JPH0776571A - アブシジン酸の単離方法 - Google Patents
アブシジン酸の単離方法Info
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- JPH0776571A JPH0776571A JP22334793A JP22334793A JPH0776571A JP H0776571 A JPH0776571 A JP H0776571A JP 22334793 A JP22334793 A JP 22334793A JP 22334793 A JP22334793 A JP 22334793A JP H0776571 A JPH0776571 A JP H0776571A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 アブシジン酸を含む水溶液を、水と混合しな
い有機溶媒と接触させ、前記水溶液からアブシジン酸を
有機溶媒に移行せしめる抽出工程、抽出工程で分離され
たアブシジン酸を含む有機層を濃縮して、アブシジン酸
と前記有機溶媒を分離する濃縮工程、濃縮工程で分離さ
れた有機溶媒を抽出工程にリサイクルする工程および濃
縮工程で濃縮されたアブシジン酸濃縮液から晶析分離に
よりアブシジン酸を単離する工程、からなることを特徴
とするアブシジン酸の単離方法。 【効果】 有機溶媒の使用量を少なく、アブシジン酸を
含む希薄溶液から効率よく、高収率でアブシジン酸を単
離できる。また、単離されたアブシジン酸はその後の精
製負荷を下げ工業的に安価な高純度ＡＢＡを得ることが
可能である。
い有機溶媒と接触させ、前記水溶液からアブシジン酸を
有機溶媒に移行せしめる抽出工程、抽出工程で分離され
たアブシジン酸を含む有機層を濃縮して、アブシジン酸
と前記有機溶媒を分離する濃縮工程、濃縮工程で分離さ
れた有機溶媒を抽出工程にリサイクルする工程および濃
縮工程で濃縮されたアブシジン酸濃縮液から晶析分離に
よりアブシジン酸を単離する工程、からなることを特徴
とするアブシジン酸の単離方法。 【効果】 有機溶媒の使用量を少なく、アブシジン酸を
含む希薄溶液から効率よく、高収率でアブシジン酸を単
離できる。また、単離されたアブシジン酸はその後の精
製負荷を下げ工業的に安価な高純度ＡＢＡを得ることが
可能である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はアブシジン酸（以下、Ａ
ＢＡと略記する）の単離方法に関する。
ＢＡと略記する）の単離方法に関する。
【０００２】ＡＢＡは天然型植物ホルモンとして重要な
化合物であり、広い用途が期待されている。
化合物であり、広い用途が期待されている。
【０００３】
【従来の技術】従来醗酵法によるＡＢＡは、セルコスポ
ラ・ロシコラおよびボトリチス・シネレアによる液体培
養および固体培養で生成し、得られた培養液および培養
物から有機溶媒で抽出し、その抽出液を濃縮する方法
（特公昭６０−６６２９号公報、特公昭６１−３５８３
８号公報）、また、得た培養液をイオン交換樹脂および
吸着樹脂に通液したあと、溶媒で溶出しその溶出液を濃
縮する方法（特公平３−６１３９号公報）などにより単
離する方法が知られている。
ラ・ロシコラおよびボトリチス・シネレアによる液体培
養および固体培養で生成し、得られた培養液および培養
物から有機溶媒で抽出し、その抽出液を濃縮する方法
（特公昭６０−６６２９号公報、特公昭６１−３５８３
８号公報）、また、得た培養液をイオン交換樹脂および
吸着樹脂に通液したあと、溶媒で溶出しその溶出液を濃
縮する方法（特公平３−６１３９号公報）などにより単
離する方法が知られている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかし、前者法は多量
の溶媒を使用し、かつ、その多量の抽出液を濃縮しなけ
ればならず煩雑である。また。後者法は多量の樹脂およ
び多量の溶出溶媒を使用し、かつ、その多量の溶出液を
濃縮するなど煩雑であり、いずれの方法もＡＢＡの工業
的な生産に適さない。
