JPH09216897A - アルスリキチン、その製造方法およびその使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 新規化合物のアルスリキチンとその製造方法
およびその用途の解明。 【解決手段】 アルスリキチンは次の式Ｉ： 【化１】 を有する化合物で、アルスリニウム・フェオスペルマム
の培地から単離精製して得られ、細胞壁形成抑制作用を
有する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、アルスリキチン、その製造方法
およびその使用に関する。アルスリキチンは下記式の化
合物である。

【化２】

【０００２】アルスリキチンは現在まで報告されていな
いデプシペプチド構造を有しており、グルタミン酸、セ
リン、β−ケトトリプトファンおよび２,４−ジメチル
−３−ヒドロキシドデカン酸から形成される。上記した
分子式および構造の検索キーを用いてケミカルアブスト
ラクト文献を検索したところ、アルスリキチンは新規な
化合物であることが判明した。アルスリキチンの構造の
特徴を示す他の化合物はない。本発明はまたアルスリキ
チンの明らかな化学的等価物にも関する。アルスリキチ
ンの明らかな化学的等価物とはアルスリキチンを用いて
容易に生成できる化合物、または、アルスリキチンの酸
付加塩またはエステルのようなアルスリキチンに容易に
変換されるような化合物である。

【０００３】本出願の別の主題は、微生物Ｙ−９０，３
０２２、その突然変異株またはバリアントの醗酵による
アルスリキチンの製造方法である。アルスリキチンの製
造のためのカビ培養株Ｙ−９０，３０２２は、Mulund,
Bombay, Maharashtra, Indiaから採集された雑草の葉か
ら単離されており、アルスリニウム・フェオスペルマム
（コルダ）エリス（Arthrinium phaeospermum (Corda)
Ellis）と命名され、ドイッチェ・ザムルング・フォン
・ミクロオルガニスメンにブタペスト条約の下１９９０
年１０月２４日に寄託されている（受託番号ＤＳＭ Ｎ
ｏ.６２４５）。

【０００４】カビ培養株の単離は、土壌試料の代わりに
上記した葉を用いたカビ分離のための直接土壌平板法
（Nature, 166, p117, 1950）を用いて行なう。アルス
リキチンの製造は、上記したカビ培養株、その突然変異
株またはバリアントを好ましくは２４〜３０℃、pH６.
０〜８.０で本明細書に記載する種類の栄養培地中、好
気的条件下に醗酵させ、培養ブロスからアルスリキチン
を単離精製することを包含する。

【０００５】水性栄養培地は、グルコース、スクロー
ス、澱粉またはデキストリンのような炭素源を含有す
る。好ましい炭素源は澱粉である。栄養培地はまた、ト
リプトン、酵母エキス、ビーフエキス、コーンスティー
プリカー、麦芽エキス、大豆粉、ペプトンまたはアンモ
ニウム塩のような無機物のような窒素源を含有する。し
かしながら、好ましい窒素源はトリプトンまたはトリプ
トンと１つ以上の別の窒素源との組合わせである。栄養
培地はまた、塩化ナトリウム、リン酸一または二水素カ
リウム、または、炭酸カルシウムのような栄養無機塩を
含有する。栄養培地はまた、鉄、マンガン、銅、亜鉛、
コバルト、または他の重金属のような微量元素を含有す
る。

【０００６】好ましくはカビ培養株Ｙ−９０，３０２２
の培養は２６℃（±１℃）およびpH約６.５で行なう。
醗酵は好ましくは６６〜１１５時間実施し、これにより
本発明のアルスリキチンの最適な収量が得られることが
解っている。

【０００７】最大の活性を達成するためには浸とうフラ
スコ中液内条件下約９０時間醗酵を行なうのが特に好ま
しい。醗酵の進行、および、本発明のアルスリキチンの
形成は、Neurospora crassa SGF 18株を用いた、細胞壁
活性化合物を検出するスクリーニング法の変法により検
出できる〔J. Antibiotics, 39(11), 1620-1622, 198
6〕。

