JPH08509226A

JPH08509226A - ビオチンやアビジンのポリマー複合体による病変の検出および治療法の改善

Info

Publication number: JPH08509226A
Application number: JP6523544A
Authority: JP
Inventors: グリフィス，ゲイリー・エル
Original assignee: イムノメディクス，インコーポレイテッド
Priority date: 1993-04-22
Filing date: 1994-04-22
Publication date: 1996-10-01
Also published as: CA2161109A1; WO1994023759A1; AU6666694A; EP0695194A1; IL109387A0; EP0695194A4; SG46472A1; US5482698A; AU674580B2

Abstract

(57)【要約】病変を検出するための方法とキットと組成物、および患者において病変を治療するためのそれらの使用が提供される。病変部位におけるターゲッティングの増幅を達成するため、マルチビオチンまたはマルチアビジン-ポリマー複合体を使用する。

Description

【発明の詳細な説明】ビオチンやアビジンのポリマー複合体による病変の検出および治療法の改善発明の背景１．発明の分野本発明は、ビオチンまたはアビジンまたはその両方の複合体を含む組成物を使用する複数段階の過程により、病的状態を検出または治療する方法の改善に関する。２．従来の技術の説明病的細胞と正常細胞、そして病原微生物に関連する種々の抗原決定基に対する抗体が、多種多様の病的状態または病変の検出および治療に使用されてきた。ターゲッティング抗体は、例えばHansenらの米国特許第3,927,193号およびGoldenb ergの米国特許第4,331,647号、第4,348,376号、第4,361,544号、第4,468,457号、第4,444,744号、第4,460,459号、第4,460,561号、第4,624,846号、第4,818,70 9号に記述されている様に、適切な検出または治療剤と複合体を形成している。これらの開示内容は全て引用することにより本明細書の一部をなすものとする。病変を検出する場合、高いシグナル対バックグランド比を達成する必要がある。治療の場合も病変に絶対的に高濃度の治療剤が付着し、合理的な期間の取り込みと結合が必要である。非ターゲッティング抗体のバックグランドレベルが高いことが、高いシグナル対バックグランド比の達成に対する主な障害であることは、かなり以前から認められている。この障害を克服するために、例えば上記引用のGoldenbergの特許に開示されている様に、種々の方法が開発されている。検出または治療剤の標的部位対バックグランド比を高めるために、プレターゲッティング法やビオチン／アビジン法の様な他の方法も更に開発されている。これらは、例えばGoldenbergらの米国特許第4,863,713号、Goodwin et al.，J．Nu cl．Med．29:226，1988、Hnatowich et al．J．Nucl．Med．28:1294，1987、Oeh r et al.，J．Nucl．Med．29:728,1988、Klibanov et al．J．Nucl．Med．29:19 51，1988、Sinitsyn et al.，J．Nucl．Med．30:66，1989、Kalofonos et al.， J．Nucl．Med．31:1791，1990、Schechter et al.，Int．J．Cancer 48:167，19 91、Paganelli et al.，Cancer Res．51:5960，1991、Paganelli et al.，Nucl ．Med．Commun．12:211，1991、Stickney et al.，Cancer Res．51:6650，1991 、およびYuan et al.，Cancer Res．51:3119，1991に報告されている。これらの文献は全て引用することにより本明細書の一部をなすものとする。卵白中に認められるアビジンは、ビタミンＢ複合体であるビオチンに対し非常に高い結合親和性を有する（Wilcheck et al.，Anal．Biochem，171:1，1988）。Streptomyces avidinii由来のストレプトアビジンは、アビジンと似ているが、非特異的組織結合力がより低く、しばしばアビジンの代わりに使用される。アビジンもストレプトアビジンもビオチンに対して四価であるので、前者がビオチンと結合する場合に、増幅が可能となる。従来の技術である２段階法において、ターゲッティング抗体は、アビジンまたはビオチンと複合体を形成させた後、患者に注入され、目的の腫瘍部位にアビジンまたはビオチンを局在させる。その後、画像化用アイソトープを付けたビオチンまたはアビジン（ターゲッティング抗体にどちらを結合させたかによって異なる）が注入され、アビジンまたはビオチンにそれぞれ結合することによって、一次抗体の部位に局在することとなる。１回目の注入後の２回目の注入のタイミングは非常に重要である。放射性同位元素標識アビジンまたはビオチンの注入が早すぎると、血流と非標的組織内のアビジン／ビオチン複合体が増加し、注入が遅すぎると、腫瘍における一次抗体の保持量が減少するため、腫瘍に対してターゲッティングできる量が減少する可能性がある。 Paganelliら（Int．J．Cancer 2:121，1988）とKalofonsら（J．Nucl．Med．3 1:1791，1990）は、上記方法の実現の可能性を証明した（前者はビオチニル化された抗体を使用し、後者はストレプトアビジンと複合体を形成された抗体を腫瘍に局在させるために使用した。）。Kalofonosら（同上）によって報告された研究において、10例中３例の患者が画像化の改善を示した。しかし、10例中８例の患者において、標識されたビオチン単独でも（抗体によるプレターゲッティングを行わずに）腫瘍を検出できたことも明らかにされた。 Paganelliら（J．Nucl．Med．31:735，1990およびCancer Res．51:5960，1991 ）は、３段階法を明らかにしている。この方法では、ビオチニル化された抗体が投与され、次いで標的に結合していない抗体を除去するためにコールドの、すなわち未標識の、複合体を形成していないアビジンを投与され、続いて放射性同位元素標識ビオチンが投与され、体内に保持されているアビジンに、恐らくアビジンがビオチニル化抗体と複合体を形成した場所に結合する。この方法によって、 Paganelliらは、腎臓以外で、高い腫瘍対正常臓器比を示すことができた。Pagan elliら（Cancer Res．51:5960，1991）は、市販のビオチニル化DTPA（ジエチレントリアミンペンタ酢酸）を使用したが、これはDTPAのカルボキシル基の２つを介して２つのビオチン残基に結合されたDTPAである。ビオチニル化DTPAの使用には２つの欠点がある。第一に、DTPAの５つのカルボキシル基の内の２つが置換されると、DTPAが治療用核種に生体内で強力に結合する能力が損なわれる。第二に、Greenら（Biochem．J．125:781，1971）によって報告された様に、アビジンの立体化学は、４つのビオチン結合部位がそれぞれ２つずつ巨大分子の反対側の面に位置し、同じ面に存在する２つの結合部位は、適当な鎖の長さのビスビオチニル化化合物により橋かけ結合できることが明らかにされている。Paganelliが使用したビスビオチニル化DTPAの鎖は十分長いため（22Å）、２つの結合部位の間（15Å）を橋かけ結合するのに十分な屈曲性を有する。これによって、この物質の１分子は、アビジンの２つの結合部位に結合し、可能な局在量が減少する。従って、病変部位に、より高レベルで、より選択的に標的を定め、保持できる検出および治療剤を可能にする優れた方法と組成物が必要とされている。発明の目的本発明の主な目的は、送達の絶対量が大きく、標的対非標的比が高い検出法または治療剤の送達法を提供することである。本発明のもう１つの目的は、より多量の検出剤または治療剤を、病変に標的を定めて投与するための複数段階の方法を提供することである。明細書と添付請求項を更に検討すれば、本技術分野に精通する者は本発明の更なる目的と利点を理解するであろう。発明の要約本発明は、患者の病変を検出または治療する方法の改善法に関する。本発明の方法は、公知の方法を改善したもので、以下のステップから成る。（a）ビオチン-タンパク質複合体またはアビジン-タンパク質複合体から成るターゲッティング組成物を患者に非経口注入するステップ。ここで、タンパク質は標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合し、タンパク質複合体が標的病変に優先的に付着する。（b）次に、（1）ターゲッティング組成物がビオチン-タンパク質複合体である場合には、アビジン、または、（2 ）ターゲッティング組成物がアビジン-タンパク質複合体である場合には、ビオチン、から成るクリアリング組成物（clearing composition）を非経口注入し、クリアリング組成物により、ターゲッティング組成物を非標的部位から実質的に除去させ、クリアリング組成物を標的病変に付着したターゲッティング組成物に結合させるステップ。そして、（c）（1）クリアリング組成物がビオチンの場合、アビジンと検出または治療剤とから、または、（2）クリアリング組成物がアビジンの場合、ビオチンと検出または治療剤とから成る検出または治療組成物を非経口注入し、該組成物を標的病変に付着させるステップ。改善点は、ステップ（a）または（b ）の組成物の少なくとも１つは、複数のアビジンまたはビオチン部位に結合して複合体を形成できるポリマーを更に含み、それによって、続いて投与される組成物が結合できる結合部位の数が増加し、それによって標的部位における検出または治療剤の量が増幅される。一実施例において、本発明方法は、患者における病変の検出または治療法を提供する。この方法は以下のステップから成る。（a）（1）マルチビオチン-ポリマー-タンパク質複合体、または、（2）ビオチン-タンパク質複合体から成る第一組成物を患者に注入するステップ。ここで、タンパク質は標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に結合し、ビオチン -ポリマー-タンパク質複合体を標的病変に付着させ、ビオチンレセプターを供給する。（b）（1）アビジン、（2）マルチアビジン-ポリマー複合体、（3）マルチアビジン-マルチ治療または検出剤-ポリマー複合体、（4）アビジン-治療または検出剤複合体、または、（5）マルチアビジン-治療または検出剤-ポリマー複合体から成るクリアリング剤（clearing agent）によって、循環血液中のビオチン- ポリマー-タンパク質複合体を除去させるステップ。（c）（1）アビジン、（2）マルチアビジン-ポリマー複合体、（3）マルチアビジン-マルチ治療または検出剤-ポリマー複合体、（4）アビジン-治療または検出剤複合体、または、（5）マルチアビジン-治療または検出剤-ポリマー複合体から成る限局性剤（localizing agent）を注入する。ここで、限局性剤はクリアリング剤（clearing agent）と同じでも、異なっていても構わず、また、同時に注入することも、クリアリング剤の後に注入することもでき、ビオチンレセプターに結合させることによって標的病変に限局性剤を局在させることができる。（d）（1）ビオチン-検出または治療剤複合体、（2）ポリマー-マルチビオチン複合体、または、（3）ポリマー-マルチビオチン-マルチ治療または検出剤複合体から成る組成物を注入し、（d）の組成物のビオチンを、（c）の限局性剤のアビジンレセプターに結合させるステップ。（e）ステップ（d）においてポリマーを含む複合体が使用された場合には、（1）アビジン-治療または検出剤複合体、（2）マルチアビジン-ポリマー複合体、（3）アビジン、または、（4）マルチアビジン-マルチ治療または検出剤-ポリマー複合体から成る組成物を注入し、ステップ（e）の組成物のアビジンを、ステップ（d）の限局性組成物のビオチンレセプターに結合させるステップ。（f）ステップ（e）においてアビジン-治療または検出剤複合体以外のものが注入された場合には、ビオチン-治療または検出剤複合体を注入し、標的病変のアビジンレセプターにビオチンを結合させるステップ。（g）治療または検出剤を使用して、標的病変を治療または検出するステップ。ここで、プロセスの少なくとも１のステップでポリマー複合体が使用され、ポリマーは十分剛性が高い立体化学構造を持つものとし、標的病変に既に存在する１つのレセプターに対し、複合体の１つのアビジンまたはビオチンだけが結合するようにする。非常に有利には、前記の標的病変に結合しないクリアリング・限局性剤中のアビジン結合治療または検出剤は、主に肝臓と腎臓によって容易に代謝され、排泄される。別の実施例において、本発明は、患者における病変の検出または治療法を提供する。この方法は以下のステップから成る。（a）マルチアビジン-ポリマー-タンパク質複合体またはアビジン-タンパク質複合体から成る第一組成物を患者に注入するステップ。ここで、該タンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に結合し、該タンパク質複合体を標的病変に付着させる。（b）（1）ビオチン、（2）マルチビオチン-ポリマー複合体、（3）マルチビオチン-マルチ治療または検出剤-ポリマー複合体、または、（4）ビオチン-治療または検出剤複合体、から成るクリアリング剤（clearing agent）を注入し、該クリアリング剤によって循環血液中の第一組成物のマルチアビジン-ポリマー-タンパク質複合体を除去させるステップ。