JPH0856646A - 低酸素培養器 - Google Patents
低酸素培養器Info
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Abstract
培養器において、その対象物に合わせて該低酸素培養器
内のガス濃度やガスの組成を制御するために、窒素ガス
や炭酸ガスを用いるが、この窒素ガスの供給源を窒素ボ
ンベ等のようにガス量が有限のものを使用しない。 【構成】 培養室1に、窒素ガスの貯留タンク23から
窒素ガスを供給する構成において、大気中の窒素ガスを
高濃度に濃縮できるPSA方式のN2 濃縮器23で作る
窒素ガスを用いる構成とする。
Description
器の改良に関する。
の対象物に合わせて温度、培養室のガス濃度及び組成,
培養液,培地pH等さまざまの要因によりその成育が影
響され変わってくる。特に培地と培地pHと培養室内の
O2 濃度とCO2 濃度が重要である。CO2 濃度は培地
のpHを一定に保つ上から重要であり、O2 は微生物の
好気性,嫌気性の性質上から、また細胞の種類によりそ
の濃度管理は重要である。今まで培養室を恒温に保ち、
温度変化が少なくなるよう温湯を壁面内に入れる構造の
ものがあり、また培地は重曹を含む緩衝液を用いてその
pHが変わりにくいようにCO2 の濃度を高めている。
また、別のものではCO2 導入口,N2 導入口を設けて
CO2 ボンベ又はN2 ボンベのガスを減圧弁にて減圧し
て配管にて接続して導入している。そして該培養室内の
O2 濃度,CO2 濃度を測定し、指定の値よりずれると
当該配管より手動又は自動的にこれらのガスを導入しな
がら該培養室内のガス濃度を一定に保つようにして培養
実験を続けている。しかし培養には長時間を要し、その
間、ボンベのガス切れ等により各ガスの濃度等に変化が
あるとせっかくの実験が失敗することが多々発生してい
る。
より異なるが一般的にN2 の方が多い。そして実験をす
る人はボンベの残量に気をつけながら無くなれば重いボ
ンベの交換作業を行わなければならない等の余分な苦労
がある。また、実験の過程で扉を開いて一時的に培養物
を観察する場合はその扉の開と同時にまわりの空気が流
れ込み、O2 濃度が21%に上がり、CO2 濃度は0.
03%まで下がる。扉の閉とともに大量のN2 ,CO2
を流入させ、短時間に元の環境に戻し、被培養物に与え
る影響を最小限にする必要がある。
すべく大気中にあるN2 を自動的に集めて供給し、O2
濃度を自動的に一定にする(但し、21%以下とする)
ようにし、N2 ボンベの交換を不用にする。しかし、C
O2 は自然に大量に存在するものではないので、別に生
成したガスを持ってくる必要があるためCO2 ボンベは
別に付加する。
と前面に扉3を有する気密の培養室であって該培養室に
はN2 及びCO2 を導入する導入口と一定封止圧を有す
る逆止弁25を設けた大気放出口と室内ガス濃度を検出
するO2 センサー及び/又はCO2 センサーと扉の開閉
状態を検出する開閉センサーを有し、このO2 濃度及び
/又はCO2 濃度と開閉信号は電気信号に変換されて制
御部29に伝えられる。該培養室のCO2 導入口は自動
弁V3 19を介してCO2 供給源(ボンベ)から調圧弁
を用いて調圧したCO2 が供給されるよう配管接続さ
れ、N2 導入口には自動弁V2 20を介してN2 供給源
が配管接続される。N2 供給源は空気中のN2 を自動的
に濃縮するN2 濃縮器とN2 の貯留タンクであって、N
2 透過膜により濃縮する膜式のものとカーボンモレキュ
ラーシーブス(CMS)の活性炭分子篩を用いたPSA
方式の濃縮器(公知の技術)がある。これ等の濃縮器に
より濃縮されたN2 は自動弁V1 21を介してN2 の貯
留タンク23に接続され、これに貯留した後、配管にて
該培養室のN2 供給口に自動弁V2 20を介して接続さ
れる。N2 の貯留タンク23には圧力センサー18が設
置されているのでガスの圧力が測定され、この圧力信号
は電気信号に変換され制御部29に伝えられる。N2 濃
縮器は貯留タンクの圧力が一定値PL まで低下したとき
該制御部29よりコンプレッサーを起動してN2 濃度が
一定濃度に達した後又は一定時間経過後に自動弁V1 を
