JPH08175921A

JPH08175921A - 農園芸用殺菌剤組成物

Info

Publication number: JPH08175921A
Application number: JP6320069A
Authority: JP
Inventors: Futoshi Kawane; 太川根; Shinji Kamata; 真司鎌田; Masami Mochizuki; 正己望月
Original assignee: Idemitsu Kosan Co Ltd
Current assignee: Idemitsu Kosan Co Ltd
Priority date: 1994-12-22
Filing date: 1994-12-22
Publication date: 1996-07-09

Abstract

(57)【要約】【目的】バチルス属に属する細菌を利用した農園芸用
殺菌剤組成物において、病害防除作用に優れ、更に、定
着性、持続安定性のよい農園芸用殺菌剤組成物を提供す
る。【構成】農園芸用殺菌剤組成物にバチルス属に属する
細菌、好ましくはバチルスズブチリスＦＥＲＭＰ−
１４６４７株菌、バチルスズブチリスＦＥＲＭＰ−
１４６４６株菌から選ばれる細菌の培養物から胞子を５
０重量％以上含むように調製された胞子及び胞子発芽促
進剤、好ましくは栄養基質、キレート化合物、無機塩か
ら選ばれる胞子発芽促進剤を配合する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、農園芸用殺菌剤組成物
に関し、詳しくは、バチルス属に属する細菌の胞子と胞
子発芽促進剤を含有する病害防除作用に優れた農園芸用
殺菌剤組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、農園芸植物を各種病害から保護す
る方法として、安全性、効果の持続性を考慮して、各種
病害を引き起こす病原菌と拮抗する微生物を用いて、病
害の発生を予防する方法が広く用いられている。

【０００３】この様な農園芸植物の病害防除に用いられ
てきた微生物として、トリコデルマ属、グリオクラディ
ウム属、バチルス属に属する細菌等が挙げられ、これま
でに、これらの微生物を含有する農園芸用殺菌剤組成物
も数多く研究開発されてきた。

【０００４】この中でバチルス属に属する細菌について
は、例えば、特開昭６３−２７３４７０号公報では、バ
チルスズブチリス（Bacillus subtilis）ＪＢ３株菌
（ＮＣＩＢ１２３７５）、バチルスズブチリスＪＢ
３．６株菌（ＮＣＩＢ１２３７６）、バチルスズブチ
リスＲ１株菌（ＮＣＩＢ１２６１６）あるいはこれらの
変異株等から得られる抗菌物質が植物の病気、動物及び
ヒトの微生物感染を抑制し、更に一般的な微生物汚染を
抑制するとし、上記各菌株の培養物を用いて各種農園芸
植物の病害を防除する試みがなされている。

【０００５】また、特開平２−２２２９９号公報には、
上記バチルスズブチリス（Bacillus subtilis）ＪＢ
３株菌（ＮＣＩＢ１２３７５）、バチルスズブチリス
ＪＢ３．６株菌（ＮＣＩＢ１２３７６）、バチルスズ
ブチリスＲ１株菌（ＮＣＩＢ１２６１６）あるいはこれ
らの変異株等から誘導される抗生物質を単離し、これを
各種農園芸植物の病害防除に用いるという試みがなされ
ている。

【０００６】しかし、この様なバチルス属に属する細菌
を応用した農園芸植物の病害防除方法では何れも、持続
性、定着性、安定性等の点が必ずしも十分であるとは言
えなかった。

【０００７】また、この様なバチルス属に属する細菌が
胞子を形成することは知られており、培養物などから胞
子を単離することもよく行われているが、この様な胞子
画分が大量に調製された例や、胞子を胞子発芽促進剤と
組み合わせることで農園芸植物に対する病害防除の効果
を挙げようとした例はこれまでに報告されていない。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記観点か
らなされたものであり、バチルス属に属する細菌を利用
した農園芸用殺菌剤組成物において、病害防除作用に優
れ、更に、定着性、持続安定性のよい農園芸用殺菌剤組
成物を提供することを課題とする。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者は、上記課題を
解決するために鋭意研究を行った結果、バチルス属に属
する細菌の培養物から胞子を取り出し、これを胞子発芽
促進剤と共に農園芸用殺菌剤組成物に配合することによ
り、病害防除作用に優れ、更に、定着性、持続安定性が
よい農園芸用殺菌剤組成物が得られることを見出し、本
発明を完成するに至った。

【００１０】すなわち本発明は、バチルス属に属する細
菌の胞子及び胞子発芽促進剤を含有する農園芸用殺菌剤
組成物である。以下、本発明を詳細に説明する。

【００１１】＜１＞バチルス属に属する細菌の胞子本発明の農園芸用殺菌剤組成物は、バチルス属に属する
細菌の培養物より得られる胞子を有効成分として含有す
る。

【００１２】本発明に用いるバチルス属に属する細菌と
しては、バチルス属に属する細菌であれば特に制限はさ
れないが、好ましくは植物病原菌と拮抗するバチルス属
に属する細菌が挙げられ、その内でもより好ましくはバ
チルスズブチリス（Bacillus subtilis）が挙げら
れ、更に、その内でもバチルスズブチリスＦＥＲＭ
Ｐ−１４６４７株菌、バチルスズブチリスＦＥＲＭ
Ｐ−１４６４６株菌が好ましく挙げられる。

