JPH08280332A - 飼料用添加剤 - Google Patents
飼料用添加剤Info
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- JPH08280332A JPH08280332A JP7092698A JP9269895A JPH08280332A JP H08280332 A JPH08280332 A JP H08280332A JP 7092698 A JP7092698 A JP 7092698A JP 9269895 A JP9269895 A JP 9269895A JP H08280332 A JPH08280332 A JP H08280332A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 酵素処理酵母の経口投与による家畜および魚
類の免疫増強 【構成】 酵母細胞壁溶解酵素により処理した酵母を含
む飼料添加剤およびそれを含む飼料。
類の免疫増強 【構成】 酵母細胞壁溶解酵素により処理した酵母を含
む飼料添加剤およびそれを含む飼料。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は飼料添加剤および飼料に
関する。さらに、詳述すれば、本発明は酵母細胞壁溶解
酵素で処理した酵母菌体を含む飼料添加剤およびそれを
配合してなる飼料に関する。
関する。さらに、詳述すれば、本発明は酵母細胞壁溶解
酵素で処理した酵母菌体を含む飼料添加剤およびそれを
配合してなる飼料に関する。
【０００２】
【従来の技術】一般に畜産業界や養殖業界では生産コス
トの低減のために、高密度で飼育されており、それだけ
細菌やウイルス等の病原体が蔓延しやすい状態にある。
従来はこれらの病原体の蔓延を防止するために、抗生物
質やその他の殺菌剤を飼料に配合することが行われてい
るが、これら抗生物質の多用によって菌交代現象による
日和見感染または耐性菌の出現、畜産物や魚肉への薬物
残留等の問題がある。上記の問題を解決する方法とし
て、抗生物質を使用せずに、生体の免疫系を刺激して活
性化させ、免疫力を高める物質である、所謂免疫増強物
質を飼料に配合することが行われている。このような免
疫増強物質としてペプチドグリカン（特公平６−２５０
６７号公報）や細菌、酵母、キノコ等の細胞壁構成物質
であるβ−グルカン等が知られている。酵母菌体内には
栄養価の高い蛋白質、ビタミン、ミネラル等を高濃度に
含み、その細胞壁にはグルカン、マンナン等を含む。し
かし、ヒト、家畜、魚類等は酵母細胞壁を消化する酵素
を持たず、さらに酵母細胞壁が極めて強固であるために
消化性が悪く、菌体成分の利用率は低い。酵母菌体自身
の利用率を高めるために、酵母細胞壁の様々な破壊方法
が検討されている。例えば、特開平６−２５６１９９号
公報には酵母菌体を微粉砕してなる飼料用免疫増強剤及
びその製造法が開示されている。特公昭４７−１５７１
２号公報には酵母を自己消化、酵素処理およびアルカリ
処理してなる水溶性高分子多糖体を得ている。また、特
開平４−２５３７０３号公報には酵母をアルカリ抽出し
て第一の不溶性酵母残留物を得、これを熱アルカリ抽出
して第二の不溶性酵母残留物を得、これを所定のｐＨで
洗浄して第三の不溶性酵母残留物を得、これを酸加水分
解して第四の不溶性酵母残留物を得、これを水中にて沸
騰させ第五の不溶性酵母残留物を得、これをエタノ−ル
中で沸騰させて第六の不溶性残留物を得、これを水洗し
て、主としてβ−１，３−グリコシド結合によって結合
したグルコピラノース単位からなり、そこからβ−１，
６−グリコシド結合によって結合したグルコピラノース
単位の少なくとも１個の分枝を有する酵母グルカンの製
