JPH0799996A - パーオキシダーゼ活性測定用試薬及びそれを用いた測定方法 - Google Patents
パーオキシダーゼ活性測定用試薬及びそれを用いた測定方法Info
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- JPH0799996A JPH0799996A JP26781393A JP26781393A JPH0799996A JP H0799996 A JPH0799996 A JP H0799996A JP 26781393 A JP26781393 A JP 26781393A JP 26781393 A JP26781393 A JP 26781393A JP H0799996 A JPH0799996 A JP H0799996A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 （イ）ルミノールと過酸化水素とからなる基
質と、（ロ）一般式 【化１】 （式中、Ｒ1 及びＲ2 は水素原子又は低級アルキル基、
Ｒ3 は水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、水酸
基又はアミノ基である。）で表されるピリジン化合物と
一般式 【化２】 （式中、Ｘは水素原子、アルカリ金属又はアルカリ土類
金属である。）で表されるフェノチアジン化合物とから
なる活性増幅物質と、からなるパーオキシダーゼ活性測
定用試薬、及びパーオキシダーゼと、ルミノールと過酸
化水素とからなる基質と、前記一般式（Ｉ）で表される
ピリジン化合物と前記一般式（II）で表されるフェノチ
アジン化合物とからなる活性増幅物質とにより発生する
化学発光を測定することからなるパーオキシダーゼ活性
の測定方法である。 【効果】 本発明の活性増幅物質を用いることにより、
今まで測定することができなかった極微量のパーオキシ
ダーゼの活性を測定することができる。さらに本発明を
ＥＩＡに用いると従来の測定法に比べ高感度な測定が可
能である。
質と、（ロ）一般式 【化１】 （式中、Ｒ1 及びＲ2 は水素原子又は低級アルキル基、
Ｒ3 は水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、水酸
基又はアミノ基である。）で表されるピリジン化合物と
一般式 【化２】 （式中、Ｘは水素原子、アルカリ金属又はアルカリ土類
金属である。）で表されるフェノチアジン化合物とから
なる活性増幅物質と、からなるパーオキシダーゼ活性測
定用試薬、及びパーオキシダーゼと、ルミノールと過酸
化水素とからなる基質と、前記一般式（Ｉ）で表される
ピリジン化合物と前記一般式（II）で表されるフェノチ
アジン化合物とからなる活性増幅物質とにより発生する
化学発光を測定することからなるパーオキシダーゼ活性
の測定方法である。 【効果】 本発明の活性増幅物質を用いることにより、
今まで測定することができなかった極微量のパーオキシ
ダーゼの活性を測定することができる。さらに本発明を
ＥＩＡに用いると従来の測定法に比べ高感度な測定が可
能である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、パーオキシダーゼ活性
測定用試薬及びその試薬を用いた測定方法に関する。更
に詳しくは、（イ）ルミノールと過酸化水素とからなる
基質と、（ロ）一般式
測定用試薬及びその試薬を用いた測定方法に関する。更
に詳しくは、（イ）ルミノールと過酸化水素とからなる
基質と、（ロ）一般式
【化５】 （式中、Ｒ1 及びＲ2 は水素原子又は低級アルキル基で
あり、Ｒ3 は水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル
基、水酸基又はアミノ基である。）で表されるピリジン
化合物と一般式
