JPH07509143A - 縫合可能で生体適合性の遅延再吸収性膜の製造のための架橋剤を用いて架橋されたコラーゲンの用途、およびその膜 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 縫合可能で生体適合性の遅延再吸収性膜の製造のための架橋剤を用いて架橋され たコラーゲンの用途、およびその膜 本発明は本質的に縫合可能で生体適合性の遅延再吸収性膜の製造のための架橋剤 を用いて架橋されたコラーゲンの用途、およびそのような膜に関する。このよう な膜は有利に導かれた組織再生のために用いられうる。

導かれた組織再生の概念は最近二エマン（Ｎｉｅａ＋ｘｎ）によって開発された ものであり、実際にはインビボの２つの細胞集団を分離しつる生体適合性材料の 用途を包含する。

原理は以下の通りである： 生きている組織にあいた空間ができると、満たされるべき空隙を集落化するため のただ１つであろう、単一の細胞型にアクセスが故意に限定されない限り、この 空隙近傍の最も迅速に増殖する細胞系がその空間を満たす。

この原理は臨床室が要望する方法で損傷した組織の修復を方向づけるための導か れた組織再生に利用される。

したがって、たとえば、歯周療法術のばあい、損傷した根周囲の靭帯組織を修復 することは非常に困難である。

事実、歯周組織治癒過程の間、上皮は靭帯よりもより迅速に再生しその場所を占 める傾向がある。

このケースに用いられる導かれた組織再生技術は、上皮がアクセスできないよう に、靭帯によって通常占められる領域を分離することからなる。この操作は組織 に移植された生体適合性材料を用いて行ないうる。本発明の目的はこのような材 料を記載することである。

２つのタイプの製品がこの導かれた組織再生を意図し商標で市販される伸展され た（　ｅｘｐｚｎｄｅｄ）ポリテトラフルオロエチレン膜が知られているが、こ れらの膜は再吸収されない。これらの膜には移植されてからずっとそのままであ るという利点があり、このことにより行なわなければならないバリアー機能が完 べきに実行される。

しかしながら、それらの膜を無期限にその場所においておくことはできず、２回 の外科的介入を必要とする、すなわち、１回は材料を挿入するためであり、２回 目は、６〜８週間後、再生現象が開始されたところでそれを除くためである。

−４、コラーゲンまたはポリグリコレート類（ｐｏ１７ｇ１７ｃｏｌａｌｅ＋） などの他のポリマーでできている、再吸収可能な膜は、再吸収により排除される ので、除去のための介入を必要としない。

しかしながら、それらの再吸収時間は比較的短く、それらの膜は必らずしも充分 な再生を開始するほど長くそのままでは残存しない。

本発明の１つの目的は、したがって、縫合可能で生体適合性かつ遅延再吸収性で ある、導かれた組織再生のための新規な膜材料を提供することである。

本発明のさらなる目的は、このような膜の基本材料の製造のための特別な方法を 提供することである。

本発明は初めてこの技術的な問題を、工業的かつ医学的規模で用いられつる簡単 で信頼できかつ安価な方法で解決することを可能とする。

したがって、第１の特徴にしたがえば、本発明は導かれた組織再生のための縫合 可能で生体適合性の遅延再吸収性膜の製造のための架橋剤を用いて架橋されたコ ラーゲンの用途を提供する。

一形態において、出発コラーゲンは凝固剤を用いてコラーゲンゲルを凝固するこ とにより産生された凝固状態である。

一形態において、架橋の程度は天然コラーゲンと比較して、コラーゲンの変性温 度が少なくとも１５℃、好ましくは少なくとも２０℃増加するような程度である 。

架橋剤は公知のコラーゲン架橋剤のいがなるものからも選択されつる。たとえば 、ジアルデヒドなどのアルデヒド、とくにはグルタルアルデヒドでありうる。し がしながら、好ましくは架橋剤はジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡと省略 される）からなる。大部分の他の架橋剤とは対照的に、ＤＰＰＡは架橋を誘導し 、材料には結合しない。