造法を開示する。
トの低減のために、高密度で飼育されており、それだけ
細菌やウイルス等の病原体が蔓延しやすい状態にある。
従来はこれらの病原体の蔓延を防止するために、抗生物
質やその他の殺菌剤を飼料に配合することが行われてい
るが、これら抗生物質の多用によって菌交代現象による
日和見感染または耐性菌の出現、畜産物や魚肉への薬物
残留等の問題がある。上記の問題を解決する方法とし
て、抗生物質を使用せずに、生体の免疫系を刺激して活
性化させ、免疫力を高める物質である、所謂免疫増強物
質を飼料に配合することが行われている。このような免
疫増強物質としてペプチドグリカン（特公平６−２５０
６７号公報）や細菌、酵母、キノコ等の細胞壁構成物質
であるβ−グルカン等が知られている。酵母菌体内には
栄養価の高い蛋白質、ビタミン、ミネラル等を高濃度に
含み、その細胞壁にはグルカン、マンナン等を含む。し
かし、ヒト、家畜、魚類等は酵母細胞壁を消化する酵素
を持たず、さらに酵母細胞壁が極めて強固であるために
消化性が悪く、菌体成分の利用率は低い。酵母菌体自身
の利用率を高めるために、酵母細胞壁の様々な破壊方法
が検討されている。例えば、特開平６−２５６１９９号
公報には酵母菌体を微粉砕してなる飼料用免疫増強剤及
びその製造法が開示されている。特公昭４７−１５７１
２号公報には酵母を自己消化、酵素処理およびアルカリ
処理してなる水溶性高分子多糖体を得ている。また、特
開平４−２５３７０３号公報には酵母をアルカリ抽出し
て第一の不溶性酵母残留物を得、これを熱アルカリ抽出
して第二の不溶性酵母残留物を得、これを所定のｐＨで
洗浄して第三の不溶性酵母残留物を得、これを酸加水分
解して第四の不溶性酵母残留物を得、これを水中にて沸
騰させ第五の不溶性酵母残留物を得、これをエタノ−ル
中で沸騰させて第六の不溶性残留物を得、これを水洗し
て、主としてβ−１，３−グリコシド結合によって結合
したグルコピラノース単位からなり、そこからβ−１，
６−グリコシド結合によって結合したグルコピラノース
単位の少なくとも１個の分枝を有する酵母グルカンの製
造法を開示する。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】酵母の細胞壁の消化を
助長するために、従来の技術は煩雑な工程を余儀無くさ
れており、また工業化の規模として不向きであった。本
発明はそのような欠点を解消し、比較的簡単な工程によ
りかつ工業化に適する方法を開発し、免疫増強を目的と
して酵母細胞壁溶解酵素で処理した酵母を利用するもの
である。
助長するために、従来の技術は煩雑な工程を余儀無くさ
れており、また工業化の規模として不向きであった。本
発明はそのような欠点を解消し、比較的簡単な工程によ
りかつ工業化に適する方法を開発し、免疫増強を目的と
して酵母細胞壁溶解酵素で処理した酵母を利用するもの
である。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者等は上記の点を
考慮し研究を重ねた結果、プロテア−ゼ活性の低い酵母
細胞壁溶解酵素により酵母細胞壁を消化し、得られた酵
素処理酵母を飼料の添加剤として経口投与した場合、す
ぐれた免疫増強効果が認められたことで本発明を完成さ
せるに至った。本発明に用いられる酵母菌は酵母細胞壁
溶解酵素により溶解可能なものであれば、どれでもよ
く、例えばサッカロミセス、サッカロミコデス、ネマト
スポラ、カンジダ、トルロプシス、プレタノミセス、ロ
ドトルラ等に属する菌、あるいはビール酵母、パン酵
母、清酒酵母等が挙げられる。酵母細胞壁溶解酵素に
は、プロテアーゼ活性が低い酵素が望ましく、例えばア
