JPH08214880A - 微生物の破壊方法 - Google Patents
微生物の破壊方法Info
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- JPH08214880A JPH08214880A JP5197295A JP5197295A JPH08214880A JP H08214880 A JPH08214880 A JP H08214880A JP 5197295 A JP5197295 A JP 5197295A JP 5197295 A JP5197295 A JP 5197295A JP H08214880 A JPH08214880 A JP H08214880A
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Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 微生物が含まれる水性けん濁液にアルキルベ
ンゼンスルホン酸ナトリウムを添加し、超音波処理して
微生物を破壊する。 【効果】 微生物を超音波処理法によって破壊させるに
際し、そこに少量のアルキルベンゼンスルホン酸ナトリ
ウムを共存させると、低い超音波出力でしかも短時間で
破壊を十分進行させることができ、従って高分子の酵素
や核酸が破壊されたり、酸化されたりする危険性が殆ん
どない。
ンゼンスルホン酸ナトリウムを添加し、超音波処理して
微生物を破壊する。 【効果】 微生物を超音波処理法によって破壊させるに
際し、そこに少量のアルキルベンゼンスルホン酸ナトリ
ウムを共存させると、低い超音波出力でしかも短時間で
破壊を十分進行させることができ、従って高分子の酵素
や核酸が破壊されたり、酸化されたりする危険性が殆ん
どない。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、微生物の破壊方法に関
する。更に詳しくは、超音波処理法による微生物の破壊
方法に関する。
する。更に詳しくは、超音波処理法による微生物の破壊
方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】微生物中には、生理活性物質および酵
素、更にはそれらを合成する遺伝子などの様々な有用物
質が含まれている。これらの物質を大量に必要とする場
合には、微生物が当該物質を外に放出しない限り、微生
物を大量に増殖させた後、それを破壊することにより目
的物質を取出す方法が一般に用いられている。また、合
成物を微生物外に放出する微生物種の数も少ないため、
殆んどの場合に微生物を破壊する方法がとられている。
素、更にはそれらを合成する遺伝子などの様々な有用物
質が含まれている。これらの物質を大量に必要とする場
合には、微生物が当該物質を外に放出しない限り、微生
物を大量に増殖させた後、それを破壊することにより目
的物質を取出す方法が一般に用いられている。また、合
成物を微生物外に放出する微生物種の数も少ないため、
殆んどの場合に微生物を破壊する方法がとられている。
【０００３】微生物を破壊する方法には、化学的な方法
と物理的な方法とがある。化学的な方法は、リゾチーム
等の酵素を用いる方法であるが、その酵素に感受性のな
い微生物に使用できないことは当然である。
と物理的な方法とがある。化学的な方法は、リゾチーム
等の酵素を用いる方法であるが、その酵素に感受性のな
い微生物に使用できないことは当然である。
【０００４】一方、物理的な方法には、超音波処理法、
ホモジナイザを用いる方法(ブラウンのセルホモジナイ
ザを用いる方法)、フレンチ・プレスを用いる方法など
がある。しかしながら、ホモジナイザを用いる方法では
高分子の酵素や核酸が破壊される可能性があり、またフ
レンチ・プレスを用いる方法では高価な装置を必要とし
ている。
ホモジナイザを用いる方法(ブラウンのセルホモジナイ
ザを用いる方法)、フレンチ・プレスを用いる方法など
がある。しかしながら、ホモジナイザを用いる方法では
高分子の酵素や核酸が破壊される可能性があり、またフ
レンチ・プレスを用いる方法では高価な装置を必要とし
ている。
【０００５】超音波処理法は、超音波出力が高い場合に
は高分子の酵素や核酸を破壊するおそれがあるため、超
音波出力を低くして用いなければならず、そのために菌
体を破壊するのに時間を要し、処理時間が長くなるとそ
こに発生するラジカル等の作用によって、酵素や核酸が
酸化されてしまうという欠点がみられる。
は高分子の酵素や核酸を破壊するおそれがあるため、超
音波出力を低くして用いなければならず、そのために菌
体を破壊するのに時間を要し、処理時間が長くなるとそ
こに発生するラジカル等の作用によって、酵素や核酸が
酸化されてしまうという欠点がみられる。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、超音
波処理法によって微生物を破壊するに際し、低い超音波
出力を適用した場合でも、比較的短時間での破壊を可能
とする方法を提供することにある。
波処理法によって微生物を破壊するに際し、低い超音波
出力を適用した場合でも、比較的短時間での破壊を可能
とする方法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】かかる本発明の目的は、
微生物が含まれる水性けん濁液にアルキルベンゼンスル
ホン酸ナトリウムを添加し、超音波処理して微生物を破
壊する方法によって達成される。
微生物が含まれる水性けん濁液にアルキルベンゼンスル
ホン酸ナトリウムを添加し、超音波処理して微生物を破
壊する方法によって達成される。
【０００８】破壊の対象とされる微生物は、グラム陰性
細菌、グラム陽性細菌のいずれであってもよく、例えば
これらの細菌湿菌体１gに対し50mMリン酸塩(pH7.2)の如
き緩衝液を10mlの割合で加えた、微生物が含まれる水性
けん濁液として調製された上で用いられる。
細菌、グラム陽性細菌のいずれであってもよく、例えば
これらの細菌湿菌体１gに対し50mMリン酸塩(pH7.2)の如
き緩衝液を10mlの割合で加えた、微生物が含まれる水性
けん濁液として調製された上で用いられる。
【０００９】この水性けん濁液には、その最終濃度が約
0.01以上、好ましくは0.05〜0.1%となるような量のアル
キルベンゼンスルホン酸ナトリウムを溶解させた水溶液
が添加され、撹拌した後、35℃での振とう培養が約30〜
60分間程度行われる。