開いて貯留タンクにガスを供給する。そして貯留タンク
の圧力が一定値PH まで上昇したとき停止する。N2 の
貯留タンクから培養室にN2 ガスを供給する自動弁V2
20は該培養室のO2 濃度が、一定値以上になった信号
により制御部が開閉して制御し、O2 濃度を目標の一定
値に保つように構成したものである。すなわち自動弁V
2 20が開になるときは該培養室のO2 濃度が一定値以
上になったときであり、同じく閉になるときは当該濃度
が設定値に達したときである。
2 20が開となりN2 が充填され、これによりO2 濃度
が低下する。しかし該培養室の内部圧力が上昇しないよ
う作動圧力が約0.1kgf/cm2 ・Gの逆止弁を付
設した大気放出口より余剰のガスは大気に放出される。
またCO2 濃度が低下したときはその信号により制御部
はCO2 供給源のひとつであるボンベよりCO2 ガスを
自動弁V3 19を開として導入する。CO2 センサーの
信号によりCO2 が設定値に達すると制御部29により
自動弁V3 19は閉となりCO2 の導入が止められる。
制御部には該培養室内のCO2 濃度及びO2 濃度を目標
値に設定する設定器及び温度を目標値に設定する設定器
が設けられている。しかし温度については、本発明の主
要課題でないので省略する。この自動弁V3 ,V2 の制
御は、制御部29が設定器で設定される目標値になるよ
うO2 センサー及び/又はCO2 センサーの検出信号を
監視しながら該自動弁V3 ,V2 の開閉制御を行うが、
目標値と検出信号の差が大きいときは開の状態を連続す
るが、ある基準値以内に近づくと弁を一定時間間隔で開
閉を繰り返しながら目標値になるよう制御する。
示す。壁面内に温湯ジャケット2と前面に扉3を有する
気密の培養室1がある、扉3はヒンジ4で開閉できる。
その開閉状態が開閉センサー5のボタン6を押圧するか
否かで検出し、その信号を信号線7により制御部29に
伝える。また該培養室1にはN2 及びCO2 を導入する
導管27と28を有し、培養室の内圧が高くなりすぎな
いよう一定封止圧を有する逆止弁25を付設し導管26
により大気放出口が設けられている。該培養室1内の雰
囲気ガス濃度、特にO2 及びCO2 濃度の検出を行うO
2 センサー9,CO2 センサー9′を有する。この濃度
信号は電気信号に変換されて制御部29に伝えられる。
19を介してCO2 ボンベ22が接続され高圧を調圧弁
を用いて低圧に調圧されたCO2 が供給される。N2 導
入管27には自動弁V2 20を介してN2 供給源が配管
接続される。N2 供給源は空気中のN2 を自動的に濃縮
するPSA式のN2 濃縮器24(濃縮されたN2 はアル
ゴンを含んだ濃度で99.9〜99.99%の濃度まで
濃縮することが出来る)とN2 の貯留タンク23であ
り、N2 濃縮器24により濃縮生成されたN2 ガスを自
動弁V1 21を介して、N2 の貯留タンク23に接続し
貯留した後、自動弁V2 20を介してN2 の導管27に
て培養室1にN2 が導入できるよう接続する。N2 濃縮
器は圧縮空気供給部と濃縮部を持っており、濃縮器が起
動されると、まず圧縮空気供給部により大気が取り込ま
れて圧縮されて窒素濃縮部に送り込まれ窒素ガスが濃縮
されるが装置が起動されて所定の高濃度に達するまで一
定の時間が必要であり、起動当初は低い濃度である。特
にPSA式濃縮器の場合は数分を要する。このため初期
の低濃度の窒素ガスをN2 の貯留タンク23に送り込ま
ないようN2 濃度が濃縮器起動後一定時間を経た後、自
動弁V1 21を開にするよう制御部29が制御してい
る。またN2 濃縮器は膜式もPSA式も供給空気量に対
して、取出ガスの量を増やすと濃度は低下することが判
っている。培養室の濃度を一定に保つためには、N2 濃
縮器から得られる窒素ガスの濃度を目標濃度以上の高濃
度(これを酸素濃度でいえば低濃度)にしなければいけ
ない。前述のN2 濃縮器の起動初期の濃縮ガスは一定時
間を経て高濃度に達した後に自動弁V1 21を開けるこ
とにより達成されるが我々はこればかりでなく、自動弁
V121を開にした時、低圧になっているN2 の貯留タ
ンクにN2 濃縮器より、一時に大量にN2 が流入するこ
とにより、濃縮ガスの一時的な低濃度化が発生し、培養
