JPH0859536A - 新規トリテルペノイド類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 式（Ｉ） 【化１】 （式中、Ｒはメチル基またはアセトキシメチル基であ
る）で示されるトリテルペノイド類。かかるトリテルペ
ノイドは、イリス植物の根茎から得られるイロン類の生
合成前駆体として得られる。 【効果】 イロン類の生合成用前駆体または化学合成用
前駆体として有用な新規化合物が提供できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規トリテルペノイド
類に関し、より具体的にはアヤメ科（Iridaceae）のイ
リス（Iris）植物が産生しうる２種のトリテルペノイド
に関する。

【０００２】

【発明の背景】一定のイリス（Iris）の根茎部に蓄積さ
れるオリス油は、ニオイスミレの花香を有するイロン類
を含む高級天然精油の一種であり、貴重な香料原料であ
る。通常、イロン類は、新鮮なイリスの根茎に殆ど含ま
れていないが、根茎の外層を剥ぎ長期乾燥貯蔵すること
によつてイロン類の含量が徐々に増大することが知られ
ている。これらのイロン類のうち、例えば、主要芳香成
分であるγ−イロンの前駆体はトリテルペノイドの範疇
に入るイリフローレンタール（iriflorental）であるこ
とも知られている［Jaenickeら、Progr. Chem. Org. Na
t. Prod. ５０，１−２５（１９８６）参照］。

【０００３】また、Marner らは、イリス根茎に由来す
る脂溶性成分としてイリフローレンタールを始め、数種
のトリテルペノイド類を単離同定し、それらをイリダー
ル類（iridals）と命名している（Liebigs Ann. Chem.
１９９０，５６３−５６７；およびHelv. Chim. Acta.
７３，４３３−４３８，１９９０）。そして、これらの
イリダール類のうち、下記構造式（ＩＩ）で示すよう
に、スピロ環を有することで構造上特異なスピロイリダ
ール類が特定のイリス根茎の抽出物中に存在することも
報告している。

【０００４】

【化２】

【０００５】上式中、Ｒ¹およびＲ²は、それぞれアセト
キシメチル（−ＣＨ₂ＯＣＯＣＨ₃）基および水素原子
［以下、（ＩＩ−ａ）化合物という］；アセトキシメチ
ル（−ＣＨ₂ＯＣＯＣＨ₃）基およびアセチル基［以下、
（ＩＩ−ｂ）化合物という］；ヒドロキシメチル（−Ｃ
Ｈ₂ＯＨ）基および水素原子［以下、（ＩＩ−ｃ）化合
物という］；またはメチル（−ＣＨ₃）基および水素原
子［以下、（ＩＩ−ｄ）化合物］を表わす。なお、上記
スピロイリダール類の炭素骨格の番号付けは、スクワレ
ンの番号付けに従つている。

【０００６】一方、本発明者らも、イリス根茎部に蓄積
されるオリス油の含有成分に関する研究、ならびにイロ
ン類の生産を目的にした、イリスのカルス誘導、カルス
継代培養、液体懸濁培養および植物体の再生について検
討してきた。かかる研究において、上記式（ＩＩ）に構
造上類似するが、特定の炭素原子上の置換基の立体配座
において異なり、上述の文献を始め、従来技術未載の、
スピロイリダール類がシボリイリス（Iris pallida
L.）の根茎および組織培養物中に存在することを見い出
した。そして、これらのスピロイリダール類の単離、同
定に成功し、こうして単離されたスピロイリダール類は
イロン類の生合成および化学合成前駆体として利用しう
るだけでなく、それ自体、例えば抗酸化剤等の生物活性
物質として有用であることを確認して本発明を完成し
た。