ースロバクターやオエルスコビアに属する菌の産生する
酵素があげられる。このような酵母細胞壁溶解酵素の好
適な具体例はアースロバクター・ルテウスの生産する酵
母細胞壁溶解酵素（特公昭４７−３２６７４号及び特公
昭４８−２７９０号公報参照）が挙げられる。酵母細胞
壁溶解酵素処理は、菌体を約１〜２０重量％含む水性懸
濁液としておこなえばよい。そして酵母細胞壁溶解酵素
を乾燥酵母菌体１ｇあたり１〜２００単位、好ましくは
５〜５０単位添加し、約ｐＨ５〜８で、２０〜５０°
Ｃ、好ましくは３０〜４５°Ｃで１〜２０時間緩やかに
攪拌して反応させる。なお、ここでいう、酵素の活性単
位は以下のようにして求めたものである。菌体濃度５ｍ
ｇ／ｍｌの酵母懸濁液３ｍｌ、ｐＨ７．５の１／１５Ｍ
リン酸緩衡液５ｍｌに酵母細胞壁溶解酵素液１ｍｌおよ
び水を加えて全量を１０ｍｌにし、これを２５℃で２時
間反応させ、反応後の８００ｎｍにおける光学密度
（Ｏ．Ｄ．）を測定する。対照として酵素液の代わりに
水を加えて同様の操作を行い、次式により８００ｎｍに
おける光学密度の減少率を算出する。 減少率＝（対照のＯ．Ｄ．−酵素反応液のＯ．Ｄ．）／
対照のＯ．Ｄ．×１００ 減少率が３０％を示すものを酵素活性１単位とする。な
お、減少率と酵素濃度間には、６０％に至るまでは比例
があり、正確に単位を測定する場合には、酵素液は６０
％以下の減少率を示す範囲に適度に希釈しなければなら
ない。この酵素処理に際し、前もって、酵母菌体を７０
〜１００°Ｃ、好ましくは９０〜１００°Ｃで加熱して
おくと酵素量を減らすことが可能であるので好ましい。
具体的には、例えば、水蒸気の吹き込みにより９０°Ｃ
以上でかつ沸点以下の温度にして、３０〜１２０分間程
度加熱すればよい。酵素処理後の酵母は、保存性を高め
るためには乾燥することが好ましい。乾燥方法は通常知
られている温風乾燥などのいずれの方法でもよい。
考慮し研究を重ねた結果、プロテア−ゼ活性の低い酵母
細胞壁溶解酵素により酵母細胞壁を消化し、得られた酵
素処理酵母を飼料の添加剤として経口投与した場合、す
ぐれた免疫増強効果が認められたことで本発明を完成さ
せるに至った。本発明に用いられる酵母菌は酵母細胞壁
溶解酵素により溶解可能なものであれば、どれでもよ
く、例えばサッカロミセス、サッカロミコデス、ネマト
スポラ、カンジダ、トルロプシス、プレタノミセス、ロ
ドトルラ等に属する菌、あるいはビール酵母、パン酵
母、清酒酵母等が挙げられる。酵母細胞壁溶解酵素に
は、プロテアーゼ活性が低い酵素が望ましく、例えばア
ースロバクターやオエルスコビアに属する菌の産生する
酵素があげられる。このような酵母細胞壁溶解酵素の好
適な具体例はアースロバクター・ルテウスの生産する酵
母細胞壁溶解酵素（特公昭４７−３２６７４号及び特公
昭４８−２７９０号公報参照）が挙げられる。酵母細胞
壁溶解酵素処理は、菌体を約１〜２０重量％含む水性懸
濁液としておこなえばよい。そして酵母細胞壁溶解酵素
を乾燥酵母菌体１ｇあたり１〜２００単位、好ましくは
５〜５０単位添加し、約ｐＨ５〜８で、２０〜５０°
Ｃ、好ましくは３０〜４５°Ｃで１〜２０時間緩やかに
攪拌して反応させる。なお、ここでいう、酵素の活性単
位は以下のようにして求めたものである。菌体濃度５ｍ
ｇ／ｍｌの酵母懸濁液３ｍｌ、ｐＨ７．５の１／１５Ｍ
リン酸緩衡液５ｍｌに酵母細胞壁溶解酵素液１ｍｌおよ
び水を加えて全量を１０ｍｌにし、これを２５℃で２時
間反応させ、反応後の８００ｎｍにおける光学密度
（Ｏ．Ｄ．）を測定する。対照として酵素液の代わりに
水を加えて同様の操作を行い、次式により８００ｎｍに
おける光学密度の減少率を算出する。 減少率＝（対照のＯ．Ｄ．−酵素反応液のＯ．Ｄ．）／
対照のＯ．Ｄ．×１００ 減少率が３０％を示すものを酵素活性１単位とする。な
