JPH08501064A - ペプチドとカルボキシ末端ポリエステルとの塩 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、少なくとも１個の塩基性基を有するペプチドから誘導された陽イオンおよびカルボキシ末端ポリエステルから誘導された陰イオンから形成された新規の塩、このような塩の製造法、および遅延放出用の医薬品の製造へのこのような塩の使用に関する。本発明による塩は、該塩が純粋な形であるか、または遊離の結合してない形の過剰量のペプチドまたは過剰量の遊離ポリエステルとの混合物であるかに応じて、遅延放出用の医薬品の処方物の場合に有用である種々の性質を有する。

Description

【発明の詳細な説明】 ペプチドとカルボキシ末端ポリエステルとの塩 本発明は、少なくとも１個の塩基性基を含有するペプチドから誘導されたカチ オンおよびカルボキシ末端ポリエステルから誘導されたアニオンからなる新規の 塩、このような塩の製法および遅延放出医薬組成物の製造におけるこのような塩 の使用に関する。本発明の塩は、その塩が純粋形であろうと、またはその遊離し た非結合形のペプチドの過剰かまたは遊離ポリエステルの過剰との混合物であろ うと、遅延放出医薬組成物の処方において有効である種々の特性を有する。この ような塩は両親媒性であり、その際、一部は親水性および疎油性であるペプチド からなり、かつ一部は疎水性および親油性であるポリエステルからなる。 「ペプチド」という用語は、ここでは、通常一般的に「ペプチド」、「ポリペ プチド」または「タンパク質」と称されるポリ（アミノ酸）を包含する、一般的 な意味で使用され；かつ「塩基性ペプチド」は、天然状態で塩基性であるペプチ ドであり、これは、過剰の塩基性アミノ酸、例えばアルギニン又はリジンの存在 から生じるか、またはペプチドのＮ末端または単に少なくとも１個の塩基性基を 含有するペプチドから、場合により１個以上の酸性アミノ酸基の存在下で生じる 。 この用語は、ペプチドの合成類縁物、塩基性官能価または他の任意の形の誘導さ れた塩基性度を有する非天然アミノ酸も包含する。「ポリエステル」なる語を、 以後、カルボキシ−末端ポリエステルを表すために使用する。 欧州特許第５８４８１号明細書は、ポリエステルの末端カルボン酸基とペプチ ド内の塩基性基との間の特異な化学的相互作用の可能性をほのめかしている。ロ ーター等(Lawter et al)、Proc.Int.Symp.Control Rel.Bioact.Mater.,14,19,(1 987)およびオカダ等(Okada et al)、Pharmaceutical Research,8,584-587(1991) も、この可能性を記載しているが、これらの文献は、このような特異なペプチド −ポリエステル塩を全く特に記載しておらず、このような塩がどのようにして製 造されうるかという記載をしておらず、かつ医薬組成物の製造においてこのよう な塩を使用することにより生じうる有益な効果に関する記載がないという点で推 論的である。 しかしながら、本発明によれば、冒頭で述べたように、少なくとも１個の塩基 性基を有するペプチドから誘導されるカチオンおよびカルボキシ末端ポリエステ ルから誘導されるアニオンから形成される塩を含有するかまたはそれからなる組 成物が提供され；組成物は、溶剤中の塩の溶液または分散液の形で存在し、溶剤 は、遊離ポリエステルのための溶剤であるが、遊離ペプチ ドのための溶剤ではなく、前記分散液中の塩の粒径は、５μｍより小さく、かつ 有利には０．２μｍより小さく；または注射または皮下内移植のための微粒子ま たは移植物の形で存在する。 塩のカチオン成分は、薬理学的に活性である塩基性ペプチドまたは薬理学的に 不活性である塩基性ペプチドから誘導される。塩基性ペプチドが薬理学的に活性 である場合、本発明の塩は、それ自体、遅延放出医薬処方物中に処方される。塩 基性ペプチドが薬理学的に不活性である場合、本発明の塩は、天然状態で酸性で あるか（過剰の酸性アミノ酸、例えばアスパラギン酸およびグルタミン酸からな る）または天然状態で中性である他の薬理学的に活性のペプチドの遅延放出組成 物の処方における賦形剤として使用される。 ペプチドの遅延放出処方物における、もう一つの要求は、もちろん、ペプチド が、意図された放出の期間にわたり処方物中で十分に安定であることである。「 十分に安定」とは、薬物を完全に不溶性にさせないか、または処方物に関して意 図された使用の期間に、薬理学的活性の完全な損失を伴って変性しないことを意 味する。 適当な薬理学的に活性なペプチドは、少なくとも３００Ｄａ、有利には少なく とも８００Ｄａ分子量を有する。意図された放出の期間にわたって、遅延放出処 方物中で十分に安定であり、かつそれ故に本発明の組 成物で使用されるこのようなペプチドの例は、次のものである；オキシトシン、 バソプレッシン、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ） 、プロラクチン、黄体形成ホルモン、濾胞刺激ホルモン、ルリベリンまたは黄体 形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）、インシュリン、ソマトスタチン、グル カゴン、インターフェロン、ガストリン、テトラガストリン、ペンタガストリン 、ウロガストロン、セクレチン、カルシトニン、エンケファリン、エンドルフィ ン、キョートルフィン、タフトシン、チモポエチン、チモシン、チモスチムリン (thymostimulin)、胸腺体液性因子、血清胸腺因子、腫瘍壊死因子、コロニー刺 激因子、モチリン、ボンベシン、ジノルフィン(dinorphin)、ニューロテンシン 、セルレイン、ブラシキニン、ウロキナーゼ、カリクレイン、サブスタンスＰ類 縁物およびアンタゴニスト、アンギオテンシンＩＩ、神経成長因子、血液凝固因 子ＶＩＩおよびＩＸ、リゾチームクロリド、レニン、ブラジキニン、チロシジン 、グラミシジン、成長ホルモン、メラニン細胞刺激ホルモン、甲状腺ホルモン放 出ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、副甲状腺ホルモン、パンクレオザイミン、コ レシストキニン、ヒト胎盤性ラクトゲン、ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン、タンパ ク質合成刺激ペプチド、ガストリックインヒビトリーペプチド、バソアクティブ インテスティナルペプチド、血小板由来増殖因子、成長ホルモ ン放出因子、骨形態形成タンパク質(bone morphogenic protein)および合成類縁 物および変性物および薬理学的に活性のそのフラグメント。 本発明の組成物の有利なペプチド成分は、ＬＨＲＨの合成類縁物であり、かつ 特にこのような類縁物は、これに限定されないが次のものを包含する；ブセレリ ン(buserelin)（［Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｕ^t）⁶，ｄｅｓ−Ｇｌｙ−ＮＨ₂ ¹⁰］−ＬＨＲ Ｈ（１−９）ＮＨＥｔ）、デスロレリン(deslorelin)（［Ｄ−Ｔｒｐ⁶、ｄｅｓ −Ｇｌｙ−ＮＨ₂ ¹⁰］−ＬＨＲＨ（１−９）ＮＨＥｔ）、フェルチレリン(fertir elin)（［ｄｅｓ−Ｇｌｙ−ＮＨ₂ ¹⁰］−ＬＨＲＨ（１−９）ＮＨＥｔ）、ゴセレ リン(goserelin)（［Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｕ^t）⁶，Ａｚｇｌｙ¹⁰］−ＬＨＲＨ）、ヒ ストレリン（［Ｄ−Ｈｉｓ（Ｂｚｌ）⁶，ｄｅｓ−Ｇｌｙ−ＮＨ₂ ¹⁰］−ＬＨＲＨ （１−９）ＮＨＥｔ）、ロイプロレリン(leuprorelin)（［Ｄ−Ｌｅｕ⁶，ｄｅｓ −Ｇｌｙ−ＮＨ₂ ¹⁰］−ＬＨＲＨ（１−９）ＮＨＥｔ、ルトレリン(lutrelin)（ ［Ｄ−Ｔｒｐ⁶，ＭｅＬｅｕ⁷，ｄｅｓ−Ｇｌｙ−ＮＨ₂ ¹⁰］−ＬＨＲＨ（１−９ ）ＮＨＥｔ）、ナフアレリン(nafarelin)（［Ｄ−Ｎａｌ⁶］−ＬＨＲＨ）、トリ プトレリン(tryptorelin)（［Ｄ−Ｔｒｐ⁶］−ＬＨＲＨ）および薬理学的に活性 のその塩。 本発明の塩において使用される、適当な薬理学的に不活性な塩基性ペプチドは 、次のものである；ポリア ルギニン、ポリリジンおよびポリ（アルギニン−コ−リジン）、Ｄ−、Ｌ−また はＤＬ−形の中性アミノ酸とＤ−、Ｌ−またはラセミ形のアルギニンおよび／ま たはリジンとの（コ−）ポリマー、ペプチド鎖が完全にまたは部分的に、塩基性 基により、Ｎ−末端で終結し、かつ骨格が中性アミノ酸残基からなるペプチドま たは（コ−）ポリペプチド。 本発明の塩においてアニオン源として使用したカルボキシ−末端ポリエステル は、ホモ−ポリエステルまたはコ−ポリエステルである。有利なこのようなポリ エステルは、筋内または皮下組織中で見られるような水性生理学的環境において 、低分子量水溶性フラグメントへと崩壊または腐食するものである。この環境に おいて、崩壊の主な方法は、低分子量ホモ−またはコ−ポリエステルフラグメン トおよび最終的には適用の部位からの処方物の消失をまねく、エステル基の加水 分解的分離を包含する単純バルク加水分解(simple bulk hydrolysis)である。し かしながら、これらの注射または内移植部位において、リビング組織中の他の部 位におけるのと同様に、他の崩壊メカニズムが、酵素により媒介されるようなも のを包含することが認められる。 適当なホモ−およびコ−ポリエステルは、ヒドロキシ酸から由来されるもの、 またはジオールおよび／またはポリオール、例えば（これに限定されないが）ポ リエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、２〜１０Ｃアルキレングリ コール、グリセロール、トリメチロールプロパンおよび多官能性アルコールのポ リオキシエチレート形、例えばグリセロール、トリメチロールプロパンおよび糖 と、ジカルボン酸および／またはポリカルボン酸、例えば（これに限定されない が）（１〜１０Ｃアルカン）ジカルボン酸、特にマロン酸、コハク酸およびグル タル酸、フタル酸、メリト酸、ピロメリト酸とを、場合により、ヒドロキシ酸お よび／またはモノ−オールの存在下で重縮合することから誘導されるものである 。 ヒドロキシ酸を基礎とするホモ−およびコ−ポリエステルを製造する有利な方 法は、環状酸二量体の開環重合によるか、またはヒドロキシ酸またはヒドロキシ 酸の混合物、またはこのようなヒドロキシ酸から誘導されたラクトンの直接重合 または共重合による。開環タイプまたは共重合タイプの双方のこれらの重合は、 有利には、得られるホモ−またはコ−ポリエステルが完全にまたは一部カルボン 酸官能価を有するポリマー鎖を含有するようにして実施される。従って、酸二量 体の開環縮合は、適当なポリマー連鎖移動剤または得られるホモ−またはコ−ポ リエステルの分子量および構造の双方を制御する共−開始剤の存在下で実施され る。適当なこのような連鎖移動剤は、水、ヒドロキシカルボン酸、モノカルボン 酸、ジカルボン酸およびポ リカルボン酸である。 重縮合または共重縮合により製造されるポリエステルのために、重合は、過剰 のカルボン酸官能価が使用され、すなわち、［−ＣＯＯＨ］対［−ＯＨ］の比が １または１以上であるという条件下で実施される。重縮合物の構造および分子量 は、使用したアルコール（モノ−オール、ジオールまたはポリオールまたは混合 物）の性質、使用した酸（モノ−、ジ−またはポリ−カルボン酸または混合物） の性質および使用した過剰のカルボン酸の量により決定される。クレブス回路中 に含まれる酸は、特に有効である。 本発明でホモ−またはコ−ポリエステルを製造するために有効に使用される適 当なヒドロキシ酸またはラクトンの例は、次のものを包含する；β−プロピオノ ラクトン、β−ブチロラクトン、γ−ブチロラクトンおよびピバロラクトンおよ びα−ヒドロキシ酪酸、α−ヒドロキシイソ酪酸、α−ヒドロキシ吉草酸、α− ヒドロキシイソ吉草酸、α−ヒドロキシカプロン酸、α−ヒドロキシイソカプロ ン酸、α−ヒドロキシ−β−メチル吉草酸、α−ヒドロキシヘプタン酸、α−ヒ ドロキシデカン酸、α−ヒドロキシミリスチン酸およびα−ヒドロキシステアリ ン酸。有利なこのようなホモ−およびコ−ポリエステルは、Ｄ−、Ｌ−またはＤ Ｌ−形の乳酸およびグリコール酸、または相当する二量体ラクチドおよびグリコ リドから誘導されるもので あり、かつ有利な場合による連鎖停止剤は乳酸である。 高分子の塩基性ペプチド薬は、完全または一部、ポリマー−カチオンとして存 在しえ、かつポリエステルは、完全または一部、ポリマー−アニオンとして存在 しうるが、混合の慣例の方法を用いるかまたは有機溶剤を用いるこのようなポリ マー種間の酸−塩基相互作用から生じる塩形成は、非常に困難かまたは不可能で さえある。例えば、２種の成分を混合する融成物は不適当である。それというの も、ペプチドは通常融解せず、むしろ、ポリマーを融解するために通常使用され る高温で分解してしまうことが知られているからである。しかしながら、ペプチ ドが融解される（これは融解しない）場合でさえ、次のような熱力学的理由で、 ホモ−またはコ−ポリエステルと非相容性であるかまたはその中に不溶性である 。 ペプチドは高分子であり、従って、慣例のポリマーの典型的特性の多くを有す る。従って、二種の異なるポリマータイプの混合の自由エネルギーが非常にプラ スであり、かつ従って熱力学的に好適ではないので、ペプチドは、（特異な化学 的または物理学的相互作用の不存在下で）異なる化学的およびポリマー骨格構造 を有する他の高分子と完全に非相容性であるかまたはその中に不溶性である。バ ルク状態において、ペプチドは非常に極性であり、強く水素結合した分子は、そ の結果、ペプチドとホモ−またはコ−ポリエステル （これらは、相対的に無極性であり、この中の水素結合はないかまたは弱い）と の混合のエンタルピーが非常にプラスになる；これは、吸熱的および熱力学的に 適当でない。更に、高分子は、限定により大きく、かつ従って低い固有エントロ ピーを有し、結果として、２つの異なる高分子種の混合のエントロピーが非常に 低いかまたはマイナスにすらなる（例えば、P J Florey,“Principles of Polym er Chemistry”,Cornell University,1953,555;L Bohn,“Polymer Handbook”， ２ｎｄ Edition,J Wiley 1975,III-211;およびL Bohn,Rubber Chemistry and Te chnology,1966,493参照）。従って、融解状態の高温でのペプチドとポリエステ ルとの混合は、塩形成を生じるために必要な分子寸法(molecular scale)で混合 を生じない。ペプチドとポリエステルの単純混合物は、塩形成を生じない。 ペプチドが溶剤中でいくらかの溶解性または膨潤可能性を有しない限り、同様 の困難が、有機溶剤を用いてペプチドおよびポリエステルの塩を形成する試みで 存在する。ポリエステルおよびペプチドの溶解特性は、非常に異なっている。ペ プチドを溶かす溶剤、例えば水は、ポリエステルのための完全な非溶剤であり； かつ、一般的に、ポリエステルのための良好な溶剤、例えばジクロロメタンは、 ペプチドのための完全な非溶剤である。ペプチドおよびポリエステルの双方を溶 かしうるような溶剤、例えばジメチルスルホキシド、ジ メチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドおよびＮ−メチルピロリドンは異な る問題を有する。それというのも、これらは、相対的に不揮発性であり、高い沸 点を有し、かつ従って除去するのが非常に困難であるからであり、かつまた、こ れらの溶剤のいくつかの非相容性の毒性故である。揮発性であり、かつ毒物学的 に認容性である、双方の成分のための一定の溶剤を同定することも可能になって いるが、このような溶剤には別の困難が存在している。例えば、酢酸は、ペプチ ドおよびポリエステルの双方のための溶剤であるが、多量の酸溶剤は、ペプチド をアセテート塩として存在させ（質量作用効果故に）、従って、室温（すなわち ２０〜２５℃）で、または凍結乾燥による酢酸の除去は、結果として、ペプチド およびポリエステルの相分離を生じ、従って、得ようとする塩形成は生じない傾 向がある。 従って、本発明の課題は、塩基性ペプチドのカチオンおよびカルボキシ−末端 ポリエステルのアニオンからなる塩の製法を提供することである。 本発明のペプチド−ポリエステル塩の製造は、カルボン酸基を有するホモ−ま たはコ−ポリエステルおよび、塩基性残基が遊離塩基としてまたは弱酸、有利に は揮発性酸（その際、酸は１０^-3より小さい酸解離定数または３より大きいｐＫ_a （ｐＫ_a＝−ｌｏｇ₁₀Ｋ_a、ここでＫ_aは酸解離定数である）を有する）の塩とし て生じるペプチドを用いて実施することができる。特に有利なこのような塩基性 ペプチド塩は、酢酸との塩である。しかしながら、２つの高分子種の固有の非相 容性故に、有利には、これらのペプチド−ポリエステル塩が発生しうる条件を使 用すべきである。 これを達成するための一つの方法は、溶液を形成するために、ペプチドおよび ポリエステルの双方を溶かす溶剤を使用することであり、この溶液からは溶剤を 直接除去することができ、その際、第一に両親媒性の塩が残るか、または第二に ペプチドおよびポリエステルの混合物が、更に加工した場合に両親媒性の塩を形 成するように前処理される物理状態で残る。 第一のアプローチの例は、溶剤、例えば、これに限定されないがジメチルスル ホキシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドおよびＮ−メチルピロ リドンを使用することであり、これらは、実質的に中性であり、ペプチドおよび ポリエステルの双方のための溶剤であってよい。前記したような標準環境下で、 これらの溶剤は、その高い沸点および相対的不揮発性により、除去することが非 常に困難である。ペプチド（例えばアセテート塩としての）およびポリエステル がこれらの溶剤のいずれか一つに溶ける場合、ポリエステル中の強い酸性の乳酸 またはグリコール酸基が弱いカルボン酸に代わるので、ペプチドは、ポリエステ ルとの塩として存在する傾向がある。溶剤および遊離 した酢酸（または他の弱いが揮発性のカルボン酸）のバルクを真空中で除去し、 かつペプチド−ポリエステル塩を含有する残留溶液を蒸留水に添加し、不溶性ポ リマー塩を沈殿させる。 蒸留水は、有利には、ポリエステルアニオンの置換によるカルボネート塩の形 成を阻害する二酸化炭素を有しない。次いで、ペプチド−ポリエステル塩中の残 留溶剤を、有利には二酸化炭素不含の水で更に洗浄することにより除去する。い くつかの環境において、ポリマー塩は、溶剤を除去する必要なしに水中への直接 沈殿により単離され、かつこのアプローチは、ペプチドが塩基として使用される 場合に特に有効である。 従って、本発明の他の一態様によれば、遊離塩基の形または弱酸、例えば酢酸 との塩の形の塩基性ペプチドおよびカルボキシ末端ポリエステルを、双方が溶け る中性の極性溶剤中に溶かし、溶剤または溶剤のほとんどを除去し、かつ残留す る濃縮溶液をペプチド−ポリエステル塩のための過剰の非溶剤に添加することよ りなる、塩基性ペプチドおよびカルボキシ末端ポリエステルからなる塩の製法が 提供される。 ペプチドおよびポリエステルの双方を溶かす溶剤を用いることを基礎とする第 二のアプローチは、前記溶剤が凍結および慣例の凍結乾燥または噴霧乾燥により 除去することができることによるものである。この方法の実質的な部分は、非常 に迅速な、ほとんど瞬間的 な速度で、かつ有利にはポリエステルおよびペプチドのガラス転位温度より下で ある温度で、ペプチド−ポリエステルから溶剤を除去することである。この場合 、溶剤は中性または酸性であってよく、かつ有利な溶剤は酢酸である。 ある程度の粘性流または粘弾性特性を示す溶液からの溶剤のこのような非常に 迅速な除去は、結果として、小さなコロイド状寸法で発生する２つの非相容性高 分子タイプの相分離を生じる。すなわち、得られるペプチド−ポリエステル混合 物は、非常に高い表面積および表面エネルギーを有する。