JPH08512040A

JPH08512040A - デオキシヌクレオシドのリポヌクレオチド、それらの製造方法および抗ウイルス薬としてのそれらの用途

Info

Publication number: JPH08512040A
Application number: JP7503270A
Authority: JP
Inventors: ツィルフ，ハラルト; ヘルマン，ディーター
Original assignee: ベーリンガーマンハイムゲゼルシャフトミットベシュレンクテルハフツング
Priority date: 1993-07-01
Filing date: 1994-06-29
Publication date: 1996-12-17
Also published as: CA2165979A1; DE4321978A1; WO1995001362A1; EP0706530A1; AU7344994A

Abstract

(57)【要約】本発明は、置換されたＣ₃骨格を表す脂質成分がリン酸エステルまたはチオリン酸エステルを経てデオキシヌクレオシドに結合されている、デオキシヌクレオシドの新規リン脂質誘導体に関する。

Description

【発明の詳細な説明】デオキシヌクレオシドのリポヌクレオチド、それらの製造方法および抗ウイルス薬としてのそれらの用途本発明は、置換されたＣ₃骨格を表す脂質成分がホスフェートまたはチオホスフェートを経て適当なヌクレオシドに結合されている２′−デオキシヌクレオシドとβ−Ｄ−アラビノフラノシルピリミジンの新規リン脂質誘導体、および抗ウイルス薬としてのそれらの用途に関する。本発明は、式Ｉの化合物（上式中、Ｒ¹は、場合によりフェニル、ハロゲン、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルメルカプト、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシカルボニル、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルスルフィニルまたはＣ₁〜Ｃ₆アルキルスルホニル基により単置換もしくは多置換されていることがある、１〜20個の炭素原子を有する直鎖のまたは枝分れした飽和または不飽和脂肪族基を表し、Ｒ²は、場合によりフェニル、ハロゲン、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルメルカプト、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシカルボニルまたはＣ₁〜Ｃ₆アルキルスルホニル基により単置換もしくは多置換されていることがある、１〜20 個の炭素原子を有する直鎖のまたは枝分れした飽和または不飽和脂肪族基を表し、Ｒ³は水素原子またはヒドロキシを表し、Ｒ⁴は所望によりハロゲンにより置換されていることがある直鎖のまたは枝分れしたＣ₅〜Ｃ₈アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₇アルケニルまたはＣ₂〜Ｃ₇アルキニル基を表し、Ｒ⁵は酸素原子またはイミノ基を表し、Ｘは原子価結合、酸素原子、硫黄原子、スルフィニルまたはスルホニルを表し、ＹはＸと同じ意味を有し、そしてＸとＹの２つの基は同じであることも異なることもでき、Ｚは酸素原子または硫黄原子である）およびそれらの互変異性体、並びに無機または有機の酸または塩基との生理学的に許容されるそれらの塩に関する。一般式Ｉの化合物は不斉炭素原子を含むので、それらの化合物の全ての光学活性形およびラセミ混合物も本発明の主題である。抗ウイルス薬としてのリポヌクレオチドの製造および用途はJ.Biol．Chem．26 5 ，6112(1990)とEP 0 350 287に記載されている。しかしながら、この場合には、脂肪酸エステル構造によってＡＺＴやｄｄＣのような既知ヌクレオシドに結合されたジミリストイルホスファチジル基とジパルミトイルホスファチジル基のみが調査され合成された。 J．Med．Chem．33，1380(1990)では、抗腫瘍作用を有するチオエーテル脂質とシチジンリン酸とのヌクレオシド接合体が記載され、腫瘍学において利用されている。 Chem．Pharm．Bull．36，209(1988)では、抗白血病活性を有する５′−（３− ＳＮ−ホスファチジル）ヌクレオシド、並びにトランスフェラーゼ活性を有するホスホリパーゼＤの存在下での適当なヌクレオシドとホスホコリンからのそれらの酵素的合成が記載されている。ヌクレオシド中に環状糖成分を有する抗ウイルス作用を有するリポヌクレオチドが特許出願PCT/EP91/01541中に記載されている。Ｌ−α−ジミリストイルホスファチジル酸とアシクロビルとのアシクロビルリン脂質接合体がActa Chem．Scand.，Ser．B，39，47(1985)中に記載されている〔Organophosphorus Chem．18，187(1987)も参照のこと〕。細胞増殖抑制作用を有する新規シタラビン誘導体がDE-OS 4111730に記載されている。それらの化合物の塩基の５′位は置換されていない。