JPH07506765A

JPH07506765A - 蛋白質含有液から蛋白質−結合物質を透析により分離する膜と方法

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Publication number: JPH07506765A
Application number: JP6520382A
Authority: JP
Inventors: スタンゲ，ヤン; ミッツナー，ステファン; ラムロウ，ヴォルフガング
Original assignee: テラクリン　アクチエンゲゼルシャフト
Priority date: 1993-03-19
Filing date: 1994-03-17
Publication date: 1995-07-27
Anticipated expiration: 2019-01-13
Also published as: DE4309410A1; EP0615780B1; JP2003299730A; ES2157912T3; WO1994021363A1; US5744042A; EP0615780A1; DE69330179T2; JP3486190B2; ATE200741T1; DE69330179D1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】蛋白質含存液から蛋白質−結合物質を透析により分離する膜と方法発明の説明１、技術分野本発明は膜及び膜輸送法、特に蛋白質−含を液、例えば血漿及び血液から望ましくない又は潜在的に有害な蛋白質−結合物質（ＰＢＳ）　、及びもし存在するならば水溶性物質（低分子量及び中分子量の物質）及び／又は親油性物質を上記膜を使用する透析により分離する効果的な方法に関する。

２　背景価値のある蛋白質に強く結合した物質のその蛋白質からの、透析による分離は不可能であるか、又は少なくとも多数の困難を伴う。これは蛋白質が血液又は血漿のような複雑な混合物の中に含まれている場合に特に当てはまる。

例えば末期腎臓病（ＥＳＲＤ、尿毒症）において、薬剤分離技術か血液からの親水性毒素の分離に広く受け入れられている。今日、腎移植が有効でない場合に、血液透析（ＨＤ）を続けることかＥＳＲＤ患とに採られる生命維持の長期治療法となっている。しかし、蛋白質か結合した毒素又は親油性の毒素の除去は医学において現在未解決の問題として残っている。患者における種々の外因性及び内因性中毒の病因には、特にａｌｂΔＶ６．３７ｍ１ｎ−結合毒素（ＡＢＴ）か関与していることか明らかにされている。

しかして、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸、チロキシンとトリプトファン、非共役ビリルビン、メルカプタン類、ジゴキシン様免疫反応性物質、ベンゾジアゼピン様物質、芳香族アミノ酸及びフェノール類等のＡＢＴ類か、劇症肝不全（ＦＨＦ）における肝性脳障害及び大脳水腫の発症原因となっていると思われる。

これらの物質は、少なくとも一部は、ＦＨＦに認められる致死性大脳変質の原因となっていると思われる。更に、ＦＨＦには、典型的には、凝血異常、呼吸欠陥、低酸素症、肺水腫、電解質平衡異常、酸−塩基障害、腎機能不全、低血糖症、心臓機能不全、敗血症、多器官不全及び死に至る出血が伴われる。その死亡率は、例えは患者の年令と入院時における脳障害の段階に依存して、これまでずっと変わらず、６０〜１００９６の高水準にあった。

慢性肝不全においては、−次毒素は異なるだろう（例えば、エタノール）けれとも、肝臓の代謝が不十分なことに起因して同じＡＢＴ群が血中及び脳の中に蓄積する。従って、ＦＨＦに普通認められる脳障害のような症状はこれらの患者にも生ずることがあり、しかもＦＨＦの様相に似ている急性の病勢悪化カルはしば認められる。

新生児の高ビリルビン血症がもう１つの臨床上関係のある内因性中毒である。

この高ビリルビン血症の形には、血液−脳バリヤーが未発達である故に、新生児の脳に対して損傷性の作用があることか知られている。成人におけるビリルビンの毒性作用は検討段階であるか、少なくとも非常に高い濃度においてはその毒性作用を明確に証明できると思われる。

更に、例えば３環式抗うつ剤、ジゴキシン、ジギトキシン、テオフィリン又はベンゾジアゼピンによる偶発的過剰投与又は自殺的（ｓｕｉｃｉｄａｌ）中毒の場合において高アルブミン−結合速度を有することが知られている非常に多数の薬剤か存在する。

上記の場合のＡＢＴの重要性は一般に知られていることであるが、患者は規則的なＨＤ治療を受けているにもかかわらず、ＥＳＲＤにおいてアルブミン−結合毒素、例えはフランカルボン酸類、インドキシルサルフェート、アルミニウムイオン、フェノール類、その他の有機酸の存意の蓄積もある。一方では“中分子量” 範囲内の“尿毒症毒素”に対する不満足な研究、また他方では尿毒症の血漿かその限外濾過の濾液より大きな毒性作用を示すと言う事実は、“尿毒症毒素“のあるものは蛋白質を結合させ得るだろうと言う仮説を導いた。

一方では、１９７６年と言う早い時期にその起源を持つこの理論は、アメリカン・ソサイティー・フォ・アーティフィシャル・インターナル・オルガンズ（Ａｍｅｒｉｃａｎ　５ｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ　Ｉｎｔｅｒｎａｌ　Ｏｒｇａｎｓ）　（１９９３）や、米国、欧州及び日本の多くの専門家によって受け入れられた。これは、アルブミン−結合物質を非毒性レベルに保つために、肝臓だけでなく腎臓も血液からのそれら物質の分離に関与していることを示している。このことはある種の薬剤と指示薬物質（例えば、フェノールレッド）について既に知られていることであるか、最近になってフラン誘導体についても、そのことが血液透析によっては十分に置換できない腎臓の特別なＩＪＦ泄機能どして明らかにされた。これは患者の透析においてこれら分子の濃度が、病態生理学的に関係かあるだろうレベルに達することを説明するものである。このことの重要性を示すものであるが、血液透析を受ける慢性患者に畜積するフランカルボン酸はミトコンドリアの細胞呼吸の強い抑制剤であることか明らかにされた。フラン誘導体は、更に、インビトロで示される通り、ＤＮＡ合成を妨害することによって細胞増殖の抑制剤として作用する。

はとんど全ての患者に、高度に特化された、又は増殖性の組織（例えば、造血組織）が不十分であることによって引き起こされる、ＥＳＲＤにおいてＨＤ治療を続けることのインビボの関係長期合併症（ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）　（例えば、透析に関係した貧血、免疫反応の低下、高感染率、脳障害）が認められる。これらのインビトロとインビボの結果における関係を示唆するものであるが、臨床研究は、例えば血液透析を受けている患者の貧血の程度はフランカルボン酸の血漿レベルと強く相関することを明らかにした。

上記疾病の全ての状態に共通していることは、病因にＡＢＴ類か関与しているだけでなく、集中医療と移植か、又は補助治療（例えば、エリトロポイエチン）と反復入院を伴う長期治療のいずれかの治療コストが非常に高いことである。ＡＢＴが関係する疾病には、一方では患者数か多いことと治療コストが高いことにより経済的にかなりの幅かあり、また他方では死や治療無効に至らしめる総体的な予後の悪さかある（例えば、全世界で継続ＨＤを受けている患者数は４００゜０００人であり、年当たりの治療回数はおおよそ６千万回である）。

ＡＢＴか関係する疾病の治療−技術状態１、透析及び限外濾過ＡＢＴ類は、非透析性のアルブミン分子に対するそれらの親和性の故に、インビトロ及びインビボで透析液に存意の程度には透過して行くことができない。更に、これらＡＢＴ類の多くは極めて親油性で、水には可溶でない。

普通の血液透析は、血漿から低分子量の物質（＜　１５００ダルトン）は効果的に分離するか、肝不全の有害な作用の原因であると考えられる蛋白質−結合物質は分離しない。例えば大気孔のポリアクリロニトリル膜を使用する血液透析は、低分子量物質に加えて中分子量（１５００−５０００ダルトン）の物質は効果的に分離するが、この場合も実験動物で蛋白質−結合物質は分離しない：デ・グロット、ＧＨ（Ｄｅ　Ｇｒｏｏｔ、ＧＨ）、シャーム　ＳＷ（ＳｃｈａｌｍＳＷ）、シフト　Ｔ　（Ｓｃｈｉｃｈｔ　Ｉ）：虚血性の肝壊死を持つビッグにおける大気孔血液透析法：ランダム化研究、肝胃腸学、第３１巻（１９８４年）、第２５４頁：デ・グロット、ＧＨ、シャーム　ＳＷ１シフト　■：ビッグの急性肝不全における大気孔膜による血液透析とクロス−透析との比較（ｃｒｏｓｓ−ｄｉａｌｙｓｉｓＬ　ＥＩＪｒ、Ｊ、ＣＩ　ｉｎ、Ｉｎｖｅｓｔ、　、第１３巻（１９８３年）、第６５頁を参照されたい。

従って、透析及び限外濾過はこれら物質の分離には満足な方法ではない。

２、腹膜透析別の治療法として腹膜透析（ＰＤ）を受けている患者は１回のＰＤ期間中に総血清アルブミンの１０％までを失うか、この途中で存置なアルブミン−結合物質（ＡＢＴ）も勿論失う。臨床研究では、ＨＤ患者の典型的な長期合併症、特に前記の貧血はＰＤ患者には観察することができなかった。しかし、ＰＤによるアルブミン−結合毒素のこの向上した除去にはアルブミンの損失か付随する。このアルブミンの損失は死亡率の増加と相関する。更に、ＰＤは腹膜炎を起こす高い危険と関連がある。

３、エリトロボイエチン療法エリトロポイエチン療法は、部分的には、透析／尿毒症関連貧血を完全に変えるものであるが、高価である。貧血の理由は内因性エリトロボイエチンの欠乏ではない。動脈性高血圧かこの療法において最もしばしば見られる悪影響の１つである。

４、腎臓移植この方法てＥＳＲＤにおいてＡＢＴ類の除去率が３５で、不十分であると言う問題を改善することがてきる。それにもかかわらず、それには、手術の危険、強い免疫低下、高率の腫瘍の危険を含めて、多数の厳しい合併症かある。総寿命の予想値はＨＤ治療と違わない。

５、血液潅流／血漿潅流イオン交換樹脂及び木炭等の異なる又は池の吸着剤上での血液潅流又は血漿潅流も有効であるか、十分に特異性てはない。これらの方法もホルモン（コルチコステロイド類、チロキシン）に似た本質的物質を除去する。これらのホルモンはそれら自身の輸送蛋白質（コルチコステロイド輸送蛋白質又はチロキシン輸送蛋白質）に結合されている。

これに関してなされた研究の大部分において、血液は木炭又はイオン交換樹脂が入っている吸着剤カラムを通して潅流された。この方法で蛋白質−結合毒素は効果的に除去されたが、これには次の欠点が付随した・ａ）血液細胞、特に血小板の損失、ｂ）凝固因子の損失、Ｃ）血液細胞（血小板、白血球）の活性化、ｄ）補体系の活性（ＩＺ。

ｅ）結合の絶対的非特異性モートに起因する必須血漿成分の血液化合物（ホルモン、ビタミン、成長因子）の損失、ｆ）特に木炭吸着剤か用いられたときの微小粒子の放出。

木炭潅流に見られる悪影響を少なくするために、木炭粒子は色々な血液−適合性物質で被覆されるが、これら木炭吸着剤が示す蛋白質−結合物質に対する結合能は、低い。マイクロカプセル化された木炭上ての血液潅流は血漿から低分子量物＊　（＜　１５００ダルトン）を効果的に除去するが、肝不全の有害な作用の原因であると考えられる蛋白質−結合物質は除去しない。

全ての体外透析技術及び吸着技術の内、アルブミン−被覆樹脂［例えば、アンバーライト（Ａｍｂｅｒ　Ｉ　ｉ　ｔｅ）ＸＡＤ−７］又はアルブミンが共存結合されたアガロースビーズ上での血液潅流かビリルビン、その他の存置な蛋白質− 結合存機アニオンを実験動物の血液から効果的に除去することか明らかにされた［ウィルソン　ＲＡ（Ｗｉｌｓｏｎ　ＲＡ）、ウェブスター　ＫＨ（ＷｅｂｓｔｅｒＫＨ）　、ホフマン　ＡＦ　（Ｈｏｆｍａｎｎ　ＡＦ）　人工肝臓に向かって、肝不全に関係した非結合及び蛋白質−結合血漿化合物のインビトロでの除去、Ｇａ５ｔｒｏｅｎｔｅｒｏ１．　、第６２巻（１９７２年）、第１１９１頁；ジャーシュミット　ＢＦ　（Ｓｃｈａｒｓｃｈｍｉｄｔ　ＢＦ）、プロ・ソツ　ＰＨ（Ｐｌｏｔｚ　ＰＨ）、バーク　ＰＤ（Ｂｅｒｋ　ＰＤ）：アフイニテイークロマトグラフィーによる血液からの物質の除去、Ｉｔ、アルブミン−共役アガロースビーズ上での血液潅流による黄痕症状を持つラットの血液からのビリルビンの除去、Ｊ、ＣＩ　ｉｎ、Ｉｎｖｅｓｔ、　、第５３巻（１９７４年）、第７８６頁］。

