JPH09173051A - 脱色活性を有する新規微生物およびこれを用いた脱色方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 少なくとも脱色活性を有するゲオトリク
ム・カンジダム（Geotrichum candidum ）、およびその
菌株であるゲオトリクム・カンジダムＤｅｃ１（ＦＥＲ
Ｍ Ｐ−１５３４８）、並びにこれを培養して得られた
菌体外分泌物を用いて染料を分解・脱色することからな
る脱色方法。 【効果】 種々の染料に対し広い脱色スペクトルを示す
新規微生物が得られるので、染料排水処理に菌を用いた
処理システムや、染料で汚染された土壌のバイオレメデ
ィエーションの開発等への応用が期待される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、染料に対して高脱
色活性を有する新規な糸状菌株およびこれを用いた脱色
方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】染色工場や染料製造産業の工程で排出さ
れる各種合成染料は、難分解性物質が多い。こうした有
色廃水の処理には主に吸着、濃縮、化学的変換、焼却等
の物理化学的な方法が用いられている。これらの処理方
法は効率的である反面、処理コストが高い、有害な副産
物が生成される、高いエネルギー消費が要求される、等
の種々の問題点がある。

【０００３】近年、上記の方法に代わるものとして、微
生物による処理方法が注目を集めており、既に染料や有
色物質を分解できるいくつかの菌類も報告されている。
最も盛んに研究が行われている菌類はリグニンペルオキ
シダーゼによるリグニン分解能力を示す白色腐朽菌であ
るファネロカエテ・クリソスポリウム（Phanerochaete
chrysosporium ）で、その分解メカニズムも明らかにな
っている。また、いわゆる脱色菌としてプレウロツス・
オストレアツス（Pleurotus ostreatus ）、コリオルス
・ベルシカラー（Coriolus versicolor ）、ストレプト
ミセテス種（Streptomycetes spp. ）等も研究されてい
る。

【０００４】しかしながら、脱色菌の種類はまだ少な
く、しかもこれらの菌は１若しくは数種類の染料を脱色
し得るのみで、多種類の染料に対して脱色活性を有する
ものでない。例えば、プレウロツス・オストレアツスは
１種類の高分子色素について（Appl. Microbiol. Biote
chnol., 21, 394-396(1985)) 、コリオルス・ベルシカ
ラーはメラノイジンについて（ Argic. Biol. Chem.. 4
6, 1623-1630(1982)) 、ストレプトミセテス種は３種類
のアンスロン染料について（Can. J. Microbiol., 37,
902-907(1991))、それぞれ脱色可能であるという報告が
されている。さらにファネロカエテ・クリソスポリウム
（P. chrysosporium）では３種類の高分子色素、３種類
のアゾ染料と４種類のアゾ染料およびヘテロ環状染料に
ついての脱色活性や、ストレプトミセテス種とファネロ
カエテ・クリソスポリウムではいくつかのアゾ染料およ
び該染料と共通の骨格を有する物質（モデル物質）につ
いての脱色活性等も報告されている。

【０００５】微生物による処理の効率は、菌の生存力、
適応性、脱色活性等に依存するが、さらに、より多種類
の染料に対して高い脱色活性を有する菌類を用いること
ができれば、処理効率のさらなる向上を図ることができ
るものと思われる。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明はこのような事
情を鑑みてなされたもので、より効率的な微生物処理を
行い得るための菌類、およびこれを用いた脱色方法を提
供することを課題とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記課題を
解決するために鋭意研究を行い、染料を脱色する菌をス
クリーニングし、種々の染料に対し広い脱色スペクトル
を示す糸状菌の新菌株の単離に成功した。すなわち本発
明は、種々の染料に対して高脱色活性を有する糸状菌お
よびその菌株、並びにこれを用いた脱色方法に関する。

