JPH08508715A

JPH08508715A - 抗ウイルス性ナフトキノン化合物、その組成物および用途

Info

Publication number: JPH08508715A
Application number: JP6517395A
Authority: JP
Inventors: アール．ボイド、マイケル; エイチ．、ザセカンドカーデリナ、ジョン; アール．グスタフソン、カーク; アー．デコステール、ローラン; パーソンズ、イアン; パネル、ルイス; ビー．マクマホン、ジェイムズ; エム．クラッグ、ゴードン
Original assignee: US Department of Health and Human Services
Current assignee: US Department of Health and Human Services
Priority date: 1993-01-29
Filing date: 1994-01-31
Publication date: 1996-09-17
Anticipated expiration: 2014-07-26
Also published as: ATE152717T1; DK0681578T3; EP0681578B1; DE69403063T2; GR3024226T3; ES2103577T3; CA2155020A1; US5783598A; CA2155020C; US5672607A; AU680872B2; JP2922648B2; WO1994017055A1; US5869522A; EP0681578A1; DE69403063D1; AU6099194A

Abstract

(57)【要約】本発明は新規な抗ウイルス性ナフトキノン化合物を提供する。該化合物は本発明の方法に従って、コノスペルマム属の植物から単離されるか、または化学的に合成される。該抗ウイルス性ナフトキノン化合物、その誘導体およびそのプロドラッグは、単独で、または他の抗ウイルス剤と組み合わせて、レトロウイルス、特にヒト免疫不全ウイルス、具体的にはＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２のようなウイルスの増殖または複製を阻害するための医薬組成物のような組成物としてウイルス感染症の治療または予防において用いることができる。

Description

【発明の詳細な説明】抗ウイルス性ナフトキノン化合物、その組成物および用途発明の技術分野本発明は、抗ウイルス性化合物、特にコノスペルマム（Conospermum）属の植物から得た抗ウイルス性化合物、具体的には、ナフトキノン類と称する化合物に関する。本発明はまた、抗ウイルス性化合物、具体的にはナフトキノン類およびその誘導体を、実質的に純粋な形態で、コノスペルマム属植物から得る方法に関する。本発明はまた、合成ナフトキノン類およびその誘導体、ならびにそれらの化学的合成方法に関する。更に、本発明は、抗ウイルス性ナフトキノン類、その誘導体、またはそのプロドラッグを含有する組成物、ならびにそれらの組成物を抗ウイルス治療やウイルス感染の予防のような臨床的な適用に使用する方法に関する。発明の背景後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ、エイズ）は致命的な疾病であり、ここ数年、その公表患者数は劇的な増加の一途をたどっている。極く近い将来においても、公表患者数は大幅に増加し続けるであろうと推測されている。従って、エイズを撃退する医薬やワクチンの開発を求める強い要望がある。エイズウイルスは、最初１９８３年に同定された。以来、数種の名前や略名で知られるに及んでいる。エイズウイルスは、三番目に判明したＴリンパ球ウイルス（ＨＴＬＶ−III）であり、免疫系の細胞中で複製する能力を有し、深刻な細胞破壊を引き起こす。エイズウイルスはレトロウイルス、すなわち複製時に逆転写酵素を使うウイルスである。この特別なレトロウイルスはまた、リンパ節疾患関連ウイルス（ＬＡＶ）、エイズ関連ウイルス（ＡＲＶ）としても知られており、また最近はヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）としても知られている。今日までに、ＨＩＶは区別される２種のファミリー、すなわちＨＩＶ−１およびＨＩＶ− ２が知られている。本書において、ＨＩＶなる略名を用いる場合、ＨＩＶウイルスを包括的に示す。具体的には、ＨＩＶはＣＤ４＋ヘルパー／インデューサーＴ細胞に対する深刻な細胞変性効果を及ぼし、免疫系を重篤に傷つけることが知られている。ＨＩＶ感染はまた神経学的損傷を引き起こし、最終的には感染患者を死に至らしめる。レトロウイルス、特にＨＩＶに対して有効な薬剤が求められているのに応じて、ウイルス化学療法分野が発展してきている。薬剤が抗レトロウイルス活性を発揮するには何通りかの方法がある。例えば、ＨＩＶが複製するには少なくとも４つのウイルス蛋白質、すなわち逆転写酵素（ＲＴ）、プロテアーゼ（ＰＲ）、トランスアクチベーター蛋白質（ＴＡＴ）およびビリオン蛋白質発現調節因子（RE V）を必要とする。従って、理論上はウイルスの複製に関与する蛋白質のいずれか１つ乃至全てを阻害すれば、ウイルスの複製が阻止できるといえる。ＡＺＴやｄｄＣのような抗レトロウイルス剤は、ＲＴを阻害することが知られている。また、ＴＡＴを阻害する抗ウイルス剤もある。ＡＺＴのようなヌクレオシド誘導体は、抗ウイルス治療に現在用いられ得る唯一の臨床的に有効な薬剤である。ＡＺＴやその関連化合物は非常に有用であるが、その毒性や、十分に適度といえる治療を達成するには治療係数が不充分である点から、その有用性には限度がある。合成ペプチドもまた、エイズの治療において、レトロウイルスＰＲの阻害剤として潜在的有用性を有することから開発が進められている。これらの阻害剤はレトロウイルスＰＲが機能するのを妨げる点で有効であるが、これらの阻害剤にはいくつかの顕著な欠点がある。先ず第一に、ＰＲの活性部位には障害がある、換言すれば、この部位ではＰＲの他の部分に比べて近づきにくいため、該阻害剤がＰＲの活性部位に近づき結合する能力が損なわれる。第二に、ＰＲの活性部位に結合するペプチド阻害剤は、一般に水に難溶性でありドラッグデリバリーの点で大きな問題を生じる。従って、ＨＩＶに対して有効な抗ウイルス治療を施す上で、それ単独で用いられる、あるいはＡＺＴおよび／または他の薬剤と組み合わせて併用できる新しい種類の抗ウイルス剤の開発が急務となっている。ＨＩＶ感染を阻止するために用いられる新薬もまた重要である。本発明の目的は、新規抗ウイルス性化合物、特にコノスペルマム属の植物から得た抗ウイルス性化合物、具体的には、ナフトキノン類およびその誘導体と称する化合物、ならびに化学的に合成されたナフトキノン類およびその誘導体を提供することである。本発明のもう１つの目的は、新規抗ウイルス性化合物、具体的にはナフトキノン類およびその誘導体を、コノスペルマム属の植物から単離するかあるいは化学的に合成することによって得る方法を提供することである。本発明のさらなる目的は、レトロウイルス、特にヒト免疫不全ウイルス、具体的にはＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２のようなウイルスの増殖または複製を阻害する新規組成物、特に医薬組成物を提供することである。本発明のまた別の目的は、レトロウイルス、特にヒト免疫不全ウイルス、より具体的にはＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２のようなウイルスに感染したヒトをはじめとする動物の新規治療処置方法を提供することである。本発明の更に別の目的は、レトロウイルス、特にヒト免疫不全ウイルス、より具体的にはＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２のようなウイルスに、動物、特にヒトが感染するのを予防する新規組成物、特に医薬組成物を提供することである。本発明の他の目的は、レトロウイルス、特にヒト免疫不全ウイルス、より具体的にはＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２のようなウイルスに、動物、特にヒトが感染するのを予防するための新規予防処置方法を提供することである。本発明の上述の目的および他の目的は、本発明の更に別の特徴とともに以下の記載から明らかになろう。発明の要約本発明は、新規抗ウイルス性化合物、特にコノスペルマム属の植物から単離された、実質的に純粋な形態の抗ウイルス化合物、具体的にはナフトキノン類およびその誘導体と称する化合物、および化学的に合成されたナフトキノン類およびその誘導体を提供する。本発明はまた、コノスペルマム属植物から、あるいは化学的合成により新規抗ウイルス性化合物、具体的にはナフトキノン類およびその誘導体を、実質的に純粋な形態で得る方法を提供する。このようにして得られた化合物は１種以上の他の抗ウイルス剤をさらに含有していてもよい組成物、特に医薬組成物の形で用いることができる。このような化合物はウイルス、特にレトロウイルス、具体的にはＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２のようなヒト免疫不全ウイルスの増殖または複製を阻止することが見出された。従って、上記化合物や関連組成物は、ウイルス、特にレトロウイルス、具体的にはＨＩＶ−１やＨＩＶ−２のようなヒト免疫不全ウイルスに感染したヒトをはじめとする動物の治療処置あるいは、動物、特にヒトがウイルスに感染するのを防ぐ予防処置において有用であると期待される。図面の簡単な説明図１は、Conospermum sp．（Spjut 7139）から実質的に純粋な形態で単離されたコノクルボン（conocurvone）（１）および関連ナフトキノン化合物（２〜８）、あるいはコノスペルマム属植物から単離された化合物の合成誘導体および関連合成ナフトキノン化合物（９および１０）として調製された化合物の構造を示す。図２は、（Ａ）単量体テレチフォリオンＢ（teretifolione B）（２）、（Ｂ）天然の三量体コノクルボン（１）、および（Ｃ）半合成誘導体（４）の５００ＭＨｚ¹ＨＮＭＲスペクトル（CDCl₃）を示す。図３は、（Ａ）テレチフォリオンＢ（２）、（Ｂ）コノクルボン（１）、および（Ｃ）化合物４の５００ＭＨｚ¹ＨＮＭＲスペクトル（CDCｌ₃）の芳香族領域の拡大図を示す。図４は、本発明に包含される抗ウイルス性ナフトキノン化合物を示す（式中、Ｒ₁からＲ₁₂の各記号は同一または異なって、それぞれＨ、Ｃ₁〜Ｃ₁₀の直鎖状または分枝状の飽和または不飽和アルキル、アリール、ＯＣＨ₃またはＯＨである）。図５は、抗ウイルス性ナフトキノン化合物、具体的にはコノクルボン（１）の抗ウイルス活性の一例を示す。グラフＡ、ＢおよびＣは一定範囲の濃度のコノクルボン（１）が、非感染ＣＥＭ−ＳＳ細胞（○）に及ぼす効果と、ＨＩＶ−１に感染したＣＥＭ−ＳＳ細胞（●）に及ぼす効果を、培養６日後に測定した結果を示したものである。グラフＡはＢＣＥＣＦアッセイにより判定した生存ＣＥＭ− ＳＳ細胞の相対数を示す。グラフＢはそれぞれの培養液の相対的ＤＮＡ含量を示す。グラフＣはＸＴＴアッセイにより判定した生存ＣＥＭ−ＳＳ細胞の相対数を示す。グラフＤは、培養４日後に測定した、感染性ウイルスまたはウイルス複製の指標に対して一定範囲濃度のコノクルボンが及ぼす効果を示す。これらの指標としては、ウイルス逆転写酵素（▲）、ウイルスコア蛋白質ｐ２４（◆）およびシンシチウム（合胞体）形成単位（syncytium-forming unit）（■）が含まれる。