結論として、通常、ペ プチドのための非溶剤であるポリエステルのためのもう一つの異なる溶剤を、実 質的に溶剤不含のこのタイプのペプチド−ポリエステル混合物に加える場合、高 い表面エネルギーが、塩形成およびポリエステル中のペプチドのコロイドの性質 の消滅により散逸する。この第２のアプローチのために適当な溶剤は、凍結乾燥 可能であるべきであり、かつこれに限定されないが、酢酸、ジオキサン／水混合 物およびｔ−ブタノール／水混合物を包含するか、または噴霧乾燥可能であるべ きである。 従って、本発明のもう一つの態様により、塩基の形または弱酸、例えば酢酸と の塩の形の塩基性ペプチドおよびカルボキシ末端ポリエステルを、双方が溶けか つ凍結乾燥により除去することができる溶剤中に溶解 し、得られる溶液を高速で凍結し、得られる凍結した混合物を凍結乾燥し、得ら れる混合物をポリエステル成分のための溶剤中に分散し、かつ混合物を、ペプチ ド−ポリエステル塩が形成されるように溶かすことによる、塩基性ペプチドおよ びカルボキシ−末端ポリエステルからなる塩の製法を提供する。 特に、この方法で、酢酸中の、ペプチドおよびポリ乳酸または乳酸およびグリ コール酸のコポリマーの溶液を、液体窒素に滴加する。この結果、多かれ少なか れ酢酸の瞬間的凍結、および多かれ少なかれ実質的に溶剤不含のペプチド−ポリ エステル混合物の発生が生じる。酢酸溶剤を除去するための凍結乾燥は、非常に 細かいコロイド寸法でペプチド−ポリエステル生成物を生じる。多くのペプチド に関して、このような材料のコロイドの性質は、ポリエステルのための溶剤、例 えばジクロロメタンを加える場合に、非常に微細なコロイド状懸濁液が発生する 場合に、かつ過剰のカルボン酸官能価が混合物中に存在する場合に証明され、澄 明溶液は、ペプチド−ポリエステル塩が形成される際に過剰の表面エネルギーが 失われる場合に結果として得られる。ペプチド／ポリエステル／酢酸混合物を多 かれ少なかれ即座に凍結するための他の方法、液体窒素への滴加の代わりに例え ばドライアイスおよびヘキサンの混合物中へ混合物の滴加を使用することができ る。 仮定的に、もちろん、完全に不溶性の化合物を、もしこれを十分に小さい平均 粒径まで減少することができる場合、可溶性にすることができる。粒子が密度σ を有する半径ｒの球であり、かつ粒子が表面エネルギーγを有すると仮定した場 合、このような粒子はそれに付随した表面エネルギー４πｒ²γを有する。粒子 液の２つの場合を考える： （ｉ）過剰の固体が非常に粗粒であり、かつ従って非常に小さな表面エネルギー を有し、かつ飽和溶液が、濃度Ｃ_sを有する場合。ギブスの自由エネルギーは次 のようになる： （ｉｉ）過剰の固体が半径ｒの非常に小さい粒子である場合、非常に小さな粒子 と平衡している溶液のギブスの自由エネルギーは次のようになる： しかしながら、この場合、固体は次のようなギブスの自由エネルギーを有する： しかしながら、前記（ｉ）から 通常の場合において、小さな粒径による通常より高い溶解度は準安定性であり 、かつ粒子は例えば溶解および再結晶によって寸法が成長するので、高い表面エ ネルギーの効果が取り消される。しかしながら、小さな粒径のペプチド−ポリエ ステル混合物を用いて塩形成が生じ、かつこれは、溶液として低い自由エネルギ ー状態を提供する可溶性両親媒性塩の形成を許容することにより、コロイド状粒 子の表面エネルギーの減少の二者選択的な方法を提供する。 本発明のもう一つの態様により、強酸との塩、例えばクロリドまたはスルフェ ートの形の塩基性ペプチドをポリエステルと反応させることからなり、その際、 ポリエステルのいくつかまたは全てが、適当なアルカリ金属またはアルカリ土類 金属とのカルボン酸塩、例えばカルボン酸ナトリウム、−カリウム、−カルシウ ムまたは−マグネシウム塩の形である、塩基性ペプチドおよびカルボキシ−末端 ポリエステルからなる塩の製法を提供する。低い分子量のポリエステル（約１０ ０００より少ない平均分子量を有する）のために、アルカリとの塩を水中に溶解 するか、または非常に微細に分散することができる。このような溶液または分散 液のペプチドの水溶液（有利には二酸化炭素不含）への添加は、結果として、非 水溶性の両親媒性ペプチド−ポリエステル塩の沈殿を生じる。 同様の方法で、「ペギレート化された(pegylated)」 塩基性ペプチド（ペプチドのポリオキシエチレン抱合体）のクロリドまたはスル フェートは、溶剤、例えばジクロロメタンと一部相容性であるかまたはその中に 可溶性であるか、またはそうであってよく、かつカルボキシ−末端ポリエステル のナトリウムまたはカリウム塩も、ジクロロメタン中に可溶性であってよい。従 って、２種のこのような塩を適当な割合で混合する場合、溶解性ペプチド−ポリ エステル塩は、アルカリ金属クロリドまたはスルフェートの沈殿を用いる二重分 解により生じる。 前記した異なる高分子の熱力学的非相容性は永年知られているが、これは、ポ リエステルマトリックスからのペプチド薬の遅延放出の従来技術においてまれに しか考慮されなかった。この熱力学的非相容性または不溶性の必要な考慮は、通 常の環境において、ポリエステルがペプチド薬に完全に不透過性であることであ る。ポリエステルを介する、ペプチド薬の分配−依存フィキアン(Fickian)拡散 を生じるために、ペプチドはポリエステル中でのいくらかの溶解性を有している ベきである。しかしながら、前記の理由で、事実はそうでなく、かつ従って、分 配−依存フィキアン拡散によるポリエステルを介するペプチドの移動は不可能で ある。 更に、論拠のために、ペプチド薬またはその合成類縁物のいずれか一つが、ポ リエステル中へのいくらか の可溶性またはそれとの相容性を有する場合ですら、ポリエステル相を介する拡 散による移動はやはり不可能である。回転および並進的(translational)ポリエ ステルセグメント易動性(mobility)から生じ、かつ拡散分子の通過を許すポリエ ステル中の自由体積は、約５００Ｄａ程度より高い分子量を有する高分子の拡散 を調節するためには不十分な大きさであることが長い間認められてきた（例えば 、R W BakerおよびH K Lonsdale，“Controlled Release of Biologically Acti ve Agents”中の“Controlled Release:Mechanisms and Rates”参照，編集A C TanquaryおよびR E lacey，Plenum Press,1974,15以下参照）。 しかしながら、フィキアン拡散によるポリエステルを介するペプチド薬の移動 が約５００Ｄａ程度より上のペプチドのために実質的に不可能である場合でさえ 、それにもかかわらずポリペプチドの連続放出が達成された。欧州特許第５８４ ８１号明細書は、ポリエステルからのペプチド薬の連続放出が、２種の高分子、 親水性および水溶性であるペプチドおよび疎水性および非水溶性であるポリエス テルの非常に異なる特性を用いることにより、どのようにして得られたか記載し ている。その明細書中に記載された処方物において、ペプチド薬放出は、主に、 処方物の表面におけるドメイン(domain)からのまたは処方物の表面と連続または 隣接しているペプチド薬のドメインからのペプチドの １回の濾過により先ず発生する水性孔を介して達成された。この濾過は、放出の 開始段階の準備をし、かつポリエステルの引き続くバルク加水分解的崩壊は、結 果として、ポリエステル内に更に多孔性を発生させ、かつ従って更に、崩壊およ び腐食により制御されたペプチド放出が生じうる。加水分解的ポリエステル崩壊 から生じる多孔性が十分に迅速に起きない場合、濾過相からの開始放出は、崩壊 −誘導された十分な多孔性が輸送系(delivery system)中で生じる前に完全であ り、かつペプチドの不連続的放出が得られる。従って、欧州特許（ＥＰ）第５８ ４８１号明細書中に記載された処方物のパラメーターは、放出の２つの段階が重 なり、その結果、ペプチド薬の連続放出が生じるよう保証するために、ポリエス テルの加水分解的崩壊が開始濾過放出段階に関して適時に起きるように選択され る。 しかしながら、ポリエステル相を介するペプチドのフィキアン拡散移動がこの ような単純ペプチド−ポリエステル混合物の場合に不可能であるのに対して、完 全に異なる状況が、場合により遊離ポリマーの存在下での本発明のペプチド−ポ リエステル塩の処方物の場合に生じる。これらの材料を含有する処方物において 、ポリエステル単独からなる分離相は存在しない；それどころか、ペプチドの放 出を制御する連続相は、完全にまたは一部、ペプチド−ポリエステル塩である。 遊 離ペプチドは、ペプチド−ポリエステル塩のこの相中にいくらかの溶解性を有し 、かつこのような材料を用いる処方において、他の必要性、例えば効果的ま自由 体積が存在する場合に、真のフィキアン、ペプチドの分配−依存拡散が可能であ る。 ペプチド−ポリエステル塩が高い加水分解セグメントを有するので、ペプチド −ポリエステル塩処方物はポリエステル単独よりも高い水収容率(water uptake) を有する。更に、これらの処方物中で、ペプチド−ポリエステル相互作用のイオ ン性質により水収容率は更に高められる。これは、ペプチド−ポリエステル塩の 実質的にヒドロゲルの性質を含み、かつポリカチオン−ポリアニオン錯体におけ る高分子セグメントの易動性の程度の増大をもたらす。すなわち、マトリックス 材料の効果的な自由体積が増大し、かつ従って高分子ペプチドを調節することが できる。 ペプチド−ポリエステル塩（場合により遊離ポリマーの存在下で）のこれらの 特性の正味の効果は、ペプチド−ポリエステル塩のマトリックスまたは混合塩お よび遊離ポリマー相を介する高分子ペプチドのフィキアン拡散移動を許可するこ とである。これは、ポリエステル単独またはペプチドおよびポリエステルの単純 混合物を用いて生じるものと全く異なる状況であり、かつ従って、ペプチド−ポ リエステル塩の使用から生じる増大された透過性を基礎とする遅延放出マトリッ クスまたは膜が、本明細書中で前記したペプチドの制御された放出のための処方 物の中心である。 従って、本発明のペプチド−ポリエステル塩は、腸管外薬輸送系の設計におい て、水性および非−水性の薬理学的に相容性の注射賦形剤中の遊離ペプチド薬、 遊離ポリエステルおよびペプチド−ポリエステル塩の種々の混合物を用いる溶液 または分散液を基礎として、かつ筋内または皮下的に注射されるか内移植されう る皮下移植物を基礎として、親油性溶剤中のこれらのペプチド含有基の新規のお よび意想外の溶解性により、新たなかつ意想外の利点を提供する。更に、これら のペプチド−ポリエステル塩を基礎とする処方物は、特に、高い親油性ポリエス テルを用いるものは、他の方法によっても適用することができる。特に重要であ るのは、ペプチド−ポリエステル塩および／または遊離ペプチド薬および／また は遊離ポリエステルの種々の組合せを良好な作用のために使用することができる 経口法である。多くの場合、経口投与のために、薬理学的に相容性の担持剤、例 えば植物油またはそのおよび単独または他の油との混合物でのモノ−、ジ−およ びトリ−グリセリドを包含する変法を使用することは有利である。あまり重要で ないものは、部位的、直腸内および鼻腔内の適用法である。 前記した欧州特許第５８４８１号明細書（１９８２）の他に、ラウター等（前 記）およびオカダ等（前記） は、得られるペプチド−ポリマー塩の可能性を記載する明細書で公知の技術の唯 一の状態であるが、これらの文献の双方は思索的であり、その中で、この推定的 な相互作用がどのように実現されまたは利用されうるか記載していない。本発明 のもう一つの課題は、制御された薬物放出の少なくとも３つの異なる特性を与え るために、種々の割合でのペプチド−ポリエステル塩および／または遊離ペプチ ド薬および／または遊離ポリエステルの種々の組合せよりなる遅延放出医薬処方 物を提供することである。 本発明のもう一つの態様によれば、前記したペプチド−ポリエステル塩および ／または遊離ペプチド薬および／または遊離ポリエステルおよび場合により他の 薬理学的賦形剤からなる遅延放出医薬組成物を提供することである。 本発明の医薬組成物の設計は、次の考えに基づいている。単純ペプチド薬が通 常、水中に溶けるのに対して、ポリエステルおよびその遊離ポリエステルとのそ の双方の塩は、通常完全に非水溶性である（ポリエステルおよびコ−ポリエステ ルの非常に低いオリゴマー形に関して、それらはそれ自体、非水溶性である一方 、ペプチド−ポリエステル塩の形である場合、それらは水に溶けることが認めら れているが）。しかしながら、ペプチド薬およびポリエステルの混合物（ここで 、ペプチドの全ておよび一部は、水性生理学的液体中でペ プチド−ポリエステル塩として存在している）の恒温保持により、結果として、 ポリエステルのある程度の崩壊が生じる。これらの崩壊された生成物が非水溶性 である場合、ペプチド−ポリエステル塩の崩壊は不溶性であるまで続く。他方、 ポリエステルが初めに十分に低い分子量であるか、または水溶性のポリエステル −誘導酸性フラグメントが製造されるのと等しくまたは同様に低い分子量のポリ マー成分を含有する場合、これらのフラグメント（アニオンとしての）はポリペ プチドカチオンとともに共移動可能(co-transportable)である。本発明の新規の ペプチド−ポリエステル塩組成物に関して、放出の即時性は、ポリエステル成分 の分子量および分子量分布に非常に左右される。 分子量分布は、 であり、かつｗ_iは分子量Ｍ_iを有するポリマー分子の 重量フラクションであり、かつｎ_iは分子量Ｍ_iを有するポリマー分子の数である 。 分子量分布は、しばしば、多分散度と称され、かつ狭い、通常のまたは最も可 能性のあるおよび広い分布のための種々の値は公知である（例えば、“Polymer Handbook”,2nd Edition,J Wiley 1975,IV-3参照）。一般的に、１．８より低い 多分散度は狭い分布または低い多分散度であり、約１．８〜２．２は、通常また は最も可能性のある分布または通常の多分散度であり、かつ約２．２より上は、 広いまたは幅広い分布または高い多分散度であることが認められる。 腸管外法、例えばデポー薬または輸送系の筋内または皮下注射または皮下内移 植によるペプチド薬の適用のために、２０００Ｄａより多い数平均分子量および １％ｗ／ｖで、２５℃で、クロロホルム中で、０．０８ｄｌ／ｇより大きいまた はそれと等しいおよび４．０ｄｌ／ｇまでおよびそれを含む固有粘度を有するポ リエステルは有利である。他の方法、例えば経口による適用のために、有利な数 平均分子量の範囲は、５００〜５０００Ｄａである。 技術水準で大部分は無視されてきた前記の考察から、水溶性の誘導されたフラ グメントの小さなフラクションをちょうど与えるための特に塩基性ペプチドの存 在下でのポリエステルの崩壊およびこれが起きるための時間間隔は、分子量およ び分子量分布により制御され ることが分かる。水溶性のフラグメントへの実質的に即時の崩壊は、（分子量分 布のタイプにより）それぞれ約１００００Ｄａより少ないおよび約１５０００Ｄ ａより少ない重量平均分子量を有する狭いおよび通常の双方の分布のポリエステ ルを用いて生じるが、一般的に、ポリエステルの多分散度が低くなればなる程、 水溶性のフラグメントへの即時の崩壊のために必要な重量平均分子量は低くなる 。１５０００Ｄａより大きい重量平均分子量のポリエステルのためには、通常ま たは広い分布が必要とされる。やはり、これは、ある程度、分子量分布の性質お よびタイプに依存するが、一般的に、重量平均分子量が高くなればなるほど、水 溶性のフラグメントへの早い崩壊を得るために必要とされる多分散度は高くなる 。 ペプチドのいくつかまたは全てが、場合により遊離ポリエステルを含有するペ プチド−ポリエステル塩の形であるポリエステルまたはコ−ポリエステルおよび ペプチド組成物のために、異なる３つの放出特性を得ることができる。これらの 第一は、酸性の水溶性のまたは親水性のフラグメントの実質的に即座の崩壊を得 るために、ポリエステルの崩壊が起きる場合であり、これは、結果として、ペプ チドの即座の放出を次のようなメカニズムによりもたらす： 第一の場合、組成物は、全ての薬物をペプチド−ポリエステル塩として含有す るか、または遊離した非結合薬をペプチド−ポリエステル塩に付加して含有して いてよい（双方の場合において、場合により遊離ポリマーの存在下で）。しかし ながら、ポリマーは、ペプチドの存在下で、ほとんど即座に、水溶性のフラグメ ントヘ崩壊し、その結果、ほとんど即座に持続されたペプチドの連続放出が開始 される。崩壊組成物を介する水溶性の遊離ペプチドの拡散が、放出を調節する連 続相中でのペプチド−ポリエステルの存在によるマトリックスの増大された透過 性により促進されることが注目される。 これらの場合の第二は、ペプチド薬がペプチド−ポリエステル塩として存在し ている（場合により遊離ポリエステルの存在下で）が、ポリエステルが水溶性の フラグメントへと即座に崩壊しない場合である。これは、結果として、ペプチド 薬の放出がない開始期間を 生じる。たとえペプチド−ポリエステル塩が、マトリックスに、遊離拡散ペプチ ドへの増大された透過性を与えるとしても、拡散に利用可能な遊離ペプチドは存 在しない。全てのペプチドは非水溶性のペプチド−ポリエステル塩の形であり、 かつポリエステルが水溶性のフラグメントに崩壊し、かつ遊離および移動可能な 薬物を生じるのは、かなりの時間の後でしかない。その結果、その間に最初はペ プチド放出がない遅延誘導期間が生じ、その誘導期間に引き続いて、放出が開始 される。この第二の場合は、可溶性のワクチンおよびペプチドの時間を決めれら たパルス的な放出のための理論的なものである。 第三の場合は、場合により遊離ポリエステルの存在下で、遊離形およびポリマ ー−薬塩形の双方の形のペプチド薬を含有し、かつそのポリエステルが薬１５０ ００Ｄａより大きい（有利には約３００００Ｄａより大きい）重量平均分子量を 有し、かつ狭いまたは最もありうる分子量分布を有する有するするペプチド−ポ リエステル薬系を基礎とする処方物を、例えば筋内および皮下注射部分で見られ るような生理学的環境に置き、不連続的放出を生じうる場合である。放出の第一 段階は、ペプチド薬の存在およびより透過性のペプチド−ポリエステル塩系を介 して移動されるその能力により生じる。更に遊離ペプチド薬を得るためにペプチ ド−ポリエステル塩中でのポリエステルの崩壊を生じ る前に遊離ペプチド薬の放出のこの第一段階が完了する場合、不連続なペプチド 薬放出は続く。 明らかに、その崩壊の間に、遊離ペプチド薬が組成物に存在しない期間がない 場合、連続放出が得られる。この放出特性は、欧州特許第５８４８１号明細書に 記載されたものと同様であるが、欧州特許第５８４８１号明細書における放出の メカニズムおよび使用された材料（ペプチド−ポリエステル塩ではない）は、本 明細書中で定義したメカニズムおよび材料とは全く異なっている。放出特性に応 じて、これらの混合物は、ペプチド、タンパク質および可溶性ワクチンの連続放 出のための理論的なものである。 前記したように、これらのペプチド−ポリエステル薬塩系、その物理化学的特 徴およびペプチドの放出を生じるメカニズムは、欧州特許第５８４８１号明細書 および同第５２５１０号明細書中に記載されたものおよびこの発明者に公知であ る、乳酸およびグリコール酸のホモ−およびコ−ポリマーからのペプチド放出に 関する他の全ての文献とは全く異なっている。これらのうち、欧州特許第５８４ ８１号明細書、ラウター等（前記）およびオカダ等（前記）のみが、ポリエステ ルカルボン酸基およびペプチド中のアミノ酸のイオン相互作用から生じる塩形成 に関して言及しているが、組成物は、その中に記載されたように、ペプチド薬／ ポリエステル塩を含有しなかった。しかしながら、こ れらの前記の文献は、この点について思索的であり、かつこのような相互作用が 本当に生じることを最終的に確立せず、また彼らはこのようなペプチド−ポリエ ステル塩がどのように製造されかつ単離され、かつ次いで、放出の異なる特性の 多様性を用いる、親油性有機溶剤中でのその意想外の溶解性によるペプチドの放 出を達成するために使用できるか証明していない。 ペプチド−ポリエステル混合物の特性のうち、放出を決定するおよび前記して いないものは、ペプチド中の塩基性官能基の数およびポリエステル中のカルボン 酸基の数である。