JPH0782148A

JPH0782148A - 免疫抑制剤

Info

Publication number: JPH0782148A
Application number: JP22586593A
Authority: JP
Inventors: Takashi Sakamoto; 貴坂本; Yasuo Yanagihara; 康夫柳原; Tadashi Okada; 正岡田; Kazuhiko Hayashi; 一彦林; Takeshi Imaoka; 武今岡; Masaaki Motoyama; 晶章本山; Tadami Utsunomiya; 忠実宇都宮
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1993-09-10
Filing date: 1993-09-10
Publication date: 1995-03-28

Abstract

(57)【要約】【構成】本発明は、一般式【化１】〔式中ＲはＣ₁−Ｃ₆アルコキシメチル基を示す。〕で
表わされる５−フルオロウラシル誘導体を有効成分とす
る免疫抑制剤を提供するものである。【効果】本発明免疫抑制剤は、優れた免疫抑制作用を有
する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、５−フルオロウラシル
誘導体を含有する免疫抑制剤に関する。

【０００２】

【従来技術とその課題】本発明者らは従来より種々の薬
理作用を有する化合物につき鋭意研究を重ねてきたが、
その過程で、制癌作用を有する特定の５−フルオロウラ
シル誘導体を見出した（特開昭６３−２０１１２７号公
報）。

【０００３】一方、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）
や５′−デオキシ−５−フルオロウリジン（５′−ＤＦ
ＵＲ）が免疫抑制作用を有することは、既に報告されて
いる（Ohta, Y., et al., Gann, 71, 190-196,(1980)）
が、該報告によれば、５′−ＤＦＵＲの免疫抑制作用は
５−ＦＵのそれに比して弱いとされており、之等の各薬
理作用間には関連性は見出せない。

【０００４】しかして、本発明者らは更に引き続く研究
の結果、先に開発した上記特定の５−フルオロウラシル
誘導体が、特に優れた免疫抑制作用を有するという新し
い事実を見出し、ここに本発明を完成するに至った。

【０００５】

【課題を解決するための手段】即ち、本発明は、一般式

【０００６】

【化２】

【０００７】〔式中ＲはＣ₁−Ｃ₆アルコキシメチル基
を示す。〕で表わされる５−フルオロウラシル誘導体を
有効成分とする免疫抑制剤に係わる。

【０００８】本発明において有効成分とする上記一般式
（１）の５−フルオロウラシル誘導体は、極めて優れた
免疫抑制作用を有し、しかも低毒性であり、人及び動物
の免疫抑制剤有効成分化合物として特に有用である。殊
に、上記化合物は、（１）吸収性がよい、（２）持続性
がよい、（３）安定性がよい、（４）下痢、おうと、消
化管出血等の消化管毒性が極めて少ない、（５）その本
来の免疫抑制作用を奏する投与量と毒性を惹起する投与
量との差が大きく治療係数が優れ、安全性が高い等の優
れた特徴を具備している。

【０００９】従って本発明は、一般式（１）の５−フル
オロウラシル誘導体の有効量を、薬理的に許容される担
体と共に含有する免疫抑制剤を提供する。

【００１０】本明細書において、上記一般式（１）で示
されるＣ₁−Ｃ₆アルコキシメチル基としては、メトキ
シメチル、エトキシメチル、１−プロポキシメチル、イ
ソプロポキシメチル、１−ブトキシメチル、２−ブトキ
シメチル、tert−ブトキシメチル、１−ペンチルオキシ
メチル、１−ヘキシルオキシメチル基等を例示できる。

【００１１】上記一般式（１）の化合物の内でも、Ｒが
エトキシメチル基又はメトキシメチル基である化合物は
好ましい。特に、３−〔３−（６−ベンゾイルオキシ−
３−シアノ−２−ピリジルオキシカルボニル）ベンゾイ
ル〕−１−（エトキシメチル）−５−フルオロウラシル
は最も好ましい化合物である。

