JPH07505781A - 抗菌的に活性な化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 抗菌的に活性な化合物 産業上の利用分野 本発明は抗菌的に活性な化合物およびその誘導体、並びにこのような化合物を製 造するための方法および微生物に関する。さらに本発明は、単独であるいは他の 生物致死剤または成長調節剤と組み合わせてこれらの化合物を含有する抗菌性組 成物に、並びに菌類を制御するための本発明の化合物または組成物の使用に関す る。

発明の背景 種々の微生物が生物学的活性を示す二次代謝物質を生成し、そしてこれらが疾病 および害虫を制御するための生物致死剤として有用され得ることは多年に亘って 公知である。

農学的重要性を有する植物および動物における種々の疾病および害虫を制御する ための生物学的抗菌剤を同定し、開発する分野で進歩が認められたが、しかし使 用中のほとんどの殺虫剤が依然として現実に分解するのが難しく、且つ広域スペ クトル活性を有する合成化合物である。

この千年間に、農地を取り巻く環境および生態系に及ぼすこのような殺虫剤の影 響力に体する関心が増大し、その結果としてその活性がより特異的で、そして自 然環境中で容易に分解可能な生物致死剤が必要なことは疑う余地がない。

天然物は、別の作用様式を有し、さらに生物分解性で且つ環境により安全である 合成抗菌剤の代替物を提供し得る。

したがって本発明の目的は、天然供給源から生じる新規の抗菌的に活性な化合物 例えば微生物二次代謝物質、またはこのような化合物の直接誘導体を同定するこ とである。

米国特許第５．００８．１８７号およびＣｈａｉｅｔ等（Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａ ｌ　ｏｆＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　４２　１７１８−１７２１．１９８９）は、 ＭＦ　５０００（ＡＴＣＣＮ　ｏ　、　２０８８３　）と呼ばれるフザリウム（ Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属に属する微生物の発酵によって得られる抗菌剤として下記 の式ｉｂの二次代謝物質を記載する。

本発明は上記の米国特許第５．００８．１８７号に記載の化合物に密接に関連し た化合物および菌類を制御するための農業におけるそれらの使用に関する。

発明の要約 手短に言えば、本発明は次式Ｉ： （式中＋Ｒ’は水素、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル、 例えばメチル、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖ヒドロキシアルキ ル、例えばＣＨ，ＯＨ，１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル エーテル、または所望により置換された芳香族エーテルであり；各々のＲ″は独 立に水素、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル、例えばメチ ル、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖ヒドロキシアルキル、例えば ＣＨ，ＯＨ，１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルエーテル、 または所望により置換された芳香族エーテルであり；および各Ｒ２は独立に水素 、ヒドロキシ、メトキシ。

アセトキシ、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルエーテル、 または所望により置換された芳香族エーテルであり；そしてキラール中心ａ、ｂ 、ｃ、　ｄ、ｅ、ｆ、およびｇは各々独立にＲまたはＳ配置を有することができ る）の化合物（但しＲ１が−ＣＨ，−ＯＨであり、すべてのＲｆが−ＣＨ，であ り、そしてすべてのＲ３が−ＯＨである（弐１ｂ）化合物を除＜）；またはそれ らの農学的に許容され得る塩またはそれらのエステルに関する。

式■（式中、Ｒ２がすべて−ＣＨ，であり、Ｒ３がすべて−ＯＨであり、Ｒ１が ＣＨ，である（式Ｉａ）かまたは−ＣＨ，−０Ｈ（弐１ｂ）である）の化合物は 、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属に属する微生物、特にフザリウム　パリド ロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）種、特にフザリウム 　パリドロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）種、特にＣ Ｌ５３４−１（ＩＭＩ　ＣＣＮｏ、　３５１４３９）と呼ばれる株に属する微生 物からの二次代謝物質として得られる。

上記化合物は、抗菌活性を示し、菌類に対する植物の保護のための農業的、園芸 的に抗菌性の化合物として用い得る。

本発明の第二の態様によれば、式１ａ及び式１ｂの化合物は、フザリウム（Ｆｕ ｓａｒｉｕｏ＋）属に属する微生物、特にフザリウム　パリドロセウム（Ｆｕｓ ａｒｉｕｍ　ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）種、特にフザリウム　パリドロセウ ム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）　（ＩＭＩ　ＣＣＮｏ、 　３５１４３９）と呼ばれる株に属する微生物を培養し、次いで生物塊から活性 化合物を回収することにより得られる。これらの単離化合物をその後化学的に処 理して、上記の誘導体を生成する。

本発明の化合物の別の生成方法は、適切な出発物質からの伝統的化学合成による ものである。

本発明の第三の態様では、本発明は希釈剤、キャリアー等のような好適な賦形剤 と組み合わせて本発明の新規の化合物を含有する抗菌性組成物に関する。

本発明はさらに抗菌性組成物として本発明の化合物を産生ずる微生物の使用に関 する。

本発明の情況内では、本発明はさらに新規の組合せ組成物を生成するために本発 明の新規の化合物を公知の生物致死剤または植物成長調節剤と組み合わせるよう 意図される。

さらに本発明は第四の態様において、感染領域への本発明の新規の化合物を含有 する組成物の適用による植物疾患を制御する方法に関する。

第五の態様においては、本発明は植物疾患、特に菌類の攻撃を撲滅するまたは制 御するための本発明の新規の化合物または組成物の使用に関する。

最後に本発明は微生物フザリウム　パリドロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍｐａｌｌ ｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）（ＩＭＩ　ＣＣＮｏ、　３５１４３９）の単離された純粋 培養物に関する。

微生物の寄託 本発明を詳細に記載するために、菌類フザリウム　パリドロセウム（Ｆｕｓａｒ ｉｕｍ　ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）　（ＩＭＩ　ＣＣＮｏ、　３５１４３９ ）の株を下記の日付けでの特許手続きのためにインタナショナル　マイクロジカ ルインスティチュート　カルチャー　コレツクジョン（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎ ａｌＭｙｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ ｅｃｔｉｏｎ）　（ＩＭＩ　ＣＣ）、フェリーレーン、キュー、サーリーＴＷ９ ３ＡＦ、英国に寄託した。ブダペスト条約下の国際寄託当局であるＩＭＩ　ＣＣ は、上記条約の規定第９規則に従って寄託を履行する。