【００１３】バチルスズブチリスＦＥＲＭＰ−１４
６４７株菌及びバチルスズブチリスＦＥＲＭＰ−１
４６４６株菌は、工業技術院生命工学工業技術研究所
（ＦＥＲＭ）に１９９４年１１月１７日付で寄託されて
いる。また、バチルスズブチリスＦＥＲＭＰ−１４
６４７株菌はＮＣＩＢ１２３７６株菌として、バチルス
ズブチリスＦＥＲＭＰ−１４６４６株菌はＮＣＩＢ１
２６１６株菌として、スコットランド，ＡＢ９８ＤＧ，
アバーディーン（Aberdeen），アビーロード（Abbey Ro
ad）１３５，Ｐ．Ｏ．ボックス３１のナショナル・コレ
クションズ・オブ・インダストリアル・アンド・マリン
・バクテリア社（National Collectionsof Industrial
and Marine Bacteria Ltd.）（ＮＣＩＢ），トリー・リ
サーチ・ステーション（Torry Research Station）に１
９８６年１２月２２日付（ＮＣＩＢ１２３７６）、１９
８７年１２月２４日付（ＮＣＩＢ１２６１６）で寄託さ
れており、これらの株の性質は、欧州特許出願公開第２
７６１３２号公報に記載されている。

【００１４】本発明に用いる胞子は、上記バチルス属に
属する細菌の培養物から得られる。バチルス属に属する
細菌の培養は、例えば、往復式振盪培養、ジャーファメ
ンター培養、培養タンク培養等の液体培養や固体培養
等、バチルス属に属する細菌の通常の培養方法に準じて
行うことができる。

【００１５】培養に用いる培地は、胞子を効率よく形成
しやすい培地であれば何でもよく、炭素源としてグルコ
ース、デンプン、デキストリン、シュークロース、糖蜜
等の糖類、クエン酸、リンゴ酸等の有機酸類、グリセリ
ン等のアルコール類を、窒素源としてアンモニア、硫酸
アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム等
のアンモニウム塩や硝酸塩及び酵母エキス、コーン・ス
ティープ・リーカー、肉エキス、小麦胚芽、ポリペプト
ン、大豆粉等の有機窒素源を、無機塩としてリン酸、カ
リウム、カルシウム、マンガン、マグネシウム、鉄等の
塩類、例えば、塩化カリウム、塩化カルシウム、硫酸マ
ンガン、硫酸第一鉄などを配合することができる。ま
た、必要に応じて消泡剤等の種々の添加剤を用いること
も可能である。

【００１６】培養の条件は特に限定されるものではない
が、培養は、固体培養あるいは、通気撹拌や振盪培養等
の好気的条件下で行われる液体培養が好ましく、温度は
好ましくは１０〜５０℃、より好ましくは１５〜４０
℃、ｐＨは好ましくは４〜９、より好ましくは６〜８の
範囲で行う。

【００１７】上記の様にして得られたバチルス属に属す
る培養物より胞子を分離する方法であるが、膜分離、遠
心分離、濾過分離等の方法を用いて行うことができる。
得られた胞子画分は、そのままある程度の水分を含んだ
状態で後述の農園芸用殺菌剤組成物に用いることも、ま
た、必要に応じて凍結乾燥、通風乾燥、スプレードライ
等の乾燥法を用いて乾燥物として農園芸用殺菌剤組成物
に用いることも可能である。

【００１８】本発明に用いるバチルス属に属する細菌の
胞子の製造方法を、例えば、バチルスズブチリスＦ
ＥＲＭＰ−１４６４７株菌を用いた場合について説明
する。バチルスズブチリスＦＥＲＭＰ−１４６４７
株菌の斜面培養物をブイヨン培地（肉エキス１％、ペプ
トン１％、ＮａＣｌ０．５％含有）を入れた坂口フラス
コに植菌後、回転振盪機で３０℃で１日間培養する。得
られた培養物を培地（グルコース２％、ポリペプトン１
％、酵母エキス０．２％、ＫＨ₂ＰＯ₄０．１％）を入れ
た発酵槽に植菌して好気的条件下で３０℃で７２時間培
養して培養液を得る。この培養液を遠心分離して培養上
清と菌体沈殿物に分離し、培養上清を除去後、菌体沈殿
物を水で洗浄し、湿菌体（胞子画分）を得る。また、こ
の胞子画分（湿菌体）を−８０℃で凍結後、減圧下で乾
燥して粉砕すれば胞子画分を乾燥物とすることができ
る。この様にして得られるバチルスズブチリスＦＥ
ＲＭＰ−１４６４７株菌培養物の胞子画分は、前記菌
株の胞子を乾燥重量で約５０重量％〜１００重量％含有
するものである。

