JPH0772711B2 - 細胞粒度分布測定法 - Google Patents
細胞粒度分布測定法Info
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- JPH0772711B2 JPH0772711B2 JP62057760A JP5776087A JPH0772711B2 JP H0772711 B2 JPH0772711 B2 JP H0772711B2 JP 62057760 A JP62057760 A JP 62057760A JP 5776087 A JP5776087 A JP 5776087A JP H0772711 B2 JPH0772711 B2 JP H0772711B2
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、白血球等の細胞の粒度分布測定法に関するも
のである。
のである。
健常人の末梢血中の白血球には、リンパ球、単球、好中
球、好酸球、好塩基球の種類がある。これらは各々その
機能が異なっており、血液中の白血球を種類別に計数す
ることによって、病気の診断に貢献することができる。
球、好酸球、好塩基球の種類がある。これらは各々その
機能が異なっており、血液中の白血球を種類別に計数す
ることによって、病気の診断に貢献することができる。
白血球を分類、計数するための一つの方法として、従来
から、自動血球計数装置が使用されてきた。
から、自動血球計数装置が使用されてきた。
この方法は、血液中の赤血球を溶解剤で破壊し、白血球
のみが浮遊した電解液を細孔中に流し、血球が細孔を通
過したときの細孔部のインピーダンス変化を検出し、検
出信号の大きさによって白血球を分類するものである。
のみが浮遊した電解液を細孔中に流し、血球が細孔を通
過したときの細孔部のインピーダンス変化を検出し、検
出信号の大きさによって白血球を分類するものである。
従来は、第６図（ａ）に示すように、赤血球溶解剤を添
加した後、所定時間（T1）まで待ち、T1からT2までのＴ
時間（たとえば12秒間）白血球を測定していた。このと
き、自動血球計数装置で検出した各細胞の体積（Ｖ）を
横軸に、細胞の頻度（ｆ）を縦軸にとって描いた細胞
（この場合は白血球）の粒度分布曲線は、たとえば第２
図に３次元的に示す様に、時間（ｔ）とともに変化す
る。
加した後、所定時間（T1）まで待ち、T1からT2までのＴ
時間（たとえば12秒間）白血球を測定していた。このと
き、自動血球計数装置で検出した各細胞の体積（Ｖ）を
横軸に、細胞の頻度（ｆ）を縦軸にとって描いた細胞
（この場合は白血球）の粒度分布曲線は、たとえば第２
図に３次元的に示す様に、時間（ｔ）とともに変化す
る。
第２図の細胞の粒度分布曲線を体積（Ｖ）と時間（ｔ）
との２次元分布図に描き直すと第３図の様になる。図中
の曲線は等頻度線を表わす。測定時間Ｔをｍ個の小期間
に区切り、各小期間における体積（Ｖ）と頻度（ｆ）と
の２次元分布図を描くと第４図に示すものとなる。たと
えば、第３図の小期間t1における細胞の粒度分布曲線は
第４図（ａ）に示すものとなり、以下、小期間t1、t2、
…tmに対応する細胞の粒度分布曲線はそれぞれ第４図
（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）に示すものとなる。
との２次元分布図に描き直すと第３図の様になる。図中
の曲線は等頻度線を表わす。測定時間Ｔをｍ個の小期間
に区切り、各小期間における体積（Ｖ）と頻度（ｆ）と
の２次元分布図を描くと第４図に示すものとなる。たと
えば、第３図の小期間t1における細胞の粒度分布曲線は
第４図（ａ）に示すものとなり、以下、小期間t1、t2、
…tmに対応する細胞の粒度分布曲線はそれぞれ第４図
（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）に示すものとなる。
従来の方法は、各小期間における細胞の粒度分布を測定
せず、測定時間Ｔ全体において検出された全ての信号か
ら、第５図に示す様な細胞の粒度分布を描いていた。す
なわち、第５図の細胞の粒度分布曲線は、小期間t1、
t2、t3、…tmにおける細胞の粒度分布曲線（たとえば、
