JPH085629A - 血液または血球の保存方法 - Google Patents
血液または血球の保存方法Info
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 血液または血球を保存する際に、白血球、特
に顆粒球を安定化して保存する。 【効果】 本発明の血液または血球の保存方法によっ
て、白血球、特に顆粒球を安定化すなわち減少させるこ
となく保存することが可能となる。また、本発明の保存
剤入り採血管を用いることにより、採取した血液を後操
作なしに、白血球、特に顆粒球を安定化して保存するこ
とができる。
に顆粒球を安定化して保存する。 【効果】 本発明の血液または血球の保存方法によっ
て、白血球、特に顆粒球を安定化すなわち減少させるこ
となく保存することが可能となる。また、本発明の保存
剤入り採血管を用いることにより、採取した血液を後操
作なしに、白血球、特に顆粒球を安定化して保存するこ
とができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、臨床検査で採取した血
液または血球の保存方法に関する。
液または血球の保存方法に関する。
【０００２】
【従来の技術および解決しようとする課題】臨床検査の
ために患者から血液を採取する際、減圧された採血管と
穿刺針を備えた採血管ホルダーからなる採血器具が多く
使用されている。
ために患者から血液を採取する際、減圧された採血管と
穿刺針を備えた採血管ホルダーからなる採血器具が多く
使用されている。
【０００３】採血後速やかに検査を行うことが好ましい
が、外部検査機関に検査依頼する場合などは、その日の
うちに検査ができるとは限らない。その場合に、時間の
経過に伴う測定値の信頼性が問題となる。
が、外部検査機関に検査依頼する場合などは、その日の
うちに検査ができるとは限らない。その場合に、時間の
経過に伴う測定値の信頼性が問題となる。
【０００４】その１例として、ＣＰＤ（Citrate Phosph
ate Glucose）保存血中の白血球数および赤血球の浸透
圧抵抗の経日的な減少が報告されている。また、これに
対し、ビタミンＥに抑制作用があることが報告されてい
る（文献：Vitamins 39 p86-90 1969、特表平５−５０
０３１９））。しかし、ビタミンＥは、安定性に欠け、
また脂溶性なので血液に溶解させにくいという問題点が
ある。
ate Glucose）保存血中の白血球数および赤血球の浸透
圧抵抗の経日的な減少が報告されている。また、これに
対し、ビタミンＥに抑制作用があることが報告されてい
る（文献：Vitamins 39 p86-90 1969、特表平５−５０
０３１９））。しかし、ビタミンＥは、安定性に欠け、
また脂溶性なので血液に溶解させにくいという問題点が
ある。
【０００５】一方、自動血球測定用試薬としてポリオキ
シエチレン系非イオン界面活性剤を用いる方法および試
薬が知られている（特開平３−２５２５５６、特再昭６
３−８０９５０４）。これらの発明は、赤血球を溶解
し、白血球に作用して白血球を分類・計測可能とするも
のであり、測定時に添加する血球数の測定用試薬であ
る。したがって、ポリオキシエチレン系非イオン界面活
性剤の血液または血球の保存作用・効果、および採血時
に添加する保存剤になりえることについては全く明らか
にされておらず未解決である。
シエチレン系非イオン界面活性剤を用いる方法および試
薬が知られている（特開平３−２５２５５６、特再昭６
３−８０９５０４）。これらの発明は、赤血球を溶解
し、白血球に作用して白血球を分類・計測可能とするも
のであり、測定時に添加する血球数の測定用試薬であ
る。したがって、ポリオキシエチレン系非イオン界面活
性剤の血液または血球の保存作用・効果、および採血時
に添加する保存剤になりえることについては全く明らか
にされておらず未解決である。
【０００６】
【課題を解決するための手段】上記の問題を解決すべく
鋭意研究を重ねた結果、以下に述べる血液または血球の
保存方法、保存剤、保存剤入り採血管により上記目的を
達成することが出来ることを見出し、本発明を完成する
に至った。 （１） ポリオキシエチレン系非イオン界面活性剤を血
液または血球に添加することを特徴とする血液または血
球の保存方法。
鋭意研究を重ねた結果、以下に述べる血液または血球の
保存方法、保存剤、保存剤入り採血管により上記目的を
達成することが出来ることを見出し、本発明を完成する
に至った。 （１） ポリオキシエチレン系非イオン界面活性剤を血