【００１９】＜２＞胞子発芽促進剤本発明の農園芸用殺菌剤組成物には、上記バチルス属に
属する細菌の胞子と共に胞子発芽促進剤が配合される。

【００２０】本発明に用いる胞子発芽促進剤としては、
一般にバチルス属に属する細菌の胞子の発芽を促進する
成分として知られているものであれば特に制限はされ
ず、例えば、栄養基質として、炭素源であるグリセロー
ル、Ｌ−アラビノース、リボース、Ｄ−キシロース、ガ
ラクトース、Ｄ−グルコース、Ｄ−フルクトース、Ｄ−
マンノース、イノシトール、マンニトール、Ｄ−ソルビ
トール、α−メチル−Ｄ−グルコシド、Ｎ−アセチルグ
ルコサミン、アミグダリン、アルブチン、サリシン、セ
ロビオース、マルトース、ラクトース、メリビオース、
スクロース、トレハロース、イヌリン、Ｄ−ラフィノー
ス、デンプン、デキストリン、グリコーゲン、β−ゲン
チビオース、Ｄ−ツラノース、α−デンプン、可溶性デ
ンプン、甘草甘味料、エリスリット、キチン、キトサ
ン、セルロース、グリチルリチン、カップリングシュガ
ー、マルチット、メープルシュガー、カチオン化デンプ
ン、転化糖、ハチミツ、水飴、上述した糖類の１種又は
２種以上で構成されるオリゴ糖類及び多糖類、クエン酸
等や、窒素源である各種アミノ酸類、硫酸アンモニウ
ム、リン酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、塩化アン
モニウム、尿素、大豆粉末、稲藁等、その他成分の酵母
エキス、ペプトン等を挙げることができる。

【００２１】胞子発芽促進剤として、上記栄養基質の他
に、無機塩、例えば、リン酸カリウム、リン酸鉄、二重
過リン酸石灰、ポリリン酸アンモニウム、縮合リン酸塩
（ポリリン酸ナトリウム、ポリリン酸カリウム等）、酸
性リン酸塩、ヘキサメタリン酸ナトリウム等の水溶性無
機リン酸塩、塩化カリウム、硝酸カリウム等のカリウム
塩、銅、鉄、亜鉛、カルシウム、マグネシウム、マンガ
ン、モリブデン等の微量元素の塩等を挙げることができ
る。これらの無機塩は、単独で用いても胞子の発芽を促
進させることはできるが、糖類と共に用いることが好ま
しく、糖類の中でもグルコースと共に用いることがより
好ましい。

【００２２】また、ＥＤＴＡ、炭酸水素ナトリウム、チ
オグリコール酸ナトリウム、グリシルグリシン、８−ヒ
ドロキシキノリン、シュウ酸、酒石酸、クエン酸、ソル
ビトール、リン酸、メタリン酸ナトリウム、ピロリン
酸、トリポリリン酸ナトリウム、トリポリリン酸カリウ
ム、メタリン酸カリウム等のキレート化合物も、本発明
の農園芸用殺菌剤組成物に胞子発芽促進剤として配合す
ることができる。

【００２３】＜３＞農園芸用殺菌剤組成物本発明の農園芸用殺菌剤組成物は、上記バチルス属に属
する細菌の胞子及び胞子発芽促進剤をそれぞれ１種又は
２種以上含有するものである。

【００２４】本発明の農園芸用殺菌剤組成物に、上記バ
チルス属に属する細菌の胞子を配合する際には、含有胞
子重量が組成物全量の０．００１〜９９．９部となるよ
うに配合することが好ましい。胞子含有量が０．００１
重量部未満であると病害防除作用が十分でないことがあ
り、９９．９重量部を越えると農園芸用殺菌組成物中に
胞子発芽促進剤の有効量を組成することができず、やは
り病害防除作用が十分でないことがある。

【００２５】また、胞子発芽促進剤の配合量は、組成物
全量に対して０．１〜９９．９９９重量部とすることが
好ましい。胞子発芽促進剤の含有量が０．１重量部未満
であると優れた病害防除作用が得られないことがあり、
９９．９９９重量部を越えると病害防除作用を発揮する
のに十分な量の胞子を農園芸用殺菌組成物中に組成する
ことができず、胞子による優れた病害防除効果が得られ
ないことがある。

【００２６】本発明の農園芸用殺菌剤組成物は、通常の
微生物製剤の製造方法に従って、上記バチルス属に属す
る細菌の胞子及び胞子発芽促進剤を必要に応じて各種任
意成分と共に、粉剤、粒剤、水和剤、乳剤、液剤、フロ
アブル、塗布剤等に製剤化したものである。

【００２７】上記任意成分としては、固体担体として、
カリオンクレー、パイロフィライトクレー、ベントナイ
ト、モンモリロナイト、珪藻土、合成含水酸化ケイ素、
酸性白土、タルク類、粘土、セラミック、石英、セリサ
イト、バーミキュライト、パーライト、大谷石、アンス
ラ石、石灰石、石炭灰、ゼオライト等の鉱物質微粉末、
籾殻、フスマ、カニ殻、エビ殻、オキアミ微粉末、米
糠、小麦粉、トウモロコシ穂軸、落花生殻、骨粉、魚
粉、粕粉、鋸屑、木粉、炭、くん炭、バーク炭、籾殻く
ん炭、草木炭、ピートモス、アタパルジャイト、乾燥蓄
糞、活性炭、油粕等の有機物微粉末等を挙げることがで
きる。また、液体担体としては、水、植物油、液体動物
油、合成水溶性高分子（ポリビニルアルコール、ポリビ
ニルピロリドン、ポリアクリル酸類等）等が挙げられ
る。更に、必要に応じて補助剤として、可溶性増量剤、
カゼイン、ゼラチン、アラビアガム、アルギン酸、合成
高分子（ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸類
等）、ベントナイト等の固着剤や分散剤、その他の成分
として、プロピレングリコール、エチレングリコール等
の凍結防止剤、キサンタンガム等の天然多糖類、ポリア
クリル酸類等の増粘剤を挙げることができる。

