JPH09208488A - 脳血管性痴呆治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】脳血管性痴呆治療剤を提供する。 【解決手段】ＴＲＨ作用を有するオリゴペプチドを含有
してなる脳血管性痴呆治療用製剤。 【効果】上記製剤は、極微量のオリゴペプチドによっ
て、脳血管性痴呆症に著効を示す。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は脳血管性痴呆治療剤
に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、老齢人口の増加と共に老人性痴呆
症の患者数はますます増加する傾向にあり、社会的にも
非常に重要な問題となってきている。脳血管性痴呆は脳
梗塞や脳出血の後遺症として出現するものであり、その
臨床症状は場所、時間、人に対する見当識障害や記憶障
害に加え、意欲低下、情緒障害、うつ的症状や行動異常
などであり、それは多岐にわたっている。これまで脳血
管性痴呆の治療薬としては、向精神薬（主として抗不安
薬、抗うつ薬）、脳循環代謝改善薬などが繁用されてい
るが、必ずしも満足できる効果は得られていない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】脳血管性痴呆は直接的
に脳血管系の障害、たとえば脳出血、脳梗塞などにより
脳神経細胞が障害を受け、種々の神経活動に異常を来た
すものである。とりわけ、記憶系には著しい障害が表わ
れる場合が多い。しかしこの記憶系の障害に対する的確
な治療薬または治療方法がなく、中枢神経系の機能異常
であるとして、脳内の代謝あるいは神経伝達機能の調整
剤が用いられてはいるが、諸症状とくに記憶障害の改善
には結び付いていない。一般に薬物は血液脳関門を通過
しにくく、はっきりした効果を得るには多くの投与量を
必要とする。このため、脳以外の組織に作用し、副作用
が避けにくい。それゆえ、副作用が少なく、かつ、僅か
の投与量で有効性を発揮する薬物が求められてきた。本
発明者らは、ＴＲＨおよびそのアナログを含有する徐放
性製剤について検討を加えて来たが（ＥＰ−Ａ−Ｏ２５
６７２６公報参照）、これらの徐放製剤により極微量の
投与で脳梗塞モデル動物における記憶障害を顕著に改
善、治療されるという知見を得た。これに基づいて更に
研究した結果、本発明を完成した。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明は、（１）ＴＲＨ
作用を有するオリゴペプチドを含有してなる脳血管性痴
呆治療用製剤、（２）徐放性製剤である前記（１）記載
の製剤、（３）マイクロカプセルである前記（２）記載
の製剤、（４）ＴＲＨ，乳酸・グリコール酸共重合体お
よびＤ−マンニトールを含有してなる前記（３）記載の
製剤を提供するものである。上記ＴＲＨ作用を有するオ
リゴペプチドとして、例えば式

【化１】 ［式中、Ｘは４,５または６員複素環基を、Ｙはイミダ
ゾール−４−イル，４−ヒドロキシフェニルまたはイソ
プロピルを、Ｒ¹，Ｒ²は同一または異なって水素もしく
は低級アルキルを、Ｒ³は水素または置換基を有してい
てもよいアラルキルを、Ｚはメチレンまたは硫黄原子を
示す］で表わされる化合物が挙げられる。 Ｘで示される４,５,６員複素環基は窒素,酸素または(お
よび)硫黄原子を有していてもよく、例えば

【化２】 などが挙げられる。Ｒ¹およびＲ²で表わされる低級アル
キルとしては、Ｃ_1-3アルキルなど（例、メチル，エチ
ル，プロピル，イソプロピルなど）が挙げられる。Ｒ³
で表わされる置換基を有していてもよいアラルキルとし
ては、１〜２個の水酸基などの置換基を有していてもよ
いフェニルＣ_1-2アルキルなど例えば３,４−ジヒドロキ
シフェニルエチルなどが挙げられる。化合物(Ｉ)は２〜
４のアミノ酸または誘導体もしくは類似体からなる場合
が好ましい。

【０００５】化合物(Ｉ)に包含される化合物として、ピ
ロ Ｇlu−Ｈis−ＰroＮＨ₂(ＴＲＨ),α−ブチロラクト
ンカルボニル−Ｈis−ＰroＮＨ₂（ＤＮ−１４１７），
オロチル−Ｈis−ＰroＮＨ₂（ＣＧ−３５０９），２−
メチルテトラヒドロチアジン−３−オン−５−イルカル
ボニル−Ｈis−ＰroＮＨ₂（ＣＧ−３７０３），ピロＧl
u−Ｔyr−ＰroＮＨ₂（Ｒo １０２９２８），ピロＧlu−
Ｈis−ＰroＮＨ（３,４−ジヒドロキシフェニルエチ
ル）（Ｒo １０９４３０），ピロＧlu−Ｈis−（３,４
−ジヒドロキシフェニルエチルアミノカルボニル）（Ｒ
o １０８８０２），ピロ−２−アミノアジピル−Ｈis−
チアゾリジン−４−カルボアミド（ＭＫ−７７１），ピ
ロ−２−アミノアジピル−Ｌeu−ＰroＮＨ₂（ＲＧＨ−
２２０２），ピロＧlu−Ｈis−（３−モノメチル）Ｐro
ＮＨ₂（ＲＸ７４３５５），ピロＧlu−Ｈis−（３,３−
ジメチル）ＰroＮＨ₂（ＲＸ７７３６８），アゼチジノ
ン−４−イルカルボニル−Ｈis−ＰroＮＨ₂（ＹＭ−１
４６７３）など[これらの化合物の性状についてはニュ
ーロファーマコロジー（Neuropharmocology），２０，
９４７−９５７(１９８１)および同誌，２３，３３９−
３４８(１９８４)，ブレーン・リサーチ・レビュー（Br
ain Research Reviews），４，３８９−４０３(１９
８２)，ブレーン・リサーチ（Brain Research），４８
６，２２８−２３５(１９８９)，アルツナイム・フォル
シュング（Arzneim Forsch.／Drug Res.），３９，２
９７−２９８(１９８９)，ＥＰ−Ａ−１２３,４４４公
報参照]が挙げられる。とりわけ化合物(I)としてＴＲ
Ｈ,ＤＮ−１４１７,ＣＧ−３５０９が好ましい。上記化
合物はフリー体でも、あるいはその塩でもよく、上記化
合物またはその塩は水和物、あるいは非水和物の何れで
あってもよい。とりわけ、フリー体またはpKa ４以上の
弱酸の塩が好ましい。