お、減少率と酵素濃度間には、６０％に至るまでは比例
があり、正確に単位を測定する場合には、酵素液は６０
％以下の減少率を示す範囲に適度に希釈しなければなら
ない。この酵素処理に際し、前もって、酵母菌体を７０
〜１００°Ｃ、好ましくは９０〜１００°Ｃで加熱して
おくと酵素量を減らすことが可能であるので好ましい。
具体的には、例えば、水蒸気の吹き込みにより９０°Ｃ
以上でかつ沸点以下の温度にして、３０〜１２０分間程
度加熱すればよい。酵素処理後の酵母は、保存性を高め
るためには乾燥することが好ましい。乾燥方法は通常知
られている温風乾燥などのいずれの方法でもよい。
【０００５】
【効果】この酵素処理酵母を免疫増強物質として経口投
与した場合、微量で免疫増強効果が認められた。本発明
の投与量はヒトおよび家畜等の対象により当然に異な
る。例えば、家畜に投与する場合は、通常一日あたり、
乾燥酵母換算で約０．５ｍｇ／体重１ｋｇが望ましい。
与した場合、微量で免疫増強効果が認められた。本発明
の投与量はヒトおよび家畜等の対象により当然に異な
る。例えば、家畜に投与する場合は、通常一日あたり、
乾燥酵母換算で約０．５ｍｇ／体重１ｋｇが望ましい。
【０００６】
【参考例１】 酵素処理酵母の調製 ビール工場から採取したビール酵母の生菌体を５％の濃
度で水に懸濁させ、９０°Ｃ以上の温度で１時間加熱処
理し、冷却する。アースロバクター・ルテウス由来の酵
母細胞壁溶解酵素を酵母乾燥重量１ｋｇ当たり５０００
単位添加し、４５°Ｃで１６時間ゆるやかに攪拌しなが
ら反応させる。その後、必要に応じて乾燥し、酵素処理
酵母標品を得た。この酵素処理酵母を生理食塩水に懸濁
させ、振とう器で１５分間振とうして、飼料用免疫増強
物質を調製した。
度で水に懸濁させ、９０°Ｃ以上の温度で１時間加熱処
理し、冷却する。アースロバクター・ルテウス由来の酵
母細胞壁溶解酵素を酵母乾燥重量１ｋｇ当たり５０００
単位添加し、４５°Ｃで１６時間ゆるやかに攪拌しなが
ら反応させる。その後、必要に応じて乾燥し、酵素処理
酵母標品を得た。この酵素処理酵母を生理食塩水に懸濁
させ、振とう器で１５分間振とうして、飼料用免疫増強
物質を調製した。
【０００７】
【参考例２】 免疫増強試験方法 （１）ＢＡＬＢ／ｃマウス（７週令、オス）に、参考例
１で得た酵素処理酵母懸濁液を経口投与する。投与２日
後に腹腔マクロファージ、脾臓リンパ球、脾臓好中球を
採取した。これらの細胞について、ケミルミネッセンス
リーダーを用いて貪食能の測定、ＮＫ活性、サイトカイ
ンの測定を行った。また、Ｃ３Ｈ／ＨｅＮマウスに同酵
素処理酵母を経口投与し、３日後に脾臓由来単核球を採
取し、グルコ−ス消費による幼若化反応を測定した。 （２）ケミルミネッセンスリーダーによる貪食能の測定 「測定する貪食細胞を採取しプラスチック小試験管に分
取し、感光増幅剤ルミノールを加え、ケミルミネッセン
スリーダーにセットする。刺激因子としてオプソニン化
ザイモセルを添加し貪食に伴う化学発光反応をリーダー
で測定する。対照群の化学発光強度のピーク値を１とし
た場合の各投与群のピーク値をＳ．Ｉ．値(Stimulating
Index) として表した。 （３）ＮＫ活性の測定 標的細胞（Ｔ）にはＫ−５６２を用い、測定前に蛍光色
素で標識する。採取した脾臓リンパ球を１０％ＦＣＳ加
ＲＰＭＩ−１６４０に浮遊させ、エフェクター細胞
（Ｅ）とした。事前試験より、エフェクター細胞と標的
細胞の最適比（Ｅ：Ｔ）を４０：１とした。９６穴プレ
ートでＥ：Ｔ＝４０：１の条件で混合し、５％ＣＯ2 存
在下で３７°Ｃで４時間反応後、細胞内に残存する蛍光
色素量を蛍光色素測定装置で測定した。細胞傷害活性は