【００２８】この様にして得られる本発明の農園芸用殺
菌剤組成物が適応される植物の病原菌としては、病原菌
がかび類に属するもの、例えば、イネの紋枯病菌リゾク
トニアソラニ（Rhizoctonia solani）、いもち病菌ピ
リキュラリアオリゼー（Pyricularia oryzae）、オオ
ムギのうどんこ病菌エリシフェグラミニス（Erysiphe
graminis）、コムギの立枯病菌ゲウマノマイセスグ
ラミニス（Gaeumannomyces graminis）、エンドウの褐
斑病菌アスコキタピシ（Ascochyta pisi）、ソラマメ
の赤色斑点病菌ボトリチスファバエ（Botrytis faba
e）、

【００２９】野菜類、例えば、トマト、ナス、イチゴ、
キュウリ、レタス、インゲン等の灰色かび病菌ボトリチ
スシネレア（Botrytis cinerea）、キャベツの黒すす
病菌アルタナリアブラッシコーラ（Alternaria brass
icicola）、トマトの葉かび病菌クラドスポリウムフ
ラバム（Cladosporium fulvum）、疫病菌フィトフトラ
インフェスタンス（Phytophthora infestans）、萎ち
ょう病菌フザリウムオキスポラム（Fusarium oxysporu
m）、キュウリのうどんこ病菌スフェロテカフリジネア
（Sphaerotheca fuliginea）、べと病菌シュードペロノ
スポラキュベンシス（Pseudoperonospora cubensi
s）、立枯病菌ピシウムｓｐ（Pythiumsp.）、ネギの
さび病菌プシニアアリー（Puccinia allii）、小菌核
病菌スクレロチニアアリー（Sclerotinia allii）、
ハクサイの黒斑病菌アルタナリアブラッシセア（Altern
aria brassicae）、ニンジンの黒葉枯病菌アルタナリア
ダウシ（Alternaria dauci）、ホウレンソウの立枯病菌
リゾクトニアソラニ（Rhizoctonia solani）、レタス
の菌核病菌スクレロチニアスクレロチオラム（Sclero
tinia sclerotiorum）、ナスの半身萎ちょう病菌バーテ
ィシリウムダリア（Verticillium dahliae）、イチゴ
のうどんこ病菌スファエロテカフムリ（Sphaerotheca
humuli）、炭そ病菌コレトトリカムフラガリア（Coll
etotrichum fragariae）、

【００３０】花卉類、例えば、シクラメン、キク、バ
ラ、スターチス等の灰色かび病菌ボトリチスシネレア
（Botrytis cinerea）、バラのうどんこ病菌スファエロ
テカパノッサ（Sphaerotheca pannosa）、キクの白さび
病菌プッシニアホリアナ（Puccinia horiana）、

【００３１】果樹の白紋羽病菌ロセリニアネカトリッ
クス（Rosellinia necatrix）、カンキツ類の青かび病
菌ペニシリウムイタリカム（Penicillium italicu
m）、黒点病菌ディアポルセシトリ（Diaporthe citr
i）、ナシの赤星病菌ジムノスポランジウムアシアチ
カム（Gymnosporangium asiaticum）、リンゴの黒星病
菌ベンツリアイネクアリス（Venturia inaequali
s）、モモの灰星病菌モニリニアフルクチコーラ（Mon
ilinia fructicola）、

【００３２】芝生のラージパッチ病菌リゾクトニアソ
ラニ（Rhizoctonia solani）、葉枯病菌カーブラリア
ｓｐ（Curvularia sp）、ヘルミントスポリウムｓｐ
（Helminthosporium sp）、さび病菌プッシニアゾイ
シア（Puccinia zoysiae）、ダラースポット病菌スクレ
ロチニアホメオカルパ（Sclerotinia homoeocarp
a）、春はげ病菌フザリウム（Fusarium）、リゾクトニ
ア（Rhizoctonia）、ピシウム（Pythium）、雪腐病菌テ
ィフラインカルナタ（Typhula incarnata）、ブラウ
ンパッチ病菌リゾクトニアソラニ（Rhizoctonia sola
ni）等を挙げることができる。

【００３３】＜４＞本発明の農園芸用殺菌剤組成物の施
用方法本発明の農園芸用殺菌剤組成物は、上記の様な各種栽培
植物の各種病害を防除する目的で栽培植物に施用される
が、その方法は、剤型等の使用形態、作物や病害によっ
て適宜選択され、例えば、地上液剤散布、地上固形散
布、空中液剤散布、空中固形散布、水面施用、施設内施
用、土壌混和施用、土壌潅注施用、表面処理（種子粉
衣、塗布処理等）育苗箱施用法、単花処理、株元処理等
の方法を挙げることができる。また、これらの施用法の
内でも好ましくは、各種剤型の農園芸用殺菌剤組成物を
栽培植物の種子にコートする、栽培植物の花に単花処理
する、栽培植物の茎葉に処理する、栽培植物の傷口箇
所、剪定部に塗布処理する、土壌潅注する、土壌混和す
る等の方法が挙げられる。

【００３４】また、栽培植物への農園芸用殺菌剤組成物
の施用に際して、殺虫剤、殺線虫剤、殺ダニ剤、除草
剤、殺菌剤、植物生長調節剤、肥料、土壌改良資材（泥
炭、腐植酸資材、ポリビニルアルコール系資材等）等を
混合施用、あるいは混合せずに交互施用、または同時施
用することも可能である。