（c）（1）マルチビオチン-ポリマー複合体、（2）マルチビオチン-マルチ治療または検出剤-ポリマー複合体、または、（3）ビオチン-治療または検出剤複合体、から成る限局性剤（localizing agent）を注入するステップ。ここで、限局性剤はクリアリング剤と同じでも、異なっていても構わず、また、同時に注入することも、クリアリング剤の後に注入することもでき、アビジンレセプターに結合させることによって標的病変に限局性剤を局在させることができる。（d）（1）アビジン-検出または治療剤複合体、（2）ポリマー-マルチアビジン複合体、または、（3）ポリマー-マルチアビジン-マルチ治療または検出剤複合体から成る組成物を注入し、この複合体のアビジンを、限局性剤のビオチンレセプターに結合させるステップ。（e）ステップ（d）においてポリマーを含む複合体が使用された場合には、（1）ビオチン-治療または検出剤複合体、（2）マルチビオチン-ポリマー複合体、または、（3）マルチビオチン-マルチ治療または検出剤-ポリマー複合体から成る組成物を注入し、この複合体のビオチンを、組成物（d）によって提供されるビオチンレセプターに結合させるステップ。（f）ステップ（e）においてビオチン-治療または検出剤複合体以外のものが注入された場合には、アビジン-治療または検出剤複合体を注入し、標的病変のビオチンレセプターに、この複合体のアビジンを結合させるステップ。（g）検出または治療剤を使用して、標的病変を検出または治療するステップ。ここで、本方法の少なくとも１つのステップでポリマー複合体が使用され、ポリマーに十分剛性が高い立体化学構造を持たせて、標的病変に既に存在する１つのレセプターに対し、複合体の１つのアビジンまたはビオチンだけを結合させる。非常に有利には、前記の標的病変に結合しないクリアリング・限局性剤中のビオチン結合治療または検出剤は、主に肝臓と腎臓によって容易に代謝され、排泄される。別の実施例において、本発明は患者における病変の検出または治療法を提供する。この方法は以下のステップから成る。（a）マルチビオチン-ポリマー-タンパク質複合体から成る第一組成物を患者に注入するステップ。ここで、該タンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に結合し、マルチビオチン-ポリマー-タンパク質複合体を標的病変に優先的に付着させ、標的病変に複数のビオチンレセプターを供給する。（b）アビジンを含む組成物を少なくとも１回注入し、非標的部位からマルチビオチン-ポリマー-タンパク質複合体を除去させ、複数のビオチンレセプターに結合させることによって標的病変にアビジンを局在させるステップ。（c）ビオチン-検出剤複合体またはビオチン-治療剤複合体を注入し、標的病変のアビジンレセプターにビオチンを結合させるステップ。（d）検出または治療剤を使用して、標的病変を検出または治療するステップ。別の実施例において、本発明は患者における病変の別の検出または治療法を提供する。この方法は以下のステップから成る。（a）ビオチン-タンパク質複合体から成る第一組成物を患者に注入するステップ。ここで、該タンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に結合し、ビオチン-タンパク質複合体を標的病変に優先的に付着させ、標的病変にビオチンレセプターを供給する。（b）少なくとも１分子以上のアビジンと複合体を形成するポリマーから成るクリアリングおよび限局性組成物を少なくとも１回注入し、非標的部位からビオチン-タンパク質複合体を除去させ、標的病変にしたビオチン-タンパク質複合体に結合させるステップ。ここで、各マルチアビジン-ポリマー複合体のアビジンの内の１つだけが、標的病変の１つのビオチンレセプターに結合するため、標的病変におけるアビジンレセプターの数は増加する。（c）ビオチン-治療または検出剤複合体を注入し、この複合体のビオチンを標的病変のアビジンレセプターにビオチンを結合させ、これによって標的病変に付着するビオチン-治療または検出剤の量を増加させるステップ。（d）治療または検出剤を使用して、標的病変を治療または検出するステップ。別の実施例において、本発明は患者における病変の別の検出または治療法を提供する。この方法は以下から成る。（a）ビオチン-タンパク質複合体から成る第一組成物を患者に注入するステップ。ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に結合し、ビオチン-タンパク質複合体を標的病変に結合させ、これによって標的病変にビオチンレセプターを提供する。（b）マルチアビジン-ポリマー-検出または治療剤複合体から成るクリアリングおよび限局性組成物を少なくとも１回注入し、非標的部位からビオチン-タンパク質複合体を除去させ、標的病変に局在させるステップ。ここで、各複合体のアビジンの内の１つだけが、標的病変のビオチンレセプターに結合する。これによって、標的病変に検出または治療剤が供給され、アビジン結合部位の数が増幅される。ここで、除去されたビオチン-タンパク質と、マルチアビジンや、ポリマー、検出または治療剤からなる付着しない複合体とは、代謝され、体内から排泄される。（c）ビオチン-検出または治療剤複合体を注入し、ステップ（b）の複合体によって供給される標的病変のマルチ-アビジン部位に、この複合体を増幅されたかたちで優先的に結合させるステップ。（d）検出または治療剤を使用して、標的病変を検出または治療するステップ。別の実施例において、本発明は患者における病変の別の検出または治療法を提供する。この方法は以下のステップから成る。（a）アビジン-タンパク質複合体から成る第一組成物を患者に注入するステップ。ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合し、アビジン-タンパク質複合体を標的病変に付着させ、これによって標的病変にアビジンレセプターを供給する。（b）マルチビオチン-ポリマー複合体から成るクリアリングおよび限局性剤を少なくとも１回注入し、非標的部位からアビジン-タンパク質複合体を除去させ、標的病変に該クリアリングおよび限局性剤を局在させるステップ。ここで、各マルチビオチン-ポリマー複合体のビオチンの内の１つだけが、標的病変に付着した各アビジン-ポリマー複合体によって供給されるアビジンレセプターに結合する。これによって、各マルチビオチン-ポリマー複合体は、標的病変に複数のビオチンレセプターを供給する。（c）アビジン-治療または検出剤複合体を注入し、この複合体を標的病変のビオチンレセプターに結合させ、これによって標的病変で利用できる治療または検出剤の量を増幅するステップ。（d）増幅された量の治療または検出剤を使用して、標的病変を治療または検出するステップ。別の実施例において、本発明は患者における病変の別の検出または治療法を提供する。この方法は以下のステップから成る。（a）アビジン-タンパク質複合体から成る第一組成物を患者に注入するステップ。ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合し、アビジン-タンパク質複合体を標的病変に付着させ、これによって標的病変にアビジンレセプターを供給する。（b）マルチビオチン-ポリマー-検出または治療剤複合体から成るクリアリングおよび限局性組成物を少なくとも１回注入し、非標的部位からアビジン-タンパク質複合体を除去させ、標的病変に該複合体を局在させるステップ。ここで、各マルチビオチン-ポリマー複合体のビオチンの内の１つだけが、標的病変に付着した各アビジンまたはポリマー複合体によって供給されるアビジンレセプターに結合する。これによって、各マルチビオチン-ポリマー検出または治療剤複合体は、標的病変に複数のビオチンレセプターを供給し、検出または治療剤を供給する。ここで除去されたビオチン-タンパク質と、非結合マルチビオチン-ポリマー-検出または治療剤複合体とは、代謝され、体内から排泄される。（c）アビジン-治療または検出剤複合体を注入し、複合体を標的組織のマルチ -ビオチンレセプターに増幅法で結合させるステップ。（d）標的病変の増幅された量の治療または検出剤を使用して、標的病変を治療または検出するステップ。詳細な説明標的部位において利用可能なビオチンまたはアビジン結合部位の数が増加するため、標的部位において利用可能な検出または治療剤の量が顕著に増加するので、本発明の方法は、従来の技術の方法よりも病変の選択的な検出と治療により有利である。３段階法による本発明のより好ましい実施例において、マルチビオチン-ポリマーターゲッティング抗体またはそのフラグメントを注入後、クリアリング剤（ clearing agent）および限局性剤（localizing agent）としてアビジンを投与する。次いで、第三段階として、ビオチンと複合体形成したアイソトープまたは薬物を投与する。別の好ましい３段階法による本発明方法において、第一ステップは、マルチビオチン-ポリマー抗体またはそのフラグメントの注入で、第二ステップはマルチアビジンまたはポリマーのクリアリング剤（clearing agent）および限局性剤（ localizlng agent）またはチェイスの注入である。第三ステップは、検出または治療剤と複合体形成したビオチンの注入である。後から注入される複合体を含むアビジンまたはビオチンが結合できる複数のビオチンまたはアビジン部位を供給し、それによって標的部位で利用可能な検出または治療剤の量を増幅するためにポリマーの使用を考慮に入れていない従来の技術の方法と比較すると、これらの方法はいずれも、病変部位に送達または保持される検出または治療剤の絶対量の見地から改善法と言える。勿論、所望により、薬剤を更に蓄積するためにこの手順を繰り返すことができる。更に、病変位置に局在させるタンパク質は、二重特異性抗体またはハイブリッド抗体も可能で、これによって少なくとも２本の抗体のアームが、病変に関連する異なる物質を指向する。これは、病変部におけるより高いレベルの付着と結合を達成するために好ましい。本発明のこれらの方法により、他者により以前に報告されている他の手順よりも改善された以下の成績が得られる。１．病変にターゲッティングされる検出および治療剤の絶対量が増加する。２．病変対正常臓器（腎臓を含む）比がより高い。それによって、３．病変の検出または治療が改善される。本発明の方法において使用される検出または治療剤は、以下のいずれか、または複数が可能である。Ａ．診断または治療用核種（例えば、アルファ線、ベータ線、ガンマ線、ポジトロン、Ｘ線および蛍光の放射物質や、電子または中性子の捕獲物質）。Ｂ．検出用または治療用の光活性化色素。Ｃ．細胞毒性物質（例えば、薬物、毒素、ホルモン、サイトカイン、ホルモン拮抗剤、レセプター拮抗剤）。Ｄ．分化物質（例えば、ビタミン、サイトカイン、オートクリン、ある種のホルモンと薬物）。本発明の方法は、癌、感染性疾患、心血管疾患およびその他の病的状態の検出（体内手技または体外画像化のいずれかにより）または治療に使用できる。体内検出手技には、術中、血管内または内視鏡手技が含まれ、腹腔鏡技術が含まれ、外科的に侵襲的なものも侵襲的でないものも含まれる。本発明の最も有用なポリマーは、限定された立体化学的構造を有するポリマーである。この様なポリマーは、ビオチン（またはアビジン）に相補的な種が後から注入された時に、各ビオチン（またはアビジン）が１つのアビジン（またはビオチン）部位に結合できる様にビオチン（またはアビジン）部位間の距離を十分に保つ。また、ポリマー複合体が後から注入され、複数のビオチンまたはアビジン部位がポリマーと複合体を形成している場合には、ビオチンまたはアビジン残基の位置と限定的な立体化学的構造によるポリマーの相対的な剛性は、複合体の複数の残基部位の実質的に１つだけが、その前に組成物が注入されたため既に標的部位に存在する相補的レセプター部位に、結合するできるようにするのに、十分である。例えば、ポリマーのバックボーンに置換されたビオチン単位は、標的病変に存在する２つのアビジンレセプターに結合することはできない。その理由は、（1）ポリマー複合体の各ビオチンはその隣接するビオチンから15Å以上離れており、また（2）ポリマーは立体的な剛性が十分高いため屈曲せず、２つ以上のビオチン単位を対応する数のアビジンレセプターに結合させることはできない。この方法で、ターゲッティング増幅が可能性の限界まで達成される。この様なポリマーは、本技術に精通する者によって、公知の市販薬剤から選択することができる。例えば、ポリアミノ酸、タンパク質、オリゴデオキシリボヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ポリイミン、多糖類、ポリアミン、ポリカルボン酸またはポルアルコール等から選択できる。好ましいのは、５から200kDの分子量のポリマーで、更に好ましいのは20から60kDである。より好ましいポリマーの例は、スターバースト-デンドリマー（starburst den drimer）またはデキストランで、置換のために適切に改変されており、最も好ましくは、限られた数のアミノ基を持つ。デキストランは、剛性の直鎖構造となっている。スターバースト-デンドリマーは、置換が可能な外側表面にアミノ基を持つ球状である。アルキル基の添加により改変されている市販のビオチン製品が入手可能である。本発明の使用に好ましいビオチンは、ビオチンそのものか、短いアルキル（C1 〜5）鎖を持つ改変されたビオチンである。長鎖アルキル基により変性されたビオチンを使用すると、隣接するビオチンがアビジンの４つのレセプターの１つに既に結合しているアビジンに、このビオチンが結合できることになる。