以下の式で算出した。 （４）脾臓由来単核球の幼若化試験 脾臓由来単核球２×１０6 ／ｍｌをコンカナバリンＡ
（Ｃｏｎ Ａ）添加群、ポークウィードマイトジェン
（ＰＷＭ）添加群および無処理群に分け、混合培養し
た。９６時間後、培養上清中のグルコース量を測定し、
その消費量からＳ．Ｉ．値（消費したグルコース量／培
地中のグルコース量×１００）を求め、評価した。 （５）インターロイキン２（ＩＬ−２）およびインター
ロイキン５（ＩＬ−５）産生量の測定 脾臓単核球をＣｏｎ ＡおよびＰＷＭで刺激し、４日間
培養後、ＥＬＩＳＡ（Enzyme-linked immunosorbent as
say)を用いた常法により培養上清中のＩＬ−２およびＩ
Ｌ−５量を測定した。
１で得た酵素処理酵母懸濁液を経口投与する。投与２日
後に腹腔マクロファージ、脾臓リンパ球、脾臓好中球を
採取した。これらの細胞について、ケミルミネッセンス
リーダーを用いて貪食能の測定、ＮＫ活性、サイトカイ
ンの測定を行った。また、Ｃ３Ｈ／ＨｅＮマウスに同酵
素処理酵母を経口投与し、３日後に脾臓由来単核球を採
取し、グルコ−ス消費による幼若化反応を測定した。 （２）ケミルミネッセンスリーダーによる貪食能の測定 「測定する貪食細胞を採取しプラスチック小試験管に分
取し、感光増幅剤ルミノールを加え、ケミルミネッセン
スリーダーにセットする。刺激因子としてオプソニン化
ザイモセルを添加し貪食に伴う化学発光反応をリーダー
で測定する。対照群の化学発光強度のピーク値を１とし
た場合の各投与群のピーク値をＳ．Ｉ．値(Stimulating
Index) として表した。 （３）ＮＫ活性の測定 標的細胞（Ｔ）にはＫ−５６２を用い、測定前に蛍光色
素で標識する。採取した脾臓リンパ球を１０％ＦＣＳ加
ＲＰＭＩ−１６４０に浮遊させ、エフェクター細胞
（Ｅ）とした。事前試験より、エフェクター細胞と標的
細胞の最適比（Ｅ：Ｔ）を４０：１とした。９６穴プレ
ートでＥ：Ｔ＝４０：１の条件で混合し、５％ＣＯ2 存
在下で３７°Ｃで４時間反応後、細胞内に残存する蛍光
色素量を蛍光色素測定装置で測定した。細胞傷害活性は
以下の式で算出した。 （４）脾臓由来単核球の幼若化試験 脾臓由来単核球２×１０6 ／ｍｌをコンカナバリンＡ
（Ｃｏｎ Ａ）添加群、ポークウィードマイトジェン
（ＰＷＭ）添加群および無処理群に分け、混合培養し
た。９６時間後、培養上清中のグルコース量を測定し、
その消費量からＳ．Ｉ．値（消費したグルコース量／培
地中のグルコース量×１００）を求め、評価した。 （５）インターロイキン２（ＩＬ−２）およびインター
ロイキン５（ＩＬ−５）産生量の測定 脾臓単核球をＣｏｎ ＡおよびＰＷＭで刺激し、４日間
培養後、ＥＬＩＳＡ（Enzyme-linked immunosorbent as
say)を用いた常法により培養上清中のＩＬ−２およびＩ
Ｌ−５量を測定した。
【０００８】
【実施例１】ＢＡＬＢ／ｃマウスに酵素処理酵母を経口
投与し、腹腔マクロファージの貪食能の指標となる化学
発光量をケミルミネッセンスリーダーで測定した。対照
群のピーク値を１とした場合の各投与群のピ−ク値を
Ｓ．Ｉ．値として表した。結果は図１に示した通りであ
る。図１の結果は酵素処理酵母の経口投与によって腹腔
マクロファージの貪食能が増強されることを示してい
る。
投与し、腹腔マクロファージの貪食能の指標となる化学
発光量をケミルミネッセンスリーダーで測定した。対照
群のピーク値を１とした場合の各投与群のピ−ク値を
Ｓ．Ｉ．値として表した。結果は図１に示した通りであ
る。図１の結果は酵素処理酵母の経口投与によって腹腔
マクロファージの貪食能が増強されることを示してい
る。
【０００９】
【実施例２】酵素処理酵母を経口投与した群では、ＮＫ