【０００７】

【発明の構成】従つて、本発明によれば、下記式（Ｉ）
で示されるトリテルペノイド類が提供される。

【０００８】

【化３】

【０００９】上式中、Ｒはメチル基またはアセトキシメ
チル基である。

【００１０】なお、本明細書では、式（Ｉ）のＲがメチ
ル基を表わすトリテルペノイドを化合物Ｉと称し、Ｒが
アセトキシメチル基を表わすトリテルペノイドを化合物
ＩＩと称する。また、これらの化合物の同定に関する以
下の説明中の炭素原子の番号付は、上記式（ＩＩ）の様
式に従う。

【００１１】化合物Ｉの同定：¹Ｈ ＮＭＲおよび¹³Ｃ
ＮＭＲデータと共に、ＦＡＢ ＭＳスペクトラムの分子
イオンピークｍ／ｚ４６９（Ｍ−Ｈ)^-より分子式Ｃ₃₀Ｈ
₄₆Ｏ₄を有する。

【００１２】ＵＶスペクトラムは２７２ｎｍに共役トリ
エンに起因する極大吸収と、２６２および２８４ｎｍに
副極大吸収を示す。

【００１３】ＩＲスペクトラムは水酸基に帰属する吸収
帯（３４１０ｃｍ^-1）とα,β−不飽和アルデヒドに帰
属する吸収帯（１６４９ｃｍ^-1）を示す。

【００１４】¹Ｈおよび¹³Ｃ ＮＭＲスペクトラムは、１
個のアルデヒド、５個の二重結合および５個のメチレン
基の存在を示す。

【００１５】さらに、Ｈ、Ｈ−ＣＯＳＹ、ＨＭＢＣおよ
びＨＭＱＣを含むＮＭＲ実験の詳細な解析によりすべて
の水素と炭素をアサインすることができた。すなわち、
化合物Ｉは、上記の既知化合物（ＩＩ−ｄ）：（＋）−
（６Ｒ、１０Ｓ、１１Ｓ、１４Ｓ、２６Ｒ）−２６−エ
ナールと同様の骨格を有するが、理化学的データ、例え
ば、¹Ｈ ＮＭＲおよび¹³Ｃ ＮＭＲが相互に異なり、特
に、既知化合物（ＩＩ−ｄ）の［α］_D値が＋１３７で
あるのに対し、本発明の化合物Ｉのそれが＋１０.５で
ある点でも明瞭に異なる。

【００１６】２６−Ｈおよび１４−Ｈと共に２７Ｈ₃に
おける差ＮＯＥスペクトラムは、１７−Ｈの照射によつ
て化合物Ｉは既知化合物（ＩＩ−ｄ）と異なる立体構造
をもつことを示す。すなわち、化合物Ｉは１１Ｒの立体
配置を有する。その上、化合物Ｉの６−Ｈと２７−Ｈ₃
との間のＮＯＥの観察結果は、６Ｒおよび１０Ｓの立体
配置を示し、２７−Ｈ₃と１４−Ｈおよび２６−Ｈとの
間のＮＯＥのデータは、１４Ｒおよび２６Ｓの立体配置
を示した。

【００１７】従つて、本発明の化合物は、同様の骨格を
有する既知化合物（ＩＩ−ｄ）とは、明瞭に区別できる
新規化合物であり、式（Ｉ）のＲがメチル基を表わす、
（＋）−（６Ｒ、１０Ｓ、１１Ｒ、１４Ｒ、２６Ｓ）−
１９−メチル−２６−ヒドロキシ−１５−メチリデンス
ピロイリド−１６−エナールである。

【００１８】化合物ＩＩの同定：化合物ＩＩの分光学的
データは化合物Ｉと類似しているが、ＩＲスペクトラム
は、水酸基（３４０２ｃｍ^-1）およびα,β−不飽和ア
ルデヒド（１６５９ｃｍ^-1）と共にエステル基（１７３
６ｃｍ^-1）に起因する吸収帯を示した。