寄託年月日：　１９９２年２月１８日 寄託者の照会：　ＣＬ５３４〜Ｉ ＩＭＩ　ＣＣ呼称：　ＩＭＩ　ＣＣＮｏ、　３５１４３９１ＭＴ　ＣＣＮｏ、　 ３５１４３９は、ジュテロマイセテス発明の詳細な説明 上記のように、本発明は第一の態様において次式■・（式中、Ｒ１は水素、１〜 ６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル、例えばメチル、１〜６個の 炭素原子を有する直鎖または分枝鎖ヒドロキシアルキル、例えばＣＨ，ＯＨ，１ 〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルエーテル、または所望によ り置換された芳香族エーテルであり；各々のＲ２は独立に水素、１〜６個の炭素 原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル、例えばメチル、１〜６個の炭素原子を 有する直鎖または分枝鎖ヒドロキシアルキル、例えばＣＨ，ＯＨ，１〜６個の炭 素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルエーテル、または所望により置換され た芳香族エーテルであり：および各Ｒ２は独立に水素、ヒドロキシ、メトキシ。

アセトキシ、１〜６個の炭素原子を育する直鎖または分枝鎖アルキルエーテル、 または所望により置換された芳香族エーテルであり：そしてキラール中心ａ、　 ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、およびｇは各々独立にＲまたはＳ配置を有することができ る）の新規の化合物（但しＲ１が−ＣＨ，−ＯＨであり、すべてのＲ２が−ＣＨ ，であり、そしてすべてのＲ２が一〇Ｈである（式Ｉｂ）化合物を除り）；また はそれらの農学的に許容され得る塩またはそれらのエステルに関する。

式Ｉ（式中、Ｒ１がすべて−ＣＨ，であり、Ｒ３がすべて−ＯＨであり、Ｒ１が ＣＨ，である（式Ｉａ）かまたは−ＣＨ，−０Ｈ（弐ｒｂ）である）の化合物を 、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）　ｒｌの株フザリウム　パリドロセウム（Ｆ ｕｓａｒｉｕｍ　ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）　（ＩＭＩ　ＣＣＮｏ。

３５１４３９）からの代謝物質として単離した。

第二の態様によれば、本発明は組成物Ｉの新規の化合物の製造方法に関する。

１式の化合物は、後述の条件下で適切な栄養培地上でフザリウム（Ｆｕｓａｒｉ ｕｍ）属、特にフザリウム　パリドロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍｐａｌｌｉｄｏ ｒｏｓｅｕｍ）　（ＩＭＩ　ＣＣＮｏ、　３５１４３９）に属する菌類の株を用 いて好気性培養し、次いでバイオマスおよび／または発酵培地から活性成分を回 収することにより調製し得る。

その種々の誘導体を得るために、天然代謝物質を引き続き化学的に又は生物形質 転換により修飾し得る。誘導体は代謝物質のある特性、例えば水性媒質中でのそ の溶解性、その疎水性、親水性、安定性、特異性等を改良するために生成し得る 。

本発明の化合物を入手可能な出発物質を用いて十分公知の化学合成により生成す るということも意図される。

本発明の化合物は、抗菌活性を示すことが知られており、それらはその結果抗菌 性組成物中の活性成分として有用である。

したがって本発明は活性成分として式■の化合物を含有する抗菌性組成物を包含 する。本発明は、単独でまたは任意の抗菌性組成物中の活性成分としての本発明 の任意の他の化合物または任意の他の生物致死的活性剤または植物成長調節剤と 組み合わせて用いる本発明の任意の化合物の使用を意図する。

その活性成分として本発明の抗菌的に活性な化合物を有する本発明の抗菌性組成 物は農学的および／又は園芸的適用のために、活性成分を好適な不活性および相 溶性キャリアーまたは希釈剤と混合することにより処方して、農学的組成物中に 一般に用いられる種類の組成物、例えば水和剤、乳剤、濃縮乳濁液、粒状処方物 、水溶性粉末、アルギン酸塩、キサンタンガムおよび／またはエアゾールを得る 。固体キャリアーとしては、ベントナイト、珪藻土、燐灰石、石膏、タルク、パ イロフィライト、バーミキュライト、砕穀および粘土等が挙げられる。均質且つ 安定な製剤を生成するために、界面活性剤を加えてもよい。

本発明の組成物中の希釈剤またはキャリアーは、所望により界面活性剤に連携し て上記のように固体または液体であることができ、その例としては例えば分散剤 、乳化剤または湿潤剤が挙げられる。

適当な界面活性剤には、陰イオン性化合物、例えばカルボン酸塩、例えば長鎖脂 肪酸の金属カルボン酸塩；Ｎ−アシルサルコシネート；リン酸と脂肪アルコール エトキシレートとのモノ−またはジ−エステルまたはこのようなエステルの塩： 脂肪アルコール硫酸塩、例えばＦデシル硫酸ナトリウム、オクタデシル硫酸ナト リウムまたはセチル硫酸ナトリウム：エトキシル化脂肪アルコールスルフェート ；エトキシル化アルキルフェノールスルフェート：リグニンスルホン酸塩：石油 スルホネート；アルキルアリールスルホネート、例えばアルキル−ベンゼンスル ホネートまたは低級アルキルナフタレンスルホネート、例えばブチル−ナフタレ ンスルホネート：スルホン化ナフタレン−ホルムアミド縮合物の塩；スルホン化 フェノール−ホルムアミド縮合物の塩；あるいはより複雑なスルホネート、例え ばアミドスルホネート、例えばオレイン酸とＮ−メチルタウリンとのスルホン化 縮合生成物、またはジアルキルスルホスクシネート、例えばジオクチルスクシネ ートのナトリウムスルホネートが挙げられる。非イオン性剤としては、脂肪酸エ ステル、脂肪アルコール、脂肪酸アミドあるいは脂肪−アルキルーまたはアルケ ニル−置換フェノールとエチレンオキシドとの縮合生成物、多価アルコールエー テルの脂肪エステル、例えばソルビタン脂肪酸エステル、このようなエステルの エチレンオキシドとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸 エステル、エチレンオキシドとプロピレンオキシドとのブロックコポリマー、ア セチレングリコール、例えば２、　４．　７．　９−テトラエチル−５−デシン −４，７−ジオール、またはエトキシル化アセチレングリコールが挙げられる。