【００１２】上記一般式（１）で表わされる化合物は、
公知であり、公知の方法により製造できる（前記特開昭
６３−２０１１２７号公報参照）。

【００１３】上記化合物は、通常一般的な医薬製剤の形
態で人を含む哺乳類に投与される。製剤は通常使用され
る充填剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢
剤等の希釈剤あるいは賦形剤を用いて調製される。この
医薬製剤としては各種の形態が治療目的に応じて選択で
き、その代表的なものとして錠剤、丸剤、散剤、液剤、
懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤（液
剤、懸濁剤等）、軟膏剤等が挙げられる。

【００１４】錠剤の形態に成形するに際しては、担体と
して例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿
素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロ
ース、ケイ酸等の賦形剤、単シロツプ、ブドウ糖液、デ
ンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロー
ス、セラツク、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポ
リビニルピロリドン等の結合剤、乾燥デンプン、アルギ
ン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素
ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソル
ビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ス
テアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊
剤、白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の
崩壊抑制剤、第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナ
トリウム等の吸収促進剤、グリセリン、デンプン等の保
湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロ
イド状ケイ酸等の吸着剤、精製タルク、ステアリン酸
塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等が
例示できる。さらに錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施し
た錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フ
イルムコーテイング錠あるいは二重錠、多層錠とするこ
とができる。

【００１５】丸剤の形態に成形するに際しては、担体と
して例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化
植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム
末、トラガント末、ゼラチン等の結合剤、ラミナラン、
カンテン等の崩壊剤等が例示できる。

【００１６】坐剤の形態に成形するに際しては、担体と
して例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高級ア
ルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半
合成グリセライド等を使用できる。

【００１７】カプセル剤は常法に従い通常有効成分化合
物を上記で例示した各種の担体と混合して硬質ゼラチン
カプセル、軟質カプセル等に充填して調製される。

【００１８】注射剤として調製される場合、液剤、乳剤
及び懸濁剤は殺菌され、かつ血液と等張であるのが好ま
しく、これらの形態に成形するに際しては、希釈剤とし
て例えば水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピ
レングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコー
ル、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキ
シエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を使用でき
る。なお、この場合等張性の溶液を調製するに充分な量
の食塩、ブドウ糖あるいはグリセリンを医薬製剤中に含
有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無
痛化剤等を添加してもよい。

【００１９】更に必要に応じて着色剤、保存剤、香料、
風味剤、甘味剤等や他の医薬品を医薬製剤中に含有せし
めてもよい。

【００２０】ペースト、クリーム及びゲルの形態に成形
するに際しては、希釈剤として例えば白色ワセリン、パ
ラフイン、グリセリン、セルロース誘導体、ポリエチレ
ングリコール、シリコン、ベントナイト等を使用でき
る。

【００２１】本発明免疫抑制剤中に含有されるべき、前
記一般式（１）で表わされる有効成分化合物の量として
は、特に限定されず広範囲に適宜選択されるが、通常医
薬製剤中１〜７０重量％とするのがよい。

【００２２】上記医薬製剤の投与方法は特に制限はな
く、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、患
者の症状の程度等に応じて決定される。例えば錠剤、丸
剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤は経口
投与される。注射剤は単独であるいはブドウ糖、アミノ
酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、更に必要
に応じて単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与
される。坐剤は直腸内投与される。

【００２３】上記医薬製剤の投与量は用法、患者の年
齢、性別その他の条件、疾患の程度等により適宜選択さ
れるが、通常有効成分である本発明化合物の量が１日当
り体重１ｋｇ当り約１〜２００ｍｇ程度とするのがよ
く、該製剤は１日に１〜４回に分けて投与することがで
きる。

【００２４】

【実施例】以下本発明有効成分化合物につき行なわれた
薬理試験例を挙げ、次いで本発明免疫抑制剤の調製例を
製剤例として挙げる。

【００２５】

【薬理試験例１】本発明有効成分化合物として、特開昭
６３−２０１１２７号公報中実施例１に記載の３−〔３
−（６−ベンゾイルオキシ−３−シアノ−２−ピリジル
オキシカルボニル）ベンゾイル〕−１−（エトキシメチ
ル）−５−フルオロウラシルを用いた。該化合物を１％
ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）水溶
液に入れ、約３０分間攪拌後、氷水中で約１０分間超音
波処理して均一な懸濁液形態とし、これを更に同ＨＰＭ
Ｃ水溶液で希釈して、化合物濃度がそれぞれ５、１０、
２０及び４０ｍｇ／１０ｍｌの懸濁液を調製した。