【０００６】本発明における上記オリゴペプチドを含有
し、それらを持続的に放出する製剤としては通常の徐放
性製剤であればよく、その形態、投与ルートには関係な
く用いることができる。通常１週間以上の放出期間を有
する徐放性製剤を用いるが、１回の投与では１週間以上
持続的に薬物を放出しなくともそれらを頻回投与するこ
とで同様の効果が得られれば、そのような製剤でもよ
い。しかし、１回の投与では少なくとも２４時間以上の
持続的な放出をする製剤が好ましく、より好ましくは１
回の投与で２日以上の持続的な放出をする製剤がよい。
このように持続的にＴＲＨまたはその活性をもつ物質を
放出する製剤としては注射剤または埋め込み剤が挙げら
れる。薬物を高分子マトリックス中に分散した埋め込み
剤、それらを粉砕するかあるいは初めからマイクロスフ
ェアーもしくはマイクロカプセルとした注射剤が一般的
な製剤である。使用する高分子としては生体内分解性あ
るいは生体内溶解性のものがよく、(1)ポリ乳酸、乳酸
・グリコール酸共重合体、ポリシアノアクリレート、ポ
リカプロラクトン、ポリオルトエステル、ポリリンゴ
酸、ポリ−β−ヒドロキシ酪酸、ポリオルソカーボネー
ト、無水マレイン酸系共重合体等の合成高分子、(2)ア
ルブミン、ポリアミノ酸、コラーゲン、ゼラチン等の蛋
白質、(3)ポリアクリルスターチ、分解性スターチ、デ
キストラン、およびその誘導体、メチルセルロース、エ
チルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、アセ
チルセルロース、ニトロセルロース等の糖類等が挙げら
れる。これらの徐放性製剤（好ましくはマイクロカプセ
ルなど）のうち特に好ましいものとしては、ＴＲＨ，乳
酸・グリコール酸共重合体およびＤ−マンニトールを含
有してなる徐放性製剤などが挙げられる。

【０００７】これらの徐放性製剤の製造方法としては、
例えば、モールディング法などの通常用いられる方法で
よい。薬物は高分子マトリックス中に均一に分散あるい
は溶解したものがよく、薬物および高分子を適当な溶剤
に均一に溶解し、溶剤を除去して成形した埋め込み剤を
調製する方法、あるいは薬物の水溶液を高分子の非水溶
媒を均一に混合または乳化し、溶媒および水を除去した
埋め込み剤を調製する方法等が挙げられる。これらの埋
め込み剤を粉砕して注射剤を調製することもできる。マ
イクロスフェアーの調製方法は相分離法、液中乾燥法
（溶媒除去法）、コアセルベーション法、スプレードラ
イ法、粉砕法等の調製方法が挙げられる。他の徐放性製
剤としては経皮投与剤が挙げられる。経皮投与剤として
はいわゆるパッチ剤あるいは軟膏剤のいずれでもよい
が、パッチ剤の方が長期間持続的に薬物を放出するには
好ましい。経皮投与剤は通常の方法で調製される。使用
される製剤基剤としては、ＴＲＨまたはその活性をもつ
物質を溶解または分散させやすいプロピレングリコー
ル、ソルビトール液、グリセリン、ポリエチレングリコ
ール等の多価アルコール類、オリーブ油等の植物油、ス
クワレン、ラノリン等の動物油、流動パラフィン、ワセ
リン等の鉱物油、その他の油脂、脂肪酸エステル等が用
いられる。このとき、経皮吸収の促進剤を使用してもよ
い。促進剤としては脂肪アルコール、脂肪酸のアルカリ
金属塩、脂肪属モノアミン、エイゾン等が挙げられる。

【０００８】好ましい徐放性製剤の製造方法としては通
常用いられる水中乾燥法等、特に好ましくは、（Ｗ／
Ｏ）／Ｗ型水中乾燥法またはＯ／Ｗ型水中乾燥法等が用
いられる。即ち、（Ｗ／Ｏ）／Ｗ型水中乾燥法の場合、
ＴＲＨ薬物を含む溶液を内水相とし、高分子重合体を含
む溶液を油相としてＷ／Ｏ型乳化物をつくり、該乳化物
を水相に分散させて（Ｗ／Ｏ）／Ｗ型乳化物をつくり水
中乾燥法に付し、油相中の溶媒を除去することにより水
溶性薬物のマイクロカプセルを製造する。Ｏ／Ｗ型水中
乾燥法の場合、水溶性薬物と高分子重合体とからなる油
相を水相に分散させてＯ／Ｗ型乳化物をつくり水中乾燥
法に付し、油相中の溶媒を除去することにより水溶性薬
物のマイクロカプセルを製造する。この際（Ｗ／Ｏ）／
Ｗ型乳化物，Ｏ／Ｗ型乳化物いずれの方法においても、
水中乾燥時の外水相に、例えば特開平６−１４５０４６
号に示されるような浸透圧調節剤を加えることも可能で
ある。上記ＴＲＨの使用量は、薬物の種類、所望の薬理
効果および効果の持続期間などにより異なるが、内水層
中の濃度としては、約０.００１％〜約９０％（Ｗ／
Ｗ）、より好ましくは約０.０１％〜約８０％（Ｗ／
Ｗ）から選ばれる。特に好ましくは約０.０１％〜約７
０％（Ｗ／Ｗ）である。また、ＴＲＨはフリー体でも塩
の形でもよいがフリー体が好ましい。