あり、Ｒ3 は水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル
基、水酸基又はアミノ基である。）で表されるピリジン
化合物と一般式
【化６】 （式中、Ｘは水素原子、アルカリ金属又はアルカリ土類
金属である。）で表されるフェノチアジン化合物とから
なる活性増幅物質と、からなるパーオキシダーゼ活性測
定用試薬、及びパーオキシダーゼと、ルミノールと過酸
化水素とからなる基質と、前記一般式（Ｉ）で表される
ピリジン化合物と前記一般式（II）で表されるフェノチ
アジン化合物とからなる活性増幅物質とにより発生する
化学発光を測定することからなるパーオキシダーゼ活性
の測定方法である。
金属である。）で表されるフェノチアジン化合物とから
なる活性増幅物質と、からなるパーオキシダーゼ活性測
定用試薬、及びパーオキシダーゼと、ルミノールと過酸
化水素とからなる基質と、前記一般式（Ｉ）で表される
ピリジン化合物と前記一般式（II）で表されるフェノチ
アジン化合物とからなる活性増幅物質とにより発生する
化学発光を測定することからなるパーオキシダーゼ活性
の測定方法である。
【０００２】
【従来の技術】酵素免疫測定法（ＥＩＡ）は、高感度な
測定法として技術開発が行われている。中でも化学発光
基質を用いる測定法は、高感度化の達成のために有力な
手段であり、例えばルミノールを用いた化学発光法では
比色法の１０-14 ｍｏｌに比べパーオキシダーゼの検出
感度が１０-16 ｍｏｌであるとの報告がなされている
（蛋白質核酸酵素、別冊Ｎｏ．３１，ｐ５１〜６３，１
９８７年参照）。しかし化学発光法は、発光時間が短い
などの欠点を有しているため汎用されていなかった。そ
こでこの欠点を補う試みがなされ、ｐ−ヨードフェノー
ルを活性増幅物質として用いた化学発光法（Ｈ．Ａｌｌ
ａｎ，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ Ａｐｒ．，６３
０〜６３６，３５，（１９８８）参照）、あるいはイン
ドフェノール誘導体とフェノチアジン誘導体とを組み合
せて活性増幅物質として用いたパーオキシダーゼ活性の
化学発光測定法（特開平２−１７４６９４号参照）等が
見い出された。
測定法として技術開発が行われている。中でも化学発光
基質を用いる測定法は、高感度化の達成のために有力な
手段であり、例えばルミノールを用いた化学発光法では
比色法の１０-14 ｍｏｌに比べパーオキシダーゼの検出
感度が１０-16 ｍｏｌであるとの報告がなされている
（蛋白質核酸酵素、別冊Ｎｏ．３１，ｐ５１〜６３，１
９８７年参照）。しかし化学発光法は、発光時間が短い
などの欠点を有しているため汎用されていなかった。そ
こでこの欠点を補う試みがなされ、ｐ−ヨードフェノー
ルを活性増幅物質として用いた化学発光法（Ｈ．Ａｌｌ
ａｎ，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ Ａｐｒ．，６３
０〜６３６，３５，（１９８８）参照）、あるいはイン
ドフェノール誘導体とフェノチアジン誘導体とを組み合
せて活性増幅物質として用いたパーオキシダーゼ活性の
化学発光測定法（特開平２−１７４６９４号参照）等が
見い出された。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、これら
の活性増幅物質を用いる化学発光法は、持続した発光が
得られ、ある程度の高感度化が達成されたものの、微量
成分の測定には更なる感度が要求されているのが現状で
ある。そして有効な測定方法の出現が久しく期待されて
いた。
の活性増幅物質を用いる化学発光法は、持続した発光が
得られ、ある程度の高感度化が達成されたものの、微量
成分の測定には更なる感度が要求されているのが現状で
ある。そして有効な測定方法の出現が久しく期待されて
いた。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者は、更なる高感
