JPH08301777A - 免疫賦活・感染防御物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 ヒトおよび動物等の免疫力を増強し、病原微
生物の感染を阻止する物質の提供。 【構成】 洗浄、殺菌した卵殻末および卵殻末と卵殻膜
末混合物を含有する免疫力増強・感染防御物質およびこ
れらの物質を含有する食品または飼料。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はヒトおよび動物等の免疫
力を増強し、病原微生物の感染を阻止する物質およびこ
れらの機能を付与させた飼料に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来、ヒトおよび動物の各種病原微生物
の感染には抗生物質が投与され、それら微生物の生体内
への進入を防いできた。しかし、抗生物質を多用するこ
とにより、菌交代現象による日和見感染や耐性菌の出
現、さらには家畜にあっては抗生物質の食肉などへの残
留問題が持ち上がってきた。近年、免疫学の進歩によ
り、ヒトおよび動物等の種々の感染症の原因および憎悪
因子は免疫機能の不全または免疫力の低下によると考え
られてきた。さらに畜産や水産業界においては大規模多
数飼育により、密飼いなどによるストレスのため、免疫
力が低下した家畜等が感染症に罹りやすい問題が提起さ
れている。ところで、本発明に使用される卵殻は古くか
らカルシウム源としてヒトや家畜に使用されてきた。ま
た、卵殻膜は特公昭５４−２３９７５号公報においてタ
ンパク質、アミノ酸および多糖類を含有する食品、医薬
品、化粧品、保健医薬、外用薬および飼料に使用するこ
とを開示する。また特開平６−６５０９４号公報には卵
殻膜の免疫賦活・感染防御剤ならびに飼料としての利用
が開示されている。しかしながら、これらの従来技術
は、使用する卵殻膜をあらかじめ洗浄、殺菌することを
何ら明示していない。特に鶏卵のサルモネラ汚染は日本
のみならず、世界的に大きな問題となっており、鶏卵を
洗浄殺菌せずに使用することは、病原細菌汚染を広げる
ことになりかねない。さらに、これらの従来技術には卵
殻膜を粉末化することも提示していないし、卵殻または
卵殻と卵殻膜の混合物に免疫力を高め、感染防御能を増
強することについても示唆する記載はない。また本発明
において卵殻を洗浄・減菌する意味は、卵殻表面に付着
する菌の有害物質が免疫性に悪影響を及ぼすことと卵殻
以外に他の夾雑物があると、免疫抑制に作用する場合が
あるためである。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】抗生物質の多用によ
り、日和見感染や耐性菌の出現また抗生物質の畜産物へ
の残留などの問題が起きているので、本発明者らはこれ
らの問題を解決すべく、ヒトおよび動物等に投与しても
安全に免疫力を高め、感染防御能を増加させる天然物由
来の物質を見出した。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者等は洗浄、殺菌
された卵殻または卵殻と卵殻膜の混合物に免疫力・感染
防御機能を有することを見出し、これらの免疫力・感染
防御能物質を飼料に配合することにより、動物の免疫力
を高めかつ感染防御効果を高めるものである。本発明に
使用される卵殻または卵殻と卵殻膜の混合物は洗浄、殺
菌されねばならないが、その方式は特に限定されるもの
ではなく、例えば、酸性水による洗浄や高圧殺菌などが
考えられる。また、これらの物質は必ず粉末化する必要
があるが、その方法は常法にしたがってよい。洗浄・殺
菌された本発明物質に他の成分、例えば殺菌剤や栄養剤
を加えることは任意である。

【０００５】なお、免疫力を低下させる原因はいろいろ
考えられるが、働き過ぎや寒暖の差等また動物において
は密飼いなどのストレスおよび細菌やウイルスによる感
染症などである。本発明物質の投与量はヒトや動物によ
り異なり、例えば、家畜に投与する場合は、通常、１日
あたり１００ｍｇ／体重１ｋｇ以下が推奨される。飼料
に配合し、不断給与するときは、体重１ｋｇあたり１ｍ
ｇ未満が望ましい。また、卵殻と卵殻膜末の混合比は特
に限定されるものではない。投与形態も粉体や液体の形
でもよく、単独投与でも、あるいは飼料や食品に混合し
て使用することができる。

【０００６】

【実施例１】卵殻末および卵殻末と卵殻膜末の混合物を
腹腔内投与した場合の大腸菌感染防御効果を調べた。Ｉ
ＣＲマウスに卵殻末および卵殻末と卵殻膜末の混合物を
腹腔投与し、２４時間後に最小致死量の大腸菌を各マウ
スの腹腔に接種した。その翌日から７日間マウスを観察
し、生存率を求めた。対照として、滅菌生理食塩水を同
様に投与後、同じく大腸菌を接種し、その後の生存を観
察した。その結果を表１に示した。 卵殻末および卵殻末と卵殻膜末の混合物を投与した群の
生存率は７０％以上であったが、非投与対照群は１０％
であった。

【０００７】

【実施例２】ＩＣＲマウスに卵殻末および卵殻末と卵殻
膜末の混合物を経口投与し、２４時間後最小致死量の大
腸菌を各マウスの静脈内に接種した。その翌日から７日
間マウスを観察し、生存率を求めた。対照として、滅菌
生理食塩水を同様に投与後、同じく大腸菌を接種し、そ
の後の生存を観察した。その結果は図１のとおりであ
る。卵殻末および卵殻末と卵殻膜末の混合物を経口投与
し、大腸菌を経口感染させた群の生存率は６０％以上で
あったが、非投与対照群は２０％であった。これらのこ
とから、卵殻末と卵殻膜末の混合物の投与は大腸菌等敗
血症をおこす菌を排除し、生存率を高めることが確認さ
れた。