この方法の選択性又は可能性のある悪い作用に関して評価はなされなかった。しかし、これらのアルブミン−被覆吸着剤は低分子量及び中分子量の物質を除去しなかった［ザキム（Ｚａｋｉｍ）及びボイヤー（Ｂｏｙｅｒ）（編集）、肝臓学、肝疾患の教科書、Ｗ、　Ｂ、ソーンダース社（Ｗ、Ｂ、　５ａｕｎｄｅｒｓ　Ｃｏｍｐａｎｙ）、１９９０年、第４７９−４８２頁コ。

結論として、血液−潅流又は血漿−潅流は非選択的な方法のままである。

６、血漿交換この方法では、患者の血漿が血液から濾過又は遠心分離で分離され、アルブミン溶液又は血漿で置換される。この方法は次の欠点を示す：ａ）はとんどの蛋白質 −結合毒素は血漿ばかりでなく、組織にも分布される。

血漿交換期間後、毒素の精製された血漿への再分布か起こる。これにはこの治療を受けているＦＨＦの患者か昏睡から覚めるか、それは治療時間の間だけで、治療か終わった後はまた深い昏睡に落ち入ると言う臨床上の観察が伴った。か（して、血漿交換はそれを有効なものにするためには頻繁に行われなければならなかったか、これは以下に述べる典型的な免疫反応に導いた。

ｂ）頻繁な血漿交換に由来する観察された免疫反応は長い間輸血からアレルギー性反応乃至アナフィラキンー反応として知られていた。特別の発現は“輸血肺症 ”として記載された。

Ｃ）ウィルス感染の危険が存在する（ＨＩＶ、肝炎）。

ｄ）ＦＨＦでは、その生体は器官の再生性を高めるために成長ホルモンの分泌が多くなって大量の細胞を崩壊させると言う反応を示す。これらの成長ホルモンのレベルは健康なヒトの場合により高く、従ってドナーの血漿には存在しない。

ｅ）血漿交換は高価である。

７、交換輸血ひどい新生児−高ビリルビン血症では、今日、交換輸血か特に選はれる治療法である。この療法は回復不能な脳の損傷が予防されるので、患者にはを益である。

しかし、輸血には上記て血漿交換について述べたのと同様の欠点がある。

８、その池の体外法特にＦＨＦの治療分野に関する、及び蛋白質−結合毒素の除去に対する他の色色な方法が過去何年間もなされて来た：ａ）吸着剤懸濁液に対する木炭−含浸中空繊維／透析木炭をセルロースの膜に充填することによって透析の血液適合性と木炭吸着の作動性とを併せ持たせ、或いは“中分子量分子”を除去するために吸着剤懸濁液（粉末木炭及びイオン交換樹脂）を再循環させる試みは期待したものに全くならないか、又は期待したものに十分に近付かなかった。特に、ＡＢＴの蛋白質が強く結合した部分（例えば、非共役ビリルビン）の除去は不十分であった。この理由は、本発明者の見解では、以下に述へる“トンネル効果′についての性質を欠く膜を使用したことにあった。

ｂ）親油性液体膜新油性の液体を充填して中分子量の脂肪酸及びメルカプタン類のような水不溶性の化合物か通過できるようにした疎水性のポリマー半透膜を使用することによって、蛋白質−結合毒素を除去する努力か更になされた。アルカリ性透析物（ｐＨ１３）の溶液がこれら毒素の受容体溶液として提案された。この方法の不利な点は次の通りである：１、ＡＢＴ類のあるものはこの液体膜に不溶性であり、従ってそれらは除去プロセスからＩＪＰ除される（非共役ビリルビン）。

２、親水性毒素（例えば、アンモニア）のその液相中の不溶性はそれらの除去も拒み、そして前記中毒のほとんとか親水性毒素及び疎水性毒素を含めて複雑な性質のものであるので、更なる透析処理の追加使用を必要とした。追加の透析装置の使用により、体外の血液容量も血液−ポリマーの接触も増加する。最１表に述へるか決して軽視すべきてないものはコストであるが、それは非常に高い。

３、アルカリ性の透析物溶液の使用は患者には潜在的に有害なもので、少なくとも膜か損傷する場合それは内因性のｐＨｆａに影響を及ぼす。

９、バイオハイブリッド（ｂｉｏｈｙｔｉｒ　ｉｄ）系これらの系は自然の解毒をもたらす生物成分（例えば、肝臓切片、肝細胞）を含む血液又は血漿の処理用に設計されたバイオリアクターである。肝臓切片は機能性か限られ、しかも寿命が短いために、細胞に基づく系しか許容できない。この方法の不利点は次の通りである：ａ）この処理に必要とされる細胞を十分な量で与える安定かつ安全な供給源がない。

蛋白質−結合毒素の解毒に最も重要な細胞である肝臓の肝細胞は、今日まで遺伝的手法によらないインビトロ培養法で産生ずることはできなかった。この培養法では、続いて細胞の変化か起こり、従ってこの方法は計り切れない更なる危険と結び付いている。インビトロ培養法で産生ずることができると思われる肝腫瘍細胞の使用は腫瘍を発現させる危険と、更には予見できない細胞の代謝変化に由来する危険と結び付いている。動物細胞の使用は、一方では患者の血ｇＪ／血液と、他方では異種間肝細胞との間の免疫反応と結び付いている。

ｂ）方法の困姪性細胞又は完全なバイオリアクターを凍結保存できる可能性が乏しいために、デバイスの調製は常に使用直前に行わなければならない。このことはこの方法を高度に専門化されたセンターにしか使用できないものにする。

１０、肝臓移植肝臓移植は、今日、慢性か急性のいずれかの末期肝不全の患者に特に選ばれる方法となっている。それは肝不全について述べられたエイル療法（ａｉｌ　ｔｈｅｒａｐｉｅｓ）ら最高の長期生存率を示すからである。この方法の制限因子は、適当なドナーの器官の入手性か限られていること（長い待機者リスト）、手術の危険、一般的な合併症（例えば、高い感染の危険、高い腫瘍の危険、糖尿病の危険）と関連した拒否反応をさける、生涯にわたる長い免疫抑制治療である。更に、移植の適応症は極めて厳格に定められ、死に至るような病気の非常に多数の患者は自動的に排除される。かくして、移植は手術に適しないそのような患者に対する十分な解毒処置の必要を避けた。手術に適したこのような多数の患者は、昏睡、低血圧、高い出血の危険を伴うＦＨＦの故に、手術を受けるには悪すぎる状態にある。これらの患者には、移植の準備のために十分な“肝臓橋掛は治療（ｌｉｖｅｒｂｒｉｄｇｉｎｇ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）“が必要てあり、そして多くの場合、患者か移植後にＦＨＦに罹ると、その治療か再び必要になる。最後になるが、決して軽視てきないことは、移植は手術に由来して、また免疫抑制治療に由来して高コストを引き起こす。

従って、ＡＢＴ類のような蛋白質−結合物質を蛋白質−含有液、例を挙げると、例えはＦＨＦ、慢性肝不全、偶発的又は自殺的薬物過剰投与及びＥＳＲＤを罹患した患者の血液又は血漿から分離する、効果的で安全な、しかも経費がより少ない方法を提供することか有用であろう。この方法は、例えばを傷成分、例えば蛋白質のその液体からの望ましくない除去、又は潜在的に有害な（有毒な）物質のその液体に対する添加により液体、例えば血液の恒常性を妨害しないならば存置てあろう。

しかして、本発明の１つの目的は、蛋白質−結合物質をこれら物質を含有する蛋白質−含有液から透析により分離する方法を提供することである。本発明のもう１つの目的は、上記蛋白質−結合物質をこれら物質を含有する蛋白質−含有液から透析により分離するための膜を提供することである。

更なる目的は次の説明、図面及び請求の範囲から明らかになるであろう。

発明の概要本発明は、蛋白質−結合物質（ＰＢＳ）−これには強く結合されたものさえ包含されるーは蛋白質−含有液（Ａ）から、半透膜の助けを借りて、力りＰＢＳに対して受容体機能を有する蛋白質の助けを借りて、透析液（ｄｉａｌｙｓａｔｅ　１ｉｑｕｉｄ）（Ｂ）に対して透析することによって除去することができると言う予想外の知見に基づく。

本発明の透析液（Ｂ）は、蛋白質−含有液（Ａ）から除去されるべき、一般に蛋白質−含有液（Ａ）中のＰＢＳ−蛋白質錯体の中に存在する蛋白質のタイプの蛋白質−結合物質（ＰＢＳ）に対して受容体機能を有する蛋白質を含有しているのか好ましい。蛋白質−含有液（Ａ）としての血漿又は血液の場合、透析液（Ｂ）中の好ましい受容体蛋白質はアルブミン、特にヒトの血清アルブミン又はヒトの組み換えアルブミンである。

本発明の膜は機能的に異なる２つの部分を含んでいるのか好ましい。一方の部分は、本発明の方法の条件下でＰＢＳ、及びもし存在するならば水溶性物質は通過させるが、液（Ａ）中のＰＢＳを結合した蛋白質（類）と透析液（Ｂ）中の受容体蛋白質は排除する実効分離膜機能（ａｃｔｕａｌ　ｓｅｐａｒａｔｉｎｇ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ）を存する部分であり、他方の部分は出入（ｐｏｒｔ）−及び吸着−機能を有する部分である。膜はＰＢＳに対して受容体機能を有する蛋白質で被覆されているのか好ましい。１つの好ましい態様において、本発明の膜は、液（Ａ）の側に面する、足の長さか約１０μｍ以下で、かつ直径か液（Ａ）中の蛋白質を排除すべく十分に小さいトンネル一様構造と透析液（Ｂ）の側に出入−及び吸着−構造を含む。膜は少なくとも１つの面において、好ましくは透析液（Ｂ）の側において蛋白質−結合物質に対して受容体機能を有する蛋白質の薄いフィルムで被覆されているのが好ましい。

本発明の膜は平らなフィルム、肉厚は薄いか直径は大である管又は、好ましくは、中空の細繊維と言った巨視的形態を有するものであることができる。製膜技術、中空繊維膜及び透析については、カーク・オスマー（Ｋｉ　ｒｋ−Ｏｌｈｍｅｒ）のエンサイクロペディア・才ブ・ケミカル・テクノロジー（Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ　ｏｆ　ＣｈｅｍｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、第３版、第７巻（１９７９年）、第５６４−５７９頁、特に第５７４−５７７頁、第４２巻（１９８０年）、第４９２−５１７頁及び第１５巻（１９８１年）、第９２−１３１頁に記載がある。更に、膜及び膜分離法はウルマンのエンサイクロペディア・オブ・インダストリアル・ケミストリー（Ｕｌ１ｍａｎｎ’ｓ　Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ　ｏｆ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第５版、第Ａ１６巻（１９９０年）、第１８７−２６３頁に記載されている。

膜のマＩ・リックス材料は、液（Ａ）側及び透析液（Ｂ）側で蛋白質に対して親和性を有する限り、セラミック、グラファイト、金属、金属酸化物及びポリマーを含めて多数の材料からできていることができる。今日最も広く使用されている方法は、粉末の焼結、フィルムの延伸、フィルムの放射線照射及びエツチング、並びに転相技術である。本発明の膜に対して好ましい材料はポリスルホン類、ポリアミド類、ポリカーボネート類、ポリエステル類、アクリロニトリル重合体類、ビニルアルコール重合体類、アクリレート重合体類、メタクリレート重合体類及び酢酸セルロース重合体類より成る群から選択されるを機ポリマーである。特に好ましいものは、例えばポリビニルピロリドンで親水性が付与されたポリスルホンの膜である。

膜を正確かつ完全に定義するのはかなり困難なことである：ウルマンの上記引用文献、第１９０−１９１頁、Ｎｏ、２．　１及び２．２を参照されたい。膜は構造か均質、微孔質又は不均質、対称若しくは非対称であることかできる。膜は中性であってもよいし、或いは特定の結合能又は錯体形成能を持つ官能基を有していてもよい。分離プロセスに現在用いられている最も重要な膜は非対称膜である；ウルマンの上記文献、第２１９頁以降、Ｎｏ、４．　２を参照されたい。公知の非対称膜は、“フィンガー（ｆｉｎｇｅｔ）”タイプの構造、孔寸法の分布か段階的に変化しているスポンジ−タイプの構造又は孔寸法の分布が均一であるスポンジタイプの構造を持っている：ウルマンの上記文献、第２２３−２２４頁を参照されたい。