度を求めて鋭意研究した結果、化学発光を利用しパーオ
キシダーゼ活性を測定するためルミノールと過酸化水素
とを基質として用いる方法において、前記一般式（Ｉ）
で表されるピリジン化合物と前記一般式（II）で表され
るフェノチアジン化合物とがパーオキシダーゼの活性増
幅物質となることを見い出し、本発明を完成した。
度を求めて鋭意研究した結果、化学発光を利用しパーオ
キシダーゼ活性を測定するためルミノールと過酸化水素
とを基質として用いる方法において、前記一般式（Ｉ）
で表されるピリジン化合物と前記一般式（II）で表され
るフェノチアジン化合物とがパーオキシダーゼの活性増
幅物質となることを見い出し、本発明を完成した。
【０００５】前記一般式（Ｉ）で表されるピリジン化合
物において、Ｒ1 及びＲ2 は水素原子又は低級アルキル
基であり、この低級アルキル基としては炭素数１〜４の
低級アルキル基であり、例えばメチル基、エチル基、プ
ロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｓｅｃ−ブチル
基、ｔ−ブチル基等を挙げることができる。
物において、Ｒ1 及びＲ2 は水素原子又は低級アルキル
基であり、この低級アルキル基としては炭素数１〜４の
低級アルキル基であり、例えばメチル基、エチル基、プ
ロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｓｅｃ−ブチル
基、ｔ−ブチル基等を挙げることができる。
【０００６】Ｒ3 は水素原子、ハロゲン原子、低級アル
キル基、水酸基又はアミノ基である。ハロゲン原子とし
ては、例えば塩素、臭素、ヨウ素等を挙げることができ
る。低級アルキル基としては、前記Ｒ1 及びＲ2 と同じ
炭素数１〜４の低級アルキル基の他、アミノ基、ジメチ
ルアミノ基、ピペリジノ基等で置換されたアルキル基を
挙げることができる。またアミノ基としては、無置換の
アミノ基の他、メチルアミノ基、エチルアミノ基、ジメ
チルアミノ基、ジエチルアミノ基、ジプロピルアミノ
基、１−ピロリジニル基、ピペリジノ基、４−メチルピ
ペリジノ基、４−エチルピペリジノ基、フェニルアミノ
基等の置換アミノ基を挙げることができる。
キル基、水酸基又はアミノ基である。ハロゲン原子とし
ては、例えば塩素、臭素、ヨウ素等を挙げることができ
る。低級アルキル基としては、前記Ｒ1 及びＲ2 と同じ
炭素数１〜４の低級アルキル基の他、アミノ基、ジメチ
ルアミノ基、ピペリジノ基等で置換されたアルキル基を
挙げることができる。またアミノ基としては、無置換の
アミノ基の他、メチルアミノ基、エチルアミノ基、ジメ
チルアミノ基、ジエチルアミノ基、ジプロピルアミノ
基、１−ピロリジニル基、ピペリジノ基、４−メチルピ
ペリジノ基、４−エチルピペリジノ基、フェニルアミノ
基等の置換アミノ基を挙げることができる。
【０００７】前記一般式（Ｉ）で表されるピリジン化合
物としては、例えばピリジン、２−メチルピリジン、３
−メチルピリジン、４−メチルピリジン、４−ヒドロキ
シピリジン、２−ヒドロキシピリジン、４−クロロピリ
ジン、４−アミノピリジン、４−ジメチルアミノピリジ
ン、４−ジエチルアミノピリジン、４−ピペリジノピリ
ジン、４−（２−ピペリジノエチル）ピリジン、４−
（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン、コリジン等を挙げるこ
とができる。
物としては、例えばピリジン、２−メチルピリジン、３
−メチルピリジン、４−メチルピリジン、４−ヒドロキ
シピリジン、２−ヒドロキシピリジン、４−クロロピリ
ジン、４−アミノピリジン、４−ジメチルアミノピリジ
ン、４−ジエチルアミノピリジン、４−ピペリジノピリ
ジン、４−（２−ピペリジノエチル）ピリジン、４−
（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン、コリジン等を挙げるこ