グラフＡ、ＢおよびＣにおいて、データは非感染、非薬剤処理の対照群の数値に対する百分率で示した。グラフＤにおいては、データは感染、非薬剤処理の対照群の数値に対する百分率として示した。好ましい実施態様の詳細な説明本発明は、実質的に純粋な形態で、例えば下記の構造を有する新規抗ウイルス性化合物、特にナフトキノン類およびその誘導体（以下、総称的にナフトキノン類と称する）を提供する。この抗ウイルス性ナフトキノン類およびその抗ウイルス性誘導体は、下記一般式（式中、Ｒ₁からＲ₁₂の各記号は同一または異なって、それぞれＨ、Ｃ₁〜Ｃ₁₀ の直鎖状または分枝状の飽和または不飽和アルキル、アリール、ＯＣＨ₃またはＯＨである）を有する化合物として記載できる。本発明はまた、次の工程を含む、コノスペルマム属の植物から抗ウイルス性ナフトキノン類およびその誘導体を単離・精製する方法を提供する。（a）乾燥植物原料を有機溶媒で抽出して粗抽出物を得て、（b）次の工程により活性な抗ウイルス性ナフトキノン類およびその誘導体を、抗ウイルス（例えば抗ＨＩＶ）バイオアッセイを指標とする単離・精製に付す。（i）該粗抽出物を液−液分配に付して抗ウイルス（例えば抗ＨＩＶ）活性画分を得て、（ii）該抗ウイルス（例えば抗ＨＩＶ）活性画分を遠心向流クロマトグラフィーに付して濃縮された抗ウイルス（例えば抗ＨＩＶ）活性画分を得て、（iii）この濃縮された抗ウイルス（例えば抗ＨＩＶ）活性画分を低圧カラムクロマトグラフィーおよび／またはゲル浸透クロマトグラフィーに付して粗製の半精製抗ウイルス（例えば抗ＨＩＶ）活性化合物を得て、（iv）該半精製抗ウイルス（例えば抗ＨＩＶ）活性化合物を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に付して実質的に純粋な形態の抗ウイルス（例えば抗ＨＩＶ）活性ナフトキノンまたはその誘導体を得る。本発明は更に、抗ウイルス性ナフトキノン類およびその誘導体を、コノスペルマム属の植物から単離するか、化学的に合成するか、あるいは市販品を購入した前駆物質を用いて合成する方法を提供する。該方法は、次の工程を含む。（a）適宜置換されたまたは無置換の２，３−デオキシ−１，４−ナフトキノン化合物を、それぞれ同一または異なっていてもよく、それぞれ適宜置換されたまたは無置換の３−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンまたは２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン化合物であってもよい他の２つのサブユニットと、酸または塩基触媒下でカップリングさせて、対応する抗ウイルス性三量体ナフトキノン化合物を得て、（b）所望の抗ウイルス性三量体ナフトキノン化合物を実質的に純粋な形態まで精製する。必要な２，３−デオキシ−１，４−ナフトキノンが入手可能でない場合には、次の工程により対応する３−ヒドロキシ−または２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン化合物から３−ヒドロキシ基または２−ヒドロキシ基を除去することによって製造できる。（i）対応する３−または２−ｐ−ブロモ安息香酸エステル誘導体を調製し、（ii）対応する３−または２−ｐ−ブロモ安息香酸エステル誘導体をチオフェノールで処理して、対応する２，３ビスチオフェノール付加物を形成させ、（iii）その対応する２，３ビスチオフェノール付加物をラネーニッケル還元に付して、所望の対応する２，３−デオキシ−１，４−ナフトキノン化合物を得る。所望の抗ウイルス性三量体ナフトキノン化合物は、例えば、必要に応じて、液 −液分配、ゲル浸透クロマトグラフィー、低圧カラムクロマトグラフィー、遠心向流クロマトグラフィーまたはＨＰＬＣ等の適当な方法によって精製することができ、さらに適宜画分や化合物を抗ウイルス（例えば抗ＨＩＶ）バイオアッセイに付してもよい。本発明方法に従って得た抗ウイルス性ナフトキノン化合物は、単独で、あるいは他の抗ウイルス剤と組み合わせて併用して、レトロウイルス、特にヒト免疫不全ウイルス、具体的にはＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２のようなウイルスの増殖または複製を阻害するための医薬組成物のような組成物として用いることができる。そして、このような組成物は上述の１種以上のウイルスで感染したヒトをはじめとする動物の治療処置や、１種以上の同ウイルスに感染するおそれのあるヒトをはじめとする動物の予防処置において有用であると期待される。本発明の基礎となっている知見以前には、本発明の抗ウイルス性ナフトキノン化合物は単離されたことも記載されたこともなかった。このような抗ウイルス性化合物の単離方法も知られていなかった。従って、このような化合物の抗ウイルス活性は従来知られておらず、またこれらの化合物を動物、特にヒトにおけるウイルス感染症の治療的あるいは予防的処置において、医薬組成物のような組成物として用いられ得ることも認識されていなかった。本発明を完成するに至った最初の観察は、抗ＨＩＶスクリーニングにおいて、Conospermum sp．（Spjut 7139）という名の植物からの抽出物（コード名 N495 3）の抗ウイルス活性の観察であった。このスクリーニングは1986年に着想された方法（米国国立保健研究所、ＤＴＰ）ＮＣＩのM.R．Boyd）であり、1988年以来、米国国立ガン研究所で開発、実施されてきた［Boyd，M.R.，AIDS，Etiology ，Diagnosis，Treatment and Prevention（DevitaV.T.，Jr.，Hellman S.，Rose nberg S.A.編），pp．305-319（Philadelphia：Lippincott，1988）参照］。コノスペルマム属は植物のヤマモガシ科（Proteaceae）の約６２ある属の１つである。コノスペルマム属中の全ての既知の種が、オーストラリア大陸に固有の種である。本発明を達成するのに用いる抽出物を得る乾燥Conospermum sp.（Spj ut 7139）植物は、ゲラルドトン（Geraldton）とパース（Perth）の中間にある西オーストラリアのゲアドナー（Gairdner）山脈地帯で、R．Spjutによって1981 年に収集された（NCI/USDA協働契約に基づく）。Conospermum sp．（Spjut 7139 ）の担保試料は、米国のナショナル・アルボリータム（U.S．National Arboretu m）およびスミソニアン協会（Smithsonian Institute）に寄託されている。コノスペルマム種の以前の研究により、一連の単純な単量体ナフトキノン化合物が同定された（Cannon，J.R．ら、Tetrahedron Lett.，2795-2798，1975）。しかしながら、抗ウイルス活性については、この属に由来の化合物が有するとは一切考えられていなかった。本発明を達成するためのコノスペルマム抽出物は、当初無作為に選択され、上記の抗ＨＩＶスクリーニングに付された何千種類もの植物抽出物の１つであった。スクリーニングで活性があることが見出されたConospermum sp．（Spjut 7139 ）植物の抽出物から個々の生物活性化合物を単離・精製するために、特異的バイオアッセイに照らしながら進める方法を採用した。この方法においては、分画に付すコノスペルマム抽出物の最初の選択、適用する全体の化学的単離方法の決定、ならびに個々の段階の特徴を生物学的試験を分析しながら決定した。単離・精製工程の指標に用いる抗ＨＩＶスクリーニングアッセイ（Weislow,O. S.らのJ．Natl．Cancer Inst.，81（8）：577-586，1989）では、ＨＩＶの細胞変性効果からヒトＴリンパ芽球細胞がどの程度保護されているかを測定した。抽出物の画分は種々の化学的手段を用いて調製し、一次スクリーニングでは無作為に試験した。活性画分をさらに分離し、得られたサブフラクションをスクリーニングで無作為に試験した。本方法は、さらに詳細な化学分析や構造解明に付することができる活性化合物、すなわち純粋化合物を含む抗ウイルス画分を得る為に必要なだけ繰り返した。このようにして、本書中で記載される新規な種類の抗ウイルス性化合物の第一の代表的化合物であるコノクルボン（図１の化合物１）が見出された。以前に報告されテレチフォリオンＢと呼ばれていたナフトキノン化合物（J.R．Cannonら，Tetrahedron Lett.，2795-2798，1975）（図１の化合物２）もまたコノスペルマム種から単離されたが、これは抗ＨＩＶ活性を欠いていた。本発明においては、Conospermum sp．（Spjut 7139）がコノクルボンの植物源として用いられたが、同属の他の植物種、例えば、コノスペルマム・インクルヴム（Conospermum incurvum）、コノスペルマム・ストチエーディス（C.stoechad is ）およびコノスペルマム・トリプリネルヴィウム（C．triplinervium）等から単離することにより得てもよい。植物からコノクルボンを単離するのには各種の方法を用いることができる。これらの方法としては、抽出、液−液分配、高速向流クロマトグラフィー、低圧カラムクロマトグラフィー、および種々の結合相を用いるＨＰＬＣが挙げられる。コノクルボンの単離は、紫外線（ＵＶ）、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）および抗ＨＩＶバイオアッセイを組み合わせてモニターすることができる。典型的な単離方法を以下に述べる。約１ｋｇの空気乾燥した葉、小枝、種、果実、樹皮または根からなる植物原料をまず微細末に粉砕し、１：１のメタノール−ジクロロメタンで抽出し、その後１００％メタノールで洗浄する。溶媒を留去すると、通常これらの有機抽出物は、総量で出発植物原料のかさの約２〜２０％の量になる。最初の粗抽出物を９：１のメタノール−水に溶解し、ヘキサンで抽出する。抗ＨＩＶ活性を９：１のメタノール−水画分中に濃縮し、これを次いでジクロロメタンか四塩化炭素のいずれかと７：３のメタノール−水との間で分配する。ジクロロメタンまたは四塩化炭素に可溶な物質は、ヘキサン／エタノール／酢酸エチル／水（５：４：２：１、上昇展開法）を用いる遠心向流クロマトグラフィーで予備的に分画することができる。遠心向流クロマトグラフィーから得た抗ＨＩＶ画分を溜めておく。抗ＨＩＶ活性画分は、ジオール結合相を充填したカラム上でヘキサン／酢酸エチルの漸次極性を増大させる混合液で溶出する低圧カラムクロマトグラフィーにかける方法および／またはセファデックスＬＨ−２０上でヘキサン／ジクロロメタン／メタノール（２：５：１）混合液またはジクロロメタン／メタノール（１：１）混合液でゲル浸透クロマトグラフィーに付す方法でさらに分離してもよい。活性物質の最終精製は、フェニル結合相カラムを用いアセトニトリル／水（１７：３、体積比で０．１％酢酸を含有）で溶出するＨＰＬＣによって行い、純粋なコノクルボンを得る。この方法を用いることにより、一般的に純粋な活性化合物を、粗抽出物の元の量に対し全体の正味量として約0.05 〜０．５％の収率で得ることができる。コノクルボンの単離については、実施例１でさらに詳細に記述する。本発明の抗ウイルス性ナフトキノン化合物は、化学合成によって得ることもできる。抗ウイルス性ナフトキノン化合物の合成に必要な前駆物質やサブユニット化合物は、天然物（特にコノスペルマム属の植物）から単離するか、化学的に合成するか、あるいは市販品を購入するかのいずれかの手段により容易に得ることができる。