【０００８】

【発明の実施の形態】以下に本発明について詳述する。 ［本菌株のスクリーニング、単離］国内各所の畑地より
採取したいくつかの土壌サンプルを水に懸濁し、この懸
濁液を下記に示す３種類の染料を２００ｐｐｍずつ含む
ＧＰＹ寒天培地、ＰＤＡ培地に添加した。なお、ＧＰＹ
寒天培地（ｇ／ｌ）はグルコース１０、ポリペプトン
３、酵母エキス７、ＫＨ₂ ＰＯ₄ １、ＭｇＳＯ₄ ・７Ｈ
₂ Ｏ ０．５、寒天１５（ｐＨ＝７）の成分からなる。
また、ＰＤＡ培地（ｇ／ｌ）はポテトエキス２００、グ
ルコース２０、寒天１５（ｐＨ＝５．６）の成分からな
る。

【０００９】スクリーニングに用いた染料は、アントラ
キノン発色団を有する代表的な反応性染料である C. I.
Reactive blue 114、アゾ発色団を有する酸性染料であ
る C. I. Acid blue 324、およびアゾ染料で分散染料で
ある C. I. Dispersive blue79 である。土壌の懸濁液
を添加した各プレートを３０℃にて３週間培養した。脱
色されて透明なハローを形成したコロニー（集落）を採
取し、これらをＧＰＹ溶液に再懸濁させ、純菌化を繰り
返すことによっていくつかの糸状菌株を単離した。

【００１０】これらの中の１つの菌株が高い染料分解能
力と広い染料脱色スペクトルを示した。この菌株は後述
するように新菌株として、ゲオトリクム・カンジダム
（Geotrichum candidum ）Ｄｅｃ１と命名され、平成７
年１２月１５日付で工業技術院生命工学工業技術研究所
に寄託された（受託番号：ＦＥＲＭ Ｐ−１５３４
８）。 ［本菌株の菌学的性質］本発明に係るゲオトリクム・カ
ンジダムＤｅｃ１（以下、単に「Ｄｅｃ１株」と略記）
の菌学的性質は以下のとおりである。 （ａ）形態 Ｄｅｃ１株は、ポテトデキストロース寒天培地（ＰＤ
Ａ）上で速やかに生育し、コロニー全体に分生子を豊富
に形成する。菌糸は直径１．６〜４．８μｍで、無色で
隔壁を有し、表面は平滑である。幅の広い栄養菌糸と幅
の狭い分生子形成菌糸とに分かれる。分生子と菌糸との
区別は不明瞭で、分生子形成菌糸が分断されて分生子と
なる。ときに栄養菌糸も分生子を形成する。分生子は、
大きさが２．４〜４．８×２．４〜１６μｍで、無色で
表面は平滑であり、分節型分生子で菌糸の分断により形
成され、気中または培地表面に連鎖し、最初は角張った
円筒型形状をなすが、後には樽型、楕円型、亜球形をな
すようになる。 （ｂ）各種培地における生育状態 ＰＤＡ培地（２５℃）上での生育は極めて良い。コロニ
ーの直径は、培養５日間で６２−７３ｍｍに、７日間で
９０ｍｍ以上に達する。コロニーの表面は気生菌糸が旺
盛で、毛羽立ち羊毛状となり、純白色を呈する。裏面か
ら見ると無色である。分生子の形成は良好である。

【００１１】麦芽エキス寒天培地（２５℃）上での生育
は良好である。５日間でコロニーの直径は４７−５７ｍ
ｍに、７日間で９０ｍｍ以上に達する。コロニーの表面
はＰＤＡ培地（２５℃）上での生育とほぼ同じである。
ツアペック酵母エキス寒天培地（２５℃）上での生育は
良好である。コロニーの直径は、培養５日間で４６−５
３ｍｍに、７日間で９０ｍｍ以上に達する。コロニーの
表面は羊毛状で白色を呈し、裏面から見ると無色であ
る。