【００２６】１．体液性免疫に及ぼす作用試験緬羊保存血液（コスモバイオ社製、ＳＲＢＣ）を生理食
塩水で洗浄し、自動血球計数装置（Sysmex CC-130 東亜
医用電子社製）を用いて、２．１×１０⁹個／ｍｌとな
るように生理食塩水で調整後、その０．２５ｍｌをマウ
スの尾静脈より投与し、感作した。感作同日（感作日の
薬物投与はＳＲＢＣ感作の１時間後）より、供試薬物を
１日１回、４日間強制経口投与した（実験群）。尚、供
試薬物無添加（１％ＨＰＭＣ１０ｍｌ／ｋｇ投与）の対
照群を設けた。

【００２７】薬物投与の７日目にそれぞれのマウスをエ
ーテル麻酔下で後大静脈より採血し、血清を採取し、そ
の免疫溶血反応による抗体価（溶血素価）を、松橋らの
方法（松橋直ら、生物化学実験法１５，「免疫学実験入
門」、第１１１〜１１５頁、学会出版センター（１９８
３年））に従い測定した。

【００２８】即ち、上記溶血素価の測定は、各マウス抗
血清を５６℃、３０分間非働化後、ゼラチン−バルビタ
ール緩衝液（ＧＶＢ）にて１０倍希釈から出発した倍々
希釈系列を作成し、その５０μｌを９６ウェルマイクロ
プレートに入れ、補体としてモルモットより得た異種抗
体を除いた補体血清（寒冷飽和したもの）５０μｌを加
えて混和後、５．２×１０⁸個／ｍｌの濃度に調整した
ＳＲＢＣ懸濁液５０μｌを加えてよく混和し、３７℃に
て２４時間保温した。対照としてＧＶＢ−補体−赤血球
及び正常血清−補体−赤血球の組合わせを作った。

【００２９】溶血素価の判定は、基準となる溶血サンプ
ルを作り、マイクロプレートの底に沈んだ赤血球の円の
大きさと、各試料のそれとを比較して行なった。溶血サ
ンプルは５．２×１０⁸個／ｍｌのＳＲＢＣ懸濁液１ｍ
ｌを遠心し、その沈渣に蒸留水０．４８ｍｌを加え、赤
血球を完全に溶血後、１．７％食塩液０．５ｍｌを加え
て作成した溶血液にＳＲＢＣ懸濁液及びＧＶＢを以下の
割合に混合して作った。各混合サンプル１５０μｌをマ
イクロプレートに入れ、検体と同様にして３７℃にて２
４時間保温し、判定の基準とした。

【００３０】混合サンプル組成（μｌ）：１００％溶血７５％溶血５０％溶血不溶血溶血液１００７５５００ＳＲＢＣ懸濁液０２５５０１００ＧＶＢ２００２００２００２００本実験では、７５％溶血以上の溶血が認められる場合を
陽性とし、その最高希釈倍数をもって力価（溶血素価）
とした。尚、プレートの底にできる赤血球の円をできる
だけ明瞭にするため、判定は保温終了２４時間にて行な
った。

【００３１】上記試験の結果を表１に示す。尚、各結果
は平均値±標準偏差で表わされ、平均値間の有意差を、
ノンパラメトリックダネットテスト（nonparametric Du
nnett's test）により検定し、ｐ＜０．０５には＊印
を、ｐ＜０．０１には＊＊印を付して表記した。

【００３２】

【表１】

【００３３】上記表１より、対照群のマウスのＳＲＢＣ
感作７日目の溶血素価の平均は、６８６であったのに対
して、本発明有効成分化合物投与群（実験群）では、４
日間連続投与によって、用量依存的に低下することが明
らかである。