その他の有用なビオチン誘導体には、活性エステル類、アミン類、ヒドラジド類、チオール基類で、ポリマーの相補反応基がアミン類、アシルおよびアルキル基を残す基、カルボニル基およびハロゲン化アルキル、またはミカエル型アクセプター（Michael-type acceptor）であるものが含まれる。アビジンは、高い親和性と特異性でビオチンと結合する能力によって機能的に定義されたタンパク質群である。アビジンは、小さなオリゴマータンパク質で、４つの同じサブユニットから構成され、それぞれがビオチンに対する結合部位を１つ持っている。従って、アビジンはアビジン１モル当たり４モルまでのビオチンと結合できる。アビジンには、（a）両生類、爬虫類、トリ類によって産生され、それらの卵の中に存在し、アビジンとして知られるタンパク質と、（b）ストレプトミセスに属するStreptomyces avidiniiによって産生され、ストレプトアビジンとして知られるタンパク質が含まれる。ここで使用される「アビジン」には、上記のタンパク質の全てが含まれる。各アビジン部分は、ビオチンに対し４つのレセプターを持っているので、本発明の方法から結果的に生じる増幅を起こすためには、アビジンを含む複合体が複数のアビジン部位を持つ必要はない。しかし、本発明の方法にマルチアビジン複合体を利用することは好ましいことである。病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合するタンパク質は公知である。例えば、抗体類は、癌関連物質に使用でき、また増加した、あるいは独自の抗原マーカーを示す循環器病変といった全ての病変に対して使用できる。例えば、循環器病変としては、血栓および塞栓を含む血管の凝血、心筋梗塞およびその他の臓器の梗塞、アテローム硬化性プラークの様な血管病変や、炎症性病変、感染性の寄生虫等が挙げられる。適切な応用例の具体例は、上記に引用され、記載されているGoldenbergの特許と出願に示されている。癌状態には、癌、メラノーマ、肉腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、神経膠腫、骨髄腫、神経腫瘍が含まれる。感染性疾患には、侵襲性微生物または寄生虫を原因とする疾患が含まれる。ここに使用される「微生物」とはウィルス、細菌、リケッチア、マイコプラズマ、原生動物、真菌、および類似の微生物を指し、「寄生虫」とは感染性の一般に顕微鏡レベルの微小な多細胞無脊椎動物、またはその卵または幼弱型で、抗体による除去または溶解または食作用破壊を受けやすい。例えば、マラリア寄生虫、スピロヘータ、蠕虫等があり、「感染物質」または「病原体」は、微生物と寄生虫の両者を指す。本発明の方法に有用なタンパク質物質には、タンパク質、ペプチド、ポリペプチド、糖タンパク質、脂質タンパク質等が含まれ、例えばホルモン、リンホカイン、成長因子、アルブミン、サイトカイン、酵素、免疫モジュレーター、レセプタータンパク質、抗体および抗体フラグメント等がある。本発明において特に関心の対象となるタンパク質物質は、抗体と抗体フラグメントである。「抗体と抗体フラグメント」という言葉は、一般に抗原と特異的に結合し免疫複合体を形成する免疫グロブリンまたはそのフラグメントを意味する。抗体は、例えば、IgG、IgM、IgA、IgD、IgE等のあらゆるクラスの免疫グロブリン全体、２つまたは複数の抗原またはエピトープに対し特異性を有するキメラまたはハイブリッド抗体が可能である。ポリクローナル抗体、好ましくはヒトまたは、例えば霊長類、ヤギ、ウサギ、マウス等の適切な動物由来のアフィニティー精製された抗体が可能である。モノクローナル抗体も本発明の使用に適しており、その高い特異性により好ましい。これらは、現在では従来の方法と考えられる免疫原性を持つ抗原製剤による哺乳類の免疫感作、免疫リンパ細胞または脾臓細胞と不死の骨髄細胞系列の融合、特異的なハイブリドーマクローンの分離によって、容易に調製される。本発明における抗体の有用性に影響を与えるのは、抗体の抗原特異性であるため、種間融合と高頻度可変領域の遺伝子工学的操作の様なより新しいモノクローナル抗体調製法も除外されない。例えば、ヒトモノクローナル抗体、種間モノクローナル抗体、キメラ（例えば、ヒト／マウス）モノクローナル抗体、遺伝子工学により調製される抗体等の、モノクローナル抗体の新しい調製法も利用できることは明らかである。本発明において有用な抗体フラグメントには、ハイブリッドフラグメントを含むF（ab'）₂、F（ab）₂、Fab'、Fab、Fv等が含まれる。好ましいフラグメントは、Fab'、F（ab'）₂、Fab、F（ab）₂である。免疫グロブリンの高頻度可変抗原結合領域を保持し、Fab'フラグメントと同じか、小さいサイズのサブフラグメントも有用である。これには、一般に遺伝子工学または組み換えタンパク質が含まれる。これは単鎖でも多重鎖でもよく、抗原結合部位を組み込んでいるか、あるいは天然免疫グロブリンフラグメントと実質的に同じ方法でターゲッティング手段として生体内で機能する。この様な単鎖の結合分子は、米国特許第4,946,778号に開示されており、これは引用することにより本明細書の一部をなすものとする。Fab'抗体フラグメントは、無傷の免疫グロブリンのペプシン消化によって調製可能なF（ab'）₂フラグメントの還元切断により好都合に調製できる。Fab抗体フラグメントは、還元条件下に無傷の免疫グロブリンのパパイン消化によって、あるいは免疫グロブリン全体を慎重にパパイン消化することによって得られるF（a b）₂フラグメントの切断によって調製することができる。フラグメントは遺伝子工学によっても産生できる。抗体と免疫グロブリンクラスの混合物も、ハイブリッド抗体と同様に使用できることに言及しなくてはならない。二重特異性とハイブリッドを含む多重特異性抗体と抗体フラグメントは病変の検出および治療に関する本発明の方法において特に好ましく、少なくとも２種類の実質的に単一特異性抗体または抗体フラグメントから構成され、この場合、上記抗体または抗体フラグメントの少なくとも２つが、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連する少なくとも２つの異なる抗原、あるいは標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質の少なくとも２つの異なるエピトープまたは分子に特異的に結合する。多重特異性抗体と二重特異性の抗体フラグメントは、米国特許第4,361,544号に開示されている抗腫瘍マーカーハイブリッドと類似の方法によって調製できる。ハイブリッド抗体のその他の調製法は、例えば米国特許第4,474,893号および第4,479,895号およびMilstein et al.，Immunol．Today，5299(1984)に開示されている。好ましいタンパク質は、マーカー物質に対する特異的免疫反応性を少なくとも 60%有し、その他の抗原または非標的物質に対する交差反応性が35%未満のタンパク質である。上記に開示されている様に、腫瘍抗原に対する抗体と病原体に対する抗体は公知である。例えば、腫瘍またはウィルス、細菌、真菌、寄生虫による感染症を含む感染病変によって産生される、あるいはそれらに関連するマーカーに特異的に結合する抗体と抗体フラグメントが、特にHansenらの米国特許第3,927,193号およびGoldenbergの米国特許第4,331,647号、第4,348,376号、第4,361,544号、第4 ,468,457号、第4,444,744号、第4,818,709号および第4,624,846号に開示されている。例えば、胃腸管、肺、乳、前立腺、卵巣、精巣、脳またはリンパ腫、肉腫またはメラノーマの様な抗原に対する抗体は特に有利に使用される。感染性疾患作用物質に対する多種多様のモノクローナル抗体が開発され、Eur ．J．Clin．Microbiol.の中のPolinによる概説に要約されており、簡単に入手できることが示されている。これらのモノクローナル抗体には、以下に示す病原体とそれらの抗体に対するモノクローナル抗体類（MAbs）が含まれる。抗細菌モノクローナル抗体類（anti-bacterial MAbs） Streptococcus agalactiae Lefionella pneumophilia Streptococcus pyogenes Escherichia coli（大腸菌） Neisseria gonorrhosae（淋菌） Neisseria meningitidis（髄膜炎菌） Pnemococcus（肺炎球菌） Hemophills influenzae B（Ｂ型インフルエンザ菌） Treponema pallidum（梅毒トレポネーマ） Lyme diseaxe spirochetes（ライム病スピロヘータ） Pseudomonas aeruginosa（緑膿菌） Mycobacterium Ieprae（ライ菌） Brucella abortus（ウシ流産菌） Mycobacteriumu tuberuculosis（ヒト結核菌） Tetunus toxin（破傷風トキシン）抗ウィルスMAbs HIV-１、-２、-３ Hepatitis A,B,C,D（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ型肝炎） Rabis virus（狂犬病ウィルス） Influenza virus（インフルエンザウィルス） Cytomegalovirus（サイトメガロウィルス） Herpes simplex １および２（単純ヘルペス１型および２型） Human serum parvo-like virus（ヒト血清パルボ様ウィルス） Respiratory syncytial virus（呼吸器シンシチウムウィルス） Varicella-Zoster virus（帯状庖疹ウィルス） Hepatitis B virus（Ｂ型肝炎ウィルス） Measles virus（麻疹ウィルス） Adenovirus（アデノウィルス） Human T-cell leukemia viruses（ヒトＴ−細胞白血病ウィルス） Epstein-Barr virus（エプシュタイン-バールウィルス） Murine leukemia virus*（ネズミ白血病ウィルス） Mumps virus（オタフクカゼウィルス） Vesicular stomatitis virus（水泡性口内炎ウィルス） Sindbis virus Lymphocytic choriomeningititis virus（リンパ球性脈絡髄膜炎ウィルス） Wart virus（疣贅ウィルス） Blue tongue virus（ブルータングウィルス）Ｓ Sendai virus（センダイウィルス） Feline leukemia virus*（ネコ白血病） Reo virus（レオウィルス） Polio virus（ポリオウィルス） Simian virus40*（シミアンウィルス40） Mouse mammary tumor virus*（マウス乳腺腫瘍ウィルス） Dengue virus（デング熱ウィルス） Rubella virus（風疹ウィルス） *＝動物ウィルス抗原生動物MAbs Plasmodium falciparum（熱帯熱マラリア原虫） Plasmodium vivax（三日熱マラリア原虫） Toxoplasma gondii（トキソプラズマ） Trypanosoma rangeli Trypanosoma cruzi Trypanosoma rhodesiensei Trypanosoma brucei Schistosoma mansoni（マンソン住血吸虫） Schistosoma japanicum（日本住血吸虫） Babesia bovis（ウシのバベシア症の病原種） Elmeria tenella Onchocerca volvulus（回旋糸状虫） Leishmania tropica（熱帯リューシュマニア） Trichinella spiralis（旋毛虫） theileria parva Taenia hydatigena（胞状条虫） Taenia ovis（ヒツジ条虫） Taenia saginata（無鉤条虫） Echinococcus granulosus（単包条虫） Mesocestoides corti抗マイコプラスマMAbs Mycoplasma arthritidis M.hyorhinis M.orale M.arginini Acholeplasma laidlawii M.salivarium M.pneumonia（肺炎マイコプラズマ）文献に報告されている感染性微生物に対して産生されるモノクローナル抗体類（MAbs）の更なる具体例を下記に示す。ヒト免疫不全ウィルス１型（HIV-1）のgp120糖タンパク質抗原に対するMAbsは公知であり、その様な抗体のいくつかは、ヒトにおいて免疫防御の役割を果たすことができる。例えば、Rossi et al.，Proc．Natl．Acad．Sci．USA，86:8055- 8058，1990を参照すること。ウィルス抗原とウィルスによって誘導される抗原に対するMAbsも公知である。このことは、エピトープを正しく選択することによって、治療標的と非治療標的を識別できることを示している。マラリア原虫に対するMAbsは、スポロゾイト、メロゾイト、シゾント、ガメトサイトステージに対して志向できる。モノクローナル抗体は、スポロゾイト（スポロゾイト周辺抗原）に対して産生されており、スロゾイトをin vitroと齧歯類において中和することが明らかにされている（N．Yoshida et al.，Science 207 :71-73，1980）。幾つかのグループが、トキソプラズマ感染症に関わる原虫の寄生虫T．