第４図の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ））を、加え合
わせたものとなっている。
せず、測定時間Ｔ全体において検出された全ての信号か
ら、第５図に示す様な細胞の粒度分布を描いていた。す
なわち、第５図の細胞の粒度分布曲線は、小期間t1、
t2、t3、…tmにおける細胞の粒度分布曲線（たとえば、
第４図の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ））を、加え合
わせたものとなっている。
体積（Ｖ）と頻度（ｆ）による細胞の粒度分布曲線に現
われる個々の山は、異種の細胞の集団を表わしている。
したがって、細胞の粒度分布曲線上に多くの山が現われ
るほど、より多くの異種細胞が弁別されて検出されたも
のと言える。たとえば、第４図の（ｂ）および（ｃ）で
は４個の山（ピーク）が現われているが、第５図では３
個の山（ピーク）しか見えない。これは、従来の方法で
は測定時間中の細胞の体積の変化を無視して、時間平均
的な細胞の大きさに対する粒度分布曲線を描いているた
めである。すなわち、従来の方法では測定時間の途中で
得られるべき貴重な情報が失われている。
われる個々の山は、異種の細胞の集団を表わしている。
したがって、細胞の粒度分布曲線上に多くの山が現われ
るほど、より多くの異種細胞が弁別されて検出されたも
のと言える。たとえば、第４図の（ｂ）および（ｃ）で
は４個の山（ピーク）が現われているが、第５図では３
個の山（ピーク）しか見えない。これは、従来の方法で
は測定時間中の細胞の体積の変化を無視して、時間平均
的な細胞の大きさに対する粒度分布曲線を描いているた
めである。すなわち、従来の方法では測定時間の途中で
得られるべき貴重な情報が失われている。
また、溶解剤添加後の赤血球の溶解の進行や白血球細胞
の大きさの変化は、個々の検体によって、および測定温
度によって変化する。したがって、第６図において、溶
解剤添加後の測定開始時刻T1と測定時間Ｔの最適条件の
設定が非常に難しかった。このT1とＴが最適条件から大
きくずれると、第５図に示す細胞の粒度分布曲線すら得
られなくなってしまう。
の大きさの変化は、個々の検体によって、および測定温
度によって変化する。したがって、第６図において、溶
解剤添加後の測定開始時刻T1と測定時間Ｔの最適条件の
設定が非常に難しかった。このT1とＴが最適条件から大
きくずれると、第５図に示す細胞の粒度分布曲線すら得
られなくなってしまう。
本発明は、上記問題点を解決し、測定時間中に得られる
最も有用な細胞の粒度分布曲線を描くことが出来、測定
時間中の細胞の大きさの変化をモニターできる様にした
細胞粒度分布測定法の提供を目的とするものである。
最も有用な細胞の粒度分布曲線を描くことが出来、測定
時間中の細胞の大きさの変化をモニターできる様にした
細胞粒度分布測定法の提供を目的とするものである。
本発明の細胞粒度分布測定法は、つぎの（ａ）〜（ｅ）
の各工程、すなわち、 （ａ） 同一に作製されたｎ個の細胞浮遊液試料を粒度
分布分析装置に導入し、細胞浮遊液試料が１個の場合の
測定時間の総時間を小期間に区切り、各小期間における
ｎ個の細胞浮遊液試料の細胞の粒度分布を測定する工程 （ｂ） 各小期間に得られた各細胞浮遊液試料ごとの細
胞の粒度分布データを記憶装置に記憶させる工程 （ｃ） ｎ個の細胞浮遊液試料から得られた各試料ごと
の細胞の粒度分布データを演算装置で加算し、各小期間
ごとの細胞の粒度分布曲線を描かせる工程 （ｄ） 上記演算装置において、各小期間ごとの細胞の
粒度分布曲線から細胞浮遊液試料中の細胞種を最も良く
分離する細胞の粒度分布曲線を選定させる工程 （ｅ） 上記演算装置において、選定された細胞の粒度
分布曲線を解析し、各細胞種の存在比率を算定させる工
程 を包含することを特徴としている。
の各工程、すなわち、 （ａ） 同一に作製されたｎ個の細胞浮遊液試料を粒度
分布分析装置に導入し、細胞浮遊液試料が１個の場合の
測定時間の総時間を小期間に区切り、各小期間における
ｎ個の細胞浮遊液試料の細胞の粒度分布を測定する工程 （ｂ） 各小期間に得られた各細胞浮遊液試料ごとの細