架橋方法それ自身は当業者によく知られている。ＤＰＰＡ架橋方法については、 ここに参考文献としてとり入れられる、ＦＲ−Ａ−２６４５８７０として公開さ れた、本願出願人の名におけるさきの特許出願に言及されつる。

用いられるコラーゲンは天然コラーゲン、とくにはタイプＩまたはタイプ■の天 然コラーゲンでありうる。

特定な一形態において、あまり好ましくないが、アテロコラーゲンを用いること も可能である。

別の特定な実施態様において、コラーゲンまたはアテロコラーゲンとグリコサミ ノグリカン類の混合物が用いられ、この混合物は架橋剤を用いて架橋される。

本発明による用途のとくに有利な一形態において、コラーゲンの架橋された層と コラーゲンまた□はアテロコラーゲン／グリコサミノグリカン混合物の層からな る混合膜を製造することができ、これらの２つの層は前記の架橋剤を用いて架橋 される。

別の有利な形態において、前記の膜は、出発ゲルの凍結乾燥を含むステップによ って製造されているので、多孔性にされスポンジ様外観をもつ。

第２の特徴にしたがって、本発明は、導かれた組織再生のための、コラーゲンか らなる縫合可能で生体適合性の遅延再吸収性膜をも包含し、該膜は架橋剤を用い て架橋されたコラーゲンからなる。

１つの形態において、架橋の程度は天然コラーゲンと比較して、架橋されたコラ ーゲンの変性温度を少なくとも１５℃、好ましくは少なくとも２０℃増加するよ うな程度である。好ましい架橋剤はＤＰＰＡと省略される、ジフェニルホスホリ ルアジドである。

有利な一形態において、コラーゲンはタイプＩまたはタイプ■の天然コラ−シン である。

別の形態において、コラーゲンはアテロコラーゲンである。

別の形態において、コラーゲンまたはアテロコラーゲンは、全体が前記架橋剤を 用いて架橋される前に、グリコサミノグリカンと混合される。

膜の別の特定の形態において、膜はとくに出発ゲルの凍結乾燥を含むステップに よって製造されているので、多孔性である。

別の形態において、この膜は少なくとも２つの層、すなわち架橋されたコラーゲ ンの第１の層とコラーゲンまたはアテロコラーゲン／グリコサミノグリカン混合 物の第２の層からなる。

本発明の構成において有利に用いられうるグリコサミノグリカン類は、構造グリ コサミノグリカン、とくにはヒアルロン酸、コンドロイチン　４−硫酸、コンド ロイチン　６−硫酸、デルマタン硫酸、ヘパラン硫酸、ケラタン硫酸ならびにヘ パリンおよびその誘導体、とくには約２０００〜約１０，０００の低分子量のヘ パリンである。

コラーゲンまたはアテロコラーゲンに対するグリコサミノグリカン類の割合は好 ましくは１８〜２５％である。

グリコサミノグリカンおよびコラーゲンまたはアテロコラーゲンは溶液の形態で 混合される。たとえば、グリコサミノグリカンは０．５〜４重量％、より特有に は０゜５〜２重量％、好ましくは約１％のグリコサミノグリカン類を含有するグ リコサミノグリカン類の水溶液の形態である。加えて、コラーゲンまたはアテロ コラーゲンは０．５〜２重量％、好ましくは約１重量％の濃度のコラーゲンまた はアテロコラーゲンの水溶液の形態でありうる。コラーゲンまたはアテロコラー ゲンの溶液は、本発明にしたがって微酸性水溶液、とくには酢酸の０．１Ｍ水溶 液にコラーゲンまたはアテロコラーゲン繊維を溶解することによって製造されう る。