の溶媒を使用し、かつ、その多量の抽出液を濃縮しなけ
ればならず煩雑である。また。後者法は多量の樹脂およ
び多量の溶出溶媒を使用し、かつ、その多量の溶出液を
濃縮するなど煩雑であり、いずれの方法もＡＢＡの工業
的な生産に適さない。
【０００５】
【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは、
ＡＢＡを含む水溶液からＡＢＡを効率よく選択的に高収
率で単離する方法を鋭意検討した結果、本発明に到達し
た。
ＡＢＡを含む水溶液からＡＢＡを効率よく選択的に高収
率で単離する方法を鋭意検討した結果、本発明に到達し
た。
【０００６】すなわち、本発明は(i) ＡＢＡを含む水溶
液を、水と混合しない有機溶媒と接触させ、前記水溶液
から前記ＡＢＡを前記有機溶媒に移行せしめる抽出工
程、(ii)前記(i) 抽出工程で分離された前記ＡＢＡを含
む有機層を濃縮してＡＢＡと有機溶媒を分離する濃縮工
程、(iii) 前記(ii)濃縮工程で分離された有機溶媒を前
記(i) 抽出工程にリサイクルする工程および(iv)前記(i
i)濃縮工程で濃縮されたＡＢＡ濃縮液から晶析分離によ
りＡＢＡを単離する工程、からなることを特徴とするＡ
ＢＡの単離方法である。
液を、水と混合しない有機溶媒と接触させ、前記水溶液
から前記ＡＢＡを前記有機溶媒に移行せしめる抽出工
程、(ii)前記(i) 抽出工程で分離された前記ＡＢＡを含
む有機層を濃縮してＡＢＡと有機溶媒を分離する濃縮工
程、(iii) 前記(ii)濃縮工程で分離された有機溶媒を前
記(i) 抽出工程にリサイクルする工程および(iv)前記(i
i)濃縮工程で濃縮されたＡＢＡ濃縮液から晶析分離によ
りＡＢＡを単離する工程、からなることを特徴とするＡ
ＢＡの単離方法である。
【０００７】以下、本発明を詳細に説明する。
【０００８】本発明では、まず、(i) ＡＢＡを含む水溶
液を、水と混合しない有機溶媒と接触させ、前記水溶液
から前記ＡＢＡを有機溶媒に移行せしめる抽出工程に供
する。
液を、水と混合しない有機溶媒と接触させ、前記水溶液
から前記ＡＢＡを有機溶媒に移行せしめる抽出工程に供
する。
【０００９】本発明で使用するＡＢＡを含む水溶液は、
特に限定されない。
特に限定されない。
【００１０】たとえば、ＡＢＡを生産することのできる
微生物を用いて培養された液体培養液および固体培養物
を熱水抽出した固体培養抽出水溶液などが挙げられる。
液体培養液を用いる場合は特に菌体を除去しなくても使
用できる。水溶液中のＡＢＡ濃度は０．００１〜５％が
好ましい。また、水溶液中のｐＨは通常１〜５であり、
２〜４が特に好ましい。
微生物を用いて培養された液体培養液および固体培養物
を熱水抽出した固体培養抽出水溶液などが挙げられる。
液体培養液を用いる場合は特に菌体を除去しなくても使
用できる。水溶液中のＡＢＡ濃度は０．００１〜５％が
好ましい。また、水溶液中のｐＨは通常１〜５であり、
２〜４が特に好ましい。
【００１１】水と混合しない有機溶媒は特に限定されな
いが、水と分離しＡＢＡを溶かす有機溶媒の中から選ば
れる。たとえば、酢酸エチル、酢酸ｎ−ブチルなどのエ
ステル類、ｎ−ブタノール、シクロヘキサノールなどの
アルコール類、メチルエチルケトン、メチルイソブチル
ケトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、エチルイソ
プロピルエーテルなどのエーテル類、クロロホルム、ジ
クロロエタンなどのハロゲン化炭化水素などが挙げら
れ、それぞれ単独もしくは２種以上混合して用いられ
る。その溶媒量は特に限定されないが、ＡＢＡを含む水
溶液の重量に対して通常０．１〜３倍、本発明を特に効
果的に実施するためには０．１〜１倍が使用される。Ａ
ＢＡを含む水溶液と有機層との接触方法は任意であり、
バッチ法であっても連続法であってもよい。
いが、水と分離しＡＢＡを溶かす有機溶媒の中から選ば
れる。たとえば、酢酸エチル、酢酸ｎ−ブチルなどのエ
ステル類、ｎ−ブタノール、シクロヘキサノールなどの
アルコール類、メチルエチルケトン、メチルイソブチル
ケトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、エチルイソ
プロピルエーテルなどのエーテル類、クロロホルム、ジ
クロロエタンなどのハロゲン化炭化水素などが挙げら
れ、それぞれ単独もしくは２種以上混合して用いられ
る。その溶媒量は特に限定されないが、ＡＢＡを含む水
溶液の重量に対して通常０．１〜３倍、本発明を特に効
果的に実施するためには０．１〜１倍が使用される。Ａ
ＢＡを含む水溶液と有機層との接触方法は任意であり、
バッチ法であっても連続法であってもよい。
【００１２】かくしてＡＢＡを含む水溶液からＡＢＡを
有機溶媒に移行せしめる。
有機溶媒に移行せしめる。
【００１３】次に、本発明では、(ii)(i) 抽出工程で分
離されたＡＢＡを含む有機層を濃縮して、ＡＢＡと有機
溶媒を分離する濃縮工程に供する。
離されたＡＢＡを含む有機層を濃縮して、ＡＢＡと有機
溶媒を分離する濃縮工程に供する。
【００１４】濃縮方法は常圧濃縮、減圧濃縮のいずれで
もよいが、濃縮は通常、液温が６０℃以下、好ましくは
４５℃以下で行われる。液温が高すぎるとＡＢＡが分解
するおそれがある。
もよいが、濃縮は通常、液温が６０℃以下、好ましくは
４５℃以下で行われる。液温が高すぎるとＡＢＡが分解
するおそれがある。
【００１５】さらに、本発明では、(iii)(ii) 濃縮工程
で前記ＡＢＡから分離された有機溶媒を(i) 抽出工程に
リサイクルする工程に供する。
で前記ＡＢＡから分離された有機溶媒を(i) 抽出工程に
リサイクルする工程に供する。
【００１６】一方、本発明では、(iv)(ii)濃縮工程で濃
縮された前記ＡＢＡを含む濃縮液は、晶析分離して前記
ＡＢＡを単離する工程に供する。ＡＢＡを含む濃縮液か
らＡＢＡを単離する方法は特に限定されない。たとえ
ば、濃縮液をそのまま冷却してＡＢＡを晶析した後、固
液分離するか、更に濃縮してから冷却晶析した後、固液
分離する方法などが挙げられる。
縮された前記ＡＢＡを含む濃縮液は、晶析分離して前記
ＡＢＡを単離する工程に供する。ＡＢＡを含む濃縮液か
らＡＢＡを単離する方法は特に限定されない。たとえ
ば、濃縮液をそのまま冷却してＡＢＡを晶析した後、固
液分離するか、更に濃縮してから冷却晶析した後、固液
分離する方法などが挙げられる。
【００１７】かくして単離したＡＢＡは既知の晶析精製
方法で、つまり、有機溶媒で均一液としたあと、その均
一液を冷却したり、あるいは濃縮したりしてＡＢＡを結
晶化させ、高純度品にできる。
方法で、つまり、有機溶媒で均一液としたあと、その均
一液を冷却したり、あるいは濃縮したりしてＡＢＡを結
晶化させ、高純度品にできる。
【００１８】(i) 抽出工程の抽出槽は特に限定されない
が、一般の抽出槽および抽出塔あるいは培養槽が使用さ
れる。その抽出槽の撹拌は、槽の型にもよるが１００〜
１，０００rpm の回転数が好ましい。また、その抽出槽
の温度は特に限定されないが、０〜５０℃で管理される
のが好ましい。
が、一般の抽出槽および抽出塔あるいは培養槽が使用さ
れる。その抽出槽の撹拌は、槽の型にもよるが１００〜
１，０００rpm の回転数が好ましい。また、その抽出槽
の温度は特に限定されないが、０〜５０℃で管理される
のが好ましい。
【００１９】以下、本発明の一実施態様を図１のフロー
に従って説明する。
に従って説明する。
【００２０】抽出工程の(1) の抽出槽でＡＢＡを含む水
溶液に水と混合しない有機溶媒を接触させる。(2) のポ
ンプで(1) の抽出槽のＡＢＡを含む有機層を濃縮工程
(3) の濃縮槽に供給し、蒸留して有機層とＡＢＡを分離
する。(5) のポンプで(4) の留出受槽で蒸留回収した有
機層を抽出工程の(1) の抽出槽に循環させる。(6) のポ
ンプで(3) の濃縮槽で濃縮されたＡＢＡを含む濃縮液を
単離工程に供給し、ＡＢＡを単離する。
溶液に水と混合しない有機溶媒を接触させる。(2) のポ
ンプで(1) の抽出槽のＡＢＡを含む有機層を濃縮工程
(3) の濃縮槽に供給し、蒸留して有機層とＡＢＡを分離
する。(5) のポンプで(4) の留出受槽で蒸留回収した有