陽イオン性界面活性剤の例としては、例えば脂肪族モノ−ジー又はポリアミン、 例えばアセテート、ナフチネートまたはオレエート；酸素含有アミン、例えばア ミンオキシドまたはポリオキシエチレンアルキルアミン；カルボン酸とジーまた はポリアミンとの縮合により調製されるアミド結合アミン；あるいは第四アンモ ニウム塩が挙げられる。

本発明の組成物は農薬の製剤化のために当業界で公知のいかなる形態、例えば溶 液、分散液、水性乳濁液、散布剤、種子仕上げ剤、分散性粉末、乳剤または顆粒 の形態を採ることができる。さらに、本発明の組成物は直接施用するのに適した 形態であり得るし、あるいは施用前に適量の水または他の希釈剤で希釈する必要 がある濃縮物または一次組成物として適した形態であってもよい。

乳剤は、乳化剤の存在下で水を用いて乳濁中に生成される水混和性溶媒中に溶解 される活性成分を含んでなる。

散布剤は、固体粉末希釈剤、例えばカオリンと一緒に直接的に混合及び粉砕され る活性成分を含んでなる。

粒状固体は、散布剤に用い得るものと同様の希釈剤と会合され得る活性成分を含 んでなるが、しかし混合物は公知の方法により粒状化される。あるいは粒状固体 は前粒状希釈剤、例えばフラー土、アタパルジャイトまたは石灰石粗粒子上に吸 収または吸着される活性成分を含んでなる。

水和剤、顆粒または粗粒は通常、適切な界面活性剤及び不活性粉末希釈剤、例え ば白土との混和物中に活性成分を含んでなる。

別の適切な濃縮物は、活性成分を水または他の液体、湿潤剤および懸濁剤と一緒 に粉砕することにより生成される流動性懸濁濃縮物である。

菌類が制御されるべき作物、環境条件または他の因子といったような情況によっ て、本発明の上記の抗菌的に活性な化合物に加えて本発明の組成物は他の活性成 分、例えば他の生物致死剤、例えば抗菌剤、殺虫剤、除草剤、殺昆虫剤、線虫駆 除剤、ダニ駆除剤あるいは植物栄養剤または肥料を含有してもよい。

本発明の活性化合物と組み合わせ得る他の抗菌剤の例としては、特にエルゴステ ロール生合成阻害剤（”ＥＢＩｓ”）が挙げられる。

これらは一般にイミダゾールまたはトリアゾール誘導体であって、その例として は普通名プロクロラズ、トリアジメツすン、プロピコナゾール、ジクロブトラゾ ール、トリアシミノール、フルシラゾール、フルトリアフォル、ミクロフ゛タニ ル、ペンコナ゛ブール、キンコナゾール、イマザリルおよびジニコナゾールか挙 げられる。非アゾールＥＢＩｓの例としては、ヌアリモル、フェナリモル、フェ ンプロピモルフ、トリデモルフおよびフェンプロピジンか挙げられる。

本発明の抗菌剤製剤ど組み合わせ得る他の抗菌剤としては、アニリド、例えばカ ルボキシン、マタラキシル、フララキシル、オフラス、ベナラキシル、メブロニ ル、フルトラニル、ベンジクロンおよびオキサジギシル；ベンズイミダゾール、 例えばベノミルおよびカルペンダジン；カルバメート、例えばマネブ、マンコゼ ブおよびプロパモカルブ：ジカルポキシミド、例えばイプロジオン、ビンクロプ リンおよびプロシミドン：燐誘導体、例えばビラシフオス、ドルクロフォス−メ チルおよびフォセチルアルミニウム；並びにその他の化合物、例えばジチオカル バメート、ビスジチオカルバメート、イミダゾール、トリアゾール、ファタロニ トリル、ポリハロゲンアルキルチオ化合物、イミノフタジン、グアザチン、ジク ロラン、クロロタロニル、ピリフェキソクス、エチリモル、シモキサニルおよび アニシジンが挙げられる。

その第四の態様において、本発明は、有効量の本発明の抗菌的に活性な化合物を 処置すべき、領域に施用する植物上の菌類の撲滅方法に関する。

この態様に関連して、本発明の組成物は農業的又は園芸的使用のために前発芽処 理として土壌に直接にまたは出芽前および／または出芽後処理として植物の葉ま たは果実に施用し得る。作物および環境によって、種子または果実が菌類を制御 すべき植物に出現するまで処理を延期し得る。

本発明の活性製剤または組成物は、例えば菌類が植物上に現れ始めた時点でまた は菌類の出現前に保護手段として噴霧または散布することにより植物に直接施用 し得る。このような場合はいずれも、好ましい施用方式は葉に噴霧することであ る。植物が最もひどく損傷される可能性のある時期であるので、植物成長の初期 段階で菌類の良好な制御を得ることが一般的に重要である。必要であると考えら れる場合には、噴霧または散布は出芽前または出芽後除草剤を含有すると便利で ある。

本発明の組成物中の本明細書に記載の本発明の活性化合物の濃度は、塑形の種類 および施用領域によって広範囲で変化し得る。

単独でまたは慣用的抗菌剤と組み合わせて用いる場合の本発明の組成物中の本発 明の抗菌的に活性な化合物の濃度は、植物に適用される場合、好ましくは約０． ００１〜約３０重量％、特に０．Ｏ１〜３．０重量％の範囲内である。