【００１２】コーンミール寒天培地（２５℃）上での生
育は良くない。コロニーの直径は、培養５日間で３８−
５１ｍｍに、７日間で９０ｍｍ以上に達する。コロニー
の表面は気生菌糸が薄く、平坦に広がり無色である。分
生子の形成は悪い。ツアペック寒天培地（２５℃）上で
の生育は認められない。 （ｃ）生育温度とｐＨ ＰＤＡ培地および麦芽エキス寒天培地（ＭＥＡ）のそ
れぞれにＤｅｃ１株を植菌し、各温度で７日間培養した
結果を表１に示す。

【００１３】

【表１】

【００１４】ツアペック酵母エキス（ＣＹ）液体培地
のｐＨを２−１０に変化させ、これらをそれぞれ試験管
に８ｍｌずつ入れ、Ｄｅｃ１株を１白金耳植菌し、２５
℃で７日間培養した結果を表２に示す。

【００１５】

【表２】

【００１６】表１、表２から明らかなように、本菌株の
至適生育温度は２５℃前後である。また生育可能なｐＨ
は４−８で、至適ｐＨは６前後である。 （ｄ）生理学的性質 Ｄ−グルコースの発酵性は弱く、ガラクトース、グルコ
ース、ソルボース、キシロース、グリセロール、ラクト
ースで増殖可能である。

【００１７】以上の菌学的性質をもとに、Ainsworth an
d Bisby's Dictionary of the Fungi,7th ed.,C.M.L.,K
ew(1983)、 Mycologia,49,820-830(1957) 、Trans. Myc
ol.Soc.,Japan,3,29-35 (1962) 、YEAST:characteristi
cs and identification, Cambridge University Press
(1983)、「菌類図鑑」（講談社、1978）を参考に検討し
た結果、本菌は真菌門、不完全菌亜門、不完全糸状菌綱
のゲオトリクム（Geotrichum）属菌であると同定した。
次いで種の検索を行った結果、ゲオトリクム・カンジダ
ム（Geotrichum candidum ）の記載と一致したので、本
菌をゲオトリクム・カンジダムに属すると同定した。

【００１８】さらに同種内の公知菌株との比較を行っ
た。いずれの公知菌株も、下記実施例に示す本菌株のよ
うな、多種類の染料に対して幅広く高脱色活性を示すも
のがないため、本菌株を新規の菌株ゲオトリクム・カン
ジダム（Geotrichum candidum）Ｄｅｃ１と命名した
（ＦＥＲＭ Ｐ−１５３４８）。

【００１９】

【実施例】

［Ｄｅｃ１株の脱色活性］下記の表３に示す２２種類の
染料（反応性染料１５種、酸性染料２種、分散染料２種
と、モデル化合物３種）を用いて、本菌株の脱色活性を
測定した。なお、用いられる染料中、C. I. Reactive b
lue 5 、C. I. Reactive red 33、C. I. Acid red 73
、C. I. Dispersive red 60 は、それぞれ下記の化
１、化２、化３、化４で表される化学構造を有する。

【００２０】

【化１】

【００２１】

【化２】

【００２２】

【化３】

【００２３】

【化４】

【００２４】またモデル化合物３種（便宜上ＡＱ−１、
ＡＱ−２、ＡＺ−１と呼ぶ）は、それぞれ上記染料と化
学構造上共通の部分をもつ染料である。すなわちＡＱ−
１、ＡＱ−２はいずれも C. I. Reactive blue 5 のモ
デル化合物で、それぞれ下記の化５、化６で表される化
学構造を有する。

【００２５】

【化５】

【００２６】

【化６】

【００２７】またＡＺ−１は C. I. Reactive red 33
のモデル化合物で、下記の化７で表される化学構造を有
する。

【００２８】

【化７】

【００２９】（１）Ｄｅｃ１株の固体培地における脱色
活性 上記２２種類の各染料を０．４５μｍの硝酸セルロース
フィルタで濾過した後、終濃度１００〜２００ｐｐｍを
含むＰＤＡ培地を作成した。白金耳で本菌株から菌糸を
取り、プレートの中央に植菌した。次いでこのプレート
を２８℃で４日間培養し、形成されたハローの脱色直径
（ｍｍ）を測定した。結果を表３に示す。