本発明の最も好ましい膜の構造は下部構造か高度に多孔質である薄い選択性スキン層から構成され、その孔か膜を多少なりとも垂直に、スキンから下方に延びているフィンガー又はチャンネルの形で貫通している非対称膜である。非常に薄いスキンか実効膜となり、それは孔を含有していることかできる。多孔質の下部構造はスキン層の支持体として役立ち、受容体機能を持つ蛋白質がスキンに接近して行き、そしてスキンを液（Ａ）側から透析液（Ｂ）側の方へ浸透して行く蛋白質−結合物質を受容する。

分離手順に先立って、膜は次のように準備するのか好ましい。即ち、膜を液（Ａ）側から及び／又は液（Ｂ）側から、受容体機能を有する蛋白質を含有する液体、好ましくは受容体蛋白質、好ましくはヒトの血清アルブミンを約１〜約５０　ｇ／＋　００ｍＬ、更に好ましくは約５〜約２０ｇ／１００ｍＬの濃度で含有する０、９％ＮａＣｌ溶液で処理する。処理時間は約１５〜約４０”Ｃ１好ましくは約１８〜約３７°Ｃにおいて約１〜約３０分、好ましくは約１〜約３０分である。

本発明の、蛋白質−結合物質、そして勿論存在しているかもしれない普通の水溶性物質の、蛋白質−含有液（Ａ）からの分離法はつぎのように実施される：精製すべき液（Ａ）を、膜を含む透析装置にその膜の液（Ａ）側に沿って液（Ａ）側で膜面積１平方メートル（ｓｑｍ）当たり約５０〜約５００ｍＬ／分、好ましくは約１００〜約２００ｍＬ／分の流量で通し、通過させる。透析液（Ｂ）を膜の透析液（Ｂ）側に沿って膜面積１平方メートル当たり約５０〜約５００ｍＬ／分、好ましくは約１００〜約２００ｍＬ／分の流量で、そして好ましくは液（Δ）と同じ流量て通す。

液（Ａ）から得られる、蛋白質−結合物質、そして多分水溶性物質を含有する透析液（Ｂ）を、次に、常用の透析機器に接続された第二の常用の透析装置に通し、通過させる。水性標準透析液に対する透析を行う。この透析によって、水溶性物質は透析液（Ｂ）と標準透析液との間で交換される。かくして、尿素又はクレアチニンのような水溶性の毒素は透析液（Ｂ）から分離することができ、また電解質、グルコース及びｐＨは透析液（Ｂ）中で、従ってまた液（Ａ）中でもその平衡を保たせることかできる。得られた、水溶性物質を含まない透析液（Ｂ）は、これを次いて木炭−吸着材、例えばガンプロ　ＡＢ社（ＧＡＭＢＲＯＡＢ）から得られるアトソーバ（Ａｄｓｏｒｂａ）３００Ｃ又はアサヒ社（ＡＳＡＨＩ）から得られるＮ３５０、及びアニオン交換カラム、例えばアサヒ社から得られるＢＲ３５０に通し、通過させて透析液（Ｂ）中の蛋白質受容体から蛋白質−結合物質を除去するのか好ましい。精製された透析液（Ｂ）を次に本発明の膜の透析液（Ｂ）側に戻し、再使用する。

他の存置な点及び利益は、当業者には、次に述べられる詳細な説明から明白になるであろう。

図面の説明図１は本発明の方法に従って、蛋白質−結合物質（非共役ビリルビン、遊離脂肪酸、フェノール、スルホブロモフタレイン）を血漿［液（Ａ）］からインビトロ（試験管内）で分離したその結果を示すグラフである。蛋白質−結合物質（ＰＢＳ）の減少は血漿［液（Ａ）］中の初期濃度に対するパーセントで示され図２は血漿［液（Ａ）］中の初期濃度に対するパーセントで示される、透析溶液［液（Ｂ）１図Ｉに対応するもので、同し実験により得られる］における蛋白質−結合物質の増加を示すグラフである。

図３は慢性肝不全か急性悪化した２９才の患者の４日間のＭＡＲ３治療とそれに続く２日間の通常のＨＤＦ中の総血清ビリルビン濃度を示すグラフである。

図４、図５及び図６は本発明による血液透析による血液精製の態様を例証する図である。

ＤＡ　−透析装置Ａ（アルブミン被覆膜）ＤＢ　−透析装置Ｂ（常用透析装置）ＡＤＳ　Ａ−吸着材ＡＡＤＳ　Ｂ−吸着材Ｂポンプｌ　−血液用ローラー（ｒｏｌｌｅｒ）ポンプポンプ２−第一アルブミン透析液用ローラーポンプポンプ３−第二アルブミン透析液用ローラーポンプＩ− ■　−安全装置 ■　−血液用ラインの気泡トラップＴＩ　−アルブミン透析液用ラインの気泡トラップＩＩＩ　−血液不足デテクタＴＶ　−毒性低下チャンバーＸ／Ｙ　−アルブミン透析液用流動コネクタ（ＤＡ）Ｕ／Ｖ　−常用の透析液流動用コネクタ（ＤＢ）血液［液（Ａ）］は“入”から流れ、ポンプて気泡トラップを通って給送されて透析装置（ＤＡ）に入り、そして毒性低下チャンバーを通過し、その後安全クランプを通る。安全装置は本発明の一部てはないが、安全に関する法令上使用しなければならない。アルブミン透析液［液（Ｂ）］はローラーポンプ２でコネクタＸからコネクタＹに向かって、又はコネクタＹからコネクタＸに向かって給送されるが、初めは血液不足デテクタ（ＩＩＩ）を、また気泡トラップ（ＴＩ）を通る血流に対して向流て送られるのか好ましい。その後、液（Ｂ）は常用の透析装置（ＤＢ）及び、所望によっては吸着材カラム（Δ及びＢ）を通る。

その他の可能性は次の通りであるニー液（Ｂ）は吸着材を通過するだけであって、透析装置は通過しない、−液（Ｂ）は透析装置ＤＢを通過するだけであって、吸着祠は通過しない。

常用の透析装置（ＤＢ）は、常用の透析機器から来るものであってもよいし、或いは他の潅流装置又はローラーポンプでバッグから給送されてもよい常用の透析液に接続される。

発明の詳細な説明Ａ、蛋白質−含有液から蛋白質−結合物質を分離する方法本発明は血漿及び血液のような蛋白質−含有液から望ましくないか、潜在的に有害な蛋白質−結合物質及び／又は親油性物質を除去する実際的かつ効果的な方法を提供するものである。基本的な手順は常用の高フラツクス透析法と同様であるが、以下に記載される幾つかの修正か本発明により施されている。

１、透析液（Ｂ）透析液（Ｂ）は液（Ａ）から除去されるへき蛋白質−結合物質（ＰＢＳ）に対して受容体として役立つ蛋白質を含有している。受容体蛋白質は液（Δ）中の蛋白質に結合される物質に対して十分な親和性を有しているべきである。好ましい受容体蛋白質はヒ１−の血清アルブミンである。受容体蛋白質の濃度は約１〜約５０ｇ／１００ｍ１、好ましくは約６〜約４０ｇ／１００ｍ１、更に好ましくは約８〜約３０ｇ／１００ｍ１、最も好ましくは約８〜約２０ｇ／１００ｍ１である。

透析液（Ｂ）は更にＮａＣｌ、ＫＣＩ、ＭｇＣＩｔ　、ＣａＣ１ｘ　、乳酸ナトリウム及びグルコース■水和物のような塩を、特定の患者の血液中の電解質組成に依存した量で含有している。例えば、低カリウム血症を患っている患者の透析では、より高濃度のカリウムか必要とされる。

重炭酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）中の好ましいイオン濃度は、ナトリウムについて約１３０〜約１４５ミリモル／Ｉ０００ｍｌ、カルシウムについて約１０〜約２．５ミリモル／Ｉ０００ｍｌ、カリウムについて約２．０〜約４．０ミリモル／１０１００Ｏ，マグネシウムについて約０．２〜約０．８ミリモル／１０１００Ｏ、クロリドについて約１００〜約１１０ミリモル／ＩＯ００ｍｌ、パイカーボネートについて約３０〜約４０ミリモル／１０１００Ｏ，アセテートについて約２〜約ｌＯミリモル／１０１００Ｏ、ヒト血清アルブミンについて約１〜約５０ｇ／１００ｍ１、好ましくは約６〜約４０ｇ／１００ｍ１、更に好ましくは約８〜約３０ｇ／１００ｍ１、最も好ましくは約８〜約２０ｇ／１００ｍ１である。

重炭酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）中の更に好ましいイオン濃度は、ナトリウムについて約１３５〜約１４０ミリモル／ＩＯ００ｍｌ、カルシウムについて約１．５〜約２．０ミリモル／１０１００Ｏ、カリウムについて約３．０〜約３゜５ミリモル／１０１００Ｏ，マグネシウムについて約０．４〜約０．６ミリモル／１０１００Ｏ，クロリドについて約１０４〜約１０８ミリモル／１０１００Ｏ。

パイカーボネートについて約３４〜約３８ミリモル／１０１００Ｏ、アセテートについて約４〜約８ミリモル／Ｉ０００ｍｌ、ヒト血清アルブミンについて約１〜約５０グラム／１００ｍ１、好ましくは約６〜約４０ｇ／１００ｍ１、更に好ましくは約８〜約３０ｇ／１００ｍ１．最も好ましくは約８〜約２０ｇ／１００ｍ１である。

酢酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）中の好ましいイオン濃度は、ナトリウムについて約１３０〜約１４５ミリモル／ＩＯ００ｍｌ、カルシウムについて約１゜０〜約２．５ミリモル／Ｉ０００ｍｌ、カリウｌ、ニツイテ約２．０〜約４．　０ミリモル／Ｉ０００ｍｌ、マグネシウムについて約０．　２〜約０．８ミリモル／１０１００Ｏ、クロリドニツイて約１ｏｏ〜約１１０ミリモル／Ｉ０００ｍｌアセテートについて約３０〜約４０ミリモル／ＩＯ００ｍｌ、ヒト血清アルブミンについて約１〜約５０グラム／１００ｍ１．好ましくは約６〜約４０ｇ／ｌｏ。

ｍｌ、更に好ましくは約８〜約３０ｇ／１００ｍ１最も好ましくは約８〜約２０ｇ／１００ｍ１である。

酢酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）中の更に好ましいイオン濃度は、ナトリウムについて約１３５〜約１４０ミリモル／ＩＯ００ｍｌ、カルシウムについて約１．５〜約２０ミリモル／Ｉ０００ｍｌ、カリウムについて約３．０〜約３゜５ミリモル／１０１００Ｏ、マグネシウムについて約０．４〜約０．６ミリモル／１０１００Ｏ、クロリドについて約１０４〜約１０８ミリモル／１０１００Ｏアセテートについて約３３〜約３８ミリモル／ｌＯ１００Ｏ，ヒト血清アルブミンについて約１〜約５０グラム／１００ｍ１．好ましくは約６〜約４０ｇ／１００ｍ１、更に好ましくは約８〜約３０ｇ／１００ｍＬ最も好ましくは約８〜約２０ｇ／１００ｍ１である。

透析液（Ｂ）の１例は、透析液（Ｂ）のリットル当たりヒト血清アルブミン約ｌＯ〜約２０重量％、ＮａＣ１約６．１ｇ、乳酸ナトリウム約４．　０ｇ、　ＫＣＩ約０．１５ｇ、ＣａＣＬ　ｘ）（、Ｏ約０．３１ｇ、ＭｇＣ１ｘ　Ｘ６Ｈｔ　Ｏ約０゜１５ｇ及びグルコースｌ水和物１．６５ｇを含むものである。

２、膜本発明の膜は２つの機能的に異なる部分（領域）を含んでいるのが好ましい。

一方の部分はＰＢＳと水溶性物質を本発明の方法の条件下で通過させるが、液（Ａ）中のＰＢＳを結合してしまった蛋白質（類）と液（Ｂ）の受容体蛋白質を排除する実効分離膜機能を存する部分であり、他方の部分は出入−及び吸着−機能を存する部分である。膜はＰＢＳに対して受容体機能を有する蛋白質で被覆されているのが好ましい。１つの好ましい態様において、本発明の膜は液（Ａ）の側に面してＩ・ンネル様構造を持つ薄層を含んでいる。そのトンネルの長さは約１０８ｍ以下、好ましくは約５μｍ以下、更に好ましくは約０．１μｍ以下、最も好ましくは約０．Ｏ１〜約０．　１μｍである。トンネルは液（Ａ）中の蛋白質をり［除し、好ましくは約２０，０００〜約６６．０００ダルトン、更に好ましくは約５０，０００〜約６６．０００ダルトンの分子量を存する分子をそれらトンネルを通過させるべく十分に小さい直径を有する。液（Ａ）中の蛋白質に対する膜の篩係数（ｓｉｅｖｅ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ）は０．　１未満、更に好ましくは０．０１未満である。更に、膜は透析液（Ｂ）側に出入−及び吸着−構造を含むのか好ましい。この部分は透析液（Ｂ）中の受容体蛋白質を出入−及び吸着一層に侵入させて膜の液（Ａ）から来るＰＢＳを受容すべく十分に開口した構造を与えなければならない。更に、この部分の内側表面は以下に述べる被覆法又はＰＢＳの結合に適した他の構造によって吸着される受容体蛋白質を媒介にしてのＰＢＳに対する吸着材として作用する。この吸着は時間中ずっと安定であることもてきるし、その逆であることもできる。股は少なくとも一方の側において蛋白質−結合物質に対して受容体機能を存する蛋白質の薄膜で被覆されているのか好ましい。本発明の膜を含む市販の透析装置は液（Ｂ）側に受容体蛋白質の溶液を含有していることかできる。