一次組成物または濃縮物中では、活性化合物の量は広範に変化し、例えば組成物 の約５〜約９５重量％の範囲であり得る。

本発明の混合組成物中の抗菌的に活性な成分の濃度は、植物に適用する場合は、 好ましくは０．００１〜５０重量％、特に０．０１〜１０重量％の範囲内である 。−次組成物中では、他の活性成分の量は広範に変えることができて、例えば組 成物の５〜８０重量％であり得る。

時としては、例えば好適な液体または固体組成物中に根を浸すことにより、植付 は前または植付は中に植物の根を処理することが実用的である。本発明の活性製 剤を植物に直接適用する場合、好適適用率は、０．００１〜５０ｋｇ／ヘクター ル、好ましくは０．０５〜５　ｋｇ／ヘクタールである。

本発明の方法では、単独でまたは慣用的生物致死剤と組み合わせる本発明の活性 製剤は種子または他の生息環境に施用してもよい。

したがって種子の筋撒き前、最中または後に土壌中の活性成分の存在か種子を攻 撃する恐れのある菌類の増殖を制御し得るように土壌に直接製剤を適用し得る。

組成物は、１ヘクタール当たり約１ｇ〜約５０ｋｇの抗菌的に活性な化合物に相 応する量で施用し得る。

土壌を直接処理する場合、単独または慣用的生物致死剤との混合物中の活性製剤 は、土壌と密に混ぜ合わせ得るいかなる方法、例えば噴霧することによる、固体 形態の顆粒を散布することによる、または種子と同じ畝に挿入することにより筋 撒き時点で活性成分を適用することにより施用され得る。好適な施用率は、０． ０１〜５０ｋｇ／ヘクタール、さらに好ましくは０．０５〜５　ｋｇ／ヘクター ルである。

植物における菌類の制御に関連して本発明を詳細に記載してきたが、しかし本発 明の抗菌的に活性な化合物はヒトを含めた哺乳類における菌類の撲滅または制御 にも用い得ると考えられる；そして木材保存および／または含浸用組成物に上記 の化合物を加えることにより木材の保存にも用い得る。さらに、本発明の活性化 合物はペイント中の抗菌剤及び防腐剤−ともに貯蔵中のペイント中の増殖を、そ して家の漆喰処理した表面のようなペイント処理物上での増殖を防止するため− としても存用である。

菌株の説明 菌類の分類および形態 本菌類は、Ｂｕｒｇｅｓｓ、　Ｗ、　＆　Ｌｉｄｄｅｌｌ　Ｃ，Ｍ、　（１９８ ３）、　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙｍａｎｕａｌ　ｆｏｒ　Ｆｕｓａｒｉ＋ｎｎ　ｒ ｅｓｅａｒｃｈ：　Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　ａ　ｋｅｙ　ａｎｄｄｅｓｃ ｒｉｐｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｃｏｍｍｏｎ　５ｐｅｃｉｅｓ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　 Ａｕ５ｔｒａｌｉａ　、　ＴｈｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　５ｙｄｎｅｙ、 　５ｙｄｎｅｙ、（ＩＳＢＮ　０−９０９７９８−３９−７）、　Ｂｏｏｔｈ、 　Ｃ。

（１９７１）、　Ｔｈｅ　ｇｅｎｕｓ　Ｆｕｓａｒｕｍ、　Ｃｏ＋＋＋ｍｏｎｗ ｅａｌｔｈ　Ｍｙｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅB Ｋｅｗ　５ｕｒｒｅｙ、　Ｅｎｇｌａｎｄ、　ａｎｄ　Ｂｏｏｔｈ、　Ｃ，＆　 Ｂ、Ｃ，５ｕｔｔｏｎ、　１９８４．　Ｆｕｓａｒｕｉｍｐａｌｌｉｄｏｒｏｓ ｅｕｍ、　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｃｔ　ｎａｍｅ　ｆｏｒ　Ｆ、ｓｅｍｉｔｅｃｔ ｕｍ　Ａｕｃｔ、　Ｔｒａｎｓ。

Ｂｒ、　Ｍｙｃｏｌ、　Ｓｏｃ、８３（４）ニア０２−７０４　を用いてフザリ ウム　パリドロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）　（ Ｃｏｏｋｅ）　５ａｃｃ、（ｓｙｎ、　Ｆ、ｓｅｍｉｔｅｃｔｕｍＢｅｒｋ、　 ＆　Ｒａｖ）と同定される。

本菌類はジュテロマイセテス（Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、モニリアレ ス（Ｍｏｎｉｌｉａｌｅｓ）目に属する。

ポテト　スクロース（Ｐｏｔａｔｏ　５ｕｃｒｏｓｅ）寒天上の好気性菌糸体は 、むら毛状で白色から桃色、はしばみ色を経て淡黄褐色に漸次変化する。分生胞 子は一次および二次の２種類に分けられる。−次分生胞子は二次のものよりやや 短い。それらは楔形足細胞を育し、透明で、θ〜５の隔膜を有し、７．５〜３５ ｘ２．５〜４μｍである。これらの−次分生胞子は、各細胞から生成される６個 までの別々の胞子を有する多胚芽性仮軸的増殖細胞から全削性分生胞子として形 成される。

二次分生胞子は、簡単な小便から形成される。これらの分生胞子は典型的踵付足 細胞を有する（さらなる詳細に関してはＢｏｏｔｈ　ａｎｄＳｕｔｔｏｎ、　１ ９８４参照）。

菌株の培養 菌株の培養は、ジャガイモデキストロース寒天（Ｄｉｆｃｏ　）斜面培養基（１ ２ｍｌ／培養基）上で増殖させ、１２１°Ｃで４０分間オートクレーブ処理し、 次いでしかる後、ＰＤ寒天と呼ばれるであろう。接種後、それを２０〜２５°Ｃ で２日以上インキュベートすることができる。