【０００９】本発明で用いられる高分子重合体として
は、水に難溶または不溶で、生体適合性のある高分子重
合体等が挙げられる。水に難溶とは、該高分子重合体の
水に対する溶解度が０より大きく約１％（Ｗ／Ｗ）以下
であることを意味する。かかる高分子重合体としては、
例えば、生体内分解型としてポリ脂肪酸エステル（例、
ポリ乳酸，ポリグリコール酸，ポリクエン酸，ポリリン
ゴ酸、乳酸・グリコール酸共重合体など），ポリ−α−
シアノアクリル酸エステル，ポリ−β−ヒドロキシ酪
酸，ポリアルキレンオキサレート（例、ポリトリメチレ
ンオキサレート，ポリテトラメチレンオキサレートな
ど），ポリオルソエステル，ポリオルソカーボネート、
あるいはその他のポリカーボネート（例、ポリエチレン
カーボネート，ポリエチレンプロピレンカーボネートな
ど），ポリアミノ酸（例、ポリ−γ−ベンジル−Ｌ−グ
ルタミン酸，ポリ−Ｌ−アラニン，ポリ−γ−メチル−
Ｌ−グルタミン酸など）などが挙げられる。さらに、生
体適合性を有するその他の高分子重合体として、ポリス
チレン，ポリメタアクリル酸，アクリル酸とメタアクリ
ル酸との共重合体、ポリアミノ酸，デキストランステア
レート，エチルセルロース，アセチルセルロース，ニト
ロセルロース，無水マレイン酸系共重合体，エチレンビ
ニールアセテート系共重合体，ポリビニールアセテー
ト，ポリアクリルアミドなどが挙げられる。これらの高
分子重合体は１種でもよく、また２種以上の共重合体、
あるいは単なる混合物でもよく、またその塩でもよい。

【００１０】これらの高分子重合体の中で、特に注射剤
として用いる場合は、生体内分解型高分子重合体が好ま
しい。該生体内分解型高分子重合体の好ましい具体例と
しては、例えばヒドロキシカルボン酸の重合体または共
重合体あるいはそれらの混合物などが挙げられる。該ヒ
ドロキシカルボン酸としては特に限定されないが、一般
式（II）

【化３】 〔式中、Ｒは水素またはアルキル基を示す。〕で表され
るヒドロキシカルボン酸が好ましい具体例として挙げら
れる。上記式中、Ｒで示されるアルキル基としては、例
えば炭素数１から８の直鎖あるいは分枝状のアルキル基
（例、メチル，エチル，プロピル，イソプロピル，ブチ
ル，イソブチル，第３級ブチル，ペンチル，ヘキシル，
ヘプチル，オクチル等）が好ましい。これらの中で、炭
素数１から３の直鎖あるいは分枝状のアルキル基（例、
メチル，エチル，プロピル，イソプロピル等）が特に好
ましい。

【００１１】上記ヒドロキシカルボン酸の好ましい具体
例としては、例えばグリコール酸，乳酸，２−ヒドロキ
シ酪酸，２−ヒドロキシ吉草酸，２−ヒドロキシ−３−
メチル酪酸，２−ヒドロキシカプロン酸，２−ヒドロキ
シイソカプロン酸，２−ヒドロキシカプリル酸などが挙
げられる。このうち特に、グリコール酸，乳酸，２−ヒ
ドロキシ酪酸，２−ヒドロキシ−３−メチル酪酸，２−
ヒドロキシカプロン酸等が好ましい。さらに、グリコー
ル酸，乳酸，２−ヒドロキシ酪酸等が特に好ましい。こ
れらのヒドロキシカルボン酸において、Ｄ−体，Ｌ−体
およびＤ,Ｌ−体が存在するものは、そのいずれを用い
てもよいが、Ｄ,Ｌ−体が好ましい。該共重合体の共重
合の形式は、ランダム、ブロック、グラフトの何れでも
よい。これらのグリコール酸共重合体において、生体内
での分解が比較的速やかで単独で用いた場合の放出期間
が１ケ月以内のものが好ましい。本発明に使用される高
分子重合体は、一般的な合成法（例えば、特開昭６１−
２８５２１号公報参照）で問題なく合成できる。

【００１２】本発明に使用されるこれらの高分子重合体
の平均分子量は約２０００〜約８０００００のものが好
ましく、より好ましくは約５０００〜約２０００００の
範囲から選定される。上記の高分子重合体として、乳酸
・グリコール酸共重合体を用いる場合が好ましく、その
組成比は約１００／０〜約５０／５０（Ｗ／Ｗ）が好ま
しい。酪酸・グリコール酸共重合体を用いる場合、その
組成比は約１００／０〜約２５／７５（Ｗ／Ｗ）が好ま
しい。乳酸・グリコール酸共重合体は、重量平均分子量
が約５０００〜約３００００のものが好ましい。さらに
約５０００〜約２００００のものが特に好ましい。上記
高分子重合体として例えばポリ乳酸（Ａ）とグリコール
酸・２−ヒドロキシ酪酸共重合体（Ｂ）との混合物を用
いる場合、（Ａ）／（Ｂ）で表される混合比が約１０／
９０〜約９０／１０（重量比）の範囲で使用される。好
ましくは約２５／７５〜約７５／２５（重量比）の範囲
である。ポリ乳酸の重量平均分子量は約５０００〜約３
００００のものが好ましい。さらに約６０００〜約２０
０００のものが特に好ましい。グリコール酸・２−ヒド
ロキシ酪酸共重合体の組成比は、モル比で約４０／６０
〜約７０／３０が好ましい。グリコール酸・２−ヒドロ
キシ酪酸共重合体の重量平均分子量は約５０００〜約２
５０００が好ましい。さらに約５０００〜約２００００
が特に好ましい。