本発明の膜は平らなフィルム、肉厚は薄いか直径は大である管、又は好ましくは中空細繊維の巨視的形態を有していることができる。

膜のマｌ−リックス材料は、液（Ａ）側及び透析液（Ｂ）側において蛋白質に対して親和性を存している限り、セラミック、グラファイト、金属、金属酸化物及びポリマーを含めて、種々の材料からできていることかできる。今日最も広く使用されている方法は、粉体の焼結、フィルムの延伸、フィルムの放射線照射とエツチング、及び転相の各方法である。本発明の膜に好ましい材料はポリスルホン類、ポリアミド類、ポリカーボネート類、ポリエステル類、アクリロニトリル重合体類、ビニルアルコール重合体類、アクリレート重合体類、メタクリレート重合体類及び酢酸セルロース重合体類より成る群から選択される有機ポリマーである。

本発明において使用される好ましいポリマー膜は、例えばポリビニルピロリドンにより親水性か付与された、高度に透過性の非対称ポリスルホン膜、例えばフレセニアス　ＡＧ社（Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ　ＡＧ）のＨＦ８０である。

このような膜と膜のモジュール、透析カートリッジ、人工腎臓膜系は、例えばフレセニアスΔＧ社から、またガンプロＡＢＭからポリフラックス（Ｐｏｌｙｆ　ＩＵＺＸ）として、バクスター社（Ｂａｘｔｅｒ　Ｉｎｃ、）からＣＴｌ９０Ｇとして市販されている。

第一部分：液（Ａ）側に面する膜の層又は構造は蛋白質−結合物質及び水溶性物質、即ち低分子物質及び“中分子物質”の、液（Ａ）側から透析用溶液［液（Ｂ）側Ｊへの選択的移動を可能にする実効膜となるものでなければならない。

しかして、望ましくない物質の正味の可動輸送は、液（Ａ）側から透析液（Ｂ）側に向かって減少している、望ましくない物質についての濃度勾配に従って液（Ａ）側から透析液（Ｂ）側へと起こる。実効膜には３つの条件が満足されねばならない：１、トンネルは十分に短くなければならず、好ましくは約５μｍ未満、更に好ましくは約１μｍ未満、最も好ましくは約０．　１μｍ未満でなけれはならない。

２、トンネルの直径は望ましくない分子は通過させるくらい大きいが、液（Ａ）に含まれる所望の分子の液ＣＢ）への、及び受容体蛋白質の液（Ｂ）から液（Ａ）への通過は阻止すへく十分に小さくなければならない。液（Ａ）としての血漿又は血液の場合、その排除限界は約６６．０００ダルトンであるのが好ましい。

液（Ａ）中の蛋白質に対する膜の篩係数は、好ましくは０．　１未満、更に好ましくは０．０１未満である。

３、液（Ａ）側に面する実効膜の層又は構造の化学的、物理的等々の構造は所望とされない物質の通過が、例えば疎水性及び親水性のミクロドメインによって可能とされるそのような構造である。

第二部分：液（Ｂ）側に面する膜の層又は構造は、通常はスポンジ様又はフィンガ一様の様式でより多く開口した膜構造を与えるものでなければならない。こ、の部分は膜のこの部分内に重要な出入−及び吸着−機能を与える：ｌ、膜のこの部分の空間の広がった構造に起因して、透析液（Ｂ）側から来る受容体蛋白質は上記の液（Ａ）側に面する構造の透析液側の口に接近し、液（Ａ）側からトンネル様構造を通過して来る、蛋白質−結合物質のような所望とされない物質を受容することができる。

２、この構造中に存在する大きな総表面積に起因して、その構造は、この中間膜の吸着において１種のスペーサーとして機能する結合した分子を介して蛋白質− 結合物質（ＰＢＳ）を極めて多量で吸着するか、又は膜がそれ自体の構造に起因してＰＢＳを吸着する能力を有するならば、ＰＢＳが直接膜結合される。この吸着は可逆的であってもよいし、或いは不可逆的であってもよいが、可逆的である方が好ましい。

３、膜の透析液（Ｂ）側に向かって開かれた構造に起因して、外側の膜表面に対して垂直に又は平行に、或いはそれらとは異なる方式で指向するかもしれない透析物の運動で、受容体蛋白質の分子の出入層への輸送と出入層を出る輸送の両者が可能となる。外側の膜表面に対して垂直な運動と輸送は、出入膜の中に運動して行き、そして液（Ｂ）の流れに戻る液（Ｂ）の交互に行われるインフラックス（ｉｎｆｌｕｘ）運動とアウトフラックス（ｏｕｔｆｕｌｕｘ）運動で与えられるのか好ましい。このインフラックスとアウトフラックスはローラーポンプを使用することによって得られるパルス様の圧力分布により、又は初めは液（Ｂ）に向かって指向され、最後に液（Ａ）に指向されることから生ずる、膜に沿って変化する膜横断圧力（けａｎｓｍｅｍｂｒａｎａｌ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ）の変化（初めのＴＭＰは正、最後のＴＭＰは負）により与えることかできる：ＴＭＰ：膜横断圧力。

しかして、本発明の透析膜は、機能的には、トンネル様部分とフィンガ一様又はスポンジ様出入／吸着部分に分けられているのが好ましい。それらは、両方共、本発明の方法を可能にするある種の前提条件を満足しなければならない。理想的なトンネル様部分は０に近い長さく０．０１〜０．１μｍ）、精製され、保持液（ｒｅｔｅｎｔａｔｅ）中に保持されるべき所望蛋白質の大きさに近い直径、例えばアルブミンの直径を存するものであろう。言い換えると、トンネル様部分は保持液中の、液（Ａ）の価値のある、所望とされる物質を保持し、液（Ａ）中に含まれる蛋白質−結合物質、その他の所望とされない物質か透析液（Ｂ）の側に進むのを可能にすべく十分に小さい直径を有すべきである。

本発明の透析膜の理想的な出入／吸着部分は、受容体蛋白質をして１−ンネルの透析液側に近い領域に接近せしめ、遠ざかるのを可能にする良く開かれた構造を存する。この部分はＰＢＳを直接、又は結合した受容体蛋白質を媒介にして吸着する大きな内側表面を有する。この部分の総直径は、この場合も透析液の流れへの交換を更に効果的にするのを可能にするほど小さい直径であるべきである。後者の２点はそれらをそれらの極限までもたらすことができ、それによって他方のものは、吸着か更に望まれるか、又は膜の出入／吸着部分を通る通過が更に望まれるか（こよるが、はとんど！井除される。

例えは血漿又は血液を精製する常用の透析膜は機能又は構造を基準にして分類することかできる。機能上の基準は高フラツクスであるか、低フラックスであるか、又は高透過性であるかであり、これに対して構造上の基準は、例えば平らであるか、中空繊維であるか、対称であるが、又は非対称であるかである。本発明に有用なトンネル様膜（ＴＭ）の群は次の理由からこれらの用語では十分に記述されない：ａ）ＴＭは高フラツクス、高透過性の膜であるが、“高透過性”と称されるあらゆる高フラツクス膜が全てＴＭである訳ではない［例えば、ホスパル社（ＨＯ３ＰＡＬ）から入手できるＡＮ６９］；ｂ）ＴＭは非対称であることかできるが、あらゆる非対称膜が全てＴＭである訳ではない［例えば、フレセニアスＡＧ社から入手できるＦ８］　：ｃ）ＴＭは非対称かつ高透過性であることかできるが、あらゆる非対称かつ高透過性膜が全てＴＭである訳ではない［例えば、トーレ社（Ｔｏｒａｙ）から入手てきるＰＭＭＡＩ　；ｄ）ＴＭは対称であることができるか、あらゆる対称膜か全てＴＭである訳ではない［例えば、アクゾ１（ＡＫＺＯ）から入手できるタブロファン（Ｃｕｐｒｏｐｈａｎ）コ　。

従って、トンネル様膜なる用語は本発明に有用な透析膜の構造上及び機能上の特徴の新しい質を表すものである。

４、膜の予備処理と条件本発明の膜には次のようにして予備処理を施すのか好ましい。膜を少なくとも１つの側で、好ましくは液（Ａ）側と液（Ｂ）側の両側から受容体蛋白質の溶液により含浸する。含浸工程用の好ましい溶液は受容体蛋白質、好ましくはヒトの血清アルブミンを約ｌ〜約５０ｇ／ｌｏｏｍＬ、好ましくは約６〜約４０ｇ／１００ｍＬ、更に好ましくは約８〜約３０　ｇ／　１００ｍＬ、最も好ましくは約８〜約２０ｇ／ｌｏｏｍＬの濃度で含有する０、９％ＮａＣｌ溶液である。含浸用溶液を膜の液（Ａ）側と液（Ｂ）側に沿って、受容体蛋白質を膜の前記２つの部分に侵入させ、それら部分に吸着させるのに十分な時間、一般に、約１５〜約４０°Ｃ１好ましくは約１８〜約３７°Ｃにおいて約１〜約１２０分間、好ましくは約１〜約５０分間通し、この場合ｐＨ値は約５〜約９、好ましくは約７である。この予備処理は膜の使用直前に行うことができるが、予備処理された膜は、受容体蛋白質かヒトの血清アルブミンである場合は、滅菌条件下において最高２４ °Ｃまての温度て最長２年間貯蔵して置くこともてきる。

含浸用溶液は被覆操作中に“パルス様の圧力分布”を示すローラーポンプで、例えば１つは透析液側の隔室側に、１つは透析装置の血液の隔室側にある２つのローラーポンプて給送するのか好ましい。両ポンプの圧力分布間に相の遅れか存在し、かくして膜の両側での溶液の効果的な流入、流出か確実に行われるようにするのか好ましい。

５、ＰＢＳの蛋白質含有液（Ａ）からの分離法蛋白質−結合物質（ＰＢＳ）を蛋白質含有液（Ａ）から分離する方法は次のようにして実施するのが好ましい：精製すべき液（Δ）を本発明の透析膜の液（Ａ）側に沿って、透析膜の平方メートル当たり約５０〜約３００ｍ１／分、好ましくは約ｉｏｏ〜約２００ｍ１／分の流量で通す。透析液（Ｂ）を膜の透析液（Ｂ）側に沿って透析膜の平方メートル当たり約５０〜約１０１００Ｏ／分、好ましくは約ｌＯＯ〜約５００ｍ１／分の流量で通す。液（Ａ）、従って液（Ｂ）の流量は同じ大きさのオーダーであるのが好ましい。液（Ａ）対液（Ｂ）の流量比は約１：０．１〜約１：１０、好ましくは約ｌ：ｌ〜約１．５である。保持液は精製された蛋白質−含有液（Ａ）であり、それより蛋白質−結合物質、その他の所望とされない物質か除去される。

本発明の方法の１つの好ましい態様においては、液（Ａ）の第一透析工程は得られた透析液（Ｂ）の２つの後処理工程と結合される。

まず、得られた透析液（Ｂ）を常用の透析機器に接続されている第二の常用透析装置を通過させる。透析を水性の標準透析液に対して行う。この透析によって、水溶性物質は透析液（Ｂ）と標準透析液との間で交換させることかできる。水溶性毒素、尿素及び／又はクレアチニンは透析液（Ｂ）から除くことかでき、また電解質、グルコース及びｐＨ値は保持液である透析液（Ｂ）中でその平衡を保たせることができる。その後、透析液（Ｂ）を木炭−吸着材、例えばガンプロＡＢ社からのアドソーバ３００Ｃ又はアサヒ社からのＮ３５０に、次いてアニオン交換カラム、例えばアサヒ社からのＢＲ３５０に通し、通過させて透析液（Ｂ）中の受容体蛋白質から蛋白質−結合物質を除去する。精製された受容体蛋白質−含有透析液（Ｂ）を次に本発明の膜の液（Ｂ）側に戻す。

