JPH0827005A

JPH0827005A - 抗菌剤

Info

Publication number: JPH0827005A
Application number: JP18193894A
Authority: JP
Inventors: Yoji Tamaoki; 洋司玉置; Takayuki Kato; 隆行加藤; Yoshiaki Miyake; 義明三宅
Original assignee: Pokka Corp
Current assignee: Pokka Corp
Priority date: 1994-07-12
Filing date: 1994-07-12
Publication date: 1996-01-30
Anticipated expiration: 2014-06-07
Also published as: JP2901879B2

Abstract

(57)【要約】【構成】ＬＥ−Ｖ（β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏ
ｘｙｐｈｌｏｒｏｇｌｕｃｉｎｏｌ）を有効成分とす
る抗菌剤。【効果】天然物由来で安全性が高く、虫歯菌や歯周病
原増殖阻害剤として歯みがき、口内清浄剤、食品類に添
加使用できるほか、防カビ剤として青果物等の防カビに
使用できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、抗菌剤に関するもので
あり、更に詳細には、天然有機化合物を有効成分とする
安全性の高いすぐれた抗菌剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】従来、天然物、特に柑橘類の果皮に由来
し、水に溶けやすく、無味、無臭であり、熱に安定な、
抗菌力にすぐれ且つ安全性の高い、フロログルシノール
系抗菌性物質については、これを単離、精製し、構造決
定に成功した例は知られていない。

【０００３】一方、β−Ｄ−グルコピラノキシフロロ
グルシノール（以下、ＬＥ−Ｖという場合もある）が、
微生物（例えば虫歯菌、歯周病菌や植物に寄生するカビ
類）に対してすぐれた抗菌性を有することについては、
特許はもとより、他の研究報告もなされていない。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】現在のところ、やむを
得ず抗菌剤としては化学合成品が使用されているが、人
体や環境に対する安全性の面で問題がある。そこで、当
業界においては、安全性が高く、取扱いやすく、しかも
適用範囲も広いすぐれた抗菌剤の開発が待望されてい
る。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明は、上記した業界
のニーズに応えるためになされたものであって、安全性
重視の面から、天然物に着目した。

【０００６】そこで本発明者らは、天然物由来の抗菌性
物質を求めて鋭意研究したところ、レモン、グレープフ
ルーツ、バレンシアオレンジ、ネーブルオレンジなどの
柑橘類の果皮に抗菌性物質が含まれることを確認したの
である。そして、抗菌性物質を分離、精製するのに成功
しただけでなく、精製物質（ＬＥ−Ｖ）についてその構
造決定にも成功し、そして更にこの精製物質のすぐれた
抗菌性も確認し、遂に本発明の完成に至ったものであ
る。

【０００７】すなわち本発明は、ＬＥ−Ｖを有効成分と
する抗菌剤に関するものである。ＬＥ−Ｖ物質は、柑橘
類の果皮由来の天然物質であって、フロログルシノール
誘導体であり、構造決定の結果、β−Ｄ−グルコピラノ
キシフロログルシノール（β−Ｄ−glucopyranoxy ph
loroglucinol）と同定された。

【０００８】ＬＥ−Ｖは、レモン、グレープフルーツ、
バレンシアオレンジ、ネーブルオレンジなどの柑橘果実
の搾り粕、果皮や果汁に存在し、これらから抽出、精製
できる。抽出溶媒としては、水、熱水、アルカリ水、酸
性水のような溶媒や、メタノール、エタノール、アセト
ンのような有機溶媒でも抽出できる。そして、粗精製の
状態でも、ＬＥ−Ｖ成分が十分量あれば抗微生物効果が
発揮される。ＬＥ−Ｖ物質は、安全性が高く、卓越した
抗菌作用を示すだけでなく、その抗菌スペクトルが広範
なために各種の抗菌剤として広く使用できる。そのう
え、水に溶けやすく、無味、無臭であり、熱に安定であ
るので、きわめて使いやすく、きわめて広範囲な用途に
利用することができる。

【０００９】例えばＬＥ−Ｖ物質は、次のような用途に
広く利用できる。飲食品に直接ないし関接的に添加し
て、日持ち向上ないし、抗菌剤としての使用；虫歯菌、
歯周病原菌に対する抗菌剤（例えば、直接患部に適用す
る薬剤、口中洗浄剤、うがい薬、歯磨きとしての使
用）；抗カビ剤としての使用；果実や野菜等青果物の貯
蔵、輸送時の抗カビ剤（例えば、塗布剤、ワックス剤と
して、ポストハーベスト農薬の代替物としての使用）。
以下、本発明の実施例について述べる。