前記文献は、ペプチド−ポリエステル塩の使用から生じる認め られかつ意想外の効果、およびポリエステル単独のまたは二成分が簡単に混合さ れかつ従ってペプチド−ポリエステル塩を含有しない混合物の透過性と比べた場 合に、ペプチド−ポリエステル塩を完全にまたは一部含有する系の意想外に高い 透過性に関しても記載していない。 透過性におけるこの相違は、簡単な拡散細胞実験で証明され、ここで、二つの 水性コンパートメントに分かれ、一方がペプチド水溶液を有しかつ他方が水相の みを含有する連続するおよび欠陥のないポリエステル膜は、膜ポリエステルの著 しい崩壊の前に、それを通ってのペプチド移動を許容しない。これに対して、完 全にまたは一部ペプチド−ポリエステル塩を含有する膜は、ペプチドが５００Ｄ ａより大きい分子量を有す る場合ですら、分配依存拡散により、塩−含有膜を通っての薬物の移動を許容す る。 本発明のペプチド−ポリエステル塩は、同様の従来技術材料で知られなかった 、特に、薬理学的輸送系の設計および製造において有効である、他の意想外でか つ有効な有利な特性を有する。これらの特性の最も有効なものの一つは、ペプチ ドが通常完全に不溶性である有機溶剤中でポリエステル塩の形である場合のペプ チドの良好な可溶性である。このことは、薬輸送系の製造のために使用される新 たな工程および方法を許可し、かつ特に無菌的製造を促進する、薬剤の製造にお ける非常に多くの利点を生じる。これらの工程および方法および使用される材料 は、従来技術に記載された方法および材料とは全く異なるものである。 従って、場合により可溶化されたまたは分散された形で遊離ポリマーおよび／ または遊離ペプチドを含有するペプチド−ポリエステル塩の溶液を無菌濾過する ことができ、従って、固体または懸濁液ペプチド処方物の無菌製造に通常結びつ いた問題を軽減する。従って、ペプチド−ポリエステル塩の無菌濾過された溶液 は、無菌環境における種々の薬理学的乾燥法に作用させることができる。固体粒 子を生じる噴霧乾燥、噴霧凝固および他の乾燥法は、それ自体、無菌操作に迅速 に役立つ有利な方法である。 特に有効であるのは、薬理学的に相容性の注射賦形 剤中に懸濁することができる、０．２μｍ〜５００μｍの大きさの粒径を有する 微粒子の発生である。このような微粒子は、使用前に水性注射賦形剤中に、また は二者選択的に、使用される材料のための非溶剤である有機注射賦形剤中に懸濁 することができる。乳酸およびグリコール酸のホモ−およびコ−ポリマーを基礎 とする輸送系のために、適当なこのような有機賦形剤は、非常に親油性の油状物 、例えば（これに限定されないが）オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピ ル、植物油および種々の脂肪族グリセリドである。ある環境において、このよう な親油性賦形剤の混合物を使用することは有利である。 このような親油性賦形剤は、乳酸およびグリコール酸を基礎とするデリバリー 形のための非溶剤であるが、これらは、非常に親油性のポリエステル、例えば長 鎖ヒドロキシ酸を基礎とするようなもの、例えばヒドロキシステアリン酸と共に 使用することは不適当である。このような非常に親油性のポリエステルまたはコ −ポリエステルのためには、親水性有機注射賦形剤、例えば（これに限定されな いが）プロピレングリコールおよび低分子量ポリエチレングリコールが有利であ る。明らかに、水性注射賦形剤は、より親油性のポリマーを基礎とする輸送系に も適当である。 微粒子を製造するための二者選択適方法は、他の意想外でかつ有利な本発明の ペプチド−ポリエステル塩の特性を利用する。ペプチド−ポリエステル塩は、む しろ熱力学的に水性または極性環境または相中に存在するかまたは溶ける親水性 ペプチド、および疎水性でありかつむしろ熱力学的に疎水性相中に溶けるポリエ ステル鎖からなる。すなわち、ペプチド−ポリエステル塩は両親媒性であり、か つ単純ペプチド塩中には存在しない界面活性の特徴を有する。この界面活性は、 むしろ相界面に存在するペプチド−ポリエステル塩を生じ、かつ塩の一般的性質 （疎水性鎖の割合および長さ）により、大部分の水相中でもっとも熱力学的に安 定なタイプの分散液は、ペプチド−ポリエステル塩が、水中の分散液として存在 することである（臨界ミセル濃度が非常に低いので、全ての塩が多くの状況で界 面に存在しうるとは限らない）。 従って、ペプチド−ポリエステル塩が、水性分散液の安定性を作り、並びに保 持するために、非常に効果的な分散剤であることが分かる。微粒子薬理学的処方 物を製造するためのこの第二の方法において、ペプチド−ポリエステル溶液（例 えばジクロロメタン中の）は、場合により粘度−強化ポリマー、例えば（これに 限定されないが）ポリビニルアルコールを有していてもよい水相中に、ペプチド −ポリエステル塩の界面活性特性を用いて簡単に分離される。このようなペプチ ド−ポリエステル塩を含有するいくつかの有機溶液は自然に分散しうるが、一般 的な方法として、撹拌または剪断が水性分散液の製造において必要とされる。 前記したような方法の更に有利な態様は、水性分散が二酸化炭素の不存在下で および不活性雰囲気中で有効に実施されるように、操作を実施することである。 ペプチド−ポリエステル塩の有機溶液が二酸化炭素不含であることは、更に有利 である。それというのも、通常状態下での大気および水中の二酸化炭素の濃度は 、ポリエステルカルボン酸基の濃度と比較して、次の等式にしたがって、質量作 用効果により競争塩処方物中に入るために、十分に高いからである： （ここで、Ｐはポリエステルであり、かつＤはペプチド薬である）。次いで、得 られる水性分散液を、種々の技術、例えば有機溶剤の真空中での除去、引き続く 凍結乾燥、または１回凍結乾燥操作での溶剤および水の双方の直接除去により乾 燥させる。次いで、得られた生成物を、前記の方法で、適当な注射用医薬調合物 を製造するために使用する。 微粒子の医薬組成物を製造する更に二者選択的方法は、適当な有機溶剤または 賦形剤中の、コロイド状に分散する遊離ペプチドを含有するペプチド−ポリエス テル塩の実質的に乾燥した溶液を使用する。（「実質 的に乾燥した」という用語は、ペプチドからの水のすベての痕跡を除去すること が目で見ては不可能であり、かつ更に、薬物は全く、分離水相中に水性溶液とし て存在しないことを意味する。）激しい撹拌の状態下でポリマーのための非溶剤 を添加し、引き続き、沈殿した微粒子を更に硬くし、かつ安定化するために、多 量の第二の非溶剤へ、溶剤−膨張したペプチド−ポリエステル塩（場合により遊 離ポリマーを含有し、かつ場合により遊離薬物を含有する）を添加することによ り、最終形が生じる。明らかに、適当な条件下で、または適当な界面活性剤、例 えば（これに限定されないが）ソルビトールの脂肪酸エステルの存在下で、微粒 子の沈殿がポリエステルのための単独の非溶剤、例えばパラフィン、例えばヘキ サンを用いて実施される。 前記した種々の方法により製造される微粒子は、ペプチドがポリエステル単独 の相中にカプセル化される欧州特許５２５１０号明細書(Syntex)および同第１４ ５２４０号明細書（タケダ）で略述された方法により製造されたマイクロカプセ ルとは構造的に完全に異なっている。マイクロカプセルは、連続する第二の相内 の一つの化合物または材料の一つ以上のコアとして定義され、従って、第二相材 料の連続被覆は、マイクロカプセルの表面に材料が存在することがないように、 コア材料を完全に取り囲むかまたはマイクロカプセル化し、かつマイクロカプセ ル化されたコア材料は、カプ セル化されていないコア化合物または材料の物理化学的および熱力学的特性を全 ての点に関して保持する。 従って、欧州特許第５２５１０号明細書において、相分離コアセルベーション 法は、ペプチドの希釈水溶液の液滴を被覆するために使用され、従って、ポリマ ー単独が水溶性液滴の周りを連続的に被覆することよりなる。すなわち、微小球 の幾何学および形状を有する真のマイクロカプセルである。沈殿したマイクロカ プセルの単離および硬化および乾燥の後に、ペプチド薬がポリマー外皮内の離散 コアとして存在する生成物が得られた。乾燥前のマイクロカプセルの内部の水の 存在故に、ポリマーのガラス転移温度より低い温度での脱水工程の間のその除去 は、結果として、非常に小孔性(doraminous)である粒子を生じる。欧州特許第５ ２５１０号明細書中で使用されたまたは記載された方法および材料はペプチド− ポリエステル塩を含んでおらず、また前記の工程は、無菌製造が必要とされる場 合に、ペプチド−ポリエステル溶液または懸濁液の無菌濾過を許さない。 更に、この前記特許文献は、特に、米国特許第３７７３９１９号明細書(Boswe ll)中に記載された、この中で、２５℃でベンゼン可溶性であると定義される乳 酸およびグリコール酸を基礎とするポリエステルを使用した。本発明において、 乳酸および／またはグリコール酸を基礎とするベンゼン不溶性ポリエステル （しかし、これはクロロホルム中に可溶性である）は、比較的短いデリバリー期 間、すなわち２カ月より少ない期間のために有利である。 欧州特許第１９０８３３（タケダ）号明細書中で、ペプチドは、ゲル化された 薬物の水溶液として取込まれ、かつゲル化された水相は、ポリマー溶液中に分散 された。次いで、この油（ポリマー溶液）中水（水性薬物ゲル）型分散液を、そ れ自体、剪断下に水中に分散させて、水中油中水型(water-in-oil-in-water)二 重分散液を得た。真空下での有機溶剤の除去後に、薬物／ゲル化剤がポリマー単 独によりカプセル化された親油性のマイクロカプセルが得られた。この方法の生 成物は、薬物を単純な塩として保持し、ペプチドのポリマー塩として保持するの ではない。従って、本発明の医薬処方物は、マイクロカプセルが、薬物のコアが 完全にポリマー単独により密閉されている微少球(microspheres)の形状および幾 何学を有する欧州特許第５２５１０号、同第１４５２４０号および同第１９０８ ３３号明細書中に記載された生成物とは全く異なる構造、物理化学的特性および 熱力学的特性を有する。 本発明の生成物は、（これに限定されないが）微少球の幾何学および形状を有 していてよいが、これらは前記したようなマイクロカプセルでは全くなく、むし ろペプチド−ポリエステル塩（場合により遊離ポリマーも含有している）の溶液 であるか、またはこれらは、 遊離ペプチド薬が場合により遊離ポリマーも含有しているポリマー−薬物塩の連 続相内または被覆内にカプセル化されるマイクロカプセルである。前記したよう に、このようなポリマー薬物塩の透過特性は、遊離ポリマー単独のものとは全く 異なるので、本発明の生成物は、前記欧州特許第５２５１０号、同第１４５２４ ０号および同第１９０８３３号明細書中に記載されたものとは全く異なる方法で そのペプチド薬負荷を放出する。 従って、本発明のもう一つの態様は、場合により遊離ポリマーを含有するペプ チド−ポリエステル塩の溶液を用いる、マイクロカプセルではない微少球の製造 、またはマイクロカプセルであるが、場合により遊離ポリマーを含有するペプチ ド−ポリエステル塩の相または被覆によりカプセル化された遊離薬物からなる微 少球を製造することである。 このような種々異なる粒子は、種々の異なる方法、例えば沈殿、相分離コアセ ルベーション、噴霧乾燥および噴霧凝固により製造することができる。有利な粒 径は０．２μｍ〜５００ｐｍにわたり、かつ前記粒子は適当な注射賦形剤中の懸 濁液として注射することができる。 特に効果的でかつ有効なペプチド薬の腸管外医薬処方物は、遊離ポリエステル のための溶剤であるがペプチドおよびその単純塩のための非溶剤である薬理学的 に相容性の有機溶剤、例えばクロリドおよびアセテート中の、場合により遊離ポ リエステルを含有し、かつ場合により分散されたまたは溶解された遊離ポリエス テルを含有する薬物−ポリエステル塩の溶液の形で製造することもできる。 従って、しかしながら、本発明により、次の組成からなる組成物が溶液の形で あることを特徴とする、ペプチド薬の遅延放出のための、ペプチド薬およびポリ エステルからなる医薬組成物を提供する： （ａ）ポリエステルとの塩の形である少なくとも３００Ｄａ、特に少なくとも８ ００Ｄａの分子量を有する前記のような塩基性ペプチド薬（その際、塩は、塩基 性ペプチドのカチオンおよびカルボキシ末端ポリエステルのアニオンからなる） 、 （ｂ）遊離ポリエステルのための溶剤であるが、遊離ポリペプチドのための溶剤 ではない薬理学的に相容性の有機溶剤、 （ｃ）過剰のポリエステル、および場合により （ｄ）可溶化されたまたはコロイド状に分散された形の過剰の遊離ペプチド薬。 適当な塩基性ペプチドおよびカルボキシ−末端ポリエステルは、前記のもので あり、かつ特に有利なペプチドは、前記の合成ＬＨＲＨ類縁物である。 ポリエステルが乳酸およびグリコール酸のホモ−およびコ−ポリマーを基礎と するポリエステル−ペプチ ド薬塩のために適当な、薬理学的に相容性の有機溶剤は、これに限定されないが 、安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール、乳酸エチル、グリセリルトリアセテ ート、クエン酸のエステルおよび低分子量（＜１０００）ポリエチレングリコー ル、アルコキシポリエチレングリコールおよびポリエチレングリコールアセテー ト等を包含し、かつこれらのうち、安息香酸ベンジルおよびベンジルアルコール は有利であり、特に安息香酸ベンジルは有利である。 このような有機溶剤のための唯一の要求は、薬理学的に相容性であり、かつポ リエステル−ペプチド薬塩がその中に可溶性であることである。このような溶剤 の単独を使用しようと、またはこのような溶剤の混合物を使用しようと、このよ うな溶剤の可溶性は、簡単な実験によって容易に測定することができる。乳酸お よびグリコール酸のホモ−およびコ−ポリマーは、もっとも極性および疎油性の ポリエステルであり、かつオレイン酸エチル、植物油および他の親油性担体のよ うな有機注射溶剤中に溶けないが、親油性モノマーまたはコ−モノマーまたは親 油性ヒドロキシ酸、例えばヒドロキシステアリン酸を基礎とするホモ−およびコ −ポリマーは、このような親油性注射賦形剤中に可溶性である。 本発明の溶液組成物を形成するために溶かされる固体中のペプチド薬対ポリエ ステルの比は、もちろん、 ペプチド薬の能力、使用したポリエステルの性質および所望されるペプチド薬放 出の期間により変化する。 ぺプチド薬組込みの有利な程度は、０．１〜３０％ｗ/ｖである。一般的に、 最適な薬物負荷は、ポリエステルの分子量およびその分子量分布、所望された放 出の期間およびペプチド薬の能力に左右される。明らかに、比較的低い能力の薬 物のためには、高い程度の組込みが要求される。 組成物による水収容は、ポリエステルの加水分解分断率を制御する重要な因子 であり、かつ水収容の割合は、組成物上での薬物負荷により決定される程度まで である。従って、比較的短い期間にわたって、すなわち３カ月、比較的迅速な薬 物放出が望まれる場合に、３０％までのペプチド薬負荷が適当である。 コ−ポリエステルのモノマー組成物、例えばラクチド−コ−グリコリドポリエ ステル中のラクチド対グリコリドの比も、ポリエステル崩壊およびペプチド薬放 出の速度を決定する際に重要である。放出の持続時間も、一部、ポリエステルの 重量平均分離量により決定されるが、薬物−ポリエステル塩として組込まれうる ペプチド薬の量は、数平均分子量により決定される。すなわち、多分散度（重量 平均対数平均分子量の比）は重要なパラメータである。 従って、例えば、１〜４カ月のペプチド薬放出の持続時間に、多分散度１．２ 〜２．２を有する４０００〜 ２００００の重量平均分子量のポリエステルおよびペプチド薬含有率０．１〜３ ０％からなる組成物は有利である。一般的に、薬物負荷が低くなればなるほど数 平均分子量は低くなり、かつポリエステルの多分散度が高くなればなるほど望ま しい。長い放出期間、すなわち２〜６カ月のために、０．１〜２０％のペプチド 薬物負荷、および重量平均分子量８０００〜２００００および１．５〜＞２．２ の多分散度を有するポリエステルを使用することは有利である。６カ月よりも長 い放出期間のためには、０．１〜１０％のペプチド薬物負荷が有利であり、その 際、求めるポリエステルは、重量平均分子量２００００〜５００００および多分 散度＞１．８を有する。 本発明の組成物中の全ペプチド−ポリエステル固体の組込みの程度は、もちろ ん、ペプチド成分の能力、ペプチド薬の輸送が望まれる期間、選択した溶剤中で の全固体の可溶性および適用に望まれる溶液組成物の容量および粘度に応じて変 化する。 本発明の溶液組成物の粘度は、ポリエステルの分子量およびペプチド薬負荷に より決定される。一般的に、固体約４０ｗ/ｖ％（ペプチド薬物/ポリエステル塩 、遊離薬物、遊離ポリエステル）より多く含有し、かつこの中でポリエステルが ＞８０００の重量平均分子量を有する溶液は、その粘度故に注射による適用が困 難である。したがって、≦４０ｗ/ｖ％の溶液が、これ らのポリエステルのために有利である。約８０００〜約２００００の重量平均分 子量のポリエステルからなる溶液組成物のためには、≦３０ｗ/ｖの濃度が有利 であり、約２００００〜約５００００の分子量のポリエステルからなる溶液組成 物のためには、≦２０ｗ/ｖ％の濃度が有利である。いくつかの環境において、 例えば、組成物を非常に細い針を用いて注射することが望まれる場合に、非常に 低い粘度の溶液が有利であり、かつ濃度は、２ｗ/ｖ％またはそれ以下まで減少 されうるが、粘度の減少と、注射するために必要とされる容量の増大との間には 平衡が存在する。 本発明によるもう１つの特徴によれば、 １．塩基性ペプチド薬およびポリエステルの均質混合物を製薬学的に認容性の溶 剤中に溶解し；または ２．Ｃ₁〜Ｃ₆アルカノール中のペプチド薬の溶液を、注射に適した溶剤中のポリ エステルの溶液に緩徐に添加し、その後、ヒドロキシル溶剤が注射のために製薬 学的に認容性でない場合には、蒸発によって除去するかまたはヒドロキシル溶剤 が注射のために製薬学的に認容性である場合には、該ヒドロキシル溶剤の除去は 不用にできる ことからなる本発明の組成物の製造法が得られる。 上記方法１で使用された塩基性ペプチド薬およびポリエステルの均質混合物は 、有利に、塩基性ペプチドおよびポリエステルを、塩基性ペプチド薬およびポリ エステルの双方を溶解する能力があり、かつ凍結乾燥される能力がある溶剤また は溶剤混合物中に溶解することによって得られる。この種の溶剤または溶剤混合 物の適当な例は、氷酢酸およびジオキサンと水との混合物であり、次に、こうし て得られた溶液は凍結乾燥させられる。また、この２つの成分は、例えばジメチ ルスルホキシド中に溶解され、引続き、該溶剤は除去されてもよい。 また、該均質混合物は、ペプチド薬をヒドロキシル溶剤中、例えばメタノール 中に溶解し、該溶液を、例えばジクロロメタン中のポリエステルの溶液に添加し 、 次に、該溶剤を、例えば蒸発によって除去することによって得ることもできる。 また、塩化物の塩のようなペプチド薬の水溶液を、ポリエステルのナトリウム 塩の水溶液または分散液に添加し、該混合物を凍結乾燥させて、ペプチド薬／ポ リエステル塩および塩化ナトリウムの混合物を生じさせてもよい。この塩化ナト リウムは、望ましい場合には、有機溶剤中の製品を混合し、不溶性の塩化ナトリ ウムを濾別することによって除去してもよい。 方法１の場合、製薬学的に認容性の溶剤中への均質混合物の溶解を、反応混合 物の加熱および／または撹拌によって促進してもよい。 上記方法２の場合、ペプチドにとって適当なアルカノール溶剤は、例えばメタ ノール、エタノールまたはプロピレン−１，２−ジオールである。 場合によっては遊離薬および／または遊離ポリエステルを含有するポリエステ ル−ペプチド薬の塩の溶液の形での製薬学的ペプチド薬製品の主な利点は、患者 へ投与する前の前混合のために何ら必要とせずに直ちに使用するための滅菌され た形での注射可能な製品の調製物が、滅菌濾過を用いて製造することができるこ とである。このことは、固体または懸濁液製品の滅菌よりも、はるかに単純な製 造作業である。滅菌された注射可能な溶液の製造のための選択的な過程は、場合 によっては遊離薬および／または遊離ポリエステルを 含有する滅菌されたポリエステル−ペプチド薬塩を、製薬学的に認容性の有機注 射ビヒクル中に溶解することである。 