機層を抽出工程の(1) の抽出槽に循環させる。(6) のポ
ンプで(3) の濃縮槽で濃縮されたＡＢＡを含む濃縮液を
単離工程に供給し、ＡＢＡを単離する。
【００２１】
【実施例】以下実施例によって本発明を具体的に示す。
【００２２】実施例１ グルコース４％、酵母エキス０．３％、燐酸１カリウム
０．２％、塩化カリウム０．１％、硫酸マグネシウム水
和物０．０２％、ポリオキシエチレンモノステアリン酸
ソルビタン０．０１％からなる液体培地を５００ml容バ
ッフル付きフラスコ５本に５０mlずつ加え、１２０℃１
５分加圧蒸気滅菌した。これにボトリチス・シネレアＦ
ＥＲＭ Ｐ−６１５６の前培養菌液を４％ずつ植菌し、
回転数１８０rpm 、振幅７cmで、２５℃７日間培養し、
ＡＢＡ濃度０．０５％の培養液を得た。
０．２％、塩化カリウム０．１％、硫酸マグネシウム水
和物０．０２％、ポリオキシエチレンモノステアリン酸
ソルビタン０．０１％からなる液体培地を５００ml容バ
ッフル付きフラスコ５本に５０mlずつ加え、１２０℃１
５分加圧蒸気滅菌した。これにボトリチス・シネレアＦ
ＥＲＭ Ｐ−６１５６の前培養菌液を４％ずつ植菌し、
回転数１８０rpm 、振幅７cmで、２５℃７日間培養し、
ＡＢＡ濃度０．０５％の培養液を得た。
【００２３】３リットルジャーファーメンターにこの培
養液１，０００ｇとメチルイソブチルケトン溶媒５００
mlを仕込み、室温下３００rpm で撹拌した。このジャー
ファーメンターの上澄液のＡＢＡを抽出したメチルイソ
ブチルケトン層を１５ml/min速度の定量ポンプで１００
mlの蒸留装置に供給した。蒸留装置は２５Torrの減圧に
保ち、供給されるメチルイソブチルケトン量と留出する
メチルイソブチルケトン量がバランスするように加熱し
ながら蒸留した。
養液１，０００ｇとメチルイソブチルケトン溶媒５００
mlを仕込み、室温下３００rpm で撹拌した。このジャー
ファーメンターの上澄液のＡＢＡを抽出したメチルイソ
ブチルケトン層を１５ml/min速度の定量ポンプで１００
mlの蒸留装置に供給した。蒸留装置は２５Torrの減圧に
保ち、供給されるメチルイソブチルケトン量と留出する
メチルイソブチルケトン量がバランスするように加熱し
ながら蒸留した。
【００２４】次いで、この留出したメチルイソブチルケ
トン層を再び約１５ml／min 速度の定量ポンプでジャー
ファーメンターにリサイクルした。この操作を７時間行
った。
トン層を再び約１５ml／min 速度の定量ポンプでジャー
ファーメンターにリサイクルした。この操作を７時間行
った。
【００２５】蒸留装置に残った液を５mlまで濃縮した
後、冷却して析出結晶を濾過した。減圧乾燥し、純度７
５．１％のＡＢＡ０．４９ｇを得た。
後、冷却して析出結晶を濾過した。減圧乾燥し、純度７
５．１％のＡＢＡ０．４９ｇを得た。
【００２６】実施例２ 実施例１の培養液の替わりに、実施例１で得た培養液に
ＡＢＡを４．５ｇ添加した培養液１，０００ｇを使用し
た以外は実施例１と同じ方法で行った。実施例１と同じ
ように処理し、純度９２．３％のＡＢＡ５．０４ｇを得
た。
ＡＢＡを４．５ｇ添加した培養液１，０００ｇを使用し
た以外は実施例１と同じ方法で行った。実施例１と同じ
ように処理し、純度９２．３％のＡＢＡ５．０４ｇを得
た。
【００２７】実施例３ 実施例１のメチルイソブチルケトン溶媒５００mlの代り
に１−ブタノール溶媒５００mlを使用した以外は実施例
１と同じ方法で行った。実施例１と同じように処理し、
純度７０．１％のＡＢＡ０．５３ｇを得た。
に１−ブタノール溶媒５００mlを使用した以外は実施例
１と同じ方法で行った。実施例１と同じように処理し、
純度７０．１％のＡＢＡ０．５３ｇを得た。
【００２８】比較例１ 実施例１と同じ培養液１，０００ｇとメチルイソブチル
ケトン溶媒５００mlを３リットルジャーファーメンター
に仕込み、室温下３００rpm で１時間撹拌した後、撹拌
をとめ上澄液のメチルイソブチルケトン層だけを抜出し
た。さらにメチルイソブチルケトン溶媒５００mlを仕込
み、同じ操作を繰返した。この操作を計３回行い、得ら