胞の粒度分布データを記憶装置に記憶させる工程 （ｃ） ｎ個の細胞浮遊液試料から得られた各試料ごと
の細胞の粒度分布データを演算装置で加算し、各小期間
ごとの細胞の粒度分布曲線を描かせる工程 （ｄ） 上記演算装置において、各小期間ごとの細胞の
粒度分布曲線から細胞浮遊液試料中の細胞種を最も良く
分離する細胞の粒度分布曲線を選定させる工程 （ｅ） 上記演算装置において、選定された細胞の粒度
分布曲線を解析し、各細胞種の存在比率を算定させる工
程 を包含することを特徴としている。
以下、本発明の実施例を第１図に示すブロック図に基づ
いて説明する。
いて説明する。
実施例 白血球測定時間Ｔを第６図（ｂ）の様に小期間t1、t2、
t3、…tmに分割して測定し、各小期間における細胞（こ
の場合は白血球）の粒度分布曲線を描く場合には、各小
期間において検出される細胞数が充分でなく、細胞の粒
度分布の分解能が低下するため、実際には第４図に示す
分布図よりも粗いものしか得られない。第４図と同程度
の分解能の細胞の粒度分布曲線を得るために、本実施例
では以下の様にする。
t3、…tmに分割して測定し、各小期間における細胞（こ
の場合は白血球）の粒度分布曲線を描く場合には、各小
期間において検出される細胞数が充分でなく、細胞の粒
度分布の分解能が低下するため、実際には第４図に示す
分布図よりも粗いものしか得られない。第４図と同程度
の分解能の細胞の粒度分布曲線を得るために、本実施例
では以下の様にする。
まず、血液を希釈装置１で白血球が測定できる程度（通
常200〜500倍）に希釈する。この希釈試料を等量にｎ個
に分割する。分割された細胞浮遊液試料をそれぞれS1、
S2、…Snと呼ぶ。
常200〜500倍）に希釈する。この希釈試料を等量にｎ個
に分割する。分割された細胞浮遊液試料をそれぞれS1、
S2、…Snと呼ぶ。
試料S1に赤血球溶解剤を添加し、添加後の時刻T1からT2
までのＴ時間、白血球を粒度分布分析装置２で測定す
る。Ｔ時間をｍ個に分割し、各小期間t1、t2、t3、…tm
において測定され得られた細胞の粒度分析データｆ
（S1,t1）、ｆ（S1,t2）、ｆ（S1,t3）、…ｆ（S1,tm）
を記憶装置３に蓄積する。
までのＴ時間、白血球を粒度分布分析装置２で測定す
る。Ｔ時間をｍ個に分割し、各小期間t1、t2、t3、…tm
において測定され得られた細胞の粒度分析データｆ
（S1,t1）、ｆ（S1,t2）、ｆ（S1,t3）、…ｆ（S1,tm）
を記憶装置３に蓄積する。
試料S2、…Snについても同様の処理を行う。試料S2から
得られた細胞の粒度分布データはｆ（S2,t1）、ｆ（S2,
t2）、…ｆ（S2,tm）であり、試料Snから得られた細胞
の粒度分布データはｆ（Sn,t1）、ｆ（Sn,t2）、…ｆ
（Sn,tm）である。
得られた細胞の粒度分布データはｆ（S2,t1）、ｆ（S2,
t2）、…ｆ（S2,tm）であり、試料Snから得られた細胞
の粒度分布データはｆ（Sn,t1）、ｆ（Sn,t2）、…ｆ
（Sn,tm）である。
以上の様に記憶装置３に蓄積されたデータを、演算装置
４で各小期間ごとに積算する。得られた細胞の粒度分布
データをＦ（t1）、Ｆ（t2）、Ｆ（t3）、…Ｆ（tm）と
呼ぶ。すなわち、 となる。
４で各小期間ごとに積算する。得られた細胞の粒度分布
データをＦ（t1）、Ｆ（t2）、Ｆ（t3）、…Ｆ（tm）と
呼ぶ。すなわち、 となる。
なお、本実施例では試料S1の測定終了後、試料S2、…試
料Snの測定を順次行ったので、白血球を測定するための
検出装置は１台用意すれば良いが、試料S1、S2、…Snを
同時に測定する場合には、検出装置をｎ台用意する必要
がある。
料Snの測定を順次行ったので、白血球を測定するための
検出装置は１台用意すれば良いが、試料S1、S2、…Snを
同時に測定する場合には、検出装置をｎ台用意する必要
がある。
得られた細胞の粒度分布データＦ（t1）、Ｆ（t2）、Ｆ
（t3）、…Ｆ（tm）から細胞の粒度分布曲線を描くと、
それぞれ第４図の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）および（ｄ）
の如くになる。
（t3）、…Ｆ（tm）から細胞の粒度分布曲線を描くと、