【００３０】

【表３】

【００３１】なお、表中の「相対値」は、染料 C. I. R
eactive blue 5 の直径を１とした場合の値である。Ｄ
ｅｃ１株はモデル物質であるＡＱ−１、ＡＱ−２、ＡＺ
−１を脱色したので、本菌は染料の発色団に直接的に作
用すると考えられる。また、脱色の効率は各染料の構造
により異なる。

【００３２】表３において、４日間の培養で脱色活性が
やや低かった染料は、７日間の培養で完全に脱色され
た。C. I. Dispersive red 60 は２週間培養で薄い黄色
に脱色したが、C. I. Dispersive blue 79 は２週間経
ってもほとんど脱色できなかった。なお、固体培地で脱
色できた染料は、染料によって脱色の速度差はあるが、
後述の表４に示すようにＰＤ液体培地でも分解され、脱
色できた。

【００３３】グルコースと無機塩のみからなるツァペッ
クドックス寒天培地では７〜１０日間かけて脱色が完了
した。 （２）液体培地における脱色活性 Ｄｅｃ１株をＰＤＡ培地で６日間培養し、その菌体を滅
菌蒸留水に懸濁し、ガーゼで濾過し、１０⁷ （コロニー
形成単位／ｍｌ）（ｃｆｕ／ｍｌ）の胞子懸濁液を準備
した。

【００３４】この懸濁液５ｍｌを５００ｍｌ坂口フラス
コのＰＤ液体培地１５０ｍｌ（ｐＨ＝６）に植菌し、１
２０ｓｐｍ、３０℃で６日間培養した。濾過して除菌し
た各染料溶液を濃度１００〜２００ｐｐｍになるように
添加し、培養液０．１〜１．０ｍｌを経時的にエッペン
ドルフチューブにサンプリングし、遠心分離（１２００
０ｒｐｍ、３ｍｉｎ）により培養上清を取り、サンプル
とした。

【００３５】各培養上清（サンプル）の染料濃度の減少
は、分光光度計（ＵＶ−２４０、島津製作所製）で各染
料の最大吸収帯の吸光度の減少により測定した。脱色速
度は染料の初期濃度とある時間経過後の各培養上清の吸
光度差により求めた。あらかじめ求めた染料濃度と吸光
度の測定結果に基づいて、ある時間経過後における吸光
度の差を染料濃度の変化（ｐｐｍ／ｈ）に換算した。全
波長スキャンニングにより求めた各染料の最大吸収帯の
波長を表４に示す。

【００３６】

【表４】

【００３７】〈液体培地でのＤｅｃ１株の増殖とｐＨ変
化〉ＰＤ液体培地におけるＤｅｃ１株の増殖とｐＨの経
時変化を図１に示す。増殖曲線は１００ｍｌＰＤ液体培
地で培養した菌体の乾燥重量により求めた。増殖は培養
３日目に最大になり、その後は菌糸の自己分解による菌
体重量の減少がみられた。ｐＨは培養３日で６から４．
５に下がり、それ以降は２週間ほぼ一定に維持された。 〈脱色活性とグルコース濃度〉ＰＤ液体培地における培
養３日後、つまり増殖が最大になったとき、染料 C.I.
Reactive blue 5 ２００ｐｐｍを添加し、培養液の上
清の吸光度を測定した（図２）。脱色活性は速やかに発
現し、培養５日目に最大１００ｐｐｍ／ｈに至ったが、
１０日目には７７ｐｐｍ／ｈに下がった。しかし再び１
４日目には１３０ｐｐｍ／ｈに増加した。培地中のグル
コースは培養３日後から徐々に減少し１９日目には枯渇
した。グルコースが２ｇ／ｌ以下になると、脱色活性の
著しい減少が観察されたが、１９日目にグルコース１０
ｇ／ｌを添加すると脱色活性が速やかに復活した。すな
わち、本菌株の脱色活性を維持させるには、グルコース
等のエネルギー源が必須なことがわかる。 〈染料の初期濃度と脱色速度〉図３は、染料 C. I. Rea
ctive blue 5 の初期濃度を変えたときの脱色速度の変
化を示すグラフである。ＰＤ液体培地に含まれる染料濃
度が４００〜１６００ｐｐｍでは、脱色速度は徐々に増
加したが、３２００ｐｐｍでは初めの４時間は脱色活性
が低かった。これは細胞活性に対する染料の阻害効果で
あると考えられた。しかし脱色活性の向上が６時間後に
得られた。