この方法を蛋白質−含有液中のアルブミン−結合薬剤と毒素の分離について実験し、試験すると、液中のこれら化合物に著しい低下がもたらされた。

本発明の方法の池の可能な単純化された態様は次の修正を含むものである。透析装置から来る透析液（Ｂ）をもう１つの透析装置に通し、通過させるが、いかなる吸着材にも通さない。透析装置から来る透析液（Ｂ）を１つ又は２つの吸着材に通し、通過させるが、他の透析装置には通さない。透析装置から来る透析液（Ｂ）をその透析装置の透析液用隔室の入口に（例えば、ローラーポンプで）直接給送して戻し、かくして透析液（Ｂ）の十分な運動とＡＢＴの十分な除去を実現する。更にもう１つの単純な修正態様は、ヒトの血清アルブミンを約１〜約５０ｇ／旧、好ましくは約６〜約４０ｇ／ｄｉ、更に好ましくは８〜３０　ｇ／ｄｌ、最も好ましくは約８〜約２０　ｇ／ｄ　１の濃度で含む透析液（Ｂ）が充填された、透析液用の入口と出口か閉鎖されている透析液用隔室を備えた透析装置であろう。透析装置は、例えば振盪又は横揺れさせることによってその全体を運動させることもてきる。

本発明の方法の利点は、潜在的に有害な、又は望ましくない蛋白質−結合物質、及び恐らくは望ましくない水溶性物質で汚染された血液又は血漿のような生物蛋白質−含有液を、その液か蛋白質−結合物質、その他の望ましくない物質を前より低い濃度で含有し、その液か透析処理前に持っていた潜在的に有害な、又は所望とされない作用を示さなくなるように、本発明の方法により選択的に精製することができることである。

本発明の方法のもう１つの利点は、生物学的液体の化学的、物理的恒常性かはとんと変化しないこと、即ちそのために使用される方法と透析膜は良好な生物学的適合性を発揮することである。

本発明の方法は、更に、単純、実用的であり、しかも市販の透析機器により大容量の生物学的液体、例えば外部回路中の血液を繰り返し何時間も、色々な条件に対して処理するのに適していると言う利点を有する。

蛋白質−結合物質及び水溶性物質を含有する血漿又は血液からそれら物質を分離する使い捨てセットは、前記の膜、血液透析用の第二の常用透析装置、血液潅流用の常用木炭吸着材装置とこの吸着材装置に管材料で接続された血液潅流用の常用イオン交換樹脂装置、及びヒトの血清アルブミンを含有する透析液の装置を含んて成ることかてきる。

蛋白質−結合物質及び水溶性物質を含有する血漿又は血液からそれら物質を分離する使い捨てセットは、また前記の膜を有し、透析液（Ｂ）側にヒト血清アルブミン含有液が充填されている透析装置、血液透析用の第二の常用透析装置、血液潅流用の常用木炭吸着材装置とこの吸着材装置に管材料で接続された血液潅流用の常用イオン交換樹脂装置、及びヒトの血清アルブミンを含有する透析液の装置を含んで成ることもてきる。

Ｂ、ＰＢＳ及び水溶性物質の除去の評価特に、光に対して不安定なビリルビンの分解を避けるために全化合物を実験の直後に測定した。

一ブロモスルホフタレイン：ベツチ（ＢＥＣＨ）の方法により分光測光法で測定。

一ビリルビン：ａ）ジエントラシフ（ＪＥＮＤＲＡＳＳＩＩＯの方法により分光測光法で測定；ｌ））コダソク・エクタケム（ＫＯＤＡＫ　ＥＫＴＡＣＨＥＭ）の乾式の化学的方法。これら両方法は使用濃度範囲で良好な相関性を示した。

−フェノール類：ａ）ベラチャ−（ＢＥＣＨＥＲ）の方法により分光測光法で測定；　ｂ＞　ＨＰＬＣｏこの場合もこれら両方法は使用濃度範囲で良好な相関性を示した。

一遊離脂肪酸類、ローレル（ＬＡＵＲＥＬＬ）とチブリング（ＴＩＢＢＬＩＮＧ）の方法による（即ち、脂肪酸はエステルを生成させなかった）。

−ジゴキシンニアホット（ＡＢＢＯＴＴ）の分析装置／乾式の化学的方法。

−ジギトキンン　アボットの分析装置／乾式の化学的方法。

−クレアチニン、尿素、尿酸、トランスアミナーゼ、血球数：コダック・エクタケムの乾式の化学的方法。

Ｃ，インビトロモデル生物学的液体中の減少して行く濃度のみならず、膜輸送プロセスを膜に対する吸着と区別する本質的な基準である透析液中の増加して行く濃度をも測定可能にするために、２つの閉鎖ループ式隔室（血漿用隔室と透析溶液用隔室）を備えた常用の透析機器を用いる。高さが約２５ｃｍと約１０ｃｍで、容積が各々５００ｍ１である、一方は血漿を含有する生物学的液体用の容器としての、他方は透析液溶液用の容器としての２本のガラス瓶を用いる。これら瓶は共に、１本は血漿又は透析液の流入用のものであり、もう１本は血漿又は透析液の流出用のものである２本の管のためのコネクタをそれぞれ備えている。“分流循環”を避けるためには、流入と流出との間の距離は１０ｃｍより短くすべきではない。各組の２つのコネクタを、透析用の常用ローラーポンプを使用できるようにするシリコーンセグメントを各々備えている２本の可撓性プラスチック管（約１００ｃｍ、直径約６ｍｍ）と接続する。これら２本の管の血漿が入っている瓶から離れた方の他端を透析装置の血液側のコネクタと次のように接続する：瓶の流出側を透析装置の流入側と接続し、透析装置の流出側を瓶の流入側と接続する。それら２本の管の透析液が入っている瓶から離れた方の他端を透析装置の透析液側のコネクタと次のようにして接続する：瓶の流出側を透析装置の透析液流入側と接続し、透析装置の透析液流出側を瓶の流入側と接続する。臨床血液透析から知られている通り、透析液の流れか透析装置を通って血漿の流れに対して向流で流れるように設計するために、透析装置の血漿流入側を透析液の流出側の次に配置する。血漿用瓶の流入／流出管のシリコーンセグメントは血漿をシマルタン（ｓｉｍｕｌｔａｎｅ）式ローラーポンプで給送するために用いられる。また、透析液用瓶の流入／流出管のシリコーンセグメントは、透析液をシマルタン式ローラーポンプで給送するために用いられる。こうして両隔室の流入／流出容量間に平衡が保たれ、結果に影響を及はすことがあり得る膜横断水の損失が回避される。

インビトロの実験に用いられる血漿の調製ａ）ポリスルホン透析膜を使用しての本発明の方法の評価用ヒトのヘパリン化された血漿を若い男性ドナーから採取し、蛋白質の結合率が高いモデル物質で富化したニーカプリル酸（７５０ｍｇ／ｌ　０００ｍ１）−フェノール（５３０ｍｇ／Ｉ　０００ｍ１）−非共役ビリルビン（Ｉ　Ｉｍｇ／＋　００ｍ１）−スルホブロモフタレイン（２３０ｍｇ／Ｉ　０００ｍ１）非共役ビリルビン１１０ｍｇ、スルホブロモフタレイン２３０ｍｇ、カプリル酸７５０ｍｇ及びフェノール５３０ｍｇを０．１Ｍ−ＮａＯＨ溶液５０ｍ１に溶解させた。その後、この溶液にヒトのアルブミン［脂肪酸を含まない、シグマ社（ＳＩＧ〜ｆＡ）１２．５ｇを溶解した。その後、３０９６酢酸溶液の添加によりそのｐＨ値を７．４に調整した。その後、この毒素混合液をヘパリン化血漿９５０ｍ１と混合した。この血漿溶液５００ｍ１を血漿用瓶に満たした。

透析液の組成：　２０９６（２０ｇ／ｌ　００ｍ１）ヒトアルブミン溶液１００ｍ１を市販のＣＶＶＨ透析溶液４００ｍ１と混合した。このアルブミン含有溶液５゜Ｏｍｌを透析液用瓶に満たした。

ｂ）他の透析膜／血液フィルターの評価用ヒトのヘパリン化血漿を若い男性ドナーから採取し、蛋白質の結合率が高いモデル物質で富化したニー非兵役ビリルビン（１１ｍｇ／ｌ　００ｍ１）−スルホブロモフタレイ：／　（２３０ｍｇ／１００１００Ｏ同様に、尿毒症と透析の実効性のマーカーとして知られるモデル物質で富化したニークレアチニン（６ｍｇ／ｌ　００ｍ１）−尿素（１００ｍｇ／１００ｍ１） −尿酸（１７ｍｇ／ｌ　００ｍ１）非共役ビリルビン１１０ｍｇ、スルホブロモフタレイン２３０ｍｇ、クレアチニン６０ｍｇ、尿素１０００ｍｇ及び尿酸１７０ｍｇを０．１Ｍ−ＮａＯＨ溶液５０ｍ１に溶解した。その後、この溶液にヒトのアルブミン（脂肪酸を含まず、シグマ社）２５ｇを溶解した。その後、室温での３０％酢酸溶液の添加により、そのｐＨ値を７．４に調整した。その後、この毒素混合液をヘパリン化ヒト血漿９５０ｍ１ど混合した。この血漿溶液５００ｍ１を血漿用瓶に満たした。

瓶を満たした後、それら瓶を閉じて気密にし、そしてポンプセグメント（流入及び流出）をンマルタン式ローラーポンプに、各（血漿と透析液）サークルを向流式に再循環させるように設置した。流量は１００ｍ１／分に調整した。温度は３７°Ｃに調整した。

次の透析膜／血液フィルターを使用した・ａ）本発明の方法の、原理の評価用ＨＦ８０：フレセニアスＡＣ社、ドイツｂ）他の透析膜の評価用ダイアフィルター（Ｄｉａｆｉｌｔｅｒ）３０：アミコン社（ＡＭＩＣＯＮ）、Ｕ、Ｓ、Ａ。

ＨＦ８８ニガンブロＡＢ社、スエーデンランディア・プロ（ＬＵＮＤＩＡ　ＰＲＯ）５　：ガンプロＡＢ社、スエーデンＣＴｌｌ０Ｇ：バクスター（ＢＡＸＴＥＲ）、Ｕ、Ｓ、Ａ。

スパン（ＳＰＡＮ）：オルガノン・テクニカ（ＯＲＧＡＮＯＮ　ＴＥＣＩ（Ｎ［ＫＡ）　、オランダＫＦ２０１−エバル（ＥＶＡＬ）ＮＩ　３　ニカワスミ（ＫＡＷＡＳＵＭＩ）、日本Ｂ１−２．ＩＵ：１−−レ・メディカル社（ＴＯＲＡＹ　Ｍｅ　ｄ　ｉ　ｃ　ａ　ＩＣｏ、）、日本フィルトラル（ＦＩＬＴＲＡＬ）ｌ　６・ホスパル社（ＨＯ３ＰＡＬ）、フランス透析膜、各会社から得られた技術情報：＊フレセニアスＡＣ社の高透過性ポリスルホン膜はカットオフ（ｃｕｔ　ｏｆｆ）　（約４０．０００ダルトン）を決める０、５〜１μｍのスキン層を持つ非対称膜である。スキン層は高フラツクス透析膜用の厚さ約４０μｍの、及び血液濾過（ｈｅｍｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）膜用の厚さ約３５μｍの多孔質の支持層で支持されている。このポリスルホン膜の疎水性の表面構造はポリビニルピロリドンて親水性化されている。

フレセニアスＡＣ社の低透過性ポリスルホン中空繊維膜はカットオフ（約５０００ダルトン）を決める、厚さ約４０μｍの多孔質の支持層で支持されている０゜５〜１μｍのスキン層を持つ非対称膜である。このポリスルホン膜の疎水性表面構造はポリビニルピロリドンで親水性化されている。これらの繊維は次のフレセニアス透析装置に存在する　Ｂ３、Ｂ４、Ｂ５、Ｂ６、Ｂ７、Ｂ８゜本ホスパル・パン膜（ＡＮ６９）はポリアクリロニトリルに基づく、高透過度を持つ膜厚５０μｍの対称膜である。この膜はフィルトラル８−２０に中空繊維として、またパイオスパル（Ｂｉｏｓｐａｌ）に存在する。

＊オルガノン・テクニカ社のスパン膜はポリアクリロニトリルに基づく非対称膜である。

＊ダイアフィルターは多孔質の支持層で支持されている、カットオフを決めるスキン層を存する非対称の、中空繊維より成る血液フィルター膜である。この血液濾過膜は次のアミコン社のフィルターに存在する：ミニフィルター（Ｍｉｎｉｆｉｌｔｅｒ）、ミニフィルタープラス、ダイアフィルター１Ｏ１２０，３０及び５０゜＊ランデイア・プロ５膜は平らなポリカーホネート製透析膜である。