抗菌剤製造 菌糸体および胞子から成る室温で７日間ＰＤ寒天上で増殖させた傾斜培養を、０ ．１％ツイーン（Ｔｗｅｅｎ）（登録商標）８０を含有する滅菌水１０ｍ１と混 合し、水道水を用いてイースト−エクストラクトースクロース（Ｙｅａｓｔ−Ｅ ｘｔｒａｃｔ−Ｓｕｃｒｏｓｅ）培地　１００　ｍｌを含入した５００　ｍｌの 三角フラスコ中に接種した（２％酵母菌抽出物（Ｄｉｆｃｏ　）　；　１５％シ ュクロース；　１０ｐｐｍ　ＺｎＳＯ４−７Ｈｚ　Ｏ；　５　ｐｐｍ　ＣｕＳＯ ｓ　”５ＨｔＯおよび０．３％寒天（Ｄｉｒｃｏ　）　）。ｐＨは基質を１２１ 　”Ｃで４０分間オートクレーブ処理する前に６．４に調整した。接種後、フラ スコを２６℃に１３日間放置した。

本菌類は、十分公知の手順に従って表面培養で産生ずることもできる。

発酵は、また微生物が同化し得る炭素および窒素の他の供給源並びに一般に低レ ベルの無機塩を含有する培地で実施することもできる。さらに、培地に微量金属 を補充し得るが、しかし炭素および窒素の複合供給源を用いる場合にはそれらは 通常複合供給源中に存在する。

化合物の抽出 メタノール　１００　ｍｌを各フラスコに加えた後、フラスコを１８℃で３時間 振盪（２００ｒｐｍ　）　シた。２０．０００　ｒｐｍで１０分間遠心分離して 、抗菌剤を含有するメタノール上清みを菌糸体から分離した。その後菌糸体を含 有するベレットを捨て、抗菌活性に関して上清みを分析した。

本発明の化合物は、短鎖アルコール、アセトン、ＤＭＳＯ１酢酸エチル等を用い るといったような当業界で公知の他のあらゆる慣用的抽出法によりバイオマスお よび／または増殖培地から抽出することもできる。濃縮抽出物は疎水性樹脂に吸 着させて精製し得る。使用する樹脂は、非イオン性の、特に架橋スチレン／ジビ ニル−ベンゼン−コポリマーおよびハロゲン化スチレン／ジビニル−ベンゼン− コポリマーである。一般的に用いられる吸着樹脂は、ＸＡＤ−８（ローム　アン ド　ハース社）である。２つの成分の混合物は、この樹脂を水に溶解した低級ア ルコール／アセトン、好ましくはメタノールまたはエタノールの濃度を漸増して 溶離することにより９０％以上の純度で得ることができる。２成分の粗製混合物 は、これらの分画の組合せ及び濃縮により得ることができる。所望により、酸性 移動相を用いた公知の逆相クロマトグラフィーにより本化合物をさらに精製して 、２つの精製化合物を精製し得る。

簡便にするために、単離した本化合物（式１ａ）を以後ＢＫ２１９と呼ぶ。

単離化合物の特性表示 発酵および抽出 ＰＤ寒天上で増殖させた菌株の傾斜培養物を上記のように酵母菌抽出物−スクロ ース培地中に接種し、発酵させて、抽出した。

単離／精製 上清み１１１５ｍｌを減圧下で２５０　ｍｌに濃縮した。濃縮抽出物をアンバー ライト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ）　ＸＡＤ−８（ｃ？−ム　アンド　ハース）の２ ００　ｍｌカラムに適用し、これを水性エタノールの段階勾配（０％、３０％、 ５０％、７０％および１００％各々２００　ａｌｌ）で溶離した。ボトリチス　 シネネア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｎｅａ）を用いた円板拡散検定により全 分画の活性をモニタリングした。生物学的活性は、３０〜５０％エタノールで溶 離する淡黄色分画中に見出され、溶媒を蒸発させて黄色油７８０　ｍｇを得た。

化合物１ａ及び化合物１ｂのさらなる精製および分離を逆相ＨＰＬＣ［ブーチ（ Ｂｉｉｃｈｉ）カラム　２６　ｘ　２３０ｍｍ、リクロブレブ（ＬｉＣｈｒｏｐ ｒｅｐ）　（登録商標）　Ｃ１０，１５〜２５μｍ　；　６０％ＣＨ，，ＣＮで 開始し、６０分後に１０００％ＣＨ２，ＣＮで終了する％蟻酸で緩衝したｃＨｓ 　ＣＮ／Ｈ，Ｏの直線勾配、流量ｘｏｍｌ／分、検出　λ＝２２５　ｎｍ］によ り実施して、４４９　ｍｇの化合物Ｉｂ　（Ｒｔ　＝３３分）および２５１ｍｇ の化合物１　ａ　（Ｒｔ　＝５０分）をともに無色ガラスとして得た。

分析的ＨＰＬＣ法： カラム、メルク　リクロソープ（Ｍｅｒｋ　ＬｉｃｈｒｏＳｏｒｂ）　（登録商 標）ＲＰ−１８４，６ｍｍｘ２５０ｍｍ 流量　：　１．５　ｍｌ／分 溶離剤：水に溶解した８０％アセトニトリル＋０．０５％ＴＦＡ検出　、　ＴＪ 　Ｖ、　２２５　ｎｍおよび２４０　ｎｍ保持時間＝５分　化合物１ａ ２分　化合物ｒｂ 式１ａで示される新規の化合物ＢＫ２１９は、以下の物理化学的特性を特徴とす る無色固体である。

分子量　：５９０（陰性ＦＡＢ−ＭＳ）分子組成：　Ｃｓ４ＨｓａＯ＊　（質量 計算値　５８９．３７４０　実測値５８９．３７９２）　（陰性陰性Ｆ　Ａ　Ｂ −ＭＳによる）ＵＶスペクトルデータ：　ＵＶｍａｘ　２１６　ｒｒｎ＋　（３ ２，０００）　２３９　ｒｕｎ（２６，０００）　２８１　ｎｍ　（７，９００ ）［α］″、”＝−２３，６（ｃ＝０．４．　ＭｅＯＨ）Ｉｂ式で示される活性 化合物は、以下の物理化学的特性を特徴とする無色固体である。