gondii に対するMAbsを開発している（Kasper et al.，J．Immunol，129:1694-1699，19 82、同じく、130:2407-2412，1983）。幼住血吸虫の表面抗原に対して、MAbsが開発され、in vivoまたはin vitroで幼住血吸虫に作用することが見いだされている（Simpson et al.，Prasitology ，83:163-177，1981、Smith et al.，Prasitology，84:83-91,1982、Gryzch et al.，J．Immunol.，129:2739:2743，1982、Zodda et al.，J．Immunol，129:232 6-2 328，1982、Dissous et al.，J．Immunol，129:2232-2234，1982）。 Trypanosoma cruziは、シャーガス病の原因物質で、吸血サシガメによって伝播される。この寄生虫のある形態から別の形態（エピマスティゴートステージからトリポマスティゴートステージ）への分化をin vitroで特異的に阻害するMAb が産生されており、これは細胞表面の糖タンパク質と反応するが、この寄生虫の哺乳類（血流）型には、この抗原は存在しない（Sher et al.，Nature，300:639 -640，1982）。ヒトにおける主な感染症の大部分の原因微生物（細菌、ウィルス、原生動物、その他の寄生虫）に対し、適切なMAbsが開発されており、多くが過去にin vitro の診断目的に使用されている。これらの抗体と、従来の方法により産生できる新しいMAbsは、本発明において使用するのに適している。心血管病変の検出および治療に有用なタンパク質には、フィブリン特異性タンパク質が含まれ、例えばフィブリノーゲン、可溶性フィブリン、抗フィブリン抗体およびフラグメント、フラグメントE₁（橋かけ結合フィブリンの調節されたプラスミン消化により調製されたヒトフィブリンの60kDaのフラグメント）、プラスミン（新しく形成された血栓の溶解に関与する血液中酵素）、プラスミノゲン活性化因子（例えば、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、組織プラスミノゲン活性化因子）、ヘパリン、フィブロネクチン（450kDの粘着性血漿糖タンパク質）、血小板志向性タンパク質、例えば血小板、抗血小板抗体および抗体フラグメント、抗活性化血小板抗体、および抗活性化血小板因子等で、これらはKoblik e t al.，Semin．Nucl．Med.，19:221-237，1989によって概説されており、引用することによりこれらは全て本明細書の一部をなすものとする。本発明の方法において有用な放射性核種の中で、ガンマ線放射物質、ポジトロン放射物質、ｘ線放射物質、常磁性イオン、蛍光放射物質が検出または治療に適しているが、ベータおよびアルファ放射物質と中性子捕獲物質、例えばホウ素およびウラニウム等も治療に使用できる。本発明の方法に適した放射性核種には、下記が含まれる。すなわち、アクチニウム-225、アスタチン-211、ヨウ素-123、ヨウ素-125、ヨウ素-126、ヨウ素-131 、ヨウ素-133、ビスマス-212、臭素-77、インジウム-111、インジウム-113m、ガリウム-67、ガリウム-68、ルテニウム-95、ルテニウム-97、ルテニウム-103、ルテニウム-105、水銀-107、水銀-203、レニウム-186、レニウム-188、テルリウム -121m、テルリウム-122m、テルリウム-125m、ツリウム-167、ツリウム-168、テクネチウム-99m、フッ素-18、銀-111、白金-197、パラジウム-109、銅-67、リン -32、リン-33、イットリウム-90、スカンジウム-47、サマリウム-153、ルテチウム-177、ロジウム-105、プラセオジム-142、プラセオジム-144、テルビウム-161 、ホルミウム-166、金-199、コバルト-57、コバルト-58、クロム-51、鉄-59、セレニウム-75、タリウム-201、イッテルビウム-169。好ましくは、ラジオアイソトープは10〜7,000kevの範囲の粒子または放射線を放射し、より好ましくは、50 〜1,500kevである。体外画像化法に好ましいアイソトープには以下のものが含まれる。すなわち、ヨウ素-123、ヨウ素-131、インジウム-111、ガリウム-67、ルテニウム-97、テクネチウム-99m、コバルト-57、コバルト-58、クロム-51、鉄-59、セレニウム-75 、タリウム-201、イッテルビウム-169である。体内検出に最も好ましいアイソトープには以下のものが含まれる。ヨウ素-125 、ヨウ素-123、ヨウ素-131、インジウム-111、テクネチウム-99m、ガリウム-67 である。治療に好ましいアイソトープには、以下のものが含まれる。アクチニウム-225 、ビスマス-212、鉛-212、ビスマス-213、ヨウ素-125、ヨウ素-131、レニウム-1 86、レニウム-188、銀-111、白金-197、パラジウム-109、銅-67、リン-32、リン -33、イットリウム-90、スカンジウム-47、サマリウム-153、ルテチウム-177、ロジウム-105、プラセオジム-142、プラセオジム-143、テルビウム-161、ホルミウム-1 66、金-199である。治療剤の中で、本発明において有用なものは、アイソトープ、薬物、毒素、非電離放射線により活性化される蛍光色素、ホルモン、ホルモン拮抗剤、レセプター拮抗剤、酵素または別の物質により活性化されるプロ酵素、オートクリンまたはサイトカインである。これらは、Merck Index、Goodman and Gilman等の集成書と上記引用文献に記載されている。この様な薬物はいずれも、本技術において公知の従来の方法により、タンパク質と、ポリマーまたはビオチンもしくはアビジンの複合体を形成したり、タンパク質に搭載することが可能であり、上述の薬物との類似性によって説明される。本発明は、例えば光力学療法においてタンパク質や、ビオチンまたはアビジンと複合体を形成して使用され、適切な非電離放射線と組み合わせて使用される色素も考慮している。本発明の方法においては、光とポルフィリンも考慮されており、癌治療におけるそれらの使用は、van den Berg（Chemistry in Britain，May 1986，Vol.22,p p.430-437）に概説されている。この文献は引用することにより本明細書に組み込まれるものとする。本発明において有用な公知の細胞毒性物質は、Goodman et al.，「治療法の薬理学的基礎（The Pharmacological Basis of Therapeutics）」第６版、A．G．G ilmanら編、Macmillan Publishing Co．ニューヨーク、1980に一覧されている。これらには、タキソールや、メクロレタミン、シクロホスラミド、メルファラン、ウラシルマスタード、クロラムブシルの様なナイトロジェンマスタード類や、チオテパの様なエチレンイミン誘導体類、ブスルファンの様なアルキルスルホネート類や、アルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾシンの様なニトロソ尿素類、ダカルバジンの様なトリアゼン類、メトトレキサートの様な葉酸類似体類、フルオロウラシル、シタラビン、アザリビンの様なピリミジン類似体類、メルカプトプリン、チオグアニンの様なプリン類似体類、ビンブラスチン、ビンクリスチンの様なビンカアルカロイド類、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、ミスラマイシン、ミトマイシンの様な抗生物質類、L-アスパラギナーゼの様な酵素類、シスプラチンの様な白金配位錯体類、ヒドロキシウレアの様な尿素置換物質類、プロカルバジンの様なメチルヒドラジン誘導体類、ミトーテンの様な副腎皮質抑制剤類、そして、副腎皮質ステロイド（プレドニソン）、プロゲスチン類（カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロプロゲステロン、酢酸メゲストロール）、エストロゲン類（ジエチルスチルベストロールおよびエチニルエストラジオール）、抗エストロゲン類（タモキシフェン）、アンドロゲン類（プロピオン酸テストステロンおよびフルオキシメステロン）の様なホルモンおよび拮抗剤類が含まれる。細胞内タンパク質合成を障害する薬物も、本発明の方法に使用できる。この様な薬物は、本技術に精通する者にとって公知であり、プロマイシン、シクロヘキシミド、リボヌクレアーゼ等が含まれる。毒素も本発明の方法において使用できる。治療剤として有用な毒素は、本技術に精通する者にとって公知であり、例えばアブリン、アルファ毒素、ジフテリア毒素、外毒素、ゲロニン、アメリカヤマゴボウ抗ウィルスタンパク質、リシン、サポリンの様な植物および細菌毒素が含まれる。毒素は、その天然の形態で、細胞を死滅させるために、細胞結合機能、細胞毒性機能、毒性作用を細胞内に輸送する機能の少なくとも３つの異なる生化学機能を必要とする。本発明において有用な修飾された毒素は、天然毒素の細胞結合機能を提供するドメインが機能しない点で天然毒素とは異なっている。なぜならば、そのドメインは部分的あるいは完全に欠失しているからである。本発明において有用なその他の治療剤には、抗DNA、抗RNA、放射性同位元素標識オリゴヌクレオチドが含まれ、例えば抗センスオリゴデオキシリボヌクレオチド、抗タンパク質、抗クロマチン細胞毒性または抗微生物剤等がある。本発明の方法において有用なタンパク質は、本技術において公知の種々の方法によって標識あるいは複合体形成が可能である。これらの方法の多くが上記に引用されている米国特許と特許出願に開示されている。Rayuduの前記引用書中、およびChilds et al.，J．Nuc．Med.，26，293（1985）も参照のこと。in vivoで使用するためのアイソトープを標識するのに適した従来の放射性同位元素標識方法はいずれも、一般に本発明による検出剤の標識に適している。アビジンまたはビオチンは、本技術に精通する者にとって公知の方法により、薬物、毒素、ホウ素およびウランの様な中性子捕獲物質、アイソトープ、非電離放射線によって活性化される蛍光色素、ホルモン、オートクリン、サイトカイン、細胞防御剤等の治療剤との複合体を形成することができる。引用することにより本明細書に組み込まれるShinらの米国特許第5,057,313号に、その様な方法の１つが提示されている。アビジンを検出または治療剤と複合体を形成させる方法のその他の具体例として以下が挙げられる。すなわち、（a）ヨウ素と複合体を形成するためのクロラミンＴまたはボルトン-ハンター法、（b）テクネチウムまたはレニウムと複合体を形成するためのGriffith et al．（Cancer Res．51:4594，1991）またはFritz berg et al．（米国特許第5,120,526号）により報告された方法、（c）金属各種と複合体を形成するための二官能基キレート化剤を介するMearesらによって報告された方法（Br．J．Cancer 62:21,1990）である。更に、アビジンまたはビオチンは、アミノ基を含むタンパク質に関して報告された方法により、デンドリマーと結合させることができる。この方法はHnatowich et al．（J．Nucl．Med．28: 1294，1987）により報告されている。ビオチンは、リジンおよびシステイン残基により、また利用可能な場合にはそれらの酸化された炭水化物基により、タンパク質（抗体およびそれらのフラグメントを含む）との複合体を容易に形成することができる。これらの方法を下記に例示する。ビオチンまたはアビジンとデキストランの複合体を形成する方法には、適切な誘導体基を含むハプテンとデキストランとの複合体を形成する方法が含まれ、これは引用することにより本明細書に組み込まれるShinらの米国特許第5,057,313 号に開示されている。ビオチンとスターバースト-デンドリマーの複合体を形成する方法の１つは、第３世代から第10世代のスターバースト-デンドリマー溶液（0.01から100mmol）を、トリス、ヘペス、燐酸塩、炭酸塩またはホウ酸塩緩衝液（１から2000mmol）中で、N-ヒドロキシサクシンイミドビオチンまたはN-ヒドロキススルホサクシンイミドビオチン（0.01mmolから10mol）と処理する方法である。溶解度を高めるために、DMFまたはDMSの様な補助溶媒を70%の量まで添加してよい。4〜100℃で0 .25から24時間反応させる。置換されたポリマーは、透析またはサイズエクスクルージョンまたはイオン交換クロマトグラフィーにより精製される。ビオチン対ポリマーの置換率は、HABA試薬と遊離アミノ基の標準光度計測法により、例えばフルオレサミン（flourescamine）またはニンヒドリンにより決定される。アビジンとスターバースト-デンドリマーの複合体を形成する方法の１つは、第３世代から第10世代のスターバースト-デンドリマー溶液（0.01から100mmol）を、炭酸カリウムまたは水素化ナトリウム等の塩基を適宜添加したDMF、トルエンまたはDMSOの様な適切な溶媒中で、無水マレイン酸（0.01から1000mmol））と処理する方法である。25〜170℃で１から96時間反応させ、反応を完了させるために、反応中に形成された水を除去するための装置を選択することができる。この条件と同様の反応条件は公知であり、文献（Hargreaves et al．Chem．Rev．7 0:439-469， 1970）に報告されている。反応混合物は、マレイミド基を保持するためpH7以下の緩衝液中で、サイズエクスクルージョンまたはイオン交換クロマトグラフィーまたは透析により精製される。