【００３５】本発明の農園芸用殺菌剤組成物の施用量
は、病害の種類、適用植物の種類、殺菌剤組成物の剤型
等によって異なるため一概には規定できないが、例え
ば、液剤の農園芸用殺菌剤組成物を地上散布する場合に
は、その施用の胞子濃度は、通常約１０⁶ＣＦＵ（コロ
ニー形成単位）／ｍＬ〜１０¹⁰ＣＦＵ／ｍＬであり、好
ましくは約１０⁷ＣＦＵ／ｍＬ〜１０⁹ＣＦＵ／ｍＬであ
り、施用量は、０．５〜５０Ｌ／ａである。また、粒
剤、粉剤等はなんら希釈することなく製剤のままで施用
することも可能であり、地上散布する場合、胞子の施用
量が、１０¹²〜１０¹⁴ＣＦＵ／ａ程度となるように散布
することが好ましい。

【００３６】

【実施例】以下に本発明の実施例を説明する。まず、本
発明の農園芸用殺菌剤組成物に配合するバチルス属に属
する細菌の胞子の製造例について説明する。

【００３７】

【製造例１、２】バチルス属に属する細菌の胞子画分
（湿菌体）バチルスズブチリスＦＥＲＭＰ−１４６４７株の保
存菌の斜面培養物の一白金耳をフラスコ当たり１００ｍ
Ｌのブイヨン培地（肉エキス１％、ペプトン１％、Ｎａ
Ｃｌ０．５％含有）の入った坂口フラスコ（５００ｍＬ
容）に植菌後、振幅１０ｃｍ、回転数１２０ｒｐｍの往
復振盪機を用いて３０℃で１日間培養した。得られた培
養物３００ｍＬを培地（グルコース２％、ポリペプトン
１％、酵母エキス０．２％、ＫＨ₂ＰＯ₄０．１％）１５
Ｌの入った３０Ｌ容の発酵槽に植菌し、好気的条件下で
３０℃で７２時間培養して培養液を得た。得られた約１
５Ｌの培養液を常法に従って遠心分離（６０００ｒｐ
ｍ、２０分間）して培養上清と菌体沈殿物に分離した。
培養上清を抗生物質画分（比較例１）として分離後、菌
体沈殿物を水で洗浄し、湿重量約７８０ｇの湿菌体（胞
子画分）を得た（製造例１）。この胞子画分は、バチル
スズブチリスＦＥＲＭＰ−１４６４７株の胞子を乾
燥重量で１００重量％含有するものである。

【００３８】上記でバチルスズブチリスＦＥＲＭＰ
−１４６４７株を用いる替わりに、バチルスズブチリ
スＦＥＲＭＰ−１４６４６株を用いて同様の操作を行
い、バチルスズブチリスＦＥＲＭＰ−１４６４６株
の胞子を乾燥重量で５０重量％含有する湿重量約７５０
ｇの胞子画分を得た（製造例２）。

【００３９】

【比較例２】バチルス属に属する細菌の生菌体画分
（湿菌体）バチルスズブチリスＦＥＲＭＰ−１４６４７株の保
存菌の斜面培養物の一白金耳をフラスコ当たり１００ｍ
Ｌのブイヨン培地（肉エキス１％、ペプトン１％、Ｎａ
Ｃｌ０．５％含有）の入った坂口フラスコ（５００ｍＬ
容）に植菌後、振幅１０ｃｍ、回転数１２０ｒｐｍの往
復振盪機を用いて３０℃で１日間培養した。得られた培
養物３００ｍＬを培地（グルコース２％、ポリペプトン
１％、酵母エキス０．２％、ＫＨ₂ＰＯ₄０．１％）１５
Ｌの入った３０Ｌ容の発酵槽に植菌し、好気的条件下で
１８時間培養して培養液を得た。得られた約１５Ｌの培
養液を常法に従って遠心分離（６０００ｒｐｍ、２０分
間）して培養上清と菌体沈殿物に分離した。培養上清を
除去後、菌体沈殿物を水で洗浄し、湿重量約６００ｇの
湿菌体（生菌体画分）を得た。この生菌体画分は、バチ
ルスズブチリスＦＥＲＭＰ−１４６４７株の胞子を
乾燥重量で３重量％含有するものである。

【００４０】

【製造例３、４】粉末胞子上記製造例１によって得られたバチルスズブチリス
ＦＥＲＭＰ−１４６４７株の胞子画分約６００ｇを水
３Ｌに懸濁後、スプレードライヤー（ニロジャパン社
製）に１．５〜２Ｌ／ｈｒの流速で処理した（入口温度
１５０℃、出口温度１００℃）。スプレードライヤーに
よって得られた乾燥物を粉砕することにより乾燥重量約
７８ｇの粉末胞子を得た（製造例３）。

【００４１】同様にして製造例２で得られた胞子画分約
６００ｇより約７８ｇのバチルスズブチリスＦＥＲＭ
Ｐ−１４６４６株の粉末胞子を得た（製造例４）。

【００４２】

【比較例３】生菌体懸濁液上記比較例２によって得られたバチルスズブチリス
ＦＥＲＭＰ−１４６４７株の生菌体画分約１００ｇを
水１０Ｌに懸濁させて生菌体懸濁液を得た。