【００３４】２．細胞性免疫に及ぼす作用試験入荷後１週間訓化飼育した各マウスの腹部を剃毛し、翌
日無傷のマウスを選び、感作抗原（７％塩化ピクリル(p
icrylchloride,東京化成試薬特級) のエタノール溶液）
１００μｌを、腹部に塗布した。その翌日より供試薬物
を上記１．の体液性免疫に及ぼす作用試験と同じ投与量
で１日１回６日間強制経口投与して、感作した（実験
群）。対照群も同様とした。

【００３５】感作７日目にマウスの両耳の厚さをダイヤ
ルシックネスゲージ（尾崎製作所社製）を用いて測定
し、前値とした。その後、マウスの両耳にそれぞれ１０
μｌずつ（耳の裏表各５μｌずつ）惹起抗原（１％塩化
ピクリルのオリーブオイル溶液）を塗布し、２４時間後
に再度両耳の厚さを測定し、後値とした。

【００３６】判定は、左右両耳の後値と前値との差を求
めてその平均を耳の厚さの増加量とした。また得られた
増加量より下式に従って抑制率（％）を求めた。

【００３７】抑制率（％）＝（１−Ｔ／Ｃ）×１００Ｔ＝供試薬物投与群（実験群）の耳の厚さの増加量Ｃ＝対照群の耳の厚さの増加量。

【００３８】上記試験の結果を表１と同様にして表２に
示す。

【００３９】

【表２】

【００４０】表２から、塩化ピクリルによる２４時間後
の遅延型過敏反応に対して、本発明有効成分化合物は、
高用量で抑制傾向を示す（２０ｍｇ／ｋｇ投与にて４６
％、４０ｍｇ／ｋｇ投与にて３１％）ことが判る。

【００４１】３．免疫臓器に及ぼす作用試験入荷後１週間訓化飼育したマウスに供試薬物を上記１．
及び２．の試験と同一投与量で１日１回７日間強制経口
投与し、マウスの一般状態を投与期間中毎日（供試薬物
投与の前後にそれぞれ）観察した。

【００４２】各群マウス体重を、群分け日から剖検日
（最終投与の翌日）まで、毎日その日の供試薬物投与前
に測定した。

【００４３】また、剖検日にエーテル麻酔下で後大静脈
から採血し、自動血球計数装置（Sysmex F-800、東亜医
用電子社製）を用いて、末梢白血球数を求めた。

【００４４】更に、剖検日に採血後放血死させ、その後
免疫臓器としての胸腺及び脾臓の重量を測定した。

【００４５】その結果、一般状態は各群とも投与期間中
特に変化はなかった。

【００４６】また、末梢白血球数、胸腺重量及び脾臓重
量の結果を、表１と同様にして表３に示す。

【００４７】

【表３】

【００４８】表３より、本発明有効成分化合物は、末梢
白血球数に対しては、４０ｍｇ／ｋｇ投与にて２０．５
％の減少傾向を示し、胸腺重量に対しては、２０ｍｇ／
ｋｇ及び４０ｍｇ／ｋｇ投与にて、それぞれ６９．１％
及び７４．５％の有意な減少を示し、また脾臓重量に対
しては、４０ｍｇ／ｋｇ投与にて１６．９％の減少傾向
を示した。

【００４９】以下、３−〔３−（６−ベンゾイルオキシ
−３−シアノ−２−ピリジルオキシカルボニル）ベンゾ
イル〕−１−（エトキシメチル）−５−フルオロウラシ
ルを有効成分化合物として用いた本発明免疫抑制剤の製
剤例を挙げる。

【００５０】製剤例１１錠中、上記組成物の錠剤を製造した。

【００５１】製剤例２１錠中、上記組成物の錠剤を製造した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者今岡武滋賀県大津市美空町２番７−303号 (72)発明者本山晶章滋賀県大津市富士見台８番20−402号 (72)発明者宇都宮忠実滋賀県野洲郡野洲町大字三上2112番地の72

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式【化１】〔式中ＲはＣ₁−Ｃ₆アルコキシメチル基を示す。〕で
表わされる５−フルオロウラシル誘導体を有効成分とす
る免疫抑制剤。