＊ガンプロＡＢ社のポリアミド中空繊維膜は３種の改良型で市販される対称膜である・一高フラックス透析及び血液ダイアフィルトレージョン（ｈｅｍｏｄｉａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）用の、３層、高疎水性度のものとして設計された、肉厚５０μ ｍのポリアミド。

中空繊維の内径は２２０μｍである。これらの中空繊維はポリフラックス（Ｐｏｌｙｆｌｕｘ）＋３０及びポリフラックス１５０（商標名）に存在する。

−血液濾過用の、３層、高親水性度のものとして設計された、肉厚６０μｍのポリアミド。中空繊維の内径は２１５μｍである。これらの中空繊維はＦＨ２２、ＦＨ７７、ＦＨ８８に存在し、ＦＨ６６（商標名）の場合肉厚は５０．ｃｚｍである。

−水の限外濾過用（発熱物質の分離用）の、親水性度かより低い“フィンガー構造”のものとして設計された肉厚６０μｍのポリアミド。中空繊維の内径は２１５μｍである。これらの中空繊維はＵ２０００及びＵ７０００（商標名）に存在する。

＊ＫＦ２０トエバルＮ１３は肉厚３２μｍのエチレン−ビニルアルコール共重合体中空繊維膜である。この膜もＫＦＩＯＩ・エバルＮＩ６に存在する。

＊トーレ・メディカノ吋土のＰＭＭＡ中空繊翁［膜はポリメチルメタクリレート１こ基づく、肉厚３０μｍの、Ｂ１−１．６Ｕ及びＢ１−２．ＩＵに存在するが、又は肉厚２０μｍの、Ｂ２−０．５乃至Ｂ２−２．０及びＢ１−０．６１（乃至Ｂ１−１．６Ｈに存在する非対称膜である。

本バクスターＣＴ１００Ｇは三酢酸セルロースの中空繊維膜である。それは非対称分布の孔寸法を存し、肉厚か１５μｍである混成（ｈｙｂｒｉｄ）セルロース材料であると記述されている。このタイプの中空繊維もバクスターＣＴ１９０Ｇに存在する。

各透析装置を予備潅流でのその使用前に透析液側のみならず血液側でもヒトの血清アルブミン溶液（５ｇ／ｌ　００ｍＬ）により流量５０ｍＬ／分で２０分間含浸した。

表中の略号：Ａｌｂ、−アルブミンｔＪｎ、Ｂｉｌ、　−非共役ビリルビンｃ、Ｂｉ１．−共役ビリルビン５ＢＰ−スルホブロモフタレインｐｈ−フェノールＦＦＡ−遊離酸、この場合カプリル酸ＤＩＧ−ジギトキシンＣｒｅａ−クレアチニンＵｒ、酸−尿酸り、インビトロの結果ａ）原理の評価表１＝インヒドロでの血漿（液Ａ）からのＰＢＳの除去（ＨＦ８０、フレセニアスＡＧ社）、血漿濃度（液Ａ中）時間　Ａｌｂ、Ｕｎ、Ｂｉｌ、　ＳＢＰ　Ｐｈ　’　ＦＦＡ（＊）　（ｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄり　（ｍｇ／ｌ）　（ｍｇ／ｌ）　（ｍｇ／Ｉ）０　３．５　１１．７０　２３０　５２９　７４９５　３．４　９．３６　１８Ｇ　３７０　５Ｇ２＋０　３．４　８．４２　１５１　２９１　５０２３０　３．４　７．７２　１３３　１９０　４３４６０　３．４　７．０２　１２４　１３７　４１９９０　３．３　５．８５　１１７　１２７　４１２透析液（Ｂ）中のアルブミンの重要性を証明するために、表１におけると同じ条件下で比較試験を行ったか、ただし透析液（Ｂ）中のアルブミンは省いた。結果を比較用表１に示す。

比較用表トインビト口での血漿（液Ａ）からのＰＢＳの除去（ＨＦ８０、フレセニアスＡＣ社）、血漿濃度（液Ａ中）、アルブミンなしの常用透析液を使用時間　Ａｌｂ、　０口、Ｂｉｌ、　ＳＢＰ　Ｐｈ　ＦＦＡ（９）　（ｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｌ）　（ｍｇ／Ｉ）　（ｍｇ／Ｉ）０　３．５　１１．７０　２３０　５２９　７４９５　３．４　１１．５　２２７　４２０　７３０１０　３．４　１１．４２　２２１　３７１　７２３３０　３．４　１１．４４　２１８　２９０　７１９ＧＯ３，４１１，３９２１１２７０７１８９０３，３１１，４０２１５２６８７２４表２：血漿（液Ａ）からのＰＢＳの除去（ＨＦ８０、フレセニアスＡ０社）、透析液濃度（液Ｂ中）時間　Ａｌｂ、　ｔｌｎ、Ｂｉｌ、　ＳＢＰ　Ｐｈ　ＦＦＡ（ｅ）　（ｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／Ｉ）　（ｍｇ／ｌ）　（ｍｇ／Ｉ）０　４．０　０．００　０　０　０５　３．０　０．９　２１　５２　１４９＋０　３．１　１．５　４８　７９　１８７３０　２．９　１．７　６７　１００　２０２６０　２．９　２．１　１０３　１１１　２１７９０　２．８　２．３　１１９　１１６　２２４比較試験を表２におけると同じ条件下で行ったか、ただし透析液（Ｂ）中のアルブミンは省いた。結果を比較用表２に示す。

比較用表２　血漿（液Ａ）からのＰＢＳの除去（ＨＦ８０、フレセニアスＡＧ社）、透析物濃度（液Ｂ中）、アルブミンなしの常用透析液を使用時間　Ａｌｂ、　Ｕｎ、Ｂｉｌ、　ＳＢＰ　Ｐｈ　ＦＦＡ（ｅ）　（ｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／Ｉ）　（ｍｇ／ｌ）　（ｍｇ／Ｉ）ｏ　ｏ、ｏ　ｏ、ｏｏ　ｏ　ｏ　。

５　＜０．２　０．０　０　２８　０１０　＜０．２　０．０　０　７９　０３０　＜０．２　０．０　０　１２１　０６０　＜０．２　０．０　０　１７３　０９０　＜０．２　０．０　０　１８１　０ｂ）異なるタイプの透析装置／膜からの結果表３：血漿（液Ａ）からのＰＢＳ及び親水性毒素のインビトロ除去（アミコン社製ダイアフィルター）、血漿濃度（液Ａ）時間　Ａｌｂ、　ＳＢＰ　ｔｌｎ、Ｂｉｌ、ｃ、Ｂｉｌ、　Ｃｒｅａ　尿素　Ｄｒ、酸（９と（ｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／Ｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｉ）０　３．５　２３０　１１．７　０．６　６．８　１２０　１６．８３０　３．４　８６　４．５　０，４７　３．２　３７　９．８６０　３．３　５６　３．９　０．４０　２．９　３７　８．１表４．血漿（液Ａ）からのＰＢＳ及び親水性毒素のインビトロ除去（アミコン社製ダイアフィルター）、透析物濃度（液Ａ）時間　Ａｌｂ、　ＳＢＰ　Ｕｎ、Ｂｉｌ、ｃ、Ｂｉｌ、　Ｃｒｅａ　尿素　Ｏｒ、酸（＋））　（ｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌン０　４．０　０　０．００　０．００　０．０　０　０．０３０　３．３　９　０．４６　０．１４　３．６　４７　＋０．３６０　３．３　４４　０．９＋　０．３６　３．５　４７　１０．３表５：血漿（液入）からのＰＢＳ及び親水性毒素のインビトロ除去（ガンプロ社からのＦＨ８８）、血漿濃度（液Ａ）時間　Ａｌｂ、　ＳＢＰ　Ｏｎ、　Ｂｉ　１．　ｃ、　Ｂｉ　１．　Ｃｒｅａ　尿素　［１ｒ、酸（ｅ）　（ｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／Ｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｉ）０　３．５　２３０　１＋、７　０．６　６．８　１２０　＋６．８３０　３．２　４７　７．３　０．１３　２．８　＋９　３．０６０　３．１　３２　６．３　０．１３　２．７　１２　３．０表６：血漿（液Ａ）からのＰＢＳ及び親水性毒素のインビトロ除去（ガンプロ社からのＦＩ（８８）　、透析物濃度（液Ｂ）時間　Ａｌｂ、　ＳＢＰ　Ｕｎ、Ｂｉｌ、ｃ、Ｂｉｌ、　Ｃｒｅａ　尿素　Ｏｒ、酸（分）　（ｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｉ）０　４．０　０　０．００　０．００　０．０　０　０．０３０　３．５　３３　１．０８　０．０７　３．５　３０　６．９６０　３．３　４９　１．６８　０．＋２　３．４　２８　６．９表７＝血漿（液Ａ）からのＰＢＳ及び親水性毒素のインビトロ除去（バクスター社からのＣＴｌｌ０Ｇ）、血漿濃度（液Ａ）時間　Ａｌｂ、　ＳＢＰ　Ｕｎ、Ｂｉｌ、ｃ、Ｂｉｌ、　Ｃｒｅａ　尿素　Ｕｒ、酸（＋）　（ｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／Ｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）０　３．４　２３２　１１．７　０．６　６．８　１２０　１６．８３０　３．３　１１４　８．８　０．５　３．０　２９　８．２６０　３．２　８４　７．６　０．４５　３．０　３８　８．３表８：血漿（液Δ）からのＰＢＳ及び親水性毒素のインビトロ除去（バクスター社からのＣＴＩ　１０Ｇ）、透析物濃度（液Ｂ）時間　Ａｌｂ、　ＳＢＰ　Ｕｎ、Ｂｉｌ、ｃ、Ｂｉｌ、　Ｃｒｅａ　尿素　Ｏｒ、酸（＋））　（ｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）０　４．０　０　０．００　０．００　０．０　０　０．０３０　３．５　５９　０．８　０．０２　３．０　３９　８．１６０　３．３　８４　１．１　０．０２　３．０　３８　８．１表９．血漿（液Ａ）からのＰＢＳ及び親水性毒素のインビトロ除去（オルガノン・テクニカ社からのスパン）、血漿濃度（液Ａ）時間　Ａｌｂ、　ＳＢＰ　ＬＩｎ、Ｂｉｌ、ｃ、Ｂｉｌ、　Ｃｒｅａ　尿素　Ｕｒ、酸（＋））　（ｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）０　３．５　２４０　＋１．７　０．６　Ｇ、８　１２０　１６．８３０　３．２　１６７　９．２　０．５８　２．７　３８　６６０　３．２　＋４８　８．６　０．５８　２．５　３８　６表ＩＯ＝血漿（液Ａ）からのＰＢＳ及び親水性毒素のインビトロ除去（オルガノン・テクニカ社からのスパン）、透析物濃度（液Ｂ）時間　Ａｌｂ、　ＳＢＰ　Ｕｎ、Ｂｉｌ、ｃ、Ｂｉｌ、　Ｃｒｅａ　尿素　Ｏｒ、酸（９）　（ｇ／ｃｌｌ）　（ｍｇ少（ｍｇ／ｄｉ）　（＋ｎｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）０　４．０　０　０．００　０．００　０．０　０　０．０３０　３．６　６　Ｇ、１９　０．１？　２．６　３８　７．０６０　３．６　１８　０．１９　０．＋８　２．６　３８　７．０Ｃ）透析液（Ｂ）中の色々なアルブミン濃度の影響フェノール富化血漿：ヒトのヘパリン化血漿を若い男性ドナーから採取し、フェノールで富化した。これはフェノール５３０ｍｇを０．１Ｍ−ＮａＯＨ溶液５０ｍ１に溶解することによって行った。その１組ヒトの血漿（脂肪酸を含まず、ノグマ社）２．５ｇを＋ＩＯえた。次いて、そのｐｈ値を３０９６酢酸塩溶液で７．４に調整した。最後に、この毒素混合液を健康な若い男性トナーから採取し、プールして置いた血漿９５０ｍ１と混合した。この血漿溶液５００ｍ１を透析装置の血漿側にある血漿用の瓶に満たした。

透析液（Ｂ）：２０９６（２０ｇ／１００ｍ１）ヒトアルブミン溶液２００ｍ１を市販のＣＶＶＨ透析溶液３００ｍ１と混合した。この溶液（即ち、８０ｇ／ｌアルブミン）５００ｍｌを透析装置の透析液側にある透析物用瓶に満たした。