本発明のエーテル／チオエーテル脂質は新規であり、且つ有用な薬理学的性質も有する。特にそれらは、ＤＮＡウイルス、例えば単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、パポバウイルス、水痘−帯状庖疹ウイルス、Ａ／Ｂ／Ｃ型肝炎ウイルスもしくはエプスタイン−バーウイルス、またはＲＮＡウイルス、例えばトガウイルスまたはレトロウイルス、例えばオンコウイルス HTLV ＩおよびII 並びにレンチウイルスビスナおよびヒト免疫不全ウイルスHIV-１および２により引き起こされる感染の治療や予防に適当である。式Ｉの化合物は、ヒト、中でもエイズ（AIDS）患者におけるウイルス性庖疹感染の臨床的発現を治療するのに特に適当であると思われる。一般式Ｉの化合物は、薬理学的に適切な用量で不特定に細胞毒性を有することなく抗ウイルス作用を有する。加えて、式Ｉの化合物は、高脂血症、特に高コレステロール血症の治療に適当である。更に前記物質はウラシルレダクターゼの不活性化剤／阻害剤であり、従ってそれらの抗腫瘍作用のため、悪性疾患の治療に適する。ウラシルレダクターゼを不活性化する性質のため、前記化合物は器官特異のおよび全身性の自己免疫疾患、例えば乾癬、全身性紅斑性狼瘡、慢性関節リウマチおよび他の自己免疫疾患を治療するのにも使うことができる。その上、該化合物は非常に優れた経口耐性と優れた生物学的利用能により区別される。本発明の化合物およびそれらの医薬製剤は、上記感染の治療や予防のための他の薬剤と組み合わせて使うこともできる。ＨＩＶ感染またはこの病気に伴う疾患の治療と予防に用いることができる別の薬剤を含むそれらの薬剤の例は、３′− アジド−３′−デオキシチミジン、２′，３′−ジデオキシヌクレオシド、例えば２′，３′−ジデオキシシチジン、２′，３′−ジデオキシアデノシンおよび２′，３′−ジデオキシイノシン、または非ヌクレオシドＲＴ阻害剤、例えばHE PT、ネビラピンもしくはL-697,661および対応する誘導体である。本発明の化合物と１または複数の別の薬剤は、各々個別に、単一製剤か別々の製剤のいずれかにおいて同時に、または異なる時点で投与することができる。一般式Ｉの化合物の可能な塩として、リン酸基のアルカリ塩、アルカリ土類塩およびアンモニウム塩が考慮に入る。アルカリ塩としてはリチウム、ナトリウムおよびカリウム塩が好ましい。アルカリ土類塩としては特にマグネシウム塩やカルシウム塩が挙げられる。本発明によれば、アンモニウム塩は、１〜４個の炭素原子を有するアルキル基および／またはアラルキル基（好ましくはベンジル基）により４回まで置換され得るアンモニウムイオンを含む塩として解釈される。この場合、置換基は同じであっても異なっていてもよい。一般式Ｉ中のＲ¹は、好ましくは、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ基またはＣ₁〜Ｃ₆アルキルメルカプト基により更に置換されていることがある直鎖Ｃ₉〜Ｃ₁₄アルキル基を表す。Ｒ¹は特に、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシルまたはテトラデシル基を表す。Ｒ¹のＣ₁〜Ｃ₆アルコキシ置換基としては、好ましくはメトキシ、エトキシ、ブトキシおよびヘキシルオキシ基が挙げられる。Ｒ¹がＣ₁〜Ｃ₆ アルキルメルカプト基により置換される場合、これはメチルメルカプト、エチルメルカプト、プロピルメルカプト、ブチルメルカプトまたはヘキシルメルカプト基であると解釈される。Ｒ²は、好ましくは、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ基またはＣ₁〜Ｃ₆アルキルメルカプト基により更に置換されることがある直鎖Ｃ₉〜Ｃ₁₄アルキル基を表す。Ｒ²は特に、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシルまたはテトラデシル基を表す。Ｒ²のＣ₁〜Ｃ₆アルコキシ置換基としては、好ましくはメトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシまたはヘキシルオキシ基が挙げられる。Ｒ²がＣ₁〜Ｃ₆アルキルメルカプト基により置換される場合、これは特にメチルメルカプト、エチルメルカプト、ブチルメルカプトまたはヘキシルメルカプト基であると解釈される。Ｒ⁵は好ましくは酸素原子である。ＸおよびＹは好ましくは酸素または硫黄原子を表し、Ｚは好ましくは酸素原子を表す。Ｒ⁴は好ましくは不飽和炭化水素基を表し、アルケニルの場合には、ハロゲンにより、特に臭素により置換されることがあり、特に好ましくはアルキニル基を表す。一般式Ｉの前記リポヌクレオチド中の特に好ましい連結ヌクレオシドは、１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチニルウラシル２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウラシル１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−２−イニルウラシル２′−デオキシ−５−プロプ−２−イニルウリジンである。