とができる。
【０００８】前記一般式（II）で表されるフェノチアジ
ン化合物において、Ｘは水素原子、アルカリ金属又はア
ルカリ土類金属である。アルカリ金属としては、例えば
ナトリウム、カリウム等を、さらにアルカリ土類金属と
してはカルシウム、バリウム等を挙げることができる。
ン化合物において、Ｘは水素原子、アルカリ金属又はア
ルカリ土類金属である。アルカリ金属としては、例えば
ナトリウム、カリウム等を、さらにアルカリ土類金属と
してはカルシウム、バリウム等を挙げることができる。
【０００９】前記一般式（II）で表されるフェノチアジ
ン化合物としては、例えば３−（１０−フェノチアジニ
ル）プロパンスルホン酸、３−（１０−フェノチアジニ
ル）プロパンスルホン酸ナトリウム、３−（１０−フェ
ノチアジニル）プロパンスルホン酸カリウム等を挙げる
ことができる。
ン化合物としては、例えば３−（１０−フェノチアジニ
ル）プロパンスルホン酸、３−（１０−フェノチアジニ
ル）プロパンスルホン酸ナトリウム、３−（１０−フェ
ノチアジニル）プロパンスルホン酸カリウム等を挙げる
ことができる。
【００１０】本発明の測定は、パーオキシダーゼを含む
被検液と、ルミノールと過酸化水素とからなるパーオキ
シダーゼの基質と、前記一般式（Ｉ）で表されるピリジ
ン化合物及び一般式（II）で表されるフェノチアジン化
合物とからなる活性増幅物質とにより発生する化学発光
を測定することにより行うことができる。
被検液と、ルミノールと過酸化水素とからなるパーオキ
シダーゼの基質と、前記一般式（Ｉ）で表されるピリジ
ン化合物及び一般式（II）で表されるフェノチアジン化
合物とからなる活性増幅物質とにより発生する化学発光
を測定することにより行うことができる。
【００１１】測定を実施するに当って、前記一般式
（Ｉ）で表されるピリジン化合物及び前記一般式（II）
で表されるフェノチアジン化合物は、それぞれ１０〜５
０００μＭ用いることができるが、反応を効率よく行う
ためには１００〜１０００μＭ用いることが好ましい。
測定に用いる基質は、ルミノールを１００〜１０００μ
Ｍ、好ましくは２００〜４００μＭ用い、さらに過酸化
水素を１００〜１０００μＭ、好ましくは２００〜５０
０μＭ用いることが経済的にも有利である。
（Ｉ）で表されるピリジン化合物及び前記一般式（II）
で表されるフェノチアジン化合物は、それぞれ１０〜５
０００μＭ用いることができるが、反応を効率よく行う
ためには１００〜１０００μＭ用いることが好ましい。
測定に用いる基質は、ルミノールを１００〜１０００μ
Ｍ、好ましくは２００〜４００μＭ用い、さらに過酸化
水素を１００〜１０００μＭ、好ましくは２００〜５０
０μＭ用いることが経済的にも有利である。
【００１２】測定は、緩衝液中で行うことが好ましく、
例えばトリシン−水酸化ナトリウム緩衝液、トリス−塩
酸緩衝液、トリス−コハク酸緩衝液、リン酸緩衝液等を
挙げることができる。緩衝液は、ｐＨが７．０〜９．０
のものを用いることができる。測定は、１０〜４０℃で
行うことができるが、効率よく行うためには２０〜３０
℃で実施することが好ましい。
例えばトリシン−水酸化ナトリウム緩衝液、トリス−塩
酸緩衝液、トリス−コハク酸緩衝液、リン酸緩衝液等を
挙げることができる。緩衝液は、ｐＨが７．０〜９．０
のものを用いることができる。測定は、１０〜４０℃で
行うことができるが、効率よく行うためには２０〜３０
℃で実施することが好ましい。
【００１３】一般に化学発光の測定は、パーオキシダー
ゼを含む被検液と共に前記一般式（Ｉ）で表されるピリ
ジン化合物、前記一般式（II）で表されるフェノチアジ
ン化合物および前記基質を含む試験液を入れた試験管を
フォトンカウンターの中に入れ測定を行なうことができ
る。
ゼを含む被検液と共に前記一般式（Ｉ）で表されるピリ