【００１９】ＦＡＢ ＭＳスペクトラムでは、分子イオ
ンピークがｍ／ｚ５２７（Ｍ−Ｈ)^-に観察された。

【００２０】¹Ｈ ＮＭＲでは、１個のアセトキシル基と
４個のメチル基が５個のメチル基の代わりに観察される
ことから、化合物ＩＩは化合物Ｉのメチル基に代わるア
セトキシメチル基が存在することが推察される。２次元
法および差ＮＯＥを含む詳細なＮＭＲ実験では、化合物
ＩＩは化合物Ｉと同一の立体配置を示し、１９−アセト
キシメチル基を有することが判明した。

【００２１】従つて、化合物ＩＩもまた、例えば既知化
合物（ＩＩ−ａ）と明瞭に区別できる新規化合物であ
り、式（Ｉ）のＲがアセトキシメチル基を表わす、
（＋）−（６Ｒ、１０Ｓ、１１Ｒ、１４Ｒ、２６Ｓ）−
１９−アセトキシメチル−２６−ヒドロキシ−１５−メ
チリデンスピロイリド−１６−エナールである。

【００２２】以下に、化合物Ｉおよび化合物ＩＩの理化
学的性質を下記に示す。なお：ＩＲスペクトルは、ＪＡ
ＳＣＯ ＦＴ−ＩＲ５３００スペクトロメーターで測定
し；ＵＶスペクトルは、ＪＡＳＣＯ ＵＶＩＤＥＣ−６
１０Ｃスペクトロメーターで測定し；¹Ｈ ＮＭＲスペク
トルは、ＪＥＯＬ ＥＸ−４００（４００ＭＨｚ）スペ
クトロメーターで測定し；¹³Ｃ ＮＭＲスペクトルはＪ
ＥＯＬ ＥＸ−４００（１００ＭＨｚ）で測定した。ま
た、ＦＡＢ ＭＳスペクトルは、Finnigan ＭＡＴ ＭＡ
Ｔ−９０で測定した。

【００２３】化合物Ｉ： 性状：白色粉末 ［α］_D ²⁵＋１０.５（ｃ＝０.８、メタノール） ＵＶ（メタノール）ｎｍ（ε）：２６２（１３１０
０）、２７２（１３６００）、２８４（９８００） ＦＡＢ ＭＳ ｍ／ｚ：４６９（Ｍ−Ｈ)^- ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３４１０（ｂｒ）、２９２２、
１６４９、１６０８。¹ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ，δ）：１.３０（２Ｈ，ｍ，４
−Ｈ₂）、１.３２（３Ｈ，ｓ，２７−Ｈ₃)、１.４２
（２Ｈ，ｍ，１２−Ｈ₂）、１.５７、２.０２（各１
Ｈ，ｍ，１３−Ｈ₂）、１.６２（３Ｈ，ｓ，２４−
Ｈ₃）、１.６３、１.７３（各１Ｈ，ｍ，９−Ｈ₂）、
１.６８（３Ｈ，ｓ，３０−Ｈ₃）、１.８１（３Ｈ，
ｓ，２５−Ｈ₃）、１.８３（３Ｈ，ｓ，２９−Ｈ₃）、
１.８８、２.２２（各１Ｈ，ｍ，５−Ｈ₂）、２.１１
（２Ｈ，ｍ，２０−Ｈ₂）、２.１２（２Ｈ，ｍ，２１−
Ｈ₂）、２.５２、２.７９（各１Ｈ，ｍ，８−Ｈ₂）、
２.９７（１Ｈ，ｍ，１４−Ｈ）、３.４０、３.５０
（各１Ｈ，ｍ，３−Ｈ₂）、３.５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
９.８Ｈｚ，６−Ｈ）、４.５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３.９
Ｈｚ，２６−Ｈ）、５.００、５.１８（各１Ｈ，ｓ，２
８−Ｈ₂）、５.１１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６.４Ｈｚ，２２
−Ｈ）、５.９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０.７Ｈｚ，１８−
Ｈ）、６.２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５.６Ｈｚ，１６−
Ｈ）、６.６３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０.８，１５.５Ｈ
ｚ，１７−Ｈ）、１０.１６（１Ｈ，ｓ，１−Ｈ）。