分子量：　６０６　（陰性ＦＡＢ−ＭＳ）分子組成：　Ｃ５ａＨｓ４０＊　（質 量計算値　６０５．３６８９６　実測値６０５．３６４５）　（陰性陰性ＦＡＢ −ＭＳによる）ＵＶスペクトルデータ：　ＵＶｍａｘ　２１６　ｎｍ　（２８， ０００）　２３９　ｎｍ（２４，０００）　２８１　ｎｍ　（６，５００）［（ Ｚ］　”、’＝　−２１，２（ｃ　＝０．３．Ｍｅ　ＯＨ）’Ｈ−ＮＭＲデータ を表１に、”Ｃ−ＮＭＲデータを表２に示す。

スペクトルはＣＤ＊　ＯＤにおいて周囲温度で得られた。δ＝３．３（’Ｈ）お よびδ＝４９　ｐｐｍ　（”Ｃ）でのシグナルは内部参照として用いた。

表　１．　化合物ＩａおよびＩｂの’ＨＮＭＲデータ６　ｍ　Ｊ　δ　ｍ　Ｊ Ｉｐｐｍｌ　ｆＨｚｌ　ｌｐｐｍ１　１Ｈｚ１１−Ｈ，０，９２電７０．９４１ ７ ２−Ｈ，１，３ｍ　１．３　ｍ ３−Ｈ，１，３ｍ　１．３　ｍ ４−Ｈ，１，３’　ｍ　１．３　ｍ ５−Ｈ，１３ｍ　１．３　ｍ ６−８．１．４　ｍ　１．３　ｍ　（Ｈ２）６−Ｈ，１，１ｍ ７−Ｈ１，６７ｍ　１．０４　ｍ ８−Ｈ，０，９４ｄ　７　０．９０　ｄ　７９−Ｈ，２，１１ｄｄ　１４；７　 ２．ＯＡＢ　（Ｈ，Ｊ９−Ｈ，１，９７ｄｄ　１４；１１ ＋１−Ｈ，１，７２ｄ　ｌ　１．６８　ｄ　ｌ＋２−Ｈ５，１０ｄｄ　ｌ；９　 ５．＋２　ｄｄ　９；１＋３−Ｈ３，５５ｍ　３．４６　ｄ＋　９；７；７１４ −代　３．４１　ｄｄ　ＩＩ；８　１．０３　ｄ　７（Ｈ，）＋４−Ｈ，３，４ ７ｄｄ　ＩＩ；６ ＋５−Ｈ５，３７ｄ　９　５．３７　ｂｄ　９＋７−Ｈ，１，８４ｄ　ｌ　１． １１１　ｄ　１１８−Ｈ６，３２ｄ　１６　６．２８　ｄ　１６１９−Ｈ５，６ ３ｄｄ　１６；７　５．６０　ｄｄ　１６；７２０−Ｈ４，３７ｄｄ　７；Ｉ　 ４．３７　ｄｄ　７；１２２−Ｈ，１，２１ｓ　１．２０　５ ２３−Ｈ，１，２７ｓ　１．２６　５ ２５−Ｈ６，１４ｓ　６．１３　５ ２９−Ｈ４，５３ｄ　９４．５３　ｄ　１０３０−Ｈ４，０３ｄｄ　９．９　４ ．０３　ｄｄ　１０；１０３１−Ｈ’３．６５　ｍ　３．６５　ｍ３２−）（、 ２，００ｄｔｌｄ　１３；５；２　２．Ｏｄｄ　１１；３３２−Ｈ，１，６１ｄ ｄｄ　１３；１２；１２　＋、６　ｄ＋　ＩＪＩＩ；ｌｌ３３−８　３．６５　 ｍ　３．６５　ｍＱ）１ 表２．　化合物■及び■の”ＣＮＭＲデータ・メタノール−ｄ、中で、１５０Ｍ ｈｚ；ゝメタノール中で、７５Ｍｈｚ、・前記のスペクトルデータから、化合物 ＢＫ２１９は式１ａを存すると思われる。

フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属に属する株はすべて、変種、組換え体および 突然変異体を含めて、自然淘汰で得られたかイオン化照射または紫外線照射のよ うな突然変異誘発剤の作用により、あるいはニトロソグアニジンのような化学的 突然変異誘発剤の作用により生じたか否かにかかわらず、本発明に含めるものと する。

抗菌活性 化合物１ａおよびＩｂの混合物（１：４）は、オオマイセテス（Ｏｏｍｙｃｅｔ ｅｓ）　、アスコマイセテス（Ａｓｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）およびジュテロマイセ テス（Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｅｔｅｓ）種に属する菌類の増殖をインビトロ阻害 することが判明した。それは特に以下のものに対して強い影響力を及ぼすことが 判明した： オオマイセテス（Ｏｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱：マイチウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）ｓｐ 、タイプ（Ｔｙｐｅ）　Ｆ。