それらの瓶を満たした後、それらを閉じて気密にし、そしてポンプセグメント（流入及び流出）を、各（血漿及び透析物）サークルの再循環を向流で可能にするようにノマルタン式ローラーポンプに設置した。流量は１００ｍ１／分に調整した。温度は３７°Ｃに調整した。

表Ｉｌ：透析液（８ｇ／ｄｉ）中のアルブミンａ度が高くなったインビトロの血漿（液Ａ）からのフェノールの除去（ＨＦ８０、フレセニアスＡＧ社）、血漿と透析物の濃度時間　フェノールの濃度（ｍｇ／ｌ）（分）　液Ａ（血漿）　液Ｂ（透析物）０．０　５２９　０２．５　１５８　１４８５．０　１３２　１５１１０．０　１１６　１４８２０．０　１０５　１４７Ｅ、インヒポ（生体内）系市販の透を斤ａ器（Ａ　２００８、フレセニアス社）をインビボ系のハードウェア装置として選択した。単品はいずれも市販のもので、体外治療の血液処理での使用法にはジャーマン・フエデラル・ヘルス・オーソリティー（Ｇｅｒｍａｎ　ＦｅｄｅｒａｌＨｅａｌ　ｔｈ　Ａｕｔｈｏｒｉ　ｔｙ）　［ベルリン（Ｂｅｒ　Ｉ　ｉｎ）］からの安全承認付きであった。

Ａ２００８透析機器の血液ポンプを、両側で前記のようにアルブミン含浸された非対称のポリスルホン中空繊維透析装置（１，８平方メートル、ＨＦ８０、フレセニアス社）を通して１６０ｍ１／分の連続血液流を供給するために使用した。

液（Ｂ）の透析物用隔室はアルブミンを５ｇ／１００ｍ１の濃度（即ち、静脈内注入又は血漿交換での液体置換に用いられる濃度）で存するリンゲルラクテート溶液１０１００Ｏを含存する閉鎖ループ系であった。このアルブミン含有液（Ｂ）透析液の１２０ｍ１／分と言う流量はその機器の第二ポンプ（通常、液体の置換に用いられる）で実現された。更に、アルブミン含有液（Ｂ）透析物の３工程再生法を導入し、従ってＰＢＳ−分離能を高め、そして効果的な血液濾過と水溶性毒素分離の可能性を付は加えることによってそのインビボ系を改良した。

この順序て含有させた液（Ｂ）透析物のループ１、Ａ２００８の通常の透析物用隔室に接続された追加の、常用の大気孔透析装置（１，３平方メートルのポリスルホン中空繊維透析装置、ＨＦ６０、フレセニアスＡＣ社）。アルブミン含有閉鎖ループの液（Ｂ）透析物を上記透析装置の血液隔室に通し、通過させたが、他の側では標準重炭酸塩透析物（カリウムイオン４ミリモル／リットル）を用いた。この第一工程の目的は肝性昏睡の水溶性要因物！（アンモニア、バランスの崩れたアミ人酸、共役ビリルビン等）を除去して電解質−、グルコース−及びｐＨ −調節を支え、かつ腎性症候群又は他のタイプの腎不全における腎機能を支え又は代替することであった。

２、活性化された木炭の市販カラム（アドソーバ３００Ｃ、ガンプロＡＢ社）。

この第二工程の目的は閉鎖ループ系でのアルブミン溶液の再使用を助長するために第一群のＰＢＳ　（例えば、芳香族化合物、脂肪酸）をそのアルブミンから除去することてあった。

３、市販のアニオン交換樹脂［ブラソーバ（Ｐｌａｓｏｒｂａ）ＢＲ−３５０、アサヒ・メディカル社］。この第三工程の目的は非共役ビリルビン及び蓄積した胆汁酸のアルブミン溶液からの分離であった。

この再生後、アルブミン溶液は血液を更に精製するためにＨＦ８０透析装置の液（Ｂ）透析物用隔室に再循環させた。

Ｆ、インビボの結果＊患者ｌ患者は６年のアルコール中毒の病歴後に慢性肝不全の急性代償障害を持つに至った３０才の白人女性てあった。この患者を保存的（ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅｌｙ）にｌＯ口間治療したか、成功しなかった。この治療に入るところでは、患者は段階１ｖの肝性脳障害（深い昏睡、痛みの刺激に反応しない患者）の状態にあった。低血圧症、低血糖症及びアルカロンス（ａｌｃａｌｏｓｉｓ）か認められた。

生化学、トロンボプラスチン時間［クイック（Ｑｕｉｃｋ）１９％；活性化凝固時間は２００秒より長かった。抗トロンビンＩＩＩは【８９６てあった：血小板数は７３ＸｌＯ”／リットル（減少傾向存り）であった。総ビリルビンは６１５ μモル／リットル、非共役ビリルビンは５１μモル／リットル、コリンエステラーゼは１６μモル／リットル、アンモニアは９６μモル／リットルであった。アミノトランスフェラーゼ類の量は５〜ｌＯ倍増加し、血液のｐＨは７．５であった。患者に３種の治療法を施した（連続３日て）。治療時間は１日当たり約７〜１０時間で、以下に記載する解毒系を用いた。

治療中に不利な反応は観察されなかった。血圧、酸素飽和度、血中グルコースレベル及び血液のｐＨは徐々にてはあるが、連続的に改善された。

治療中に、患者は意識消失から回復し、２回目の治療後には脳障害の神経学的症状を残さずに完全に覚睡した（羽ばたき振せん無し、完全な定位認識存り（ｆｕｌｌｙ　ｏｒｉｅｎｔａｔｅｄ）、伝達反応と身体的反応に遅れ無し、正常な反射の回復）。次の数日間に肝ＷＪテ素の活性か５０９６まで徐々に減少し、トロンボプラスチン時間は４０９６まて増加した。次の３日以内に血小板数か最高１３０Ｘ１０９／リツトルまで増加し、また抗トロンビンＩＩＩは４３％になった。

表１２、患者１：治療前後の総血清ビリルビンレベル総血清ビリルビン治療　治療　治療前　治療後　総減少ｏｉ　時間（時）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）＋　７　３６　２５．３　１０．７２　１０　３４．５　２３．２　１１．３３　８　２３．５　１７．５　６．１表１３、患者ｌ：治療前後の非共役血清ビリルビンレベル総血清ビリルビン治療　治療　治療前　治療後　総減少回数　時間（時）　（＋ｎｇ／引）　（ｍｇ／引）　（ｍｇ／ｄｌ）１　７　３．０　２．５　０．５２　１０　３．３　２．３　１．０３　８　１．８　１．７　０．１＊患者２、男性、３４才、慢性アルコール性肝臓疾患患者（体ｆｆｉ１２０ｋｇ）は６年間アルコール性であると知られていた人で、感染（発熱、高白血球数、左シフト）の諸徴候、食欲減退及び全身状態の悪化が伴った、進行の遅い黄療のために病院に入院することが許された。この患者を３週間保存的に治療した。保存性治療の下で全身状態が急速に悪化し、血清ビリルビン濃度か最高３７．７ｍｇ／１００ｍ１までのレベルに上昇したので、患者をＭＡＲ３法て治療した。５日間の治療中に、患者の全身状態か更に悪化することはなかった。４時間の治療時間はこの患者には明らかに短か過ぎた。４日日に２時間の短いＭＡＲ３治療を２時間の血液ダイアフィルトレージョンと組み合わせた。その日の非常に小さい総ビリルビンの差は、恐らくは、効果のない治療と十分な血液濾過との組み合わせ効果である。しかし、この短い治療時間でも、尿素、クレアチニン又はアンモニアのような親水性の尿毒症毒素の分離のみならず、ビリルビンの分離も可能てあった（透析液のサーキットに納められた第二透析装置に起因する）。

表１４、患者２；治療前後の総ビリルビンレベル総血清ビリルビン治療　治療　治療前　治療後　総減少凰監　時間（時）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｉ）　（ｍｇ／ｄｌ）１　４　３７．７　３２．２　５．５２　５　３７．０　２９．１　７．９３　４　３２．４　２７．５　４．９４　２＋２　３２．８　３２．１　０．７（ＭＡＲ３＋ＨＤＦ）５　４　３２．４　２８．５　３．９表１５、患者２：治療前後の血清中の尿素及びクレアチニンのレベル治療　治療　尿素（ｍｇ／ｄｉ）　クレアチニン回数　時間　治療前　治療後　治療前　治療後１　４　１６０　１３８　３．９　３．１２　５　１９４　１５３　４．１　３．４３　４　２０８　１５２　４．７　３．６４　２＋２　２２６　１３６　５．２　３．１（ＭＡＲ３＋ＨＤＦ）５　４　２０２　１４８　４．９　３．７＊患者３、女性、２９才、慢性のアルコール性肝不全この患者はアルコール乱用の長い病歴を存し、肝硬変前段階レベルにあると臨床的に判断される公知の慢性肝不全を伴っていた。黄痕が増し、全身状態が悪化したとき入院して来た。通常の治療の下でこの患者は肝性脳障害の段階ＩＶに進んだ。即ち、彼女は深い昏睡に落ち入り、痛みの刺激に反応を示さなかった。ビリルビンレベルは２９．５ｍｇ／１００ｍ１に上昇した。患者はＭＡＲ３−治療の第１０目に生命を脅かす激しい酸−塩基障害、肺水腫、低酸素症を示し、経験を積んだ医師は瀕死の状態と判断した。この状態において本発明による方法での治療を最終対策（ｕｌｔｉｍａ　ｒａｔｉｏ）として開始した。その生命を脅かすひどい状態は２日以内に正常な酸−塩基値、正常酸素付加（ｎｏｒｍｏｏｘｙｇｅｎａｔ　１ｏｎ）及び正常な呼吸を持つ中度の病状に完全に変化した。患者は昏睡から覚め、脳障害の段階１／ＩＩに戻った。即ち、患者は言葉は不明瞭であったが、十分に反応した。患者を１日６時間、連続６日間治療した。この期間中にビリルビンレベルは１６．２ｍｇ／Ｉ　００ｍ１まで連続的に減少した。

表１６、患者３・ＭＡＲ３の４期間（１−４）との血液ダイアフィルトレージョン２期間（５−６）中の、治療前後の総血清ビリルビンレベル総血清ビリルビン治療　治療時間　治療前　治療後　総減少’Ｎｅｌ　（Ｒ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｌ）　（ｍｇ／ｄｉ）１　５　２９．０　２４．３　４．７２　６　２６．９　１９．９　７．０３　５　２３．４　１７．８　５．６４　５　１８．３　＋３．１　５．２５　５　１５．９　１２．９　３．０６　４．５　＋６．５　１５．６　０．９＊患音４女性、４１才、ジゴキシン中毒この患者は頻拍性不整脈、食欲不振、嘔吐、下痢等のジゴキシン中毒の典型的間の治療後、臨床症状は完全に正常化し、そのためＥＣＧ変化を示さなくなった。

表Ｉ６は治療の開始時と終点て単一のパス・クリアランス（ｓｉｎｇｌｅ　ｐａｓｓｃｌｅａｒａｎｃｅ）を明らかにしている。出発高毒性レベルと閉鎖−ループ式液（Ｂ）透析液用サーキットでのオンライン−吸着／透析によるジゴキシンの十分な再生（３，９５〜０．５及び２．　５５〜０．　５４）が認められた。

液（Ｂ）透析物用サーキットの飽和、及び吸着媒（ＰＢＳ）は認められながった。ジゴキシンは多くの組織に分布されているので、血液レベルは普通、他の組織からの連続インフラックスの故に、非常にゆっくり減少する。従って、より長期の治療、理想的には連続治療か望ましいだろう。

表１７、患者４．４時間のＭＡＲ３中のジゴキシンの単一パス・クリアランス出発時　透析装置の前　７．４５　０．５０透析装置の後　３．６６　３．９５終点　透析装置の前　５．８４０．５４透析装置の後　３．８６　２．５５以上の説明は本発明を例証せんとするもので、本発明を限定するものではない。

本発明の新規な着想の精神と範囲から逸脱しない限り、多数の変更及び修正を加えることができる。本明細書に記載される特定の組成物と用途に関して限定は意図されていないか、又は限定と判断すべきてはないことを理解すべきである。

本発明はアルブミンに関して不透過性又は本質的に不透過性の膜に関するとしても、本発明はアルブミンに関して部分的に透過性の膜の使用をも包含するものであることを観察されるへきである。

総ビリルビン（ｍｌ／ｄｉ）フロントページの続き（７２）発明者　スタンゲ、ヤシドイツ連邦共和国ディ　−　１８０５５　ロストツク、ダブリュ、ゼーレンピンデルシュトラーセ　３８（７２）発明者　ミツツナ−、ステファンドイツ連邦共和国ディ　−　１８０５５　ロストツク、ヴエンデンシュトラーセ　２（７２）発明者　ラムロウ、ヴオルフガングドイツ連邦共和国ディ　−　１８２０９　バット　ドベラン、ゲーテシュトラーセ　２０