【００２４】¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ，δ）：１１.７
（２５）、１７.９（２９）、１８.５（２４）、２６.
１（８）、２６.６（３０）、２７.７（１３）、２８.
５（２１）、２９.１（２７）、３１.９（５）、３４.
３（４）、３５.８（１２）、３９.８（９）、４１.９
（２０）、４６.１（６）、５０.８（１４）、６０.５
（１１）、６４.２（３）、７５.３（１０）、７５.９
（２６）、１１７.３（２８）、１２５.９（２２）、１
２６.７（１７）、１２７.４（１８）、１３３.３（２
３）、１３４.４（１６）、１３５.２（２）、１４１.
１（１９）、１４６.７（１５）、１６７.６（７）、１
９３.８（１）。

【００２５】化合物ＩＩ： 性状：白色粉末 ［α］_D ²⁵ ＋１０.５（ｃ＝０.６、メタノール） ＵＶ（メタノール）ｎｍ（ε）：２６６（１６８０
０）、２７４（１７５００）、２８６（１４１００） ＦＡＢ ＭＳ ｍ／ｚ：５２７（Ｍ−Ｈ)^- ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３４０２（ｂｒ）、２９２６、
１７３６、１６５９、１６１１。

【００２６】¹Ｈ ＮＭＲ（ベンゼン−ｄ₆，δ）：０.９
７（３Ｈ，ｓ，２７−Ｈ₃）、１.２１、１.４０（各１
Ｈ，ｍ，９−Ｈ₂）、１.３２（２Ｈ，ｍ，１２−
Ｈ₂）、１.３５（２Ｈ，ｍ，４−Ｈ₂）、１.３９、１.
９１（各１Ｈ，ｍ，１３−Ｈ₂）、１.６０（３Ｈ，ｓ，
３０−Ｈ₃）、１.７５（３Ｈ，ｓ，２４−Ｈ₃）、１.７
９（３Ｈ，ｓ，ＣＨ₃−Ｃ＝Ｏ）、１.９６（３Ｈ，ｓ，
２５−Ｈ₃）、２.２３、２.３７（各１Ｈ，ｍ，８−
Ｈ₂）、２.４２（２Ｈ，ｍ，２１−Ｈ₂）、２.９３（１
Ｈ，ｍ，１４−Ｈ）、３.３３、３.５１（各１Ｈ，ｍ，
３−Ｈ₂）、３.７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９.８Ｈｚ，６−
Ｈ）、４.３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３.９Ｈｚ，２６−
Ｈ）、４.５８、４.８８（各１Ｈ，ＡＢ，Ｊ＝１３.７
Ｈｚ、２９−Ｈ₂）、５.１１、５.１４（各１Ｈ，ｓ，
２８−Ｈ₂）、５.３１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６.８Ｈｚ，２
２−Ｈ）、６.３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８.８Ｈｚ，１８−
Ｈ）、６.３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５.１Ｈｚ，１６−
Ｈ）、６.６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１.２、１５.１Ｈ
ｚ，１７−Ｈ）、１０.５７（１Ｈ，ｓ，１−Ｈ）。

【００２７】¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ，δ）：１１.７
（２５）、１８.７（３０）、２１.８（ＣＨ₃−Ｃ＝
Ｏ）、２６.１（８）、２６.７（１３）、２７.５（２
４）、２９.０（２１）、２９.２（２７）、３１.５
（５）、３２.１（４）、３４.２（２０）、３４.３
（１２）、３６.７（９）、３９.７（６）、４６.０
（１４）、６０.０（１１）、６４.２（３）、７０.０
（２９）、７５.３（１０）、７９.８（２６）、１１
７.８（２８）、１２５.９（１７）、１２６.０（２
２）、１３１.６（１８）、１３３.５（２３）、１３
４.４（２）、１３７.８（１６）、１３８.１（１
９）、１４８.４（１５）、１６７.５（７）、１７３.
６（ＣＨ₃−Ｃ＝Ｏ）、１９３.８（１）。