フィトフィソラ　インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　１ｎｆｅｓｔ ａｎｓ、）アスコマイセテス（Ａｓｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱：ベンツリア　イナ クアリス（Ｖｅｎｔｕｒｔａ　１ｎａｑｕａｌｉｓ）フオマ　ベタエ（Ｐｈｏｍ ａ　ｂｅｔａｅ）フォマ　リンガム（Ｐｈｏｍａ　ｌｉｎｇａｍ）アスコチタ　 ビシ（Ａｓｃｏｃｈｙｔａ　ｐｉｓｉ）スフレロチニア　スクレロチオラム（Ｓ ｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ　ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）ピレノフォラ　テレス（Ｐ ｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ　ｔｅｒｅｓ）サツカロマイセス　セレビジアエ（Ｓａｃ ｃａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ジュテロマイセテス（Ｄｅｕｔｅ ｒｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱：フザリウム　オキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏ ｘｙｓｐｏｒｕｍ）ボトリチス　シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ ）リゾクトニア　ソラントＡＧ−３（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ　５ｏｌａｎｔ　 ＡＧ−３）モニリニア　フラクチゲナ（Ｍｏｎｉｌｉｎｉａ　ｆｒｕｃｔｉｇｅ ｎａ）アルテルナリア　アルテルナタ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ　ａｌｔｅｒｎａ ｔａ）アスペルギルス　ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ）化合物 １ａおよびＩｂの同一混合物は、エラバクテリアレス（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｓ）目に属する細菌の成長にインビトロ阻害作用を及ぼすことが判明した。そ れは以下のものに対して特に強い影響を及ぼす： 実施例 実施例Ｉ 発酵および単離／精製 イースト−エクストラクトースクロース（Ｙｅａｓｔ−Ｅｘｔｒａｃｔ−３ｕｃ ｒｏｓｅ）培地（２％酵母菌抽出物（Ｄｉｒｃｏ　）　；　１５％スクロース； 　１０ｐｐｍ　Ｚ　ｎＳｏ、”　７Ｈｔ　Ｏ；　５　ｐｐｍ　ＣｕＳＯｓ　”　 ５Ｈｔ　Ｏおよび０．３％寒天）　１００　ｍｌを倉入した５００　ｍｌ三角フ ラスコ中にＣＬ　５３４−１株からの菌糸体の懸濁液を接種した。フラスコを２ ６°Ｃに１３日間放置した。

各フラスコを１００　ｍｌのＭｅＯＨで抽出し、１８ｍ″Ｃで３時間振盪した（ ２０Ｏｒｐｍ）。その後混合物を遠心分離し、代謝物質を含有する上溝を菌糸体 から分離した。

単離および精製は、　“単離化合物の特性表示”の項に記載したようにして実施 した。

実施例■ ボトリチス　シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ）に対する活性残留 保護活性 宿主：リコベルシコン　エスクレンタム（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ　ｅｓｃｕ ｌｅｎｔｕｍ）（トマトＴｏｍａｔｏ、ファースト変種　ｖａｒ　Ｆｉｒｓｔ　 ｉｎ　Ｆｉｅｌｄ）握り式噴霧器（Ｂｉｎｋ　Ｂｕｌｌｏｗｓ　９００）を用い てトマト（５週齢）に懸濁液を噴霧してかけた。懸濁液は異なる濃度の化合物１ ａおよびＩｂを組み合わせて、または化合物１ａのみを含有した。植物を温湿中 に２４時間保持して乾燥した後、ｌＸ１０５個の胞子／ｍｌおよび２５％グレー プジュースを含有する胞子懸濁液を接種した。接種は、握り式アトマイザ−（Ｗ ａｇｎｅｒ、　Ｐｉｃｏ　Ｂｅ１）を用いて実施した。次に植物をポリエチレン 袋中で１５〜２０℃で、相対湿度を９５〜１００％に上げ・てインキュベート（ 明（１０００１ｕｘ）　１６時間と暗８時間）した。

６日後に評価を実施し、その結果を以下に示す：化合物１　ａ　：　２７０　ｐ ｐｍ　３０％保護９０　ｐｐｍ　２０％保護 ３０９１１ｍ　１０％保護 １０　ｌ１ｌ）Ｅｌｌ　１０％保護 化合物１ｂ：　２７０ｐｐｍ　１００％保護９０１１ｐ１１１　８５％保護 ３０　ｐｐｍ　７５％保護 １０　ｐｐｍ　６５％保護 実施例■ Ｉｂのメチルエーテルの調製 ジクロロメタン　１ｍｌに溶解したＩ　ｂ　（２４ｍｇ）の溶液に、エーテル溶 液に溶解した余分量のジアゾメタンを０°Ｃで加えた。濃縮して真空乾燥後、反 応混合物を逆相クロマトグラフィーにより精製して１６ｍｇ（ｉＤ　Ｉ　ｃを得 た。

Ｉｃの活性 化合物１ｃは、アスコマイセテス（Ａｓｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）およびジュテロマ イセテス（Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｅｔｅｓ）に属する菌類の成長をインビトロ阻 害することが判明した。それは特に以下のものに対して強い影響力を及ぼすこと が判明した： アスコマイセテス（Ａｓｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）　：サツカロマイセス　セレビジ アエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｖｉａｅ）ジュテロマイセテ ス（Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｅｔｅｓ）　ニポトリチス　シネレア（Ｂｏｔｒｙｔ ｉｓ　ｃｉｎｅｒｅｓ）リゾクトニア　ソラニＡＧ−３（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉ ａ　５ｏｌａｎｉ　ＡＧ−３）アスペルギルス　ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｓ　ｎｉｇｅｒ）本化合物は、エラバクテリアレス（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉａｌｅ ｓ）に属する細菌の成長にインビトロ阻害作用を及ぼすことも判明した。

エラバクテリアレス（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉａｌｅｓ）　：バシラス　サブチリス （Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂｔｉｌｉｓ）補正書の翻訳文提出書 （特許法第１８４条の８） 平成６年１１月１１Ｎ

Claims (21)