【０００８】得られる培養ブロス中、アルスリキチンは
培養液ならびに菌糸体塊中に存在し、標準的な分離方法
を用いて単離できる。即ち、酢酸エチル、クロロホルム
またはブタノールのような水非混和性溶媒を用いてブロ
ス濾液を抽出するか、または、Diaion HP-20（Mitsubis
hi Chemical Industries Limited, Japan）またはAmber
lite XAD (Rohm and Haas Industries, USA）のような
重合体樹脂を用いた疎水相互作用クロマトグラフィーに
より回収できる。好ましい方法は、Diaion HP-20上に吸
着させた後に、水、メタノール、アセトンまたはアセト
ニトリル、またはこれらの組合わせを用いて抗生物質を
脱着する方法である。濃縮して凍結乾燥することにより
粗製の抗生物質が得られる。アルスリキチンはまた菌糸
体からメタノール、アセトンまたはアセトニトリルのよ
うな水混和性溶媒で抽出した後に濃縮し、Diaion HP-20
またはAmberlite XADのような重合体樹脂上の疎水相互
作用クロマトグラフィーを行なうか、または、酢酸エチ
ル、クロロホルムまたはｎ−ブタノールのような水非混
和性溶媒で抽出することにより回収することもできる。
好ましい方法は、アセトン抽出、濃縮、水による希釈お
よびDiaion HP-20上の吸着、次いで、水、メタノール、
アセトニトリル、アセトンまたはこれらの組合わせによ
り溶離する方法である。

【０００９】アルスリキチンは、更に、順相クロマトグ
ラフィー（アルミナまたはシリカゲル；溶離剤は、酢酸
エチル、クロロホルム、メタノールまたはこれらの組合
わせ）、逆相クロマトグラフィー（ジメチルオクタデシ
ルシリルシリカゲル、別名ＲＰ−１８またはジメチルオ
クタシリルシリカゲル、別名ＲＰ−８（逆相シリカゲ
ル）；溶離剤は、水、緩衝液、例えばリン酸塩、酢酸
塩、クエン酸塩（pH２〜８）、および有機溶媒であるメ
タノール、アセトニトリル、またはアセトンまたはこれ
らの溶媒を組合わせたもの）、Sephadex LH-20（Pharma
cia Chemical Industries, Sweden）のような樹脂を用
い、メタノール、クロロホルムまたは酢酸エチルまたは
これらの組合わせを用いたゲル透過クロマトグラフィ
ー；または水とクロロホルムのような２種類以上の溶媒
を用いた２相溶離系を用いた向流クロマトグラフィーの
ような方法の何れかを用いて精製できる。これらの方法
は反復して使用してもよく、または異なる方法の組合わ
せも用いてよい。好ましい方法は逆相変性シリカゲル
（ＲＰ−１８）上のクロマトグラフィーである。

【００１０】アルスリキチンは細胞壁抑制化合物として
の活性を有する。カビ、特に植物病原性カビに対してin
vivoの活性を有することが解っている。Plasmopara vi
ticola, Phytophthora infestans, Botrytis cinerea,
Pyricularia oryzae, Erysiphe graminis, Septoria no
dorumおよびPseudocercosporella herpotrichoidesに対
して特に良好な活性を示すことが解っている。

【００１１】従って、本発明のもう１つの主題は、細胞
壁抑制化合物として、特に、カビに対する化合物として
のアルスリキチンの使用である。化合物は種々の領域で
使用でき、特に植物防疫の分野に適している。

【００１２】本出願の更に別の主題は、アルスリキチン
を含有する組成物およびそのような組成物を製造するた
めのアルスリキチンの使用である。式Ｉのアルスリキチ
ンの他に、本発明の組成物は適当な製剤補助剤を含有し
てよい。式Ｉの活性化合物の含有量は、一般的に、１〜
９５重量％である。

【００１３】生物学的および／または物理化学的パラメ
ーターに応じて種々の方法で製剤できる。適当な製剤の
例は、湿潤性粉末（ＷＰ）、乳化性濃縮物（ＥＣ）、油
性または水性基剤中の水性分散体（ＳＣ）、懸濁乳剤
（ＳＣ）、散粉剤（ＤＰ）、散布剤、水分散性顆粒の形
態の顆粒（ＷＧ）、ＵＬＶ製剤、マイクロカプセル、ワ
ックスまたは餌剤である。

【００１４】これらの個々の製剤の種類は、原則として
知られたものであり、例えばWinnacker-Kuechlerの“Ch
emische Technology（化学的製造技術)"，第７巻, C-Ha
userVerlag Muenchen, 第４版（1986）; van Fakenberg
の“Pesticides Formulations（農薬の処方)"，Marcel
Dekker N.Y., 第２版 (1972)；K. Martensの“SprayDry
ing Handbook", 第３版，(1979), G. Goodwin Ltd. Lon
donに記載されている。

