非感染の動物から成る群を用 いて、各調製物の毒性を評価した。

検体回収およびウィルスの測定 腟におけるウィルス複製に対する治療効果を検討するため、ＨＳＶ−２接種後１ ．３．５．７、および１０日目に腟分泌物を綿棒で拭き取り、培地２．０ｍｌの 入ったチューブに入れ、ポルテックス撹拌し、ＨＳＶ−２の力価を測定する時ま で一７０℃で凍結した。全ての検体を回収した時点で解凍し、連続的に希釈して 、ウサギ腎細胞においてマイクロタイターＣＰＥアッセイを用いてＨＳＶ−２力 価を測定した。平均ピークウィルス力価およびウイルス力価−日曲線下の面積を 計算し、解析した。

外生殖器病変部のスコア付は 外生殖器病変の発症と拡大に対する治療効果を検討するため、病変の重篤度を０ 〜５＋の等級で初期感染期間（２１日）を通じてスコア付けした。平均ピーク病 変部スコアおよび病変部スコアー日曲線下の面積を計算し、解析した。

有効性の評価 接種した動物数に対する感染した動物数、病変部スコアー日曲線およびウイルス 力価−日曲線下の面積、ピーク病変部スコアおよびピークウィルス力価を、未投 与動物とプラシーボ投与動物またはプラシーボ投与動物と薬物投与動物の間につ いて、Ｍａｎｎ−ＷｈｉｔｎｅｙＵ順位和検定を用いて比較した。０．０５以下 のｐ値を有意とみなした。

検体 ＩＡ　プロ力インを含有しない基本配合物２Ａ　プロ力インまたはＳＬＳを含有 しない基本配合物 ３Ａ　ＳＬＳを含有せず、１．８％プロカインを含有する、基本配合物 ３　１．３％ＳＬＳおよび１．８％プロ力インを含有する基本配合物 ５　プロ力インを含有せず、１．６％テトラシカンおよびＳＬＳを含有する基本 配合物 ６　プロ力インを含有せず、１．６％テトラシカン、インターフェロン（Ｓｃｈ ｅｒｉｎｇ　ＰＩｏｕｇｈ、２００，０００単位）、およびＳＬＳを含有する基 本配合物 本基本組成物はウィルスによる病変部の治癒を促進するための組成物の好ましい 態様として定義されているものであるが、ＳＬＳまたは麻酔薬を含有しない。ア シクロビル（Ａ　ＣＶ）は、陽性対照（すなわち、抗ウィルス活性を有するもの ）として用いた。プラシーボ（Ｐ　Ｂ　Ｓ）投与した動物を未投与の対照動物と 比較した。２Ａは、未投与動物およびプランーボ投与動物と比較した。

ＡＣＶ群は、プラセボ投与群と比較した。他の全ての群は、２Ａと比較した。

結果 初期刺激の検討を行うため、３匹のモルモットから成る群をそれぞれの検体また は対照を投与した。どのような皮膚刺激または生殖器に対する毒性についても、 目にみえる徴候は認められなかった。試験期間中を通じて動物は健常であり、ま た外見上正常であった。

ウィルスの複製に対する影響 Ｈ３Ｖ−２接種後、腟道におけるウィルスの複製は、３〜５日目でピークに達し た後、大部分の動物で徐々に低下し、１０日目止でにウィルスは消失する。ウィ ルス接種６時開目に投与したＡＣＶの５％のみにおいて、ウイルス力価−日曲線 下の面積（Ａ　Ｕ　Ｇ）または平均ピークウィルス力価が有意に減少した（ｐ値 はそれぞれ０゜０５および＜０．０１）。他の全ての処方は、いつ治療を開始し たかには関係なく、腟におけるウィルスの複製を変化させなかった。

病変の発症に対する影響 Ｈ３Ｖ−２接種後３〜４日に、小胞性の病変が外生殖器皮膚に現れ始める。病変 は７〜８日目までに潰瘍期に進行し、１５〜２１日目までに徐々に治癒する。＋ ６時間目にＰＢＳプラセボを投与した動物は、未投与対照群と比較した場合、病 変部スコアー日ＡＵＣ値が有意に上昇していた（ｐ値＜０．０５）。＋６時間に 投与を行った、配合物（２人）投与群に対する賦形剤対照では、未投与対照群と 比較した場合、病変部スコアー日ＡＵＣ値が有意に低下していた（Ｐ値＜０．０ ５）。＋６時間に投与を行った、配合物投与群に対する賦形剤対照群（２Ａ）で は、＋６時間プラシーボ群および未投与対照群と比較した場合、病変部スコアー 日ＡＵＣ値が有意に低下していた（Ｐ値はそれぞれ＜０．０５および０．００１ ）。しかし、接種後４８時間目に開始した２Ａでは、＋４８時間プラセポおよび 未投与対照群と比較した場合、病変部スコアー日ＡＵＧ値が有意に上昇していた （Ｐ値はそれぞれ＜０．０１および０．００１）。