式Ｉの化合物は、次の方法で調製することができる：１．式IIの化合物（上式中、Ｒ¹，Ｒ²，Ｘ，ＹおよびＺは上述の意味を有する）を、不活性溶媒（例えばトルエン）中でまたは直接ピリジン中で、ピリジン中のＤＣＣと共にまたは２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホン酸クロリドと第三級窒素塩基（例えばピリジンまたはルチジン）の存在下で、一般式IIIの化合物（上式中、Ｒ³，Ｒ⁴およびＲ⁵は上述の意味を有する）と反応させ、そして加水分解が完了した後、所望によりヌクレオシド化学の常法に従って酸素保護基を開裂させ、または２．式IVの化合物（上式中、Ｒ¹，Ｒ²，ＸおよびＹは上述の意味を有する）を、不活性溶媒（例えばトルエン）中でまたは直接ピリジン中で、ピリジン中のＤＣＣと共にまたは２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホン酸クロリドと第三級窒素塩基（例えばピリジンまたはルチジン）の存在下で、一般式Ｖの化合物（上式中、Ｒ³，Ｒ⁴，Ｒ⁵およびＺは上述の意味を有する）と反応させ、そして加水分解が完了した後、所望によりヌクレオシド化学の常法に従って酸素保護基を開裂させ、または３．式VIの化合物（上式中、Ｒ¹，Ｒ²，Ｘ，ＹおよびＺは上述の意味を有する）を、適当な緩衝剤の存在下で、不活性溶媒（例えばクロロホルム）中でホスホリパーゼＤの存在下で、式IIIの化合物（式中、Ｒ³，Ｒ⁴およびＲ⁵は上述の意味を有する）と反応させ、そして反応が完了した後、所望によりヌクレオシド化学の常法に従って酸素保護基を開裂させる。式IIと式IVの化合物の調製はDE 39 29 217.7またはWO 91/05558中に記載されている。一般式IIIの化合物の調製は、Antiviral Chem．Chemother．3,293(1992)およびその中の引用文献、並びに特許明細書EP 465 164(1992)，EP 461 815(1991)， EP 346 108(1989)およびEP 272 065中に記載されている。式Ｉに類似している化合物がEP-A-0350287中に記載されている。その中には対応するグリセロールの１，２−ジエステルが記載されている。ウイルス感染を治療するための式Ｉの化合物を含有する薬剤は、液体または固体形態で腸内にまたは非経口的に投与することができる。この場合、常用される投与形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、コーティング錠、シロップ剤、溶液または懸濁液が挙げられる。注射液用の常用添加剤（例えば安定剤、可溶化剤および緩衝剤）を含有する注射媒としては、好ましくは水が使われる。そのような添加剤は、例えば、酒石酸塩およびクエン酸塩緩衝剤、エタノール、錯化剤（例えばエチレンジアミン四酢酸およびそれらの非毒性塩）、粘度調節用の高分子ポリマー（例えば液状ポリエチレンオキシド）である。注射液用の液状担体物質は無菌でなければならず、好ましくはアンプル中に調剤される。固形担体は、例えばデンプン、ラクトース、マンニトール、メチルセルロース、タルク、高分散ケイ酸、高分子脂肪酸（例えばステアリン酸）、ゼラチン、寒天、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、動物性または植物性脂肪、固形高分子ポリマー（例えばポリエチレングリコール）等である。経口投与に適当である製剤は、所望により矯味矯臭剤および甘味剤を含有することができる。用量は様々な要因、例えば投与形式、種、年齢および／または個体状態に依存し得る。本発明の化合物は、１日あたり且つ体重１kgあたり通常0.1〜100mg、好ましくは0.2〜80mgの量で投与される。１日量は好ましくは２〜５回の服用に分けられ、0.5〜500mgの活性物質含量を有する１〜２錠を各回に服用する。錠剤を遅延型にすることもでき、それにより投与回数が１日１〜３回に減らされる。遅延型錠剤中の活性物質の含量は２〜1000 mgであることができる。活性物質は連続点滴注入（輸液）により投与することもでき、この場合は１日あたり５〜1000mgの量が一般に適当である。実施例に言及する化合物や請求の範囲に記載される全ての置換基の意味を組み合わせることにより誘導されるものに加えて、次の式Ｉの化合物が本発明の意味の中に入る：１．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチニルウラシル〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル２．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチニルウラシル〕リン酸（３−ドデシルスルフィニル−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル３．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチニルウラシル〕リン酸（３−ドデシルスルホニル−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル４．