【００１３】なお、本明細書における分子量とは、ポリ
スチレンを基準物質としてゲルパーミエーションクロマ
トグラフィー（ＧＰＣ）で測定したポリスチレン換算の
分子量をいう。測定は、ＧＰＣカラムＴＳＫゲル（２０
００，２５００，３０００、東ソー社製）を使用し、移
動相としてクロロホルムを用いた。これら高分子重合体
の使用する量は、水溶性薬物の薬理活性の強さと、薬理
放出の速度および期間などによって決まり、たとえば水
溶性薬物に対して約０.２〜約１００００倍（重量比）
の量で調製されるが、好ましくは約１〜約１０００倍
（重量比）の量の重合体をマイクロカプセル基剤として
用いるのがよい。油相中の高分子重合体の濃度は、約
０.５〜約９０％（Ｗ／Ｗ）、さらに好ましくは約２〜
約６０％（Ｗ／Ｗ）から選ばれる。

【００１４】本発明に用いられる浸透圧調節剤として
は、水溶液とした場合浸透圧を示すものであればいかな
る物質であってもよい。該浸透圧調節剤の具体例として
は、例えば水溶性の多価アルコール類、水溶性の一価ア
ルコール類、水溶性の単糖類，二糖類およびオリゴ糖あ
るいはそれらの誘導体、水溶性のアミノ酸、水溶性のペ
プチド，タンパク質あるいはそれらの誘導体などが挙げ
られる。これらのうち水溶性の多価アルコール類、なら
びに水溶性の単糖類，二糖類およびオリゴ糖あるいはそ
れらの誘導体などが好ましい。さらに水溶性の多価アル
コール類および水溶性の単糖類などが特に好ましい。最
も好ましくは水溶性の多価アルコールなどである。

【００１５】上記水溶性の多価アルコール類としては、
例えばグリセリン等の二価アルコール類、アラビトー
ル，キシリトール，アドニトール等の五価アルコール
類、マンニトール，ソルビトール，ズルシトール等の六
価アルコール類などが挙げられる。これらのうち六価の
アルコール類などが好ましい。なかでも、マンニトール
などが特に好ましい。上記水溶性の一価アルコール類と
しては、例えばメタノール、エタノール、イソプロピル
アルコール等が挙げられる。これらのうちエタノールな
どが好ましい。上記水溶性の単糖類としては、例えばア
ラビノース，キシロース，リボース，２−デオキシリボ
ース等の五炭糖類、ブドウ糖，果糖，ガラクトース，マ
ンノース，ソルボース，ラムノース，フコース等の六炭
糖類などが挙げられる。これらのうち六炭糖類などが好
ましい。上記水溶性の二糖類としては、例えば麦芽糖、
セロビオース，α,α−トレハロース、乳糖、ショ糖な
どが挙げられる。これらのうち乳糖、ショ糖などが好ま
しい。上記水溶性のオリゴ糖としては、例えばマルトト
リオース，ラフィノース等の三糖類、スタキオース等の
四糖類などが挙げられる。これらのうち三糖類などが好
ましい。上記水溶性の単糖類，二糖類およびオリゴ糖の
誘導体としては、例えばグリコサミン、ガラクトサミ
ン、グルクロン酸、ガラクツロン酸などが挙げられる。

【００１６】上記水溶性のアミノ酸としては、例えばグ
リシン，アラニン，バリン，ロイシン，イソロイシン，
フェニルアラニン，チロシン，トリプトファン，セリ
ン，トレオニン，プロリン，ヒドロキシプロリン，シス
テイン，メチオニン等の中性アミノ酸、アスパラギン
酸，グルタミン酸等の酸性アミノ酸、リジン，アルギニ
ン，ヒスチジン等の塩基性アミノ酸等が挙げられる。ま
たこれらの水溶性アミノ酸の酸（例、塩酸，硫酸，リン
酸等）またはアルカリ（例、ナトリウム，カリウム等の
アルカリ金属等）との塩を用いてもよい。水溶性のペプ
チド，タンパク質あるいはそれらの誘導体としては、例
えばカゼイン，グロブリン，プロラミン，アルブミン，
ゼラチンなどが挙げられる。これらの浸透圧調節剤は、
単独で使用しても、一種以上を混合して使用してもよ
い。これらの浸透圧調節剤の外水相中での濃度は、浸透
圧調節剤が非イオン性物質の場合、約０.００１％〜約
６０％（Ｗ／Ｗ）、好ましくは約０.０１〜約４０％
（Ｗ／Ｗ）、より好ましくは約０.０５〜約３０％（Ｗ
／Ｗ）、特に好ましくは約１％（Ｗ／Ｗ）である。ま
た、浸透圧調節剤がイオン性物質の場合、上記の濃度を
全体のイオン価で除した濃度が用いられる。浸透圧調節
剤の添加濃度は、溶解度以下である必要はなく、一部が
分散状態であってもよい。