【００３８】そこで約３０００ｐｐｍずつ染料を繰り返
して添加した（図４。同図中矢印で示す）。４回目まで
の染料の繰り返し添加までは脱色活性の減少があまりみ
られずに脱色された。この間に添加された染料は１２ｇ
／ｌとなり、これがすべて分解できたことになる。しか
し、その後染料の添加を繰り返しても脱色活性は著しく
減少した。

【００３９】また初期濃度として１２ｇ／ｌの染料をＰ
Ｄ液体培地に添加しても２日以内にほとんど分解した。
これは本菌の脱色活性が高濃度の染料で阻害を受けない
ことを示している。 〈脱色速度と温度およびｐＨとの関係〉脱色速度に対す
る温度の効果を図５に示す。ＰＤ液体培地を用い各温度
でＤｅｃ１株を１週間培養し、それぞれの培養液に染料
を添加し分解速度を実測した。菌体量は分解速度を測定
したときの値である。最適温度は３０℃で観察され、培
養７日後のＤｅｃ１株の菌体量は３７℃以外には大きな
差がなかった。

【００４０】なお、ＰＤ液体培地における初期ｐＨを
４、５、６、７に設定して培養を行ったが、どのｐＨで
も培養５日後にはｐＨ５で一定になり、脱色活性もあま
り差がみられなかった。以後はＰＤ液体培地での初期ｐ
Ｈは６に調整した。 〈脱色活性における酸素の影響〉ＰＤ液体培地で培養し
た培養液の脱色活性を確認した後、好気あるいは嫌気条
件下で培養した。ＰＤ液体培地中の酸素を置換するため
に、１０分間窒素ガスを滅菌フィルタを通して注入し
た。次に、C. I. Reactive blue 5 ４００ｐｐｍを添加
し、脱色活性をモニターした。

【００４１】その結果、図６に示すように、嫌気条件下
では脱色活性がほとんど発現できなかった。８時間後、
空気の供給を開始すると、脱色活性が復活した。この結
果からＤｅｃ１株による染料の分解には酸素が必須であ
ることがわかった。 〈Ｄｅｃ１株の菌体外と菌体内の粗酵素液の調製〉Ｄｅ
ｃ１株を１００ｍｌＰＤ液体培地で３日間培養し、染料
C. I.Reactive blue 5 を５０ｐｐｍ添加した後、１２
時間で完全に脱色できることを確認した。

【００４２】次に、培養液を遠心分離（８０００ｒｐ
ｍ、２０ｍｉｎ）して培養上清を取り、この培養上清に
硫酸アンモニウムを８０％までゆっくり加えた。次いで
これを穏やかに攪拌し沈殿物を得た。１時間放置後、遠
心分離（１２０００ｒｐｍ、１０ｍｉｎ）により沈殿物
を取り、この沈殿物を２５ｍＭクエン酸バッファー（ｐ
Ｈ＝５）に溶解し、硫酸アンモニウムを除去するために
同バッファーで透析した。透析後、０．４５μｍ硝酸セ
ルロース膜で濾過し、菌体外粗酵素液として４℃で保存
した。これらの処理はすべて４℃で行った。