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウラシル〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル５．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３ −ウンデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル６．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３ −ドデシルオキシ−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル７．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−ノニルオキシ）−１−プロピルエステル８．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウラシル〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−デシルメルカプト）−１−プロピルエステル９．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３−ウンデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 10．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３ −トリデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 11．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３ −トリデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 12．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチニルウラシル〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−ドデシルオキシ）−１−プロピルエステル 13．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−ウンデシルオキシ）−１−プロピルエステル 14．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸〔２，３−ビス（ドデシルメルカプト）〕−１−プロピルエステル 15．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３ −デシルメルカプト−２−ドデシルオキシ）−１−プロピルエステル 16．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３ −ウンデシルオキシ−２−ドデシルオキシ）−１−プロピルエステル 17．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウラシル〕リン酸（３−デシルスルホニル−２−ドデシルオキシ）−１−プロピルエステル 18．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチニルウラシル〕リン酸（３−デシルオキシ−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 19．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウラシル〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−ドデシルオキシ）−１−プロピルエステル 20．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３ −テトラデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 21．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチニルウラシル〕リン酸（３−ペンタデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 22．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３−トリデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 23．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３ −ドデシルメルカプト−２−オクチルオキシ）−１−プロピルエステル 24．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３ −ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 25．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３ −ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 26．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 27．５′−〔１′−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチニルウラシル〕リン酸（３−ウンデシルメルカプト−２−ウンデシルオキシ）−１−プロピルエステル 28．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３ −ウンデシルメルカプト−２−ウンデシルオキシ）−１−プロピルエステル 29．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３ −ウンデシルメルカプト−２−ウンデシルオキシ）−１−プロピルエステル 30．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウラシル〕リン酸（３−ウンデシルメルカプト−２−ウンデシルオキシ）−１− プロピルエステル 31．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−２−イニルウラシル〕リン酸（３−ウンデシルメルカプト−２−ウンデシルオキシ）−１− プロピルエステル 32．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウラシル〕リン酸（３−ドデシルスルフィニル−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 33．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３ −ドデシルスルフィニル−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 34．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３ −ドデシルスルフィニル−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 35．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−２−イニルウリジン〕リン酸（３−ドデシルスルフィニル−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 36．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチニルウラシル〕リン酸（３−ウンデシルスルフィニル−２−ウンデシルオキシ）−１−プロピルエステル 37．５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウラシル〕リン酸（３−ウンデシルスルフィニル−２−ウンデシルオキシ）−１ −プロピルエステル 38．５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３ −ウンデシルスルフィニル−２−ウンデシルオキシ）−１−プロピルエステル実施例１リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 60mlの無水ピリジン中の4.26 gのP₄O₁₀の懸濁液を室温で13mlのヘキサメチルジシロキサンと混合し、100℃に１時間加熱した。次いでそれをわずかに冷却し、25 gの３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ−１−プロパノールと混合し、そして100℃に更に2.5時間加熱した。完全に室温に冷却しそして真空中で高揮発性成分を留去した後、残渣の水性懸濁液からエーテルを使って上記リン酸エステルを抽出することができた。エーテル相の蒸発残渣をシリカゲル60またはRP 18上でのカラムクロマトグラフィーにより精製した。収量18.7 g（63％）。ＴＬＣプレートMerck 5715シリカゲル60上でのＲ_f＝0.66(CH₂Cl₂/MeOH/H₂O 6.5/2.5/ 0.4)。あるいは、次のようにして上記リン酸エステルを調製することができる： 7.5ｌのトルエン中の770 gの３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ−１ −プロパノールと219 gの２，６−ルチジンの溶液を、０〜３℃において7.5ｌのトルエン中の322 gのホスホリルクロリドに２時間以内で滴下添加し、そして添加が終了したら、それを０℃で更に３時間攪拌する。