【００４３】次に、上記各製造例で得られたバチルス属
に属する細菌の胞子画分と胞子発芽促進剤を含有する本
発明の農園芸用殺菌剤組成物の実施例について説明す
る。尚、実施例中の配合量は全て重量部である。

【００４４】

【実施例１〜６】水和剤表１に示す成分をよく混和して水和剤を得た。また、同
様にしてバチルス属に属する細菌の胞子は含有するが胞
子発芽促進剤を含有しない比較例の水和剤を製造した。

【００４５】

【表１】

【００４６】

【実施例７】水和剤上記製造例２で得られた胞子画分と合成含水酸化ケイ素
粉末を重量比２：１で混和して、水分量を調整し、水分
含量が６重量％の胞子画分と合成含水酸化ケイ素粉末の
混和物を得た。これを含む表２に示す各成分をよく混和
して水和剤を得た。また、同様にしてバチルス属に属す
る細菌の胞子は含有するが胞子発芽促進剤を含有しない
比較例の水和剤を製造した。

【００４７】

【表２】

【００４８】

【実施例８】粒剤表３に示す成分をよく混和し、得られた混和物９０部に
対して水１０部を加えてよく練合した後、直径０．８ｍ
ｍのスクリーンの付いた押し出し造粒機で造粒し、室温
で乾燥した。これを更に３００〜１７００μｍに整粒し
て粒剤を得た。また、同様にしてバチルス属に属する細
菌の胞子は含有するが胞子発芽促進剤を含有しない比較
例の粒剤を製造した。

【００４９】

【表３】

【００５０】

【実施例９】粉剤表４に示す成分をよく混和して粉剤を得た。また、同様
にしてバチルス属に属する細菌の胞子は含有するが胞子
発芽促進剤を含有しない比較例の粉剤を製造した。

【００５１】

【表４】

【００５２】＜本発明の農園芸用殺菌剤組成物の評価＞
上記各実施例で得られた農園芸用殺菌剤組成物の植物病
害防除効果を比較例の製剤と共に、芝、バラ、レタス、
トマト、インゲン、ナス等の農園芸植物を用いて評価し
た。

【００５３】（１）芝リゾクトニアブラウンパッチ病防
除試験深底シャーレ（径９ｃｍ）でリゾクトニア病菌を培養
（ＰＤＡ培地）した後、滅菌土を８分目程度重層し、更
に１０日間培養して汚染土を調製した。この汚染土表面
を鎮圧した後、芝草（ベントグラスペンクロス）の種
子をシャーレ当たり０．０２ｇの割合で播種した。播種
後直ちに、実施例２で得られた水和剤の２００倍希釈液
（１．０×１０¹²ＣＦＵ／Ｌ）をシャーレ当たり６．４
ｍＬ（１ｍ ²当たり１Ｌ相当量）滴下した。このシャー
レを、２５〜３０℃、多湿条件下で栽培し、１５日後に
発病程度を以下の評価基準で目視判定した。

【００５４】＋：発病軽度＋＋：発病中度＋＋＋：発病重度

【００５５】更に、実施例３及び４で得られた水和剤の
２００倍希釈液（１．０×１０¹²ＣＦＵ／Ｌ）を用いて
同様の試験を行った。また、上記各実施例で得られた水
和剤による処理を行わなかった芝草についても同様の試
験を行い発病程度を調査した。

【００５６】比較のために、上記実施例の水和剤の２０
０倍希釈液の替わりに比較例４で得られた水和剤の２０
０倍希釈液（１．０×１０¹²ＣＦＵ／Ｌ）を用いて同様
の試験を行い、発病程度を調査した。結果を表５に示
す。

【００５７】

【表５】

【００５８】（２）芝リゾクトニアブラウンパッチ病防
除試験芝リゾクトニアブラウンパッチ病害に対する防除効果を
試験（品種：ベントグラスペンクロス、試験区：１０
ｍ²／区、２反復）した。発病は自然発生とした。粒径
０．１〜１．０ｍｍの川砂に実施例９で得られた粉剤を
１０重量％の含有量となるように加え均一に混合して目
土用砂とし、この目土用砂を試験区に０．５ｍ³／１０
００ｍ²の割合で５月下旬から３週間隔で３回散布し
た。最終散布の３週間後に発病面積を測定し、発病面積
率を求めた。

【００５９】また、上記実施例９で得られた粉剤を含有
する目土用土による処理を行わなかった芝草についても
同様の試験を行い発病面積率を求め、これをコントロー
ルとして次式により試験例の防除価を算出した。

【００６０】

【数１】防除価（％）＝（１−（試験例の発病面積率／
コントロールの発病面積率））×１００

【００６１】比較のために、上記実施例９の粉剤の替わ
りに比較例７で得られた粉剤を用いて同様の試験を行
い、発病面積率を求め、防除価の算出を行った。結果を
表６に示す。

【００６２】

【表６】

【００６３】（３）芝ダラースポット病防除試験芝ダラースポット（スクレロチニア病害）に対する防除
効果を試験（品種：ベントグラスペンクロス、試験
区：２ｍ²／区、３反復）した。発病は自然発生とし
た。実施例５で得られた水和剤の２００倍希釈液（１．
０×１０¹²ＣＦＵ／Ｌ）を７日間隔で４回、土壌潅注
（１Ｌ／ｍ²）し、最終処理の７日後に発病斑数を調査
した。