液または血球に添加することを特徴とする血液または血
球の保存方法。
【０００７】（２） 前記ポリオキシエチレン系非イオ
ン界面活性剤がポリオキシエチレンヒマシ油またはポリ
オキシエチレン硬化ヒマシ油であることを特徴とする
（１）に記載の血液または血球の保存方法。
ン界面活性剤がポリオキシエチレンヒマシ油またはポリ
オキシエチレン硬化ヒマシ油であることを特徴とする
（１）に記載の血液または血球の保存方法。
【０００８】（３） 前記ポリオキシエチレン系非イオ
ン界面活性剤が一般式またはで表される化合物であ
ることを特徴とする（１）に記載の血液または血球の保
存方法。
ン界面活性剤が一般式またはで表される化合物であ
ることを特徴とする（１）に記載の血液または血球の保
存方法。
【０００９】
【化１】
【００１０】
【化２】
【００１１】（４） ポリオキシエチレン系非イオン界
面活性剤を有することを特徴とする血液または血球の保
存剤。
面活性剤を有することを特徴とする血液または血球の保
存剤。
【００１２】（５） 前記ポリオキシエチレン系非イオ
ン界面活性剤がポリオキシエチレンヒマシ油またはポリ
オキシエチレン硬化ヒマシ油であることを特徴とする請
求項４に記載の血液または血球の保存剤。
ン界面活性剤がポリオキシエチレンヒマシ油またはポリ
オキシエチレン硬化ヒマシ油であることを特徴とする請
求項４に記載の血液または血球の保存剤。
【００１３】（６） 前記ポリオキシエチレン系非イオ
ン界面活性剤が前記一般式またはで表される化合物
であることを特徴とする（４）に記載の血液または血球
の保存剤。 （７） 一端が開口し他端が閉塞した有底管と、該有底
管の開口部を密封する密封部材とからなる採血管であっ
て、該減圧採血管内に少なくともポリオキシエチレン系
非イオン界面活性剤を封入したことを特徴とする採血
管。
ン界面活性剤が前記一般式またはで表される化合物
であることを特徴とする（４）に記載の血液または血球
の保存剤。 （７） 一端が開口し他端が閉塞した有底管と、該有底
管の開口部を密封する密封部材とからなる採血管であっ
て、該減圧採血管内に少なくともポリオキシエチレン系
非イオン界面活性剤を封入したことを特徴とする採血
管。
【００１４】（８） 前記ポリオキシエチレン系非イオ
ン界面活性剤がポリオキシエチレンヒマシ油またはポリ
オキシエチレン硬化ヒマシ油であることを特徴とする
（７）に記載の採血管。
ン界面活性剤がポリオキシエチレンヒマシ油またはポリ
オキシエチレン硬化ヒマシ油であることを特徴とする
（７）に記載の採血管。
【００１５】（９） 前記ポリオキシエチレン系非イオ
ン界面活性剤が前記一般式またはで表される化合物
であることを特徴とする（７）に記載の採血管。
ン界面活性剤が前記一般式またはで表される化合物
であることを特徴とする（７）に記載の採血管。
【００１６】（１０） 前記減圧採血管内にさらに抗凝
固剤を封入したことを特徴とする（７）から（９）のい
ずれかに記載の採血管。
固剤を封入したことを特徴とする（７）から（９）のい
ずれかに記載の採血管。
【００１７】
【作用】本発明の保存剤を添加した血液は、添加しない
で同一条件下で保存した血液と比較して、白血球の数が
減少しにくい。その効果は、２４時間までは採血時と同
程度の白血球数を示し、非添加の場合と比較して明らか
な差がある。４８時間においても、非添加の場合よりも
減少率が低い。特に、顆粒球の数において、顕著な効果
が認められる。また、細胞の機能においても有効性が認
められる。
で同一条件下で保存した血液と比較して、白血球の数が
減少しにくい。その効果は、２４時間までは採血時と同
程度の白血球数を示し、非添加の場合と比較して明らか
な差がある。４８時間においても、非添加の場合よりも
減少率が低い。特に、顆粒球の数において、顕著な効果
が認められる。また、細胞の機能においても有効性が認
められる。
【００１８】本発明の血液または血球の保存剤として
は、ポリオキシエチレン系界面活性剤が好ましく、より
好ましくはポリオキシエチレンヒマシ油またはポリオキ
シエチレン硬化ヒマシ油であり、特に好ましくは前記一
般式またはで表される化合物である。前記ポリオキ
シエチレンヒマシ油およびポリオキシエチレン硬化ヒマ
シ油は、ヒマシ油および硬化ヒマシ油に酸化エチレンを
付加したものである。血液または血球の保存剤としての
ポリオキシエチレンヒマシ油またはポリオキシエチレン
硬化ヒマシ油は、酸化エチレンの１０から１００モル付
加物が好ましく、より好ましくは３０から１００モル付