次いで沈澱した塩酸塩を吸引濾過し、トルエンで洗浄し、濾液を炭酸水素トリエチルアンモニウム溶液（乳濁液が透明になるまで4.5ｌの水中の463 gのトリエチルアミンの混合物にCO₂を通すことにより調製する）にゆっくり添加する。室温で２時間後、前記乳濁液を3.7ｌの１Ｎ塩酸および4.5ｌの飽和塩化ナトリウム溶液と混合し、濾過により分離する。有機相を蒸発により濃縮し、油状残渣（900 g）をそのまま次の反応に使用する。５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウラシル〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステル 14.5 g（３０ミリモル）のリン酸（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステルを各回20mlの無水ピリジンと２回混合し、蒸発により濃縮した。残渣を200mlの無水ピリジン中に取り、窒素下で27 g（85ミリモル）の２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホン酸クロリドと混合し、そして２０℃で２時間攪拌した。30mlの無水ピリジン中の8.47 g（３０ミリモル）の１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−プロプ−１−イニルウラシルを添加した後、それを40℃で更に24時間攪拌した。次いで100mlの水を加え、混合物を室温で更に２時間攪拌し、ロータリーエバポレーター中で溶媒を留去した。トルエンとの蒸発により油状残渣からピリジン残留物を除去し、そして溶離剤としてメタノール／水＝７／３→9.5／0.5の直線勾配を使ったRP18上でのカラムクロマトグラフィーにより精製した。収量9.36gのオイル（理論量の41％）；RP8 上でのＲ_f＝0.78（H₂O/MeOH 0.5/9.5）、ＴＬＣプレートMerck 5715シリカゲル6 0Ｆ上でのＲ_f＝0.25(CH₂Cl₂/MeOH/H₂O 6.5/2.5/0.4)。実施例２実施例１と同様にして、１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−エチニルウラシルから27％の収率で５′−〔１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５− エチニルウラシル〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１ −プロピルエステルを調製した。オイル；RP8上でのＲ_f＝0.72(H₂O/MeOH 0.5/9. 5)、ＴＬＣプレートMerck 5715シリカゲル60上でのＲ_f＝0.30（CH₂Cl₂/MeOH/H₂O 6.5/2.5/0.4）。実施例３実施例１と同様にして、２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジンから23％の収率で５′−〔２′−デオキシ−５−プロプ−１−イニルウリジン〕リン酸（３−ドデシルメルカプト−２−デシルオキシ）−１−プロピルエステルを調製した。オイル；RP8上でのＲ_f＝0.71(H₂O/MeOH 0.5/9.5)、ＴＬＣプレートMe rck 5715シリカゲル60上でのＲ_f＝0.28(CH₂Cl₂/MeOH/H₂O 6.5/2.5/0.4)。実施例４フレンドウイルス白血病モデルにおける効力と耐性６〜８週齢の雌Balb/cマウス（Iffa Credo）にそれぞれ０日目にウイルスを含む脾上清0.2mlを腹腔内に接種した。０日目（開始：ウイルス接種後１時間目）から13日目まで、試験物質6.25mg、12.5mg、25mgおよび50mg／kgの腹腔内用量により毎日動物を治療した。治療の開始前と13日目に体重と小血球算定（WBC，RBC，Hb，Hct，Plt）のパラメーターを測定し、そして14日目に動物を犠牲にした後、ウイルス血症のパラメーターとして個体の脾重量を測定した。ＡＺＴに用いるものと同じデザインを使って本発明の物質を試験した。得られた結果は、試験した物質がウイルスにより引き起こされる巨脾症に対して用量依存効果を有し、従ってレトロウイルス感染の治療に利用できることを示す。実施例５ＨＩＶ感染細胞培養物における効能少なくとも４濃度を使ったマイクロタイタープレート中のＭＴ２系において、大部分は自動的に（BeckmanからのBiomek）三重反復測定を実施した（標準偏差＜５％）。平行した調製物において毒性（細胞＋物質）と抗ウイルス作用（細胞＋物質＋ウイルス）を測定した。試験しようとする物質とＭＴ２細胞とを予備インキュベートし、次いでHIV− １（HTLV-III-B，MOI 0.03）を感染させた。上清を除去し、培地（物質を含む）により置き換え、７日間インキュベートした。次いで細胞変性効果（合胞体）を評価し、ＭＴＴ試験（細胞の生存力）を実施し、そして再感染のために上清を移した。

Claims