前記調製物は、投与の腸管外経路のための一次調製物であるとしても、本発明 のポリエステル薬塩は、経口投与可能な処方物の製造に使用してもよい。 注射されることができるかまたは皮下に植え込まれるとができる処方物のまっ たく異なる型は、移植物または移植物の異なる型の混合物を基礎とする薬輸送系 である。これは、場合によっては遊離薬および／または遊離ポリエステルを含有 する本発明のポリエステルペプチド薬塩から、常用の溶融ポリマー二次加工技術 、限定するものではないが、例えば押出し、圧縮、射出成形を用いて製造するこ とができ、この場合、高められた温度（有利に１００℃未満）は、移植物の製造 の場合にポエステル薬塩を溶解させるために使用される。この種の移植物の製造 は、無菌条件下にまたは選択的に照射による末端滅菌によって実施することがで き、この場合、限定するものではないがγ線またはＸ線を使用する。この固体用 量形は、粉砕または微粉砕によって微粒子形に変えることができる。好ましい粒 度は、１μｍ〜５００μｍの範囲内であり、この微粒子輸送系（マイクロスフェ アでもマイクロカプセルでもない）は、適当な常用の製薬学的に認容性の注射ビ ヒクル中に懸濁させることができる。 ペプチド−ポリエステル薬塩の溶融法は、本発明のペプチド−ポリエステル薬 塩の物理化学的性質および熱動力学的性質と、遊離ペプチドおよびその単純な塩 の物理化学的性質および熱動力学的性質との間の最も意義がありかつ重要な違い を包含しかつ説明する。多くの場合、本発明のペプチド−ポリエステル塩は、溶 解しないが、しかし、高められた温度で分解する遊離ペプチドおよびその単純な 塩、例えば塩化物および酢酸塩とは異なり、溶融しかつ流動する。 ポリエステルの崩壊は、部分的には、該ポリエステルの分子量および多分散度 に左右される。明らかに、エステル基の加水分解による切断によって主として生 じる崩壊のために、ポリエステルまたはポリエステルを含有する医薬品は水を吸 収しなければならない。放出量を制御するマトリクスまたは膜が完全にかまたは 分的にペプチド−ポリエステル薬塩を含有するような系のために、ポリエステル だけのものと比べた場合、制御するマトリクスまたは膜によって、より高度に水 が吸収されることになる。従って、ポリエステル薬塩を含有する連続マトリクス 相または膜は、ポリエステルだけを基礎とする連続的マトリクス相または膜とは 異なって崩壊する。また、放出量を制御するようなポリエステルマトリクスまた は膜中への水または生理学的液体の拡散率は、部分的には崩壊率を制御すること になる。また、水または生理学的液体のこの拡散は、 処方物の寸法および形状によって決定され、同様にまた、ポリペプチドおよびポ リエステルのポリマー塩を含有する組成物からの薬放出量は、前記の要因に左右 される。 本発明のペプチド−ポリエステル薬塩のポリエステル成分として特に重要なも のは、乳酸およびグリコール酸のホモポリマーおよびコポリマーを基礎とするも のであり、この場合、乳酸は、その光学活性形およびラセミ形の任意の１つまた はそれ以上の形であってもよい。この一般的な型のポリエステルは、久しく知ら れており、かつ種々の放出量を制御された薬輸送系の詳細について研究されてい る（例えば、“Biodegradable Polymers as Drug Delivery Systems”M Chasin & R Langer、Marcel Dekker編中のD H Lewisによる“(Controlled Release of Bi oactive Agents from Lactide/Glycolide Polymers”を参照のこと、前記文献は 、本明細書中に参考のために引用したにすぎない）。 例えば、米国特許第３７７３９１９号明細書には、広く一般的な意味で、抗菌 性のポリペプチドを含有するラクチドポリエステルおよびラクチドコポリエステ ルからなる放出量を制御された医薬品が製造されうることが示されている。しか しながら、前記米国特許明細書に開示された抗菌性のペプチドは、該ペプチドが 硫酸塩として生じるかあるいはまたポリエステル−ペ プチド薬塩の形成を阻止するかまたは妨害する他の特徴を有するので、ポリエス テル塩を生成するためには不十分である。確かに、本明細書中に示された例は、 次に、開示されたように高められた温度で、ペプチド薬と、その性質にかかわり なく、１個のポリマーとの混合を続ける場合、ペプチド薬の突発的分解を生じる 。 同様に、抗菌性のポリペプチド、コリスチンは、欧州特許第２５６９８号明細 書中には、多くの列挙された化合物の１つとして開示され、該化合物は、ポリラ クチドを用いて処方できるといわれているが、しかしやはり、この化合物は、ポ リエステルの末端カルボン酸基との塩の形成を妨害する構造的特徴を有している 。コリスチンは、製薬学的には、硫酸コリスチンまたはコリスチンスルホメタン 酸ナトリウムとしてだけ使用され、双方の形成のいずれも、本発明によるポリエ ステルとの両親媒性の塩の製造できるようにするものではない。乳酸およびグリ コール酸のホモポリマーおよびコポリマーを基礎とする生物分解可能なポリマー を有するポリペプチドの使用を開示する他の従来技術は、欧州特許第５２５１０ 号明細書、同第５８４８１号明細書、同第１４５２４０号明細書および同第１９ ０８３３号明細書であり、上記されている。 乳酸およびグリコール酸のコポリマーが久しく知られているとしても、薬放出 マトリクスとして使用され た場合に、コモノマー単位の分布、その後の配列の長さ（ランダムではなくコポ リマー中の同じ個々のコモノマーの配列の長さ（runs））およびこの種の構造変 化の作用に関してのその構造の複雑さは、従来技術において無視されていた。こ のコポリマー構造は、部分的に、崩壊速度と同様に、ベンゼンのような溶剤中で のポリマーの溶解度または膨潤度の双方を測定する。この相関関係は、まず、ハ ッチンソン(Hutchinson)によって注目されたが（欧州特許第５８４８１号明細書 ）、しかし、本発明中で拡大されかつ詳細にされている。 この点を説明するために、米国特許第３７７３９１９号明細書には、ベンゼン 中に溶解するラクチドおよびグリコシドの５０／５０のコポリエステルを用いる 放出量を一定に制御された薬処方物が開示されているが、実際には、この米国特 許明細書は、（乳酸／グリコール酸コポリマーについて）ベンゼン可溶性である ものに特に限定されている。更に、前記ベンゼン可溶性コポリエステルの有用性 は、欧州特許第５２５１０号明細書中でのその詳細な使用によって強調されてい た。しかしながら、早期の米国特許第２７０３３１６号明細書（米国特許第３７ ７３９１９号明細書と共通の特許権者であった）には、ベンゼン中に不溶性であ る５０／５０のラクチド／グリコシドコポリエステルが開示された。前記の２つ の米国特許明細書は、共通 の特許権者(duPont)であったので、前記特許明細書の後者で特許の保護を請求さ れた発明の場合、ベンゼン不溶性コポリマーは、ベンゼン可溶性であったものと 比較していくつかの点で劣っていたと推測されなければならない。この点は、米 国特許第３７７３９１９号明細書のベンゼン可溶性コポリマーだけを使用した欧 州特許第５２５１０号明細書によって強調されている。 従来技術は、本出願人等による欧州特許第５８４８１号明細書以外には、乳酸 およびグリコール酸のコポリエステルの構造がその溶解度および崩壊度に対して 有している作用を無視していた。本出願人等は、同じ分子量および分子量分布の ポリエステルについて、次の一般的関係は、最も多くの場合、クロロホルム中に ２５℃で可溶性であるポリエステルに当てはまり、即ち、ベンゼン不溶性のポリ エステルは、ベンゼンによって膨潤するが、しかし、溶解しないポリエステルよ りも迅速に崩壊し、同様にベンゼンで膨潤可能なポリエステルは、崩壊実験が、 水性の生理学的液体中かまたは緩衝液中でｐＨ７．４で３７℃で行われる場合に は、ベンゼン中で自由可溶性であるポリエステルよりも迅速に崩壊する。その結 果、相対的に短い期間に亘って、例えば一週間ないし２か月の腸管外処方物から のペプチドの連続的放出量を得るために、ベンゼン中に不溶性であるポリエステ ルを使用することは特に有 用である。 従って、ペプチド０．１ｗ／ｖ％ないしペプチド７５ｗ／ｖ％までを含有して もよい組成物について、次のものは、ポリエステル組成物および該組成物の構造 、粘度および多分散度に関連しているものとみなされる。 一週間から２か月の期間に亘って連続的に薬を放出させるための本発明により 処方することができるペプチド−ポリエステル薬塩の製造のためには、有利に、 標準ないし広い多分散度を有するこの種のベンゼン不溶性ポリエステルのモル組 成物は、有利にグリコール酸（またはグリコシド）６０％／乳酸（またはラクチ ド）４０％ないしグリコール酸（グリコシド）約２５％／乳酸（またはラクチド ）７５％までの範囲であり、かつこの種のポリエステルは、有利に、０．０８〜 ４．０ｄｌ／ｇの範囲内の２５℃でクロロホルム中で１ｗ／ｖ％での固有粘度を 有する。 分子量および分子量分布を包含するポリエステルパラメーターの適当な選択に よって、また、本発明による処方物からの一週間ないし２か月の期間に亘るポリ ペプチドの連続的放出を達成することも可能であり、この場合、ベンゼン中で可 溶性であり、クロロホルム中１％で２５℃で０．０８〜０．５ｄｌ／ｇの固有粘 度を有し、かつ狭いないし広い多分散度を有するポリ乳酸ホモポリマーかまたは グリコール酸（またはグリコリド）３５％／乳酸（またはラクチド）６５％ない しグリコール酸（またはグリコリド）１０％／乳酸（またはラクチド）９０％の 範囲内のモル組成を有するコポリエステルを使用する。 本発明による処方物からの相対的に長い期間、例えば２〜６か月に亘るペプチ ドの連続的放出は、ベンゼン可溶性であり、０．２〜４．０ｄｌ／ｇの２５℃で クロロホルム中で１ｗ／ｖ％での固有粘度および標準的ないし高い多分散度を有 するポリ乳酸ホモポリマーかまたはグリコール酸（またはグリコリド）２５％／ 乳酸（またはラクチド）７５％ないしグリコール酸（またはグリコリド）０％／ 乳酸（またはラクチド）１００％の範囲内のモル組成を有するコポリエステルを 用いて達成することができる。 本発明による処方物からの極めて長い期間、例えば２年までに亘るペプチドの 連続的放出は、ベンゼン可溶性であり、０．２〜４．０ｄｌ／ｇの２５℃でクロ ロホルム中で１ｗ／ｖ％の固有粘度を有するポリ乳酸ホモポリマーまたはグリコ ール酸（またはグリコリド）２５％／乳酸（またはラクチド）７５％ないしグリ コール酸（またはグリコリド）０％／乳酸（またはラクチド）１００％の範囲内 のモル組成を有するコポリマーを使用して達成することができる。 相対的に短い期間、例えば２か月までの時間を定められたかまたはパルスにさ れた（放出前の誘導期を有する）放出または非連続的放出（この場合、放出の初 期段階に、放出されないかまたは効果的でない放出期間が続き、次に、放出の第 二段階が続く）は、本発明による処方物を用いて達成することができ、この場合 、狭いないし最もありうる分子量分布および０．３〜４．０ｄｌ／ｇの２５℃で クロロホルム中で１ｗ／ｖ％での固有粘度を有するベンゼン不溶性ポリマーを使 用する。 新規であり本発明を、全ての他の以前に記載されたポリエステルまたはコポリ エステルを基礎とする放出量を制御された薬輸送系と区別し、更に放出速度を制 御する本発明の更に別の特徴は、（場合によっては遊離薬および／または遊離ポ リマーの存在下での）ポリエステル塩としてのペプチドの混和の水準である。こ の更に制御する特徴は、ステロイドのような相対的に低い水溶性を有する高い脂 肪親和性薬の輸送に向けられているポリエステルを基礎とする更に従来の輸送系 の場合の放出速度を増大させることになるようなパラメーターとは全く異なる。 前記の場合、薬の混和の水準が増大するので、この種の系の水の吸収量が減少さ れるとしても、脂肪親和性薬の増大した相容積に基づき、放出の速度は、増大し たとみなされる。実際には、ステロイドのような薬のかかる増大した放出速度は 、薬の熱動力学的識別点を保持する薬および単純なフィックの拡散動力学(Ficki an diffusion kinetics)(Baker and Lonsdale、上記引用文）に左右される。 これは、ステロイドのような薬については、薬負荷が増大し、かつ脂肪親和性薬 を得ることにより、脂肪親和性ポリマー中への多少の可溶性を有するので、単純 なフィックの拡散速度は増大するということである。 しかしながら、本発明の製品とは、全体的に異なる条件が存在する。現在、ポ リエステルおよびコポリエステルの崩壊の主要な構成要素の一部は、エステル基 の加水分解および前記加水分解の発生が、水の吸収量に左右されるような程度の 速度であることが認められている(Pitt and Zhong-wei gu、 J.Controlled Relea se、第４巻、第２８３〜２９２頁（１９８７年）；Hutchinson and Furr、同書 、第１３巻、第２７９〜２９４頁（１９９０年）を見よ）。ペプチドは親水性で あり、ポリエステルとの該ペプチドの塩の形成は、ポリエステルだけのものより も高度の水の吸収量を有するポリエステル薬塩を含有する相を生じる。これは、 塩の中のポリエステル鎖が、同様の組成、分子量および多分散度を有する遊離ポ リエステルだけものよりも迅速に崩壊することができるということである。ペプ チド放出は、崩壊に著しく左右されるので、その場合、放出は、部分的に、組成 物中でのポリエステル−ペプチド薬の混和の水準および塩の中でのペプチドの割 合の双方によって決定される。同じ組成および構造のポリエステルまたはコポリ エステルについては、前記パラメーターの一方または双方を増大させることによ り、 放出速度を増大させ、従って、一定の環境下で、放出を生じうる期間を減少させ ることができる。ポリエステル薬塩としてかまたは遊離ペプチドとの組合せ物中 のポリエステル薬塩としてのペプチド薬の混和の水準は、有利にポリエステル薬 処方物中で０．１ｗ／ｗ％〜７５ｗ／ｗ％の範囲内である。 本発明の組成物およびポリエステル分子量および多分散度を有するその変法中 のペプチド薬負荷は、以下の通りである。極めて長い期間、例えば２年までに亘 るペプチドの連続的放出については、１．０ｗ／ｗ％〜２０ｗ／ｗ％の範囲内の 薬の混和の低い水準は好ましく、この場合、好ましくは２００００Ｄａまたはそ れ以上の重量平均分子量および２．２を上廻る、有利に３．５を上廻る多分散度 を有するポリエステルを使用する。また、極めて長い期間の放出ための前記パラ メーターは、部分的に、薬処方物中の他の特徴、例えばコモノマー含量に関する 組成、構造、ベンゼン中での溶解性／不溶性、投与形の形状および寸法に左右さ れる。約２００００の重量平均分子量のポリエステルは、その構造、組成および 多分散度のような要因に応じて約０．２の固有粘度を有する。 相対的に長い期間、例えば６か月までに亘る連続的放出については、ペプチド 薬の混和の好ましい水準は、０．５ｗ／ｗ％〜３５ｗ／ｗ％の範囲内であり、こ の場合、有利に１００００Ｄａまたはそれ以上の重量平 均分子量および１．８を上廻る、有利に２．２を上廻る多分散度を有するポリエ ステルまたはコポリエステルを使用し、この場合、全ての他のパラメーター、例 えば組成、構造、ベンゼン中での溶解性／不溶性、投与形の形状および寸法に左 右される。 相対的に短い期間、例えば２か月までに亘る連続的放出については、ペプチド 薬の混和の好ましい水準は、０．１ｗ／ｗ％〜７５ｗ／ｗ％の範囲内であり、こ の場合、好ましくは２０００Ｄａまたはそれ以上の重量平均分子量および１．２ を上廻る多分散度を有するポリエステルを使用し、この場合、全ての他のパラメ ーター、例えば組成、構造、ベンゼン中での溶解性／不溶性、投与形の形状およ び寸法に左右される。 更に、本発明による処方物からのペプチド薬放出を制御し、かつ乳酸およびグ リコール酸のホモポリマーおよびコポリマーを基礎とする輸送系の従来技術の型 には存在しない付加的なパラメーターは、ペプチド薬分子中に残留するアルギニ ンおよびリジンのような塩基の数に関してはペプチドの官能性であり、平均的な ポリマーまたはコポリマー鎖によって含有されるカルボン酸基の平均数に関して はポリエステルまたはコポリエステルの官能性である。一般に、ペプチド薬の連 続的放出については、ペプチド−ポリエステル高分子電解質錯体中でのこの種の 多官能性相互作用の水準が大きければ、それだけ一層、必要とされる多分散度は 大きい。これとは異なり、非連続的またはパルス的放出については、２．２未満 の多分散度は好ましい。 異なる化学構造を有する２つのポリマー型の相容性または可溶性の相対的に僅 かに発生することの１つは、乳酸およびグリコール酸のホモポリマーおよびコポ リマーを基礎とするポリエステルと、低分子量のポリオキシエチレンおよび特に 低分子量のポリエチレングリコールとの混合物によって説明される。この相容性 は、本発明の場合、新規かつ予想されなかった方法でポリエステル−ペプチド薬 塩およびその処方物に良好な影響を及ぼした。従って、一定の薬理学的活性のペ プチドは、‘ペギル化(pegylated)’できることが知られており、この場合、ペ プチドの薬理学的活性が保持されているような方法で、ポリエチレングリコール またはアルコキシ−ポリエチレングリコールと共役結合させられる。 従って、共役結合させられたポリエチレン鎖のペギル化されたペプチド分子中で の存在は、ペギル化されたペプチドをポリエステルまたはコポリエステルと部分 的に相容性にする。 従って、ペギル化されたペプチド中に残留するリジンまたはアルギニン残分は 弱酸の塩として生じる場合には、この相容性は、放出の制御の他の要因を加える のと同様にポリエステル−ペプチド薬塩の調製を簡易化する。また、ペプチドと 、他の水溶性ポリマー、例 えば多糖類、合成ポリペプチドおよびポリビニルピロリドンとの薬理学的に活性 の共役結合は有用であるが、しかし、前記の後者の水溶性のポリマーは、ポリエ ステルまたはコポリエステル可溶性であるかまたは相容性であるのであまり好ま しくはない。 有利に、本発明は、塩基性官能価薬理学的に活性の薬に当てはまる。しかしな がら、薬理学的に活性であり、かつ中性かまたは広くポリアニオンとして存在す る傾向があるペプチド（過剰量のカルボン酸官能価を有するポリペプチド）に当 てはめることもできる。 前記の例の第一には（この場合、酸性残分も塩基性残分も含有していない薬理 学的に活性の中性ポリペプチド）、塩基性官能価を有しかつ薬理学的に不活性で ある合成ポリペプチドおよびポリエステルの塩が使用される。薬理学的に不活性 の合成ポリペプチドおよびポリエステルまたはコポリエステルのこの種の塩は、 両親媒溶性であり、同様に、有機相中で薬理学的に活性であるが、しかし、中性 のペプチドを溶解するかまたはコロイド状に分散させる分散剤として作用するこ とができる。 前記の場合の第二には（この場合、薬理学的に活性のポリペプチドは、残留カ ルボン酸官能価を有し）、合成ポリペプチド鎖中に少なくとも２個の塩基性基を 有し、かつ薬理学的に不活性である合成ポリペプチドおよびポリエステルまたは コポリエステルの塩が使用 される。この第二の場合、合成ポリペプチドおよびポリエステルの塩の中で、該 塩中の塩基性官能基の濃度は、酸性の薬理学的に活性のペプチド中のカルボン酸 基の濃度を上廻っている。こうして、塩の中の過剰量の塩基性官能価は、酸性の 薬理学的に活性のペプチドのカルボン酸基を用いて更に塩を形成することによっ て相互作用することができる。こうして、生じた塩の錯体は、通常、ペプチドの ための全体の非溶剤は問題にされないが、しかし、ポリエステルまたはコポリエ ステルのための溶剤である有機溶剤または相中に、他のポリエステル−ペプチド 塩のための上記の方法で溶解されるかまたは分散されてもよい。 ポリエステルとの塩基性の官能価を有するペプチドおよびカルボン酸官能価を 有するコポリエステルの塩は、両親媒溶性なので、その界面活性能は、他の親水 性薬の分散液またはこの種の薬の水性懸濁液を簡易化するために、ポリエステル −ペプチド塩を含有する有機溶剤または相中で使用することができる。