【００１７】本発明における（Ｗ／Ｏ）／Ｗ型水中乾燥
法によるマイクロカプセルの製造は例えば以下のように
して行なわれる。まず、水に水溶性薬物を前記の濃度に
なる量を溶解し、これに必要であればゼラチン、寒天、
アルギン酸、ポリビニルアルコールあるいは塩基性アミ
ノ酸などの薬物保持物質を加えて溶解もしくは懸濁し、
内水相とする。通常、常温で溶解されるが必要であれば
９０℃以下の温度で加温することによって容易に溶解さ
れる。これらの内水相中には、ＴＲＨの安定性、溶解性
を保つためのpＨ調整剤として、炭酸、酢酸、シュウ
酸、クエン酸、リン酸、塩酸、水酸化ナトリウム、アル
ギニン、リジンまたはそれらの塩などを添加してもよ
い。また、さらに生理活性ペプチドの安定化剤として、
アルブミン、ゼラチン、クエン酸、エチレンジアミン四
酢酸ナトリウム、デキストリン、亜硫酸水素ナトリウ
ム、ポリエチレングリコールなどのポリオール化合物な
どを、あるいは保存剤として、一般に用いられるパラオ
キシ安息香酸エステル類（例、メチルパラベン、プロピ
ルパラベンなど）、ベンジルアルコール、クロロブタノ
ール、チメロサールなどを添加してもよい。

【００１８】このようにして得られた内水相を、高分子
重合体を含む溶液（油相）中に加え、ついで乳化操作を
行い、Ｗ／Ｏ型乳化物をつくる。該乳化操作は公知の分
散法、例えば、断続振とう法、プロペラ型撹はん機ある
いはタービン型撹はん機などのミキサーによる方法、コ
ロイドミル法、ホモジナイザー法、超音波照射法などが
用いられる。またこれらの工程は、バッチで行なっても
よいし、流路の中で連続的に乳化を行なってもよい。連
続乳化の例としてはホモミックラインフローなどが挙げ
られる。上記高分子重合体を含む溶液（油相）は、高分
子重合体を有機溶媒中に溶解したものが用いられる。該
溶媒としては、沸点が約１２０℃以下で、かつ水と混和
しない性質のもので、高分子重合体を溶解するものであ
ればいかなるものでもよい。その具体例としては、例え
ばハロゲン化炭化水素（例、ジクロロメタン、クロロホ
ルム、クロロエタン、ジクロロメタン、トリクロロエタ
ン、四塩化炭素など）、脂肪酸エステル（例、酢酸エチ
ル、酢酸ブチルなど）、エーテル類（例、エチルエーテ
ル、イソプロピルエーテルなど）、芳香族炭化水素
（例、ベンゼン、トルエン、キシレンなど）等が挙げら
れる。これらは２種以上適宜の割合で混合して用いても
よい。温度は約５〜約３０℃、好ましくは約１０〜約２
５℃、より好ましくは約１０〜約２０℃、Ｗ／Ｏ／Ｗ形
成時の水相温度としては約５〜約３０℃、好ましくは、
約１０〜約２５℃、より好ましくは約１０〜約２０℃と
することが好ましい。ついで、このようにして調製され
たＷ／Ｏ型乳化物を、浸透圧調節剤を前記の濃度になる
量を含有した水相中で水中乾燥法に付す。すなわち、該
Ｗ／Ｏ型乳化物をさらに浸透圧調節剤を含有した第３層
目の水相中に加え、（Ｗ／Ｏ）／Ｗ型の３相乳化物を形
成させた後、油相中の溶媒を除去し、マイクロカプセル
を調製する。

【００１９】本発明におけるＯ／Ｗ型水中乾燥法による
マイクロカプセルの製造は、例えば以下のようにして行
われる。まず、高分子重合体を水不溶性溶媒に溶解す
る。ついでこの溶液に、水溶性薬物を加えよく混合して
油相を製造する。この場合、所望により水不溶性溶媒と
共に水溶性溶媒を用いることも有効である。ついで、こ
のようにして製造された油相を、浸透圧調節剤を前記の
濃度になる量を含有した水相中で水中乾燥法に付す。す
なわち、該油相をさらに浸透圧調節剤を含有した第２相
目の水相中に加え、Ｏ／Ｗ型乳化物を形成させた後、油
相中の溶媒を除去し、マイクロカプセルを製造する。

【００２０】上記水不溶性溶媒としては、該高分子重合
体を溶解し、水に不溶性のものであればいかなるもので
もよい。該水不溶性溶媒の具体例としては、例えばハロ
ゲン化炭化水素類（例、ジクロロメタン，クロロホル
ム，ジクロロヘキサン，クロロエタン，ジクロロエタ
ン，トリクロロエタン，四塩化炭素等）、エステル類
（例、酢酸エチル等）、エーテル類（例、エチルエーテ
ル等）、芳香族炭化水素類（例、ベンゼン，トルエン
等）、炭化水素類（例、ｎ−ペンタン，ｎ−ヘキサン
等）などが挙げられる。上記水溶性溶媒は、水溶性を有
し、上記水不溶性溶媒と混合し得るものであればいかな
るものでもよい。該水溶性溶媒の具体例としては、例え
ばアルコール類（例、メタノール，エタノール，プロピ
ルアルコール，イソプロピルアルコール等）、アセト
ン、アセトニトリルなどが挙げられる。

【００２１】（Ｗ／Ｏ）／Ｗ型水中乾燥法における第３
相目の水相またはＯ／Ｗ乾燥法における第２相目の水相
に乳化剤を加えてもよい。その例としては、一般に安定
なＯ／Ｗ型乳化物を形成するものであればいずれでもよ
い。さらに具体例には、例えばアニオン界面活性剤
（例、オレイン酸ナトリウム，ステアリン酸ナトリウ
ム，ラウリル硫酸ナトリウムなど）、非イオン性界面活
性剤（例、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステ
ル〔例、Tween ８０，Tween ６０（アトラスパウダー社
製）など〕ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体〔例、Ｈ
ＣＯ−６０，ＨＣＯ−５０（日光ケミカルズ社製）な
ど〕あるいはポリビニールピロリドン、ポリビニールア
ルコール、カルボキシメチルセルロース、レシチン、ゼ
ラチンなどが挙げられ、これらの中の一種類か、いくつ
かを組合わせて使用してもよい。使用の際の濃度は約
０.０１％〜約２０％（Ｗ／Ｗ）の範囲から適宜選定で
き、より好ましくは約０.０５％〜約１０％（Ｗ／Ｗ）
の範囲で用いられる。