コラーゲンまたはアテロコラーゲンおよびグリコサミノグリカン類の混合物を中 性に近いｐＨおよびと（には６．５〜８のｐＨにするための準備がなされうる。

水酸化ナトリウムの水溶液はこの意図で用いられうる。

第３の特徴にしたがって、本発明は出発コラーゲンを製造するための特別の方法 に関する。この方法は独立して特許性があり、独立した発明を構成する。

本方法は、アンモニア性溶液、好ましくは脱水効果をもつアンモニア性溶液から なる凝固剤を用いてこのゲルを凝固する、コラーゲンゲルの製造からなる。

この凝固方法の１つの有利な実施態様において、アンモニア性溶液は脱水剤とし てアセトンを用いる有機アンモニア性溶液である。実際上、アセトン／水性アン モニアの組合わせでゲルを凝固しゲル中に存在する水を除去するための相乗効果 がみられる。

アセトン／水性アンモニアの割合は、好ましくは５゜１５０〜８０／２０容量比 およびとくに好ましくは７゜／３０容量比である。

１つの有利な形態において、凝固されるゲルの量が比較的多量であるとき、凝固 溶液は凝固の期間補充される。

１つの特有な形態において、適した形態の凝固ゲルを産生ずるために、適した形 状および断面のダイを通してゲルが出される。もしダイの断面が長方形であれば 、フィルムかえられる；これは引き続いて膜を形成するであろう。

えられた凝固ゲルはそののち前記架橋剤を用いて架橋されつる。

方法の他の形態もまた本発明の前述の特徴のコンチクストにおいて可能である。

とくに、コラーゲンは天然コラーゲン、とりわけタイプＩまたはタイプ■の天然 コラーゲンでありうる、でなければ実際はアテロコラーゲン、すなわちテロペプ チド類（Ｉｅｌｏｐｅｐ＋１ｄｅｓ）が除かれているコラーゲンでありうる。さ らに、コラーゲンはグリコサミノグリカンと混合しつる。

したがって、簡単に例示という手段で与えられるために本発明の範囲をいかなる 方法においても限定しえない、本発明の２つの現在の好ましい実施態様を言及す る本発明の詳細な説明的記載にもとづいて当業者にとって明らかになるであろう 技術的利点に加えて、前記に言及された全ての決定的な技術的利点を本発明が可 能にすることが理解される。実施例におけるパーセンテージは、他にことわりの ない限り重量％である。

実施例１ 架橋された単一コラーゲン膜の製造 Ａ−天然コラーゲンの抽出およびゲルの製造ゲルはまず最初に洗浄され石灰／硫 化物混合物（石灰＝４％、硫化ナトリウム＝３％）を用いて脱毛されている仔ウ シの皮から製造する。

そののち、前記皮を塩化アンモニウム（２％）およびメタ重亜硫酸ナトリウム（ ０，５％）を含有する浴で脱石灰化（ａｎ　ｌ　１ＩＩｌｅ）する。そこで、中 和を行ない、そののち水で２回洗浄することにより塩を除去する。引き続いてす りつぶし、そののちｐＨ７，８のリン酸緩衝液（０゜７８ｇ／ｌの二水素リン酸 カリウムおよび２１．７ｇ／ｌの一水素リン酸二ナトリウム）を用いて洗浄する 。リン酸塩はそののち軟化水（＋ｏｌｔｅｎｅｄ　ｖＩｔｅ「）を用いて２回連 続して洗浄することにより除去する。

すりつぶした材料をそののち酢酸の１０％溶液で酸性化する。酢酸の量はコラー ゲンに対して５％である。すりつぶした材料をそこで練和しくｍ息ｌ＊ｔｓｌｅ ）均一なペーストをえる。このペーストをそののち希釈し０．７５％濃度の天然 コラーゲンを含有するゲルをえる。

Ｂ−フィルムの製造 えられたゲルは真空下（ｕｎｄｅｒマ１ｃ＋ｕｍ）でガスを除いたのち、断面が Ｑ、５ｍｍの高さをもつ長方形のダイをへて凝固浴中に入れる。凝固溶液はアセ トン／水性アンモニア混合物（７０／　３０　ｖ　／　ｖ　）であり、ゲル２５ ０ｍ１ごとに補充する。