ペプチド と、ポリエステルまたはコポリエステルとのこの種の両親媒溶性の塩の分散剤ま たは可溶化剤としての使用は、本発明のもう１つの特徴を形成する。 本発明は、以下の実施例によって説明されるが、本発明はそれによって制限さ れるものではない。 粘度の測定および分子量を平均にされた変法に対する該粘度の関係は、Sorens enおよびCampbell、“Pr eparative Methods of Polymer Chmistry”第２版、１９６８年、Interscience Division of John Wiley、第４３〜５０頁中で検討されている。以下の本明細書 中に記載された実施例の場合、約１００秒のクロロホルムだけのための流量時間 を生じるUbbgelohde粘度計を使用した。前記のように溶剤として使用されたクロ ロホルムは、開示された組成範囲に関するベンゼン可溶性およびベンゼン不溶性 の双方のための溶剤であった。 約２０００Ｄａを上廻る分子量の前記の使用の場合に記載されたポリエステル の分子量および分子量分布を、サイズ排除クロマトグラフィーにより、ポリスチ レン標準に対して測定し、この場合、１０ｐｍのガードカラムを連続して接続し 、かつ備えたPL Gel ３×３０ｃｍ、１０μｍ混合Ｂカラム（例えば、Polymer Laboratories、Church Stretton、Shropshire、UK）を使用した。テトラヒドロ フランを、４０℃で、毎分１ｍｌの標準的な流速で溶剤として使用した。分子量 特性を、ＧＰＣソフトウエアを有するデータ アナリュシス パッケージ パー キン−エルマー(Data Analysis Package Perkin-Elmer)７７００ プロフェッシ ョナル コンピュータを用いて計算した。 ２０００Ｄａ未満の分子量の測定のためには、サイズ排除クロマトグラフィー は、分子量の測定の好ましい方法ではなく、その代わりに、非水性電位差滴定を 、 ポリエステルの分子量または当量を生じさせるために、ポリエステルまたはコポ リエステルのカルボン酸含量の直接的測定によって使用することができる。一般 に、非水性電位差滴定は、水１０ｖ／ｖ％を含有するアセトン中に溶解したポリ エステルまたはコポリエステルの周知の重量を用いて実施された。滴定を、稀釈 された水酸化ナトリウム溶液を用い、かつラジオメーター（コペンハーゲン、デ ンマーク）によって供給された装置を用いて実施した。これは、滴定器（ＴＴＴ ８０）およびオートビュレット（ＡＢＵ８０）、ＰＨメーター（ＰＨＭ８３）お よびラッセルＣＭＡＷＫ電極(Russell CMAWK electrode)からなる。滴定をサー ボグラフ（ＲＥＣ８０）にプロットし、かつポリマーの分子量は、 であり、この場合、 ｗは、使用したポリマーの分子量であり、 ｆは、ポリマー鎖１個当たりのカルボン酸基の平均数であり、 ｖは、使用した水酸化ナトリウムの容量であり、 ｎは、使用した水酸化ナトリウムの規定度である。例１ 酢酸ゴセレリン（１００．６ｍｇ、遊離塩基としてのペプチド約８６ｍｇに対 する当量）と、ポリマー鎖１個当たりに１個の末端カルボン酸基を有し、かつ４ ３０００Ｄａの重量平均分子量および０．０８ｄｌ／ｇの２５℃でクロロホルム 中で１ｗ／ｖ％での固有粘度を有し、かつベンゼン中に不溶性の５０／５０モル ％のＤ，Ｌ−ラクチド／グリコリドコポリマー（３００．３ｍｇ）とを、無水物 の遊離氷酢酸（３ｍｌ）中に溶解した。薬とポリマーとの酢酸溶液を、液体窒素 に滴下し、かつ凍結した液滴を、２４時間で高真空条件下に凍結乾燥させた。凍 結乾燥された製品を最終的に５０℃で２４時間高真空下に後乾燥させ、酢酸ゴセ レリン僅かに約２５ｗ／ｗ％（遊離塩基としてのペプチド約２２．３ｗ／ｗ％に 対する当量）を含有するポリエステル薬混合物を生じた。 乾燥したポリエステル薬混合物（４００ｍｇ）を、ジクロロメタンに添加し、 ４ｍｌに増量した。まず、混濁したコロイド混合物が得られるが、１時間経過後 に、該混合物は、次第に清澄化して清澄な溶液を形成した。該溶液を、薄膜とし て流延し、室温で約６時間乾燥させ、次に５０℃で２０時間高真空下に乾燥させ た。こうして、ポリエステル薬を含有する清澄で透明な薄膜が得られた。 （ｉ）こうして得られた清澄で透明な薄膜（１００ｍ ｇ）を溶融し、かつ８０℃で圧縮成形して、約０．０２ｃｍの厚さの透明な薄膜 を生じさせた。３７℃で２４時間水中に浸漬した場合に、水和した薬／ポリマー 薄膜の重量は、２２５ｍｇに増大した。これとは異なり、同様に処理された単独 のポリエステル（１００ｍｇ）は、１２６ｍｇだけ重量を増大し、酢酸ゴセレリ ン（２５ｍｇ）とポリマー（７５ｍｇ）との単純な混合物からなる薄膜（薬をジ クロロメタン中のポリマーの溶液に添加し、溶剤を除去し、かつ生じた材料を圧 縮成形して、約０．０２ｃｍの厚さの薄膜を生じさせることによって製造した） は、３７℃で水中で２４時間の浸漬後に１３６ｍｇだけ重量増大した。この実験 から、ポリエステル薬の塩組成物は、単独のポリエステルまたは薬とポリエステ ルとの単純な混合物よりもはるかに親水性であり、高い水吸収量を有することは 明らかである。 ジクロロメタン中の薬とポリマーとの単純な混合物の場合、該薬は、１か月後 でさえも、溶解の兆候を示さず、乾燥されかつ圧縮成形された場合、この単純な 混合物は、不透明な薄膜を生じた。しかしながら、他の実験の場合、上記により 得られた清澄で透明な薄膜（１００ｍｇ）は、ジクロロメタン（１ｍｌ）中に溶 解して、清澄で透明なポリエステル薬溶液を生じた。この溶液に、トリフルオロ 酢酸（５０μｌ）を添加し、かつ該混合物を強力に撹拌した。ゴセレリンがトリ フ ルオロ酢酸塩として直ちに沈殿した。 前記の２つの実験は、上記のようにして得られたポリエステル薬の塩を含有す る清澄で透明な薄膜が、常用の溶融ポリマー二次加工技術を用いる成形輸送系に 加工することができることを示す。更に、前記製品は、ほとんど酢酸または酢酸 塩のアニオンを含有せず、同様に該薬は、ポリエステルの塩の形で存在しなけれ ばならない。このポリエステル薬の塩は、コポリマー上の末端の乳酸またはグリ コール酸の基が、酢酸よりもはるかに強い酸であり、同様に弱い酢酸がポリマー によって代替されているので発生する。ジクロロメタン可溶性ポリエステル薬の 塩中のポリマーのカルボン酸は、交互に、極めて強力なカルボン酸、例えばトリ フルオロ酢酸によって代替されうる。このことが生じる場合、ペプチドのトリフ ルオロ酢酸塩が形成され、これは、ジクロロメタン中に不溶性であるので沈殿し なかった。 （ｉｉ）ポリエステル薬の塩が含有されている上記のようにして得られた清澄で 透明な薄膜（５０ｍｇ）を、成形して、約０．０２ｃｍの厚さの薄膜を生じた。 該薄膜を、燐酸塩で緩衝した塩水（アゾ化ナトリウム０．０２％を含有する）中 、ｐＨ７．４および３７℃で恒温保持し、緩衝溶液を、放出されたゴセレリンの 量を測定するためにＵＶよって周期的に評価した。連続的に約２週間を超えて３ 週間までにはゴセレリンを放出 した成形製品は、ほとんど完全に崩壊し、培養液(incubation medium)から姿を 消してしまった。 この実験は、短時間の間隔で薬の輸送のための極めて低い分子量のベンゼン不 溶性ポリマーの有用性を実証する。 同様に成形された調製物は、酢酸ゴセレリンの代わりに、天然に生じる性腺刺 激ホルモン放出ホルモンまたは性腺刺激ホルモン放出ホルモンの他の高い能力を 有する（アゴニストまたはアンタゴニストの）合成の類縁物、例えばトリプトレ リン、ロイプロレイン、ブセレリンおよびナファレリンを、有利には、酢酸塩ま たは他の弱酸との塩として使用して製造することができるか；または完全な性腺 刺激ホルモンまたは性腺刺激ホルモンサブユニットの分泌物を制御する任意の他 のポリペプチドホルモンを使用して製造することができる。例２ 上記例１中で得られた清澄で透明な薄膜製品（１００ｍｇ）と、１２１０００ Ｄａの重量平均分子量および０．８４ｄｌ／ｇの２５℃でクロロホルム中で１ｗ ／ｖ％での固有粘度を有し、かつベンゼン中に不溶性の５０／５０モル％のＤ， Ｌ−ラクチド／グリコリドコポリマー（１．０５ｍｇ）とをジクロロメタン（１ ００ｍｌ）中に溶解した。この溶液を、毎分１０００回転（ｒｐｍ）で強力に撹 拌し、シリコーン油（５０ ｍｌ）を１時間で緩徐に添加し、ポリエステル薬の塩と遊離ポリエステルの双方 を沈殿させた。１時間後に、部分的に沈殿したポリエステル薬の塩、遊離ポリエ ステル、シリコーン油およびジクロロメタンを、強力に撹拌されたヘキサン（２ リットル）に添加し、ポリエステル薬の塩および遊離ポリエステルの微粒子を硬 化させた。この混合物を２時間撹拌し、次に沈降させ、ヘキサン層を廃棄した。 この微粒子（遊離塩基としてのゴセレリン約１．９５ｗ／ｗ％を含有する）を、 新しいヘキサン（５００ｍｌ）で３回洗浄し、最終的に、濾別しかつ３５℃で２ ４時間高真空下に乾燥させた。遊離ポリマー中のポリエステル薬の溶液からなる こうして得られたほぼ球形の微粒子の平均寸法は、約３０μｍであった。 この製品の一部分（２５０ｍｇ）を、燐酸塩で緩衝された塩水（アゾ化ナトリ ウム０．０２％を含有する）中、ｐＨ７．４および３７℃で恒温保持し、かつ該 緩衝溶液を、放出されたゴセレリンの量を測定するためにＵＶによって周期的に 評価した。約５週間を超えて７週間までには薬を放出した微粒子は、培養液から ほとんど姿を消してしまった。 この実験で使用されたポリマー組成物は、同じラクチド／グリコリド組成物の ２つのコポリマーの混合物であるが、しかしこの場合、大きく異なる分子量を有 し、本明細書に記載されたような混合物と同様に、ベ ンゼン中に不溶性であり、１０８０００Ｄａの重量平均分子量、５．１の多分散 度および０．７２ｄｌ／ｇの２５℃でクロロホルム中で１ｗ／ｖ％での固有粘度 を有していた。 前記の実験は、５〜７週間の相対的に短い期間に亘るゴセレリンの放出につい ての高い分子量および高い多分散度を有するベンゼン不溶性ポリエステルの有用 性を示す。 同様に微粒子調製物は、酢酸ゴセレリンの代わりに、天然に生じる性腺刺激ホ ルモン放出ホルモンの類縁物または性腺刺激ホルモン放出ホルモンの他の高い能 力を有する（アゴニストまたはアンタゴニストの）合成の類縁物、例えばトリプ トレリン、ロイプロレイン、ブセレリンおよびナファレリンを、有利には、酢酸 塩または他の弱酸との塩として使用して製造することができるか；または完全な 性腺刺激ホルモンまたは個々の性腺刺激ホルモンサブユニットの分泌物を制御す るかまたは変性する任意の他のポリペプチドホルモンを使用して製造することが できる。例３ 酢酸ゴセレリン（１０１ｍｇ、遊離塩基としてのゴセレリンの約８６ｍｇに対 する当量）と、ベンゼン中に可溶性であり、約５４００Ｄａの重量平均分子量、 ０．０８ｄｌ／ｇの２５℃でクロロホルム中で１ｗ／ｖ％での固有粘度および１ ．８の多分散度を有する１ ００モル％のポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）（２９９．７ｍｇ）とを、無水物の遊離氷酢 酸（４ｍｌ）中に溶解した。ゴセレリンとポリエステルとのこの酢酸溶液を、液 体窒素に滴下し、かつ凍結した液滴を単離し、真空下に２４時間で凍結乾燥させ 、次に５５℃で２４時間高真空下に乾燥させた。 （ｉ）生じた乾燥製品を、ジクロロメタン（４ｍｌ）に添加し、混濁した混合物 を最初に生じさせ、迅速に溶解して、清澄な溶液を生じさせ、０．２μｍのナイ ロンの滅菌フィルターを通して濾過した。 この実験は、ポリエステルの有機溶液中の単純な薬の塩の混合物または分散液 とは異なり、ゴセレリンのポリエステル塩の溶液が滅菌濾過できることを示す。 （ｉｉ）トリフルオロ酢酸（５０μｌ）を、上記（ｉ）からの清澄なジクロロメ タン溶液（１ｍｌ）に強力に撹拌しながら添加した。ゴセレリンがそのトリフル オロ酢酸塩として直ちに沈殿し、この場合、ゴセレリンは、ジクロロメタン溶液 中にカルボキシ末端のポリエステルとの塩として存在していたことを示す。 同様に滅菌溶液調製物は、酢酸ゴセレリンの代わりに、天然に生じる性腺刺激 ホルモン放出ホルモンまたは性腺刺激ホルモン放出ホルモンの他の高い能力を有 する（アゴニストまたはアンタゴニストの）合成の類縁物、例えばトリプトレリ ン、ロイプロレイン、ブセレリンおよびナファレリンを、有利には、酢酸塩また は他の弱酸との塩として使用して製造することができるか；または完全な性腺刺 激ホルモンまたは個々の性腺刺激ホルモンサブユニットの分泌物を制御するかま たは変性する任意の他のポリペプチドホルモンを使用して製造することができる 。例４ 例３中で得られたゴセレリン−ポリエステルのジクロロメタン溶液（２ｍｌ） を、更にジクロロメタンで稀釈し、１０ｍｌに増量した。この溶液を、強力に撹 拌されたヘキサン（１リットル）中に噴霧して、単離しかつ真空下に４５℃で２ ４時間乾燥させた後、約２μｍ〜約３０μｍの寸法の範囲、約１０μｍの平均寸 法を有する微粒子を生じた。前記の微粒子のゴセレリン含量は、遊離塩基として の約２２％に対する当量であった。 前記微粒子を、燐酸塩で緩衝して３７℃でｐＨ７．４にされた塩水中で恒温保 持し、上清を、ゴセレリンについてＵＶによって周期的に評価した。ゴセレリン は連続的に放出され、放出は、約８週間までに本質的に完結し、１１時間までに は微粒子は、全体的に崩壊し、培養液から姿を消してしまった。この実験は、約 ２か月に亘る連続的なペプチド放出が得られる極めて低い分子量のベンゼン可溶 性ポリエステルの有用性を示す。 上記の実験中の酢酸ゴセレリンが、トリフルオロ酢 酸によって代替される場合、清澄な溶液は得られないが、その代わり、ジクロロ メタン中のポリエステル溶液は、本質的にゴセレリントリフルオロ酢酸の分散液 を含有する。この混合物は、０．２μｍのフィルターを通過しないし同様に滅菌 濾過することができず；このようなポリエステル溶液中のゴセレリントリフルオ ロ酢酸の分散液を、撹拌されたヘキサン中に噴霧した場合には、微粒子よりもむ しろ凝結させかつ凝集させた物質が生じた。 従って、ゴセレリン−ポリエステル塩は、極めて低い分子量のポリマーの溶液 中の単純な塩の混合物よりも、はるかに容易に微粒子形中に調製する性質を有す る。 同様の微粒子調製物は、酢酸ゴセレリンの代わりに、天然に生じる性腺刺激ホ ルモン放出ホルモンまたは性腺刺激ホルモン放出ホルモンの他の高い能力を有す る（アゴニストまたはアンタゴニストの）合成の類縁物、例えばトリプトレリン 、ロイプロレイン、ブセレリンおよびナファレリンを、有利には、酢酸塩または 他の弱酸との塩として使用して製造することができるか；または完全な性腺刺激 ホルモンまたは個々の性腺刺激ホルモンサブユニットの分泌物を制御するかまた は変性する任意の他のポリペプチドホルモンを使用して製造することができる。例５ 酢酸ゴセレリン（３０４ｍｇ、遊離塩基としてのゴセレリンの約２４８ｍｇに 対する当量）と、約５４００の重量平均分子量、０．０８ｄｌ／ｇの２５℃でク ロロホルム中で１ｗ／ｖ％での固有粘度および１．８の多分散度を有する１００ モル％のポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）１０２ｍｇ）を、無水物の遊離氷酢酸（２ｍｌ） 中に溶解した。次にゴセレリンとポリエステルとの酢酸溶液を、液体窒素に滴下 し、かつ凍結した液滴を単離し、高真空下に２４時間で凍結乾燥させ、次に真空 下に５５℃で２４時間乾燥させた。 生じた製品をジクロロメタン（２ｍｌ）に添加し、全体的に清澄でなかった混 濁したコロイド混合物を次第に生じた。ジクロロメタン中のこの混合物は、本質 的に、ゴセレリン−ポリエステル中の酢酸ゴセレリンの分散液からなっていた。 ポリエステル−ゴセレリンの塩化メチレン溶液中の酢酸ゴセレリンの分散液を 、遊離塩基としての約７２ｗ／ｗ％に対する当量のゴセレリンを含有する微粒子 形の中に調製させ、この場合、遊離酢酸ゴセレリンは、噴霧乾燥、噴霧凝結、単 純沈降または相分離コアセルベーションによって、ゴセレリン−ポリエステル塩 の連続相の至る所に分散している。 同様に微粒子調製物は、酢酸ゴセレリンの代わりに、天然に生じる性腺刺激ホ ルモン放出ホルモンまたは性腺刺激ホルモン放出ホルモンの他の高い能力を有す る （アゴニストまたはアンタゴニストの）合成の類縁物、例えばトリプトレリン、 ロイプロレイン、ブセレリンおよびナファレリンを、有利には、酢酸塩または他 の弱酸との塩として使用して製造することができるか；または完全な性腺刺激ホ ルモンまたは個々の性腺刺激ホルモンサブユニットの分泌物を制御するかまたは 変性する任意の他のポリペプチドホルモンを使用して製造することができる。例６ Ｄ，Ｌ−乳酸７８％およびグリコール酸２２％のモル組成を有するＤ，Ｌ−乳 酸およびグリコール酸のコポリエステルを、２個のヒドロキシ酸の共重縮合によ って製造した。コポリエステルの沈殿のためのメタノールへのアセトン中のコポ リエステルの溶液の添加および沈殿した材料を分離および乾燥による該コポリマ ーの精製後に、該コポリエステルは、約１１０００Ｄａの重量平均分子量、６１ ００Ｄａの数平均分子量（非水性の電位鎖滴定によって測定され、かつそれぞれ のコポリエステル鎖が１個だけの末端カルボン酸基を有することを評価するもの ）、従って、１．６の多分散度および０．１５ｄｌ／ｇの２５℃でクロロホルム 中で１ｗ／ｖ％での固有粘度を有していた。 酢酸ゴセレリン（２２８．９ｍｇ、遊離塩基としてのゴセレリンの約２００ｍ ｇに対する当量）と、上記のコポリエステル（１．８ｇ）とを、無水物の遊離氷 酢酸（１０ｍｌ）中に溶解した。こうして得られたゴセレリン−ポリエステル溶 液を、液体窒素に滴下し、かつ凍結した液滴を単離し、２４時間で凍結乾燥させ 、次に最終的に、５０℃で２４時間真空下に乾燥させた。 乾燥したゴセレリン−ポリエステル混合物を、ジクロロメタン（１０ｍｌ）に 添加し、まず、混濁したコロイド混合物が生じたが、２４時間後に該混合物は、 ０．２μｍのナイロンの滅菌フィルターを通して濾過することができた清澄な溶 液に変化した。 トリフルオロ酢酸を、この清澄な溶液の小さなアリコートに添加し、ゴセレリ ンがそのトリフルオロ酢酸塩として直ちに沈殿し、この場合、清澄で透明なジク ロロメタン溶液中に、ゴセレリン−ポリエステル混合物中のゴセレリンは、大部 分または全てがポリエステルとの塩として存在していたことを示す。 ゴセレリン−エステル塩のジクロロメタン溶液を乾燥するまで蒸発させ、生じ た固体を室温で６時間乾燥させ、次に５５℃で２０時間真空下に乾燥させて、ゴ セレリン−ポリエステル塩を含有する清澄な流延薄膜を生じた。 上記のようにして得られた乾燥したゴセレリン−ポリエステル混合物（１ｇ） を、ジクロロメタン８ｍｌ中に溶解した。生じた溶液を、２５０ｍｌの多口型丸 底フラスコ中に入れ、窒素の流れで一掃して全ての空気を除去し、二酸化炭素を 含有しない雰囲気を生じさ せた。予め脱ガスして全ての二酸化炭素を除去し、次に二酸化炭素を含有しない で窒素を供給された水（９０ｍｌ）をフラスコの中に導入し、かつ該混合物を本 質的に二酸化炭素を含有していない雰囲気下に約５００ｒｐｍで強力に撹拌した 。ゴセレリン−ポリエステル塩のジクロロメタン溶液を迅速に拡散させ、安定性 の水中油（薬−ポリマーの塩のジクロロメタン溶液）形分散液を生じた。約２０ ０ｒｐｍで撹拌し続ける間、次第に真空に引き、かつジクロロメタンのばら荷を 真空下で蒸発させ、水中のゴセレリン−ポリエステルの塩の分散液を生じた。こ の分散液を凍結乾燥して、ゴセレリンが約２０ｐｍの平均粒度を有するゴセレリ ン−ポリエステルの塩として存在する微粒子を生じ、該微粒子は、燐酸塩で緩衝 して３７℃でＰＨ７．４にされた塩水中で恒温保持し、上清をゴセレリンについ てＵＶによって周期的に評価した場合、ゴセレリンを約６週間に亘って放出する ことを示した。 また、同様に微粒子を、マンニトールのようなポリペプチドの安定性を向上さ せることが知られている水相助剤中に組み込むことによって製造してもよい。二 酸化炭素を含有しない雰囲気中で上記方法を実施することは好ましいが、それで もやはり、二酸化炭素の痕跡の存在下に十分な結果を達成することも可能であり 、この場合、ポリエステルの分子量および薬負荷量に左右される。 