Ｈ８Ｖ−２接種後６時間目に開始したｌＡ１５．６、または５％ＡＣＶによる治 療は、病変の発展を有意に減少させた（Ｐ値＜０．０５またはこれ未満）。ＡＣ ｖ５％は、平均ピーク病変部スコアも低下させた（Ｐ値く０．００１）。これら の配合による＋４８時間での投与は、病変の発症を阻害しなかった。病変部スコ アー日ＡＵＣ，および平均ピークスコアの増加が、ＩＡおよび５て認められた（ Ｐ値は０．０６以下）。

プラセボが４２，５の病変部スコアを示したことは注目すべき重要点である。検 体ｌＡ１３．５、および６は全て１．３％ＳＬＳを含有しており、スコアはそれ ぞれ１７．２．３１．７．１９．８、および１７．４であったが、一方検体２Ａ および３ＡはＳＬＳを含有しておらず、スコアはそれぞれ２７．８および２１． ０であった。

検体３および３Ａは、不規則なスコアを示し、配合または試験におけるエラーが 原因であると考えられた。しかしながら、処方中にＳＬＳが存在することにより 、このモデルにおける病変の経過の重篤度が軽減することは明らかである。

用いた動物モデルと、配合中の、特にＳＬＳを含有しない処方中の成分の溶解度 がばらついたことに起因して、本結果に大きい標準偏差が生じているにもかかわ らず、ＳＬＳを含有する検体の平均総スコアは１２であり、それに比較してＳＬ Ｓを含まない検体では２３であり、重篤度が４８％低下している。２４時間群で は平均スコアは、ＳＬＳ検体では１４、対照では１７．２であり、１９％改善し ているが、一方７２時間群では１０．５対２６という同程度のスコアにより、病 変の重篤度は６０％の減少となっている。

例３ Ｈ３Ｖ病変部の治癒促進における、ヒトでのインＯビボにおける有効性の証明 ６人の患者に関する症例報告データを、ＳＬＳおよびプロ力インを含有する検体 を用いるオープン試験において得た。治癒までの平均日数が、同一患者における 過去の平均である１０日から、６日にまで減少したということが示された。さら に、疾患の経過は良好に変化しているように思われた。感染のステージは、紅斑 （Ｅ　ｒ　ｙ） 丘疹（Ｐ　ａ　ｐ） 小胞（Ｙｅｓ） 浮腫（Ｅｄｅ） 面皮（Ｓ　ｃ　ａ） と定義される。

表１は、再発（初期ではない）病変部にクリームを毎日４回、局所に適用した臨 床試験の結果を示す。

第１表　臨床試験の結果 患者　（過去の）　感染日数　症状の 症状の平均　継続期間 継続期間　型　Ｅ＋７　Ｐａｐ　Ｙｅｓ　Ｅｄｅ　ＳＣ！　（日）１　１０　生 殖器　４００００　５ ２　１２　生殖器　５２２２１　６ ３　１０　口唇　５２０００　５ ４　１０　生殖器　４３０００　４ ５　１４　生殖器　６００００　７ ６　６　生殖器　８０２４３　８ 平均１０．３日　平均５．８日 ６人の患者のうち４人において丘疹の状態を越えて進行することが決してなかっ たこと、およびアシクロビルを全身投与していた、それまでの対照と比べて、治 癒までの平均日数が４４％減少したことは、注目すべき重要な点である。すべて の症例で病変に伴う痛みは軽減または消失した。

例４ ヒト患者における大規模試験 ３３人の被験者は、１５人をプラシーボ対照（プラシーボ）へ無作為に割り付け 、１８人の被験者を活性化合物（活性群）へ無作為に割り付け、１型単純ヘルペ スの感染に対し投与を行った。患者は、主として■型単純ヘルペスウィルスであ る口唇および顔面の部分におけるヘルペス病変部が存在することを特徴とした。