室の濃度を乱すことが判った。このためN2 濃縮器とN
2 の貯留タンクの間に流量制限手段30を付設し、両者
間の圧力差に変化が生じても一定の流量しか流れない定
流量弁かあるいは前記の両者間に圧力差が生じたときで
もN2 濃縮器から供給するガスの濃度が目標濃度で得ら
れる所定の流量しか流れない流量制限手段(オリフィス
等)を入れることが重要であることを見出した。この流
量制限手段30をN2 濃縮器24とN2 の貯留タンク2
3を接続する配管経路中に設ける。
閉されたとき、急速に定状濃度に回復するよう大量のガ
スが短時間に供給できるようN2 濃縮器は小型であって
も多くのN2 を貯留できるようN2 を吸着保持する能力
を持つゼオライトを充填している。こうすることにより
通常のタンクの容積で同じ圧力に対して3倍以上のN2
を貯留できる。但し、ゼオライトのN2 の吸着保持能力
は水分により劣化するので水分を含まないN2 濃縮器に
より生成された含水率の低いガスと組み合わさないと良
い結果が得られない。膜式の濃縮器もCMSによるPS
A式濃縮器による濃縮窒素ガスも水分の少ない乾燥した
ガスが得られる。またN2 の貯留タンク23には圧力セ
ンサー18を付設して、ガスの圧力が測定され信号線1
7により制御部29に伝えられる。圧力は貯えられたガ
スの容量が少なくなると圧力が下がり、貯えられたガス
の容量が多いと高い圧力を示す。該培養室内のO2 濃度
が設定値より外れ高くなるとその信号により制御部29
は自動弁V2 20を開とし、N2 を供給するのでタンク
内のガスが消費される。PSA式のN2 濃縮器24は貯
留タンク23の圧力が圧力センサー18により一定値P
L まで低下したことを検出し、それを信号線17により
制御部29に伝えると制御部29は信号線16によりN
2 濃縮器24を起動する。
室より取り出し、途中で研究観察を行ない、続いてまた
収納して培養を続ける場合も度々ある。このようなとき
扉を開にして取り出すと外気が培養器内に入り、O2 濃
度,CO2 濃度がコントロールされていた環境が崩れて
しまうので、扉が閉じられた後、直ちに元の環境へ復帰
させる必要がある。このため扉が開となり続いて閉とな
った状況を開閉センサー5により検出し、信号線7によ
り制御部29に伝え、N2 濃縮器24を起動する、扉の
開閉を行った直後は大幅な濃度変化があるためN2 を多
く必要とするので、貯留タンク23内のガスの放出に続
いてPSA式のN2 濃縮器からの生成供給が必要となる
ためである。O2 濃度が一定値に低下した後、CO2 ガ
スの濃度を高める方がO2 濃度を下げるためN2 ガスの
供給を続けながらCO2 の供給も同時に行う方法よりC
O2 消費量を少なくすることが出来る。但し、被培養物
の性質と培養液のpHの変動等により許容される環境条
件の乱れた状態の続く時間の長さは個々によって変わる
のでN2 とCO2 の供給を同時に行われなければならな
いものもある。
ンクの圧力が一定値PH に上昇したときであり、自動弁
V2 20が開になるときは該培養室内のO2 濃度が設定
値以上になったときであり、同じく閉になるときは当該
濃度が設定値に達したときである。このようにO2 セン
サー9やCO2 センサー9′により検出される該培養室
1内のO2 濃度が上昇すると制御部29により自動弁V
2 20が開となり、N 2 が貯留タンク23より放出さ
れ、該培養室1内のO2 濃度が低下する。しかし該培養
室1の内部圧が上昇しないよう逆止弁25を付設した導
管26により、大気放出口より余剰ガスとして放出され
る。またCO2 濃度がO2 センサー9やCO2 センサー
9′によって低下が検出されCO2 濃度を伝える信号線
11により制御部29に伝えられると制御部29は信号
線13により自動弁V3 19を開にしてCO2 ボンベ2
2のCO2 を該培養室1内に放出し、CO2 濃度の上昇
を図る。O2 センサー9,CO2 センサー9′によりC
O2 濃度が設定値に達することが検出されると制御部2
9は自動弁V3 19を閉としてCO2 の導入を止める。
尚、制御部29には該培養室内のCO2 濃度及びO2 濃
度を目標値に設定する設定器を持つ。また温湯ジャケッ
ト2の温度を制御部29より電線12によりヒーター8