【００１５】所望な製剤補助剤、例えば不活性物質、界
面活性剤、溶剤、および他添加物もまた知られたもので
あり、例えば、Watkins, “Handbook of Insecticide D
ustDiluents and Carriers (殺虫剤粉剤希釈剤および担
体のハンドブック)", 第２版，Darland Books, Caldwel
l N.J.：H. v. Olphen, “Introduction to Clay Collo
id Chemistry (粘土コロイド化学入門)", 第２版, J. W
iley & Sons, N.Y.；Marsdon, “Solvents Guid (溶媒
の手引き)"，第２版, Interscience, N.Y.,1950; McCut
cheon's “Detergents and Emulsifiers Annua (洗剤乳
化剤年鑑)，MC Publ, Corp., Ridgewood N.J.；Sisley
and Wood, “Encyclopedia of Surface Active Agents
（界面活性剤百科)", Chem. Publ. Co. Inc., N.Y., 19
64; Schoenfeldt，“Grenzflaehenaktive Athylenoxida
ddukte (Surface-Active Ethylene Oxide Adducts（界
面活性エチレンオキサイド付加物)", Wiss. Verlagsge
s., Stuttgart, 1976; Winnacker-Kuechler,“Chemisch
e Technologie (ChemicalTechnology（化学的製造技
術)"，第７巻，C. Hauser Verlag Muenchen, 第４版,81
1986. に記載されている。

【００１６】他の農薬活性物質、肥料および／または成
長調節剤との組合わせもまた、それらの製剤に応じて、
例えばレディーミックスまたはタンクミックスの形態で
製造できる。湿潤性粉末は水に均一に分散する製剤であ
り、活性化合物の他に、湿潤剤、例えば、ポリオキシエ
チル化アルキルフェノール、ポリオキシエチル化脂肪族
アルコール、アルキルスルホネートまたはアルキルフェ
ノールスルホネート、および分散剤、例えば、ナトリウ
ムリグニンスルホネート、ナトリウム２,２′−ジナフ
チルメタン−６,６′−ジスルホネート、ナトリウムジ
ブチルナフタレンスルホネートまたはナトリウムオレイ
ルメチルタウリド、並びに希釈剤または不活性物質も含
有してよい。乳化性濃縮物は、活性化合物を有機溶媒、
例えば、ブタノール、シクロヘキサノン、ジメチルホル
ムアミド、キシレンまたは高沸点芳香族または炭化水素
中に溶解し、１つ以上の乳化剤を添加することにより製
造する。使用できる乳化剤は例えば、カルシウムアルキ
ルアリールスルホネート、例えばドデシルベンゼンスル
ホン酸カルシウムまたは非イオン系乳化剤、例えば脂肪
酸ポリグリコールエステル、アルキルアリールポリグリ
コールエーテル、脂肪族アルコールポリグリコールエー
テル、プロピレンオキシド／エチレンオキシド、ソルビ
タン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂
肪酸エステルまたはポリオキシエチレンソルビトールエ
ステルである。

【００１７】散粉剤は活性化合物を微粉化固体物質、例
えば、タルク、天然粘土、例えばカオリン、ベントナイ
ト、ピロフィライトまたはケイソウ土と共に粉砕するこ
とにより得る。顆粒は活性化合物を吸着性の顆粒化不活
性物質に噴霧するか、または、活性化合物の濃縮物を
砂、カオリナイト、または顆粒化不活性物質の表面上
に、粘着剤、例えばポリビニルアルコール、ナトリウム
ポリアクリレートまたは鉱物油を用いながら塗布するこ
とにより製造できる。適当な活性化合物はまた所望によ
り肥料との混合物として、顆粒肥料の製造で慣用的に用
いられる方法で顆粒化できる。

【００１８】湿潤性粉末中の活性化合物の濃度は、例え
ば、約１０〜９０重量％であり、１００重量％とする残
りの部分は、慣用的な製剤成分よりなる。乳化性濃縮物
の場合は、活性化合物の濃度は約５〜８０重量％である
ことができる。微粉剤様製剤は通常は５〜２０重量％を
含有する。

【００１９】更に、上記活性化合物の製剤には、場合に
より、バインダー、湿潤剤、分散剤、乳化剤、浸透剤、
溶媒、充填剤または担体を、各々慣用的に配合してよ
い。使用する場合は、市販形態で存在する濃縮物を、場
合により慣用的な方法で、例えば湿潤性粉末、乳化性濃
縮物、分散体の場合、そして場合によってはミクロ顆粒
の場合も、水を用いて希釈する。散粉剤および顆粒化製
剤および噴霧用溶液の製剤は、慣用的には別の不活性物
質で更に希釈することなく使用する。