【００２８】以上の本発明の化合物ＩおよびＩＩは、そ
れ自体既知の精製法、例えば、シボリイリスの新鮮な根
茎のメタノール抽出物に水を加え、この水溶液をｎ−ヘ
キサンと酢酸エチルで分配し、次いで酢酸エチル抽出物
をシリカゲルクロマト処理（ＣＨＣｌ₃：ＣＨ₃ＯＨ＝１
０：１）して粗精製物画分を得た後、この画分をＨＰＬ
Ｃ［Capcell pak Ｃ₁₈（資生堂製）、ＣＨ₃ＯＨ：Ｈ₂Ｏ
＝５：１］で精製することにより得ることができる。物
質収支の１例を示せば、新鮮な根茎５３０ｇから、化合
物Ｉが４.２ｍｇと化合物ＩＩが１.８ｍｇ得られた。前
記粗精製物のＨＰＬＣ分析結果を図１に示す。ＨＰＬＣ
の分析条件は以下のとおりである。

【００２９】カラム：Capcell Pak Ｃ１８ ＳＧ１２０ カラム温度：３０℃ 溶媒：メタノール：水＝５：１ 流速：１ｍＬ／ｍｉｎ 検出：ＵＶ２５４ｎｍ 図１中では、保持時間９.５６分に化合物ＩＩ、同１３.
１４分に化合物Ｉに相当する吸収がみられ、保持時間１
５.８０分にイリフローレンタール、同１８.８４分にイ
リパリダール（Iripallidal）に相当する吸収がみられ
る。

【００３０】本発明の化合物ＩおよびＩＩは、また、イ
リス（Iris）属に属する植物体に由来する器官の培養に
よつても得ることができる。培養は、まず、前記器官の
切片を、植物成長調節物質を含むそれ自体既知の寒天培
地に移植してカルスを誘導し、得られたカルスをさらに
前記寒天培地で継代培養し、次いで得られたカルスを植
物成長調節物質フリー、あるいは植物成長調節物質とし
てサイトカインまたはジベレリンを主にした一定の寒天
培地に移植生育して無菌幼植体を得るように行う（Plan
t Cell Rep. １３：１２−１６（１９９３）参照）。こ
うして得られた幼植体の根部を適当な液体培地に移植
し、それらを継代培養することにより培養根を得る。あ
るいは、前記カルスを液体培地に移植し、継代培養して
セルサスペンジョン(Cell suspension)を得る。こうし
て得た培養根またはセルサスペンジョンは、天然の根茎
由来の抽出物のように多数のイリダール類（図１参照）
を含まず、化合物Ｉおよび化合物ＩＩをほぼ選択的に生
産するので、本発明の化合物を単離精製するのに都合が
よい。

【００３１】培養の対象とすることができる器官は、根
茎、葉、茎、花、種子のいずれを使用してもよい。カル
スの誘導に使用する寒天培地は、例えば、リンスマイヤ
ー・スクーグ［Linsmaier & Skoog（以下ＬＳとい
う）］寒天培地、また、植物成長調節物質として２,４
−ジクロロフエノキシ酢酸（２,４−Ｄ）やカイネチン
（ＫＴ）を適量添加したものを挙げることができる。誘
導したカルスの継代培養には同様の寒天培地を使用する
ことができる。これらの培養は、通常、暗所で約２６℃
の温度で行う。

【００３２】このようなカルスから幼植体を得るには、
カルスを前記ＬＳ寒天培地であつて、植物成長調節物質
を含まない培地、または、植物成長調節物質としてサイ
トカイニンもしくはジベレリンを主にした培地で培養す
ればよい。培養根の培養は、例えば、適量の５,６−ジ
クロロインドール酢酸（５,６−Ｄ−ＩＡＡ）を添加し
たＢ５液体培地で行うのが好都合である。