ジン化合物、前記一般式（II）で表されるフェノチアジ
ン化合物および前記基質を含む試験液を入れた試験管を
フォトンカウンターの中に入れ測定を行なうことができ
る。
【００１４】また本発明の方法をＥＩＡに用いる場合に
は、通常測定に用いられるポリスチレンビーズ、磁性粒
子、容器の壁等の固相上にサンドイッチ法、競合法等の
免疫測定法により補足されたパーオキシダーゼ標識体の
活性を上記方法に従い測定することにより達成される。
は、通常測定に用いられるポリスチレンビーズ、磁性粒
子、容器の壁等の固相上にサンドイッチ法、競合法等の
免疫測定法により補足されたパーオキシダーゼ標識体の
活性を上記方法に従い測定することにより達成される。
【００１５】
【実施例】本発明を以下参考例及び実施例により更に詳
細に説明する。
細に説明する。
【００１６】参考例１ １．３４ｍＭ３−（１０−フェノチアジニル）プロパン
スルホン酸ナトリウムを含むトリシン−水酸化ナトリウ
ム増幅物質緩衝液ｐＨ＝８．３（５０ｍＭ）、及び１．
０ｍＭ過酸化水素と０．７５ｍＭルミノールとを含むト
リシン−水酸化ナトリウム基質緩衝液ｐＨ＝８．３（５
０ｍＭ）をそれぞれ作成した。
スルホン酸ナトリウムを含むトリシン−水酸化ナトリウ
ム増幅物質緩衝液ｐＨ＝８．３（５０ｍＭ）、及び１．
０ｍＭ過酸化水素と０．７５ｍＭルミノールとを含むト
リシン−水酸化ナトリウム基質緩衝液ｐＨ＝８．３（５
０ｍＭ）をそれぞれ作成した。
【００１７】参考例２ 参考例１で作成した増幅物質緩衝液２００μｌにパーオ
キシダーゼ（１ｎｇ／ｍｌ）１０μｌを加え、更に参考
例１で作成した基質緩衝液１３５μｌを加え、５秒間の
発光を添加直後（０分）から２分おきに１０分までクリ
ニルーマット（ベルトールド社製フォトンカウンター）
で測定した。その結果を図１に示す。
キシダーゼ（１ｎｇ／ｍｌ）１０μｌを加え、更に参考
例１で作成した基質緩衝液１３５μｌを加え、５秒間の
発光を添加直後（０分）から２分おきに１０分までクリ
ニルーマット（ベルトールド社製フォトンカウンター）
で測定した。その結果を図１に示す。
【００１８】実施例１ １．３４ｍＭ３−（１０−フェノチアジニル）プロパン
スルホン酸ナトリウムを含むトリシン−水酸化ナトリウ
ム増幅物質緩衝液に表１に示すピリジン化合物１．０ｍ
Ｍを加え増幅物質緩衝液を作成した。この増幅物質緩衝
液２００μｌにパーオキシダーゼ（１ｎｇ／ｍｌ）１０
μｌを加え、更に参考例１で作成した基質緩衝液１３５
μｌを加え、６分後クリニルーマットで５秒間の発光を
測定した。ピリジン化合物を添加しない増幅物質緩衝液
を用いて測定を行った結果を基準としてその相対活性を
求めた。その結果を表１に示す。
スルホン酸ナトリウムを含むトリシン−水酸化ナトリウ
ム増幅物質緩衝液に表１に示すピリジン化合物１．０ｍ
Ｍを加え増幅物質緩衝液を作成した。この増幅物質緩衝
液２００μｌにパーオキシダーゼ（１ｎｇ／ｍｌ）１０
μｌを加え、更に参考例１で作成した基質緩衝液１３５
μｌを加え、６分後クリニルーマットで５秒間の発光を
測定した。ピリジン化合物を添加しない増幅物質緩衝液
を用いて測定を行った結果を基準としてその相対活性を
求めた。その結果を表１に示す。
【００１９】
【表１】
【００２０】実施例２ 実施例１で作成した４−ジメチルアミノピリジンを用い
た増幅物質緩衝液２００μｌにパーオキシダーゼ（１ｎ
ｇ／ｍｌ）１０μｌを加え、更に参考例１で作成した基
質緩衝液１３５μｌを加え、５秒間の発光を添加直後
（０分）から２分おきに１０分までクリニルーマットで
測定した。その結果を図２に示す。
た増幅物質緩衝液２００μｌにパーオキシダーゼ（１ｎ
ｇ／ｍｌ）１０μｌを加え、更に参考例１で作成した基
質緩衝液１３５μｌを加え、５秒間の発光を添加直後
（０分）から２分おきに１０分までクリニルーマットで
測定した。その結果を図２に示す。
【００２１】参考例３ ８．０ｍＭｐ−ヨードフェノール、１．０ｍＭルミノー