加物であり、特に好ましくは４０から６０モル付加物で
ある。前記一般式またはで表される化合物のｄ，
ｅ，ｆ，ｘ，ｙ，ｚは、正の整数であり、その合計は１
０から１００が好ましく、より好ましくは３０から１０
０であり、特に好ましくは４０から６０である。
は、ポリオキシエチレン系界面活性剤が好ましく、より
好ましくはポリオキシエチレンヒマシ油またはポリオキ
シエチレン硬化ヒマシ油であり、特に好ましくは前記一
般式またはで表される化合物である。前記ポリオキ
シエチレンヒマシ油およびポリオキシエチレン硬化ヒマ
シ油は、ヒマシ油および硬化ヒマシ油に酸化エチレンを
付加したものである。血液または血球の保存剤としての
ポリオキシエチレンヒマシ油またはポリオキシエチレン
硬化ヒマシ油は、酸化エチレンの１０から１００モル付
加物が好ましく、より好ましくは３０から１００モル付
加物であり、特に好ましくは４０から６０モル付加物で
ある。前記一般式またはで表される化合物のｄ，
ｅ，ｆ，ｘ，ｙ，ｚは、正の整数であり、その合計は１
０から１００が好ましく、より好ましくは３０から１０
０であり、特に好ましくは４０から６０である。
【００１９】血液または血球に添加する本発明の保存剤
の量は、化合物の有効作用量によって異なるので一律で
はない。例えば、酸化エチレン６０モル付加物のポリオ
キシエチレン硬化ヒマシ油の血液への添加量は、１０〜
１００μ／ｍｌが好ましく、より好ましくは１５〜５０
μ／ｍｌである。酸化エチレン４０モル付加物のポリオ
キシエチレン硬化ヒマシ油の血液への添加量は、１０〜
３００μ／ｍｌが好ましく、より好ましくは１０〜１０
０μ／ｍｌであり、特に好ましくは１５〜５０μ／ｍｌ
である。室温で固体あるいはペースト状の化合物は、生
理食塩水またはＰＢＳ（phosphate buffered saline）
などの緩衝液に溶解してから血液また血球に添加するの
が好ましい。
の量は、化合物の有効作用量によって異なるので一律で
はない。例えば、酸化エチレン６０モル付加物のポリオ
キシエチレン硬化ヒマシ油の血液への添加量は、１０〜
１００μ／ｍｌが好ましく、より好ましくは１５〜５０
μ／ｍｌである。酸化エチレン４０モル付加物のポリオ
キシエチレン硬化ヒマシ油の血液への添加量は、１０〜
３００μ／ｍｌが好ましく、より好ましくは１０〜１０
０μ／ｍｌであり、特に好ましくは１５〜５０μ／ｍｌ
である。室温で固体あるいはペースト状の化合物は、生
理食塩水またはＰＢＳ（phosphate buffered saline）
などの緩衝液に溶解してから血液また血球に添加するの
が好ましい。
【００２０】本発明の保存剤は、ポリオキシエチレン系
界面活性剤単独でもよい。さらに抗凝固剤、栄養素、無
機塩類、抗生物質等を添加してもよい。抗凝固剤として
は、シトレートフォスフェートデキストロース、シトレ
ートホスフェートデキストロースアデニン、ヘパリンナ
トリウム、ＥＤＴＡ−２Ｎａ、クエン酸ナトリウムなど
がよい。栄養素としては、アデニン、デキストロース、
マンニトール、グルコース、グルコン酸などが好まし
い。無機塩類としては、リン酸、酢酸ナトリウムなどが
好ましい。
界面活性剤単独でもよい。さらに抗凝固剤、栄養素、無
機塩類、抗生物質等を添加してもよい。抗凝固剤として
は、シトレートフォスフェートデキストロース、シトレ
ートホスフェートデキストロースアデニン、ヘパリンナ
トリウム、ＥＤＴＡ−２Ｎａ、クエン酸ナトリウムなど
がよい。栄養素としては、アデニン、デキストロース、
マンニトール、グルコース、グルコン酸などが好まし
い。無機塩類としては、リン酸、酢酸ナトリウムなどが
好ましい。
【００２１】図１は、本発明の採血管の一実施例である
減圧採血管の断面図である。本発明の減圧採血管１は、
有底管２とこの有底管２の開口部を密封する密封部材３
とからなっており、内部が所定の採血量分だけ減圧され
ている。
減圧採血管の断面図である。本発明の減圧採血管１は、
有底管２とこの有底管２の開口部を密封する密封部材３
とからなっており、内部が所定の採血量分だけ減圧され
ている。
【００２２】有底管２の材質は、プラスチックまたはガ
ラス製である。プラスチックとしてはガスバリアー性が
高いものが好ましい。密封部材３は、ガスバリアー部材
４とシール部材５とから構成される。ガスバリアー部材
４は、アルミ箔フィルム等からなり、中空針が穿刺され
る前における気密性が高く、有底管２の開口部を密閉す
る。シール部材５は、ポリイソプロピレンゴム等からな
り、ガスバリアー部材４の少なくとも中空針穿刺領域に