【００１０】

【実施例１】ミキサーで粉砕したレモン搾り粕の果皮
を、エタノールに３７℃、３日間放置して抽出を行っ
た。これを、エバポレーターで減圧蒸留してエタノール
を除去した。これを水にとかし、分液ロートを用いて液
−液溶媒分画を行った。

【００１１】液−液溶媒分画は、溶媒として、ヘキサ
ン、クロロホルム、酢酸エチル、水飽和ブタノール、水
を用いて、順次分画を行ない、それぞれの可溶性画分を
得た。これらの画分の内、水飽和ブタノール画分は、こ
れを減圧蒸留して乾固させた後、水に溶かした。これを
分取ＨＰＬＣでさらに分画し、活性を示す画分を得た。
この画分について分取ＨＰＬＣをくり返すことにより、
精製物質（ＬＥ−Ｖ）を得た。これを凍結乾燥して、粉
末品を調製した。

【００１２】得られたＬＥ−Ｖ物質について、¹ＨＮ
ＭＲ分析、¹³ＣＮＭＲ分析その他の分析を行い、下記
表１に示す理化学的性質を得た。

【００１３】

【表１】

【００１４】これらの結果から、ＬＥ−Ｖの構造決定を
行い、ＬＥ−Ｖはβ−Ｄ−グルコピラノキシフロログ
ルシノール（β−Ｄ−glucopyranoxy phloroglucinol）
と同定された。その化学構造式は、下記化２に示すとお
りである。

【００１５】

【化２】

【００１６】

【実施例２】ＬＥ−Ｖ物質の虫歯及び歯周病菌に対する
抗菌活性を次のようにして測定、確認した。

【００１７】虫歯については、原因菌として知られるSt
reptococcus mutans ATCC 7270を用いた。歯周病につい
ては、歯肉炎と歯槽膿漏の原因菌を用いた。すなわち、
歯肉炎の原因菌としては、Prevotella intermedia及びA
ctinomyces viscosus NIAH 1010を用い、歯槽膿漏の原
因菌としては、Porphyromonas gingivalis 381を用い
た。そして、S. mutans及びA. viscosusの増殖培地とし
ては、ブレインハートインフュージョン（ＢＨＩ）培地
を用い、また、P. intermedia及びP. gingivalisの増殖
培地としては、ガム（ＧＡＭ）培地を用いた。

【００１８】これら菌類に対するＬＥ−Ｖ物質の増殖阻
害活性の測定は、濃度を変化させて添加したブイヨン培
地５ｍｌに菌を１０⁵cells／ｍｌ接種して、３７℃で２
日間培養して行った。但し、P. gingivallsについて
は、本菌が偏性嫌気性菌であるため、嫌気ジャー（ＢＢ
Ｌ製）内で培養した。その後、培養液を寒天培地に０．
１ｍｌ添加し、これを３７℃、２日間培養した後、コロ
ニーの有無を観察した。

【００１９】抗菌性は、コロニー無しの場合に滅菌と判
断した。そして、サンプル濃度と抗菌効果の相関を調
べ、活性の強さは、最小の濃度で同菌を滅菌する最小阻
害濃度（ＭＩＣ）で示した。得られた結果を下記表２に
示すが、ＬＥ−Ｖに虫歯菌、歯周病菌に対して、卓越し
た増殖阻害効果及び滅菌効果が認められた。

【００２０】

【表２】

【００２１】

【実施例３】ＬＥ−Ｖ物質の果実貯蔵時に発生するカビ
に対する増殖阻害活性を次のようにして測定、確認し
た。

【００２２】試験カビは、カビが発生した貯蔵レモン果
実から分離した。そして、緑カビ病のPenicillium digi
tatum、青カビ病のPenicillium italicumの混在した胞
子を得た。増殖培地は、ポテトデキストロース寒天（Ｐ
ＤＡ）培地を用いた。

【００２３】これらカビ類に対するＬＥ−Ｖ物質の増殖
阻害活性の測定は、ＬＥ−Ｖを添加した寒天培地５ｍｌ
をシャーレ（直径４．５ｃｍ）に作成し、シャーレ中心
に径２ミリの穴を開けた。そこに、１０⁵spores／ｍｌ
のカビ胞子を等量（５μｌ）ずつ接種して２５℃、３〜
７日間培養した。生長したカビの菌糸の円径を測定し、
増殖の程度を観察した。結果を下記表３に示すが、ＬＥ
−Ｖにはすぐれたカビ成長抑制効果があることが確認さ
れた。