【００２２】油相中の溶媒の除去は、通常用いられる方
法が採用される。該方法としては、プロペラ型撹拌機、
あるいはマグネチックスターラーなどで撹拌しながら常
圧下または徐々に減圧して行なうか、ロータリーエバポ
レーターなどを用いて、真空度を調節しながら除去す
る。この場合、高分子重合物の固化がある程度進行し、
内層から薬物の放出による損失が減少した時点で、溶媒
の除去をより完全にする目的で、（Ｗ／Ｏ）／Ｗ型ある
いはＯ／Ｗ型乳化物を徐々に加温して行うと所要時間を
短縮することができる。また、温度以外の方法で増粘化
および固化を行う場合は、単に（Ｗ／Ｏ）／Ｗ型あるい
はＯ／Ｗ型乳化物を撹拌下放置するか、加温するか、窒
素ガスなどを吹きつけるかすることなどによって除去し
てもよい。この溶媒の除去過程は薬物の放出をコントロ
ールするマイクロカプセルの表面構造を大きく左右する
重要な過程である。たとえば、除去の速度を速く行うこ
とによって、表面に多くの細孔を生じ、またより大きな
細孔となり、薬物放出速度を高める。

【００２３】このようにして得られたマイクロカプセル
は遠心分離あるいはろ過して分取した後、マイクロカプ
セルの表面に付着している遊離の水溶性薬物、薬物保持
物質などを、蒸留水で数回繰返し洗浄し、必要であれば
加温し減圧下でマイクロカプセル中の水分の乾燥および
マイクロカプセル剤中の溶媒の乾燥をより完全に行な
う。乾燥には真空乾燥機より好ましくは凍結乾燥機が用
いられる。真空度、温度は通常の凍乾条件が用いられ
る。品温としては凝集を避けるあるいは放出特性を維持
するためマイクロカプセル・Ｔg 濃度以下にすることが
好ましいが短時間（好ましくは１２０時間以下）であれ
ばＴg 温度以上であっても差し支えない。上記で得られ
たマイクロカプセルは、必要であれば軽く粉砕した後、
篩過して、大きすぎるマイクロカプセル部分を除去す
る。マイクロカプセルの粒子径は、徐放性の程度により
懸濁剤として使用する場合には、その分散性，通針性を
満足させる範囲であればよく、たとえば、平均径として
約０.５〜約４００μm の範囲が挙げられ、より好まし
くは約２〜約２００μm の範囲にあることが望まれる。

【００２４】たとえば、本発明のマイクロカプセルを注
射剤とするには、本発明のマイクロカプセルを分散剤
（例、Tween ８０，ＨＣＯ ６０（日光ケミカルズ社
製），カルボキシメチルセルロース，アルギン酸ナトリ
ウムなど），保存剤（例、メチルパラベン，プロピルパ
ラベン，ベンジルアルコール，クロロブタノールな
ど），等張化剤（例、塩化ナトリウム，グリセリン，ソ
ルビトール，ブドウ糖など）などと共に水性懸濁剤に、
あるいはオリーブ油，ゴマ油，ラッカセイ油，綿実油，
コーン油などの植物油，プロピレングリコールなどに分
散して油性懸濁剤とし、徐放性注射剤とする。さらに、
上記のマイクロカプセルの徐放性注射剤は、懸濁剤とし
て、上記の組成以外に、賦形剤（例、Ｄ−マンニトー
ル，Ｄ−ソルビトール，ラクトース，ブドウ糖など）を
加えて、再分散した後、凍結乾燥もしくは噴霧乾燥して
固型化し、用時に、注射用蒸留水あるいは適当な分散剤
を加えると、より安定した徐放性注射剤が得られる。

【００２５】また、無菌性を保持するため、各原料の溶
液は公知のろ過フィルターを用いて除菌しておくことが
好ましい。また、無菌化した溶液を凍結乾燥など無菌工
程を経て、粉末化し、用時に注射用水や無菌化された有
機溶媒に溶解して各工程で使用することも可能である。
あるいは公知の滅菌法を利用することも可能である。ま
た各原料はエンドトキシンのないものあるいは脱パイロ
ジェン工程を経たものを用いることが好ましい。本発明
の製剤（好ましくは徐放性製剤）は優れた抗脳血管性痴
呆作用を有しており、かつ毒性が低いので、哺乳動物
（ヒト，マウス，イヌ，ラット，ウシなど）に対して安
全な医薬組成物（例えば脳血管性痴呆治療用製剤など）
として使用できる。

【００２６】薬物の投与量は薬物の活性の度合いによっ
て異なるが、基本的な投与形態を１週間の徐放剤とした
場合、成人の脳血管性痴呆患者に対して１回の投与量が
約０.３５〜約３５mg（約０.００７〜約０.７mg／kg体
重）で十分な効果が期待できる。後の実験結果に示すよ
うに、このような持続的な剤形とすることで投与量は水
溶液の連日投与よりも低減できかつ、水溶液の連日投与
では得られなかった有効性が得られた。この場合１回の
投与量が約０.０５〜約５mg（０.００１〜０.１mg／kg
体重）でも十分な効果が期待できる。一般的にＴＲＨの
水溶液の連日投与では１回の投与量が１〜４mgを１日２
回投与されているので、１週間の投与量としては１４〜
５６mg(０.２８〜１.１２mg／kg体重)に相当する。該投
与量では副作用が多数出現し、かつ効果も必ずしも満足
できるものではなかったと報告されている（高人田直彦
他、“神経ペプチドの基礎と臨床”（祖父江逸郎編），
厚生省新薬開発研究出版、２６６頁〜２７２頁，１９８
６年；祖父江逸郎、神経内科治療 ３(４),３０３〜３０
９(１９８６)）が、本発明のように投与量が低減すれば
副作用も当然低減することが期待できる。投与経路は経
口、非経口のいずれでもよい。