患者に対し、覚醒中は２時間毎に軟膏／クリームを、病変部を覆うのに十分な量 で、前駆期の４８時間以内から開始して面皮が落下するまで適用するように指示 した。この軟膏は、ユーカリ油、ステアリン酸、ラウラミドＤＥＡＳＰＣＭＸ１ 蜜蝋、メチルパラベンおよびホウ砂の水性基剤中に重量パーセントで、１．９％ のテトシカインおよび１．０％のラウリル硫酸ナトリウムを含んでいた。痛み、 掻痒、治癒および臨床有効性の、医師による評価尺度についてのデーターを、患 者が認識した治療有用性の評価と共に第２表に示す。

第２表　治療群毎の、個々の評価尺度と、面皮形成および面皮消失までの日数に ついての平均値、標準誤差および試料数 プラシーボ群　活性群 評価尺度　平均±Ｓ、Ｅ、（ｎ）　平均±Ｓ、Ｅ、（ｎ）痛み　６．１±０．９ ５　（１４）　７．４±０．６４　（１８１掻痒感　５．５±０．９９　（１３ ）　７．６±０．６３　（１８１治癒　５．４±１．０１　（１４）　６．２± ０．７９　（１８１有効性　５．９±０．９２　（１４１６，９±０．７１　（ １８１有用性　４．５±０．８３　（＋５）　６．５±０．７８　（＋８１癲皮 形成（日数）２，４±０．３４　（１４）　２．８±０．３５　（１８）面皮消 失（日数）７．１±０．６６　（１４１５，９±０．２９　（１８）第２表から 判るように、活性群は総ての尺度で評価が優れていた。片側（プラシーボ群より 活性群の法が良好）Ｗｉ　ｌｃｏ！ｏｎ順位和検定により、認識された有用性は 統計上有意なものであったが（ｐ＝、０４３）、掻痒感の評価はわずかなところ で有意ではなかった（ｐ＝、０５５）。

面皮消失までの期間の分布のＫｘｐｌａｎ−Ｍｅｉｅ＋分析を行った。

対数−順位検定（ｐ＝、０４９）によると、２つの曲線は有意に異なり、活性群 の方が期間が短かった。

予備的統計解析の臨床的な意味は直接的なものである。

１、主要な主観的変数（ｆＭ皮落下までの期間）は、７．１から５．９日に減少 した。これは、治癒期間が約１８％短縮したことであり、統計上有意である（ｐ ＝、０４９）。

２、検討者による客観的な評価から、掻痒感については有意性の境界にあり、他 の各変数（痛み、治癒、総合的な有効性）については正の傾向があることが示さ れて０る。検討者の見解は、患者の意見およびヘルペス感染の局所投与に対する 検討者自身の否定的偏見をある程度反映していることを考慮すべきである。

３、患者による有用性についての見解は統計上有意なものであり（１）＝、０４ ３）、重要な知見を示している。

４、ノンレスポンダ−に関して疑問が生じていた。投薬に対して好ましいと評価 するプラシーボ投与患者、および好ましくないと評価する活性投与患者という２ 種類のノンレスポンダーが存在する。任意の疾患のためのどの様な臨床試験でも 、反応のばらつきは個々の相違における人間生物学でのばらつきによって説明さ れる自然現象である。いかなる試験にも、常にノンレスポンダ−が存在する。実 際、ノンレスポンダーが存在しないならば、その試験は大いに疑わしい。主観的 評価が用いられる場合、直接的な信頼できる測定ではないので、このことは一層 明白である。

しかしながら、要約すると、ＳＬＳおよびテトシカインを含有する組成物は、試 料数が小さいにも拘らず重要な測定値に関しては統計上の有意性のある、−律に 良好な結果を示していると考えられる。