えられたフィルムはそののち空気中室温でプラスチック製のポリテトラフルオロ エチレン支持体上で乾燥する。

乾燥すると、フィルムはその支持体から容易に取りはずフィルムはそののち、容 量で表わされる濃度、０．５％のジフェニルホスホリルアジド（Ｄ　Ｐ　Ｐ　Ａ ）を含有するジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）の溶液に２４時間４℃で放置する 。ＤＰＰＡはｐａｌｓ、９のホウ酸緩衝溶液（四ホウ酸ナトリウム０．０４Ｍ、 ホウ酸０．０４Ｍ）ですすぐことにより膜から除去する。

膜は引き続いてＩ）Ｈ８，９のホウ酸緩衝溶液において１５時間インキュベート し、そののちグリセロールの１０％溶液に入れる前に脱イオン水で５回すすぐ。

そののち空気中で乾燥し２５ｋＧｙ　（キログレイ）の線量でのγ−照射で滅菌 する。この膜のコラーゲンの最初の変性温度および最後の変性温度はそれぞれ６ ４℃および８０℃である。

実施例２ 架橋されたコラーゲン／グリコサミノグリカンの混合膜の製造 八−天然コラーゲンの抽出およびゲルの製造ゲルはまず最初に洗浄され石灰／硫 化物混合物（石灰：４％、硫化ナトリウム：３％）を用いて脱毛されている仔ウ シの皮から製造する。

そののち、前記皮を塩化アンモニウム（２％）およびメタ重亜硫酸ナトリウム（ ０，５％）を含有する浴で脱石灰化する。そこで、中和を行ない、そののち水で ２回洗浄することにより塩を除去する。引き続いてすりつぶし、そののちｐＨ７ ，８のリン酸緩衝液（０，７８ｇ／ｌの二水素リン酸カリウムおよび２１．７ｇ ／Ａ’の一水素すン酸二ナトリウム）を用いて洗浄する。リン酸塩はそののち軟 化水を用いて２回連続して洗浄することにより除去する。

すりつぶした材料はそののち酢酸の１０％溶液で酸性化する。酢酸の量はコラー ゲンに対して５％である。すりつぶした材料はそこで練和し均一なペーストをえ る。

このペーストをそののち希釈し０．７５％濃度の天然コラーゲンを含有するゲル をえる。

Ｂ−コンドロイチン　４−硫酸の製造 筋および脂肪組織が除去されている仔ヒツジの鼻中隔を細切し、４ｍｍ穴の格子 を通して押し出すことによりすりつぶす；すりつぶした材料は１％の［メルク（ ＭＥＲＣＫ　）　Ｊパパインを含有する塩化カリウム緩衝液（ＫＣＡ’　１１． 　８　ｇ／ｌ　、システィン７８．８ｍｇ／ｊ！。

ＥＤＴＡ１８０ｍｇ／ｌ）中に２４時間６℃の温度で放置する。割合は緩衝液１ に対してすりつぶされた材料１３０ｇである。

上清を残渣から４００Ｏｒｐｍで回転する遠心分離機において連続的に遠心分離 することにより分離する。４０　ｇ／ｌの三塩化酢酸をそののち上清に加える。

前述の技術にしたがった連続的な遠心分離により沈殿を除去する。上清は水酸化 ナトリウムペレットで中和する。混合物はそののち６０００〜８０００ダルトン のカットオフ限界値（ｃｕｔ−ｏｌｌ　ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ　）をもつ管（ｇｕ ｔ　）を用いて滅菌脱イオン水に対して透析する。透析された溶液は凍結乾燥す る。コンドロイチン　４−硫酸は乾燥状態でコンドロイチン　４−硫酸１．８７ ｇを１１の０．７５％コラーゲンに加える。中和後、混合物を撹拌しそして凍結 乾燥する。えられたスポンジ状物質は１５０バールの圧力下で１５秒間圧縮する 。