同様に滅菌された溶液、流延薄膜および微粒子の調製物を、同様の方法で、酢 酸ゴセレリンの代わりに、性腺刺激ホルモン放出ホルモンの天然の類縁物または 他の高い能力を有する（アゴニストまたはアンタゴニストの）合成の類縁物、例 えばトリプトレリン、ロイプロレイン、ブセレリンおよびナファレリンを、有利 には、酢酸塩または他の弱酸との塩として使用して製造することができるか；ま たは完全な性腺刺激ホルモンまたは個々の性腺刺激ホルモンサブユニットの分泌 物を制御するかまたは変性することができる任意の他のポリペプチドホルモンを 使用して製造することができる。例７ 例５中に記載された手順を繰り返して、清澄で透明な薄膜を生じさせ、この薄 膜（１ｇ）を、ジクロロメタン（４ｍｌ）中に溶解した。この溶液を約３５℃に 昇温させ、次に水（１００μｌ）中の精製されたゼラチンの水溶液を、約４０℃ で、ゴセレリン−ポリエステル塩のジクロロメタン溶液に添加し、該混合物を３ ５℃で強力に撹拌して、ゴセレリン−ポリエステル塩のジクロロメタン溶液中の ゼラチン水溶液の極端に微細な分散液を生じた。室温に冷却する際に、懸濁液の コロイドの性質を維持していた。 この実験は、ゴセレリン−ポリエステル塩が界面活性の性質を有し、他の水溶 性の薬剤、例えばゼラチン、 多糖類および他の親水性ポリマーの水溶液の油相中、例えばジクロロメタン中に 安定性の分散液を生じさせるために使用することができるかまたはその反対を示 す。 例６中に記載された方法を繰り返して、上記のゴセレリン−ポリエステル塩の ジクロロメタン溶液中の水性ゼラチンの分散液を使用して、ゼラチンおよびゴセ レリン−ポリエステル塩の双方を含有するマイクロカプセル製品を生じた。 他の低分子量の化合物を、水性ポリマー相中に組み込んでもよい。特に、ペプ チドの安定性を向上させることが知られているマンニトールのような化合物を包 含することはしばしば有用である。また、前記安定剤を、ゴセレリン−ポリエス テル塩のジクロロメタン溶液中に分散した水性ゼラチンからなる複合水中油中水 形分散液と、更に水中に分散している生じた油中水形分散液との双方の水相中に 組み込んでもよい。 同様に懸濁液および微粒子調製物を、同様に酢酸ゴセレリンの代わりに、性腺 刺激ホルモン放出ホルモンの他の高い能力を有する（アゴニストまたはアンタゴ ニストの）類縁物、例えばトリプトレリン、ロイプロレイン、ブセレリンおよび ナファレリンを、有利には、酢酸塩または他の弱酸との塩として使用して製造す ることができるか；または完全な性腺刺激ホルモンまたは個々の性腺刺激ホルモ ンサブユニットの分泌物を制 御するかまたは変性することができる任意の他のポリペプチドホルモンを使用し て製造することができる。例８ 酢酸ゴセレリン（７７１ｍｇ、遊離塩基としてのゴセレリンの約６７０ｍｇに 対する当量）、約３６００Ｄａの重量平均分子量および０．０８ｄｌ／ｇの２５ ℃でクロロホルム中で１ｗ／ｖ％での固有粘度を有する９５／５モルのＤ，Ｌ− ラクチド／グリコリドコポリマー（１．８ｇ）と、約１５０００Ｄａの重量平均 分子量および０．１７ｄｌ／ｇの２５℃でクロロホルム中で１ｗ／ｖ％での固有 粘度を有する９５／５モルのＤ，Ｌ−ラクチド／グリコリドコポリマー（４．２ ｇ）とを、無水物の遊離氷酢酸（７０ｍｌ）中に溶解した。合わせたポリマーは 、約１２３００Ｄａの重量平均分子量および約２．６の多分散度を有していた。 ゴセレリン−ポリエステル溶液を、液体窒素に滴下し、かつ凍結した液滴を単離 し、高真空下に１８時間で凍結乾燥させた。薬−ポリマー混合物の製品を、最終 的に５５℃で２４時間で高真空下に乾燥させた。 乾燥した薬−ポリマー混合物（６ｇ）を、ジクロロメタン（６０ｍｌ）に添加 し、まず、混濁したコロイド混合物を生じ、該混合物は、１時間経過後に、次第 に清澄化してジクロロメタン中のゴセレリン−ポリエステル塩の清澄な溶液を生 じた。 この溶液を、６０℃の入口温度および３５℃の出口 温度を用いるブチ(Buchi)噴霧乾燥器を用いて、噴霧乾燥して、直径約１μｍ〜 約１０μｍのほぼ球形の微粒子を生じさせた。 この微粒子中で、薬は、酢酸含量が、遊離酸またはアニオンとして、ゴセレリ ンがその酢酸塩として存在している場合に必要とされるような０．６〜０．７％ の代わりに０．０６％以下であるので、本質的に完全にゴセレリン−ポリエステ ル塩として存在する。 この微粒子は、８０℃で圧縮成形によって更に加工した場合には、清澄で透明 でかつ脆い薄膜を生じた。 この実験は、低分子量および場合によっては高い多分散度のポリマーのベンゼ ン可溶性ポリエステルを用いるペプチド塩の有用性を示す。 同様に溶液、微粒子および成形された調製物を、酢酸ゴセレリンの代わりに、 天然に生じる性腺刺激ホルモン放出ホルモンまたは性腺刺激ホルモン放出ホルモ ンの他の高い能力を有する（アゴニストまたはアンタゴニストの）合成の類縁物 、例えばトリプトレリン、ロイプロレイン、ブセレリンおよびナファレリンを、 有利には、酢酸塩または他の弱酸との塩として使用して製造することができるか ；または完全な性腺刺激ホルモンまたは個々の性腺刺激ホルモンサブユニットの 分泌物を制御するかまたは変性する任意の他のポリペプチドホルモンを使用して 製造することができる。例９ 酢酸ゴセレリンおよび性腺刺激ホルモン放出ホルモンの他の高い能力を有する 合成のアゴニストを、男性の場合の前立腺癌および女性の場合の閉経前の乳癌の ようなホルモンに左右される癌の処置に使用される選択性の化学的去勢剤である 。また、この薬は、女性の場合の悪性でない婦人科の症状の処置に使用され、該 薬は、下垂体による性腺刺激ホルモンの分泌を最終的に抑制することによって作 用し、また更に性ホルモン、例えば雌のエストロゲンおよび雄のテストステロン を抑制させる。 従って、この種の薬の連続的に継続された放出を、規則的な発情周期を有する 標準的な成体の雌のラットの場合に生体内で評価することができる。この動物の 場合、発情周期は約４日であり、発情の発生は、発情の日に生じた膣の標本の中 の僅かに角質化した細胞の存在によってのみ明らかにされる。この動物がゴセレ リンのような薬によって化学的に去勢されている場合には、発情は生じず、この 場合、膣の標本の中に角質化した細胞の欠如を生じる。この動物たちは、化学的 去勢によって誘発された延長された発情静止期に入り、発情静止期は、薬の有効 量が放出されるのと同じ長さで維持される。 （ｉ） 例８中で得られた微粒子（４５０ｍｇ）を、ナトリウムカルボキシメチルセル ロース２ｗ／ｖ％およびポ リソルベート８０ ０．２ｗ／ｖ％を含有する水の中に分散させ、かつ水で３ｍ ｌに増量した。０．２ｍｌ（遊離塩基としてのゴセレリンの約３ｍｇに対する当 量）を、規則的な周期を示す１０匹の標準的な成体の雌のラットに皮下注射し、 その後の発情周期に対する作用を、膣の標本の顕微鏡検査によって測定した。こ の動物たちは、９５±３日間継続する化学的去勢である発情静止期の連続段階に 入った。 この実験は、低分子量のベンゼン可溶性ポリエステルを基礎とするゴセレリン −ポリエステル塩の水性懸濁液の調製物が、僅か４〜６時間の代謝半減期を有す るペプチド薬の約３か月の制御された放出の相対的に長い期間を提供することを 示す。 （ｉｉ）例８中で得られた微粒子（４５０ｍｇ）を、オレイン酸エチルの中に分 散させ、かつ３ｍｌに増量した。再度、調製物の０．２ｍｌを、規則的な周期を 示す（６匹）の雌のラットに皮下注射によって投与した。この動物たちは、８１ ±３日間継続する発情静止期の連続段階に入った。 この実験は、ポリエステルだけには不溶性である有機注射用ビヒクル中のゴセ レリン−ポリエステル塩の溶液調製物が、制御されたペプチド薬の放出の相対的 に長い期間を提供することを示す。例１０ 酢酸ロイプロレリン（５０．３ｍｇ）と、上記例６中 に記載された７８モル％のＤ，Ｌ−酪酸および２２モル％のグリコール酸からな るコポリエステル（４５３．２ｍｇ）とを、無水物の遊離氷酢酸（５ｍｌ）中に 溶解した。生じた溶液を、液体窒素に滴下し、かつ凍結した液滴を、高真空下に ２２時間で凍結乾燥させ、次に更に、５５℃で２４時間で高真空下に乾燥させた 。 生じた製品（５００ｍｇ）を、１００ｍｌの丸底フラスコ中の再蒸留したアセ トン（１０ｍｌ）中に溶解させ、まず、混濁したコロイド混合物を生じ、該混合 物は、次第に清澄化して透明な溶液になった。このアセトンを真空下に蒸発させ 、かつ生じた清澄な薄膜を、５５℃で４時間高真空下に乾燥させた。ロイプロレ リン−ポリエステル塩の前記の薄膜を、アセトン（１０ｍｌ）中に再溶解し、該 溶液を脱ガスし、次に窒素で一掃した。 新たに蒸留した水（２００ｍｌ）を窒素雰囲気下に強力に撹拌し、ロイプロレ リン−ポリエステル塩のアセトン溶液を、撹拌された水の表面に噴霧した。全て のアセトン溶液を噴霧した場合、撹拌を更に１時間続け、次に該混合物を沈降さ せた。ロイプロレリン−ポリエステル塩の微粒子が沈降し、かつ水性上清を廃棄 した。該微粒子を、二酸化炭素不含の水の更に少量（~２００ｍｌ）中に再懸濁 し、該懸濁液を窒素雰囲気下に更に１時間撹拌した。この微粒子を、まず、混合 物を沈降させ、水層を傾瀉し、次に残分を濾過して 過剰量の水から微粒子を分離することによって分離した。この微粒子を位、３０ ℃で２４時間高真空下に乾燥させて、約１５μｍの平均粒度を有する製品を生じ た。 ロイプロレリン−ポリエステル塩の前記の微粒子調製物を、燐酸塩で緩衝して ３７℃でＰＨ７．４にされた塩水中で恒温保持し、かつ上清を、ロイプロレリン についてＵＶによって周期的に評価した。ロイプロレリンを、調製物が全体的に 崩壊するまでの時間、約５週間連続的に放出した。 同様に微粒子調製物を、ロイプロレリンの代わりに、天然に生じる性腺刺激ホ ルモン放出ホルモンまたは性腺刺激ホルモン放出ホルモンの他の高い能力を有す る（アゴニストまたはアンタゴニストの）合成の類縁物、例えばトリプトレリン 、ゴセレリン、ブセレリンおよびナファレリンを、有利には、酢酸塩または他の 弱酸との塩として使用して製造することができるか；または完全な性腺刺激ホル モンまたは個々の性腺刺激ホルモンサブユニットの分泌物を制御する任意の他の ポリペプチドホルモンを使用して製造することができる。例１１ ｉ）酢酸ゴセレリン（２．２８ｇ、遊離塩基としてのゴセレリンの約２．００ｇ に対する当量）を、無水物の遊離氷酢酸（６０ｍｌ）中に溶解した。２成分系の ９５／５モル％のポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）／（ポリグリ コール酸）コポリマー（１５８４６の重量平均分子量および１．３８の多分散度 を有するコポリマー１２．６ｇおよび３８９６の重量平均分子量および１．７８ の多分散度を有するコポリマー５．４ｇ）の混合物（従ってこの場合、塩基性薬 に関してコポリマーのカルボン酸末端基の過剰量が得られる）を、撹拌しながら 無水物の遊離氷酢酸（１５０ｍｌ）中に溶解して、清澄な溶液を生じた。この薬 溶液をコポリマー溶液に添加し、完全に混合した。次にこの混合物を、液体窒素 に滴下して凍結させ、小さなビーズ状物にし、固体材料を、エドワーズ ハイ バキューム フリーズドライヤー(Edwards high vacuum freeze drier)を用いて ２日間で凍結乾燥させた。更に、乾燥した材料を、５０〜５５℃で真空炉中で２ ４時間で乾燥させた。 この乾燥された製品（１００ｍｇ）を、ジクロロメタン（１ｍｌ）に添加し、 かつ全部で２時間で溶解して、清澄な溶液を生じた。ポリエステル−ゴセレリン 塩の組成物が、薬に、該薬が非極性溶剤中に溶解できるような良好な可溶性を付 与することがこの実施例によって示されている。 ｉｉ）酢酸ゴセレリン（２．２８ｇ、遊離塩基としてのゴセレリンの約２．００ ｇに対する当量）を、無水物の遊離氷酢酸（６０ｍｌ）中に溶解した。２成分系 の１００モル％のポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）ポリマー（重量平均分子量１５１７８お よび１．２７の多分散度を 有するポリマー１２．６ｇおよび重量平均分子量４２０４および１．８４の多分 散度を有するポリマー５．４ｇ）の混合物（従ってこの場合、塩基性薬に関して コポリマーのカルボン酸末端基の過剰量が得られる）を、撹拌しながら無水物の 遊離氷酢酸（１５０ｍｌ）中に溶解して、清澄な溶液を生じた。該薬溶液を、ポ リマー溶液に添加し、入念に混合し、次にこの混合物を、液体窒素に滴下して凍 結させ、小さなビーズ状物にした。この固体材料を、エドワーズ ハイ バキュ ーム フリーズ ドライヤーを用いて２日間で凍結乾燥させ、更に、乾燥した材 料を、５０〜５５℃で真空炉中で２４時間で乾燥させた。 この乾燥された製品（１００ｍｇ）を、ジクロロメタン（１ｍｌ）に添加し、 かつ全部で２時間で溶解して、清澄な溶液を生じた。ポリエステル−ゴセレリン 塩の組成物が、薬に、該薬が非極性溶剤中に溶解できるような良好な可溶性を付 与することがこの実施例によって示されている。 ｉｉｉ）酢酸ゴセレリン（２．２８ｇ、遊離塩基としてのゴセレリンの約２．０ ０ｇに対する当量）を、無水物の遊離氷酢酸（６０ｍｌ）中に溶解した。８０／ ２０モル％のポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸／（ポリグリコール酸）コポリマー（重量平均 分子量１０６５１０および２．２７の多分散度を有するコポリマーの１２．６ｇ ）と、９５／５モル％のポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）／（ポリ グリコール酸）コポリマー（重量平均分子量３８９６および１．７８の多分散度 を有するコポリマーの５．４ｇ）との混合物（従ってこの場合、塩基性薬に関し てコポリマーのカルボン酸末端基の過剰量が得られる）を、撹拌しながら無水物 の遊離氷酢酸（１５０ｍｌ）中に溶解して、清澄な溶液を生じた。該薬溶液を、 コポリマー溶液に添加し、かつ入念に混合した。次にこの混合物を、液体窒素に 滴下して凍結させ、小さなビーズ状物にし、この固体材料を、エドワーズ ハイ バキューム フリーズ ドライヤーを用いて２日間で凍結乾燥させ、更に、乾 燥した材料を、５０〜５５℃で真空炉中で２４時間で乾燥させた。 この乾燥された製品（１００ｍｇ）を、ジクロロメタン（１ｍｌ）に添加し、 かつ全部で２時間で溶解して、清澄な溶液を生じた。ポリエステル−ゴセレリン 塩の組成物が、薬に、該薬が非極性溶剤中に溶解できるような良好な可溶性を付 与すること尾がこの実施例によって示されている。 ｉｖ）酢酸ゴセレリン（２．１７ｇ、遊離塩基としてのゴセレリンの約１．９０ ｇに体する当量）を、無水物の遊離氷酢酸（６０ｍｌ）中に溶解した。２成分系 の６７／３３モル％のポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）／（ポリグリコール酸コポリマー（ ３５８３３の重量平均分子量および１．８３の多分散度を有するコポリマー１２ ．０ｇおよび４．１１６の重量平均分子量および１．８ ６の多分散度を有するポリマー５．１５ｇ）の混合物（従ってこの場合、塩基性 薬に関してポリマーのカルボン酸末端基の過剰量が得られる）を、撹拌しながら 、無水物の遊離氷酢酸（１５０ｍｌ）中に溶解して、清澄な溶液を生じた。該薬 溶液を、コポリマー溶液に添加し、かつ入念に混合した。次にこの混合物を、液 体窒素に滴下して凍結させ、小さなビーズ状物にした。この固体材料を、エドワ ーズ ハイ バキューム フリーズ ドライヤーを用いて２日間で凍結乾燥させ 、更に、乾燥した材料を、５０〜５５℃で真空炉中で２４時間で乾燥させた。比較例 ゴセレリンアセテート（２．２８ｇ、遊離塩基としてのゴセレリン約２．００ ｇと等量）を無水物不含の氷酢酸（６０ｍｌ）に溶解した。５０／５０モル％の ポリ（Ｄ，Ｌ−酪酸）／（ポリグリコール酸）コポリマー（重量平均分子量２２ ３０７および多分散度２．０７を有するポリマー１８．０ｇ、したがってこの場 合には、塩基性薬に対してコポリマーカルボン酸末端基のほぼ化学量論的当量を 生じる）を攪拌しながら無水物不含の氷酢酸（１５０ｍｌ）に溶解し、澄明な溶 液を生じた。この薬溶液をコポリマー溶液に添加し、十分に混合した。次に、こ の混合物を液体窒素に滴加し、小さいビーズ状物として凍結乾燥した。この固体 物質をエドワーズ(Edwards)高真空凍結乾燥器を使用することにより２日間凍結 乾燥し、さらにこの乾燥した物質を真空炉中で５０〜５５℃で２４時間乾燥した 。 この乾燥した生成物（１００ｍｇ）をジクロロメタン（１ｍｌ）に添加し、４ 時間後に全部は溶解しなかったが、しかし強制的に溶解させ、４日後に澄明な溶 液を形成させた。本例の場合には、ポリエステル−ゴセレリン塩を非極性溶剤に 溶解することができるような程度に薬の下で良好な溶解性を与えるために、ポリ エステル−ゴセレリン塩の形成は、コポリマーカルボン酸末端基が塩基性薬に対 して過剰量で存在する場合に直ちに発生することが示されている。 乾燥した生成物ｉ−ｉｖをジクロロメタンに溶解し、次表に示されているよう に、ブチ（Buchi）１９０ ラブスケール（lab scale）噴霧乾燥器を使用するこ とにより噴霧乾燥した： 生成物ｉ〜ｉｖを噴霧乾燥することにより、走査電子顕微鏡によって測定され たように約１〜１０μｍの直径を有する小さい粒子を生じた。最終的な粒子を約 ０．０３％の検出限界を有するガスクロマトグラフィー検定を使用することによ り酢酸含量について検定した。この検定を使用することにより、この配合物中に は酢酸は存在しないことが測定され、このことにより、薬はポリエステル塩とし て存在し、酢酸塩としては存在しないことが証明され、それというのも約０．５ ％の酢酸濃度は酢酸塩について予想されるものであるからである。 上記の噴霧乾燥した粒子（５０ｍｇ）をジクロロメ タン（０．５ｍｌ）に溶解し、澄明な溶液を生じた。１滴のトリフルオロ酢酸を それぞれの溶液に添加し、この結果そのつど白色の沈殿物を形成させた。試料を 遠心分離し、沈殿物を捕集し、この沈殿物をジクロロメタンで洗浄した。ＨＰＬ Ｃ分析により、沈殿した物質はゴセレリンであることが判明した。本例は、強酸 の添加により薬を非極性溶剤中の溶液の薬−ポリエステル塩によって代替するこ とができ、このことにより、非極性溶剤中の薬の溶解性をペプチド薬の酸塩の予 想される溶解性に戻すことができることを示す（即ち、非可溶性）。例１２ 例１１中の噴霧乾燥した粒子ｉ〜ｉｖを注射に適当な水性ビヒクル（ナトリウ ムカルボキシメチルセルロース２％［フルカ（Fluka）、中位の粘度］、ポリソ ルベート（polysorbate）８０ ０．２％［トウィーン（Tween）（登録商標）、 フルカ］）中に分散させた（１８ｗ／ｖ ％）。 上記の注射用ビヒクル中に分散させた例１１からの噴霧乾燥した粒子を１０匹 の雌のウィスタル（Wistar）産のラットに注射した。血液試料を７日目、１４日 目および２８日目に５匹のラットの尾から採取し、これらの試料をラジオイムノ アッセイを使用することにより薬に対して知られた特異性でゴセレリンについて 検定し、かつ代謝物に対する異種反応性が欠如している ことを証明した。 この実験の結果により、この配合物は、少なくとも４週間でゴセレリンの測定 可能な血液濃度を達成することが判明した。例１３ 例１１の噴霧乾燥した生成物ｉｉを次の注射用の水性ビヒクル中に分散させた 。 ａ．ナトリウムカルボキシメチルセルロース（中位の粘度、フルカ（Fluka）） １．０％およびポリソルベート（polysorbate）８０ （トウィーン（Tween）） ０．７５％。 ｂ．メチルセルロース（１５ｍＰａ．ｓ、フルカ（Fluka））０．７５％および ポリソルベート（polysorbate）８０（トウィーン（Tween））０．７５％。例１４ 例１１の噴霧乾燥した生成物ｉｉ（４００ｍｇ）をジクロロメタン（４ｍｌ） に溶解した。この溶液を注射器を用いて、２５００ｒｐｍで攪拌した水中のポリ ビニルアルコール（ＰＶＡ）０．２５％の溶液（アルドリッヒ（Aldrich）、加 水分解した７５％、分子量２０００）に添加した。２分後、攪拌速度を８００ｒ ｐｍに減速させ、攪拌をさらに３０分間連続させた。次に、攪拌を停止させ、形 成された粒子を沈殿させた。ＰＶＡ溶液をデカントし、次に粒子を氷で冷やした 水で２回洗浄し、かつ遠心分離によって回収した。この粒子 を最終的に凍結乾燥によって乾燥させた。最終生成物は、ゴセレリンを含有する 微粒状物質であった。例１５ 例１１の噴霧乾燥した配合物ｉｖを８２℃で押出し、直径約１ｍｍの円筒形の 押出品を生じた。この押出品を約３６ｍｇの重量を有しかつゴセレリン約３．６ ｍｇを含有する長さに切断した。この押出品は、白色の外観を有しているという よりもむしろ完全に澄明ないし明色であり、この場合この白色の外観は、ペプチ ドとポリエステルとの塩を形成することなしに生成された、薬とポリマーとの簡 単な混合物の典型的なものである（例えば、商業的に入手可能な“Zoladex”デ ポー剤（depot）、この“Zoladex”は登録商標である）。この押出品の澄明度は 、光散乱および白色の外観を生じる分離層の場合よりもむしろペプチドゴセレリ ンがポリエステル相と相容性であることを示している。この相容性は、ペプチド がポリマーと同じ相である、即ちポリエステルの塩として存在する場合にのみ起 こりうる。 １個のこのようなデポー剤３．６ｍｇを麻酔をかけた２１匹のウィスタル（Wi star）産のラットに移植した。その後の時点で３匹の動物の群を死亡させ、デポ ー剤を回収した。回収したデポー剤を容積測定用のフラスコ中の氷酢酸に溶解し 、ポリマーを過剰量の水の添加によって沈殿させた。次に、このポリマーを濾過 し （Millex ０．５μｍ）、濾液をＨＰＬＣによって薬含量について検定した。こ のデポー剤の放出プロフィールを移植せずかつ同じ検定法に包含されるデポー剤 の薬含量に関連させて計算した。この薬−ポリエステル塩のデポー剤により、少 なくとも４週間の期間で生体内のゴセレリンの確認された放出量を生じた。例１６ （ｉ）１個の末端カルボン酸基を有するラクチド／グリコリドコポリマー（９５ ／５）（８．８７ｇ、分子量＝５７５０、多分散度＝１．５、末端基の滴定によ る分子量＝２５１６ｇ／モル、クロロホルム中の１ｗ／ｖ％での固有粘度＝０． １０ｄｌ／ｇ）を攪拌しながらジクロロメタン（５０ｍｌ）に溶解した。この溶 液にゴセレリンアセテート１．１３ｇを添加し、曇った懸濁液を形成させた。メ タノール（５ｍｌ）を攪拌しながら添加した。３０分後、この混合物は完全に澄 明になった。次に、溶剤を回転蒸発によって溶液から除去し、透明な固体を留め た。この固体をジクロロメタン（５０ｍｌ）に再溶解し、溶剤を再び回転蒸発に よって除去した。再溶解工程および溶剤除去工程をさらに２回繰り返し、著しく 粘稠な液体を留め、高真空下に乾燥させ、白色のフォームを生じた。このフォー ムを破壊し、室温でさらに２４時間真空下に乾燥し、微細な無定形の固体を生じ た。 （ｉｉ）上記ｉ）に記載された方法を、１個の末端カルボ ン酸基を有するラクチド／グリコリドコポリマー（７５／２５）（８．８７ｇ、 分子量＝１０９００、多分散度＝１．８５、末端基滴定による分子量＝３２１０ ｇ／モル、クロロホルム中１ｗ／ｖ％での固有粘度＝０．１４ｄｌ／ｇ）を使用 することにより繰り返し、微細な無定形の固体を生じた。 処方物１ 上記（ｉ）からのゴセレリン−ラクチド／グリコリドポリマー塩（１ｇ）を安 息香酸ベンジル（９９％、Janssenによる、２ｍｌ）に添加し、この混合物を固 体が溶解されるまで混合物を攪拌しながら手で持ったホットエアガンを使用して 加熱した。この溶液の処方物１１０μｌは、ゴセレリン３．６ｍｇを含有してい た。 処方物２ 処方物１と同様に行なうが、しかし、溶剤は、安息香酸ベンジル６７％（９９ ％、Janssenによる）とベンジルアルコール３３％（無水物、９９％、Aldrichに よる）との混合物であった。この溶液の処方物１００μｌは、ゴセレリン３．６ ｍｇを含有していた。 処方物３ 処方物１と同様に行なうが、しかし、溶剤は、ベンジルアルコール（１．７ｍ ｌ、無水物、９９％、Ａｌｄｒｉｃｈによる）であった。この溶液の処方物１０ ０μｌは、ゴセレリン３．６ｍｇを含有していた。 処方物４ 処方物１と同様に行なうが、しかし、上記（ｉｉ）からのゴセレリン−ラクチ ド／グリコリドポリマー塩（１ｇ）および安息香酸ベンジル３ｍｌを使用した。 この溶液の処方物１５０μｌは、ゴセレリン３．６ｍｇを含有していた。 処方物５ 処方物４と同様に行なうが、しかし、処方物２の溶剤混合物を使用した。この 溶液の処方物１００μｌは、ゴセレリン３．６ｍｇを含有していた。 処方物６ 処方物４と同様に行なうが、しかし、処方物３の溶剤を使用した。この溶液の 処方物１００μｌは、ゴセレリン３．６ｍｇを含有していた。 生物学的評価 生体内での上記処方 物１〜６からのゴセレリンの放出率を、投与した雌のラットの膣の汚物を毎日調 べることによって測定した。標準の発情周期（発情期、間発情期、後続発情期、 前発情期）は、前記汚物中の種々の細胞型（白血球、上皮および角質）の割合か ら追跡することができる。処方物からの薬の放出が連続的である場合には、標準 の発情周期は、中断され、ラットは、ゴセレリンの連続的放出の長さと同様に間 発情期に留まる。 処方物１〜６をラット１匹当たりゴセレリン３．６ｍｇの投与量で規則的発情 周期の雌のラットの群（ｎ＝ ６）に投与した。２０ゲージの針を備えた注射器を処方物の皮下投与のために使 用した。投与してない５匹のラットの群を対照群として使用した。膣の汚物を毎 日ラットから採取し、動物の発情状態を測定するために検査した。得られた結果 は、次の通りであった： この結果から、６つの全処方物により６週間の過剰のゴセレリン放出の期間が 生じ、かつ処方物１および２は３カ月以上の期間でゴセレリンを放出したことを 認めることができる。更に、これらの例から、ゴセレリン−ポリエステル塩の処 方物を細いゲージを針を用いて直ちに腸管外投与することができる溶液として供 給することができ、かつこのような処方物はヒトのホルモン依存性腫瘍の治療に 有用であることを認めることができる。例１７ 処方物１ 例１６からの処方物１と同様。 処方物２ 例１６（ｉ）に記載された方法を、１個の末端カルボン酸基を有するポリアク チドホモポリマー（分子量＝５０９２、多分散度＝１．４４、末端基滴定による 分子量＝２２７０ｇ／モル）およびゴセレリンアセテート（０．４６ｇ）を使用 することにより繰り返した。この無定形の固体の酢酸含量をガスクロマトグラフ ィーによって測定し、かつ０．１４％であることを見い出した。 このゴセレリン−ラクチドポリマー塩（１ｇ）を安息香酸ベンジル（９９％、 Janssenによる、２ｍｌ）に添加し、この混合物を固体が溶解されるまで混合物 を攪拌しながら手で持ったホットエアガンを使用して加熱した。この溶液の処方 物１１０μｌは、ゴセレリン３．６ｍｇを含有していた。 処方物３ １個の末端カルボン酸基を有するラクチド／グリコリドコポリマー（９５／５ ）（７．８６ｇ、分子量＝５７５０、多分散度＝１．５０、末端基滴定による分 子量＝２５１６ｇ／モル）およびゴセレリンアセテート（０．９８ｇ）を氷酢酸 に溶解した。この溶液を液体窒素への滴加によって凍結乾燥し、引続き２日間凍 結乾燥した。次に、生じる固体を４０℃でさらに２４時間 乾燥した。この凍結乾燥した固体の酢酸含量をガスクロマトグラフィーによって 測定し、かつ０．１７％であることを見い出した。 このゴセレリン−ラクチド／グリコリドコポリマー混合物（１ｇ）を安息香酸 ベンジル（２ｍｌ、９９％、Janssenによる）に添加し、この混合物を固体が溶 解されるまで混合物を攪拌しながら手で持ったホットエアガンを使用して加熱し た。この溶液の処方物１１０μｌは、ゴセレリン３．６ｍｇを含有していた。 それ故に、ポリエステル塩としてのゴセレリン処方物は、薬の下で良好な可溶 性を与え、したがってこの処方物はゴセレリンアセテートそれ自体が溶解しない 安息香酸ベンジルのような脂肪好性溶剤に溶解されることができることを認める ことができる。 生物学的評価 処方物１〜３を、例１６の記載と同様に、ラット１匹当たりゴセレリン３．６ ｍｇの投与量で規則的発情周期の雌のラットの群（ｎ＝１０）に投与した。投与 に引続き、これらの動物はゴセレリンの連続的放出を示す連続的間発情期に入る ことが見い出された。それぞれのラット群の間発情期の平均的期間は、次表中に 記載されている。この表から、３つの全処方物により、１４週間の過剰のゴセレ リン放出期間を生じたことを認めることができる。 更に、これらの例から、ゴセレリン−ポリエステル塩の処方物を細いゲージを 針を用いて直ちに腸管外投与することができる溶液として供給することができ、 かつこのような処方物はヒトのホルモン依存性腫瘍の治療に有用であることを認 めることができる。例１８ 処方物１ １個の末端カルボン酸基を有するラクチド／グリコリドコポリマー（９５／５ ）（４．５ｇ、分子量＝６８０６、多分散度＝１．５５、末端基の滴定による分 子量＝３０２７ｇ／モル、クロロホルム中の１ｗ／ｖ％での固有粘度＝０．１０ ８ｄｌ／ｇ）を氷酢酸（５０ｍｌ）に溶解した。この溶液にゴセレリンアセテー ト（０．５６ｇ、ゴセレリン０．５ｇと等量）を添加し、この混合物を１０分間 攪拌し、澄明な無色の溶液を生じた。この溶液を液体窒素への滴加によって凍結 乾燥し、引続き２日間凍結乾燥した。次に、生じる固体を４０℃でさらに２４時 間乾燥した。この凍結乾燥した固体の酢酸含量をガスクロマトグラフィーによっ て測 定し、かつ０．３％であることを見い出した。 このゴセレリン−ラクチド／グリコリドコポリマー混合物（１．０ｇ）を安息 香酸ベンジル（２．０ｍｌ、９９％、Janssenによる）に添加し、この混合物を 加熱下に攪拌しながら溶解した。最終的溶液は、１１０μｌ中ゴセレリン３．６ ７ｍｇを含有し、最終的生成物のゴセレリン含量は、１０．０ｗ／ｖ％であった 。 処方物２ 処方物１について上記した方法を、１個の末端カルボン酸基を有するラクチド ／グリコリドコポリマー（９５／５）（４．０ｇ、分子量＝６０１１、多分散度 ＝１．５６、末端基の滴定による分子量＝２７００ｇ／モル、クロロホルム中の １ｗ／ｖ％での固有粘度＝０．０９９ｄｌ／ｇ）およびゴセレリンアセテート１ ．１２ｇ（ゴセレリン１．０ｇと等量）を使用することにより繰り返した。この 凍結乾燥した固体の酢酸含量をガスクロマトグラフィーによって測定し、かつ０ ．８３％であることを見い出し、最終的生成物のゴセレリン含量は、１９．４６ ｗ／ｗ％であった。 このゴセレリン−ラクチド／グリコリドコポリマー混合物（０．５４ｇ）を安 息香酸ベンジル（２．４６ｍｌ、９９％、Janssenによる）に添加し、この混合 物を加熱下に攪拌しながら溶解した。最終的溶液は、１１０μｌ中ゴセレリン３ ．５０ｍｇを含有していた。 処方物３ 処方物２について上記した方法を、ラクチド／グリコリドコポリマー２．１ｇ およびゴセレリンアセテート１．０ｇ（ゴセレリン０．９ｇと等量）を使用する ことにより繰り返した。この凍結乾燥した固体の酢酸含量をガスクロマトグラフ ィーによって測定し、かつ１．１４％であることを見い出し、最終的生成物のゴ セレリン含量は、２８．９１ｗ／ｗ％であった。 このゴセレリン−ラクチド／グリコリドコポリマー混合物（０．３６ｇ）を安 息香酸ベンジル（２．６４ｍｌ、９９％、Janssenによる）に添加し、この混合 物を加熱下に攪拌しながら溶解した。最終的溶液は、１１０μｌ中ゴセレリン３ ．４７ｍｇを含有していた。 処方物４ 処方物１について上記した方法を、１個の末端カルボン酸基を有するラクチド ／グリコリドコポリマー（９５／５）（８．６６ｇ、分子量＝５６０４、多分散 度＝１．７１、末端基の滴定による分子量＝１９６０ｇ／モル、クロロホルム中 の１ｗ／ｖ％での固有粘度＝０．０９４ｄｌ／ｇ）およびゴセレリンアセテート １．０８ｇ（ゴセレリン０．９６ｇと等量）を使用することにより繰り返した。 この凍結乾燥した固体の酢酸含量をガスクロマトグラフィーによって測定し、か つ０．０８％であることを見い出し、最終的生成物のゴセレリン含量は、９．９ ０ｗ／ｗ％であった。 このゴセレリン−ラクチド／グリコリドコポリマー 混合物（１．０ｇ）を安息香酸ベンジル（２．０ｍｌ、９９％、Janssenによる ）に添加し、この混合物を加熱下に攪拌しながら溶解した。最終的溶液は、１１ ０μｌ中ゴセレリン３．６７ｍｇを含有していた。 生物学的評価 処方物１〜４を、例１６の記載と同様に、ラット１匹当たりゴセレリン３．６ ｍｇの投与量で規則的発情周期の雌のラットの群（ｎ＝９または１０）に投与し た。投与に引続き、これらの動物はゴセレリンの連続的放出を示す連続的間発情 期に入ることが見い出された。それぞれのラット群の間発情期の平均的期間は、 次表中に記載されている。この表から、３つの全処方物により、約３カ月または それ以上のゴセレリン放出期間を生じたことを認めることができる。 更に、これらの例から、薬ポリエステル塩の処方物を細いゲージの針を有する 注射器を用いて直ちに腸管外投与することができる溶液として供給することがで き、かつこのような処方物はヒトのホルモン依存性腫瘍の治療に有用であること を認めることができる。例１９ 例１６のゴセレリン−ポリエステル塩（ｉｉ）（３．７５ｇ）を、先に０．４ ５μｍのフィルタを通して濾過したジクロロメタン（５０ｍｌ）に溶解した。こ の溶液を、オートクレーブを用いて滅菌したフラスコ中に０．５μｍのテフロン 製濾過膜（Whatman WTP）を通して濾過した。溶剤を回転蒸発器を用いて除去し 、粘稠な液体を生じ、次に空気を０．５μｍのフィルタを通して回転蒸発器に供 給した。粘稠な液体を加熱し、かつ真空下に乾燥し、白色のフォームを生じた。 得られたフォームを層流キャビネット中のオートクレーブ処理したクリンプトッ プで密閉したバイアル中に秤量して供給し、新しく蒸留した溶剤を添加し、本質 的に粒子を含まないゴセレリン−ポリエステルの処方物を生じた。 処方物１ 固体１ｇを安息香酸ベンジル（蒸留した、０．３ｍｂでの沸点１０６℃、３ｍ ｌ）に添加し、かつ溶解するまでホットエアガンを用いて加熱した。この溶液の 処方物１４５μｌは、ゴセレリン３．６ｍｌを含有していた。 処方物２ 固体１ｇをベンジルアルコール（蒸留した、０．３ｍ ｂでの沸点４４℃、１．７ｍｌ）に添加し、かつ溶解するまでホットエアガンを 用いて加熱した。この溶液の処方物１００μｌは、ゴセレリン３．６ｍｌを含有 していた。 １０匹の雌のラットの２つの群を、ラット１匹当たり３．６ｍｇの投与量で処方 物１および２を用いて２０ゲージの針を有する注射器を用いて皮下投与した。末 端の血液試料をその後の時点（１週間後（ｎ＝４）、４週間後および６週間後（ ｎ＝３））でラットから採取した。血液試料をラジオイムノアッセイを用いてゴ セレリンについて検定した。ゴセレリンの測定可能な血液濃度を２つの処方物を 用いて測定し、これによれば、溶液処方物は数週間で確認される薬放出量を生じ ることを示した。処方物の血液濃度のプロフィールは、約４週間でピークに達す ることが測定されたが、しかし、処方物２を用いた場合には、ピークは１週間で 起こり、その後に血液濃度は、やがて次第に減少することが測定された処方物１ の血液濃度のプロフィールは、安息香酸ベンジルを溶液処方物の溶剤として使用 する場合に得られたより一定の血液濃度に基づき処方物２の場合よりも望ましい ことが考えられる。 更に、これらの例から、薬ポリエステル塩の処方物は、細いゲージの針を有す る注射器を使用することにより直ちに腸管外投与することができる溶液として供 給することができ、かつこのような処方物は、ヒトの ホルモン依存性腫瘍の治療に有用であることを認めることができる。例２０ １個の末端カルボン酸基を有するラクチド／グリコリドコポリマー（９５／５ ）（９．０ｇ、分子量＝６０１１、多分散度＝１．５６、末端基の滴定による分 子量＝２７００ｇ／モル、クロロホルム中の１ｗ／ｖ％での固有粘度＝０．０９ ９ｄｌ／ｇ）をジクロロメタン（１００ｍｌ）に溶解した。この溶液にゴセレリ ンアセテート（１．１２４ｇ、ゴセレリン１ｇと等量）を攪拌しながら添加し、 引続きメタノール（１０ｍｌ）を添加した。得られた曇った懸濁液を、澄明な溶 液が得られるまで室温で約１時間攪拌した。溶剤を回転蒸発器を使用することに より除去し、澄明な粘稠の液体を生じた。次に、この液体をジクロロメタンに再 溶解し、かつ前記と同様に再乾燥した。この過程を２回以上繰り返し、最終的に 得られた粘稠な液体を高真空下に乾燥し、白色のフォームを得、これをさらに一 晩中真空乾燥した。フォームを破壊して微細な粉末にし、この粉末を室温で１日 間真空乾燥した。この粉末に安息香酸ベンジル（２０ｍｌ、９９％、Janssenに よる）を添加し、生じる混合物を攪拌しながら温和に加熱し、溶液を得た。 生物学的評価 このゴセレリンの溶液処方物を２０ゲージの針を有 する注射器を用いてそれぞれ４５匹の雌のラットに皮下投与した（２２０μｌ、 ゴセレリン７．３ｍｇと等量）。５つのラットの群に境界を作り、血液試料を１ 日目および４日目、ならびに１週間目、３週間目、５週間目、７週間目、９週間 目、１１週間目および１３週間目に採取した。更に、血液試料を２週間目、４週 間目、６週間目、８週間目、１０週間目および１２週間目に５つのラットの群の 尾の静脈から採取した。試料をラジオイムノアッセイを用いてゴセレリンについ て分析し、この結果、ゴセレリン−ポリエステル塩の液体処方物により、投与の 約１１週間後に薬の測定可能な血液濃度が生じることが判明し、かつ処方物によ り生体内で確認されたゴセレリンの放出量が生じることが判明した。 更に、これらの例から、薬ポリエステル塩の処方物を細いゲージの針を有する 注射器を用いて直ちに腸管外投与することができる溶液として供給することがで き、かつこのような処方物はヒトのホルモン依存性腫瘍の治療に有用であること を認めることができる。例２１ サブスタンスＰとして、酢酸塩の形で知られたペプチド（Sigmaによる、２ｍ ｇ）をジクロロメタン（３ｍｌ）に添加し、かつ十分に攪拌した。このペプチド は、溶剤への溶解の徴候を示さず、かつ曇った懸濁液としてのままであった。 １個の末端カルボン酸基を有するラクチド／グリコリドコポリマー（７０／３ ０）（２２５ｍｇ、分子量＝９７５５、多分散度＝１．５２、末端基の滴定によ る分子量＝１８００）をジクロロメタン（２５ｍｌ）に添加した。この溶液を１ ５分間攪拌し、澄明な無色の溶液を生じた。この溶液にメタノール（０．５ｍｌ ）中のサブスタンスＰ（２５ｍｇ）の溶液を添加した。生じる曇った懸濁液を、 完全に澄明な溶液が形成されるまでの１時間攪拌した。溶剤を回転蒸発によって 除去し、得られた澄明な“ガラス状の”固体をジクロロメタン（５ｍｌ）に再溶 解し、かつ再蒸発させた。この処理を２回繰り返した。最終的に固体をジクロロ メタン（３ｍｌ）に溶解し、この溶液をＰＴＦＥで被覆した布の上に徐々に滴下 し、溶剤を蒸発させ、澄明な無色のガラス状の固体の薄膜を形成させた（ペプチ ド含量９．１ｗ／ｖ％）。 この薄膜（９６．８ｍｇ）を小型のバイアル中に置き、燐酸塩緩衝したサリン （２ｍｌ、ｐＨ７．４）を添加した（この場合、緩衝液は、０．２μｍのフィル タを通して予め濾過させ、かつ保存剤としてのナトリウムアジド０．０２％を含 有していた）。バイアルを３７℃で恒温器中に置き、緩衝液を除去し、かつ周期 的に代替した。除去した緩衝液をサブスタンスＰの標準溶液に対して紫外線分光 光度計（Hewlett Packard 8452A）を２１０ｎｍで使用することによりサブスタ ンスＰの放出 量を分析した。この結果は、サブスタンスＰを、カルボキシ末端基を有するラク チド／グリコリドコポリマーの塩として形成させた場合にジクロロメタンに溶解 することができ、かつこの溶剤の場合に処理することができ、薄膜を生じ、この 薄膜は、約４週間でペプチドの連続的放出を生じることを示す。例２２ ロイプロリドアセテート（換言すれば、ロイプロレリンアセテートとして知ら れている）の水溶液（３３０ｍｇ／ｍｌの溶液３００μｌ）を高い剪断条件下に 、ミグリオール（Miglyol）８１０（リノレン酸を含む中位の鎖長の飽和脂肪酸 のトリグリセリド、Dynamit Nobel, UKによる）中の約２０００の数平均分子量 を有するポリ（ヒドロキシステアリン酸）の１０ｗ／ｗ％溶液２０ｍｌに添加し 、油／水の界面で部分的にロイコプロリド−ポリマー塩を形成させ、この場合こ の塩は、生じる油中水型のコロイド状懸濁液を安定化させる。水を、この混合物 がもはや泡立たずかつ気泡を形成しなくなるまで、高真空下に攪拌することによ って５０℃で除去し、著しい曇り度を示しかつ経口投与に適した油状組成物を生 じた。例２３ Ｌｙｓ⁸−バソプレッシン酢酸塩（２ｍｇ、Ｓｉｇｍａによる）をジクロロメ タン（３ｍｌ）に添加し、かつ攪拌した。このペプチドは、溶剤への溶解の徴候 を示さ ず、かつ曇った懸濁液としてのままであった。 １個の末端カルボン酸基を有するラクチド／グリコリドコポリマー（７０／３ ０）（２２５ｍｇ、分子量＝９７５５、多分散度＝１．５２、末端基の滴定によ る分子量＝１８００）をジクロロメタン（５ｍｌ）に添加した。この混合物を１ ５分間攪拌し、澄明な無色の溶液を生じた。この溶液にＬｙｓ⁸−バソプレッシ ン（２５ｍｇ、Ｓｉｇｍａによる）およびメタノール（０．５ｍｌ）を添加した 。生じる曇った懸濁液を、完全に澄明な溶液が形成されるまでの１時間攪拌した 。溶剤を回転蒸発によって除去し、得られた澄明な“ガラス状の”固体をジクロ ロメタン（５ｍｌ）に再溶解し、かつ再蒸発させた。この処理を２回繰り返した 。最終的に固体をジクロロメタン（３ｍｌ）に溶解し、この溶液をＰＴＦＥで被 覆した布の上に徐々に滴下し、溶剤を蒸発させ、澄明な無色のガラス状の固体の 薄膜を形成させた（Ｌｙｓ⁸−バソプレッシン含量１０ｗ／ｖ％）。 この薄膜（９７．３１ｍｇ）を小型のバイアル中に置き、燐酸塩緩衝したサリ ン（２ｍｌ、ｐＨ７．４）を添加した（この場合、緩衝液は、０．２μｍのフィ ルタを通して予め濾過させ、かつ保存剤としてのナトリウムアジド０．０２％を 含有していた）。バイアルを３７℃で恒温器中に置き、緩衝液を除去し、かつ周 期的に代替した。この緩衝液をＬｙｓ⁸−バソプレッシンの標準溶液に対して紫 外線分光光度計（Hewlett Packard 84 52A）を２１０ｎｍで使用することによりＬｙｓ⁸−バソプレッシンの放出量を分 析した。この試験の結果は、次表中に示されている。この実験は、Ｌｙｓ⁸−バ ソプレッシンを、カルボキシ末端基を有するラクチド／グリコリドコポリマーの 塩として形成させた場合にジクロロメタンに溶解することができ、かつ生じる混 合物は、少なくとも４週間でペプチドの連続的放出を生じることを示す。 試験管内でのＬｙｓ⁸−バソプレッシンの放出量 例２４ ラクチド／グリコリドコポリマー中のＺＥＮＥＣＡＺＤ６００３（欧州特許第 ０４７３２６８号明細書 の参考例４または７に記載されたようなポリエチレングリコール５０００で変性 された［Met^-1，Arg¹¹，Seｒ^17,27,60,65］ヒトＧ−ＣＳＦ（顆粒細胞コロニー 刺激因子））の２つの処方物を次のようにして得た。 （ｉ）ジクロロメタン（４ｍｌ）をＺＤ６００３（３９．７２ｍｇ）の凍結乾燥 した調製物に添加した。この結果、溶剤中の薬の不透明な分散液を生じた。１個 の末端カルボン酸基を有するラクチド／グリコリドコポリマー（７５／２５）（ ３６３．６ｍｇ、分子量＝９９６３、多分散度＝２．１９、末端基の滴定による 分子量＝２８１５）を添加し、澄明な溶液を形成した。 この溶液を剪断下（２１５０ｒｐｍ、Heidolph RZR50攪拌機）で水中のメチル セルロース（Methocel ０．２５ｗ／ｖ％、１５ｍＰａ．ｓ、Flukaによる）の 溶液に添加した。この速度で３分間の攪拌後、攪拌速度を８００ｒｐｍに減少さ せた。次に、生じる粒子を重力の下で３０分間沈積させ、この溶液を氷上で冷却 したまま保持した。次に、上澄み液を廃棄し、粒子を氷冷却した蒸留水（５０ｍ ｌ）中に再懸濁させることによって洗浄し、かつ１０００ｒｐｍで遠心分離した 。この処理を４回繰り返し、次に粒子を最終的に凍結乾燥した。 こうして得られた粒子は、良好な性質を有し、球状であり、かつ光学顕微鏡に よる画像分析によって測定されるように３２μｍの平均粒径を有していた。この 粒子の薬含量を抽出およびＨＰＬＣ分析によって測定し、９．４５％であること を見い出し、この場合この値は、微粒子を形成させるために使用された薬の配合 効率が９６％であることを表わす。 （ｉｉ）ジクロロメタン（４ｍｌ）をＺＤ６００３（４４．１８ｍｇ）の凍結乾 燥した調製物に添加した。この結果、溶剤中の薬の不透明な分散液を生じた。ラ クチド／グリコリドコポリマー（７５／２５、３６４．１ｍｇ、サイズ排除クロ マトグラフィーによる分子量＝１６８００、多分散度＝２．２、Boehringer Ing elheimによる）を添加した。末端基の滴定によるポリマーの分子量の測定を実施 したが、しかし、この測定は滴定可能な部分の濃度が著しく低いので不可能であ り、したがってこのポリマーは、末端カルボン酸基を有していない。薬溶液とポ リマーとの混合物は、混濁分散液として残存したポリマーおよび混合物の添加下 に澄明にならず、このことは、予想したように、ポリマー中の酸末端基の不在下 にペプチド−ポリエステル塩が形成し得なかったことを示す。 この混合物を剪断下（２１５０ｒｐｍ、Heidolph RZR50攪拌機）で水中のメチ ルセルロース（Methocel ０．２５ｗ／ｖ％、１５ｍＰａ．ｓ、Flukaによる） の溶液に添加した。この速度で３分間の攪拌後、攪拌速度を８００ｒｐｍに減少 させた。次に、生じる粒子を重力の下で３０分間沈積させ、この溶液を氷上で冷 却した まま保持した。次に、上澄み液を廃棄し、粒子を蒸留水（５０ｍｌ）中に再懸濁 させることによって洗浄し、かつ１０００ｒｐｍで遠心分離した。この処理を４ 回繰り返し、次に粒子を最終的に凍結乾燥した。 こうして得られた粒子は、上記の（ｉ）で得られたものと比較して劣った性質 を有しており、この場合幾つかのものは、不規則な形状を有し、かつ光学顕微鏡 による画像分析によって測定されるように４０μｍの平均粒径を有していた。こ の粒子の薬含量を抽出およびＨＰＬＣ分析によって測定し、２．０５％であるこ とを見い出し、この場合この値は、微粒子を形成させるために使用された薬の配 合効率が１９％であることを表わす。 上記の例は、ジクロロメタンそれ自体が薬に対する非溶剤であるにも拘わらず 、ＺＤ６００３を１個の末端カルボン酸基を有するポリマーの存在下の場合にジ クロロメタンに溶解することができることを示す。更に、このような溶液は、薬 の極めて高い配合速度で薬およびポリマーの微粒子を形成させるために使用する ことができる。これに対して、また、上記例は、このようなポリマーが末端カル ボン酸基を有さずかつ曇った分散液をのみを形成させる場合には、ＺＤ６００３ をポリマーの存在下にジクロロメタンに溶解させることができないことを示す。 更に、末端カルボン酸基を有しないポリマーの溶液中のＺＤ６００３のかかる曇 った分散液は、微粒子を形成させるために処理した場合には、薬の僅かな均質混 合を生じる。例２５ （ｉ）ゴセレリンアセテート（２２．４７ｍｇ、ゴセレリン１９．９９ｍｇと等 量）を安息香酸ベンジル（２．２１ｇ、９９％、Janssenによる）に添加した。 この混合物を４０℃で恒温器中に置き、かつ電磁攪拌機を用いて９日間連続的に 攪拌した。２日後および９日後に、アリコートを取り、１３０００ｒｐｍで１５ 分間遠心分離し、溶解してない薬をペレット状にした。上澄み液のアリコート（ 約１００ｍｇ）を５０ｍｌの容積のフラスコ中に正確に秤量して供給した。各ア リコートに氷酢酸（２ｍｌ）を添加し、引続きトリフルオロ酢酸（０．５ｖ／ｖ ％）の水溶液で充填させた。この溶液の一部を遠心分離管中に置き、１３０００ ｒｐｍで１５分間遠心分離し、懸濁物質を分離した。次に、上澄み液をＨＰＬＣ を用いてゴセレリン含量について評価した。ゴセレリンは、それぞれの試料の場 合に検出不可能であった。このＨＰＬＣ検定におけるゴセレリン検出の限界は、 ０．２μｇ／ｍｌであり、定量化の限界は、０．５μｇ／ｍｌであった。従って 、安息香酸ベンジル中のゴセレリンの平行溶解度（４０℃で）は、上記の記載か ら０．２μｇ／ｍｇである旨、評価することができる。 （ｉｉ）１個の末端カルボン酸基を有するラクチド／ グリコリドコポリマー（９５／５ （２９１．９ｍｇ、分子量＝６７４２、多分 散度＝１．６１、末端基の滴定による分子量＝２５６５ｇ／モル、クロロホルム 中の１ｗ／ｖ％での固有粘度＝０．１０３ｄｌ／ｇ）を安息香酸ベンジル（３． ３８ｇ、９９％、Janssenによる）に添加し、溶液を形成させた。この溶液にゴ セレリンアセテート（２２．５２ｍｇ、ゴセレリン２０．０３ｍｇと等量）を添 加した。この混合物を恒温保持し、かつ上記（ｉ）の記載と同様にして試料採取 した。２日間に安息香酸ベンジル中にゴセレリンを検出することができなかった が、しかし、９日間で安息香酸ベンジル１ｍｇ当たりゴセレリン約０．２μｇの 濃度を検出した。このＨＰＬＣ検定におけるゴセレリン検出の限界は、上記（ｉ ）に記載された通りであった。このことから、ラクチド／グリコリドコポリマー との１個の混合物として存在する場合には、安息香酸ベンジル中のゴセレリンの 平衡溶解度（４０℃で）は、０．２〜０．５μｇ／ｍｇとして評価することがで きることを示すことができる。 （ｉｉｉ）１個の末端カルボン酸基を有するラクチド／グリコリドコポリマー（ ９５／５）（９．０ｇ、分子量＝６０１１、多分散度＝１．５６、末端基の滴定 による分子量＝２７００ｇ／モル、クロロホルム中の１ｗ／ｖ％での固有粘度＝ ０．０９９ｄｌ／ｇ）をジクロロメタン（１００ｍｌ）に添加した。この溶液に ゴセレリ ンアセテート（１．１２４ｇ、ゴセレリン１ｇと等量）を攪拌しながら添加し、 引続きメタノール（１０ｍｌ）を添加した。得られた曇った懸濁液を澄明溶液が 得られるまで室温で約１時間攪拌した。溶剤を回転蒸発器を用いて除去し、澄明 な粘稠の液体を生じた。次に、この液体をジクロロメタンに再溶解し、かつ前記 と同様に再乾燥した。次に、この工程を２回以上繰り返し、得られた微細な粘稠 の液体を高真空下に乾燥し、白色のフォームを生じさせ、さらに一晩中真空乾燥 した。このフォームを破壊して微細な粉末にし、この粉末を室温で１日間真空乾 燥した。この粉末に安息香酸ベンジル（２０ｍｌ、Janssenによる）を添加し、 生じる混合物を攪拌しながら温和に加熱し、溶液を得た。 この溶液を十分に混合し、１ｍｌの試料を遠心分離器中に置き、かつ１４００ ０ｒｐｍで３０分間回転させた。上澄み液のアリコートを注意深く除去し、５０ ｍｌの容積のフラスコ中に秤量して供給した。この試料を前記（ｉ）の記載と同 様にしてゴセレリン含量について検定した。この溶液のゴセレリン含量は、安息 香酸ベンジル２４．６μｇ／ｍｇであることが見い出された。 この例は、安息香酸ベンジルがゴセレリンアセテートにとって極めて不十分な 溶剤であることを示す。更に、安息香酸ベンジル中のゴセレリンアセテートとの 簡単な混合物を形成させるためのラクチド／グリコリ ドポリマーの添加により、安息香酸ベンジル中のゴセレリンアセテートの平衡溶 解度は、顕著には増大しないことを導く。しかし、ゴセレリン／ポリエステル塩 は、安息香酸ベンジルに溶解することができ、この溶剤中の遊離ゴセレリンの評 価される平衡溶解度よりも著しく高い濃度でゴセレリンを含有する溶液を形成す る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/04 38/11 38/17 38/21 38/22 38/23 38/24 38/26 38/28 38/35 38/43 38/46 38/48 47/48 Ｃ 7433−4Ｃ 9455−4Ｃ Ａ６１Ｋ 37/24 9455−4Ｃ 37/38 9455−4Ｃ 37/43 9455−4Ｃ 37/26 9455−4Ｃ 37/28 9455−4Ｃ 37/66 Ｈ 9455−4Ｃ 37/30 9455−4Ｃ 37/40 9455−4Ｃ 37/42 9455−4Ｃ 37/54 9455−4Ｃ 37/553 9455−4Ｃ 37/465 (81)指定国 ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ， ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，Ｔ Ｄ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，Ｃ Ｈ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，ＪＰ ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＫ，ＬＵ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ， ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，Ｓ Ｋ，ＵＡ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．首記したように、少なくとも１個の塩基性基を有するペプチドから誘導され たカチオンおよびカルボキシ末端ポリエステルから誘導されたアニオンから形成 された塩を含有するかまたは該塩からなる組成物において、該組成物が遊離ポリ エステルに対する１つの溶剤であるがしかし遊離ペプチドのための溶剤ではない 溶剤中の塩の溶液または分散液の形であり、該分散液中の塩の粒径が５μｍ未満 、有利に０．２μｍ未満であるか、或いは注射または皮下移植のために微粒子ま たは移植物の形であることを特徴とする組成物。 ２．ペプチドが薬理学的に活性であり、かつオキシトシン、バソプレッシン、副 腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、プロラクチン、黄 体形成ホルモン、濾胞刺激ホルモン、ルリベリンまたは黄体形成ホルモン放出ホ ルモン（ＬＨＲＨ）、インシュリン、ソマトスタチン、グルカゴン、インターフ ェロン、ガストリン、テトラガストリン、ペンタガストリン、ウロガストロン、 セクレチン、カルシトニン、エンケファリン、エンドルフィン、キョートルフィ ン、タフトシン、チモポイエチン、チモシン、チモスチムリン、胸腺体液性因子 、血清胸腺因子、腫瘍壊死因子、コロニー刺激因子、モチリ ン、ボンベシン、ジノルフィン、ニューロテンシン、セルレイン、ブラジキニン 、ウロキナーゼ、カリクレイン、サブスタンスＰの類縁物およびアンタゴニスト 、アンギオテンシン、神経成長因子、血液凝固因子ＶＩＩおよびＩＸ、リゾチー ムクロリド、レニン、ブラジキニン、チロシジン、グラミシジン、成長ホルモン 、メラミン刺激ホルモン、チロイドホルモン放出ホルモン、チロイド刺激ホルモ ン、パラチロイドホルモン、パンクレオザイミン、コレシストキニン、ヒト胎盤 性ラクトゲン、ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン、タンパク質合成刺激ペプチド、胃 抑制ペプチド、血管作動性腸ペプチド、血小板由来成長因子、成長ホルモン放出 因子、骨形態形成タンパク質、ならびにこれらの合成類縁物および変性物および 薬理学的に活性のフラグメントから選択されたものである、請求項１記載の組成 物。 ３．ペプチドが薬理学的に不活性であり、かつポリアルギニン、ポリリシンおよ びポリ（アルギニン−コ−リシン）、Ｄ−、Ｌ−またはＤＬ−形の中性アミノ酸 とＤ−、Ｌ−またはラセミ形のアルギニンおよび／またはリシンとの（コ）ポリ マー、或いはペプチド鎖がＮ−末端で塩基性によって全体的または部分的に末端 にありかつ骨格が中性アミノ酸残基からなるペプチドまたは（コ）ポリペプチド から選択されたものである、請求項１記載の組成物。 ４．ポリエステルがヒドロキシ−酸から誘導されたものならびにジオールおよび ／またはポリオールとジカルボン酸および／またはポリカルボン酸との重縮合に より誘導されたものから選択された、請求項１記載の組成物。 ５．請求項１記載の溶液または分散液を製造する方法において、 （ａ）遊離塩基の形または塩の形の少なくとも１つの塩基性アミノ酸を弱酸およ びカルボキシ末端ポリエステルを一緒に含有するペプチドを双方が可溶性である 中性の極性溶剤に溶解し、溶剤または溶剤の大部分を除去し、残留する濃厚な溶 液を過剰量のペプチド−ポリエステル塩のための非溶剤に添加するか、または （ｂ）遊離塩基の形または塩の形の少なくとも１つの塩基性アミノ酸を弱酸およ びカルボキシ末端ポリエステルを一緒に含有するペプチドを双方が可溶性であり かつ凍結乾燥によって除去することができる溶剤に溶解し、生じる溶液を高速で 凍結させ、生じる凍結混合物を凍結乾燥させ、生じる混合物をポリエステル成分 のための溶剤中に分散させ、この混合物をペプチド−ポリエステル塩が形成され るように溶解させるか、または （ｃ）少なくとも１つの塩基性アミノ酸を含有するペプチドを塩の形で強酸と反 応させ、この場合ポリ エステルの幾つかまたは全部は、適当なアルカリ金属またはアルカリ土類金属と のカルボン酸塩の形であることを特徴とする、請求項１記載の溶液または分散液 の製造法。 ６．ペプチド薬の遅延放出のために薬理学的に活性のペプチドを有する請求項１ 記載の組成物において、該組成物が製薬学的に認容性の注射用ビヒクル中に懸濁 された直径０．２μｍ〜５００μｍの微粒子の形であることを特徴とする、請求 項１記載の組成物。 ７．注射用ビヒクルが水性であるかまたは有機性ビヒクルであり、このビヒクル が使用されるビヒクルにとって非溶剤であるかまたは高度に親脂肪性ポリエステ ルのためには親脂肪性有機性の注射用ビヒクルである、請求項６記載の組成物。 ８．ペプチド薬の遅延放出のために薬理学的に活性のペプチドを有する請求項１ 記載の組成物において、該組成物が製薬学的に認容性の溶液の形で、 （ａ）ポリエステルとの塩の形であり、該塩が塩基性ペプチドのカチオンおよび カルボキシ末端ポリエステルのアニオンを有するポリエステルとの塩の形である 少なくとも３００ダルトンの分子量を有する前記の定義したような少なくとも１ つの塩基性アミノ酸を含有するペプチド薬、 （ｂ）遊離ポリエステルのための溶剤であるが、しかし遊離ペプチドの溶剤では ない溶剤、 （ｃ）過剰量の溶剤、および場合によっては （ｄ）溶解されたかまたはコロイド状で分散された遊離形の幾つかのペプチドを 有することを特徴とする、請求項１記載の組成物。 ９．塩基性ペプチド薬がブセレリン（［Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｕ^t）⁶，ｄｅｓ−Ｇｌｙ −ＮＨ２¹⁰］−ＬＨＲＨ（１−９）ＮＨＥｔ）、デスロレイン（［Ｄ−Ｔｒｐ⁶ ，ｄｅｓ−Ｇｌｙ−ＮＨ２¹⁰］−ＬＨＲＨ（１−９）ＮＨＥｔ）、フェルチレリ ン（［ｄｅｓ−Ｇｌｙ−ＮＨ２¹⁰］−ＬＨＲＨ（１−９）ＮＨＥｔ）、ゴセレリ ン（［Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｕ^t）⁶，Ａｚｇｌｙ¹⁰］−ＬＨＲＨ）、ヒストレリン（［ Ｄ−Ｈｉｓ（Ｂｚｌ）⁶，ｄｅｓ−Ｇｌｙ−ＮＨ２¹⁰］−ＬＨＲＨ（１−９）Ｎ ＨＥｔ）、ロイプロレリン（［Ｄ−Ｌｅｕ^６，ｄｅｓ−Ｇｌｙ−ＮＨ２¹⁰］−Ｌ ＨＲＨ（１−９）ＮＨＥｔ）、ルトレリン（［Ｄ−Ｔｒｐ⁶，ＭｅＬｅｕ⁷，ｄｅ ｓ−ＧｌｙＮＨ２¹⁰］−ＬＨＲＨ（１−９）ＮＨＥｔ，）、ナファレリン（［Ｄ −Ｎａｌ⁶］−ＬＨＲＨ）、トリプトレリン（［Ｄ−Ｔｒｐ⁶］−ＬＨＲＨ）およ びその薬理学的に活性の塩から選択された黄体形成ホルモン放出ホルモンの合成 類縁物である、請求項８記載の組成物。 １０．溶剤が安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール、エチルラクテート、トリ 酢酸グリセリル、クエン酸エステル、ならびに低分子量（＜１０００）ポリエ チレングリコール、アルコキシポリエチレングリコールおよびポリエチレングリ コールアセテートから選択されたものである、請求項８記載の組成物。 １１．塩基性ペプチド薬−ポリエステル塩対遊離ポリエステルの比が１：０〜０ ．１：１０である、請求項８記載の組成物。 １２．全固体対溶剤の比が２ｗ／ｖ％〜４０ｗ／ｖ％である、請求項８記載の組 成物。 １３．請求項８記載の医薬組成物の製造法において、 （ａ）ペプチド薬とポリエステルとの緊密な混合物を製薬学的に相容性の溶剤に 溶解するか；または （ｂ）Ｃ₁〜Ｃ₆アルカノール中のペプチド薬の溶液を注射に適当な溶剤中のポリ エステルの溶液に徐々に添加し、その後に出発ペプチド溶液中の溶剤が注射のた めに製薬学的に相容性でない場合には、該溶剤を除去することを特徴とする、請 求項８記載の医薬組成物の製造法。