【００３３】本発明の化合物ＩおよびＩＩの生産を目差
して、以上のように調製したカルス、セルサスペンジョ
ンまたは培養根を培養するのに使用できる培地は、Ｂ５
改変液体培地、ＬＳ液体培地、リン・スタバ（Lin & St
aba）改変液体培地等が好ましい。本発明の化合物Ｉお
よびＩＩの生産を高めるには、リン・スタバ改変液体培
地が好ましい。この培養は、通常、暗所で約２３℃の温
度にて、８〜１３日間行う。

【００３４】こうして得られる培養物からの化合物Ｉお
よびＩＩの採取は、天然の植物体からのイリダール類の
単離、精製方法に準じて行うことができる。

【００３５】単離された化合物Ｉおよび化合物ＩＩは、
それらの構造からも類堆できるように、酸化に対して不
安定であることから、逆に抗酸化剤として使用できる可
能性があり、また、イロン類の生合成または化学合成の
ための前駆体として有用である。

【００３６】

【実施例】以下、実施例を挙げて本発明をさらに具体的
に説明するが、これらに本発明の方法が限定されること
を意図するものでない。

【００３７】実施例１ 器官の培養 シボリイリス(Iris pallida L.)の根茎を、水洗後、７
０％ｖ／ｖエタノール水溶液に数分間浸漬後、葉のつけ
根を含む部分を１ｃｍ立方に切取り有効塩素濃度５％の
次亜塩素酸ナトリウム水溶液に２０分間浸漬した。組織
をさらに１〜２ｍｍの厚さにスライスし再度１％亜塩素
酸ナトリウム水溶液に１０分間浸漬した後に滅菌水で３
回水洗して殺菌した。さらに２ｍｍ立方に細分し、２,
４−Ｄ１.０μｇ／ｍＬおよびカイネチン０.１μｇ／ｍ
Ｌを含むＬＳ培地に置床した。２６℃にて暗所で培養し
たところ約１ケ月後にカルス様組織が出現した。

【００３８】こうして得られた培養物を、改変Ｂ５培地
に２,４−Ｄ１ｍｇ／Ｌとカイネチン０.１ｍｇ／Ｌを加
えた培地（ｐＨ５.７〜５.８）に植え、暗所下、２６℃
で１１０ｒｐｍにて旋回培養した。１週間目に培養懸濁
液６０ｍＬを新たに調製した同組成の培地１４０ｍＬに
植え継ぎ同様に培養を続けた。この培養１週間でカルス
は湿細胞重量で５〜６倍に増加した。継濁培養物から細
胞を濾取し、水洗して得られた細胞は、植え継いだ２週
間目に湿細胞重量１０.０ｇであつた。得られたカルス
をホモジナイズした後、化合物Ｉおよび化合物ＩＩが、
それぞれ湿細胞１００ｇ当り０.８６ｍｇおよび０.４２
ｍｇ得られた。

【００３９】

【発明の効果】本発明によれば、ニオイスミレの芳香を
有するイロン類の生合成または化学合成前駆となりうる
新規なイリダール類が提供される。

【図面の簡単な説明】

【図１】シボリイリス（Iris pallida L.）の新鮮な根
茎からの抽出物のＨＰＬＣの分析結果を示す図である。

フロントページの続き (72)発明者 小松 一男 神奈川県横浜市港北区新羽町1050番地 株 式会社資生堂第一リサーチセンター内 (72)発明者 中村 正寛 東京都中央区銀座７丁目５番５号 株式会 社資生堂内 (72)発明者 横山 峰幸 神奈川県横浜市港北区新羽町1050番地 株 式会社資生堂第一リサーチセンター内 (72)発明者 和地 陽二 神奈川県横浜市港北区新羽町1050番地 株 式会社資生堂第一リサーチセンター内 (72)発明者 駒嶺 穆 東京都世田谷区弦巻２−35−５

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式 【化１】 （式中、Ｒはメチル基またはアセトキシメチル基であ
   る）で示されるトリテルペノイド類。