デンドリマー上のマレイミド置換率は、複合体を形成したイミドの吸光度と反応前後のアミノ基の定量により、フルオレスサミンまたはニンヒドリンの様な試薬を用いて分光光度計測法により決定される。アビジンは、２-メルカプトエタノールの様なチオール剤により、限られた数のジスルフィド結合を切断して還元するか、あるいはタンパク質に遊離チオール基を挿入することが知られている試薬と反応させる。例えば、後者の方法において、トリス、ヘペス、燐酸塩、炭酸塩またはホウ酸塩緩衝液中のアビジン溶液（0.001 から1000mmol）は、２-イミノチオラン（0.001から1000mmol）と処理される。４ ℃から50℃で0.25から24時間反応させる。置換されたアビジンは上記の様に精製され、チーオル基の数はエルマン反応により決定される（Ellman，Arch．Bioche m．Biophys．82:70-77，1959）。マレイミド-デンドリマー（0.001から100mmol）とチオール-アビジン（0.001 から100mmol）はpH5〜８の適当な緩衝液中で、４から50℃で、0.25から24時間混合される。複合体は、重合反応物の正確な性質とサイズに準じて、サイズエクスクルージョン、イオン交換、アフィニティーまたは疎水性相互作用クロマトグラフィーにより精製される。そのままのゲル／SDSゲルにより複合体のサイズが決定され、上記に記載されている様に、HABA試薬によりビオチン結合能が分析される。ポリマーが付いたマルチアビジン／ビオチンと活性を有する物質の複合体調製法は、本技術に精通する者にとっては公知である。下記の具体例に１つの方法が解説されている。有利には、複合体を含むタンパク質の生理食塩水は、例えば、１回投与単位約 1.0〜500mgのタンパク質複合体／バイアルとして、滅菌バイアルに計り入れられ、バイアルは栓をし、密封され、低温で保存されるか、あるいは凍結感想され、栓を付け、密封され、保存される。本発明の検出または治療プロトコールの実施例において、ビオチン-ポリマー- タンパク質複合体は、通常タンパク質投与量0.5から200mgで、非経口注入することができる。これは、単回注入投与も、分注投与も可能である。１〜５日後、より好ましくは２日以内、第一薬剤が、抗体フラグメントまたはサブフラグメントの様な小さく、速やかにターゲッティングできる分子を含む場合には更に１日以内に、例えば2.0から200.0mgのアビジンの様な未標識クリアリング剤（clearing agent）を非経口注入する。クリアリング剤と限局性剤は、１回で注入することも、あるいは分けて注入することも可能であり、条件によっては、クリアリング剤と限局性剤を２回に分けて投与することが好ましい。第三ステップは、検出または治療剤と複合体を形成したビオチンの注入である。第三ステップの試薬は、第二ステップから24時間以内に非経口投与できる。ある検出の実施例において、第三ステップは、病変に標的を定める抗体または抗体複合体に結合されたビオチンと複合体を形成した111-Inが関与する。最後の注入から24時間以内に、より好ましくは４時間以内に、適切なコリオメータが装備されたガンマカメラにより、 111-Inに関する173kevおよび247kevの様な、使用される検出用アイソトープに適したエネルギーウィンドウを選択し、プラナーおよびシングルフォトンエミッションCTスキャンが行われる。本発明の検出または治療プロトコルの別の実施例において、ビオチン-病変-ターゲッティングタンパク質複合体を非経口注入することができる。通常のタンパク質投与量は２から200mgで、より好ましくは５から50mgの範囲である。これは、単回注入投与も、分注投与も可能である。１〜５日後、より好ましくは２日以内、第一の薬剤が、抗体フラグメントまたはサブフラグメントの様な小さく、速やかにターゲッティングできる分子を含む場合には更に１日以内に、マルチアビジン-ポリマー複合体クリアリング剤を非経口注入する。第一ステップから遅れるほど、クリアリング剤と限局性剤の投与量（および比率）を下げる。クリアリング剤と限局性剤は、１回で注入することも、あるいは分けて投与することも可能であり、クリアリング剤と限局性剤を少なくとも２回に分けて投与することが好ましく、通常は２時間以内の様に、短時間で実施する。第三ステップは、適宜検出または治療剤と複合体を形成したビオチンを２から200mg単回あるいは分注投与により非経口投与する。患者または治療法の個々の要求に応じた調製法の変更および改変、またラジオアイソトープが供給される様な変更、あるいはラジオアイソトープが利用できる様になる様な変更は、通常の技術者にとって明らかである。組成物の投与経路には、静脈内、動脈内、胸膜腔内、腹腔内、クモ膜下腔内、皮下または潅流が含まれる。本発明の方法の一応用例は、磁気共鳴画像化法（MRI）に関するものである。この場合、例えば適切に放射性同位元素標識された複合体またはMR造影剤を付けた複合体を、病変の画像を得ることを目的として投与する。本発明の方法は、シンチグラフィまたは磁気共鳴造影剤のどちらかを用いて実施できる。より複雑な装置とデータ処理を要するが、これらの造影剤を組み合わせて使用することも可能である。本発明の方法によるシンチグラフィ画像化は、目的の病変のシンチグラムを得ることによって達成される。シンチグラムは50〜500kevの範囲のエネルギー検出用ウィンドウを１つまたはそれ以上備えたガンマ画像化カメラによって通常撮影される。より高いエネルギー、ベータまたはポジトロン放射線のラジオアイソトープは、適切な検出器を備えた画像化カメラの使用を必要とし、これらは全て本技術において従来の方法である。シンチグラフィデータは、後に処理するためにコンピュータ内に保存することができる。腫瘍またはその他の病変の検出または治療に有用な方法は、米国特許第4,782, 840号、米国特許第4,934,412号、および申請中の米国出願第07/879,857号に開示されており、これらの文献の開示内容は引用することにより本明細書に組み込まれているものとする。本発明の方法は、これらの引用文献に開示されている方法を強化するために使用することができる。磁気共鳴画像法（MRI）は、造影剤がラジオアイソトープではなく、磁気共鳴（MR）増強種を含む点以外は、シンチグラフィ画像化法と類似の方法で達成される。磁気共鳴現象がシンチグラフィとは異なる原理で作動することは明らかである。通常、発生されるシグナルは、画像化される領域の水分子中の水素原子核中のプロトンの磁気モーメントの緩和時間と相関する。磁気共鳴造影剤は、緩和速度を増大することによって作用し、これによって造影剤が付着している領域の水分子と体内の別の場所にある水分子の間のコントラストを増大する。しかし、造影剤の作用は、T₁とT₂の両者を短縮することで、前者によってコントラストは上昇し、後者によってコントラストは低下する。従って、この現象は濃度依存性で、最大効果を得るための常磁性種の至適濃度が通常存在する。この至適濃度は、使用される特定の造影剤、画像化部位、画像化モード、すなわちスピンエコー法、飽和回復法、反転回復法または種々のその他のT₁またはT₂に高度に依存する画像化技術、造影剤が溶解または懸濁されている媒質の組成物によって変わる。これらの要因とそれらの相対的な重要性は本技術において公知である。例えば、Py kett，Scientific American，246，78（1982）、Runge et al.，Am．J．Radiol. ，141，1209（1983）を参照。 MR造影剤は、患者の安全性と機器の設計に合った、合理的に達成できる磁場強度を用いて、体外カメラで検出するのに十分な量が存在しなくてはならない。この様な造影剤の必要条件は、媒質中の水分子に対する効果を有するこれらの造影剤に関連した技術においては公知であり、特に、Pykettの前記引用文献中および Runge et al．の前記引用文献中に開示されている。 MRI造影剤は、本技術分野において公知であり、例えば、ガドリニウム、鉄、マンガン、レニウム、ユウロピウム、ランタン、ホルミウム、テルビウム等がある。 MRスキャンは、シンチグラフィデータと同様にコンピュータ内に保存され、画像処理される。更なる詳細な説明はなくても、本技術に精通する者は、前記の説明を用いて、本発明を全判ににわたり利用できるものと確信する。従って、以下の好ましい例は単なる説明のためのものであり、本発明を制限することを目的とするものでは決してない。以下の例において、特に表示されていない限り、温度は全て、補正せずにセ氏温度で提示されている。割合とパーセンテージは全ての重量表示である。従って、これらの例は、特に癌とその他の病的状態の検出および治療のために標的を定められた病変において、治療または検出剤を増幅する方法と試薬に関する改善法である。例例１抗体または抗体フラグメントとビオチンの複合体形成 a）リジン残基を介する場合適切な濃度（0.05〜0.5M）とやや高いpH（7.0〜9.5）で、アミンを含まない緩衝液（例えば、ホウ酸塩、燐酸塩、その他）中に含まれる１〜20mg/mlの濃度の抗体または抗体フラグメントを、１〜100モル過剰のＤ-ビオチンまたはスペーサーアームを持つＤ-ビオチン（例えば、スクシンイミド-６-［ビオチンアミド］ヘキサノエート）の活性化エステルと混合する。ジメチルホルムアミド（DMF）またはジメチルスルホキシド（DMSO）の様な補助溶媒を加えて、最終濃度20%までとし、反応物の溶解度を高めることができる。反応溶液を４℃から37℃の温度に維持し、１〜 24時間撹拌する。反応時間終了時に、サイズエクスクルージョンクロマトグラフィーまたは透析により、改変されたタンパク質を、非結合ビオチンとその他の低分子量の汚染物質から分離する。 b）システイン残基を介する場合 0.1〜0.5Mトリス緩衝液、pH8.7中の５〜20mg/mlの濃度の抗体または抗体フラグメントを、2-メルカプトエタノールの中に0.5〜5mg/mlとなる様に調製する。反応溶液を４〜37℃の温度で５〜120分間放置する。還元されたタンパク質を、5 0mM酢酸塩緩衝液、pH4.5の中で、サイズエクスクルージョンクロマトグラフィーにより、未反応のチオールから分離する。タンパク質の濃度と抗体分子当たりのチオール基の数をこの時点で決定することができる。アミンを含まないpHが中性の緩衝液中に含まれる１〜20mg/mlの濃度の還元された抗体または抗体フラグメントを、１〜100モル過剰のビオチン-マレイミド（N-ビオチニル-N-［6-マレイミドヘイサノイル］ヒドラジド）（Sigma Chem．Co.）と混合する。DMFまたはDM SOの様な補助溶媒を加えて、最終濃度20％までとし、反応物の溶解度を高めることができる。反応溶液を４℃から37℃の温度に維持し、１〜24時間撹拌する。反応時間終了時に、サイズエクスクルージョンクロマトグラフィーまたは透析により、ビオチニル化されたタンパク質を、非結合ビオチンとその他の低分子量の汚染物質から分離する。 c）炭水化物部分を介する場合１〜20mg/mlの濃度の抗体または抗体フラグメントを、室温で１〜4時間、メタ過ヨウ素酸ナトリウムと処理し、燐酸緩衝液中に最終濃度0.1-10mgとなる様にする。エチレングリコールを加え、残りの過ヨウ素酸塩を分解する。酸化されたIg Gを燐酸緩衝液中でサイズエクスクルージョンクロマトグラフィーにより低分子量汚染物質から精製する。酸化された抗体（１〜20mg/ml）を、アミンを含まない緩衝液（例えば、燐酸塩、炭酸塩、その他）中の１〜100モル過剰のビオチンヒドラジド（Pierce Chemical Co.）と、中性のpH（5.0〜8.0）で、１〜48時間、４〜37 ℃で反応させる。カップリングの至適時間後に、pH7以上に調整したシアノボロハイドライドナトリウムを添加することにより精製されたヒドラゾンを還元する。ビオチニル化された抗体をサイズエクスクルージョンクロマトグラフィーまたは透析により精製する。 d）付加されたチーオル基を介する場合適切な濃度（0.05〜0.5M）とpH（７〜10）で、アミンを含まない緩衝液（ホウ酸塩、炭酸塩等）中に含まれる１〜20mg/mlの濃度の抗体または抗体フラグメントを、１〜100モル過剰の1-イミノチオレンハイドロクロライド（Pierce Chemic al Co.）と混合する。ジスルフィド結合形成の阻害を促進するために反応混合物をEDTA中に１〜100mMとなる様に調製し、４〜37℃で１〜4時間維持する。改変されたタンパク質をpH5.0〜7.0の中性からやや酸性の緩衝液（酢酸塩、クエン酸塩等）中でサイズエクスクルージョンクロマトグラフィーにより精製する。精製されたスルフヒドリル基で置換された抗体（１〜20mg/ml）を、１〜100モル過剰のビオチンマレイミドと混合する。DMFまたはDMSOの様な補助溶媒を加えて、最終濃度20％までとし、反応物の溶解度を高めることができる。反応溶液を４℃から 37℃の温度に維持し、１〜24時間撹拌する。反応時間終了時に、サイズエクスクルージョンクロマトグラフィーまたは透析により、ビオチニル化されたタンパク質を、非結合ビオチンとその他の低分子量の汚染物質から分離する。 e）ビオチンとFab'フラグメントの部位特異的複合体形成 pH6〜８の燐酸緩塩緩衝液中に含まれる５〜20mg/mlの濃度の抗体F（ab'）₂フラグメント（無傷の抗体のペプシン消化によって得られる）を、新しく調製されたL-システインと処理し、最終システイン濃度１〜50mg/mlを得る。４〜37℃で１〜24時間反応させる。この期間が終了した時点で、Fab'フラグメントを、サイズエクスクルージョンクロマトグラフィーによりpH4.0-6.0の酸性緩衝液（酢酸塩等）中で低分子量汚染物質から精製する。Fab'フラグメントを、pH5.0〜7.0で１〜100 モル過剰のビオチン-マレイミドと反応させる。