【０００８】

【実施例３】卵殻末および卵殻末と卵殻膜末の混合物を
経口投与したＢＡＬＢ／ｃの腹腔よりマクロファージを
取り出し、プラスチック管に分取し、感光増幅剤ルミノ
ールを加え、ケミルミネッセンスリーダーにセット後、
刺激因子としてオプソニン化ザイモセルを添加し、貪食
反応を起こさせた。９０分間反応を観察し、化学発光強
度を経時的に測定した。サンプル経口投与群と陰性対照
群の化学発光強度の最高値を比較検討し、それぞれのサ
ンプルを評価した。その結果は図２のとおりである。卵
殻末および卵殻膜末の混合物の経口投与により貪食能が
賦活することが確認された。

【０００９】

【実施例４】卵殻末および卵殻膜末の混合物を経口投与
したＢＡＬＢ／ｃの脾臓より好中球を取り出し、プラス
チック小試に分取し、感光増幅剤ルミノールを加え、ケ
ミルミネッセンスリーダーにセット後、刺激因子として
オプソニン化ザイモセルを添加し、貪食反応を起こさせ
た。９０分間反応を観察し、化学発光強度を経時的に測
定した。サンプル経口投与群と陰性対照群の化学発光強
度の最高値を比較検討し、それぞれのサンプルを評価し
た。その結果は図３のとおりである。卵殻末および卵殻
膜末の混合物の経口投与により貪食能が賦活することが
確認された。

【００１０】

【実施例５】卵殻末および卵殻末と卵殻膜末混合物を経
口投与したマウスの脾臓よりリンパ球を取り出し、エフ
ェクター細胞とし、標的細胞はヒト慢性白血病由来Ｂ細
胞Ｋ５６２細胞（以下Ｋ５２細胞と略記する）とした。
また、事前試験よりエフェクター細胞（Ｅ）と標的細胞
（Ｔ）の最適比（Ｅ：Ｔ）を４０：１とした。標的細胞
を集めて洗浄し、ＲＰＭＩ１６４０培養液に浮遊させ、
２’，７’−ビス（２−カルボキシ−エチル）−５（お
よび６）−カルボキシフルオレッセイン、アセトキシメ
チルエステル（ＢＣＥＣＦ−ＡＦ）を加えた後、３７°
Ｃ、５％ＣＯ₂ 下で１時間保持した。その後、調整済の
エフェクター細胞用のリンパ球とＥ：Ｔ＝４０：１にな
るように９６穴プレートで混合培養を行い、３７°Ｃ，
５％ＣＯ₂ 下で４時間保持した。その後、軽く攪拌し、
エピコンプレートに移し、蛍光濃度測定装置（ＦＣＡ）
で測定した。陽性対照として、標的細胞に０．５％トラ
イトン１００を加えた。また、陰性対照は標的細胞に１
０％ＦＣＳ加ＲＰＭ１１６４０培養液を加えた。ＦＣＡ
の結果を次の式に当てはめ、細胞溶解値を計算し、細胞
溶解率（ＮＫ活性率）を求めた。その結果は図４のとお
りである。 卵殻および卵殻と卵殻膜の混合物経口投与によりＮＫ活
性が増強することが確認された。

【００１１】

【実施例６】卵殻末および卵殻末と卵殻膜末の混合物を
経口投与したマウスの脾臓由来リンパ球にポークウィー
ドマイトージェン（ＰＷＭ）を添加し、３７°Ｃ、５％
ＣＯ₂ 下で９６時間培養後、培養液を採取した。培養
液は抗サイトカインモノクロナール抗体を固層したプレ
ートに添加し、４°Ｃで一晩保持した。洗浄後、ビオチ
ン加抗サイトカインモノクロナール抗体を反応させ、さ
らに洗浄し、アビジンペルオキシダーゼを加えた。十分
に洗浄し、ＡＢＴＳで発光させリーダーで測定した。そ
の結果は図５のとおりである。ＩＦＮ−α、ＩＬ−５お
よび顆粒球／マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−
ＣＳＦ）は卵殻末および卵殻末と卵殻膜末の混合物の経
口投与によりその産生が高まった。

【００１２】

【発明の効果】上記の実施例から、本発明に関する免疫
力増強・感染防御能が極めて高いことが証明された。よ
って、本発明の免疫増強物質を食品や飼料に混合するこ
とは非常に有用である。

【図面の簡単な説明】

【図１】鶏卵各部位を経口投与したマウスに大腸菌を静
脈内接種した場合の生存率を示す。

【図２】各サンプルを経口投与したマウスの腹腔マクロ
ファージ貪食能を示す。

【図３】各サンプルを経口投与したマウスの脾臓由来好
中球貪食能を示す。

【図４】各サンプルを経口投与したマウスのナチュラル
キラー細胞活性を示す。

【図５】各サンプルを経口投与したマウスの脾臓由来リ
ンパ球が産生するサイトカインの程度を示す。

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 洗浄、殺菌された卵殻末を含有する免疫
   賦活・感染防御物質。
2. 【請求項２】 洗浄、殺菌された卵殻末および卵殻膜末
   を含有する免疫賦活・感染防御物質。
3. 【請求項３】 卵殻末はニワトリ、アヒルあるいはウズ
   ラのものである、請求項１または２記載の免疫賦活・感
   染防御物質。
4. 【請求項４】 洗浄、殺菌された卵殻末を含有する免疫
   賦活・感染防御物質を含む飼料。
5. 【請求項５】 洗浄・殺菌された卵殻末および卵殻膜末
   を含有する免疫賦活・感染防御物質を含む飼料。
6. 【請求項６】 畜産用または水産用である、請求項３ま
   たは４記載の飼料。