披着され、穿刺された中空針が抜去された後における針
孔を閉塞可能とする。密封部材３は、ガスバリアー部材
とシール部材とが一体となった、ポリイソプロピレンゴ
ム等からなる栓体でもよい。減圧採血管１の内部には、
本発明の保存剤６を封入する。内部の保存剤の量は、化
合物の有効作用量によって異なるので一律ではないが、
所定の採血量に対応する有効量であることが好ましい。
また、血液を凝固させないために、内部には前記抗凝固
剤を封入することが好ましい。このような本発明の保存
剤入り減圧採血管を用いることにより、採取した血液を
後操作なしに、白血球を安定させて保存することができ
る。
ラス製である。プラスチックとしてはガスバリアー性が
高いものが好ましい。密封部材３は、ガスバリアー部材
４とシール部材５とから構成される。ガスバリアー部材
４は、アルミ箔フィルム等からなり、中空針が穿刺され
る前における気密性が高く、有底管２の開口部を密閉す
る。シール部材５は、ポリイソプロピレンゴム等からな
り、ガスバリアー部材４の少なくとも中空針穿刺領域に
披着され、穿刺された中空針が抜去された後における針
孔を閉塞可能とする。密封部材３は、ガスバリアー部材
とシール部材とが一体となった、ポリイソプロピレンゴ
ム等からなる栓体でもよい。減圧採血管１の内部には、
本発明の保存剤６を封入する。内部の保存剤の量は、化
合物の有効作用量によって異なるので一律ではないが、
所定の採血量に対応する有効量であることが好ましい。
また、血液を凝固させないために、内部には前記抗凝固
剤を封入することが好ましい。このような本発明の保存
剤入り減圧採血管を用いることにより、採取した血液を
後操作なしに、白血球を安定させて保存することができ
る。
【００２３】
【実施例】ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油をヒト血液
に添加し、顆粒球数の経時変化を調べた。
に添加し、顆粒球数の経時変化を調べた。
【００２４】〈方法〉酸化エチレン６０モル付加物のポ
リオキシエチレン硬化ヒマシ油［日光ケミカルズ
（株）、ＨＣＯ−６０（医薬用）］を生理食塩水に溶解
し１０％溶液にした。ヒト血液２ｍｌにこの１０％溶液
を３００μｌ添加し、室温で放置した。対照には、生理
食塩水を同様に添加して比較した。検体は、０（採血直
後）、２４、４８時間後に自動血球計数機［東亜医用電
子（株）］で顆粒数を測定した。結果は、採血直後の顆
粒球数を１００％とする細胞数変化率で表した。
リオキシエチレン硬化ヒマシ油［日光ケミカルズ
（株）、ＨＣＯ−６０（医薬用）］を生理食塩水に溶解
し１０％溶液にした。ヒト血液２ｍｌにこの１０％溶液
を３００μｌ添加し、室温で放置した。対照には、生理
食塩水を同様に添加して比較した。検体は、０（採血直
後）、２４、４８時間後に自動血球計数機［東亜医用電
子（株）］で顆粒数を測定した。結果は、採血直後の顆
粒球数を１００％とする細胞数変化率で表した。
【００２５】〈結果〉図２に示すように、対照群は、２
４、４８時間において顆粒球数が減少していたが、ポリ
オキシエチレン硬化ヒマシ油添加群では、減少すること
なく採血直後と同程度であり、有意な効果が認められた
（Student's t-test；p<0.01）。
４、４８時間において顆粒球数が減少していたが、ポリ
オキシエチレン硬化ヒマシ油添加群では、減少すること
なく採血直後と同程度であり、有意な効果が認められた
（Student's t-test；p<0.01）。
【００２６】
【発明の効果】本発明の血液または血球の保存方法によ
って、白血球、特に顆粒球を安定化すなわち減少させる
ことなく保存することが可能となる。また、本発明の保
存剤入り採血管を用いることにより、採取した血液を後
操作なしに、白血球、特に顆粒球を安定化して保存する
ことができる。
って、白血球、特に顆粒球を安定化すなわち減少させる
ことなく保存することが可能となる。また、本発明の保
存剤入り採血管を用いることにより、採取した血液を後
操作なしに、白血球、特に顆粒球を安定化して保存する
ことができる。
【図１】図１は，本発明の採血管の一実施例である減圧
採血管の断面図である。
採血管の断面図である。
【図２】図２は、ヒト血液中の顆粒球数の経時的変化に
対するポリオキシエチレン硬化ヒマシ油の効果を示した
グラフである。
対するポリオキシエチレン硬化ヒマシ油の効果を示した
グラフである。
１ 減圧採血管 ２ 有底管 ３ 密封部材 ４ バリアー部材 ５ シール部材 ６ 保存剤