活性が有意に高まり、酵母投与量に差はなかった。結果
は図２に示した通りである。
活性が有意に高まり、酵母投与量に差はなかった。結果
は図２に示した通りである。
【００１０】
【実施例３】酵素処理酵母経口投与マウスの脾臓由来単
核球の幼弱化に及ぼす影響を調べた。その結果、酵母投
与群は非投与群に比べ、Ｓ．Ｉ．値が高かった。結果は
図３に示した通りである。処理酵母の経口投与によって
脾臓由来単核球の幼若化が増強されることを示してい
る。
核球の幼弱化に及ぼす影響を調べた。その結果、酵母投
与群は非投与群に比べ、Ｓ．Ｉ．値が高かった。結果は
図３に示した通りである。処理酵母の経口投与によって
脾臓由来単核球の幼若化が増強されることを示してい
る。
【００１１】
【実施例４】酵素処理酵母経口投与マウスの脾臓細胞培
養上清中のＩＬ−２およびＩＬ−５産生量を調べた。そ
の結果、酵母投与群は非投与群に比べＩＬ−２およびＩ
Ｌ−５産生量が多く、マイトジェンに対する反応性が高
まっていた。結果は図４および５に示した通りである。
養上清中のＩＬ−２およびＩＬ−５産生量を調べた。そ
の結果、酵母投与群は非投与群に比べＩＬ−２およびＩ
Ｌ−５産生量が多く、マイトジェンに対する反応性が高
まっていた。結果は図４および５に示した通りである。
【００１２】
【実施例５】酵素処理酵母と未処理酵母の単核球幼弱化
反応を調べた。Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ６週令のオス各群５匹に
サンプル１００ｕｇを経口投与し、３日後に脾臓由来単
核細胞を採取した。採取した細胞をＰＷＭで刺激し、９
６時間培養した。その培養液中のグルコース消費量を測
定し、Ｓ．Ｉ．値で幼弱化反応を評価した（図６）。酵
素処理酵母投与群の幼弱化反応は未処理酵母投与群より
も強く、未処理酵母投与群は陰性対照と変わらなかっ
た。酵素処理酵母投与群ではＰＷＭの刺激に対して高い
反応性を示した。このことから、免疫反応の増強には酵
母の酵素処理が有効であることが分かる。
反応を調べた。Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ６週令のオス各群５匹に
サンプル１００ｕｇを経口投与し、３日後に脾臓由来単
核細胞を採取した。採取した細胞をＰＷＭで刺激し、９
６時間培養した。その培養液中のグルコース消費量を測
定し、Ｓ．Ｉ．値で幼弱化反応を評価した（図６）。酵
素処理酵母投与群の幼弱化反応は未処理酵母投与群より
も強く、未処理酵母投与群は陰性対照と変わらなかっ
た。酵素処理酵母投与群ではＰＷＭの刺激に対して高い
反応性を示した。このことから、免疫反応の増強には酵
母の酵素処理が有効であることが分かる。
【００１３】
【実施例６】酵母経口投与マウスの脾臓由来単核球の貪
食能を化学発光量を指標にして比較した。Ｃ３Ｈ／Ｈｅ
Ｎ ６週令のオス各群５匹にサンプル１００μｇを経口
投与し、３日後に脾臓由来単核細胞を採取した。採取し
た細胞にルミノールを添加し、その後ザイモザンと反応
させ、ケミルミネッセンスリーダーで測定した（図
７）。その結果、酵素処理酵母投与群では未処理酵母投
与群よりも貪食能が高まっていた。
食能を化学発光量を指標にして比較した。Ｃ３Ｈ／Ｈｅ
Ｎ ６週令のオス各群５匹にサンプル１００μｇを経口
投与し、３日後に脾臓由来単核細胞を採取した。採取し
た細胞にルミノールを添加し、その後ザイモザンと反応
させ、ケミルミネッセンスリーダーで測定した（図
７）。その結果、酵素処理酵母投与群では未処理酵母投
与群よりも貪食能が高まっていた。
【００１４】
【実施例７】酵素処理酵母と未処理酵母とのＩＬ−２産