【００６４】また、上記実施例５で得られた水和剤によ
る処理を行わなかった芝草についても同様の試験を行い
発病斑数を調査した。更に、比較のために、上記実施例
５の水和剤の２００倍希釈液の替わりに比較例４で得ら
れた水和剤の２００倍希釈液（１．０×１０¹²ＣＦＵ／
Ｌ）、市販のバシタック水和剤（主成分；メプロニル、
クミアイ化学製、２０００ｐｐｍ）を用いて同様の試験
を行い、発病斑数を調査した。結果を表７に示す。

【００６５】

【表７】

【００６６】（４）芝ダラースポット病防除試験芝ダラースポット（スクレロチニア病害）に対する防除
効果を試験（品種：ベントグラスペンクロス、試験
区：１０ｍ²／区、反復なし）した。発病は自然発生と
した。実施例８で得られた粒剤を１ｍ²当たり３０ｇ
（６．０×１０¹⁰ＣＦＵ／ｍ²）、７日間隔で３回散布
し、最終散布の７日後に発病斑数を調査した。

【００６７】また、上記実施例８で得られた粒剤による
処理を行わなかった芝草についても同様の試験を行い発
病斑数を調査した。更に、比較のために、上記実施例８
の粒剤の替わりに比較例６で得られた粒剤（胞子含有量
が実施例８の３０倍であるが胞子発芽促進剤を含有して
いない粒剤）を用いて同様の試験を行い、発病斑数を調
査した。結果を表８に示す。

【００６８】

【表８】

【００６９】（５）バラうどんこ病防除試験バラうどんこ病に対する防除効果をビニールハウスにお
いて試験（品種：、クリスチャンディオール、試験区：
１株／区、３反復）した。バラうどんこ病菌の接種はう
どんこ病菌に感染したバラを植えた鉢を試験区の間に並
べることにより行った。新梢伸長期から展葉期のバラ
に、実施例５で得られた水和剤の２００倍希釈液（１．
０×１０¹²ＣＦＵ／Ｌ）を７日間隔で３回散布（株全体
に噴霧処理（茎葉部散布）、１００ｍＬ／株）し、最終
散布の７日後に発病小葉率を調査した。また、上記実施
例５で得られた水和剤による処理を行わなかったバラに
ついても同様の試験を行い発病小葉率を算出し、これを
コントロールとして上記芝草の試験例と同様にしてバラ
の試験例の防除価を算出した。

【００７０】更に、比較のために、上記実施例５の水和
剤の２００倍希釈液の替わりに比較例４で得られた水和
剤の２００倍希釈液（１．０×１０¹²ＣＦＵ／Ｌ）、市
販のサプロール乳剤（主成分；トリホリン、武田薬品
製、１０００ｐｐｍ）を用いて同様の試験を行い、発病
小葉率の調査及び防除価の算出を行った。結果を表９に
示す。

【００７１】

【表９】

【００７２】（６）レタス菌核病防除試験レタス菌核病に対する防除効果を試験（品種：シスコ、
試験区：４０株／区、３反復）した。レタス菌核病菌の
接種は、素焼き鉢で形成させたレタス菌核病菌子のう盤
を試験区内に均等に配置することによって行った。結球
初期のレタスに、実施例６で得られた水和剤の５００倍
希釈液（３．０×１０¹¹ＣＦＵ／Ｌ）を２５０Ｌ／１０
ａの割合で７日間隔で３回散布（株全体に噴霧処理）
し、最終散布の７日後に発病度を調査した。

【００７３】また、上記実施例６で得られた水和剤によ
る処理を行わなかったレタスについても同様の試験を行
い発病度を算出し、これをコントロールとして上記芝草
の試験例と同様にしてレタスの試験例の防除価を算出し
た。

【００７４】更に、比較のために、上記実施例６の水和
剤の５００倍希釈液の替わりに比較例４で得られた水和
剤の６５０倍希釈液（３．０×１０¹¹ＣＦＵ／Ｌ）、市
販のトップジンＭ水和剤（主成分；チオファネートメチ
ル、日本曹達製、６６７ｐｐｍ）を用いて同様の試験を
行い、発病度の調査及び防除価の算出を行った。結果を
表１０に示す。

【００７５】

【表１０】

【００７６】（７）トマト灰色かび病防除試験トマト灰色かび病に対する防除効果をガラス温室におい
て試験（品種：瑞健、試験区：１２株／区、３反復）し
た。トマト灰色かび病菌の接種は灰色かび病菌を感染さ
せ培養したミカン果実を温室内に吊り下げて行った。ト
マトの第３果房開花期に、実施例１で得られた水和剤の
２００倍希釈液（１．０×１０¹²ＣＦＵ／Ｌ）を７日間
隔で３回散布（茎葉部噴霧処理、２００Ｌ／１０ａ）し
た。最終散布の７日後に発病果・花を測定し、発病率を
求めた。

【００７７】上記実施例１で得られた水和剤による処理
を行わなかったトマトについても同様の試験を行い発病
率を求め、これをコントロールとして上記芝草の試験例
と同様にしてトマトの試験例の防除価を算出した。