ル、１．０ｍＭ過酸化水素を含むトリシン−水酸化ナト
リウム緩衝液２００μｌを４本の試験管に入れ、パーオ
キシダーゼ（０ｎｇ／ｍｌ，１ｎｇ／ｍｌ，０．１ｎｇ
／ｍｌ，０．０１ｎｇ／ｍｌ）をそれぞれ１０μｌづつ
加え、更に参考例１で作成した基質緩衝液１３５μｌを
加え６分後の５秒間の発光をクリニルーマットで測定し
た。その結果を図３に示す。
ル、１．０ｍＭ過酸化水素を含むトリシン−水酸化ナト
リウム緩衝液２００μｌを４本の試験管に入れ、パーオ
キシダーゼ（０ｎｇ／ｍｌ，１ｎｇ／ｍｌ，０．１ｎｇ
／ｍｌ，０．０１ｎｇ／ｍｌ）をそれぞれ１０μｌづつ
加え、更に参考例１で作成した基質緩衝液１３５μｌを
加え６分後の５秒間の発光をクリニルーマットで測定し
た。その結果を図３に示す。
【００２２】実施例３ 実施例１で作成した３−（１０−フェノチアジニル）プ
ロパンスルホン酸ナトリウム及び４−ジメチルアミノピ
リジンを含む増幅物質緩衝液２００μｌを４本の試験管
に入れ、パーオキシダーゼ（０ｎｇ／ｍｌ，１ｎｇ／ｍ
ｌ，０．１ｎｇ／ｍｌ，０．０１ｎｇ／ｍｌ）各１０μ
ｌを加え、更に参考例１で作成した基質緩衝液１３５μ
ｌを加え６分後５秒間の発光をクリニルーマットで測定
した。その結果を図４に示す。
ロパンスルホン酸ナトリウム及び４−ジメチルアミノピ
リジンを含む増幅物質緩衝液２００μｌを４本の試験管
に入れ、パーオキシダーゼ（０ｎｇ／ｍｌ，１ｎｇ／ｍ
ｌ，０．１ｎｇ／ｍｌ，０．０１ｎｇ／ｍｌ）各１０μ
ｌを加え、更に参考例１で作成した基質緩衝液１３５μ
ｌを加え６分後５秒間の発光をクリニルーマットで測定
した。その結果を図４に示す。
【００２３】実施例４ １．３４ｍＭ３−（１０−フェノチアジニル）プロパン
スルホン酸ナトリウム、０．０６７ｍＭフェノールイン
ドフェノールを含むトリシン−水酸化ナトリウム増幅物
質緩衝液に表２に示すピリジン化合物１．０ｍＭを加え
た増幅物質緩衝液２００μｌにパーオキシダーゼ（０．
１ｎｇ／ｍｌ）１０μｌを加え、さらに参考例１で作成
した基質緩衝液１３５μｌを加え、６分後５秒間の発光
をクリニルーマットで測定した。その結果を表２に示
す。
スルホン酸ナトリウム、０．０６７ｍＭフェノールイン
ドフェノールを含むトリシン−水酸化ナトリウム増幅物
質緩衝液に表２に示すピリジン化合物１．０ｍＭを加え
た増幅物質緩衝液２００μｌにパーオキシダーゼ（０．
１ｎｇ／ｍｌ）１０μｌを加え、さらに参考例１で作成
した基質緩衝液１３５μｌを加え、６分後５秒間の発光
をクリニルーマットで測定した。その結果を表２に示
す。
【００２４】
【表２】
【００２５】
【発明の効果】本発明の活性増幅物質は、発光反応の全
発光量又は発光信号（シグナル）／バックグラウンド比
を大きくする。そこで本発明の活性増幅物質を用いるこ
とにより、今まで測定することができなかった極微量の
パーオキシダーゼの活性を測定することができる。さら
に本発明をＥＩＡに用いると従来の測定法に比べ高感度
な測定が可能である。
発光量又は発光信号（シグナル）／バックグラウンド比
を大きくする。そこで本発明の活性増幅物質を用いるこ
とにより、今まで測定することができなかった極微量の
パーオキシダーゼの活性を測定することができる。さら
に本発明をＥＩＡに用いると従来の測定法に比べ高感度
な測定が可能である。
【図１】３−（１０−フェノチアジニル）プロパンスル
ホン酸ナトリウムを増幅物質として用い、発光を測定し
た図である。
ホン酸ナトリウムを増幅物質として用い、発光を測定し
た図である。
【図２】４−ジメチルアミノピリジンと３−（１０−フ
ェノチアジニル）プロパンスルホン酸ナトリウムとを増
幅物質として用い、発光を測定した図である。
ェノチアジニル）プロパンスルホン酸ナトリウムとを増
幅物質として用い、発光を測定した図である。
【図３】従来法のｐ−ヨードフェノールを増幅物質とし
て用いたときのパーオキシダーゼの検量線である。