【００２０】必要な適用比率は、特に外的条件、例えば
温度や湿度により変動する。広範囲に変動するが、例え
ば活性成分０.００５〜１０.０kg／haまたはそれを上回
り、好ましくは０.０１〜５kg／haである。 実施例１：雑草葉からのＹ−９０，３０２２培養株の分
離 ａ．栄養分離培地の組成 ペプトン １０ｇ グルコース ４０ｇ 寒天 ２０ｇ クロラムフェニコール ０.０５ｇ pH ６.５ 培地調製の際には、クロラムフェニコールは、これを９
５％エタノール１０mlに溶解して熱培地に充分混合した
後に添加した。培地を１２１℃１０分間オートクレーブ
滅菌した。オートクレーブ滅菌前のpHは６.５に調節し
た。 ｂ．分離 雑草葉は、Mulund, Bombay, Maharashtra, Indiaから収
集し、水で充分洗浄し、切断して小片とし、ガラス製の
ペトリ皿（直径６″）に入れた。上記培地を４５℃に冷
却し、葉の小片の入った上記ペトリ皿に注ぎ込み（約８
０ml）、充分撹拌し、固化させた。次に室温（２６±１
℃）で２週間インキュベートした。平板は定期的に観察
し、Ｙ−９０，３０２２培養株を生育中の微生物群から
分離した〔Nature, 166, p 117 (1950)〕。

【００２１】実施例II：Ｙ−９０, ３０２２培養株の維
持 維持用培地の組成 培養株No.Ｙ−９０，３０２２は以下の通り組成を変更
したSabouraudのグルコース寒天培地上で維持した。 グルコース ４０ｇ ペプトン １０ｇ リンダン（Lindane） ０.１ｇ 寒天 １５ｇ 脱塩水 １リットル pH ６.５ 成分を充分加熱することにより溶解し、試験管に分注
し、次に、１２１℃で２０分間滅菌した。まず試験管を
冷却し、次に、傾斜させて固化させた。寒天の斜面培地
にＹ−９０，３０２２培養株の発育中のものを接種針で
接種し、次に、良好な生育が観察されるまで２６℃（±
１℃）中でインキュベートした。良好な生育を示した培
養株を冷蔵庫中保存した。

【００２２】実施例III：振盪フラスコ中のＹ−９０，
３０２２培養株の醗酵 種培養培地の組成 可溶性でんぷん １５ｇ 大豆粉 １５ｇ グルコース ５ｇ ＣａＣＯ₃ ２ｇ ＮａＣｌ ５ｇ 酵母エキス ２ｇ コーンスティープリカー １ｇ ＺｎＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ０.２２mg ＣａＣｌ₂ ０.５５mg ＭｎＣｌ₂・４Ｈ₂Ｏ ０.５mg ＦｅＳＯ・５Ｈ₂Ｏ ０.１６mg ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏ ０.１６mg ＣｏＣｌ₂・６Ｈ₂Ｏ ０.１６mg 脱塩水 １リットル オートクレーブ滅菌前のpH ６.５ 上記培地を５００ml容の広口三角フラスコに１００mlず
つ分注し、１２１℃で２０分間オートクレーブ滅菌し
た。フラスコを冷却し、次に、上記した良好な胞子形成
を示した実施例IIの培養物を数白金耳接種し、２００rp
mで４８時間２６℃（±１℃）で振盪培養した。これを
種培養物として用い、種培養用培地と同じ組成の生産培
地に植菌した。生産培地を１リットル容の三角フラスコ
に２００mlずつ分注し、１２１℃で２０分間オートクレ
ーブ滅菌した。フラスコを冷却し、上記した種培養物を
接種した（１％ v/v）。醗酵は２００rpmの回転振盪装
置上、２６℃（±１℃）の温度で９６時間行った。アル
スリキチンの生産は、Neurospora crassa GSF 18株を使
用し、これを、可溶性澱粉１.５％；酵母エキス０.４
％；リン酸一水素二カリウム０.１％；硫酸マグネシウ
ム七水塩０.０５％；Ｄ−ソルビトール７.５％（浸透圧
安定剤）；Ｌ−ソルボース２.５％（グルカン合成抑制
剤）および寒天１.５％を含有する培地中で生育させな
がら、細胞壁活性化合物を検出するスクリーニング法の
変法を用いてモニタリングした〔J. Antibiot., 39(1
1), 1620-22, 1986〕。