【００４３】約３００ｍｇ（乾燥重量）の菌体を乳鉢の
中で石英砂と混合してすりつぶし、２５ｍｌのクエン酸
バッファー（ｐＨ＝５）に溶解し、遠心（１２０００ｒ
ｐｍ、１０ｍｉｎ）した上清を菌体内粗酵素液として調
製した。この菌体内粗酵素液をＨ₂ Ｏ₂ ０．２ｍＭと
C. I. Reactive blue 5 ５０ｐｐｍとに混合し、２８
℃、１２０ｓｐｍで反応させたが、染料の分解活性は観
察されなかった。

【００４４】一方、上記菌体外粗酵素液を上記と同様に
して反応させたところ、図７に示すように脱色活性がみ
られた。菌体外の粗酵素液に脱色活性がみられ、ペルオ
キシダーゼが存在することが明らかになった。この反応
溶液はタンパク質６６μｇ／ｍｌ、Ｈ₂ Ｏ₂ ０．２ｍ
Ｍ、C. I. Reactive blue 5 ５０ｐｐｍを含んでいる。
Ｈ₂ Ｏ₂ を添加しない場合と粗酵素液を熱変性させた場
合は全く脱色活性がなかった。

【００４５】なお、約０．５μｇ−タンパク質／ｍｌの
粗酵素液の脱色速度を上記表４に示した。表４で、培養
液と粗酵素との脱色速度を比較した結果、いくつかの染
料に対しては粗酵素の染料分解速度が１００倍以上高か
った。Ｄｅｃ１株の増殖が定常状態に至った培養３日後
の培養液から粗酵素を抽出したこと、より長時間の培養
でも活性が維持されていることから、本菌が分泌してい
るペルオキシダーゼは誘導型と考えられる。酵素活性が
ＰＤ液体培地で得られたことから染料自体は誘導物質で
はないと考えられる。 〈本菌体外粗酵素と西洋ワサビペルオキシダーゼとの比
較〉本菌体外粗酵素と西洋ワサビペルオキシダーゼ（Ｈ
ＲＰ）との比較を行った。

【００４６】基質に C. I. Reactive blue 5 を用い、
上記本菌体外粗酵素とＨＲＰとの脱色活性を比較する
と、本酵素の最適ｐＨは３．２であり、ＨＲＰは４．０
であった。熱安定性については、４０℃では両酵素とも
長時間安定であったが、８０℃で３時間処理すると、Ｈ
ＲＰが８８％、本酵素は４１％失活した。ｐＨ安定性
は、ｐＨ８．２の処理では両者とも約３０％失活した
が、ｐＨ２．３の酸性処理（６時間）ではＨＲＰが１０
０％、本酵素が５８％失活し、酸性領域での本酵素の安
定性が高かった。またＨＲＰと本酵素の C. I. Reactiv
e blue 5 脱色後のＵＶスペクトルも４００ｎｍ以下に
おいてかなり相違していた。本酵素の脱色活性における
金属イオンの影響を調べた結果、Ｃｕ²⁺は脱色活性を促
進するが、Ｍｎ ²⁺は阻害の傾向があった。

【００４７】以上述べたように、本発明に係るＤｅｃ１
株は、これまで報告されている脱色菌に比して格段に多
種類の染料に対して脱色活性を有する。本発明者らは、
このＤｅｃ１株が実用化している種々の染料を固体培地
および液体培地で脱色できることを証明した（表３、表
４）。またＤｅｃ１株による脱色活性はエネルギー源と
酸素が必要であることが証明された。ペルオキシダーゼ
型酵素によりリグニン関連化合物（Trans.Myc.Soc.,Jap
an,3,29-35(1962)) や除草剤（J.Gen.Microbiol., 26,1
55-165(1961)）の分解活性を示す糸状菌が報告されてい
るが、Ｄｅｃ１株は数多い染料に対して脱色活性を示
し、これは主に菌体外分泌物であるペルオキシダーゼ型
の酵素によると考えられる。脱色菌が１種類の染料に特
異的に脱色活性を示すのみでは、一般の排水における染
料の混合液に対してはあまり実用価値がないと考えら
れ、多種類の染料に対して高脱色活性を有する本菌の応
用の可能性が期待される。