生能について比較した。Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ ６週齢のオス
各群５匹にサンプル１００μｇを経口投与し、３日後に
脾臓由来単核細胞を採取した。採取した細胞をＰＷＭで
刺激し、９６時間培養した。その培養上清中のＩＬ−２
をＥＬＩＳＡ法により測定した（図８）。ＩＬ−２産生
能は酵素処理酵母投与群の方が未処理酵母投与群よりも
高かった。酵素処理酵母投与群ではＰＷＭの刺激に対し
て高い反応性を示した。
生能について比較した。Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ ６週齢のオス
各群５匹にサンプル１００μｇを経口投与し、３日後に
脾臓由来単核細胞を採取した。採取した細胞をＰＷＭで
刺激し、９６時間培養した。その培養上清中のＩＬ−２
をＥＬＩＳＡ法により測定した（図８）。ＩＬ−２産生
能は酵素処理酵母投与群の方が未処理酵母投与群よりも
高かった。酵素処理酵母投与群ではＰＷＭの刺激に対し
て高い反応性を示した。
【００１５】
【実施例８】実施例７の手法により、ＩＬ−５の産生能
を比較した（図９）。ＩＬ−５産生能は酵素処理酵母投
与群の方が未処理酵母投与群よりも高かった。酵素処理
酵母投与群ではＰＷＭの刺激に対して高い反応性を示し
た。
を比較した（図９）。ＩＬ−５産生能は酵素処理酵母投
与群の方が未処理酵母投与群よりも高かった。酵素処理
酵母投与群ではＰＷＭの刺激に対して高い反応性を示し
た。
【００１６】
【実施例９】酵素処理酵母と酸・アルカリ処理酵母の免
疫増強効果について比較した。アルカリ処理は酵母菌体
を３％ＮａＯＨ液中で３７°Ｃ２４時間攪拌し、酸処理
は酵母菌体を０．５Ｎ酢酸溶液中で同様に処理した。そ
の後、遠心分離によって３回洗浄し、酵母菌体を回収し
た。これらの酵母をマウスに経口投与し、３日後に脾臓
由来単核球の化学発光能を測定した。化学発光能を指標
とした貪食能は酸・アルカリ処理しても陰性対照とほと
んど変わらず、酵素処理酵母投与群が最も貪食能が高か
った。図５〜１０を通して、免疫増強には酵素処理が有
効であると考えられる。
疫増強効果について比較した。アルカリ処理は酵母菌体
を３％ＮａＯＨ液中で３７°Ｃ２４時間攪拌し、酸処理
は酵母菌体を０．５Ｎ酢酸溶液中で同様に処理した。そ
の後、遠心分離によって３回洗浄し、酵母菌体を回収し
た。これらの酵母をマウスに経口投与し、３日後に脾臓
由来単核球の化学発光能を測定した。化学発光能を指標
とした貪食能は酸・アルカリ処理しても陰性対照とほと
んど変わらず、酵素処理酵母投与群が最も貪食能が高か
った。図５〜１０を通して、免疫増強には酵素処理が有
効であると考えられる。
【図１】酵素処理酵母を経口投与したマウスの腹腔マク
ロファ−ジの貪食能を示す。
ロファ−ジの貪食能を示す。
【図２】酵素処理酵母を経口投与したマウスのＮＫ活性
を示す。
を示す。
【図３】酵素処理酵母を経口投与したマウスの脾臓由来
単核球の幼弱化反応を示す。
単核球の幼弱化反応を示す。
【図４】酵素処理酵母を経口投与したマウスの脾臓細胞
培養上清中のＩＬ−２量を示す。
培養上清中のＩＬ−２量を示す。
【図５】酵素処理酵母を経口投与したマウスの脾臓細胞
培養上清中のＩＬ−５量を示す。
培養上清中のＩＬ−５量を示す。
【図６】酵素処理酵母投与群と未処理酵母投与群の脾臓
由来単核球の幼弱化反応を示す。
由来単核球の幼弱化反応を示す。
【図７】酵素処理酵母投与群と未処理酵母投与群の脾臓
由来単核球の貪食能を示す。
由来単核球の貪食能を示す。
【図８】酵素処理酵母投与群と未処理酵母投与群のＩＬ
−２産生能を示す。
−２産生能を示す。
【図９】酵素処理酵母投与群と未処理酵母投与群のＩＬ