Claims (1)
- 【請求項１】 ポリオキシエチレン系非イオン界面活性
剤を血液または血球に添加することを特徴とする血液ま
たは血球の保存方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6133997A JPH085629A (ja) | 1994-06-16 | 1994-06-16 | 血液または血球の保存方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6133997A JPH085629A (ja) | 1994-06-16 | 1994-06-16 | 血液または血球の保存方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH085629A true JPH085629A (ja) | 1996-01-12 |
Family
ID=15117975
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6133997A Pending JPH085629A (ja) | 1994-06-16 | 1994-06-16 | 血液または血球の保存方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH085629A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2016510126A (ja) * | 2013-03-14 | 2016-04-04 | ホリバ・エービーエックス・エスエーエス | 関心対象のための新規のフロー分析方法 |
| WO2018230571A1 (ja) * | 2017-06-16 | 2018-12-20 | 国立大学法人東京大学 | 採血管 |
| JPWO2021132213A1 (ja) * | 2019-12-23 | 2021-07-01 |
-
1994
- 1994-06-16 JP JP6133997A patent/JPH085629A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2016510126A (ja) * | 2013-03-14 | 2016-04-04 | ホリバ・エービーエックス・エスエーエス | 関心対象のための新規のフロー分析方法 |
| WO2018230571A1 (ja) * | 2017-06-16 | 2018-12-20 | 国立大学法人東京大学 | 採血管 |
| JP2019002821A (ja) * | 2017-06-16 | 2019-01-10 | 国立大学法人 東京大学 | 採血管 |
| JPWO2021132213A1 (ja) * | 2019-12-23 | 2021-07-01 | ||
| WO2021132213A1 (ja) * | 2019-12-23 | 2021-07-01 | 富士レビオ株式会社 | 細胞外小胞の回収方法、および採血管 |
| CN114902043A (zh) * | 2019-12-23 | 2022-08-12 | 富士瑞必欧株式会社 | 细胞外囊泡的回收方法和采血管 |
| US20230051797A1 (en) * | 2019-12-23 | 2023-02-16 | Fujirebio Inc. | Method for recovering extracellular vesicle and blood collection vessel |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A977 | Report on retrieval |
Effective date: 20040615 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 |
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| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20040622 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20040819 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20050426 |