Ｄ−混合膜の製造 １％コラーゲンゲルを圧縮されたスポンジ状物質の上に断面がＱ、３ｃｍの高さ をもつダイを通して出す。ゲル１０ｍＡ’を３５０ｍ２のスポンジ状物質の上に のせる。

結果としてえられる膜は開放空気中で乾燥する。

Ｅ−膜の化学架橋 乾燥した膜は、容量で表わされる濃度、０．５％のＤＰＰＡを含有するＤＭＦの 溶液中で２４時間４℃でインキュベートする。ＤＰＰＡはｐＨ８，９のホウ酸緩 衝溶液（０，０４Ｍの四ホウ酸ナトリウム、０．０４Ｍのホウ酸）中ですすぐこ とによって膜から除去する。引き続いて膜を１５時間ｐ）Ｉｓ、９のホウ酸緩衝 溶液中でインキュベートし、そののちグリセロールの１０％水溶液中に入れる前 に脱イオン水で５回すすぐ。

膜はそののち空気中で乾燥し、２５ＫＧｙの線量での７−照射で滅菌する。この 膜のコラーゲンの最初と最後の変性温度はそれぞれ６０℃および８５℃である。

本発明にしたがった膜は、好ましくは口腔外科において、たとえば歯根膜ポケッ ト（ｐｃ＋１ｏｄｏｎｌｘｌ　ｐｏｃｋｅｔｓ　）を充填するため、上下顎骨隆 起を上昇するためまたはインブラント周囲の骨を再生するために、導かれた組織 再生のための材料として用いられうる。

歯根膜ポケットは歯の支持組織が細菌に攻撃されることによって生じる歯肉溝の くぼみ（ｄｅｅｐｅｎｉｎｇりである。

それらは歯根周囲に通常存在し顎上に歯を支持するように働く骨物質の損失によ って特徴づけられる。

このケースにおいてコラーゲン膜を用いるために、診療医は損傷をうけた骨をさ らすために全層（ｌａｌｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ　）のフラップ（ｆｌｉｐ）を作 成する。診療医は損傷を完全に保護しクラウンの一部をわずかにおおうように膜 を骨に適用する。膜が溝においてごく一部をおおったままになるようにフラップ を縫合することにより最終的に閉じる。

介入は生物材料および骨の充填剤（ｂｏｎｅ　ｆｉｌｌｉｎｇ）を相伴って使用 しても行ないうる。この技術は損傷した組織を４〜８力月間で修復することを可 能にする。

頬側領域からの抜歯はしばしば骨の多量の損失を伴う。

膜と骨の間に再構築されるべき空間が再構築のための望ましい形状を持つこと、 要すれば、膜の底面に、新しい骨の成長に適合する材料を用いることによってこ の形状を維持することを確実にするように注意して、外科医は損傷した骨を保護 し一部をおおうように骨に膜を適用することにより、これらの損失を埋め合わせ つる。最後に外科医はフラップを注意深く閉じて４〜８力月間に再構築を達成す る。

歯のない顎の骨における生体適合性人工金属種または歯科用インブラントの外科 的移植は、口腔外科において広く用いられている技術である。

これらのインブラントはそれらの全体の根の表面にわたって、ある特定のポイン トで失なわれている、骨に接触することが許容されない条件下に挿入されること がしばしばおこる。

再度、コラーゲン膜の使用は外科医がインブラントに隣接する損傷した骨を修復 することを可能にする。

このばあい、外科医は介入の開始時に作成されたフラップを閉じる前に、インブ ラントを挿入する骨の領域を保護するために簡単に膜を用いて、３〜６力月間で インブラントの骨との完全な統合がえられる。