れたメチルイソブチルケトン層を温水バス約４５℃、２
５ｔｏｒｒの減圧下で濃縮し、純度６０．５％のＡＢＡ
０．７８ｇを得た。
ケトン溶媒５００mlを３リットルジャーファーメンター
に仕込み、室温下３００rpm で１時間撹拌した後、撹拌
をとめ上澄液のメチルイソブチルケトン層だけを抜出し
た。さらにメチルイソブチルケトン溶媒５００mlを仕込
み、同じ操作を繰返した。この操作を計３回行い、得ら
れたメチルイソブチルケトン層を温水バス約４５℃、２
５ｔｏｒｒの減圧下で濃縮し、純度６０．５％のＡＢＡ
０．７８ｇを得た。
【００２９】
【発明の効果】本発明によれば大量の有機溶媒を使用す
ることなく、効率的にＡＢＡを含む水溶液から、高収率
でＡＢＡを単離できる。また、単離されたＡＢＡはその
後の精製負荷を下げ工業的に安価な高純度ＡＢＡを得る
ことが可能である。
ることなく、効率的にＡＢＡを含む水溶液から、高収率
でＡＢＡを単離できる。また、単離されたＡＢＡはその
後の精製負荷を下げ工業的に安価な高純度ＡＢＡを得る
ことが可能である。
【図１】 本発明の一実施態様を示すフロー。
(1) 抽出槽 (2) ポンプ (3) 濃縮槽 (4) 留出受槽 (5) ポンプ (6) ポンプ
Claims (2)
- 【請求項１】 (i) アブシジン酸を含む水溶液を、水と
混合しない有機溶媒と接触させ、前記水溶液から前記ア
ブシジン酸を前記有機溶媒に移行せしめる抽出工程、(i
i)前記(i) 抽出工程で分離された前記アブシジン酸を含
む有機層を濃縮してアブシジン酸と有機溶媒を分離する
濃縮工程、(iii) 前記(ii)濃縮工程で分離された有機溶
媒を前記(i) 抽出工程にリサイクルする工程および(iv)
前記(ii)濃縮工程で濃縮されたアブシジン酸濃縮液から
晶析分離によりアブシジン酸を単離する工程からなるこ
とを特徴とするアブシジン酸の単離方法。 - 【請求項２】 (i) 〜(iii) 工程の接触およびリサイク
ルを連続して行う請求項１記載のアブシジン酸の単離方
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22334793A JPH0776571A (ja) | 1993-09-08 | 1993-09-08 | アブシジン酸の単離方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22334793A JPH0776571A (ja) | 1993-09-08 | 1993-09-08 | アブシジン酸の単離方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0776571A true JPH0776571A (ja) | 1995-03-20 |
Family
ID=16796744
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22334793A Pending JPH0776571A (ja) | 1993-09-08 | 1993-09-08 | アブシジン酸の単離方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0776571A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117296849A (zh) * | 2023-09-21 | 2023-12-29 | 江西新瑞丰生化股份有限公司 | 一种基于s-诱抗素生产残液制备植物生长调节固剂的方法 |
-
1993
- 1993-09-08 JP JP22334793A patent/JPH0776571A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117296849A (zh) * | 2023-09-21 | 2023-12-29 | 江西新瑞丰生化股份有限公司 | 一种基于s-诱抗素生产残液制备植物生长调节固剂的方法 |
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