Claims

【特許請求の範囲】１．蛋白質−結合物質をこれら物質を含有している蛋白質−含有液（Ａ）から、透析液（Ｂ）に対する透析により分離するための膜にして、該蛋白質−結合物質に対して受容体機能を有する蛋白質が核膜の少なくとも１つの面に結合されており、該膜は該蛋白質−結合物質が該膜を通過できるそのような孔寸法を有している、前記膜。２．機能的に異なる２つの部分（領域）を含み、−方の部分は、蛋白質−結合物質は通過させるが、蛋白質−含有液（Ａ）中の蛋白質−結合物質を結合した蛋白質（類）と透析液（Ｂ）中の受容体蛋白質は排除する実効分離膜機能を有する部分であり、他方の部分は出入−及び吸着−機能を有する部分である、少なくとも１つの面が蛋白質−結合物質に対して受容体機能を有する蛋白質で被覆されている、請求の範囲第１項に記載の膜。３．蛋白質−含有液（Ａ）の側にトンネルー様構造を持つ、実効分離膜機能を有する１つの部分と透析液（Ｂ）の側に出入−及び吸着−構造を持つ部分を含み、該トンネルは約１０μｍ未満の長さと、蛋白質−含有液（Ａ）中の蛋白質と透析液（Ｂ）中の受容体蛋白質を排除すべく十分に小さい直径を有するものである、請求の範囲第１項又は第２項に記載の膜。４．トンネルの長さが約５μｍ未満である、請求の範囲第１〜３項のいずれかに記載の膜。５．トンネルの長さが約０．１μｍ未満である、請求の範囲第１〜３項のいずれかに記載の膜。６．膜の材料がポリスルホン類、ポリアミド類、ポリカーボネート類、ポリエステル類、アクリロニトリル重合体類、ビニルアルコール重合体類、アクリレート重合体類、メタクリレート重合体類及び酢酸セルロース重合体類より成る群から選択されたものである、請求の範囲箪１〜３項のいずれかに記載の膜。７．膜の材料がポリスルホンである、請求の範囲第１〜３項のいずれかに記載の膜。８，膜の材料がポリスルホンである、請求の範囲第１項又は第２項に記載の膜。９，蛋白質−結合物質を含有する蛋白質−含有液（Ａ）を透析液（Ｂ）に対して、該蛋白質−結合物質を該透析液（Ｂ）側に通過させる膜により；及び該蛋白質 −結合物質に対して受容体機能を有する、該透析液（Ｂ）中に遊離の形態で存在するか、及び／又は該膜の少なくとも１つの面に結合されている蛋白質により透析することから成る、該蛋白質−含有液（Ａ）から蛋白質−結合物質を分離する方法。１０．蛋白質−結合物質を含有する蛋白質−含有液（Ａ）を、該蛋白質−結合物質に対して受容体機能を有する蛋白質を含有する透析液（Ｂ）に対して、機能的に異なる２つの部分を含む膜により透析することから成る、該蛋白質−含有液（Ａ）から該蛋白質−結合物質を分離する方法にして、該膜の−方の部分は該蛋白質−結合物質と水溶性物質は通過させるが、蛋白質−含有液（Ａ）中の該蛋白質 −結合物質を結合した蛋白質（類）と透析液（Ｂ）中の受容体蛋白質は排除する実効分離膜機能を有する部分であり、他方の部分は出入−及び吸着−機能を有する部分であり、そして該膜は該蛋白質−結合物質に対して受容体機能を有する蛋白質で被覆されているものである、前記方法。１１．蛋白質−含有液（Ａ）の側にトンネルー様構造を持つ、実効分離膜機能を有する１つの部分と透析液（Ｂ）の側に出入−及び吸着−構造を持つ部分を含み、該トンネルは約１０μｍ未満の長さと、蛋白質−含有液（Ａ）中の蛋白質と透析液（Ｂ）中の受容体蛋白質を排除すべく十分に小さい直径を有するものである、請求の範囲第９項又は第１０項に記載の方法。１２．膜のトンネルの長さが約５μｍ未満である、請求の範囲第１１項に記載の方法。１３．膜のトンネルの長さが約０．１μｍ未満である、請求の範囲第１１項に記載の方法。１４．膜の材料がポリスルホン類、ポリアミド類、ポリカーボネート類、ポリエステル類、アクリロニトリル重合体類、ビニルアルコール重合体類、アクリレート重合体類、メタクリレート重合体類及び酢酸セルロース重合体類より成る群から選択されたものである、請求の範囲第１１項に記載の方法。１５．膜の材料がポリスルホンである、請求の範囲第１４項に記載の方法。１６．蛋白質−含有液（Ａ）が血漿及び血液より成る群から選択されたものであり、そして透析液（Ｂ）が蛋白質−結合物質に対して受容体機能を有する蛋白質としてのヒトの血清アルブミンを含んでいるものである、請求の範囲第９項、第１０項又は第１１項に記載の方法。１７．膜が蛋白質−結合物質に対して受容体機能を有する蛋白質を含んでいる溶液で被覆されている、請求の範囲第９項、第１０項又は第１１項に記載の方法。１８．膜が蛋白質−結合物質に対して受容体機能を有する蛋白質としてのヒトの血清アルブミンを含んでいる溶液で被覆されている、請求の範囲第１７項に記載の方法。１９．透析液（Ｂ）がヒトの血清アルブミンを１００ｍｌ当たり約１〜約５０グラムの濃度で含んでいる、請求の範囲第９項又は第１０項に記載の方法。２０．透析液（Ｂ）がヒトの血清アルブミンを１００ｍｌ当たり約６〜約４０グラムの濃度で含んでいる、請求の範囲第９項又は第１０項に記載の方法。２１．透析液（Ｂ）がヒトの血清アルブミンを１００ｍｌ当たり約８〜約３０グラムの濃度で含んでいる、請求の範囲第９項又は第１０項に記載の方法。２２．透析液（Ｂ）がヒトの血清アルブミンを１００ｍｌ当たり約８〜約２０グラムの濃度で含んでいる、請求の範囲第９項又は第１０項に記載の方法。２３．請求の範囲第１〜８項のいずれか１項に記載の膜を含んで成る透析装置を含んでいる、蛋白質−結合物質を含有する血漿又は血液からこれらの蛋白質−結合物質を分離するための使い捨てセット。２４．透析装置が透析液（Ｂ）の側にヒトの血清アルブミンを含有する液体を含んでる、請求の範囲第２３項に記載の使い捨てセット。２５．請求の範囲第１〜８項のいずれか１項に記載の膜を含んで成る透析装置、第二の常用の血液透析用透析装置、並びに、好ましくは、管材料で相互連絡された、常用の血液潅流用木炭吸着材装置と常用の血液潅流用イオン交換樹脂装置、及びヒト血清アルブミン含有透析液（Ｂ）の装置を含んでいる、蛋白質−結合物質を含有する血漿又は血液からこれら蛋白質−結合物質を分離するための使い捨てセット。２６．請求の範囲第１〜８項のいずれか１項に記載の膜を含み、かつ透析液（Ｂ）の側にヒト血清アルブミン含有液が充填されて成る透析装置、第二の常用の血液透析用透析装置、管材料で相互連絡された常用の血液潅流用木炭吸着材装置と、好ましくは常用の血液潅流用イオン交換樹脂装置、及びヒト血清アルブミン含有透析液の装置を含んでいる、蛋白質−結合物質を含有する血漿又は血液からこれら蛋白質−結合物質を分離するための使い捨てセット。２７．イオンの形で、ナトリウムを約１３０〜約１４５ミリモル／１０００ｍｌ、カルシウムを約１．０〜約２．５ミリモル／１０００ｍｌ、カリウムを約２．０〜約４．０ミリモル／１０００ｍｌ、マグネシウムを約０．２〜約０．８ミリモル／１０００ｍｌ、クロリドを約１００〜約１１０ミリモル／１０００ｍｌ、アセテートを約２〜約１０ミリモル／１０００ｍｌ及びヒト血清アルブミンを約１〜約５０グラム／１００ｍｌ含んで成る、重炭酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）。２８．イオンの形で、ナトリウムを約１３０〜約１４５ミリモル／１０００ｍｌ、カルシウムを約１．０〜約２．５ミリモル／１０００ｍｌ、カリウムを約２．０〜約４．０ミリモル／１０００ｍｌ、マグネシウムを約０．２〜約０．８ミリモル／１０００ｍｌ、クロリドを約１００〜約１１０ミリモル／１０００ｍｌ、バイカーボネートを約３０〜約４０ミリモル／１０００ｍｌ、アセテートを約２〜約１０ミリモル／１０００ｍｌ及びヒト血清アルブミンを約６〜約４０グラム／１００ｍｌ含んで成る、重炭酸塩を緩衝荊とする透析液（Ｂ）。２９．イオンの形で、ナトリウムを約１３０〜約１４５ミリモル／１０００ｍｌ、カルシウムを約１．０〜約２，５ミリモル／１０００ｍｌ、カリウムを約２．０〜約４．０ミリモル／１０００ｍｌ、マグネシウムを約０．２〜約０．８ミリモル／１０００ｍｌ、クロリドを約１００〜約１１０ミリモル／１０００ｍｌ、バイカーボネートを約３０〜約４０ミリモル／１０００ｍｌ、アセテートを約２〜約１０ミリモル／１０００ｍｌ及びヒト血清アルブミンを約８〜約３０グラム／１００ｍｌ含んで成る、重炭酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）。３０．イオンの形で、ナトリウムを約１３０〜約１４５ミリモル／１０００ｍｌ、カルシウムを約１．０〜約２．５ミリモル／１０００ｍｌ、カリウムを約２．０〜約４．０ミリモル／１０００ｍｌ、マグネシウムを約０．２〜約０．８ミリモル／１０００ｍｌ、クロリドを約１００〜約１１０ミリモル／１０００ｍｌ、バイカーボネートを約３０〜約４０ミリモル／１０００ｍｌ、アセテートを約２〜約１０ミリモル／１０００ｍｌ及びヒト血清アルブミンを約８〜約２０グラム／１００ｍｌ含んで成る、重炭酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）。３１．イオンの形で、ナトリウムを約１３０〜約１４５ミリモル／１０００ｍｌ、カルシウムを約１．０〜約２．５ミリモル／１０００ｍｌ、カリウムを約２．０〜約４．０ミリモル／１０００ｍｌ、マグネシウムを約０．２〜約０．８ミリモル／１０００ｍｌ、クロリドを約１００〜約１１０ミリモル／１０００ｍｌ、アセテートを約３０〜約４０ミリモル／１０００ｍｌ及びヒト血清アルブミンを約１〜約５０グラム／１００ｍｌ含んで成る、酢酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）。３２．イオンの形で、ナトリウムを約１３０〜約１４５ミリモル／１０００ｍｌ、カルシウムを約１．０〜約２．５ミリモル／１０００ｍｌ、カリウムを約２．０〜約４．０ミリモル／１０００ｍｌ、マグネシウムを約０．２〜約０．８ミリモル／１０００ｍｌ、クロリドを約１００〜約１１０ミリモル／１０００ｍｌ、アセテートを約３０〜約４０ミリモル／１０００ｍｌ及びヒト血清アルブミンを約６〜約４０グラム／１００ｍｌ含んで成る、酢酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）。３３．イオンの形で、ナトリウムを約１３０〜約１４５ミリモル／１０００ｍｌ、カルシウムを約１．０〜約２．５ミリモル／１０００ｍｌ、カリウムを約２．０〜約４．０ミリモル／１０００ｍｌ、マグネシウムを約０．２〜約０．８ミリモル／１０００ｍｌ、クロリドを約１００〜約１１０ミリモル／１０００ｍｌ、アセテートを約３０〜約４０ミリモル／１０００ｍｌ及びヒト血清アルブミンを約８〜約３０グラム／１００ｍｌ含んで成る、酢酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）。３４．イオンの形で、ナトリウムを約１３０〜約１４５ミリモル／１０００ｍｌ、カルシウムを約１．０〜約２．５ミリモル／１０００ｍｌ、カリウムを約２．０〜約４．０ミリモル／１０００ｍｌ、マグネシウムを約０．２〜約０．８ミリモル／１０００ｍｌ、クロリドを約１００〜約１１０ミリモル／１０００ｍｌ、アセテートを約３０〜約４０ミリモル／１０００ｍｌ及びヒト血清アルブミンを約８〜約２０グラム／１００ｍｌ含んで成る、酢酸塩を緩衝剤とする透析液（Ｂ）。