抗ウイルス性三量体ナフトキノン化合物は、適宜置換されたまたは無置換の２，３−デオキシ−１，４−ナフトキノン化合物を、２つの適宜置換されたまたは無置換の２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンまたは３−ヒドロキシ −１，４，−ナフトキノン化合物サブユニットと、酸または塩基触媒下でカップリングさせることにより製造してもよい。対応する抗ＨＩＶ活性三量体ナフトキノン生成物は、同様な化合物を実質的に純粋な形態で植物抽出物から得るのに用いた上述の単離・精製手段のような手段を用いて、反応混合物から単離・精製される。代表的な合成方法を以下述べる。適宜置換されたまたは無置換の２，３−デオキシ−１，４−ナフトキノン化合物を氷酢酸またはピリジンを含有する溶液中で、２当量の適宜置換されたまたは無置換の３−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン化合物および／または２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン化合物と反応させ、次いで抗ＨＩＶバイオアッセイを指標として単離・精製することにより、抗ウイルス性三量体ナフトキノン化合物が得られる。上記反応に必要な２，３−デオキシ−１，４−ナフトキノン化合物が他の方法で入手できない場合には、対応する３−ヒドロキシ−または２− ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン化合物から調製することができる。例えば、コノクルボン（１）自体は、テレチフォリオンＢ（２）から調製することができる。化合物１の中央のデヒドロキシ単量体サブユニットは、化合物２からＣ２ヒドロキシ基を除去することにより製造できる。この重要な相互変換反応を達成する為には、あらかじめ化合物２のｐ−ブロモ安息香酸エステル（６）を調製し、次いでこれをチオフェノールで処理し、ビスチオフェノール付加物（７）を形成させる。次に化合物７をラネーニッケル還元することにより所望のデオキシ単量体（８）が得られる。化合物８を２当量の化合物２と、塩基触媒下でカップリングさせることにより化合物１（コノクルボン）が得られる。コノスペルマム属植物の抽出物から上記一般的手法によって単離されるか、あるいは上記一般的手法により化学的に合成される抗ウイルス性ナフトキノン化合物の化学構造の具体例を図１に示す。コノクルボン（１）の他に化合物４および９も含まれる。化合物１０の合成法は、以前に文献（Jurd，L.，Aust．J．Chem. ,33：1603-1610，1980）に報告されている。しかし、化合物１０の抗ウイルス活性は今まで知られていない。図１の化合物１〜１０の構造の証拠は、主要なスペクトル分析（例、高分解能ＮＭＲ、マススペクトル、赤外線スペクトル、紫外線スペクトル）、関連する先行文献に記載の化合物のスペクトルや物理化学的特性との対比、ならびに選択した誘導体への誘導および／または合成手法を含めた手法を組み合わせることにより得られる。図１の化合物の構造の証拠については、実施例２および３で詳細に記述する。本書で具体的に記載されているもの以外の抗ウイルス性ナフトキノン化合物が他のコノスペルマム属の種や他の天然源から単離するか、あるいはそのような抗ウイルス性ナフトキノン化合物が化学的に合成できることは当業者には理解できよう。当業者ならまた、上記の単離・精製および合成の一般的手法に改良を加えることにより活性化合物の収率を改善することができることも理解できよう。但し、これまでその抗ウイルス活性が知られていなかった三量体の中心骨格構造は必須部分として、全ての活性抗ウイルス性分子に共通する構造である。従って、本発明は、このような一連の抗ウイルス性三量体ナフトキノン化合物に関する。抗ウイルス性三量体ナフトキノン化合物の一連の一般式（Ａ−Ｄ）については実施例４で詳細に記述するとともに、図４にも示す。純粋な抗ウイルス性ナフトキノン化合物の活性は、ヒトにおける化合物の抗ウイルス活性を正確に予測すると考えられている一連の相関関係のあるin vitro抗ウイルスアッセイ（Gulakowski，R.J.ら、J．Virol．Methods， 33：87-100，19 91）でさらに裏付けられる。これらのアッセイでは、化合物のＨＩＶの複製および／またはＨＩＶのヒト標的細胞に及ぼす細胞変性効果を阻害する能力を測定する。これらの測定はin vivoのＨＩＶ誘起疾患の病因に直接相関している。従って、実施例５に記載し、かつ図５に図示したナフトキノン化合物の抗ウイルス活性の分析結果は、ヒトにおけるこれらの化合物の抗ウイルス活性を正確に予測すると考えられる。本発明の化合物は、ヒト免疫不全ウイルス、具体的にはＨＩＶ-１またはＨＩＶ−２のようなレトロウイルスを阻害することが明らかになった。当業者なら、さらに本発明化合物は、他のレトロウイルスもおそらく阻害するであろうし、レトロウイルス以外のウイルスも阻害できることを十分理解できよう。本発明に従って、予防・治療処理できるウイルスとしては、例えば、Ｃ型およびＤ型レトロウイルス、ＨＴＬＶ-１、ＨＴＬＶ-２、ＨＩＶ、ＦＬＶ、ＳＩＶ、ＭＬＶ、ＢＬＶ、ＢＩＶ、ウマ伝染性貧血症ウイルス、トリ肉腫ウイルス〔例、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）〕、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス、アルボウイルス、水痘ウイルス、はしかウイルス、おたふくかぜウイルスおよび風疹ウイルス等が挙げられるが、これらには限定されない。抗ウイルス性ナフトキノン類、その誘導体および／またはそのプロドラッグは、治療および予防処置用の各種の組成物に製剤化してもよい。本発明の抗ウイルス性ナフトキノン類のプロドラッグの形態は容易に調製することができ、治療剤組成物において有利な物理化学的特性を有し得ることは当業者には理解できるであろう。例えば、高い水溶性を有する抗ウイルス性ナフトキノンブロドラッグ（例えば、それは非経口投与組成物により適している）は、キノン性官能基を対応キノールへ化学的に還元し、次いでオキシ塩化リンと反応させて対応するリン酸エステルにすることによって調製することができる。このような可溶化抗ウイルス性ナフトキノンプロドラッグを含有する組成物を生体内投与すると、該プロドラッグは容易に対応するキノールへ加水分解され、その後酸化され、生体内で活性な抗ウイルス性のナフトキノン親化合物を再形成する。同様にして、他の種類の誘導体を抗ウイルス性ナフトキノン類の還元型キノール誘導体から調製することができる。これらは、治療剤組成物に使用するために有利な他の特性を併せもったプロドラッグとして用いることができる。例えば、他のタイプのエステル化（例、アセチル化）は、高い親油性をもつ抗ウイルス性ナフトキノンプロドラッグを製造する上で有用である。このように高親油性が付与されるとプロドラッグの中枢神経系への移動が促進され、その後、プロドラッグは加水分解され、さらに活性抗ウイルス性ナフトキノン親化合物に酸化される。これは特に中枢神経系がＨＩＶ感染している患者に有効である。本発明の組成物はウイルスに感染した動物、例えばヒトを治療するするために使用することができる。特に本発明の組成物はレトロウイルス、特にヒト免疫不全ウイルス、具体的にはＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２のようなウイルスの増殖または複製を阻害するのに有用である。本組成物はまた、前記したような他のウイルスに感染した動物、例えばヒトの治療にも有用であると期待される。さらに、そのような組成物はウイルス感染のおそれのある動物、例えばヒトの予防処置に利用できるはずである。本発明の予防または治療処置方法に用いる組成物は、１種以上の抗ウイルス性ナフトキノン類、その誘導体および／またはそのプロドラッグと医薬的に許容される担体を含有する。医薬的に許容される担体としては、投与方法に応じて、当業者に周知の物を用いることができる。担体は、一つには用いるナフトキノン化合物により、また一つには当該組成物を投与する方法により選択される。種々の経路により薬剤の投与が可能であり、ある薬剤を投与するために一以上の投与経路を用いることができるが、ある特定の投与経路により投与する方が他の投与経路より即効性があったり、またより有効である場合があることが当業者には理解できるであろう。さらに、医薬的に許容される担体は、１つには用いる化合物や、採用する投与経路いかんにより選ばれることも当業者には十分明らかであろう。従って、本発明の組成物の適当な製剤組成は幅広い範囲に及ぶ。経口投与に適した製剤の組成としては、水、生理食塩水または果汁のような希釈剤に有効量の化合物を溶解した液状溶液；所定量の活性成分を固体としてまたは顆粒としてそれぞれ含有するカプセル、薬袋（sachet）または錠剤；水性液体中の溶液または懸濁液；および水中油型乳剤や油中水型乳剤が含まれる。錠剤は、乳糖、マンニトール、コーンスターチ、ポテトスターチ、微結晶性セルロース、アラビアゴム、ゼラチン、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸および他の賦形剤、着色剤、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、保存剤、着香剤ならびに薬理学的に許容可能な担体の一つ以上を含有していてもよい。抗ウイルス性ナフトキノン類、その誘導体および／またはプロドラッグは単独であるいは他の抗ウイルス性化合物と組み合わせて、吸入によって投与できるエアゾール製剤にしてもよい。このようなエアゾール製剤は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素等の圧縮可能な噴射剤に混合される。局所投与に適した製剤としては、活性成分を着香剤、通常ショ糖およびアラビアゴムまたはトラガント中に含有させた口中剤（トローチ）；ゼラチンとグリセリン、またはショ糖とアラビアゴムのような不活性基剤中に活性成分を含有させた香錠；適当な液状の担体中に活性成分を含有させた口内洗剤；ならびに活性成分に加えて慣用される担体等を配合したクリーム、乳剤、ゲル剤等が挙げられる。直腸投与用製剤は、例えばカカオ脂またはサリチレートを含有する適当な基剤を用いた坐剤として提供される。膣投与用製剤は、活性成分に加えて周知の適当な担体を配合したペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム（泡沫剤）またはスプレー剤として提供される。同様に活性成分は、コンドーム上のコーティング剤としての潤滑剤と組み合わせて用いてもよい。非経口投与用製剤としては、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、および製剤を投与対象者の血液と等張化するための溶質を含有していてもよい水性および非水性の等張性滅菌注射溶液、および懸濁化剤、可溶化剤、粘稠化剤、安定化剤および保存剤を含有していてもよい水性および非水性の滅菌懸濁剤が挙げられる。当該製剤は、アンプルやバイアルのような１回投与用または複数回投与用の密封容器に入れて提供してもよく、また使用直前に、例えば、注射用の水等の滅菌液状担体を加えるだけでよい凍結乾燥状態で貯蔵してもよい。用時調製の注射溶液や懸濁液は、滅菌散剤、顆粒および前述したような種類の錠剤から調製することができる。