それぞれ第４図の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）および（ｄ）
の如くになる。
これらの細胞の粒度分布曲線の中から、最も多くの山が
明確に現われているものを選ぶ。たとえば、第４図の中
からは（ｃ）が選ばれる。
明確に現われているものを選ぶ。たとえば、第４図の中
からは（ｃ）が選ばれる。
選ばれた細胞の粒度分布曲線を解析し、各々の山に含ま
れる細胞数の全白血球数に対する比率を計算する。各々
の山が白血球中のどの種の細胞に対応しているかは、顕
微鏡による細胞観察によって、予め同定されている。し
たがって、全白血球数中の各細胞（リンパ球、単球等）
の比率が決定される。
れる細胞数の全白血球数に対する比率を計算する。各々
の山が白血球中のどの種の細胞に対応しているかは、顕
微鏡による細胞観察によって、予め同定されている。し
たがって、全白血球数中の各細胞（リンパ球、単球等）
の比率が決定される。
なお、得られた細胞の粒度分布データＦ（t1）、Ｆ
（t2）、Ｆ（t3）、…Ｆ（tm）から、第２図および第３
図の様な時間ｔの要素を入れた分布図を描くことも容易
である。第２図、第３図からは細胞の粒度分布の時間変
化を見ることが出来、各細胞が時間経過とともにどの様
に動くかが良く判る。また、検体によって時間変化の仕
方が異なり、異常検体の抽出を行うことも出来る。
（t2）、Ｆ（t3）、…Ｆ（tm）から、第２図および第３
図の様な時間ｔの要素を入れた分布図を描くことも容易
である。第２図、第３図からは細胞の粒度分布の時間変
化を見ることが出来、各細胞が時間経過とともにどの様
に動くかが良く判る。また、検体によって時間変化の仕
方が異なり、異常検体の抽出を行うことも出来る。
なお、最良の細胞の粒度分布が得られる小期間は、検体
や測定温度によって変る可能性があるが、いずれにして
も最良の小期間の細胞の粒度分布を選べば良いので、本
実施例では、白血球測定開始時刻T1や測定終了時刻T2の
設定は、従来の様に厳密でなくても良い。T1からT2まで
の時間Ｔの間のいずれかの小期間に最良の細胞の粒度分
布が得られる様にすれば良い。最後に、細胞の粒度分布
曲線の時間変化を示す分布図を表示装置５に描かせる。
や測定温度によって変る可能性があるが、いずれにして
も最良の小期間の細胞の粒度分布を選べば良いので、本
実施例では、白血球測定開始時刻T1や測定終了時刻T2の
設定は、従来の様に厳密でなくても良い。T1からT2まで
の時間Ｔの間のいずれかの小期間に最良の細胞の粒度分
布が得られる様にすれば良い。最後に、細胞の粒度分布
曲線の時間変化を示す分布図を表示装置５に描かせる。
本発明により、次の様な効果が得られる。
（１） 測定時間を小期間に区切ってデータを蓄積する
ので、細胞の変化途中の最良の粒度分布曲線が得られ
る。
ので、細胞の変化途中の最良の粒度分布曲線が得られ
る。
（２） 測定時間中の最良の小期間に得られるデータを
使用すれば良いので、測定開始時刻や終了時刻について
の最適条件を選定する必要がない。
使用すれば良いので、測定開始時刻や終了時刻について
の最適条件を選定する必要がない。
（３） 測定時間中の細胞の大きさの変化をモニターす
ることが出来るので、時間変化の仕方が特異的な異常検
体を抽出することが出来る。
ることが出来るので、時間変化の仕方が特異的な異常検
体を抽出することが出来る。
第１図は本発明の細胞粒度分布測定法を実施する装置の
一例を示すブロック図、第２図は白血球の体積（Ｖ）を
横軸に、頻度（ｆ）を縦軸にとって３次元的に描いた細
胞の粒度分布曲線図、第３図は第２図の曲線を体積
（Ｖ）と時間（ｔ）との２次元分布図に描き直した細胞
の粒度分布曲線図、第４図（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、
（ｄ）は第３図に示す分布図において、測定時間をｍ個
の小期間に区切り、各小期間における体積（Ｖ）と頻度
（ｆ）との２次元分布を示す細胞の粒度分布曲線図、第
５図は第４図（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）を加え合
わせて描いた細胞の粒度分布曲線図、第６図（ａ）は測
定時間Ｔを分割しない場合の時間経過を示す線図、第６