をオンオフしてコントロールして目標温度に設定するが
その目標設定値にするための目標値を入力するための設
定器の図示は同図中では省略している。
囲気の培養器のN2 の供給源として、大気中に約79%
あるN2 を99%以上に濃縮したものが使用できるの
で、N2ボンベ等有限の供給源のようにガス切れの配慮
が不要となる。さらに見かけ上の体積は小型ながら、N
2 を吸着する吸着剤を充填した貯留タンクに、外観容量
の数倍のN2 を貯留することができるので、一時に大量
のN2 を供給することが出来る。
Claims (10)
- 【請求項1】 扉を有する気密の培養室であって、該培
養室にはN2 及びCO2 を導入する導入口と逆止弁を設
けた大気放出口と、該培養室の室内ガス濃度を検出する
O2 センサー及び/又はCO2 センサーを有し、検出さ
れた濃度は電気信号により制御部に伝えられ、該培養室
のCO2 導入口は自動弁V3 (19)を介してCO2 供
給源から調圧弁を用いて調圧したCO2 が供給されるよ
う配管接続され、前述のO2 センサー及び/又はCO2
センサーの信号により該制御部より自動弁V3 (19)
が制御され、N2 導入口には自動弁V2 (20)を介し
てN2 供給源が配管接続され、該O2 センサー及び/又
はCO2 センサーの信号で該制御部より自動弁V2 (2
0)を制御してN2 が供給され、N2 供給源は空気中の
N2 を自動的に濃縮するN2 濃縮器とN2 の貯留タンク
であって、濃縮されたN2 は自動弁V1 (21)を介し
て該貯留タンクに接続し、これに貯留した後、配管にて
該培養室のN2 導入口に自動弁V2 (20)を介して接
続する構成とし、該貯留タンクには圧力センサーが設置
され、N2 の圧力が測定されて該制御部に伝えられ、該
制御部によりN2 濃縮器は該貯留タンクの圧力が一定値
PLまで低下したときに起動し、N2 を濃縮してN2 濃
度が一定濃度に達した後又は一定時間経過後に自動弁V
1 (21)を開にしてN2 の貯留タンクに供給し、そし
てN2 貯留タンクの圧力が一定値PH まで上昇したとき
自動弁V1 (21)を閉にしてN2 濃縮器は停止し、前
記の自動弁V2 (20)は該培養室のO2 濃度が一定値
以上になったとき該制御部により開閉して制御しながら
O2 濃度を目標の一定値に保つよう構成したことを特徴
とする低酸素培養器。 - 【請求項2】 前記のN2 濃縮器がPSA方式によるN
2 濃縮器であることを特徴とする請求項1記載の低酸素
培養器。 - 【請求項3】 前記のN2 濃縮器が透過膜式N2 濃縮器
であることを特徴とする請求項1記載の低酸素培養器。 - 【請求項4】 N2 の貯留タンクにN2 を吸着する吸着
剤を充填してあることを特徴とする請求項1乃至請求項
3記載の低酸素培養器。 - 【請求項5】 N2 を吸着する吸着剤がゼオライトであ
ることを特徴とする請求項4記載の低酸素培養器。 - 【請求項6】 N2 の貯留タンクから培養器にN2 を供
給する自動弁V2 (20)は培養器のO2 濃度が一定値
以上になったとき開になり一定時間間隔で開閉を繰り返
しながら継続し、培養器のO2 濃度が目標値に達したと
き閉となるよう制御するように構成したことを特徴とす
る請求項1乃至請求項5記載の低酸素培養器。 - 【請求項7】 扉の開閉状態を検出する開閉センサーを
設け、N2 濃縮器の起動をN2 の貯留タンクの一定値P
L まで低下した場合に加えて、扉の開閉を検出して起動
を行い、N2 濃縮を開始するように構成したことを特徴
とする請求項1乃至請求項6記載の低酸素培養器。 - 【請求項8】 前記の扉の開閉を検出してN2 濃縮器を
起動した場合は自動弁V1 (21)をN2 濃縮器が起動
した後、直ちに開にするよう制御することを特徴とする
請求項1乃至請求項7記載の低酸素培養器。 - 【請求項9】 N2 濃縮器とN2 の貯留タンクへの接続
管路上に流量制限手段を設けたことを特徴とする請求項
1乃至請求項8記載の低酸素培養器。 - 【請求項10】 N2 濃縮器とN2 の貯留タンクへの接続
管路上に定流量弁を設けたことを特徴とする請求項1乃
至請求項8記載の低酸素培養器。
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