【特許請求の範囲】
1. １．ジュテロマイセテス（Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、好ましくはモニ リアレス（Ｍｏｎｉｌｉａｌｅｓ）属、さらに好ましくはフザリウム（Ｆｕｓａ ｒｉｕｍ）属、特にフザリウム　パリドロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｐａｌｌ ｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）種、特にフザリウム　パリドロセウム　（Ｆｕｓａｒｉｕ ｍ　ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕ）（ＩＭＩ　ＣＣ　Ｎｏ．３５１４３９）株に属 する株から産生可能な抗菌性化合物。
2. ２．次式Ｉ： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）（式中，Ｒ１は水素，１〜６個の炭素 原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル，例えばメチル，１〜６個の炭素原子を 有する直鎖または分枝鎖ヒドロキシアルキル，例えばＣＨ２ＯＨ，１〜６個の炭 素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルエーテル，または所望により置換され た芳香族エーテルであり；各々のＲ２は独立に水素，１〜６個の炭素原子を有す る直鎖または分枝鎖アルキル，例えばメチル，１〜６個の炭素原子を有する直鎖 または分枝鎖ヒドロキシアルキル、例えばＣＨ２ＯＨ，１〜６個の炭素原子を有 する直鎖または分枝鎖アルキルエーテル，または所望により置換された芳香族エ ーテルであり；および各Ｒ３は独立に水素，ヒドロキシ，メトキシ，アセトキシ ，１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルエーテル，または所望 により置換された芳香族エーテルであり；そしてキラール中心ａ，ｂ，ｃ，ｄ， ｅ，ｆ，およびｇは各々独立にＲ配置またはＳ配置を有することができる）を有 する抗菌性化合物（但しＲ１が−ＣＨ２−ＯＨであり，すべてのＲ２が−ＣＨ２ であり，そしてすべてのＲ２が−ＯＨである（式Ｉｂ）化合物を除く）；または それらの農学的に許容され得る塩またはそれらのエステル。
3. ３．次式Ｉａ： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉａ）を有する請求の範囲第２項記載抗菌 性の抗生物性化合物，またはその農学的に許容され得る塩またはそのエステル。
4. ４．請求の範囲第２もしくは３項記載の化合物、又は式Ｉｂで表わされる化合物 の製造方法てあって、適切な条件下で遺切な栄養培地上でジュテロマイセテス（ Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｅｔｅｓ）、好ましくはモニリアレス（Ｍｏｎｉｌｉａｌ ｅｓ）属、さらに好ましくはフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、特にフザリウ ム　パリドロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）種、特 にフザリウム　パリドロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕ ｍ）（ＩＭＩ　ＣＣ　Ｎｏ．３５１４３９）株に属する種を培養し、引き続きパ イオマスおよび発酵培地から式Ｉａ又は次式Ｉｂ：▲数式、化学式、表等があり ます▼（Ｉｂ）で表わされる活性化合物を単離し、所望により前記化合物のいず れか１種を化学的に修飾して式Ｉの化合物を得ることを含んでなる、前記方法。
5. ５．徴生物がフザリウム　パリドロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍｐａｌｌｄｏｒｏ ｓｅｕｍ）（ＩＭＩ　ＣＣ　Ｎｏ．３５１４３９）である、請求の範囲第３また は４項のいずれかに記載の方法。
6. ６．請求の範囲第１、２または３項の１つに記載の少なくとも１種の化合物を含 んでなる抗菌性組成物。
7. ７．化合物（Ｉａ）及び化合物（Ｉｂ）の混合物を含んでなる、請求の範囲第６ 項記載の抗菌性組成物。
8. ８．活性成分として請求の範囲第１、２または３項の１つに記載の少なくとも１ 種の化合物を他の生物致死剤および／または植物成長調節剤と組み合わせて含ん でなる抗菌性組成物。
9. ９．活性成分として式Ｉａおよび式Ｉｂの化合物の混合物を含んでなる請求の範 囲第８項記載の抗菌性組成物。
10. １０．請求の範囲第１、２または３項記載の少なくとも１種の活性化合物を不活 性キャリアーと混合することを含んでなる抗菌的に活性な組成物の製造方法。
11. １１．上記少なくとも１種の活性化合物がさらに１つ又はそれ以上の生物致死的 に活性な化合物および／または植物成長調節剤と併用される請求の範囲第１０項 記載の方法。
12. １２．感染したまたは感染し易い場所で菌類を撲滅する方法であって、上記場所 に請求の範囲第１または２項のいずれかに記載のＩ式の少なくとも１種の化合物 、または請求の範囲第６〜９項のいずれか１項に記載の組成物を施用することを 含んでなる方法。
13. １３．上記単数または複数の化合物もしくは組成物を植物に施用する請求の範囲 第１２項記載の方法。
14. １４．Ｉ式の活性成分を０．００１〜５０ｋｇ、好ましくは０．０５〜５ｋｇの 範囲の濃度で施用する請求の範囲第１２項記載の方法。
15. １５．木材上の、化粧品、飼料または食物中の菌類を撲滅するための請求の範囲 第１２項記載の方法。
16. １６．アスコマイセテス（Ａｓｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）、オオマイセテス（Ｏｏｍ ｙｃｅｔｅｓ）またはジュテロマイセテス（Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｅｔｅｓ）に 属する菌類からの攻撃を制御するための請求の範囲第１２〜１５項のいずれか１ 項に記載の方法。
17. １７．ポトリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）属特にポトリチス　シネレア（Ｂｏｔｒ ｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ）に属する菌類からの攻撃を制御するための請求の範 囲第１６項記載の方法。
18. １８．菌類を制御するための請求の範囲第１、２または３項の１つに記載の化合 物、もしくは請求の範囲第６〜９項のいずれか１項に記載の組成物の使用。
19. １９．アスコマイセテス（Ａｓｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）、オオマイセテス（Ｏｏｍ ｙｃｅｔｅｓ）またはジュテロマイセテス（Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｅｔｅｓ）に 属する菌類からの攻撃を制御するための請求の範囲第１８項記載の使用。
20. ２０．ポトリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）属特にポトリチスシネレア（Ｂｏｔｒｙ ｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ）に属する菌類からの攻撃を制御するための請求の範囲 第１９項記載の方法。
21. ２１．請求の範囲第１〜３項のいずれか１項に記載の抗菌的に活性な化合物の製 造に有用な不完全菌類、好ましくはモニリアレス（Ｍｏｎｉｌｉａｌｅｓ）属、 さらに好ましくはフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、特にフザリウム　パリド ロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）種、特にフザリウ ム　パリドロセウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ）（ＩＭ ＩＣＣ　Ｎｏ．３５１４３９）株に属する微生物の実質的に純粋な培養物。