本発明は記載された手段および種々のそれらの組合わせの技術的均等物からなる 全ての手段を包含する。

さらに、本発明はこの技術分野のいかなる状況にも関連して新規であると思われ る、そして全体として理解される前述の記載に起因するいかなる特徴をも包含す る。

補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）平成６年２月１日 １国際出願番号 ＰＣＴ／ＦＲ９２１００７５０ ２発明の名称 ３特許出願人 国　籍　フランス共和国 （明細書６頁２３行〜８頁４行をつぎのとおり補正する） イルムがえられる；これは引き続いて膜を形成するであろう。

えられた凝固ゲルはそののち前記架橋剤を用いて架橋されうる。

本発明はさらに、好ましくは導かれた組織再生のために、架橋されたコラーゲン からなる縫合可能で生体適合性の遅延再吸収性混合膜の製造のための方法であり 、まず第１にコラーゲンのスポンジ状物質を製造し、そののちコラーゲンゲルを その上から注ぎ、そして架橋剤、とくにはジフェニルホスホリルアジドを用いて 全体を架橋することからなる方法に関する。有利には、コラーゲンのスポンジ状 物質はコラーゲンおよびムコポリサッカライド、とくにはコンドロイチン　４− 硫酸の混合物からなる。

方法の他の形態もまた本発明の前述の特徴のコンチクストにおいて可能である。

とくに、コラーゲンは天然コラーゲン、とりわけタイプＩまたはタイプ■の天然 コラーゲンでありうる、でなければ実際はアテロコラーゲン、すなわちテロペプ チド類（１ｅｌｏｐｅｐｌｉｄｅｓ）が除かれているコラーゲンでありうる。さ らに、コラーゲンはグリコサミノグリカンと混合しうる。

したがって、簡単に例示という手段で与えられるために本発明の範囲をいかなる 方法においても限定しえない、本発明の２つの現在の好ましい実施態様を言及す る本発明の詳細な説明的記載にもとづいて当業者にとって明らかになるであろう 技術的利点に加えて、前記に言及された全ての決定的な技術的利点を本発明が可 能にすることが理解される。実施例におけるパーセンテージは、他にことわりの ない限り重量％である。

実施例１ 架橋された単一コラーゲン膜の製造 Ａ−天然コラーゲンの抽出およびゲルの製造ゲルはまず最初に洗浄され石灰／硫 化物混合物（石灰＝４％、硫化ナトリウム：３％）を用いて脱毛されている仔ウ シの皮から製造する。

そののち、前記皮を塩化アンモニウム（２％）およびメタ重亜硫酸ナトリウム（ ０，５％）を含有する浴で脱石灰化（ｏｎｌｉａｅ）する。そこで、中和を行な い、そののち水で２回洗浄することにより塩を除去する。引き続いてすりつぶし 、そののちｐＨ７，８のリン酸緩衝液（０゜７８ｇ／Ｊの二水素リン酸カリウム および２１．７ｇ／！の一水素すン酸二ナトリウム）を用いて洗浄する。リン酸 塩はそののち軟化水（ｔｏｆｔｅｎｅｄ　ｖｉｌｅｒ）を用いて２回連続して洗 浄することにより除去する。

すりつぶした材料をそののち酢酸の１０％溶液で酸性化する。酢酸の量はコラー ゲンに対して５％である。すりつぶした材料をそこで練和しくａ＋ｚｌＲｔｓｌ ｅ）均一なベー補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）平成６年２月１ 日 １国際出願番号 ＰＣＴ／ＦＲ９２１０Ｏ７５０ 剤を用いて架橋されたコラーゲンの用途、およびその膜３特許出願人 ５〜２重量％、好ましくは約１％のグリコサミノグリカン類を含有するグリコサ ミノグリカン類の水溶液の形態である。加えて、コラーゲンまたはアテロコラー ゲンは０．５〜２重量％、好ましくは約１重量％の濃度のコラーゲンまたはアテ ロコラーゲンの水溶液の形態でありうる。コラーゲンまたはアテロコラーゲンの 溶液は、本・発明にしたがって微酸性水溶液、とくには酢酸の０．１Ｍ水溶液に コラーゲンまたはアテロコラーゲン繊維を溶解することによって製造されつる。