動物、特にヒトに、本発明に従って投与する場合の投与量としては、適切な時間にわたって感染個体に予防あるいは治療効果を奏するに十分な量であるべきである。投与量は、用いるナフトキノン化合物の薬効の程度、病状の重篤度、感染個体の体重および年齢に応じて決められる。又、投与量は、用いる化合物がもたらすかもしれない副作用の有無も考慮して決められる。通常、できる限り副作用を最小に抑えるのが好ましい。上記投与量は、錠剤またはカプセルのような単位投与量形態としてもよい。本書において、「単位投与量形態」とは、ヒトや動物の患者の一回の投与に適した物理的に分離した単位をいい、各単位は、所望の薬効を奏するのに十分な量に計算された所定量のナフトキノン化合物を単独または他の抗ウイルス剤と組み合わせて、医薬として許容可能な希釈剤、担体またはビヒクルとともに含有している。本発明の単位投与量形態は、用いる化合物、達成する薬効、ならびに宿主（ho st）における各化合物の薬力学に従い決められる。投与量は、各患者において、「抗ウイルス有効量」ないしは、「有効水準」を達成するのに必要な量であるべきである。「有効水準」とは、投与の好ましい到達点として用いられるもので、実際の投与量や投与スケジュールは、薬物動力学、薬物分布および代謝の各個人差に応じて決められる。「有効水準」は例えば、患者における所望の血液または組織中濃度として定義してもよく、これは化合物の臨床上の抗ウイルス活性を予測することが知られているアッセイにおいて、ＨＩＶのようなウイルスを阻害する１種以上のナフトキノン化合物の濃度に対応する。本発明の化合物の「有効水準」は、本発明の組成物をＡＺＴや他の公知の抗ウイルス化合物あるいはそれらを組み合わせたものと併用する時は変わり得る。当業者なら、個々の患者において、所望の「有効濃度」を達成するために、用いられている組成物の正確な組成に対する適切な投与量、投与スケジュール、投与方法を容易に決めることができる。当業者はまた、適当な患者試料（例えば、血液および／または組織）の直接分析（例えば、分析化学的分析）または間接分析（例えば、ｐ２４またはＲＴのような代用指標を用いる）によって、本発明の化合物の「有効濃度」の適切なインディケーター（指標）を容易に決定し、用いることができる。ウイルス感染者を予防・治療処置するに際して、大用量のナフトキノン、その誘導体および／またはプロドラッグを投与し、化合物が作用する時間を経過させ、その後、ナフトキノン化合物を不活性化するために適当な試薬を投与する、所謂「高投与量」療法（“mega-dosing”regimen）を採用するのが望ましいかもしれない。本発明の組成物が、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ、エイズ）の治療に用いられる場合は、ナフトキノン、誘導体および／またはプロドラッグと組み合わせて、他の医薬を含有させてもよい。これらの併用医薬の代表例には、抗ウイルス化合物、免疫調整剤、免疫刺激剤および抗生物質が含まれる。抗ウイルス性化合物としては、例えば、ＡＺＴ、ｄｄＩ、ｄｄＣ、ガンシクロビル、フッ素化ジデオキシヌクレオチド、ネビラピンのような非ヌクレオシド類縁化合物（Shihら，PNAS ，88：9878-9882，1991）、Ｒ８２９１３のようなＴＩＢＯ誘導体（Whiteら，Antiviral Research，16：257-266，1991）、およびＢＩ−ＲＪ−７０（Shih ら，Am．J．Med., 90（Suppl．4A）：85-175，1991）等があげられる。免疫調整剤および免疫刺激剤としては、例えば各種インターロイキン類、ＣＤ４、サイトカイン、抗体調製品、輸血および細胞輸注等があげられる。抗生物質としては、例えば、抗真菌剤、抗菌剤および抗カリニ肺炎剤があげられる。ウイルス阻害性ナフトキノン化合物を他の抗レトロウイルス剤、特にｄｄＣ、ＡＺＴ、ｄｄＩ、ｄｄＡのような公知のＲＴ阻害剤、または抗ＴＡＴ剤のような他のＨＩＶ蛋白質に対し作用する他の阻害剤とともに投与すれば、一般的には、ウイルスのライフサイクルの大部分または全ての複製段階が阻害されると考えられる。ＡＩＤＳやＡＲＣ患者にｄｄＣやＡＺＴを用いる場合の投与量については公表されている。ｄｄＣのウイルスを阻止する範囲は、一般に０.０５μＭ〜１. ０ μＭである。ほとんどの患者において約０．００５〜０．２５mg／kg体重の範囲で投与すればウイルスの阻止効果がある。経口投与の場合の予備投与量は、若干これよりも広く、例えば0.001〜0.25mg／kgを１回または複数回に分けて２、４、６、８、１２時間等の間隔で投与する。現在のところ、0.01mg／kg体重のｄｄＣを８時間毎に投与するのが好ましい。併用治療を施す場合、他の抗ウイルス性化合物を、例えばナフトキノン化合物と同時に投与してもよく、あるいは、所望により投与の時期をずらしてもよい。更に、２つの医薬を１つの組成物中に組み合わせて配合してもよい。いずれかを単独で用いるのに比べ、併用投与する場合には、各医薬の投与量を低くしてもよい。本発明の化合物と方法を、以下の実施例でさらに詳述する。これらの実施例は本発明を更に例証するためのものであり、本発明を限定するものではない。実施例１この実施例は、Conospermum sp．（Spjut 7139）として知られている植物の抽出物から得られる本発明の抗ウイルス性ナフトキノン化合物、特にコノクルボン（１）の単離および精製を示すものである。乾燥した植物原料（１，２８７ｇ）をすりつぶし、１：１のジクロロメタン／メタノールで浸出し、次いで１００％メタノールで洗浄した。溶媒を減圧下で除去し、全量３９．０ｇの粗製の有機抽出物を得た。粗抽出物の１１．５３ｇを９：１のメタノール／水の混合液４５０ｍｌに懸濁し、ヘキサン（４×３００ｍｌ）で分配し、２．７２ｇのヘキサンに可溶な物質を得た。水性メタノール層に４５ｍｌの水を加え、続いて四塩化炭素（４×300 ｍｌ）で分配することにより、抗ＨＩＶ活性の四塩化炭素に可溶な物質１．００ｇ（粗抽出物の８．７％）を得た。ヘキサンに可溶な画分をヘキサン（800ml）と９：１のメタノール／水（８００ｍｌ）との間で分配を繰り返して、脱脂することにより、追加の活性なメタノール画分（０．６０ｇ，粗抽出物の５．２％）を得た。両方の活性な画分を内径２．６ｍｍのコイル（容量３７５ｍｌ）を備えた、イトーマルチレイヤーコイル装置（P.C．Inc.，Potomac，MD）を用いて、高速向流液−液クロマトグラフィーに付した。回転速度は８００ｒｐｍで、ヘキサン／エタノール／酢酸エチル／水（５：４：２：１）で構成される二層の溶媒系を、試料注入の際に初流速１ｍｌ／分で注入し、その後の工程で徐々に２ｍｌ／分にまで上げていく。移動相として用いられる上側の有機層と共にクロマトグラフを上昇展開法で操作する。試料を初めに二層の溶媒系の混合液に溶解し、それぞれ８〜１０ｍｌを４回注入する。分離は、２８０ｎｍで測定するリニアーインストゥルメンツＵＶ検出モデルＵＶ２００を用いてモニターした。全画分はまた、展開溶媒として有機移動相を用いたシリカゲル６０Ｆ₂₅₄（EM Sciences）上の薄層クロマトグラフィー（Ｒｆ＝０．０８）によって分析した。向流クロマトグラフィー（全量２４５ｍｇ）からの活性画分を、２５×３１０ｍｍのカラム、および９９：１から７：３までのヘキサン／酢酸エチルによる勾配溶離を用いる、ジオール充填剤カラム（LiChroprep DIOL，40-63μm，EM Scie nces）上の低圧液体クロマトグラフィーで更に分離した。流速を０．５から３．５ｍｌ／分へ徐々に増加させ、分離を前述したように２８０ｎｍでモニターすることにより、２３．８ｍｇの活性物質を得た。活性成分の最終的な精製は、フェニル結合相カラム（Rainin Dynamax-60A，８ μm，4.6mm I.D．×25cm）上の高速液体クロマトグラフィーにより行った。1.0 ｍｌ／分の流速で展開する溶出溶媒はアセトニトリル／水（１７：３，体積比で０．１％酢酸を含有）で構成されている。試料を５００μｌジクロロメタンおよび７５０μｌアセトニトリルの混合液に溶解し、注入量は７５〜１００μｌであった。分離は、Waters 990 フォトダイオードアレイ検出器を用いて２１０ｎｍでモニターした。この最終的な精製工程により、高速液体クロマトグラフィーの保持時間が２９分のコノクルボン（１）を全量で８.５ｍｇ（粗抽出物の0.0 7％）得た。１％酢酸を添加したヘキサン／ＩＰＡ（８：２）で展開したＣＮＴＬＣＦ₂₅₄（EM Science）のＲｆ＝０．３８；１％酢酸を添加したヘキサン／ＩＰＡ（８：２）で展開したジオールＦ₂₅₄（EM Science）のＲｆ＝0.47；１％酢酸を添加したメタノール／水（９５：５）で展開したＲＰ−８Ｆ₂₅₄（EM Science）のＲｆ＝０．３２である。純粋な化合物１で記録された分光学的および物理化学的な性質は以下の通りである：〔α〕_D＋184°（MeOH，c 0.32）；UVλ_max（MeOH）225nm（log ε＝4.9 ），275（4.6），289（4.6），405（4.2）；IR（フィルム）ν_max2969，2922，2 857，1657，1650，1644，1563，1462，1287，1207，1076，1005，915，866，750 cm_-1；陽イオン FAB-MS m/z 953.3856（MH+，Ｃ₆₀Ｈ₅₇Ｏ₁₁の計算値953.3901），連鎖スキャンにおけるドーターイオン（daughter ion）m/z 871.3073（Ｃ₅₄Ｈ₄₇ Ｏ₁₁の計算値871.3118）および869.2957（Ｃ₅₄Ｈ₄₅Ｏ₁₁の計算値869.2962）；陰イオン FAB-MS m/z 952.3872（M-，Ｃ₆₀Ｈ₅₆Ｏ₁₁の計算値952.3823），連鎖スキャンにおけるドーターイオンm/z 629.2535（Ｃ₄₀Ｈ₃₇Ｏ₇の計算値 629.2539 ）およびm/z 323.1281（Ｃ₂₀Ｈ₁₉Ｏ₄の計算値323.1283）；ニトロベンジルアルコール、重水素化したグリセロールおよび重水素化したメタノールからなるマトリックスを用いたLR陰イオンFAB-MS m/z 954およびm/z 630とm/z 324にはドーターイオンを与えた；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.39-1.42（一連の重なったCH₃一重線，積分値は9H），1.50-1.56（一連の重なったCH₃一重線，積分値は9H），1.61-1.6 5（一連の重なったCH₃一重線，積分値は9H），1.63-1.70(m，3H)，1.71-1.79(m ，3H)，2.03-2.11(m，6H)，5.01-5.09(m，3H)，5.81-5.83（重なった二重線，J= 10.5，積分値は1H），5.89-5.92（重なった二重線，J=10.5，積分値は2H），6.9 9-7.09（重なった二重線，J=8.5，積分値は3H），7.51-7.63（OH,交換可能，積分値は2H），7.71-7.76（重なった二重線，J=10.5，積分値は3H）,および7.89-8 .01（重なった二重線，J=8.5，積分値は3H）. 以前に公表された単離手段（Cannon，J.R.ら，Tetrahedron Lett.，2795-2798 ，1975）の改良したものを用いて、テレチフォリオンＢ（２）を、Conospermum sp．の抽出物から再単離した。簡潔に言うと、ジクロロメタンとメタノール／水の７：３の混合液の間で抽出物を分配し、ジクロロメタン可溶物質をジクロロメタン／メタノールの１：１溶液を用いるSephadex LH-20上のゲル浸透クロマトグラフィーに付し、漸次極性を増大させるヘキサン／酢酸エチルの混合液で溶出するジオール充填剤カラム上の低圧カラムクロマトグラフィーに付し、メタノール／水（１９：１，体積比で０．