DMFまたはDMSOの様な補助溶媒を加えて、最終濃度20%までとし、反応物の溶解度を高めることができる。反応溶液を４℃から37℃の温度で、１〜24時間撹拌する。反応時間終了時に、サイズエクスクルージョンクロマトグラフィーまたは透析により、ビオチニル化された抗体を、非結合ビオチンとその他の低分子量の汚染物質から分離する。 f）タンパク質のビオチニル化の程度を決定する。少量のビオチニル化抗体を、0.1M燐酸塩緩衝液中で10分間56℃まで加熱し、少量の１%プロナーゼ（Sigma Chemical Co.）により酵素消化する。一晩消化させる。消化物を、pH7.0の0.1M燐酸塩緩衝液中で100μMの2-（4'-ヒドロキシアゾベンゼン）-安息香酸（HABA）溶液を飽和させた10μMのアビジン溶液を用いて分析する。アビジン-HABA溶液を、容量を増加させながら消化されたビオチニル化抗体と、１〜10mMのビオチンを含む標準ビオチン溶液によって滴定する。500nMで吸光度の変化を測定し、プロナーゼで消化されたビオチン抗体中のビオチンの濃度をアビジン-HABAの滴定曲線を参考にして計算する。例２マルチビオチン-スターバースト-デンドリマー-抗体Fab'フラグメントの調製上記明細書に一般的に記述されている方法で調製されたトリス塩酸緩衝液（01 M、pH8.0、１ml）中に含まれる0.001モルのマルチビオチニル化-スターバースト -デンドリマーを、ジメチルスルホキシド（DMSO、0.2ml）中のブロモアセチルクロライド（0.02mmol）と、後者を撹拌しながら１時間にわたって滴加して、反応させる。反応物を室温で更に１時間撹拌し、デンドリマーをG-10サイズエクスクルージョンカラムで精製する。結腸特異性抗原ｐに結合するモノクローナル抗体のFab'フラグメントを、pH7.4の40mM燐酸塩緩衝液（PBS）に溶解された50mg/ml のL-システイン溶液により、F（ab'）₂フラグメントの20mg/ml溶液を37℃で１時間還元し、続いて、pH4.5、0.1Mの酢酸塩緩衝液（ABS）中で、アクリルアミドカラムにかけて、Fab'フラグメントを精製する。Ellmanの方法によりジニトロジチオ安息香酸（DTNB）を用いてFab'フラグメントを分析すると、Fab'あたり２〜３個の遊離チオール基が分析される。ブロモアセチルマルチビオチニル化デンドリマー（0.0005mmol）を、0.1M、pH 7.5のトリス塩酸緩衝液中の還元された抗体Fab'フラグメント（0.0005mmol）の溶液と混合し、溶液を室温で３時間撹拌する。Fab'-（ビオチン）_n-デンドリマーフラグメントは、０から1Mの塩化ナトリウム勾配において、50mM酢酸ナトリウム中で平衡化されたS-セファロースのベッド上で精製する。例３マルチビオチニル化された40キロドルトンのデキストランの調製Ａ．室温の暗所で混合後１時間撹拌することにより１グラムのデキストラン（ 40kDMW）を過ヨウ素酸ナトリウム（0.33g）で部分的に酸化する。この様にして形成されたポリアルデヒドデキストランを、アミコンフィルター装置による緩衝交換により精製し、凍結乾燥し、白色粉末を得る。次に、PBS緩衝液中で室温で４時間、ポリアルデヒドデキストラン（0.02mmol ）を、ビオチンヒドラジド（１mmol）と反応させ、ヒドラゾン誘導体を生成する。水素化ホウ素ナトリウム（３mmol）を添加し、室温で２時間撹拌することにより、ヒドラゾンを還元する。次に、ビオチニル化デキストランを、50mMのABS緩衝液中のG-25ゲル濾過カラムで精製し、低分子量汚染物質を除去する。ビオチン置換レベルを、HABAテスト法により推定し、正確に計量された量のビオチンに対する滴定により確認する。Ｂ．別の方法において、ポリアルデヒドデキストラン（0.02mmol）を1,3-ジアミノ-2-ヒドロキシプロパン（２mmol）と、室温で24時間反応させ、次に水素化ホウ素ナトリウム（３mmol）と室温で更に２時間処理する。このアミノ-デキストランを、p H4.5の50mMのABS緩衝液中のG-25サイズエクスクルージョンカラムにかけて精製し、トリニトロベンゼンスルホン酸（TNBS）と反応させ、分光光度法によりアミノ基置換レベルを決定する。アミノ基基準化合物に対して分析すると、デキストラン当たり50から100のアミノ基置換レベルが得られる。次にアミノデキストラン（0.001mmol）をビオチンのN-ヒドロキシスクシンイミドエステル（0.05mmol ）と、pH8、25℃で24時間反応させる。次に、pH4.5の50mMのABS中のG-25サイズエクスクルージョンカラムにかけ、（ビオチン）デキストランを低分子量汚染物質から分離する。ビオチン置換レベルをHABAテスト法により推定し、残りの未反応アミノ基をTNBSにより更に確認する。例４マルチビオチン-デキストラン-抗体フラグメントの調製Ａ．例3bにおいて調製されたビオチニル化アミノ-デキストラン（0.001mmol）を、ブロモアセチルクロライド溶液（0.01mmol）と、pH7.5、25℃で、２時間処理する。改変されたビオチニル化デキストランを、遊離スルフヒドリル基を含む抗体と反応させる前に、アクリルアミドサイズエクスクルージョンカラムにかけて精製する。抗体のスルフヒドリル基は、チーオル剤による抗体の還元によって生成される。0.1M、pH8.7のトリス塩酸緩衝液中の20mg/mlの濃度の抗体を、2-メルカプトエタノールと処理し、最終濃度25mMにする。反応溶液を４℃で10分間撹拌し、還元されたタンパク質をサイズエクスクルージョンクロマトグラフィーにより精製する。抗体濃度と抗体１モル当たりのスルフヒドリル基の比率を、ジチオジニトロ安息香酸（DTNB）を使用し、標準曲線を参考にして、エルマン反応により決定する。２〜３個の遊離チオール基を含む還元された抗体を、上記の如く調製され、限定された数のブロモアセチル基を持つブロモアセチル-ビオチン-デキストラン誘導体と、１:２の比率でpH7.5、37℃で３時間混合する。複合体を、イオン交換またはサイズエクスクルージョンまたは疎水性相互作用クロマトグラフィー（HI C）により精製し、HPLCにより分析し、ビオチン含有量と抗体濃度を上記記載と同様の方法で決定する。複合体を、その関連する抗原の免疫反応性保持レベルと、定量的アビジン結合能に関して分析する。Ｂ．別の方法において、抗体またはフラグメント上の必要とされる遊離チオール基は、文献（Blattler et al．Biochemistry，24:1517-1524，1985）に報告されている様に、2-イミノチオランによりタンパク質を置換することによって得ることができ、上記に記載されている様に、チオール-抗体の分析、そのビオチン- デキストランとのフラグメント形成、その後の精製、分析へと進む。例５マルチアビジン-デキストラン複合体の調製ポリアルデヒドデキストラン（0.001mmol）とアビジン（0.03mmol）を混合して、40mMのPBSの中で25℃で16時間、pH7で撹拌する。複合体形成過程後に、サイズエクスクルージョンまたはHIC HPLCの様な適切な分析を行う。反応混合物を、 pH8の40mMのPBS中で室温にて２時間水素化ホウ素ナトリウム（0.05mmol）と処理し、イミノ基をアミノ基に変換し、アビジン単位をデキストランのバックボーンに固定する。０から２Mの塩化ナトリウム勾配において、50mMの酢酸塩緩衝液中で平衡化されたS-セファロース上でイオン交換クロマトグラフィーにかけ、１単位のデキストランあたりそれぞれ２単位または３単位のアビジンを含む（アビジン）_n-デキストラン複合体が互いに分離され、また残りの反応混合物とも分離される。精製されたアビジン複合体のビオチン結合能は、HABAテストと蛍光物質またはラジオアイソトープと複合体を形成した定量可能量のビオチンを用いて決定される。複合体をポリアクリルアミドゲル電気泳動法により更に分析し、分離された生成物のそれぞれに関して、１単位のデキストランあたり２単位または３単位のアビジンがそれぞれ存在することを確認する。例６（アビジン）₂-デキストラン-Fab'複合体の調製 pH8の0.1Mトリス塩酸緩衝液１ml中の上記で調製された（アビジン）₂デキストラン複合体（0.0005mmol）を、DMSA中のブロモアセチルクロライド溶液100μlと、４℃で素早く撹拌しながら処理する。混合物を30分間撹拌し、改変されたポリマーを、pH7.5の40mMのPBS中でアクリルアミドサイズエクスクルージョンカラムにかけて、精製する。pH7.4の40mMのPBS中の癌胎児性抗原（Hansen et al.，Proc ．Am．Assoc．Cancer Res,，30:414，1989においてNP-4と名付けられたもの）に結合する抗体のF（ab'）₂フラグメントを、Lシステインと37℃で１時間処理し、最終システイン濃度を100mmolとする。Fab'をpH4.5の50mMのABS中のアクリルアミドカラムにかけて精製し、エルマン反応と280nmの吸光度により、Fab'１モル当たりのチオール濃度をそれぞれ分析する。Fab'（0.0005mmol）とブロモアセチル-（アビジン）₂-デキストラン（0.0005mmol）を、pH7.5の50mMのPBS中に混合し、25℃で３時間撹拌する。生成物、Fab'-（アビジン）₂-デキストランを、０から２Mの塩化ナトリウムの勾配において、pH4.5の50mM酢酸塩緩衝液中で平衡化されたS-セファロース上でイオン交換クロマトグラフィーにかけ、未結合反応物から精製する。例７マルチビオチン-デキストラン-ドキソルビシン複合体上記の様に調製され、10〜200個のアルデヒド基を含むポリアルデヒドデキストラン（0.02mmol）を、ビオチン-ヒドラジド（0.1mmol）とpH6で２時間室温にて処理する。残りの遊離アルデヒド基を、ドキソルビシン（１mmol）と同様の条件下で反応させ、水素化ホウ素ナトリウム（２mmol）を添加して還元し、pH8で４時間にわたり反応させることにより、イミノ基をアミノ基に変換する。複合体生成物を、pH4.5の50mMのABS中で平衡化されたG-10カラム上でサイズエクスクルージョンクロマトグラフィーにより精製する。複合体の分析を行ったところ、HABAテストによりデキストラン当たり約５個のビオチン残基が、496nmにおける分光光度計によるテストでは約35のドキソルビシン部分が示された。例８ビオチンと二官能キレート化剤の複合体形成による、活性金属剤による治療剤または検出剤の送達に有用な複合体の形成ビオチニルペンチルアミン（0.001mol）とイソチオシアナトベンジル-ジエチレントリアミン-五酢酸（ITC-DTPA、0.001mol）を、pH8の0.1Mホウ素酸塩緩衝液中で混合し、室温で３時間撹拌する。ビオチン-DTPAをアセトニトリル／水勾配中のC-18逆相HPLCカラム上で精製する。アセトニトリルを回転エバポレーターで減圧下で除去し、凍結乾燥により水を除去し、白色粉末生成物を得る。マススペクトルと微量分析によって、ビオチニルペンチルアミノ-チオウレアイルベンジル-DTPA（ビオチン-DTPA）の構造を確認する。例９例８のビオチン-DTPA複合体のイットリウム-90による放射性同位元素標識 0.05M HCl中の塩化イットリウム-90の25mCiの試料を、等しい容量のの0.5M酢酸ナトリウム緩衝液、pH5と処理し、金属をその酢酸塩に変換する。混合物を室温で10分間放置する。次に、pH6の50mM酢酸ナトリウム緩衝液中のビオチン-DTPA の試料250μgを加える。成分を混合し、30分間放置し、その時点で、水とエタノールと5Nの水酸化アンモニウムの溶液（キレート化されていないイットリウムを沈殿させる）中のインスタント薄層クロマトグラフィー（ITLC）による分析により、イットリウム-90の99%がビオチン-DTPAと結合していることが示される。この時点で90Y-DTPA-ビオチンはいつでも使用できる状態となる。例10 金属の検出または治療剤として有用な（ビオチン）_n（二官能キレート化剤）_m-ポリマーを提供するためのビオチンおよび二官能キレート化剤とポリマーの複合体の形成例３の様に調製されたポリアルデヒドデキストラン（0.02mmol）を、ビオチニル-ペンチルアミン（0.1mmol）とpH8で２時間室温にて処理する。2-ヒドロキシ- 1,3-ジアミノプラパン（２mmol）を加え、溶液を更に３時間撹拌する。水素化ホウ素ナトリウム（４mmol）を添加し、室温で更に３時間撹拌する。生成物を、G- 10サイズエクスクルージョンカラムで精製すると、約５個のビオチン残基と100 のアミノ基で置換されたデキストランが得られることがHABAテストとTBNS分析により明らかにされる。（ビオチン）₅-アミノデキストラン（0.01mmol）を、pH8の0.1Mホウ素緩衝液中のITC-DTPA（0.5mmol）と室温で６時間処理する。G-10サイズエクスクルージョンクロマトグラフィーと透析により、生成物を非結合DTPA誘導体から精製する。デキストランあたりのDTPA残基数が約40であることが、254nmで分光光度法により測定され、種々の過剰量のコバルト-57を用いて複合体のコバルト-57 放射性同位元素標識により確認される。例11 （ビオチン）₅（DTPA）₄₀-DTPAのイットリウム-90による放射性同位元素標識塩化イットリウム-90（25mCi）を、例９に記述されてい方法で、その酢酸塩に変換し、次いで例９においてモノマー調製で使用した条件と同一条件で、（ビオチン）₅（DTPA）₄₀-デキストラン（0.0001mmol）と処理する。ITLCにより、30分間の放射性同位元素標識後に、99%のイットリウムが複合体とキレート形成することが示された。この時点で、⁹⁰Y-（DTPA）₄₀（ビオチン）₅-デキストランはいつでも使用できる。