【００４８】またゲオトリクム・カンジダム（Geotrich
um candidum ）は、土壌や水系に広く分布し、酢酸、エ
タノール、アセトン等をエネルギー源として利用できる
ことが知られているので、実用においてグルコースの代
わりにより安価な炭素源としてこれら物質を用いること
も可能であろう。このような特性は、リアクターシステ
ムによる利用だけでなく土壌のバイオレメディエーショ
ンにおいても有色物質の処理への可能性を示すといえ
る。

【００４９】

【発明の効果】本発明により、従来に比して極めて多種
類の染料に対して脱色活性を有するＤｅｃ１株が提供さ
れるので、染料排水処理に微生物を用いた処理システム
や染料で汚染された土壌のバイオレメディエーションな
ど、幅広い分野への応用が考えられる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明に係るＤｅｃ１株の増殖と培地のｐＨ変
化の関係を示すグラフである。

【図２】本発明に係るＤｅｃ１株による脱色速度と培地
中のグルコース濃度の関係を示すグラフである。

【図３】染料の初期濃度とＤｅｃ１株による脱色速度と
の関係を示すグラフである。

【図４】染料を培地中に連続添加した場合の濃度変化を
示すグラフである。

【図５】本発明に係るＤｅｃ１株の菌体量およびその脱
色速度に対する温度効果を示すグラフである。

【図６】好気条件、嫌気条件における脱色効果を示すグ
ラフである。

【図７】本発明に係るＤ１株から菌体外分泌された粗酵
素液による脱色活性を示すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 石川 健一 神奈川県横浜市旭区南希望ヶ丘118 森永 希望ヶ 丘寮319 (72)発明者 平井 光代 神奈川県相模原市相模台１−15−１

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 少なくとも脱色活性を有するゲオトリク
   ム・カンジダム（Geotrichum candidum）。
2. 【請求項２】 次の菌学的性質を有する、請求項１記載
   のゲオトリクム・カンジダム。 （Ａ）形態学的特性 ポテトデキストロース寒天培地（ＰＤＡ）上で速やかに
   生育。菌糸は直径１．６〜４．８μｍ、無色、隔壁を有
   し、表面平滑。幅の広い栄養菌糸と幅の狭い分生子形成
   菌糸とに分かれる。分生子は２．４〜４．８×２．４〜
   １６μｍ、無色で表面平滑で、樽型、楕円型、亜球形を
   なす。 （Ｂ）培養学的特性 （１）ＰＤＡ培地：生育は極めて良い。コロニーの表面
   は気生菌糸が旺盛で、毛羽立ち羊毛状、純白色、裏面か
   ら見ると無色。分生子の形成は良好。 （２）麦芽エキス寒天培地：生育は良好。コロニーの表
   面はＰＤＡ培地上での生育とほぼ同じ。 （３）ツアペック酵母エキス寒天培地：生育は良好。コ
   ロニーの表面は羊毛状で白色、裏面から見ると無色。 （４）コーンミール寒天培地：生育は良くない。コロニ
   ーの表面は気生菌糸が薄く、平坦に広がり無色。分生子
   の形成は悪い。 （５）ツアペック寒天培地：生育は認められない。 （６）生育至適温度は２５℃前後。 （７）生育可能なｐＨは４−８、至適ｐＨは６前後。 （Ｃ）生理学的特性 Ｄ−グルコースの発酵性は弱く、ガラクトース、グルコ
   ース、ソルボース、キシロース、グリセロール、ラクト
   ースで増殖可能。
3. 【請求項３】 ゲオトリクム・カンジダム Ｄｅｃ１
   （ＦＥＲＭ Ｐ−１５３４８）である、請求項１または
   ２に記載のゲオトリクム・カンジダム。
4. 【請求項４】 請求項１〜３のいずれかに記載のゲオト
   リクム・カンジダムを培養して得られた菌体外分泌物を
   用いて染料を分解・脱色することを特徴とする、脱色方
   法。