【特許請求の範囲】１．式Ｉのリポヌクレオチド（上式中、Ｒ¹は、場合によりフェニル、ハロゲン、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルメルカプト、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシカルボニル、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルスルフィニルまたはＣ₁〜Ｃ₆アルキルスルホニル基により単置換もしくは多置換されていることがある、１〜２０個の炭素原子を有する直鎖のまたは枝分れした飽和または不飽和アルキル鎖を表し、Ｒ²は、場合によりフェニル、ハロゲン、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルメルカプト、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシカルボニルまたはＣ₁〜Ｃ₆アルキルスルホニル基により単置換もしくは多置換されていることがある、１〜２０個の炭素原子を有する直鎖のまたは枝分れした飽和または不飽和アルキル鎖を表し、Ｒ³は水素原子またはヒドロキシを表し、Ｒ⁴は所望によりハロゲンにより置換されていることがある直鎖のまたは枝分れしたＣ₅〜Ｃ₈アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₇アルケニルまたはＣ₂〜Ｃ₇アルキニル基を表し、Ｒ⁵は酸素原子またはイミノ基を表し、Ｘは原子価結合、酸素原子、硫黄原子、スルフィニルまたはスルホニルを表し、ＹはＸと同じ意味を有し、そしてＸとＹの２つの基は同じであることも異なることもでき、Ｚは酸素原子または硫黄原子である）およびそれらの互変異性体、並びに無機または有機の酸または塩基との生理学的に許容されるそれらの塩。２．Ｒ¹がＣ₁〜Ｃ₆アルコキシまたはＣ₁〜Ｃ₆アルキルメルカプト基により置換されていることがある直鎖Ｃ₉〜Ｃ₁₄アルキル基を表す、請求項１に記載のリポヌクレオチド。３．Ｒ¹がメトキシ、エトキシ、ブトキシ、ヘキシルオキシ、メチルメルカプト、エチルメルカプト、プロピルメルカプト、ブチルメルカプトまたはヘキシルメルカプト基により置換されていることがあるデシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシルまたはテトラデシル基を表す、請求項２に記載のリポヌクレオチド。４．Ｒ²がＣ₁〜Ｃ₆アルコキシまたはＣ₁〜Ｃ₆アルキルメルカプト基により置換されることがある直鎖Ｃ₉〜Ｃ₁₄アルキル基を表す、請求項１〜３のいずれか一項に記載のリポヌクレオチド。５．Ｒ²がメトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ヘキシルオキシ、メチルメルカプト、エチルメルカプト、ブチルメルカプトまたはヘキシルメルカプト基により置換されていることがあるデシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシルまたはテトラデシル基を表す、請求項４に記載のリポヌクレオチド。６．請求項１〜５のいずれか一項に記載の式Ｉのリポヌクレオチドの製造方法であって、 (1) 式IIの化合物（上式中、Ｒ¹，Ｒ²，Ｘ，ＹおよびＺは上述の意味を有する）を、不活性溶媒（例えばトルエン）中でまたは直接ピリジン中で、ピリジン中のＤＣＣと共にまたは２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホン酸クロリドと第三級窒素塩基（例えばピリジンまたはルチジン）の存在下で、一般式IIIの化合物（上式中、Ｒ³，Ｒ⁴およびＲ⁵は上述の意味を有する）と反応させ、そして加水分解が完了した後、所望によりヌクレオシド化学の常法に従って酸素保護基を開裂させ、または (2) 式IVの化合物（上式中、Ｒ¹，Ｒ²，ＸおよびＹは上述の意味を有する）を、不活性溶媒（例えばトルエン）中でまたは直接ピリジン中で、ピリジン中のＤＣＣと共にまたは２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホン酸クロリドと第三級窒素塩基（例えばピリジンまたはルチジン）の存在下で、一般式Ｖの化合物（上式中、Ｒ³，Ｒ⁴，Ｒ⁵およびＺは上述の意味を有する）と反応させ、そして加水分解が完了した後、所望によりヌクレオシド化学の常法に従って酸素保護基を開裂させ、または (3) 式VIの化合物（上式中、Ｒ¹，Ｒ²，Ｘ，ＹおよびＺは上述の意味を有する）を、適当な緩衝剤の存在下で、不活性溶媒（例えばクロロホルム）中でホスホリパーゼＤの存在下で、式IIIの化合物（式中、Ｒ³，Ｒ⁴およびＲ⁵は上述の意味を有する）と反応させ、そして反応が完了した後、所望によりヌクレオシド化学の常法に従って酸素保護基を開裂させ、続いて所望により式Ｉの化合物を生理学的に許容されるそれらの塩に変換することを含んで成る方法。７．請求項１〜５のいずれか一項に記載の式Ｉの少なくとも１つのリポヌクレオチドと製剤学的に常用される補助物質または担体とを含有する薬剤。８．ウイルスまたはレトロウイルス感染の治療用の薬剤の製造のための請求項１〜５のいずれか一項に記載の式Ｉのリポヌクレオチドの用途。