例12 ３段階法による癌の画像化 S-状結腸鏡により結腸悪性新生物と診断された患者に、癌胎児性抗原（CEA）に対するマルチビオチン-スターバースト-デンドリマー-モノクローナル抗体IgG から成る組成物を静注する。２日後、未標識アビジン（20分間隔で２回に分注）を静注する。２時間後ガンマカメラで患者をスキャンし、S-状結腸の領域に放射能集積部位が検出され、S-状結腸鏡による所見と一致していた。例13 ３段階法によるアテローム硬化性病変の画像化種々の動脈にアテローム硬化性プラークが疑われる患者に、マルチビオチン- デキストラン-抗マクロファージモノクローナル抗体F（ab'）₂を静注する。１日後、5mCiの111-Inと複合体を形成したビオチンを静注し、３時間後ガンマカメラで患者をスキャンしする。放射能集積部位が検出される。例14 ４段階法による癌放射線免疫療法結腸癌の数個の肝転移が認められる患者に、マルチアビジン-デキストラン-抗 -CEA IgGモノクローナル抗体から成る組成物を静注する。２日後、未標識アビジン（20分間隔で２回に分注）を静注する。２時間後、ビオチンから成るクリアリング剤を静注し、30分後にマルチビオチン-デキストランから成る限局性組成物を静注する。だらに２日後、I-131標識マルチアビジン-デキストランから成る組成物を静注する。２週間後、ビオチン-DTPA-Y90から成る第二治療用組成物を静注する。例15 ４段階法による癌化学免疫療法右肺腺癌の患者にマルチ、DTPA、抗肺癌IgGから成る複合体を静注する。４日後、マルチビオチン-デキストラン複合体を静注する（60分間隔で２回に分注）。更に２日後、マルチアビジン-デキストラン-ドキソルビシンを静注する。５日後、ドキソルビシンと複合体を形成したストレプトアビジンを静注する。前記例は、前記例に使用するために包括的または具体的に記述された本発明の反応物または操作条件を置き換えることによって、繰り返して行い同様の成果が得られる。前記の説明から、本技術に精通する者は、本発明の目的と範囲を逸脱することなく本発明の本質的な特徴を容易に確認することができ、また種々の利用と条件に合わせるために、本発明に種々の変更と改変を加えることができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 49/04 7431−4ＣＡ６１Ｋ 49/04 Ａ 51/00 7431−4Ｃ 49/02 Ａ 8415−4Ｃ 43/00 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．（a）（1）ビオチン-タンパク質複合体、または、（2）アビジン-タンパク質複合体（ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合し、標的病変に優先的に付着するタンパク質である。）を含むターゲッティング組成物を患者に非経口注入するステップと、（b）次に、（1）ターゲッティング組成物がビオチン-タンパク質複合体である場合には、アビジン、または、（2）ターゲッティング組成物がアビジン-タンパク質複合体である場合には、ビオチンを含むクリアリング用・限局性組成物を非経口注入し、クリアリング用・限局性組成物により、ターゲッティング組成物を非標的部位から実質的に除去させ、該クリアリング用・局限性組成物を標的病変に付着したターゲッティング組成物に結合させるステップと、（c）（1）クリアリング用・限局性組成物がビオチンの場合、アビジンと検出剤、または、（2）クリアリング用・限局性組成物がアビジンの場合、ビオチンと検出剤の複合体を含む検出組成物を非経口注入し、検出組成物を標的病変に付着させるステップと、を含む方法であって、ここで、ステップ（a）または（b）の少なくとも１つの組成物が、複数のアビジンまたはビオチン部分と複合体を形成するポリマーを含み、これによって、続いて投与される組成物が結合できる結合部位の数が増加し、それによって標的部位における検出剤の量が増幅されることを特徴とする、患者における改善された病変検出方法。２．（a）（1）マルチビオチン-ポリマー-タンパク質複合体、または、（2）ビオチン-タンパク質複合体を含むターゲティング組成物を患者に注入するステップと、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合し、標的病変に優先的に付着するタンパク質であり、（b）（1）アビジン、（2）マルチアビジン-ポリマー複合体、（3）マルチアビジン-マルチ検出剤-ポリマー複合体、（4）アビジン-検出剤複合体、または、（5）マルチアビジン-検出剤-ポリマー複合体を含むクリアリング用剤を注入し、循環血液中のビオチン複合体を除去させるステップと、（c）（1）アビジン、（2）マルチアビジン-ポリマー複合体、（3）マルチアビジン-マルチ検出剤-ポリマー複合体（4）アビジン-検出剤複合体、または、（5）マルチアビジン-検出剤-ポリマー複合体を含む限局性剤を注入するステップと、ここで、限局性剤はクリアリング用剤と同じでも、異なっていてもよく、また、同時に注入することも、クリアリング用剤の後に注入することもでき、ビオチンレセプターに結合させることによって標的病変に限局性剤を局在させることができるものであり、（d）（1）ビオチン-検出剤複合体、（2）ポリマー-マルチビオチン複合体、または、（3）ポリマー-マルチビオチン-マルチ-検出剤複合体を含む検出組成物を注入し、ステップ（d）の組成物のビオチンを、ステップ（c ）の限局性剤のアビジンレセプターに結合させるステップと、（e）ステップ（d）においてポリマーを含む複合体が使用された場合には、（1）アビジン-検出剤複合体、（2）マルチアビジン-ポリマー複合体、（3）アビジン、または、（4）マルチアビジン-マルチ検出剤-ポリマー複合体を含む組成物を注入し、ステップ（e）の組成物のアビジンを、ステップ（d）の限局性組成物のビオチンレセプターに結合させるステップと、（f）ステップ（e）においてアビジン-検出剤複合体以外のものが注入された場合には、ビオチン-検出剤複合体を注入し、標的病変のアビジンレセプターにビオチンを結合させるステップと、（g）検出剤を使用して、標的病変を検出するステップと、を含み、ここで、前記ポリマー複合体のポリマーは十分剛性が高い立体化学構造を持つため、標的病変に既に存在する１つのレセプターに対し、複合体の１つのアビジンまたはビオチンだけが結合する、請求項１記載の方法。３．（a）（1）マルチアビジン-ポリマー-タンパク質複合体、または、（2）アビジン-タンパク質複合体を含むターゲッティング組成物を患者に注入するステップと、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に結合し、ターゲッティング複合体を標的病変に付着させるものであり、（b）（1）ビオチン、（2）マルチビオチン-ポリマー複合体、（3）マルチビオチン-マルチ検出剤-ポリマー複合体、または、（4）ビオチン-検出剤複合体、を含むクリアリング用剤を注入し、このクリアリング用剤によって循環血液中のアビジン複合体を除去させるステップと、（c）（1）マルチビオチン-ポリマー複合体、（2）マルチビオチン-マルチ検出剤-ポリマー複合体、または、（3）ビオチン-検出剤複合体、を含む限局性剤を注入するステップと、ここで、限局性剤は、クリアリング用剤と同じでも、異なっていても構わず、また、同時に注入することも、クリアリング用剤の後に注入することもでき、アビジンレセプターに結合させることによって標的病変に限局性剤を局在させることができるものであり、（d）（1）アビジン-検出剤複合体、（2）ポリマー-マルチアビジン複合体、または、（3）ポリマー-マルチアビジン-マルチ検出剤複合体を含む組成物を注入し、該複合体のアビジンを、限局性剤のビオチンレセプターに結合させるステップと、（e）ステップ（d）においてポリマーを含む複合体が使用された場合には、（1）ビオチン-検出剤複合体、（2）マルチビオチン-ポリマー複合体、または、（3）マルチビオチン-マルチ検出剤-ポリマー複合体、を含む組成物を注入し、該複合体のビオチンを、ステップ（d）の組成物によって提供されるビオチンレセプターに結合させるステップと、（f）ステップ（e）においてビオチン-検出剤複合体以外のものが注入された場合には、アビジン-検出剤複合体を注入し、標的病変のビオチンレセプターにアビジンを結合させるステップと、（g）検出剤を使用して、標的病変を検出または治療するステップと、を含み、ここで、前記ポリマー複合体に使用されるポリマーは十分剛性が高い立体化学構造を持つため、標的病変に既に存在する１つのレセプターに対し、各複合体の１つのアビジンまたはビオチンだけが結合できる、請求項１記載の方法。４．（a）マルチビオチン-ポリマー-タンパク質複合体を含むターゲッティング組成物を患者に注入するステップと、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に結合し、該マルチビオチン-ポリマー-タンパク質複合体を標的病変に優先的に付着させ、標的病変に複数のビオチンレセプターを供給するものであり、（b）アビジンを含むクリアリング用・限局性組成物を少なくとも１回注入し、非標的部位からマルチビオチン-ポリマー-タンパク質複合体を除去させ、標的病変における上記複数のビオチンレセプターに結合させることによって標的病変に局在させるステップと、（c）ビオチン-検出剤複合体からなる検出組成物を注入し、標的病変における複数のアビジンレセプターにビオチンを結合させるステップと、（d）検出剤を使用して、標的病変を検出するステップと、からなる請求項2記載の方法。５．（a）ビオチン-タンパク質複合体を含むターゲッティング組成物を患者に注入するステップと、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に結合し、ビオチン-タンパク質複合体を標的病変に優先的に付着させ、これによって標的病変に複数のビオチンレセプターを供給するものであり、（b）マルチアビジン-ポリマー複合体を含むクリアリング用・限局性組成物を少なくとも１回注入し、非標的部位からビオチン-タンパク質複合体を除去させ、標的病変に付着したビオチン-タンパク質複合体に結合させるステップと、ここで、各マルチアビジン-ポリマー複合体のアビジンの内の１つだけが、標的病変の１つのビオチンレセプターに結合するため、標的病変におけるアビジンレセプターの数は増加し、（c）ビオチン-検出剤複合体を含む検出組成物を注入し、複合体のビオチンを標的病変のアビジンレセプターに結合させ、これによって標的病変に付着するビオチン検出剤の量を増加させるステップと、（d）検出剤を使用して、標的病変を治療または検出するステップと、からなる請求項２記載の方法。６．（a）ビオチン-タンパク質複合体を含むターゲッティング組成物を患者に注入するステップと、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合し、ビオチン-タンパク質複合体を標的病変に結合させ、これによって標的病変にビオチンレセプターを提供し、（b）マルチアビジン-ポリマー-検出剤複合体を含むクリアリング用・限局性組成物を少なくとも１回注入し、非標的部位からビオチン-タンパク質複合体を除去させ、標的病変に付着したビオチン-タンパク質複合体に結合させるステップと、ここで、各複合体のアビジンの内の１つだけが、標的病変の１つのビオチンレセプターに結合し、これによって、標的病変に検出剤が供給され、アビジン結合部位の数は増幅され、ここで、除去されたビオチン-タンパク質および非付着マルチアビジンまたはポリマーまたは検出剤複合体は、代謝され、体内から排泄され、（c）ビオチン-検出剤複合体を注入し、標的病変のステップ（b）の複合体によって供給されるマルチ-アビジン部位に該複合体を増幅法で優先的に結合させるステップと、（d）検出剤を使用して、標的病変を検出するステップと、からなる請求項２記載の方法。７．（a）アビジン-タンパク質複合体を含むターゲッティング組成物を患者に注入するステップと、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合し、該アビジン-タンパク質複合体を標的病変に付着させ、これによって標的病変にアビジンレセプターを供給し、（b）マルチビオチン-ポリマー複合体を含むクリアリング用・限局性組成物を少なくとも１回注入し、非標的部位からアビジン-タンパク質複合体を除去させ、標的病変に局在させるステップと、ここで、各マルチビオチン-ポリマー複合体のビオチンの内の１つだけが、標的病変に付着した各アビジンまたはポリマー複合体によって供給される１つのアビジンレセプターに結合し、これによって、各マルチビオチン-ポリマー複合体は、標的病変に複数のビオチンレセプターを供給し、（c）アビジン-検出剤複合体を注入し、該複合体を標的病変のビオチンレセプターに結合させ、これによって標的病変で利用できる検出剤の量を増幅するステップと、（d）標的病変に付着した増幅された量の検出剤を使用して、標的病変を検出するステップと、からなる請求項３記載の方法。８．（a）アビジン-タンパク質複合体を含むターゲッティング組成物を患者に注入するステップと、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合し、該アビジン-タンパク質複合体を標的病変に付着させ、これによって標的病変にアビジンレセプターを供給し、（b）マルチビオチン-ポリマー-検出剤複合体を含むクリアリング用・限局性組成物を少なくとも１回注入し、非標的部位からアビジン-タンパク質複合体を除去させ、標的病変に局在させるステップと、ここで、各マルチビオチン-ポリマー複合体のビオチンの内の１つだけが、標的病変に付着した各アビジンまたはポリマー複合体によって供給される１つのアビジンレセプターに結合し、これによって、各マルチビオチン-ポリマー検出剤複合体は、標的病変に複数のビオチンレセプターを供給し、検出剤を供給し、ここで、除去されたビオチン-タンパク質と非結合マルチビオチン-ポリマー-検出剤複合体は、代謝され、体内から排泄され、（c）アビジン-検出剤複合体を注入し、複合体を標的組織のマルチ-ビオチンレセプターに増幅法で結合させるステップと、（d）標的病変の増幅された量の検出剤を使用して、標的病変を検出するステップと、からなる請求項３記載の方法。９．上記ポリマーが、ポリアミノ酸、タンパク質、オリゴデオキシリボヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ポリイミン、多糖類、ポリアミン、ポリカルボン酸、ポリアルコールを含むグループから選択される請求項１〜８のいずれかに記載の方法。 10．上記ポリマーが、限定された立体化学構造を持つポリマーである請求項９記載の方法。 11．上記ポリマーの分子量が、5,000から200,000kDである請求項９記載の方法。 12．上記ポリマーが、デキストランまたはスターバースト-デンドリマーである請求項１記載の方法。 13．上記ポリマーが、限定された数のアミノ基を持つデキストランである請求項 12記載の方法。 14．上記病変が、癌、心血管病変、感染または炎症性である請求項１記載の方法。 15．上記心血管病変が、血栓、塞栓、梗塞またはアテローム硬化性プラークである請求項14記載の方法。 16．上記癌病変が、癌、メラノーマ、肉腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、グリオーム、または骨髄腫である請求項14記載の方法。 17．上記病変が感染性または炎症性である請求項14記載の方法。 18．上記タンパク質が、ペプチド、ポリペプチド、ホルモン、リンホカイン、成長因子、アルブミン、サイトカイン、酵素、免疫モジュレーター、レセプタータンパク質、抗体または抗体フラグメントである請求項１記載の方法。 19．上記タンパク質がモノクローナル抗体または特異的に結合するそのフラグメントである請求項18記載の方法。 20．上記フラグメントが、Fv、単鎖抗体、Fab、Fab'、F（ab）₂またはF（ab'）₂ である請求項19記載の方法。 21．上記フラグメントが、Fab、Fab'、F（ab）₂またはF（ab'）₂である請求項20 記載の方法。 22．上記抗体が多重特異性を示す請求項19記載の方法。 23．上記抗体が、マーカー物質の異なるエピトープまたは分子に対して多重特異性を示す請求項22記載の方法。 24．上記タンパク質が、マーカー物質に対する少なくとも60％の特異的免疫反応性を有し、その他の抗原または非標的物質に対する交差反応性が35％未満である請求項18記載の方法。 25．上記検出剤が、放射性核種、MRI造影剤、光活性化色素または分化物質である請求項１記載の方法。 26．術中血管内または内視鏡手技中の体内検出手技のための請求項１記載の方法。 27．上記放射性核種が、ガンマ線、ポジトロンまたはＸ線の放射物質である請求項25記載の方法。 28．上記放射性核種の放射エネエルギーが、10から7000keVである請求項25記載の方法。 29．上記放射性核種が体外画像化に使用され、上記放射性核種がヨウ素-123、ヨウ素-131、インジウム-111、ガリウム-67、ルテニウム-97、テクネチウム-99m、コバルト-57、コバルト-58、クロム-51、鉄-59、セレニウム-75、タリウム-201 またはイッテルビウム-169である請求項25記載の方法。 30．体内検出に使用される上記放射性核種が、ヨウ素-125、ヨウ素-131、インジウム-111、テクネチウム-99mまたはガリウム-67である請求項26記載の方法。 31．上記MRI造影剤が、常磁性のガドリニウム、鉄、マンガン、レニウム、ユウロピウム、ランタン、ホルミウムまたはテルビウムのイオンである請求25記載の方法。 32．患者に、（a）ターゲッティング組成物を非経口注入し、タンパク質複合体を標的病変に優先的に付着させ、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合するタンパク質であり、（b）次に、クリアリング用・限局性組成物を非経口注入し、クリアリング用・限局性組成物により、ターゲッティング組成物を非標的部位から実質的に除去させ、上記組成物を標的病変に付着したターゲッティング組成物に結合させ、そして、（c）治療組成物を非経口注入し、組成物を標的病変に付着させる、ことを含み、ここで、病変に付着した治療剤は病変を治療するために使用され、上記ターゲッティング組成物またはクリアリング用・局限性組成物の少なくとも１つにポリマーを使用することによって、その後に投与される組成物が結合することができる結合部位の数が増加し、それによって標的病変の治療剤の量が増幅される病変治療方法に使用するための薬剤の調製に際して、ビオチン-タンパク質複合体またはアビジン-タンパク質複合体を含むターゲッティング組成物と、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合するタンパク質であり、（1）ターゲッティング組成物がビオチン-タンパク質複合体である場合には、アビジン、または、（2）ターゲッティング組成物がアビジン-タンパク質複合体である場合には、ビオチンを含むクリアリング用・限局性組成物と、（1）クリアリング用・限局性組成物がビオチンの場合、アビジンと治療剤、または、（2）クリアリング用・限局性組成物がアビジンの場合、ビオチンと治療剤の複合体を含む検出組成物組成物と、の使用であって、ここで、ターゲッティング組成物またはクリアリング用・限局性組成物の少なくとも１つは、複数のアビジンまたはビオチン部分と複合体を形成するポリマーを更に含む、上記使用。 33．上記ターゲッティング組成物が、（1）マルチビオチン-ポリマー-タンパク質複合体、または、（2）ビオチン-タンパク質複合体を含み、上記クリアリング用・限局性剤組成物が、（1）アビジン、（2）マルチアビジン-ポリマー複合体、（3）マルチアビジン-マルチ治療剤-ポリマー複合体、（4）アビジン-治療剤複合体、または、（5）マルチアビジン-治療剤-ポリマー複合体の１つ以上を含み、上記治療組成物が、（1）ビオチン-治療剤複合体、（2）ポリマー-マルチビオチン複合体、または、（3）ポリマー-マルチビオチン-マルチ治療剤複合体を含み、上記ポリマー含有複合体が使用される場合には、上記治療組成物は更に、（1）アビジン-治療剤複合体、（2）マルチアビジン-ポリマー複合体、（3）アビジン、または、（4）マルチアビジン-マルチ治療剤-ポリマー複合体を含み、上記アビジン-治療剤複合体以外のものが使用される場合には、上記治療組成物は更にビオチン-治療剤複合体を含み、ここで、上記ポリマーが十分に剛性の高い立体化学構造を持つため、各複合体のアビジンまたはビオチンの１つだけが、標的病変に既に存在しているレセプターに結合できることを特徴とする、請求項32記載の使用。 34．上記ターゲッティング組成物が、（1）マルチアビジン-ポリマー-タンパク質複合体、または、（2）アビジン-タンパク質複合体を含み、上記クリアリング用組成物が、（1）ビオチン、（2）マルチビオチン-ポリマー複合体、（3）マルチビオチン-マルチ治療剤-ポリマー複合体、または、（4）ビオチン-治療剤複合体を含み、上記限局性組成物が、（1）マルチビオチン-ポリマー複合体、（2）マルチビオチン-マルチ治療剤-ポリマー複合体、または、（3）ビオチン-治療剤複合体を含み、ここで、限局性剤は、クリアリング用剤と同じでも異なっていても構わず、上記治療組成物が、（1）アビジン-治療剤複合体、（2）ポリマー-マルチアビジン複合体、または、（3）ポリマー-マルチアビジン-マルチ治療剤複合体を含み、上記ポリマー含有複合体が使用される場合には、上記治療組成物は更に、（1）ビオチン-治療剤複合体（2）マルチビオチン-ポリマー複合体、（3）マルチビオチン-マルチ治療剤-ポリマー複合体を含み、上記ビオチン-治療剤以外のものが使用される場合には、上記治療組成物は更にアビジン-治療剤複合体を含むことを特徴とする、請求項32記載の使用。 35．上記ターゲッティング組成物が、上記マルチビオチン-ポリマー-タンパク質複合体を含み、上記クリアリング用・限局性組成物がアビジンを含み、上記治療組成物が上記ビオチン-治療剤複合体を含む請求項33記載の使用。 36．上記ターゲッティング組成物が、上記ビオチン-タンパク質複合体を含み、上記クリアリング用・限局性組成物が上記マルチアビジン-ポリマー複合体を含み、上記治療組成物が上記ビオチン-治療剤複合体を含む請求項33記載の使用。 37．上記ターゲッティング組成物が、上記ビオチン-タンパク質複合体を含み、上記クリアリング用・限局性組成物が上記マルチアビジン-ポリマー-検出剤複合体を含み、上記治療組成物が上記ビオチン-治療剤複合体を含む請求項33記載の使用。 38．上記ターゲッティング組成物が、上記アビジン-タンパク質複合体を含み、上記クリアリング用・限局性組成物が上記マルチビオチン-ポリマー複合体を含み、上記治療組成物が上記アビジン-治療剤複合体を含む請求項34記載の使用。 39．上記ターゲッティング組成物が、上記アビジン-タンパク質複合体を含み、上記クリアリング用・限局性組成物が上記マルチビオチン-ポリマー-検出剤複合体を含み、上記治療組成物が上記アビジン-治療剤複合体を含む請求項34記載の使用。 40．上記治療剤が、治療用ラジオアイソトープ、薬物、毒素、非電離放射線によって活性化される蛍光色素、ホルモン、ホルモン拮抗剤、レセプター拮抗剤、酵素、別の物質によって活性化されるプロ酵素、オートクリンまたはサイトカインである請求項32〜39のいずれかに記載の使用。 41．上記治療剤が電子または中性子捕獲物質であり、それによって治療剤が治療用ラジオアイソトープに変換される請求項32〜39のいずれかに記載の使用。 42．上記治療用ラジオアイソトープが、ヨウ素-125、ヨウ素-131、アクチニウム -225、ビスマス-212、ビスマス-213、鉛-212、レニウム-186、レニウム-188、銀 -111、白金-197、パラジウム-109、銅-67、リン-32、リン-33、イットリウム-90 、スカンジウム-47、サマリウム-153、ルテチウム-177、ロジウム-105、プラセオジム-142、プラセオジム-143、テルビウム-161、ホルミウム-166、あるいは金 -199である請求項40記載の使用。 43．上記治療剤が、抗DNA、抗RNA、放射治療用オリゴヌクレオチド、抗タンパク質、あるいは抗染色体細胞毒性または抗微生物剤である請求項39記載の使用。 44．上記薬物が、タキソール、メクロレタミン、シクロホスファミド、メリファラン、ウラシル、マスタード、クロラムブシル、チオテパ、ブスルファン、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾシン、ダカルバジン、メトトレキセート、フルオロウラシル、シタラビン、アザリビン、メルカプトプリン、チオグアニン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、ミスラマイシン、ミトマイシン、L- アスパラギナーゼ、シスプラチン、ヒドロキシウレア、プロカルバジン、ミトーテン、プレドニゾン、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロプロゲステロン、ジエチルスチルベストロール、エチニルエストラジオール、タモキシフェン、プロピオン酸テストステロン、またはフルオキシメステロンである請求項40記載の使用。 45．上記毒素が、アブリン、アルファトキシン、ジフテリアトキシン、エソトキシン、ゲロニン、アメリカヤマゴボウ抗ウィルスタンパク質、リシンまたはサポリンである請求項40記載の使用。 46．ビオチン-タンパク質複合体またはアビジン-タンパク質複合体を含むターゲッティング組成物と、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合するタンパク質であり、（1）ターゲッティング組成物がビオチン-タンパク質複合体の場合、アビジンを、または、（2）ターゲッティング組成物がアビジン-タンパク質複合体の場合、ビオチンを含むクリアリング用・限局性組成物と、（1）クリアリング用・限局性組成物がビオチンの場合、アビジンと検出剤の複合体を、または、（2）クリアリング用・限局性組成物がアビジンの場合、ビオチンと検出剤の複合体を含む検出組成物と、を含むキットであって、ここで、ターゲッティング組成物またはクリアリング用・限局性組成物の少なくとも１つは、複数のアビジンまたはビオチン部分と複合体を形成するポリマーを更に含んでいる、病変を検出するための検出キット。 47．ビオチン-タンパク質複合体またはアビジン-タンパク質複合体を含むターゲッティング組成物と、ここで、このタンパク質は、標的病変によって産生される、あるいはそれに関連するマーカー物質に優先的に結合するタンパク質であり、（1）ターゲッティング組成物がビオチン-タンパク質複合体の場合、アビジンを、または、（2）ターゲッティング組成物がアビジン-タンパク質複合体の場合、ビオチンを含むクリアリング用・限局性組成物と、（1）クリアリング用・限局性組成物がビオチンの場合、アビジンと検出剤の複合体を、または、（2）クリアリング用・限局性組成物がアビジンの場合、ビオチンと検出剤の複合体を含む検出組成物を含み、ここで、ターゲッティングまたはクリアリング用・限局性組成物の少なくとも１つは、複数のアビジンまたはビオチン部分と複合体を形成するポリマーを更に含んでいる、病変を治療するための治療薬。