て用いたときのパーオキシダーゼの検量線である。
【図４】４−ジメチルアミノピリジンと３−（１０−フ
ェノチアジニル）プロパンスルホン酸ナトリウムを増幅
物質として用いたときのパーオキシダーゼの検量線であ
る。
ェノチアジニル）プロパンスルホン酸ナトリウムを増幅
物質として用いたときのパーオキシダーゼの検量線であ
る。
Claims (2)
- 【請求項１】 （イ）ルミノールと過酸化水素とからな
る基質と、 （ロ）一般式 【化１】 で表されるピリジン化合物（式中、Ｒ1 及びＲ2 は水素
原子又は低級アルキル基であり、Ｒ3 は水素原子、ハロ
ゲン原子、低級アルキル基、水酸基又はアミノ基であ
る。）と一般式 【化２】 で表されるフェノチアジン化合物（式中、Ｘは水素原
子、アルカリ金属又はアルカリ土類金属である。）とか
らなる活性増幅物質と、からなるパーオキシダーゼ活性
測定用試薬。 - 【請求項２】 パーオキシダーゼと、ルミノールと過酸
化水素とからなる基質と、一般式 【化３】 で表されるピリジン化合物と一般式 【化４】 で表されるフェノチアジン化合物とからなる活性増幅物
質とにより発生する化学発光を測定することからなるパ
ーオキシダーゼ活性の測定方法（式中、Ｒ1 及びＲ2 は
水素原子又は低級アルキル基、Ｒ3 は水素原子、ハロゲ
ン原子、低級アルキル基、水酸基又はアミノ基であり、
Ｘは水素原子、アルカリ金属又はアルカリ土類金属であ
る。）。
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| Country | Link |
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| JP (1) | JP3102228B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| US7803573B2 (en) * | 2007-02-23 | 2010-09-28 | Cyanagen Srl | Method for increasing light emission from a chemiluminescent reaction |
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-
1993
- 1993-10-01 JP JP05267813A patent/JP3102228B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (4)
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| US8129136B2 (en) | 2007-02-20 | 2012-03-06 | Cyanagen Srl | Kit for performing an assay |
| US7803573B2 (en) * | 2007-02-23 | 2010-09-28 | Cyanagen Srl | Method for increasing light emission from a chemiluminescent reaction |
| EP4412427A4 (en) * | 2021-09-29 | 2025-09-03 | Hodogaya Chemical Co Ltd | COMPOUND HAVING SULFONATE GROUP, HOLE TRANSPORT MATERIAL, HOLE TRANSPORT MATERIAL COMPOSITION FOR PHOTOELECTRIC CONVERSION ELEMENT, PHOTOELECTRIC CONVERSION ELEMENT, AND SOLAR CELL |
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