１％酢酸を含有）の混合液を用いるＣ₁₈ ＨＰＬＣに付すことにより化合物２を単離した。この化合物（２）は、コノスペルマム・テレチフォリウム（Conospermum teretifolium）から単離された一連のキノリンのうちのひとつとして以前に報告されている（Cannon，J.R.ら，Tetrahedron Lett .，2795-2798，1975）。一方、化合物２の構造は、元々合成により証明されているが、該化合物のＮＭＲ、ＵＶまたはＩＲデータは報告されていない。本明細書に挙げる独自のテレチフォリオンＢ（２）の分光化学的な同定により、構造が確認され、プロトン検出ヘテロ核相関実験（ＨＭＱＣおよびＨＭＢＣ）により、すべての¹Ｈおよび¹³ＣＮＭＲの共鳴を完全に帰属することができた。純粋な化合物２で観測したスペクトルおよび物理化学的な性質は以下の通りである：〔α〕_D＋66°（MeOH，c 0.1）；UV λ_max（MeOH）215nm（log ε＝4.7），291（4.3），394（3.8）；IR（フィルム）ν_max3350（broad），2970，2926， 1660，1651，1639，1563，1463，1311，1207，1074，972，844，744cm^-1；陽イオンFAB-MS m/z 325.1435（MH+，Ｃ₂₀Ｈ₂₁Ｏ₄の計算値325.1440）；¹³C-NMR（12 5MHz，CDCl₃，#ＤＥＰＴ実験からのＨを付記する）δ183.9（C-1，0），156.5（ C-2，0），109.0（C-3，1），184.4（C-4，0），126.9（C-4a，0），128.6（C-5 ，1），122.1（C-6，1），158.1（C-7，0），121.5（C-8，0），123.3（C-8a，0 ），119.9（C-9，1），135.4（C-10，1），79.3（C-11，0），41.2（C-12，2），22.6（C-13，2），123.4（C-14，1），132.1（C-15，0），25.5（C-16，3）， 17.5（C-17，3），26.5（C-18，3）；¹H-NMR（500MHz，CDCl₃）δ1.40（H-18，M e，s），1.51（H-17，Me，s），1.60（H-16，Me，s），1.65（H-12'，m），1.74 （H-12，m），2.05（H-13，2H，m），5.03（H-14，m），5.90（H-10，d，J=10.5 ），6.21（H-3，s），7.04（H-6，dd，J=8.5，0.7），7.48（OH，交換可能），7 .76（H-9，dd，J=10.5， 0.7），7.90（H-5，d，J=8.5）.実施例２この実施例は、本発明の抗ウイルス性ナフトキノン化合物、特にコノクルボン（１）の構造の証拠を説明するものである。コノクルボンの¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルは多くの高度に重なった共鳴があり、非常に複雑であった（図２）。加えて、芳香族基のプロトンの共鳴（図３）は、明らかに¹Ｈより小さい積分値のサテライトピークに接していた。このサテライトピークは、最初は、コノクルボンと共に溶出されたクロマトグラフィーで分離できない不純物に起因すると考えられた。しかしながら、主な¹ＨＮＭＲのシグナルとサテライト共鳴の両者による複雑性および化学シフトは、使用する重水素化した溶媒、および試料の温度に依存して変化した。スペクトルは、CDCl₃，C D₃OD，CD₃CN，DMSO-d₆,ピリジン-d₅およびベンゼン-d₆中で測定され、分析した。ベンゼン-d₆中で測定すると、プロトンＮＭＲスペクトルは最も複雑となり、一方CDCl₃中で測定すると最も複雑でないスペクトルを与えた。主なピークおよびマイナーピークの出現およびカップリングパターンの大きな変化が明らかであったが、試料を１００℃まで加熱する、あるいは−４０℃まで冷却することをしても、サテライトピークは除去できなかった。スペクトルの複雑性の変化に加えて、主なシグナルおよびサテライトピークの相対積分の変化もまた、異なったＮＭＲの溶媒、および温度を変化することで観察された。このような観察から、コノクルボン（１）の試料は真に純粋であり、サテライトピークおよび多くのスペクトルの複雑性があるということは、動的な分子内の過程、例えばＮＭＲのタイムスケールで観察される、互変異性および／または分子内の１またはそれ以上の結合の周囲で回転が制限されることに起因することが示唆される。コノクルボン（１）の¹Ｈ−ＮＭＲは複雑であるが、それはテレチフォリオンＢ（２）のスペクトルと多くの類似性を示した。化合物１の¹³ＣＮＭＲスペクトルもまた化合物２で記録されたものと密接に対応しているが、その共鳴の多くはピークが重なったクラスターとして現れた。コノクルボン（１）の構造は、明らかにテレチフォリオンＢ（２）の構造と関連しているが、化合物１のＮＭＲデータの複雑性のために従来のＮＭＲ分析では完全且つ直接的に構造を解明できなかった。化合物１の性質で重要な知見は、質量分析の研究から得た。陽イオンと陰イオンの両方のイオンモードでの高分解能の高速原子衝撃質量分析（ＦＡＢＭＳ）により、化合物１独自の分子式Ｃ₆₀Ｈ₅₆Ｏ₁₁が分かった。陽イオンモードにおいて、疑似分子イオンはＭＨ＋（Ｃ₆₀Ｈ₅₇Ｏ₁₁）として、ｍ／z ９５３．３８５６に観られた。一方、陰イオンのＦＡＢＭＳから、分子イオンがＭ−（Ｃ₆₀Ｈ₅₆Ｏ₁₁）として、ｍ／ｚ９５２．３８７２に、および連鎖スキャンにおけるドーターイオンがＣ₄₀Ｈ₃₇Ｏ₇として、ｍ／ｚ６２９．２５３５、およびＣ₂₀Ｈ₁₉Ｏ₄として、ｍ／ｚ３２３．１２８１にあることが分かった。ニトロベンジルアルコール、重水素化したグリセロールおよび重水素化したメタノールからなるマトリックスを用いた陰イオンのＦＡＢＭＳにより、ｍ／ｚ 954のピークが観測された。このことから、コノクルボン（１）が２つの交換可能な水素原子を有することが分かった。ｍ／ｚ６３０および３２４のドーターイオンを与えた連鎖スキャン分析は、これらのフラグメントはそれぞれ１つの交換可能な水素を有することを示している。分子式、質量分析スペクトルのフラグメンテーションパターン、およびＮＭＲスペクトルの特徴から、コノクルボン（１）は化合物２に構造的に関連する３つのキノリンのサブユニットを有する非対称な三量体の構造を有することが示された。コノクルボン（１）が、２−デオキシテレチフォリオンＢのサブユニットのＣ２およびＣ３の位置に、Ｃ３位で結合している２つのテレチフォリオンＢのサブユニットからなることが推測された。構造１は観測されたマススペクトルデータと一致しており、互変異性および回転が制限されるという両方の効果を示すものと予想される。分子中のヒドロキシキノン官能基は、オルトあるいはパラの何れかの形のキノンで存在しうる。オルトあるいはパラの形のキノンの相対的な分布、およびそれらの間の相互変換速度は、溶媒と温度の両方の変化により変わり得る。２つのテレチフォリオンＢのサブユニット内にあるキノンの平面の配向は、分子の中央の２−デオキシテレチフォリオンＢにあるキノンの面に対してほとんど直交している。分子モデルから分かったことは、立体的障害はあるけれども、中央の２−デオキシテレチフォリオンＢサブユニットに２つのテレチフォリオンＢのサブユニットが結合している結合の周囲の回転は可能であるはずであるということである。化合物１のそれぞれのサブユニットは非対称で、キラル炭素を有しているため、４つの異なった互変異性体と４つの異なったアトロプ異性体が存在し得る。組合せると、これはコノクルボン（１）が、理論上、全体で１６の異なった形で存在し、その間で相互変換できることを意味する。同様のタイプのケトエノール互変異性、および他の二量体および「三量体」ナフトキノン誘導体のサブユニットが結合している結合の周囲の回転が制限されることが起こること、ならびにそれに起因するＮＭＲ効果はよく知られている（Waterman，P.G.ら，J．Che m．Res .，（M）0101-0144，1985；Jeffreys，J.A.D.ら，Tetrahedron Lett.，10 85-1088，1983；Durley，R.C．ら，J．Chem．Soc．Perkin I，153-169，1975）。それゆえに、このデータはこれらの種類の化合物で報告された分光学的な特性と充分一致するものである。ピリジン中、無水酢酸でコノクルボン（１）をアセチル化し、続いて反応生成物をフェニル結合相ＨＰＬＣに付すと、１つの主ピークと多くのそれよりも小さいピークのクロマトグラムを与える。コノクルボン（１）の５．２ｍｇの試料をピリジン１ｍｌおよび無水酢酸１ｍｌ中、室温で２４時間攪拌した。反応混合物に１０ｍｌの酢酸エチルを加え、その後、１０％硫酸銅水溶液で洗浄し、水で３回洗浄した。酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去して５. ２ｍｇの生成物を得た。この生成物はクロロホルム／メタノール（９：１）で展開したシリカプレート上のＴＬＣで単一のスポットを与えた。アセトニトリル／水（１９：１）で溶出するフェニル結合相カラム上のＨＰＬＣにより、一連のピークを示すクロマトグラムを得た。主なピークを集めたが（２．１ｍｇ）、それは複雑な¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを与えた。主なピークとして集められた物質を再注入し、１本の主ピークと３本のマイナーピークを得た。２回目のＨＰＬＣ分離の主ピークとして集められた物質は、まだ複雑な¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを与え、全く同じＨＰＬＣの条件下で、再分析するとそれは１本の主ピークと３本のマイナーピークのクロマトグラムを再び与えた。ＨＰＬＣ溶出液のフォトダイオードアレイ検出により、４つの全てのピークが、λ_maxが２３０ｎｍおよび肩吸収が２７３ｎｍの同様な紫外線吸収プロフィールを有することがわかった。ＨＰＬＣで精製されたアセチル化生成物は、ｍ／ｚ１０３６のＬＲＭＳ分子イオンを与えた；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.39-1.44（一連の重なったCH₃一重線，積分値は9 H），1.53-1.58（一連の重なったCH₃一重線，積分値は9H），1.62-1.66（一連の重なったCH₃一重線，積分値は9H），1.61-1.71（m，3H），1.72-1.81（m，3H），2.01-2.10（m，6H），2.09-2.12（一連の重なったCH₃一重線，積分値は6H）， 5.06（m，3H），5.80-5.85（重なった二重線，J=10.5，積分値は3H），7.03-7.0 9（重なった二重線，J=9.0,積分値は3H），7.60-7.64（重なった二重線，J=10.5 ，積分値は2H），7.72-7.75（重なった二重線，J=10.5，積分値は1H），7.90-7. 92（重なった二重線，J=9.0，積分値は2H），7.99-8.01（重なった二重線，J=9. 0，積分値は1H）。従って、化合物１の２つのヒドロキシ基のアセチル化は、互変異性の相互変換を排除できるかもしれないが、このような結果が示唆したことは、アセテート基が３つのキノリンサブユニットが結合している結合の周囲の回転を妨げるほど、充分に嵩高くないということである。