0.01以上、好ましくは0.05〜0.1%となるような量のアル
キルベンゼンスルホン酸ナトリウムを溶解させた水溶液
が添加され、撹拌した後、35℃での振とう培養が約30〜
60分間程度行われる。
【００１０】その後、出力約50〜120Wの超音波による処
理が行われ、Klett値(濁度)の低下によって微生物の破
壊度を評価すると、１時間の超音波処理によっても、そ
の値を著しく低下させることができる。
理が行われ、Klett値(濁度)の低下によって微生物の破
壊度を評価すると、１時間の超音波処理によっても、そ
の値を著しく低下させることができる。
【００１１】
【発明の効果】微生物を超音波処理法によって破壊させ
るに際し、そこに少量のアルキルベンゼンスルホン酸ナ
トリウムを共存させると、低い超音波出力でしかも短時
間で破壊を十分進行させることができ、従って高分子の
酵素や核酸が破壊されたり、酸化されたりする危険性が
殆んどない。
るに際し、そこに少量のアルキルベンゼンスルホン酸ナ
トリウムを共存させると、低い超音波出力でしかも短時
間で破壊を十分進行させることができ、従って高分子の
酵素や核酸が破壊されたり、酸化されたりする危険性が
殆んどない。
【００１２】
【実施例】次に、実施例について本発明を説明する。
【００１３】実施例１ リゾチーム感受性のない Bacillus sp. (属迄特定)の染
色体遺伝子を分離、抽出するための微生物の破壊に際
し、Bacillus sp. が含まれるKlett値400の50mMリン酸
緩衝液(pH6.8)5mlに、種々の濃度のアルキルベンゼンス
ルホン酸ナトリウム水溶液(蒸留水に溶解)5mlを添加し
(従って、その最終濃度は添加水溶液の1/2となる)、撹
拌した後、35℃で１時間の振とう培養を行った。その
後、培養液に出力80Wの超音波を超音波洗浄器で適用し
た。添加ＡＢＳ濃度(アルキルベンゼンスルホン酸ナト
リウムの最終濃度)に対するKlett値は、図１に示され
る。
色体遺伝子を分離、抽出するための微生物の破壊に際
し、Bacillus sp. が含まれるKlett値400の50mMリン酸
緩衝液(pH6.8)5mlに、種々の濃度のアルキルベンゼンス
ルホン酸ナトリウム水溶液(蒸留水に溶解)5mlを添加し
(従って、その最終濃度は添加水溶液の1/2となる)、撹
拌した後、35℃で１時間の振とう培養を行った。その
後、培養液に出力80Wの超音波を超音波洗浄器で適用し
た。添加ＡＢＳ濃度(アルキルベンゼンスルホン酸ナト
リウムの最終濃度)に対するKlett値は、図１に示され
る。
【００１４】この結果から、ＡＢＳを最終濃度が0.1%に
なるように添加した場合には、超音波処理１時間でKlet
t値を400から15に迄低下させることができることが分か
る。これに対して、ＡＢＳを添加していない場合には、
超音波処理１時間でKlett値を400から340迄しか減少さ
せることができず、この値を15迄低下させるには4時間
の処理時間を要した。
なるように添加した場合には、超音波処理１時間でKlet
t値を400から15に迄低下させることができることが分か
る。これに対して、ＡＢＳを添加していない場合には、
超音波処理１時間でKlett値を400から340迄しか減少さ
せることができず、この値を15迄低下させるには4時間
の処理時間を要した。
【００１５】実施例２ 大腸菌 E. coli WP2 株について、実施例１と同様の処
理を行ったところ、次のようなKlett値の変化が認めら
れた。 超音波処理 ＡＢＳ 0.1% ＡＢＳなし 0分 400 400 30分 15 210 60分 6 163
理を行ったところ、次のようなKlett値の変化が認めら
れた。 超音波処理 ＡＢＳ 0.1% ＡＢＳなし 0分 400 400 30分 15 210 60分 6 163
【図１】実施例１における添加ＡＢＳ濃度とKlett値と
の関係を示すグラフである。
の関係を示すグラフである。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成７年９月２２日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００９】 この水性けん濁液には、その最終濃度が
約０．０１％以上、好ましくは０．０５〜０．１％とな
るような量のアルキルベンゼンスルホン酸ナトリウムを
溶解させた水溶液が添加され、撹拌した後、３５℃での
振とう培養が約３０〜６０分間程度行われる。
約０．０１％以上、好ましくは０．０５〜０．１％とな
るような量のアルキルベンゼンスルホン酸ナトリウムを
溶解させた水溶液が添加され、撹拌した後、３５℃での
振とう培養が約３０〜６０分間程度行われる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:19）
Claims (1)
- 【請求項１】 微生物が含まれる水性けん濁液にアルキ
ルベンゼンスルホン酸ナトリウムを添加し、超音波処理
を行うことを特徴とする微生物の破壊方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5197295A JPH08214880A (ja) | 1995-02-16 | 1995-02-16 | 微生物の破壊方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5197295A JPH08214880A (ja) | 1995-02-16 | 1995-02-16 | 微生物の破壊方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08214880A true JPH08214880A (ja) | 1996-08-27 |
Family
ID=12901796
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5197295A Pending JPH08214880A (ja) | 1995-02-16 | 1995-02-16 | 微生物の破壊方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08214880A (ja) |
-
1995
- 1995-02-16 JP JP5197295A patent/JPH08214880A/ja active Pending
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