本発明の組成物および方法の改質および変更は、当業者であれば明白なものであ ろう。これらの改質および変更は、記載した請求の範囲内に含まれるものである 。

補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）甲・ 平成　５　年　１２月　２０日

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．ウイルスの病変部の症状を減少させるための局所用組成物であって、感染に よって生じる病変の治癒の時間を短縮するため活性薬剤として麻酔薬と界面活性 剤との併用物を含む薬学上許容可能な局所用担体の有効量を含んでなる、局所用 組成物。 ２．麻酔薬が、テトラカイン、ジブカイン、ジクロニン、ベンゾカイン、リドカ イン、プラモキシン、プロパラカイン、プロカイン、トリニトロフェノール＝２ −ブチル−ｐ−アミノベンゾエート、クロロプロカイン、ブピバカイン、エチド カイン、メピバカインおよびプリロカインからなる群から選択される、請求の範 囲第１項に記載の組成物。 ３．局所用麻酔薬が、約０．１〜２０重量％の濃度でのテトラカインおよびプロ カインからなる群から選択される、請求の範囲第２項に記載の組成物。 ４．界面活性剤が、陰イオン性、陽イオン性および非イオン性界面活性剤からな る群から選択される、請求の範囲第１項に記載の組成物。 ５．陰イオン性界面活性剤が、ラウリル硫酸ナトリウム、アルキルアリールスル ホン酸ナトリウムおよびアルキルスルホネートからなる群から選択される、請求 の範囲第４項に記載の組成物。 ６．陽イオン性界面活性剤が第四級アンモニウム塩である、請求の範囲第４項に 記載の組成物。 ７．非イオン性界面活性剤がアルキル化ポリオキシエチレン、アルキル化ポリオ キシエチレンーポリオキシプロピレン共重合体およびノンオキシノールから成る 群から選択される、請求の範囲第４項に記載の組成物。 ８．麻酔薬が約０．２〜２重量％の濃度のテトラカインであり、界面活性剤が約 ０．５〜５重量％の濃度のラウリル硫酸ナトリウムである、請求の範囲第１項に 記載の組成物。 ９．麻酔薬と界面活性剤の有効な併用物以外の抗生物質、抗真菌剤および抗ウイ ルス剤からなる群から選択される化合物を更に含む、請求の範囲第１項に記載の 組成物。 １０．緩衝剤、酸化防止剤、保存剤、着色剤、芳香剤、潤滑剤、湿潤剤、遮光剤 または乾燥剤からなる群から選択される化合物を更に含む、請求の範囲第１項に 記載の組成物。 １１．担体が、ステアリン酸、ラウラミドＤＥＡ、ラウリル硫酸ナトリウム、ホ ウ砂、テトラカイン、ユーカリ油、蜜蝋、保存剤およびメチルパラベンを含んで なる、請求の範囲第１項に記載の組成物。 １２．ウイルス病変の症状を減少させる方法であって、感染によって生じる病変 の治癒の時間を短縮するため、薬学上許容可能な局所投与用担体中の麻酔薬と界 面活性剤との併用物の有効量を目的の部分に局所的に投与することから成る、方 法。 １３．麻酔薬が、テトラカイン、ジブカイン、ジクロニン、ベンゾカイン、リド カイン、プラモキシン、プロパラカイン、プロカイン、トリニトロフェノール＝ ２−ブチル−ｐ−アミノベンゾエート、クロロプロカイン、ブピバカイン、エチ ドカイン、メピバカインおよびプリロカインからなる群から選択される、請求の 範囲第１２項に記載の方法。 １４．界面活性剤が陰イオン性、陽イオン性および非イオン性界面活性剤からな る群から選択される、請求の範囲第１２項に記載の方法。 １５．陰イオン性界面活性剤が、ラウリル硫酸ナトリウム、アルキルアリールス ルホン酸ナトリウムおよびアルキルスルホネートからなる群から選択される、請 求の範囲第１４項に記載の方法。 １６．局所麻酔薬が約０．２〜２重量％の濃度のテトラカインであり、界面活性 剤が約０．５〜５重量％の濃度のラウリル硫酸ナトリウムである、請求の範囲第 １４項に記載の方法。 １７．麻酔薬と界面活性剤の併用物と共に、麻酔薬と界面活性剤以外の、抗生物 質、抗真菌剤および抗ウイルス剤からなる群から選択される化合物を投与するこ とを更に含む、請求の範囲第１２項に記載の方法。 １８．組成物を、病変部に毎日１〜６回局所に適用する、請求の範囲第１２項に 記載の方法。 １９．組成物をＩ型またはＩＩ型単純ヘルペスウイルスに感染した病変部に適用 する、請求の範囲第１２項に記載の方法。 ２０．組成物が、緩衝剤、酸化防止剤、保存剤、着色剤、芳香剤、潤滑剤、湿潤 剤、遮光剤または乾燥剤からなる群から選択される化合物を更に含む、請求の範 囲第１２項に記載の方法。