互変異性および回転の相互変換の効果を充分に排除するために、コノクルボン（１）を既に公表された方法（Cameron，D.W．およびSiddel，M.D.，Aust．J．C hem., 31：1323-1333，1978）を適用して、還元的にアセチル化した。コノクルボン（１）６．３ｍｇを２．５ｍｌ無水酢酸中、１４３ｍｇの酢酸ナトリウムおよび１６８ｍｇの亜鉛末と室温で３．５時間反応させた。反応混合物に冷水を加え、次いで、水とジクロロメタン間で分配した。ジクロロメタン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で溶媒を除去して９．５ｍｇの粗生成物を得た。これをメタノール／水（１９：１）で溶出するフェニル結合相カラムＨＰＬＣにより分離すると、３つの主なピークを与えた。先に溶出したピークを、ヘキサン／ＩＰＡ（１９：１）で溶出するキラルな支持体のシクロボンドβ上のＨＰＬＣにより精製することにより、パーアセチル化された生成物３を１．１ｍｇ得た。化合物３：LRMS m/z 1294；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.20（s，6H），1.35（s，3H ），1.57（s，6H），1.61（s，3H），1.66（s，6H），1.70（s，3H），1.71‐1. 79（m，4H），1.82‐1.88（m，2H），1.95（s，3H），1.96（s，6H），2.0‐2.1 3（m，6H），2.08（s，3H），2.20（s，3H），2.24（s，3H），2.33（s，3H）， 2.34（s，3H），5.10（t，J=7.0，2H），5.16（t，J=7.0，1H），5.54（t，J=10 .5，1H），5.55（d，J=10.2，1H），5.65（d，J=10.2，1H），6.54（d，J=9.3， 2H），7.12-7.22（m，6H），7.62（d，J=9.3，1H）. 従って、化合物３はＣ₇₆Ｈ₇₈Ｏ₁₃として適当である、ｍ／ｚ１２９４に分子イオンを与え、その¹ＨＮＭＲスペクトルは、８つのアセテート基により、δ １．９５−２．３４の間に８つのＣＨ₃一重線を有する。化合物３の¹ＨＮＭＲシグナルは、鋭く、複雑でなく、またサテライトピークが全くないので単一の形で存在することを示す。化合物１の還元的なアセチル化は、クロマトグラフィーにより均一の構成成分に精製されて単一な一連のＮＭＲ共鳴を示す生成物を与えた。付加的なＨＰＬＣピークまたはＮＭＲシグナルの出現から示唆されるような回転の相互変換の形跡が化合物３で観察されなかった。パーアセチル化誘導体３は、単一の安定な物質であるが、その回転配向を¹ＨＮＭＲ特性から決定することはできなかった。分子内の還元されたキノンサブユニット間の結合部におけるプロトン化された炭素の欠如により、ヘテロ核相関やｎＯｅ実験による慣用の分析は困難となった。それゆえ、Conospermum sp．（Spjut 7139）から単離されたコノクルボン（１）の構造の最終的な明確な証拠は、その分光学的、物理化学的、および抗ウイルス特性が合成により調製された化合物１（実施例３参照）の特性と同一であることから証明された。実施例３この実施例は、本発明の抗ウイルス性ナフトキノン化合物の合成の一例を示し、具体的にはコノクルボン（1）および関連化合物（4，9，10）を例示する。化合物２のアリコート61mg、1,4-ナフトキノン16mgおよび氷酢酸１mlを、還流水浴中で15時間攪拌した。該混合物を減圧下で乾固させ、ジクロロメタン／メタノール（1:1）を用いてSephadex LH-20上でクロマトグラフィーを行った。先に溶出する画分は、TLC（ジクロロメタン／メタノール，9:1で展開したSiO₂プレート、Rf =0.13）による新しい、より極性の高いスポットを含んでいるが、この画分をプールし、アセトニトリル／水（17:3、体積比で0.1％酢酸を含有）を用いてフェニル結合相カラムでＨＰＬＣにより精製して、７mgの「三量体」４を得た。Seph adex LH-20カラムから後で溶出する画分を、ジオール結合相充填剤でクロマトグラフィー処理し、９mgの化合物５を得た。化合物４は、以下のスペクトル特性を有していた：FAB HRMS m/z 803.2834（MH+，C₅₀H₄₃O₁₀の計算値803.2856）；¹H NMR（CDCl₃）δ1.40-1.43（一連のCH₃一重線，積分値は6H），1.51-1.55（一連のCH₃一重線，積分値は6H），1.62-1.64（一連のCH₃一重線，積分値は6H），1.6 4-1.71（m，2H），1.73-1.81（m，2H），2.04-2.11（m，4H），5.03-5.08（m，2 H），5.91-5.93（重なった二重線，J=10.5，積分値は2H），7.02-7.10（重なった二重線，J=8.5，積分値は2H），7.57（OH，交換可能），7.66（OH，交換可能），7.73-7.76（m，4H），7.93-8.01（重なった二重線，J=8.5，2H），8.14-8.1 6（m，2H）。化合物５は、以下のスペクトル特性を有していた：FAB HRMS m/z 4 81.1635（MH+，C₃₀H₂₅O₆の計算値481.1651）；¹H NMR（CDCl₃）δ1.45（s，3H），1.55（s，3H），1.64（s，3H），1.65-1.72（m，1H），1.76-1.83（m，1H）， 2.07-2.13（m，2H），5.08（t，J=7.0，1H），5.97（d，J=10.5，1H），7.03（s ，1H），7.11（d，J=8.5，1H），7.74（m，2H），7.82（d，J=10.5，1H），8.00 （d，J=8.5，1H），8.11（m，2H）. したがって、この「三量体」４は、コノクルボン（1）の場合と極めて類似した¹H NMR特性を有していた（図２および３参照）。化合物４の¹H NMR共鳴は複雑で、多くの高度に重なったシグナルおよびサテライトピークを有している。化合物１および４がNMRスペクトル特性において著しく類似していることによって、化合物１で観察されたものと同じ分子内互変異性および回転異性が化合物４においても存在することが示唆された。さらに重要なことは、「合成三量体」４の抗ＨＩＶ生物学的活性プロフィールがコノクルボン（1）の活性プロフィールと実質的に同一であるとわかったことである。これに対し、「合成二量体」５は、その¹H NMRスペクトルにおいて各プロトンのシャープなシグナルを呈し、ＨＩＶに対して完全に不活性であった。コノクルボン（1）自体も、テレチフォリオンＢ（2）を前駆体として用いて合成した。化合物１の中央のデオキシ単量体サブニユットを、化合物２からＣ２位のヒドロキシ基を除去することによって製造した。この重要な相互変換を達成するために、p-ブロモ安息香酸エステル誘導体６をチオフェノールで処理して、ビスチオフェノール付加物７を形成した。化合物７をラネーニッケル還元することによって、所望のデオキシ単量体８を得た。化合物８を２当量のテレチフォリオンＢ（2）と塩基触媒下でカップリングすることにより化合物１を得た。一般的な反応手順は以下の通りである。テレチフォリオンＢ（2；20.7mg）を、塩化ベンゾイル６２．１mgおよびトリエチルアミン１．０mlを加えたジクロロメタン３ ml中で攪拌した。該反応を１５分後に止め、混合物を１mlの水で６回洗浄した。有機層を蒸発乾固し、酢酸エチル／ヘキサン混合物中で粉砕し、不溶性の芳香族酸を濾取した。濾液をＣ₁₈充填剤に吸着させ、ついでメタノール水溶液（メタノール濃度を上げながら）で溶出した。p-ブロモ安息香酸エステル誘導体６（24.9 mg）を９５％メタノールで溶出した。化合物６をアセトン／水の混合物から晶出させた。化合物６：電子衝撃HRMS m/z 506.0702（C₂₇H₂₃BrO₅の計算値506.0729 ）；¹H NMR（CDCl₃）δ1.44（s，3H），1.55（s，3H），1.65（s，3H），1.70（ m，1H），1.77（m，1H），2.09（m，2H），5.07（bt，J=7.0Hz，1H），5.88（d ，J=10.3Hz，1H），6.79（s，1H），7.01（d，J=8.2Hz，1H），7.68（m，2H）， 7.75（d，J=10.3Hz，1H），7.98（d，J=8.2Hz，1H），8.03（m，2H）. この後、50.0mlの酢酸エチル中に、108mgの化合物６、６mlのトリエチルアミンおよび28滴のチオフェノールを加えた。反応混合物を室温で１時間攪拌し、ついで蒸発乾固した。Ｃ₁₈充填剤での段階勾配減圧液体クロマトグラフィー（vacuum-liquid chromatography；VLC）により、１００％メタノール画分中に9 3.4mgの生成物を得た。19:1のメタノール／水を用いてフェニルカラムでＨＰＬＣにより最終的な精製を行って、58.4mgの化合物７を得た。化合物７：電子衝撃 HRMS m/z 524.2305（C₃₂H₂₈S₂O₃の計算値524.1480）；IR（フィルム）ν_max2917，28 49，1663，1583，1564，1466，1440，1283，1135 cm^-1；¹H NMR（CDCl₃）δ 1.3 1（s，3H），1.52（s，3H），1.62（s，3H），1.63（m，1H），1.73（m，1H）， 2.04（m，2H），5.03（bt，J=7.0Hz，1H），5.71（d，J=10.5Hz，1H），6.95（d ，J=8.5Hz，1H），7.04（d，J=10.5Hz，1H），7.22-7.31（m，6H），7.35-7.37 （m，4H），7.78（d，J=8.5Hz，1H）．次に、市販のラネーニッケルを過剰のメタノールで３回洗浄、超音波処理することによって、新たなラネーニッケルを調製した。洗浄したラネーニッケル480m gを５mlのメタノールに加え、この溶液を還流させた。52.5mgのビスチオフェニルエーテル７のメタノール溶液を、還流させたラネーニッケル溶液に徐々に加えた。最も良い結果は、赤色が消えるのを待ってから、化合物７を含有する溶液をさらに加えるようにすることによって得られた。反応混合物を延べ１時間還流させ、濾過して、蒸発乾固した。Ｃ₁₈での段階勾配ＶＬＣによる精製を行って、19 :1のメタノール／水画分中に22.6mgの化合物８を得た。化合物８：電子衝撃HRMS m/z 308.1379（C₂₀H₂₀O₃の計算値308.1412）；UV λ_max（MeOH）225nm（log ε= 4.4），298（3.7），429（3.5）；IR（フィルム）ν_max2965，2923，2853，1655 ，1611，1576，1562，1458，1437，1300，1192cm^-1；¹³C NMR（CDCl₃、HMQC,HMB CおよびDEPT実験からなされた帰属）δ 188.0（C-1），140.0（C-2^*），137.3（ C-3^*），184.3（C-4），126.2（C-4a），128.8（C-5），121.2（C-6），159.2（ C-7），120.7（C-8），129.3（C-8a），120.1（C-9），134.2（C-10），79.5（C -11），41.3（C-12），22.6（C-13），123.5（C-14），132.2（C-15），25.6（C -16），17.6（C-17），26.7（C-18），^*C-2およびC-3の帰属は逆の可能性もある ;¹H NMR（CDCl₃）δ 1.42（s,3H）,1.53（s,3H），1.63（s,3H），1.63 （m，1H），1.73（m，1H），2.08（m，2H），5.05（bt，J=7.0Hz，1H），5.88（ d，J=10.5Hz，1H），6.80（d，J=10.0Hz，1H），6.83（d，J=10.0Hz，1H），7.0 5（d，J=8.5Hz，1H），7.79（d，J=10.5Hz，1H），7.92（d，J=8.5Hz，1H）．