【００２７】製剤中の薬物含量はとくに規定はなく、持
続的に長期間にわたり放出すれば含量の高いほど好まし
い。一般に徐放性製剤は投与初期（約０.５〜約２４時
間）に含有している薬物をその後の放出量に比較して、
より多く放出する（初期バーストと称される）。この初
期バーストが多いと副作用を引き起こすことが懸念さ
れ、投与約６時間までの放出量は約３mg以下とするのが
好ましい。このため製剤中の薬物含量は好ましくは約
０.１〜約５０％(w／w)、より好ましくは約１〜約２０
％(w／w)で用いられる。本発明においては乳酸および
(または)グリコール酸のホモポリマーまたはコポリマー
を用いてマイクロスフェアー（マイクロカプセルとも称
する）とし、水などに懸濁させて皮下投与することによ
り優れた活性を得ることができる。

【００２８】

【発明の実施の形態】以下に、本発明を実験例により具
体的に説明するが、これが本発明の範囲を制限するもの
でないことは言うまでもない。以下の実施例中、「室
温」とは通常約１０℃ないし約３５℃を意味する。

【実施例】

実験例 ラットを用いて実験的な脳梗塞を作成し、このラットの
学習障害に対するＴＲＨの持続性製剤の作用について検
討した。 （実験方法）９−１１週齢のウィスター（Wistar）系雄
性ラットを用い、エーテル麻酔下左側頸動脈分岐部を露
出させ翼突口蓋動脈および外頸動脈吻側を結紮した。左
側外頸動脈からポリエチレンチューブ（ＰＥ ５０）を
内頸動脈との分岐部まで挿入し、溶媒の２０％デキスト
ラン（dextran）５０μl に懸濁した直径３５μm のマ
イクロスフェアー２０００個を内頸動脈内に注入した。
偽手術群には同容量のデキストラン（dextran）を注入
した。ＴＲＨ持続性製剤はマイクロスフェアー注入直後
に皮下投与した。ＴＲＨ持続性製剤の投与量は一日平均
ＴＲＨとして０.０１mg／kg／dayまたは０.０４mg／kg
／dayとした。水迷路学習は脳梗塞処置１１日後から３
日間おこなった。水迷路は直径１２０cm、高さ４０cmの
円筒状の水槽であり、深さ２５cmまで約３０℃の水が満
たしてある。この水槽を４等分した１つの象限の中央に
はラットが逃避できるための１０×１０cmの透明プラッ
トフォームが水面下０.５cmのところに設置されてい
る。装置の周囲には実験者、テーブル、動物ゲージなど
ラットにとって視覚的な手がかりになるものがあり、こ
れらの配置は実験期間を通じて一定とした。各試行で
は、ラットを４つの出発点の１つから入水させ、ラット
がプラットフォームへ到達するまでの時間を測定した。
測定は最高１２０秒間行い、１２０秒以内にプラットフ
ォームへ到達しない場合には逃避時間を１２０秒として
実験者がラットをプラットフォームへ誘導した。プラッ
トフォームへ到達したラットは１０秒間放置した後ケー
ジへ戻した。このような試行を１日４試行、約１０分間
の試行間隔で３日間行った。 （結果）〔図１〕に実験的脳梗塞ラットの水迷路障害に
対するＴＲＨ持続性製剤の皮下投与の成績を示す。図は
２試行を１ブロックとして示したものであるが、偽手術
群は試行を重ねるにつれて逃避時間が短くなり明らかに
プラットフォームの位置を学習したことがわかる。一
方、脳梗塞ラットは、２ブロックから６ブロックまでい
ずれのブロックにおいても偽手術群と比較し有意に逃避
時間が長く、プラットフォームの空間的な位置が学習で
きなかった。それに対して、ＴＲＨの持続性製剤の低用
量投与は有意な作用を示さなかったが、高用量投与では
訓練の後期において有意な逃避時間の短縮を示した。こ
のことはＴＲＨ持続性製剤が、実験的脳梗塞ラットにお
ける学習障害に対して改善することを示唆する。以上の
ようにＴＲＨを持続的に放出する薬剤は、脳梗塞モデル
の脳血管性痴呆に対し、極めて少量で有効性を示すこと
が判明した。

【００２９】参考例１ 5-Oxo-L-prolyl-L-histidyl-L-prolineamide（ＴＲＨ）
の製造法 5-Oxo-L-prolyl-L-histidyl-L-prolineamide-L-tartrat
e monohydrate（TRH-T）７００ｇを純水７Ｌに溶解した
後、ＯＨ型としたアンバーライトＩＲＡ−３５に吸着さ
せた。次いで純水３０Ｌで溶出して約４０ＬのＴＲＨ水
溶液を得た。ＴＲＨ水溶液約４０Ｌに酢酸エチル１０Ｌ
を加えて撹拌後、静置分液し酢酸エチル層を除去した。
次いで水層を減圧下で９Ｌまで濃縮した。濃縮液に酢酸
エチル４Ｌを加えて撹拌後、酢酸エチル層を除去した。
得られた水層にアンバーライトＩＲ−１２０Ｂ（Ｈ型）
３５mLを添加して室温でしばらく撹拌した。樹脂をろ去
後、減圧下でろ過液を２．８Ｌまで濃縮した。続いて濃
縮された水溶液に活性炭を加え、室温でしばらく撹拌し
た後、活性炭をろ去した。ＴＲＨ水溶液はミリポアフィ
ルター（ＴＹＰＥ ＨＡ ０．４５μｍ）ろ過、続いて
ＵＦ膜ろ過を行った後、凍結乾燥してＴＲＨ３８０ｇを
得た。