【００２４】

【表３】

【００２５】

【実施例４】ＬＥ−Ｖの微生物（細菌、酵母）に対する
抗菌性を次のようにして測定、確認した。

【００２６】細菌として、Lactobacillus casei、Strept
ococcus lactisはＧＡＭ培地で、Escherichia coli IFO
3301、Salmonella typhimurium IIP 1000、Bacillus s
ubtilis AJ 1235はＮＢ培地で培養した。酵母として、S
accharomyces cerevisiae IFO 1346、Hansenula anomal
a IAM 12914はＹＭ培地で培養した。各培地にＬＥ−Ｖ
を濃度変化させて添加し、オートクレーブ処理（１２１
℃，１５分）、各菌懸濁液を接種し、細菌は３７℃で、
酵母は２５℃で培養し、ＬＥ−Ｖの滅菌濃度を調べた。
得られた結果を下記表４に示す。

【００２７】

【表４】

【００２８】

【実施例５】溶液Ａ（ＬＥ−Ｖ５０ｇ、脱イオン水５ｋ
ｇ）、及び溶液Ｂ（ショ糖５０ｇ、クエン酸８ｇ、クエ
ン酸ナトリウム８ｇ、ビタミンＣ１ｇ、香料１０ｇ、１
／５濃縮レモン果汁１００ｇ、水５ｋｇ）を用意した。

【００２９】溶液Ａ及び溶液Ｂをそれぞれ別々にプレー
ト殺菌機にて９０〜９５℃に３分間保持して殺菌した
後、５〜１０℃に冷却し、タンクに貯蔵した。次いでこ
のようにして得た混合液を紙製容器に無菌的に充填し、
虫歯予防用の長期間保存可能なレモン果汁飲料を製造し
た。

【００３０】

【実施例６】次の配合にて、虫歯予防用歯磨を製造し
た。

【００３１】配合（％）リン酸水素カルシウム・２水和物４５．０グリセリン１０．０ソルビトール２５．０ＬＥ−Ｖ２．０ＣＭＣ−Ｎａ０．５カラギーナン０．５サッカリンナトリウム０．２ラウリル硫酸ナトリウム１．２ビタミンＥ酢酸塩０．１ペパーミント香料１．０水残部

【００３２】

【実施例７】ＬＥ−Ｖ２５．０％、グリセリン脂肪酸エ
ステル８．０％、酢酸ナトリウム４．５％、エタノール
６２．５％を用いてＬＥ−Ｖ配合製剤を調製した。

【００３３】この配合製剤と市販のワックス製剤（甲東
社製）を２：３で混合し、ＬＥ−Ｖワックス製剤を調製
した。本製剤は、レモン、オレンジ、グレープフルーツ
等の柑橘類のほか、各種果実、青果物の保存にきわめて
有用であり、従来用いられている化学合成品を主体とす
るポストハーベスト農薬の代替物として、保存性はもと
より安全性の面からもきわめてすぐれたものである。

【００３４】

【発明の効果】本発明に係る抗菌剤は、天然物由来であ
るため、抗菌性にすぐれているだけでなく安全性がきわ
めて高く、青果物の防カビや飲食品の抗菌に使用して非
常に有効である。また、虫歯菌、歯周病菌増殖阻害活性
も高いので、例えば、歯みがき、口中清浄剤、各種飲食
品等にも適宜調製することができる。

【００３５】また、本発明によって抗菌剤の有効成分の
構造決定もなされたので、この化合物の誘導体を製造す
ることにより、更に新規な抗菌剤の創製も期待できる。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記の化１で示されるβ−Ｄ−グルコピ
ラノキシフロログルシノール（β−Ｄ−glucopyranox
y phloroglucinol）を有効成分とすることを特徴とする
抗菌剤。【化１】
【請求項２】抗菌剤が飲食品用の日持ち向上剤及び／
又は抗菌剤であることを特徴とする請求項１に記載の抗
菌剤。
【請求項３】抗菌剤が虫歯菌、歯周病原菌に対する抗
菌剤であることを特徴とする請求項１に記載の抗菌剤。
【請求項４】抗菌剤が防カビ剤であることを特徴とす
る請求項１に記載の抗菌剤。
【請求項５】抗菌剤が青果物の貯蔵・輸送時の防カビ
剤であることを特徴とする請求項１に記載の抗菌剤。