コラーゲンまたはアテロコラーゲンおよびグリコサミノグリカン類の混合物を中 性に近いｐＨおよびとくには６．５〜８のｐＨにするための準備がなされうる。

水酸化ナトリウムの水溶液はこの意図で用いられつる。

第３の特徴にしたがって、本発明は出発コラーゲンを製造するための特別の方法 に関する。この方法は独立して特許性があり、独立した発明を構成する。

本方法は、アンモニア性溶液、好ましくは脱水効果をもつアンモニア性溶液から なる凝固剤を用いてこのゲルを凝固する、コラーゲンゲルの製造からなる。

この凝固方法の１つの有利な実施態様において、アンモニア性溶液は脱水剤とし てアセトンを用いる有機アンモニア性溶液である。実際上、アセトン／水性アン モニアの組合わせでゲルを凝固しゲル中に存在する水を除去するための相乗効果 がみられる。

アセトン／水性アンモニアの割合は、好ましくは５０１５０〜８０／２０容量比 およびとくに好ましくは７０／３０容量比である。

１つの有利な形態において、凝固されるゲルの量が比較的多量であるとき、凝固 溶液は凝固の期間補充される。

１つの特有な形態において、適した形態の凝固ゲルを産生ずるために、適した形 状および断面のダイを通してゲルが出される。もしダイの断面が長方形であれば 、フ補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）平成６年２月１日

Claims (15)

【特許請求の範囲】
1. １．導かれた組織再生のための縫合可能で生体適合性の遅延再吸収性膜の製造の ための架橋剤を用いて架橋されたコラーゲンの用途。
2. ２．出発コラーゲンが凝固剤を用いてコラーゲンゲルを凝固することにより産生 された凝固状態である請求項１記載の用途。
3. ３．コラーゲンが天然コラーゲン、とくにタイプＩまたはタイプＩＩＩの天然コ ラーゲンである請求項１または２記載の用途。
4. ４．コラーゲンがアテロコラーゲンである請求項１または２記載の用途。
5. ５．コラーゲンまたはアテロコラーゲンがグリコサミノグリカンと混合される請 求項１〜４のうちの１つに記載の用途。
6. ６．架橋の程度が天然コラーゲンと比較して、架橋されたコラーゲンの変性温度 を少なくとも１５℃、好ましくは少なくとも２０℃増加させる程度である請求項 １〜５のうちの１つに記載の用途。
7. ７．架橋剤がＤＰＰＡと省略される、ジフェニルホスホリルアジドである請求項 １〜６のうちの１つに記載の用途。
8. ８．導かれた組織再生のための、架橋剤を用いて架橋される、コラーゲンからな る縫合可能で生体適合性の遅延再吸収性膜。
9. ９．コラーゲンが請求項２〜７のうちの１つに定義されるものである請求項８記 載の膜。
10. １０．膜が少なくとも２つの層、すなわち架橋されたコラーゲンの第１の層とコ ラーゲンまたはアテロコラーゲンおよびグリコサミノグリカンの架橋された混合 物からなる請求項８または９記載の膜。
11. １１．好ましくは脱水効果をもつアンモニア性溶液からなる凝固剤を用いてコラ ーゲンゲルを凝固することからなる、請求項２〜７のうちの１つに記載された凝 固されたコラーゲンの製造のためのコラーゲンの凝固のための方法。
12. １２．脱水効果をもつ、アセトンからなる溶媒を用いてアンモニア性溶液を製造 する請求項１１記載の方法。
13. １３．アセトン／アンモニアの割合が５０／５０〜８０／２０容量比、好ましく は約７０／３０である請求項１２記載の方法。
14. １４．凝固されるゲルの量が多すぎるとき、凝固溶液を凝固中に補充する請求項 １１〜１３のうちの１つに記載の方法。
15. １５．ゲルが適した断面および形状の、とくにはフィルムがえられるような長方 形の断面のダイを通して出される、請求項１１〜１４のうちの１つに記載の方法 。