−５産生能を示す。
−５産生能を示す。
【図１０】各種処理酵母の脾臓由来単核球の貪食に及ぼ
す影響を示す。
す影響を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 井上 勝訓 東京都渋谷区神宮前６丁目26番１号 麒麟 麦酒株式会社内 (72)発明者 松本 肇 東京都渋谷区神宮前６丁目26番１号 麒麟 麦酒株式会社内
Claims (4)
- 【請求項１】 酵母細胞壁溶解酵素で処理した酵母菌体
を含む、飼料用添加剤。 - 【請求項２】 乾燥状態にある、請求項１記載の飼料添
加剤。 - 【請求項３】酵母はサッカロミセス、エンドミコプシ
ス、サッカロミコデス、ネマトスポラ、カンディダ、ト
ルロプシス、プレタノミセスおよびロドトルラからなる
群から選択した１つである、請求項１または２記載の飼
料添加剤。 - 【請求項４】 請求項１から３のいずれか１項に記載の
飼料添加剤を配合した飼料。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7092698A JPH08280332A (ja) | 1995-04-18 | 1995-04-18 | 飼料用添加剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7092698A JPH08280332A (ja) | 1995-04-18 | 1995-04-18 | 飼料用添加剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08280332A true JPH08280332A (ja) | 1996-10-29 |
Family
ID=14061725
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7092698A Pending JPH08280332A (ja) | 1995-04-18 | 1995-04-18 | 飼料用添加剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08280332A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000057719A1 (fr) * | 1999-03-26 | 2000-10-05 | Taiho Pharmaceutical Company, Ltd. | Additifs pour aliments de crustacees ou de poissons et aliments |
| KR101978761B1 (ko) * | 2018-08-22 | 2019-05-15 | (주)휴벳 | 반려동물용 보조사료 및 이의 제조방법 |
-
1995
- 1995-04-18 JP JP7092698A patent/JPH08280332A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000057719A1 (fr) * | 1999-03-26 | 2000-10-05 | Taiho Pharmaceutical Company, Ltd. | Additifs pour aliments de crustacees ou de poissons et aliments |
| KR101978761B1 (ko) * | 2018-08-22 | 2019-05-15 | (주)휴벳 | 반려동물용 보조사료 및 이의 제조방법 |
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