【００３０】実施例１ 参考例１で得られたＴＲＨフリー体６７.５ｇを加温し
た水２０.２５ｇに溶解した液と滅菌フィルターで濾過
した乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ）〔乳酸／
グリコール酸７５／２５（Ｗ／Ｗ），重要平均分子量；
１１,５００〕６０７.５ｇを含む塩化メチレン溶液１６
１３ｇを約３０〜３８℃でＷ／Ｏ乳化物とした。このＷ
／Ｏ乳化物を１４〜１６℃に冷却後あらかじめ１４〜１
６℃に冷却した１％無菌Ｄ−マンニトールを含む０.１
％ＰＶＡ溶液（前もってろ過滅菌したもの）中で連続乳
化機によりＷ／Ｏ／Ｗエマルジョンを水中乾燥させるこ
とにより、マイクロカプセルを得た。得られたマイクロ
カプセルは篩か後、遠心分離により捕集された後に、Ｄ
−マンニトール８７.５ｇを水に溶解して加え凍結し
た。最終の棚温度は５０℃とした。このようにして得ら
れたマイクロカプセルは５８２.３ｇでラット（Wister
♂，１０Ｗ）の背部皮下に投与すると一カ月間の放出性
を示した。 実施例２ ＴＲＨフリー体２５０mgを水０.６２５mLに溶解した(Ａ
液)。乳酸・グリコール酸共重合体（乳酸／グリコール
酸＝７５／２５、重量平均分子量１４,０００、以下Ｐ
ＬＧＡ(７５／２５)−１４０００のように表示する）５
ｇを塩化メチレン６.２５mLに溶解する(Ｂ液)。 Ａ液を
Ｂ液に小型ホモジナイザー（ポリトロン、キネマチカ社
製、スイス）で攪拌しつつ加えＷ／Ｏエマルションを得
た。これを１８℃に冷却した後、１８℃の０.２５％ポ
リビニルアルコール (ＰＶＡ)水溶液１２５０mL中に注
入し、タービンホモミキサーを使用してＷ／Ｏ／Ｗエマ
ルションとした。この後、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルション液を
緩く攪拌しつつ塩化メチレンを揮散させ、内部のＷ／Ｏ
エマルションを固化させたのち、遠心分離機で固形分を
捕集し、ＴＲＨを封入したマイクロカプセルを得た。こ
れをさらに凍結乾燥し、脱溶媒および脱水がより完全に
行なわれたマイクロカプセルを得た（取込み率１００
％）。得られたマイクロカプセルのin vitroおよびラッ
ト皮下に投与した後のin vivoにおけるＴＲＨの放出性
(溶出液中または投与部位に残存するマイクロカプセル
中の薬物残存量を測定)を検討した。その結果を〔表
１〕に示す。マイクロカプセルからＴＲＨはin vitro,i
n vivoともに４週にわたる持続した放出を示した。

【表１】 in vitroおよびin vivo放出性(イニシャルに対する残存量％)、n＝３ ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ １日 １週 ２週 ３週 ４週 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ in vitro ９４.５ ８２.２ ５９.０ ４４.６ ７.８ in vivo ７９.８ ７２.８ ３１.３ １６.７ ３.２ ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

【００３１】実施例３ 実施例２と同様の方法でＰＬＧＡ(７５／２５)−１４０
００の替わりにＰＬＧＡ(７５／２５)−１００００を用
いて２週間にわたりＴＲＨを放出する持続性マイクロカ
プセル製剤を得た（取込み率１００％）。 実施例４ 実施例２と同様の方法でＴＲＨに替わりＣＧ−３５０９
を用いて４週間にわたりＣＧ−３５０９を放出する持続
性マイクロカプセル製剤を得た（取込み率９４．５
％）。

【００３２】実施例５ ＰＬＧＡ(７５／２５)−１００００の５０mgをジオキサ
ン１mlに溶解し、ＴＲＨフリー体の１０mgを溶解した５
０μLの水溶液を添加した。混懸液が得られた。これを
トレーに流し込み、窒素気流下で溶媒を揮散させた。得
られたフィルムを減圧乾燥して残存する溶媒および水を
完全に留去し、２週間にわたりＴＲＨを持続性に放出す
るフィルム状製剤が得られた（取込み率１００％）。 実施例６ 実施例５で得たフィルムを粉砕して１７０メッシュのふ
るいで篩過し、約２週間にわたりＴＲＨを放出する微粒
子製剤を得た。

【００３３】実施例７ ＴＲＨ酒石酸塩１.０mgをプロピレングリコール１７０m
gおよびオレイン酸３０mgの混液に溶解し、これを厚さ
２mm多孔質セラミックスに吸収させた。この片面をアル
ミフォイルで覆い２４時間持続的にＴＲＨを経皮的に体
内に吸収させる製剤を得た。

【００３４】

【発明の効果】本発明の徐放性製剤は、極微量のオリゴ
ペプチドによって、脳血管性痴呆症に著効を示す。

【００３５】

【図面の簡単な説明】

【図１】実験的脳梗塞ラットの水迷路障害に対するＴＲ
Ｈ持続性製剤の皮下投与の成績を示す。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】ＴＲＨ作用を有するオリゴペプチドを含有
   してなる脳血管性痴呆治療用製剤。
2. 【請求項２】徐放性製剤である請求項１記載の製剤。
3. 【請求項３】マイクロカプセルである請求項２記載の製
   剤。
4. 【請求項４】ＴＲＨ，乳酸・グリコール酸共重合体およ
   びＤ−マンニトールを含有してなる請求項３記載の製
   剤。