ついで、0.9mlのピリジン中で、５mgの化合物８を10mgのテレチフォリオンＢ（2）と混合し、反応溶液を約８０℃で９０分間加熱した。この後、反応混合物を蒸発乾固し、アセトニトリル／水（17:3、体積比で0.05％TFAを含有）で溶出するフェニルカラム上のＨＰＬＣにより精製した。アセトニトリル／水（9:1、体積比で0.05％TFAを含有）を用いて、同じカラムで最終的なＨＰＬＣ精製を行ったところ、1.2mgの物質（〔α〕_D＝+175°，ｃ0.09，MeOH）が得られたが、この物質は、IR、UV、¹H NMR、HPLC保持時間および抗HIV活性プロフィールにより、天然に存在するコノクルボン（1）と同一であった。天然および合成のコノクルボンが、マイナーサテライトピークの全てを含め、同一の¹H NMRスペクトルを有しているという事実によって、コノクルボンが、互変異性体とアトロプ異性体との平衡混合物として存在するという事実が裏付けられた。該合成物質の旋光度（〔α〕_D＝+175°）は、天然物で測定された旋光度（〔α〕_D＝+184°）と実質的に同一であった。上記の活性化合物１と４の合成では、コノスペルマム属の１種から実質的に純粋な形態で得ることができる（上記実施例１）テレチフォリオンＢ（2）を前駆体として利用したが、コノスペルマム属の別の種のような他の植物もテレチフォリオンＢ（2）を含有している（Cannon，J.R．ら，Tetrahedron Lett.，2795-25 98,1975）ことは明白であり、これらの植物もまた上記の化合物１と４の合成に使用できる。また、化合物２のラセミ体を化学合成により完全に調製できる（Ca nnon，J.R．ら，Tetrahedron Lett.，2795-2598，1975）ことが知られているので、上述の手順に従って全合成によりラセミ化合物１を調製するのにラセミ化合物２を使用できることは明白である。その代替として、適当なキラルな前駆体を用いて化合物２の純粋なエナンチオマーを合成できるであろうし、該エナンチオマーを用いて今度は化合物１の個々の立体化学異性体を調製できるであろう。しかし、化合物１または４のテレチフォリオンＢサブユニットのC-11位におけるキラリティーが抗ウイルス活性に不可欠であるという形跡はないので、化合物１または４のあらゆる立体異性体は有用な抗ウイルス活性を有すると予測される。化合物９と１０の合成およびその抗ウイルス活性は本予測をさらに補強する。化合物９と１０も「三量体」ナフトキノン化合物であるが、サブユニット中にキラル中心を持たない。化合物９は過去の化学文献に記述されていない新規の合成生成物である。該化合物は以下のように調製した。１mlのピリジン中に、1,4-ナフトキノン34mgと2- ヒドロキシ-1,4-ナフトキノン70mgを加えた。反応混合物を水浴中で８０℃で９０分間加熱し、その後減圧下でピリジンを除去した。生じたゴム状物を２Ｎ酢酸で洗浄し、メタノール／ジクロロメタンに溶解し、フェニル結合相充填剤に塗被した。塗被した吸着剤を4×2cmのVLCカラムの上端に加え、アセトニトリル水溶液（アセトニトリル濃度を上げながら）で溶出した。TLC特性を基に、6:4アセトニトリル／水で溶出した物質をプールし、8.2mgの画分を得た。該画分をさらにアセトニトリル／水（6:4，体積比で0.05％TFA含有）を用いてフェニル結合相HP LC（１cmカラム）により精製し、5.1mgの化合物９を得た。化合物９：LRMS m/z 502，これはC₃₀H₁₄O₁₈として適当である；¹H NMR（CDCl₃）δ7.65-74（m，3H），7.76-7.82（m，3H），8.04-8.09（m，3H），8.14-8.19（m，3H）；¹³CNMR（CD Cl₃）δ116.9，117.3，125.9，126.2，126.4，126.6，126.7，129.7，129.8，13 2.1，132.2，132.3，132.9，133.0，134.7，141.8，141.9，154.6，155.3，180. 6，180.8，182.0，182.1，182.5，183.0．化合物１０の構造は以前に文献（Jurd，L.，Aust．J．Chem.，33：1603-1610 ，1980）において報告されているが、該化合物が抗ウイルス活性を有することは以前は知られていなかった。本明細書では、抗ウイルス性の評価のために、発表された方法（Jurd，L.，Aust．J．Chem.，33：1603-1610，1980）で化合物１０を調製した。概説すれば、３mlの50％酢酸に1,4-ナフトキノン158mgと4-ヒドロキシクマリン162mgを加えた。反応混合物を１００℃で３０分間加熱した。形成した黄色沈澱を濾過して回収し、４mlのアセトンに浸して再度濾過して107mgの化合物１０を得た。化合物１０：LRMS m/z 478，これはC₂₈H₁₄O₈として適当である；¹H NMR（DMSO-d₆）δ7.27-7.31（m，2H），7.32-7.37（m，2H），7.60-7.65（ m，2H），7.87-7.91（m，2H），7.93-7.96（m，2H），8.10-8.14（m，2H）．実施例４この実施例は本発明における一般的な抗ウイルス性ナフトキノン化合物群を示す。実施例３の化合物に加えて、他の抗ウイルス性ナフトキノン化合物が天然物から実質的に純粋な形態で単離および／または化学的に合成されるであろうということは、当業者には正しく認識されるであろう。抗ウイルス性ナフトキノン化合物は、図４により一般的に示すように、４つの異なるシリーズ（Ａ〜Ｄ）から成っている。構造式中、R₁からR₁₂の各記号は同一または異なって、それぞれＨ、C₁ -C₁₀の直鎖状または分枝状の飽和または不飽和アルキル、アリール、OCH₃またはOHである。例えば、コノクルボン（1）はシリーズＡに属し、R₁=R₆=R₁₂=（CH₂ ）₂CHC（CH₃）₂；R₂=R₅=R₁₁=CH₃；R₃=R₄=R₇=R₈=R₉=R₁₀=Hである。同様に、上記実施例３の化合物４はシリーズＢに属し、R₁=R₂=R₃=R₄=R₇=R₈=R₉=R₁₀=H；R₆=R₁₂ =（CH₂）₂CHC（CH₃）₂；R₅=R₁₁=CH₃である。同じく、上記実施例３の化合物９はシリーズＣに属し、R₁からR₁₂が同一でそれぞれＨである。最後に実施例３の化合物１０はシリーズＤに属し、R₁からR₁₂が同一でそれぞれＨである。上記実施例から、抗ウイルス性ナフトキノンシリーズＡ〜Ｄに属する他の物質が植物から純粋な形態で単離されるか、実施例３の一般的方法と適当な前駆化合物とを用いて容易に合成されるであろうということが，当業者にはさらに明白になるであろう。該前駆化合物は植物から単離されるか、利用可能な方法により合成されるか、あるいは市販品を入手できる。例えば、文献において報告されたように（Cannon，J.R．ら，Tetrahedron Lett.，2795-2798，1975）、下に示した構造の化合物はコノスペルマム属の植物から純粋な形態で単離するか、または化学的に合成することができる。これらの化合物を適当な前駆体として用いて、実施例３の一般的方法により、以下のような抗ウイルス性ナフトキノン化合物をさらに合成することができる。すなわち、シリーズＡに属する化合物で、構造式中R₁=R₂=R₅=R₆=R₁₁=R₁₂=CH₃；R₃= R₄=R₇=R₈=R₉=R₁₀=Hのもの、シリーズＢに属する化合物で、構造式中R₁=R₂=R₃=R₄ =R₇=R₈=R₉=R₁₀=H；R₅=R₆=R₁₁=R₁₂=CH₃のもの、およびシリーズＣに属する化合物で、構造式中R₁=R₂=R₃=R₄=R₇=R₈=R₉=R₁₀=H；R₅=R₁₂=CH₂CH（CH₃）C（CH₂）₂CHC （CH₃）₂；R₆=R₁₁=OCH₃のものである。さらに別の例では、既に構造が報告されている（Waterman，P.G．ら，J．Chem．Res.，（M）：101-144，1985）が、抗ウイルス活性を有することは知られていなかったイスマイリン（ismailin）は、シリーズＤの化合物で、構造式中R₁=R₃=R₆=R₇=R₈=R₉=R₁₀=H；R₂=R₅=R₁₂=CH₃；R₄=O Hである。実施例５この実施例は、コノスペルマム属の植物から単離したか、あるいは化学的に合成した本発明のナフトキノン化合物の抗ウイルス活性を示すものである。以前に文献（Boyd，M.R.，AIDS Etiology，Diagnosis，Treatment and Pre-ve ntion （Devita，V.T.，Jr.，Hellman，S.，Rosenberg，S.A.，編），pp305-319 （Philadelphia：Lippincott，1988）；Gustafson，K.R．ら，J．Med．Chem.,35 ：1978-1986，1992）；Weislow，O.S．ら，J．Natl．Cancer Inst.，81：577-58 6，1989）；Gulakowski，R.J.ら，J．Virol．Methods, 33：87-100，1991））に記載されているＸＴＴ−テトラゾリウム抗ＨＩＶ一次スクリーニングアッセイを用いて、精製化合物の抗ウイルス活性を先ず評価した。全てのアッセイに用いたＣＥＭ−ＳＳヒトリンパ球標的細胞株は、フェノールレッドを含有しないＲＰＭＩ１６４０培地（Gibco，Grand Island，NY）に５％ウシ胎児血清、２ｍＭＬ−グルタミン、および５０μｇ／ｍｌゲンタマイシンを加えた培地（完全培地）中で培養した。指数関数的に増殖した細胞をペレット状にし、ついで完全培地に２．０×１０⁵ 細胞／ｍｌの濃度で再懸濁した。試験中を通じて、ハイチ人のＨＩＶ変異体であるＨＴＬＶ−ＩＩＩ_RF（３．５４×１０⁶ＳＦＵ／ｍｌ）を使用した。凍結したウイルスストック溶液を使用する直前に溶解して、完全培地に再懸濁し、１．２×１２⁵ＳＦＵ／ｍｌとした。抗ＨＩＶ活性を評価するための精製化合物の適当量を１００％のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、所望の初期濃度となるよう完全培地で希釈した（最終ＤＭＳＯ量は１％を越えない）。薬物の系列希釈、試薬の添加、およびプレートからプレートへの移動といった全ての行為は自動バイオメック（Biomek）１０００ワークステーション（Beckman Instru-m ents，Palo Alto，CA）で行った。一次抗ＨＩＶスクリーニングアッセイで試験したシリーズＡ〜Ｄのナフトキノン化合物の抗ウイルス活性の例を表１に示す。Conospermum sp．（Spjut 7139 ）から純粋な形態で単離されたコノクルボン（１）（上記実施例１）は広い濃度範囲にわたり、一次スクリーニングアッセイでＨＩＶ−１感染の細胞変性効果を完全に防護した（ＥＣ₅₀ ０．０２μＭ；ＩＣ₅₀ ５０μＭ）。同様に、合成して得たコノクルボン（１）（上記実施例３）は同等の抗ウイルス活性を示した（ＥＣ₅₀ ０．０２μＭ；ＩＣ₅₀ ５０μＭ）。化合物４もまた、このアッセイでＨＩＶ−１を完全に阻害し、ＥＣ₅₀＝０．０２μＭ、ＩＣ₅₀＝５０μＭであった。化合物９および１０も、それぞれＥＣ₅₀ １６μＭおよび２３μＭ、ＩＣ₅₀ ４８μＭおよび４１８μＭであり、抗ＨＩＶ活性を示した。化合物２および５のような「二量体」または「単量体」類縁体は抗ＨＩＶ活性が全くないことから（データは示していない）、全ての活性化合物に共通する中心の「三量体」骨格構造が必須であることがさらに確認された。