【００２３】実施例IV：醗酵槽におけるＹ−９０，３０
２２培養株の醗酵 段階Ｉ：種培養物の調製 振盪フラスコ中：種培養物を実施例IIIで記載した通り
１リットル容の三角フラスコ（培地１５０ml含有）中に
調製し、合わせ、５リットル容の滅菌アスピレーター瓶
に無菌的に移した。これを用いて１５０リットル容の醗
酵槽に植菌した。 段階II：醗酵 生産培地１００リットル（実施例III記載）を滅菌前pH
６.５に調節し、０.０４％Desmophen^R を消泡剤として
添加し、１５０リットル容の醗酵槽内に入れた。培地を
１.２kg／cm²の蒸気圧で３２分間１２１〜１２２℃で滅
菌した。滅菌後のpHは６.０であった。２６℃（±１
℃）に冷却した後、無菌的条件下１〜３％（v/v）の種
培養物を接種した。醗酵は６９時間、１００〜１２０rp
mで撹拌し、１００lpmで通気しながら行った。アルスリ
キチンの生産は実施例IIIに記載の通りモニタリングし
た。ブロスを採取し、遠心分離し、更に実施例Ｖに記載
の通り処理した。

【００２４】実施例Ｖ：アルスリキチンの単離精製 約１００リットルの培養ブロスを６９時間後に採取し、
遠心分離により菌糸体（６.５kg）を分離した。アルス
リキチン培養濾液並びに菌糸体内に存在することが解っ
た。培養濾液をDiaion HP-20の４リットルのカラムに通
し、カラムを脱塩水（４０リットル）で洗浄し、次にメ
タノール（１０リットル）で溶離した。画分を１リット
ルずつ集め、Neurospora crassa SGF 18株に対する活性
によりモニタリングした。アルスリキチンはメタノール
中に溶離し、活性画分を合わせ、３０〜４０℃で１０〜
１００mmの減圧下に濃縮し、凍結乾燥して粗製アルスリ
キチン１７ｇを得た。菌糸体を２×４０リットルのアセ
トンで抽出し、アセトンを３０〜４０℃で１０〜１００
mmの減圧下に除去した。残存する水性の物質を水で１０
リットルに希釈した。この溶液をDiaion HP-20の５００
mlのカラムに通した。カラムを脱塩水（５リットル）で
洗浄し、次に、メタノール（７リットル）で溶離した。
溶出液を１リットルの画分で集め、各画分中のアルスリ
キチンの存在をNeurospora crassa SGF 18株に対する活
性によりモニタリングした。アルスリキチンを含有する
活性メタノール溶出液を合わせ、３０〜４０℃で１０〜
１００mmの減圧下に濃縮し、約１００mlとした。濃縮物
を凍結乾燥し、オフホワイトの粉末として粗製アルスリ
キチン８ｇを得た。これを培養濾液から得た粗製の物質
と合わせ、７.４cm×５１.４cmのガラスカラム内に充填
したＲＰ−１８（逆相シリカゲル）上の中圧液体クロマ
トグラフィー（ＭＰＬＣ）に付した。カラムを０.０２
Ｍ水性リン酸ナトリウム緩衝液pH７.０（２.５リット
ル）で展開し、次に、５％ずつアセトニトリル濃度を上
昇させながらアセトニトリル−リン酸塩緩衝液混合物で
溶離した。即ち、溶離は１０％（２リットル）、１５％
（２リットル)、２５％（４.５リットル）、３０％
（１.５リットル）、次に５０％（１リットル）そして
アセトニトリル（１リットル）を用いて行った。流量は
１８ml／分に維持した。溶出液を５００mlの画分で集
め、アルスリキチンの存在は、２２０nmのＵＶ検出によ
り、そしてまた、各画分をNeurospora crassa SGF 18株
に対する活性によりモニタリングした。リン酸塩緩衝液
中２５〜３０％アセトニトリルの溶媒系中にアルスリキ
チンは溶出し、これを３０〜４０℃で１０〜１００mmの
減圧下に濃縮し、水溶液約３リットルを得た。この溶液
をDiaion HP-20（5００ml）のカラムに通すことにより
脱塩した。洗浄液がリン酸塩非含有となるまでカラムを
脱塩水で洗浄し、メタノール（３リットル）で溶離し
た。画分を３００mlずつ集めた。活性画分を合わせ、３
０〜４０℃で１０〜１００mmの減圧下に濃縮し、純粋な
アルスリキチン４.２ｇを得た。

【００２５】アルスリキチンの物理化学的特性は以下の
通りであった。 外観：無色固体 誘拐度：メタノールおよびジメチルスルホキシドに可
溶、石油エーテル、クロロホルム、酢酸エチルおよび水
に不溶 分子量：６４２（ＦＡＢ ＭＳ）（マトリックス：３−
ニトロベンジルアルコール） 分子式：Ｃ₃₃Ｈ₄₆Ｎ₄Ｏ₉（計算値：m/z ６４２.２２６
２；測定値：m/z ６４３.３３４１(Ｍ＋Ｈ)⁺（ＨＲ Ｆ
ＡＢ-ＭＳ；マトリックス：ＭