JPH08509735A

JPH08509735A - トロンビン阻害剤

Info

Publication number: JPH08509735A
Application number: JP6524463A
Authority: JP
Inventors: ベバー，ダニエル・エフ; ルイス，エス・ドール; シエフアー，ジユールズ・エー; フエン，ドン−メイ; ナツト，ルース・エフ; ブラデイ，ステイーブン・エフ
Original assignee: メルクエンドカンパニーインコーポレーテッド
Priority date: 1993-04-30
Filing date: 1994-04-25
Publication date: 1996-10-15
Anticipated expiration: 2019-01-13
Also published as: ES2184763T3; EP0699074B1; AU670381B2; EP0699074A1; ATE227581T1; JP3486412B2; DE69431718T2; EP0699074A4; AU6773894A; WO1994025051A1; DE69431718D1; CA2159834A1

Abstract

(57)【要約】

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称トロンビン阻害剤発明の背景トロンビンは、前駆体のプロトロンビンの形態で血漿中に存在するセリンプロテアーゼである。トロンビンは、溶液血漿タンパク質のフィブリノゲンを不溶性フィブリンに変換するという凝血機構の中心的な役割を果たす。Ｅｄｗａｒｄｓ等，Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９９２）１１４巻，１８５４−６３ページは、セリンプロテアーゼヒト白血球エラスターゼ及びブタ膵臓エラスターゼの可逆性阻害剤であるペプチジルα−ケトベンゾオキサゾールを記載している。ヨーロッパ特許出願公開第３６３２８４号は、基質ペプチドの容易に切断できるアミド基の窒素原子が水素又は置換カルボニル部分で置換されているペプチダーゼ基質類似体を記載している。オーストラリア特許出願公開第８６２４５６７７号は更に、フルオロメチレンケトン又はα−ケトカルボキシル誘導体のような活性化求電子ケトン部分を有するペプチダーゼ阻害剤を記載している。従来技術の文献に記載されているトロンビン阻害剤は、アルギニン及びリシン側鎖を含んでいる。これらの構造は、他のトリプシン様酵素に比べてトロンビンに対する選択性が低い。これらのトロンビン阻害剤の幾つかは低血圧毒性や肝臓毒性を示す。本発明の化合物はアルギニン及びリシンをアミノシクロヘキシル部分で置換する。これらの化合物は、他のトリプシン様酵素に比べてトロンビンに対する選択性を示し、また経口利用性を有する。発明の要約本発明は、トロンビン触媒部位阻害剤であり、抗凝血剤として有用な４−置換シクロヘキシルアミン誘導体を包含する。これらの化合物は、トリプシンや他のトリプシン様酵素に比べてトロンビンに対する選択性を示し、また経口利用性を有する。トリプシン様酵素（例えばトリプシン、トロンビン、因子ｘａ、カリクレイン、プラスミン、ウロキナーゼ及びプラスミノゲン活性化因子）は、アルギニル及びリシルペプチド結合での加水分解を触媒するセリン依存性酵素である。本発明は、医薬的に許容可能なキャリヤー中に本発明の化合物を含んでなる、哺乳動物で血小板損失を阻害し、血小板凝集物の形成を阻害し、フィブリン形成を阻害し、血栓形成を阻害し、かつ塞栓形成を阻害するための組成物を包含する。これらの組成物は任意に、抗凝血剤、抗血小板剤、及び血栓融解剤を含み得る。この組成物を血液、血液製剤又は哺乳動物臓器に加えて、所望の阻害作用を生起することができる。本発明は更に、医薬的に許容可能なキャリヤー中に本発明の化合物を含んでなる、哺乳動物で不安定アンギナ、治療抵抗性アンギナ、心筋梗塞、一過性虚血性発作、心房細動、血栓症発作、塞栓症発作、深静脈血栓症、散在性血管内凝固、及び再形成された管の再閉塞又は再発狭窄症を予防又は治療するための組成物を包含する。これらの組成物は任意に、抗凝血剤、抗血小板剤、及び血栓融解剤を含み得る。本発明は更に、哺乳動物の表面に本発明の化合物を共有結合又は非共有結合により連結させて表面の凝塊形成を抑制する方法を包含する。発明の詳細な説明本発明は、式：（式中、ｍは０又は１であり；ｎは０、１又は２であり；ＸはＯ又はＨ₂であり；Ｒはアリールスルホニル、アミノアシル、アシルアミノアシル、Ｎ−Ｃ_1-3アルキルアミノアシル、アシル−Ｎ−Ｃ_1-3アルキルアミノアシル、アリールアシル、アリールＣ_1ー3アルカノイル、ヒドロキシアシル、アリールオキシカルボニル、Ｃ_1-3アルキルオキシカルボニル、又はＲ”はアリール、ヘテロアリール、Ｃ_5-11炭素単環、又はＣ_5-11炭素二環であり；Ｒ¹はＨ又はＣＨ₃であり；Ｒ²はＨ又はＣＨ₃であり；Ｒ³はＨ、Ｃ_1-3アルキル、ヒドロキシＣ_1-3アルキル、カルボキシＣ_1-3アルキル、アミノＣ_1-3アルキル、グアニドＣ_1-3アルキル、アリールもしくは置換アリール、アリールメチル、Ｃ_3-8シクロアルキルメチル、又はＣ_3-8シクロアルキルであり；ＹはＣＨＯ、ＣＯＣＦ₃、ＢＯ₂Ｒ⁷Ｒ⁸、ＣＯ₂Ｒ⁴、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＲ⁵Ｒ⁶、ＣＯＣＯ₂Ｒ⁴、ＣＯＣＯ₂Ｈ、ＣＯＣＯ−Ｑ、又はＣＯ−Ｗであり；ここで、Ｑは天然アミノ酸、シクロヘキシルアミノ酸、ＮＲ⁵Ｒ⁶、もしくは又はこれらの誘導体であり；Ｗは五〜十員複素環式基又は置換複素環式基（例えばテトラゾール、フラン、オキサゾール、ベンゾオキサゾール、及びイミダゾールを含む）であり；Ｒ⁴はＣ_1-3アルキル又はアリールＣ_l-3アルキルであり；Ｒ⁵はＨ、Ｃ_1-3アルキル又はアリールＣ_1-3アルキルであり；Ｒ⁶はＨ、Ｃ_1-3アルキル又はアリールＣ_1-3アルキルであり；Ｒ⁷はＨ、Ｃ_1-3アルキル又はアリールＣ_1-3アルキルであり；Ｒ⁸はＨ、Ｃ_1-3アルキル又はアリールＣ_1-3アルキルである）で表される化合物、及びその医薬的に許容可能な塩を包含する。本発明の化合物は好ましくは、式：（式中、ｎは０、１又は２であり；ｍは０又は１であり；ＲはＤ−フェニルアラニン、Ｄ−Ｎａｌ１、Ｄ−Ｎａｌ２、Ｄ−シクロヘキシルアラニン、Ｄ−チロシン、β−３−ベンゾチエニル−Ｄ−アラニンもしくはＤ− ３，４−Ｃｌ₂−フェニルアラニン、又はこれらのＮ−メチル誘導体であるか、Ｒ¹はＨであり；Ｒ³はＨ又はシクロヘキシルであり；ＸはＯ又はＨ₂であり；ＹはＣＯＮＨ₂、ＣＯＣＯ₂Ｈ、ＣＯＣＯＮＨＣＨ₃、ＣＯＣＯＮＨＣＨ₂Ｐｈ、及びその医薬的に許容可能な塩で表される。本発明の化合物は更に好ましくは、式：（式中、ＲはＮ−メチル−Ｄ−フェニルアラニン、Ｎ−メチル−２−ナフチル−Ｄ−アラニン、Ｎ−メチル−１−ナフチル−Ｄ−アラニン、Ｎ−メチル−Ｄ−シクロヘキシルアラニン、Ｎ−メチル−Ｄ−３，４−Ｃｌ₂−Ｄ−フェニルアラニン、又はＲ¹はＨであり；Ｒ³はＨ、シクロヘキシルであり；ＹはＣＯＮＨ₂、ＣＯＣＯ₂Ｈ、ＣＯＣＯＮＨＣＨ₃、及びその医薬的に許容可能な塩で表される。本発明の好ましい実施態様を以下の表に示す。プロテイナーゼ阻害を調べるためのアッセイヒトα−トロンビン及びウシトリプシンのアッセイを、０．０５Ｍトリス緩衝液（ｐＨ７．４）、０．１５ＭＮａＣｌ、０．１％ＰＥＧ中にて、２５℃で実施した。トリプシンアッセイは更に、１ｍＭＣａＣｌ₂を含んでいた。ｐ−ニトロアニリド（ｐｎａ）基質の加水分解速度を調べるアッセイでは、Ｔｈｅｒｍｏｍａｘ９６−ウェルプレートリーダーを使用して、ｐ−ニトロアニリンの時間依存的出現を（４０５ｎｍで）測定した。ｓａｒ−ＰＲ−ｐｎａを使用して、ヒトα−トロンビン（Ｋ_m＝１２５μＭ）及びウシトリプシン（Ｋ_m＝１２５μＭ）をアッセイした。８２７０ｃｍ^-1Ｍ^-1の吸光係数を用いて３４２ｎｍで吸光度を測定し、ｐ−ニトロアニリド基質濃度を調べた。トロンビン阻害率の高い強力な阻害剤（Ｋｉ＜１０ｎＭ）を用いたある研究では、より高感度の活性アッセイを使用した。このアッセイでは、７−アミノ−４ −トリフルオロメチルクマリンの産生に関係する５００ｎｍでの蛍光（４００ｎｍでの励起）の増加から、フルオロゲニック（fluorogenic）基質Ｚ−ＧＰＲ− ａｆｃ（Ｋ_m＝２７μＭ）のトロンビン触媒加水分解速度を調べた。ストック溶液のアリコートをトロンビンで完全に加水分解して生成した７−アミノ−４−トリフルオロメチルクマリンの吸光度を３８０ｎｍで測定して、Ｚ−ＧＰＲ−ａｆｃストック溶液の濃度を調べた。酵素又は阻害剤で平衡化した酵素を含む溶液中に、基質のストック溶液を少なくとも１０倍に希釈して最終濃度を０．１Ｋ_m以下として、活性アッセイを実施した。酵素と阻害剤との間の平衡化に必要な時間を対照実験で調べた。阻害剤の不在下（Ｖｏ）又は存在下（Ｖｉ）での物質生成の初期速度を測定した。競合阻害を仮定し、且つＫｍ／［Ｓ］、［Ｉ］／ｅ、及び［Ｉ］／ｅ（［Ｓ］、［Ｉ］及びｅはそれぞれ、基質、阻害剤及び酵素の総濃度を示す）を比較したときの同一性は無視できるとすると、式１：Ｖｏ／Ｖｉ＝１＋［Ｉ］／Ｋｉ（１）に示すＶｏ／Ｖｉの［Ｉ］との依存関係により、阻害剤を酵素から解離するための平衡定数（Ｋｉ）を得ることができる。このアッセイにより示される活性は、本発明の化合物が、不安定なアンギナ、治療抵抗性アンギナ、心筋梗塞、一過性虚血性発作、心房細動、血栓症発作、塞栓症発作、深静脈血栓症、散在性血管内凝固、及び再形成された管の再閉塞又は再発狭窄症に羅患した患者の様々な症状を治療するための療法として有用であることを示している。処方及び投与手順は以下の実施例の項に記載する。本発明のペプチド化合物を記載するために使用する命名法は、ペプチドの各アミノ酸残基から見て、Ｎ末端のアミノ基が左に、カルボキシ基が右にあるとする従来の方式に従う。本発明の特定の実施態様を示す式では、アミノ及びカルボキシ末端基はしばしば図示していないが、特に明記しない限り、生理学的ｐＨ値での形態であると考える。従って、生理学的ｐＨでのＮ末端Ｈ⁺ ₂及びＣ末端Ｏ^-は、必ずしも明記はしていないが、特定例又は一般式には存在するものと考える。アミノ酸残基の側鎖の遊離官能基を、アミド化、アシル化又は他の置換により変えることもできる。この置換により、例えば、化合物の活性に作用せずにその溶解度を変えることができる。図示するペプチドでは、各残基は適当であれば、アミノ酸の慣用名に相当する３文字記法で表す。天然アミノ酸を示すために通常使用されている略称の他に、ナフチルアラニンの略称Ｎａｌ（例えばＤ−Ｎａｌ１、Ｄ−Ｎａｌ２）も使用する。Ｎａｌ１は、アラニンのβ炭素が１−ナフチル位置に結合しているアミノ酸を示し、Ｎａｌ２は、アラニンのβ炭素が２−ナフチル位置に結合しているアミノ酸を示す。本明細書に示す特定のペプチドでは、Ｄ形態であると明示しない限り、光学異性体であるＬ形態の任意のアミノ酸残基とする。実施例１Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ＯＢｚ（１−１）：Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ（７．０ｇ，２５ｍｍｏｌ）及びＨ−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ・ＨＣｌ（６．６６ｇ，２７．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２００ｍｌ）溶液に、４．６ｇ（３０ｍｍｏｌ）のＨＯＢｔ・Ｈ₂Ｏを添加し、溶液ｐＨを８（湿式狭幅（moist narrow）ｐＨ紙）に調整し、磁気撹拌しながらＥＤＣ（６．４７ｇ，３３．８ｍｍｏｌ）を添加した。３．５時間後、５０ｍｌの水を添加して反応を停止させた。この混合物を室温で１６時間維持した後に、減圧下で溶媒を蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃ−Ｈ₂Ｏに溶解した。ＫＨＳＯ₄水溶液をこの二相混合物に添加し、層分離した。有機層をＮａＨＣＯ₃、飽和ＮａＣｌで抽出し、ＭｇＳＯ₄で脱水した。溶媒を蒸発させて、生成物を白色固体として得た。それぞれ６００ｇのシリカゲル６０（Ｅ．Ｍｅｒｃｋ）を用いる２個のカラムを用い、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン（３：７）を溶離剤とするクロマトグラフィーで、生成物を更に精製した。生成物を含む画分を合わせると、１１．３ｇ（収率９７％）の１−１が得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．６５、シリカゲル、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン（２：３）Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ＯＨ（１−２）：Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ＯＢｚ（１−１）（１１．３ｇ）の９５％ＥｔＯＨ（６００ｍｌ）溶液をＮ₂で３度フラッシュし、１．８ｇの１０％Ｐｄ／ＣをＮ₂下で添加した。この混合物を排気し、Ｈ₂を導入し、反応混合物をＨ₂雰囲気下（Ｈ₂を充填した気球）で５０分間維持した。混合物をＮ₂でパージし、セライトで濾過し、濾液を真空蒸発させた。粘性油状物をＣＨＣｌ₃で数回フラッシュすると、泡状白色固体１−２（９．１３ｇ，収率１００％）が得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０、シリカゲル、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン（２：３）；Ｒ_f＝０．３、ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（９０−１０−１）実施例２以下の記述で“Ａｃｇ”は４−アミノシクロヘキシルグリシンを意味する。Ｂｏｃ−トランス−ＤＬ−Ａｃｇ−ＯＨ（２−１）：Ｎｕｔｔ等，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：ＳｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄＦｕｎｃｔｉｏｎ，Ｐｒｏｃｅｅｄ．ｏｆｔｈｅ９ｔｈＡｍｅｒ．Ｐｅｐｔ．Ｓｙｍｐ．，Ｃ．Ｄｅｂｅｒ等編，ＰｉｅｒｃｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ，４４１−４４４（１９８５）に従って２−１を製造した。Ｂａｎｆｉ等，Ｓｙｎ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９（９＆１０），１７８７−１７９９（１９８９）も、保護していないアミノ酸トランス−ＤＬ−Ａｃｇ−ＯＨの合成を記載している。Ｂｏｃ−トランス−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）−ＯＨ（２−２）：Ｎｕｔｔ等の手順に従って２−１をＣｂｚで保護して、Ｂｏｃ−トランス−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）−ＯＨ（２−２）を得た。Ｂｏｃ−トランス−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）−ＮＭｅＯＭｅ（２−３）：Ｂｏｃ−トランス−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）−ＯＨ（２−２）（７９４ｍｇ，１．９４ｍｍｏｌ）のＣＨ₂Ｃｌ₂（１０ｍｌ）懸濁液に、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ，０．２２ｍｌ）を添加した。１５分間磁気撹拌した後に、全ての出発材料は溶液と化した。温度を−１５℃に下げて、ｉ−ブチルクロロホルメート（０．２５ｍｌ，０．２７ｇ）を添加した。混合物を１０分間撹拌し、予め乾燥したＨＮＭｅＯＭｅ・ＨＣｌ（０．２２ｇ）を添加し、次いでＮＭＭを添加した（最初に０．１５ｍｌ）次に４０分かけて少しずつ０．１７ｍｌ）。反応混合物を室温に暖め、１８時間撹拌した。反応物に水を添加し、３０分撹拌した後に、ＣＨ₂Ｃｌ₂を添加し、有機層を１×ＫＨＳＯ₄溶液、１×Ｈ₂Ｏ、１ ×ＮａＨＣＯ₃溶液及び２×５０％飽和ＮａＣｌで洗浄した。有機層をＮａ₂ＳＯ₄ で脱水し、濾過し、蒸発させて２−３（７４６ｍｇ，収率８５％）を得た。ＮａＨＣＯ₃抽出物から、出発材料（１０１ｍｇ，１２．７％）を回収した。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．７５、シリカゲル、ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（９５−５ −０．５）ＨＰＬＣ：保持時間＝１９．４３分（ＶｙｄａｃＣ₁₈、３０分で９５％Ａ／Ｂ →５％Ａ／Ｂの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ−Ｈ₂Ｏ，Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ₃ＣＮ）ＮＭＲ：ＣＤ₃ＯＤ，δ７．４（ｍ，５），５．１（ｓ，２），４．５（ｂｒｍ，１），３．０（ｓ，３），３．３（ＭｅＯＨ），３．２（ｓ，３），１．９５（ｍ，２），１．８５（ｍ，１），１．６２（ｍ，２），１．４５（ｓ，９），１．１−１．３（ｍ，４）。Ｂｏｃ−トランス−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯ］（２−４）：機械撹拌機、温度計及び隔壁を備えた乾燥フラスコに、６１６ｍｇ（１．３７ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−ｔ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）−ＮＭｅＯＭｅ（２−３）、及び１８ｍｌの乾燥ＴＨＦを添加した。この懸濁液を−４０℃に冷却し、反応温度を− ３０℃未満に維持するような速度で、ＬＡＨ溶液（１ＭＬＡＨのＴＨＦ溶液１．７８ｍｌ）を滴下した。得られた溶液を−５℃で５０分間撹拌し、次いで−３５℃に冷却した。温度を−１５℃に維持しながら、エーテル（１５ｍｌ）及びＫＨＳＯ₄水溶液を添加した。この２層混合物を室温で３０分間撹拌し、層分離し、水性層をエーテルで２度抽出した。合わせたエーテル層を１Ｎ冷ＨＣｌ（３ｍｌ）、５％冷ＮａＨＣＯ₃溶液（３ｍｌ）及びＮａＣｌ飽和溶液（３ｍｌ）で１度抽出した。エーテル層を無水ＭｇＳＯ₄で脱水し、濾過し、真空蒸発させて、４７７ｍｇ（収率８９％）の（２−４）を得た。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．７、シリカゲル、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン（３：２）ＨＰＬＣ：保持時間＝１８．８分；Ｃ₁₈、３０分で１００％Ａ→７０％Ａ／Ｂ、Ａ＝０．１％ＴＦＡ−Ｈ₂Ｏ，Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ₃ＣＮ）ＮＭＲ：ＣＤＣｌ₃，δ９．６２（ｓ，１），７．４（ｍ，５），５．１（ｍ，３），４．５８（ｄ，１），４．２５（ｔ，１），３．４２（ｍ，１），２．１（ｍ，２），１．９（ｍ，２），１．６２（ｍ，１），１．５８（幅広い，Ｈ₂ Ｏ），１．４２（ｓ，９），１．２５（ｍ，２）．１．１８（ｍ，２）。Ｂｏｃ−トランス−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣ（ＳＥｔ）₃］（２ −５）：温度計、磁気撹拌機、及び添加漏斗を備えた１００ｍｌの三つ口乾燥フラスコに、Ｎ₂下で乾燥ＴＨＦ（１５ｍｌ）中のトリエチルチオオルトホルメート（１．６５ｍｌ，８．４３ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を−６５℃に冷却し、温度を−５０℃未満に維持するような速度でＴＨＦ中のＢｕＬｉ（２．８９ｍｌ，７．２３ｍｍｏｌ）を滴下した。反応溶液を−６０℃で３０分間撹拌し、反応溶液を−５５℃に維持しながら、Ｂｏｃ−トランス−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯ］（２−４）（４７０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍｌ）溶液を滴下した。添加漏斗を１ｍｌのＴＨＦで２度洗浄した。−４０℃で２時間撹拌した後に、ＮＨ₄Ｃｌ（０．６ｇ）のＨ₂Ｏ（１３．５ｍｌ）及びエーテル（２７ｍｌ）溶液を添加し、反応混合物を１０℃に暖めた。２層を分離し、水性層をエーテルで２度抽出した。合わせたエーテル層をＮａＣｌ飽和溶液で１度洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で脱水し、濾過し、真空蒸発させて、油状残留物を得た。９０ｇのシリカゲル（Ｅ．Ｍｅｒｃｋ２３０−４００メッシュ）及び溶離溶媒としてのＥｔＯＡｃ−ヘキサン（３：９）を用いるクロマトグラフィーで、生成物を単離した。生成物を含む画分（Ｒｆ＝０．３、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン（３：７））を合わせ、溶媒を蒸発させて除去し、２−５（３１７ｍｇ，収率４５％）を得た。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．３、シリカゲル、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン（３：７）ＨＰＬＣ：保持時間＝２５．２５分及び２５．７２分；比率１：４（ＶｙｄａｃＣ₁₈、３０分で８０％Ａ／Ｂ→１０％Ａ／Ｂの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ−Ｈ₂ Ｏ，Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ₃ＣＮ）保持時間＝２６．９５分及び２７．３６分；比率１：４（ＶｙｄａｃＣ₁₈、３０分で９５％Ａ／Ｂ→５％Ａ／Ｂの勾配）Ｂｏｃ−トランス−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣＯ］−ＯＭｅ（２− ６）：Ｂｏｃ−トランス−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣ（ＳＥｔ）₃］（２−５）（３１０ｍｇ，０．５２８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（１８ｍｌ，１７：１）溶液に、ＨｇＯ（１８３ｍｇ，０．８４５ｍｍｏｌ）及びＨｇＣｌ₂（６７４ｍｇ，２．４８ｍｍｏｌ）をＮ₂下で磁気撹拌しながら添加した。反応混合物を室温で１．５時間、６０℃で３０分間撹拌した。室温に冷却した後、反応混合物をセライトで濾過し、セライトを１ｍｌのＭｅＯＨで２度、５ｍｌのＣＨ₂Ｃｌ₂で３度洗浄した。Ｈ₂Ｏ（２０ｍｌ）及びＣＨ₂Ｃｌ₂（１０ｍｌ）を濾液に添加し、層分離し、水性層をＣＨ₂Ｃｌ₂（２０ｍｌ）で２度抽出した。合わせた有機層に、Ｈ₂Ｏ中７０％ＮＨ₄ＯＡｃを添加し、ＣＨ₂Ｃｌ₂層を３相混合物から除去し、残留混合物をＣＨ₂Ｃｌ₂で２度抽出し、合わせた有機層をＮＨ₄Ｃｌ飽和溶液で１度洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水し、濾過し、真空蒸発させて、２−６（２１５ｍｇ，収率９０．４％）を得た。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．４（主）、０．３５（副）、シリカゲル、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン（１：１）ＨＰＬＣ：保持時間＝１８．６７分及び１９．０２分；比率１：４（ＶｙｄａｃＣ₁₈、３０分で９５％Ａ／Ｂ→５％Ａ／Ｂの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ−Ｈ₂ Ｏ，Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ₃ＣＮ）実施例３Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣＯ］−ＯＭｅ（３−１）：ｔ−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣＯ］−ＯＭｅのＨＣｌ塩の製造：Ｂｏｃ−トランス−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣＯ］−ＯＭｅ（２０２ｍｇ，０．４４８ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）溶液をＮ₂下で−２５℃に冷却し、反応温度を−５℃未満に維持しながら、飽和するまでＨＣｌガスを導入した。１０分後に飽和すると、溶液をＮ₂で４５分間パージし、次いで過剰ＨＣｌ及び溶媒を真空蒸発させて除去し、油状ＨＣｌ塩を得た。Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣＯ］−ＯＭｅ（３−１）の製造：脱保護を実施する一方で、５４μｌのＮＭＭを添加したＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ＯＨ（１−２）（１８７ｍｇ，０．４９３ｍｍｏｌ）のＣＨ₂Ｃｌ₂（１５ｍｌ）及びＥｔＯＡｃ（３ｍｌ）溶液をＮ₂下で−１５℃に冷却し、６４μｌのｉ−ブチルクロロホルメートで処理した。−１５℃で１０分の後に、先に製造したＨＣｌ塩のＣＨ₂Ｃｌ₂（４ｍｌ）溶液を数回に分けて又はＮＭＭ（５０μｌ）と共に添加し、次いでＮＭＭ（３５μｌ）を添加して、ｐＨを７にした（湿式狭幅ｐＨ紙）。カップリングの後に、ＴＬＣ（８５−１５−１．５，ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ）で処理して、求核剤を消失せしめた。−１０℃で２時間の後に、Ｈ₂Ｏを添加し、混合物を１時間撹拌し、層分離し、有機層を１×希ＫＨＳＯ₄溶液、１×Ｈ₂ Ｏ、１×ＮａＨＣＯ₃溶液及び２×５０％飽和ＮａＣｌで洗浄した。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で脱水し、濾過し、蒸発乾固した。粗組成物を、９９−１−０．１（ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ）を溶離剤とするシリカゲルのクロマトグラフィーで精製し、生成物を含む画分を合わせて真空蒸発させ、３−１を白色固体として得た（２７５ｍｇ，収率８７％）。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．４５，０．５（異性体２種）、シリカゲル、ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（９５−５−０．５）ＨＰＬＣ：保持時間＝１７．２分及び１７．５分；比率４６：４３（ＶｙｄａｃＣ₁₈、３０分で７５％Ａ／Ｂ→２０％Ａ／Ｂの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ−Ｈ₂Ｏ，Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ₃ＣＮ）Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣＯ］−ＯＨ（３−２）：ｐＨを１２−１３に維持しながら、１７ｍｌの１：１（ｖ／ｖ）ＴＨＦ／Ｈ₂ Ｏに溶解したＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣＯ］−ＯＭｅ（３−１）（２７０ｍｇ，０．３８ｍｍｏｌ）の試料を、２．２ＮＬｉＯＨ（０．２２ｍｌ）で１．５時間かけて数回で処理した。２．５時間後、反応溶液を希ＫＨＳＯ₄溶液でｐＨ７に調節した。５０ｍｌのＥｔＯＡｃと２５ｍｌのＨ₂Ｏとを添加し、水性層をＫＨＳＯ₄溶液で更にｐＨ２に調節した。有機層を分離し、５０％飽和ＮａＣｌ溶液で２度洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で脱水し、真空蒸発させて、３−２（２５１ｍｇ，収率９５％）を得た。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．４、シリカゲル、ＥｔＯＡｃ−ＡｃＯＨ−ｉ−オクタン−Ｈ₂ Ｏ（１２−２−２−１０）の上層以下の実施例４に記載の手順に従って３−２を酸化し、脱保護して、３−３を得た。実施例４Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣＯ］−ＮＨＭｅ（４−１）：Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣＯ］−ＯＨ（３−２）（１２５ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）のジメチルアセトアミド（６．５ｍｌ）溶液に、３４ｍｇの１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢｔ）、３５μｌのＮＭＭ及び２９ｍｇのメチルアミン塩酸塩を添加し、この混合物を１５分間撹拌して、完全に溶解した。この溶液に１−（３−ジメチルアミノプロピル）− ３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，５１ｍｇ）を添加し、得られた混合物を２０時間磁気撹拌した。水（３０ｍｌ）及びＥｔＯＡｃ（７５ｍｌ）を添加し、有機層を希ＫＨＳＯ₄溶液、Ｈ₂Ｏ、ＮａＨＣＯ₃溶液、及び５０％飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で脱水し、濾過し、真空蒸発させて、４−１（１１７ｍｇ，収率９２％）を得た。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．３、シリカゲル、ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（９５−５− ０．５）Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＯＣＯ］−ＮＨＭｅ（４−２）：Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ−ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＨＯＨＣＯ］−ＮＨＭｅ（４−１）（１１５ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）のＣＨ₂Ｃｌ₂（９ｍｌ）溶液に、パーヨージナン（０．４６ｇ）（Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬）を磁気撹拌しながら添加した。１時間後、エーテル（４５ｍｌ）を添加し、次いでチオ硫酸ナトリウム溶液（２５ｍｌの飽和ＮａＨＣＯ₃中２．０ｇ）を強く撹拌しながら添加した。５分後、両層は透明であり、エーテル層を分離し、希ＮａＨＣＯ₃、５０％飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で脱水し、真空蒸発させて、未精製のケトアミド４−２を得た。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．５０、シリカゲル、ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（９５−５ −０．５）Ｈ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ−Ｄ−ＡｃｇΨ［ＣＯＣＯ］−ＮＨＭｅ（４−３）及びＨ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ−Ｌ−ＡｃｇΨ［ＣＯＣＯ］ −ＮＨＭｅ（４−４）：ＨＦ反応容器（Ｋｅｌ−Ｆ）中のＢｏｃ−ＮＭｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ｔ− ＤＬ−Ａｃｇ（Ｃｂｚ）Ψ［ＣＯＣＯ］−ＮＨＭｅ（４−２）（１２５ｍｌ）のＣＨ₂Ｃｌ₂（４ｍｌ）溶液をＮ₂パージして溶媒除去し、１．２ｍｌのアニソール中の残留物を排気して、残留ＣＨ₂Ｃｌ₂を除去した。約１２ｍｌのＨＦを反応容器内にて−７０℃で凝縮させた。０〜５℃で１．２５時間撹拌した後に、ＨＦを真空除去し、２０ｍｌのエーテル、次いで２０ｍｌの石油エーテルを残留物に添加した。上清を焼結ガラス漏斗内にデカントし、粘着性残留物を１：１（ｖ／ｖ）エーテル／石油エーテルで３度洗浄し、それぞれ前述のようにデカントした。Ｎ₂気流中で乾燥した後に、容器内の残留物を２５ｍｌのＨ₂Ｏに溶解し、前記焼結漏斗に溶液を注入して、生成物を完全に回収した。１００％Ａ→６０％Ａ／Ｂの勾配溶離系を１２０分、８０ｍｌ／分の流量で用いる分取ＨＰＬＣＷａｔｅｒｓＰｒｅｐ−ＰａｋＣ₁₈カラムに２種のジアステレオマー生成物を含む濾液を直接導入した。２種の異性体のうち、後に溶離する方のピークはより強いトロンビン阻害剤となり、Ａｃｇ中心でＬ配置（４−４）を有した。ＨＰＬＣ：保持時間＝１６．７分（Ｄ）及び１８．５分（Ｌ），ＶｙｄａｃＣ₁₈ ，３０分で１００％Ａ→６５％Ａ／Ｂの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ−Ｈ₂Ｏ，Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ₃ＣＮ両異性体のＦＡＢＭＳ：４７２（Ｍ＋Ｈ），５０４（Ｍ＋ＭｅＯＨ），分子量計算値＝４７２。トロンビン阻害剤−治療での使用様々な血栓症症状、特に冠状動脈や大脳血管の疾病の治療や予防のために、抗凝血性治療が知られている。この分野の専門家には抗凝血性治療を必要とする状況は容易に分かる。本明細書で使用する“患者”という用語は、霊長類（例えばヒト、ヒツジ、ウマ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ、ラット及びマウス）のような哺乳動物を意味するものとする。トロンビン阻害は、血栓症症状を示す個体の抗凝血性治療に有用であるだけでなく、保存全血の凝固防止や、他の試験又は保存用生物試料の凝固防止のように凝血阻止が必要なときはいつでも有用である。従って、例えば哺乳動物血液を血管移植片、ステント、整形用プロテーゼ、人工心臓及び体外循環系からなる群の中から選択される物と接触させたときに凝血を阻止することが望ましい、トロンビンを含むか又は含むと思われる媒質にトロンビン阻害剤を添加するか、又はこれらを接触させることができる。本発明のトロンビン阻害剤は、錠剤、カプセル剤（それぞれ徐放剤又は速放剤を含んでいる）、ピル剤、粉剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、懸濁液、シロップ剤及び乳濁液のような経口形態で投与することができる。更には、静脈内（濃縮塊又は浸剤）、腹腔内、皮下、又は筋肉内形態で投与してもよい。これらは全て、医薬業界の当業者にはよく知られた形態を使用する。有効ではあるが、無毒な量の所望化合物を抗凝血剤として使用することができる。トロンビン阻害剤を、活性成分を徐放させ得るように処方できるデポ剤又は埋込剤の形態で投与することができる。活性成分を圧縮して、埋込剤又は小型シリンダーにして、デポ剤又は埋込剤として皮下又は筋肉内に移植することができる。埋込剤は、生分解性ポリマー又は合成シリコーン（例えばＤｏｗ−ＣｏｒｎｉｎｇＣｏｒｐｏｒａｉｏｎｔ製のＳｉｌａｓｔｉｃ、シリコーンゴム又は他のポリマー）のような不活性材料を使用し得る。トロンビン阻害剤は、リポソーム送達系（例えば小単層板状小胞、大単層板状小胞、及び多層板状小胞）の形態で投与することもできる。リポソームは、様々なリン脂質（例えばコレステロール、ステアリルアミン又はホスファチジルコリン）から生成され得る。トロンビン阻害剤は更に、モノクローナル抗体を、化合物分子と結合する個体キャリヤーとして使用して送達され得る。トロンビン阻害剤を、標的指向性薬剤キャリヤーとしての可溶性ポリマーと結合してもよい。このようなポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシ−プロピル−メタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチル−アスパルトアミド−フェノール、又はパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリシンが含まれ得る。更には、トロンビン阻害剤をドラッグの放出を調整するのに有用なタイプの生分解性ポリマー（例えばポリ酢酸、ポリグリコール酸、ポリ酢酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート及びヒドロゲルの架橋又は両親媒性ブロックコポリマー）と結合してもよい。トロンビン阻害剤を使用する投与計画は、様々な要因（例えば、患者の型、種、年齢、体重、性別及び医療状態、治療すべき症状の重症度、投与経路、患者の腎肝機能、並びに使用する特定化合物又はその塩）に応じて選択する。当業界の医師又は獣医は、症状の進行を阻害、阻止、又は停止させるのに必要な有効量のドラッグを容易に決定して処方し得る。所定の効果のために使用するときのトロンビン阻害剤の経口用量は、約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは１．０〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、最も好ましくは１〜２０ｍｇ／ｋｇ／日である。最も好ましい静脈内投与量は、一定速度の注入中で約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ／分である。トロンビン阻害剤を１日に２回、３回又は４回に分けて投与することが有利であり得る。更には、適切な鼻腔内ベヒクルを局所的に用いて、又は当業者によく知られた経皮膚スキンパッチの形態を用いる経皮膚経路で投与することができる。経皮膚送達系の形態で投与される場合、薬剤投与は勿論投与計画期間にわたり継続的であり、断続的ではない。トロンビン阻害剤は通常、意図する投与形態（即ち経口錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、シロップ剤等）に対して適切に選択され、かつ従来の医薬診療と相容れる適切な医薬希釈剤、賦形剤又はキャリヤー（本明細書では“キャリヤー” 材料と総称する）と混合した活性成分として投与される。例えば、錠剤又はカプセル剤形態の経口投与では、活性薬剤成分を、医薬的に許容可能な無毒経口不活性キャリヤー（例えばラクトース、デンプン、スクロース、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、硫酸ナトリウム、マンニトール、ソルビトール等）と合わせることができ、液状形態の経口投与では、経口薬剤成分を医薬的に許容可能な無毒経口不活性キャリヤー（例えばエタノール、グリセロール、水等）と合わせることができる。更には、所望とあれば又は必要とあれば、適切な結合剤、滑沢剤、崩壊剤及び着色剤を混合物に取り込むこともできる。適切な結合剤には、デンプン、ゼラチン、天然糖（例えばグルコース又はβ−ラクトース）、トウモロコシ甘味剤、天然及び合成ゴム（例えばアカシア、トラガカント又はアルギン酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ろう等が含まれる。これらの剤形で使用される滑沢剤には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等が含まれる。崩壊剤は非制限的ではあるが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンゴム等を含む。トロンビン阻害剤は、様々なascular病理学の治療で相乗効果を得るために、適切な抗凝血剤又は血栓融解剤（例えばプラスミノゲン活性化因子又はストレプトキナーゼ）と一緒に投与することもできる。例えば、トロンビン阻害剤は、組織プラスミノゲン活性化因子を媒介とする血栓融解再潅流の効力を高める。血栓形成後にまずトロンビン阻害剤を投与することができ、その後組織プラスミノゲン活性剤又は他のプラスミノゲン活性化因子を投与する。トロンビン阻害剤をヘパリン、アスピリン又はワルファリンと合わせてもよい。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/445 9454−4ＣＡ６１Ｋ 31/445 38/00 ＡＣＢ 9451−4ＨＣ０７Ｃ 271/22 Ｃ０７Ｃ 271/22 9159−4ＣＣ０７Ｄ 207/16 Ｃ０７Ｄ 207/16 9284−4Ｃ 211/36 211/36 9284−4Ｃ 211/60 211/60 8517−4ＨＣ０７Ｋ 5/065 Ｃ０７Ｋ 5/065 9455−4ＣＡ６１Ｋ 37/02 ＡＣＢ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＦＩ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ (72)発明者シエフアー，ジユールズ・エーアメリカ合衆国、ペンシルバニア・19437、グウイネツド・バレー、グウイネツド・バレー・ドライブ・440 (72)発明者フエン，ドン−メイアメリカ合衆国、ペンシルバニア・19438、ハーレイスビル、サラトガ・レーン・50 (72)発明者ナツト，ルース・エフアメリカ合衆国、カリフオルニア・92122、サン・デイエゴ、シヨアライン・ドライブ・7160、アパートメント・4307 (72)発明者ブラデイ，ステイーブン・エフアメリカ合衆国、ペンシルバニア・19118、フイラデルフイア、クレフエルド・ストリート・8803

Claims

【特許請求の範囲】１．式：（式中、ｍは０又は１であり；ｎは０、１又は２であり；ＸはＯ又はＨ₂であり；Ｒはアリールスルホニル、アミノアシル、アシルアミノアシル、Ｎ−Ｃ_1-3アルキルアミノアシル、アシル−Ｎ−Ｃ_1-3アルキルアミノアシル、アリールアシル、アリールＣ_1-3アルカノイル、ヒドロキシアシル、アリールオキシカルボニル、Ｃ_1-3アルキルオキシカルボニル、又はＲ”はアリール、ヘテロアリール、Ｃ_5-11炭素単環、又はＣ_5-11炭素二環であり；Ｒ¹はＨ又はＣＨ₃であり；Ｒ²はＨ又はＣＨ₃であり；Ｒ³はＨ、Ｃ_1-3アルキル、ヒドロキシＣ_1-3アルキル、カルボキシＣ_1-3アルキル、アミノＣ_1-3アルキル、グアニドＣ_1-3アルキル、アリールもしくは置換アリール、アリールメチル、Ｃ_3-8シクロアルキルメチル、又はＣ_3-8シクロアルキルであり；ＹはＣＨＯ、ＣＯＣＦ₃、ＢＯ₂Ｒ⁷Ｒ⁸、ＣＯ₂Ｒ⁴、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＲ⁵Ｒ⁶、ＣＯＣＯ₂Ｒ⁴、ＣＯＣＯ₂Ｈ、ＣＯＣＯ−Ｑ、又はＣＯ−Ｗであり；ここで、Ｑは天然アミノ酸、シクロヘキシルアミノ酸、ＮＲ⁵Ｒ⁶、もしくは又はこれらの誘導体であり；Ｗは五〜十員複素環式基又は置換複素環式基であり；Ｒ⁴はＣ_1-3アルキル又はアリールＣ_1-3アルキルであり；Ｒ⁵はＨ、Ｃ_1-3アルキル又はアリールＣ_1-3アルキルであり；Ｒ⁶はＨ、Ｃ_1-3アルキル又はアリールＣ_1-3アルキルであり；Ｒ⁷はＨ、Ｃ_1-3アルキル又はアリールＣ_1-3アルキルであり；Ｒ⁸はＨ、Ｃ_1-3アルキル又はアリールＣ_1-3アルキルである）で表される化合物、及びその医薬的に許容可能な塩。２．式：（式中、ｎは０、１又は２であり；ｍは０又は１であり；ＲはＤ−フェニルアラニン、Ｄ−Ｎａｌ１、Ｄ−Ｎａｌ２、Ｄ−シクロヘキシルアラニン、Ｄ−チロシン、β−３−ベンゾチエニル−Ｄ−アラニンもしくはＤ−３，４−Ｃｌ₂−フェニルアラニン、又はこれらのＮ−メチル誘導体であるか、Ｒ¹はＨであり；Ｒ³はＨ又はシクロヘキシルであり；ＸはＯ又はＨ₂であり；ＹはＣＯＮＨ₂、ＣＯＣＯ₂Ｈ、ＣＯＣＯＮＨＣＨ₃、ＣＯＣＯＮＨＣＨ₂Ｐｈ、で表される請求項１に記載の化合物、及びその医薬的に許容可能な塩。３．式：（式中、ＲはＮ−メチル−Ｄ−フェニルアラニン、Ｎ−メチル−２−ナフチル−Ｄ−アラニン、Ｎ−メチル−１−ナフチル−Ｄ−アラニン、Ｎ−メチル−Ｄ−シクロヘキシルアラニン、Ｎ−メチル−Ｄ−３，４−Ｃｌ₂−Ｄ−フェニルアラニン、又はＲ¹はＨであり；Ｒ³はＨ、シクロヘキシルであり；ＹはＣＯＮＨ₂、ＣＯＣＯ₂Ｈ、ＣＯＣＯＮＨＣＨ₃、で表される請求項２に記載の化合物、及びその医薬的に許容可能な塩。４．からなる群の中から選択される請求項３に記載の化合物。５．哺乳動物でトロンビン阻害又は血栓もしくは塞栓形成阻止のために使用する請求項１に記載の化合物。６．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液中のトロンビンを阻害するための組成物。７．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液中での血小板損失を阻害するための組成物。８．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液中での血小板凝集物の形成を阻害するための組成物。９．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液中でのフィブリン形成を阻害するための組成物。１０．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液中での血栓形成を阻害するための組成物。１１．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液中での塞栓形成を阻害するための組成物。１２．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液製剤中のトロンビンを阻害するための組成物。１３．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液製剤中での血小板損失を阻害するための組成物。１４．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液製剤中での血小板凝集物の形成を阻害するための組成物。１５．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液製剤中でのフィブリン形成を阻害するための組成物。１６．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液製剤中での血栓形成を阻害するための組成物。１７．請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーとを含んでなる血液中での塞栓形成を阻害するための組成物。１８．血液に請求項６に記載の組成物を添加することからなる血液中のトロンビンを阻害するための方法。１９．血液に請求項７に記載の組成物を添加することからなる血液中での血小板損失を阻害するための方法。２０．血液に請求項８に記載の組成物を添加することからなる血液中での血小板凝集物の形成を阻害するための方法。２１．血液に請求項９に記載の組成物を添加することからなる血液中でのフィブリン形成を阻害するための方法。２２．血液に請求項１０に記載の組成物を添加することからなる血液中での血栓形成を阻害するための方法。２３．血液に請求項１１に記載の組成物を添加することからなる血液中での塞栓形成を阻害するための方法。２４．血液製剤に請求項１２に記載の組成物を添加することからなる血液製剤中のトロンビンを阻害するための方法。２５．血液製剤に請求項１３に記載の組成物を添加することからなる血液製剤中での血小板損失を阻害するための方法。２６．血液製剤に請求項１４に記載の組成物を添加することからなる血液製剤中での血小板凝集物の形成を阻害するための方法。２７．血液製剤に請求項１５に記載の組成物を添加することからなる血液製剤中でのフィブリン形成を阻害するための方法。２８．血液製剤に請求項１６に記載の組成物を添加することからなる血液製剤中での血栓形成を阻害するための方法。