精製ナフトキノン化合物の抗ＨＩＶ活性を示すさらなる例として、他の文献（ Gulakowski，R.J．ら、J．Virol．Methods, 33：87-100，1991）に詳述してある方法を用いて、抗ウイルス性ナフトキノン化合物、特にコノクルボン（１）の一連の相互に関係のあるアッセイを９６穴のマイクロタイタープレートのそれぞれのウエル上で行った。概説すれば、その方法は以下の通りである。非感染のＣＥＭ−ＳＳ細胞を完全培地５０μｌ中に１×１０⁴細胞の密度となるようにおいた。次いで、希釈したＨＩＶ−１ウイルスを適当なウエルに５０μｌ量加え、感染多重度が0.6になるようにした。適当な細胞、ウイルスおよび薬物コントロールを各実験操作で入れた。それぞれのマイクロタイターウエルの最終量を２００μｌとした。ウイルス感染細胞用に４つのウエルを使用し、非感染細胞用には２つのウエルを使用した。プレートを５％ＣＯ₂を含む雰囲気下で37℃で４、５または６日間インキュベーションした。引き続いて、バイオメックを用いて、各ウエルから細胞を含まない上清部分を除去し、文献（Gulakowski，R.J.ら、J．Virol．Methods, 33：87-100，1991）に記載のように、逆転写酵素活性、ｐ２４抗原産生および感染ビリオンの合成を分析した。それから細胞増殖または生存度を、文献（Gulakowski，R.J.ら、J.Vi rol．Methods, 33：87-100，1991）に記載のように、ＸＴＴアッセイ（Weislow ，O.S．ら、J．Natl．Cancer Inst., 81：577-586，1989）、ＢＣＥＣＦアッセイ（Rink，T.L.ら、J．Cell．Biol.，95：189-196，1982）およびＤＡＰＩアッセイ（McCaffrey，T.A．ら、In Vitro Cell Develop．Biol.，24：247-252，198 8）を用いて、各ウエルの残留内容物で評価した。グラフ表示やデータの比較を容易にするために、個々の実験的アッセイの結果（少なくとも個々の４つの測定値の結果）を平均化し、その平均値を用いて、適当なコントロールに対する割合（％）を計算した。これらの計算に使用した平均値の標準誤差は、平均で、一般的にそれぞれの平均値の１０％未満であった。図５Ａ〜Ｄに示すように、コノクルボン（１）はin vitroでＣＥＭ−ＳＳヒトリンパ芽球標的細胞に対するＨＩＶ−１の細胞変性効果を完全に阻害することができた。この化合物の標的細胞に対する直接の細胞毒性は、かなり高い濃度でのみ見られた（in vitro 「治療係数」２５００）。コノクルボンはまた、同じ阻害有効濃度の範囲で、ＨＩＶ−１−感染ＣＥＭ−ＳＳでのＲＴ、ｐ２４、およびＳＦＵの産生を著しく阻害し、これは当該化合物が本質的にウイルスの複製を停止することを示している。好適な実施態様を強調して本発明を説明したが、当業者には好適な化合物、組成物、および方法を変更し得ることが明らかであろう。本明細書で詳細に説明した以外でも本発明を実施できることが意図される。従って、以下に示す請求の範囲の精神および範囲内に包含される全ての変形を本発明は含む。本明細書において参照した全ての文献はそのまま言及により本明細書に組み入れられるものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/70 8314−4ＣＡ６１Ｋ 31/70 38/00 Ｃ０７Ｃ 46/00 38/21 46/10 Ｃ０７Ｃ 46/00 9284−4ＣＣ０７Ｄ 211/46 46/10 9360−4Ｃ 311/54 Ｃ０７Ｄ 211/46 9360−4Ｃ 311/92 １０１ 311/54 9455−4ＣＡ６１Ｋ 37/66 Ｇ 311/92 １０１ 9455−4Ｃ 37/02 (72)発明者カーデリナ、ジョンエイチ．、ザセカンドアメリカ合衆国、メリーランド州 21793、ウォーカーズヴィル、ハイランダーブールヴァード、9374 (72)発明者グスタフソン、カークアール. アメリカ合衆国、メリーランド州 21771、マウントエアリィ、ヘロンコート、 10095 (72)発明者デコステール、ローランアー. スイス国、セーアッシュ 1260、ニヨン、リュエルデムーラン、７ (72)発明者パーソンズ、イアンアメリカ合衆国、ニューヨーク州 14850、イサカ、ナンバー 2008、ヴァレンティンプレイス、120 (72)発明者パネル、ルイスアメリカ合衆国、メリーランド州 20802、シルヴァースプリング、カタリナテラス、11413 (72)発明者マクマホン、ジェイムズビー. アメリカ合衆国、メリーランド州 21701、フレデリック、エルローズコート、529 (72)発明者クラッグ、ゴードンエム. アメリカ合衆国、メリーランド州 20814、ベセスダ、エルスメアアヴェニュー、 5117

Claims

【特許請求の範囲】１．次のシリーズＡ、Ｂ、ＣおよびＤからなる群より選択される実質的に純粋な形態の抗ウイルス性ナフトキノン、その抗ウイルス性誘導体、およびそのプロドラッグ。（式中、Ｒ₁からＲ₁₂の各記号は同一または異なって、それぞれＨ、Ｃ₁〜Ｃ₁₀の直鎖状または分枝状の飽和または不飽和アルキル、アリール、ＯＣＨ₃またはＯＨである。）２．次のシリーズＡ、Ｂ、ＣおよびＤからなる群より選択される請求項１に記載の抗ウイルス性ナフトキノン。（式中、Ｒ₁からＲ₁₂の各記号は同一または異なって、それぞれＨ、Ｃ₁〜Ｃ₁₀の直鎖状または分枝状の飽和または不飽和アルキル、アリール、ＯＣＨ₃またはＯＨである。）３．次の化合物からなる群より選択される請求項１に記載の抗ウイルス性ナフトキノン、その抗ウイルス性誘導体、およびそのプロドラッグ。４．次の化合物からなる群より選択される請求項３に記載の抗ウイルス性ナフトキノン。５．次の工程を含む、コノスペルマム属の植物から抗ウイルス性ナフトキノンまたはその抗ウイルス性誘導体を単離する方法。（a）乾燥植物原料を有機溶媒で抽出して粗抽出物を得て、（b）次の工程により該粗抽出物から活性な抗ウイルス性ナフトキノンを単離する。（i）該粗抽出物を液−液分配して抗ウイルス活性画分を得て、（ii）該活性画分を遠心向流クロマトグラフィーに付して濃縮された抗ウイルス活性画分を得て、（iii）この濃縮された活性画分を低圧カラムクロマトグラフィーおよび／またはゲル浸透クロマトグラフィーに付して粗製の半精製抗ウイルス活性化合物を得て、（iv）該半精製活性化合物をＨＰＬＣに付して実質的に純粋な形態の抗ウイルス活性ナフトキノンを得る。６．抗ウイルス性ナフトキノンが抗ＨＩＶナフトキノンである請求項５に記載の方法。７．植物原料がConospermum sp．（Spjut 7139）からの原料である請求項５に記載の方法。８．次の工程を含む、抗ウイルス性ナフトキノンまたはその抗ウイルス性誘導体の合成方法。（a）適宜置換されたまたは無置換の２−，３−デオキシ−１，４−ナフトキノン化合物を、それぞれ同一または異なっていてもよく、それぞれ適宜置換されたまたは無置換の３−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン化合物または２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン化合物である２つのサブユニットと、酸または塩基触媒下でカップリングさせて、対応する抗ウイルス性三量体ナフトキノン化合物を得て、（b）抗ウイルス性三量体ナフトキノンを実質的に純粋な形態まで精製する。９．抗ウイルス性三量体ナフトキノンが、液−液分配、ゲル浸透クロマトグラフィー、低圧カラムクロマトグラフィー、遠心向流クロマトグラフィー、ＨＰＬＣ、および抗ＨＩＶバイオアッセイからなる群より選択される１以上の手段により精製される請求項８に記載の方法。１０．２−，３−デオキシ−１，４−ナフトキノン化合物が、対応する３−ヒドロキシまたは２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン化合物から３−ヒドロキシ基または２−ヒドロキシ基を次の工程により除去することにより調製される請求項８に記載の方法。（i）対応する３−または２−ｐ−ブロモ安息香酸エステル誘導体を調製し、（ii）対応する３−または２−ｐ−ブロモ安息香酸エステル誘導体をチオフェノールで処理して、対応する２，３ビスチオフェノール付加物を形成させ、（iii）対応する２，３ビスチオフェノール付加物をラネーニッケル還元に付して、所望の対応する２，３−デオキシ−１，４−ナフトキノン化合物を得る。１１．抗ウイルス有効量の請求項１に記載の少なくとも１つの化合物および医薬的に許容される担体を含有する抗ウイルス組成物。１２．請求項１に記載の抗ウイルス性化合物以外の少なくとも１つの併用抗ウイルス性化合物の抗ウイルス有効量をさらに含有する請求項１１に記載の組成物。１３．併用抗ウイルス性化合物が、ＡＺＴ、ｄｄＩ、ｄｄＣ、ガンシクロビル、フッ素化ジデオキシヌクレオチド、ネビラピン、Ｒ８２９１３、Ｒｏ 31-8959 、ＢＩ−ＲＪ−７０、アシクロビル、α−インターフェロン、および組換えＣＤ４からなる群より選択される請求項１２に記載の組成物。１４．抗ウイルス有効量の請求項３に記載の少なくとも１つの化合物および医薬的に許容される担体を含有する抗ウイルス組成物。１５．請求項３に記載の抗ウイルス性化合物以外の少なくとも１つの併用抗ウイルス性化合物の抗ウイルス有効量をさらに含有する請求項１４に記載の組成物。１６．併用抗ウイルス性化合物が、ＡＺＴ、ｄｄＩ、ｄｄＣ、ガンシクロビル、フッ素化ジデオキシヌクレオチド、ネビラピン、Ｒ８２９１３、Ｒｏ 31-8959 、ＢＩ−ＲＪ−７０、アシクロビル、α−インターフェロン、および組換えＣＤ４からなる群より選択される請求項１５に記載の組成物。１７．抗ウイルス有効量の請求項１に記載の少なくとも１つの化合物を宿主に投与することからなるウイルス感染症の予防または治療方法。１８．宿主がヒトである請求項１７に記載の方法。１９．ウイルス感染症がレトロウイルスによるものである請求項１８に記載の方法。２０．レトロウイルスがヒト免疫不全ウイルスである請求項１９に記載の方法。２１．抗ウイルス有効量の請求項２に記載の少なくとも１つの化合物を宿主に投与することからなるウイルス感染症の予防または治療方法。２２．宿主がヒトである請求項２１に記載の方法。２３．ウイルス感染症がレトロウイルスによるものである請求項２２に記載の方法。２４．レトロウイルスがヒト免疫不全ウイルスである請求項２３に記載の方法。２５．抗ウイルス性ナフトキノンがコノクルボンである請求項３に記載の抗ウイルス性ナフトキノン。２６．抗ウイルス有効量の請求項２５に記載の化合物および医薬的に許容される担体を含有する抗ウイルス組成物。２７．請求項１に記載の抗ウイルス性化合物以外の少なくとも１つの併用抗ウイルス性化合物の抗ウイルス有効量をさらに含有する請求項２６に記載の組成物。２８．併用抗ウイルス性化合物が、ＡＺＴ、ｄｄＩ、ｄｄＣ、ガンシクロビル、フッ素化ジデオキシヌクレオチド、ネビラピン、Ｒ８２９１３、Ｒｏ 31-8959 、ＢＩ−ＲＪ−７０、アシクロビル、α−インターフェロン、および組換えＣＤ４からなる群より選択される請求項２７に記載の組成物。２９．抗ウイルス有効量の請求項２５に記載の化合物を宿主に投与することからなるウイルス感染症の予防または治療方法。３０．宿主がヒトである請求項２９に記載の方法。３１．ウイルス感染症がレトロウイルスによるものである請求項３０に記載の方法。３２．レトロウイルスがヒト免疫不全ウイルスである請求項３１に記載の方法。