【００７８】更に、比較のために、上記実施例１の水和
剤の２００倍希釈液の替わりに比較例４で得られた水和
剤の２００倍希釈液（１．０×１０¹²ＣＦＵ／Ｌ）、市
販のロニラン水和剤（主成分；ビンクロゾリン、三共
製、６６７ｐｐｍ）を用いて同様の試験を行い、発病率
を求め防除価の算出を行った。結果を表１１に示す。

【００７９】

【表１１】

【００８０】（８）インゲン灰色かび病防除試験インゲン灰色かび病に対する防除効果を試験（品種：さ
つきみどり２号、試験区：６ｍ²／区、反復なし）し
た。発病は自然発生とした。インゲンの開花期に、実施
例６で得られた水和剤の５００倍希釈液（３．０×１０
¹¹ＣＦＵ／Ｌ）を３００Ｌ／１０ａの割合で７日間隔で
４回散布（茎葉部噴霧処理）した。最終散布の７日後に
インゲン莢について発病の有無を調査し、発病莢率を求
めた。

【００８１】上記実施例６で得られた水和剤による処理
を行わなかったインゲンについても同様の試験を行い発
病莢率を算出し、これをコントロールとして上記芝草の
試験例と同様にしてインゲンの試験例の防除価を算出し
た。

【００８２】更に、比較のために、上記実施例６の水和
剤の２００倍希釈液の替わりに比較例４で得られた水和
剤の６５０倍希釈液（３．０×１０¹¹ＣＦＵ／Ｌ）、市
販のロニラン水和剤（主成分；ビンクロゾリン、三共
製、６６７ｐｐｍ）を用いて同様の試験を行い、発病莢
率を求め防除価の算出を行った。結果を表１２に示す。

【００８３】

【表１２】

【００８４】（９）ナスの灰色かび病防除試験（持続安
定性試験）ナス灰色かび病に対する防除効果をガラス温室において
試験（品種：千両、試験区：８株／区、３反復）した。
ナス灰色かび病菌の接種は、灰色かび病菌を感染させ培
養したナス果実を温室内に吊り下げて行った。ナスの開
花結実期に、実施例５で得られた水和剤の２００倍希釈
液（１×１０¹²ＣＦＵ／Ｌ）を７日間隔で３回散布（株
全体に噴霧処理、３００Ｌ／１０ａ）した。最終散布の
１週間後、２週間後に発病果・花率（％）を算出した。

【００８５】上記実施例５で得られた水和剤による処理
を行わなかったナスについても同様の試験を行い発病果
・花率を算出し、これをコントロールとして上記芝草の
試験例と同様にしてナスの試験例の防除価を算出した。

【００８６】更に、比較のために、上記実施例５の水和
剤の２００倍希釈液の替わりに比較例４で得られた水和
剤の２００倍希釈液（１．０×１０¹²ＣＦＵ／Ｌ）、比
較例３で得られた生菌体懸濁液及び比較例１で得られた
培養液上清（抗生物質画分）、を用いて同様の試験を行
い、発病果・花率の算出及び防除価の算出を行った。結
果を表１３に示す。

【００８７】

【表１３】

【００８８】これらの結果から明らかなうように、バチ
ルス属に属する細菌の胞子と胞子発芽促進剤を含有する
本発明の農園芸用殺菌剤組成物は、バチルス属に属する
細菌の胞子を含有するが胞子発芽促進剤を含有しない殺
菌剤組成物に比べ病害防除作用に優れ、また、生理障害
を起こしやすい従来の合成農薬に比べても病害防除作用
は同等かそれ以上であり、更に、バチルス属に属する細
菌の生菌体、それから得られる抗生物質等に比べて定着
性、持続安定性もよい。

【００８９】

【発明の効果】本発明の農園芸用殺菌剤組成物は、バチ
ルス属に属する細菌の胞子及び胞子発芽促進剤を含有す
ることで病害防除作用に優れ、更に、定着性、持続安定
性がよい。また、この農園芸用殺菌剤組成物を施用する
ことにより、非常に効果的に植物を各種病害から保護す
ることができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所 (Ｃ１２Ｎ 3/00 Ｃ１２Ｒ 1:125）

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】バチルス属に属する細菌の胞子及び胞子
発芽促進剤を含有する農園芸用殺菌剤組成物。
【請求項２】前記バチルス属に属する細菌が、植物病
原菌と拮抗する請求項１記載の農園芸用殺菌剤組成物。
【請求項３】前記植物病原菌と拮抗するバチルス属に
属する細菌が、バチルスズブチリスである請求項２記
載の農園芸用殺菌剤組成物。
【請求項４】前記バチルスズブチリスが、前記バチ
ルスズブチリスが、バチルスズブチリスＦＥＲＭ
Ｐ−１４６４７株菌、バチルスズブチリスＦＥＲＭ
Ｐ−１４６４６株菌から選ばれる請求項３記載の農園芸
用殺菌剤組成物。
【請求項５】前記バチルス属に属する細菌の胞子の含
有量が、組成物全量に対して０．００１〜９９．９重量
部である請求項１から４の何れか１項に記載の農園芸用
殺菌剤組成物。
【請求項６】前記胞子発芽促進剤が、栄養基質、キレ
ート化合物、無機塩から選ばれる請求項１から５の何れ
か１項に記載の農園芸用殺菌組成物。
【請求項７】前記胞子発芽促進剤の含有量が、組成物
全量に対して０．１〜９９．９９９重量部である請求項
１から６の何れか１項に記載の農園芸用殺菌剤組成物。