図（ｂ）は測定時間を小期間に分割する場合の時間経過
を示す線図である。 １……希釈装置、２……粒度分布分析装置、３……記憶
装置、４……演算装置、５……表示装置
一例を示すブロック図、第２図は白血球の体積（Ｖ）を
横軸に、頻度（ｆ）を縦軸にとって３次元的に描いた細
胞の粒度分布曲線図、第３図は第２図の曲線を体積
（Ｖ）と時間（ｔ）との２次元分布図に描き直した細胞
の粒度分布曲線図、第４図（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、
（ｄ）は第３図に示す分布図において、測定時間をｍ個
の小期間に区切り、各小期間における体積（Ｖ）と頻度
（ｆ）との２次元分布を示す細胞の粒度分布曲線図、第
５図は第４図（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）を加え合
わせて描いた細胞の粒度分布曲線図、第６図（ａ）は測
定時間Ｔを分割しない場合の時間経過を示す線図、第６
図（ｂ）は測定時間を小期間に分割する場合の時間経過
を示す線図である。 １……希釈装置、２……粒度分布分析装置、３……記憶
装置、４……演算装置、５……表示装置
Claims (1)
- 【請求項１】つぎの（ａ）〜（ｅ）の各工程、すなわ
ち、 （ａ） 同一に作製されたｎ個の細胞浮遊液試料を粒度
分布分析装置に導入し、細胞浮遊液試料が１個の場合の
測定時間の総時間を小期間に区切り、各小期間における
ｎ個の細胞浮遊液試料の細胞の粒度分布を測定する工程 （ｂ） 各小期間に得られた各細胞浮遊液試料ごとの細
胞の粒度分布データを記憶装置に記憶させる工程 （ｃ） ｎ個の細胞浮遊液試料から得られた各試料ごと
の細胞の粒度分布データを演算装置で加算し、各小期間
ごとの細胞の粒度分布曲線を描かせる工程 （ｄ） 上記演算装置において、各小期間ごとの細胞の
粒度分布曲線から細胞浮遊液試料中の細胞種を最も良く
分離する細胞の粒度分布曲線を選定させる工程 （ｅ） 上記演算装置において、選定された細胞の粒度
分布曲線を解析し、各細胞種の存在比率を算定させる工
程 を包含することを特徴とする細胞粒度分布測定法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62057760A JPH0772711B2 (ja) | 1987-03-12 | 1987-03-12 | 細胞粒度分布測定法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62057760A JPH0772711B2 (ja) | 1987-03-12 | 1987-03-12 | 細胞粒度分布測定法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63222239A JPS63222239A (ja) | 1988-09-16 |
| JPH0772711B2 true JPH0772711B2 (ja) | 1995-08-02 |
Family
ID=13064833
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62057760A Expired - Lifetime JPH0772711B2 (ja) | 1987-03-12 | 1987-03-12 | 細胞粒度分布測定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0772711B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3165254B2 (ja) * | 1992-07-27 | 2001-05-14 | シスメックス株式会社 | 粒子の多次元分布の表示方法 |
-
1987
- 1987-03-12 JP JP62057760A patent/JPH0772711B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS63222239A (ja) | 1988-09-16 |
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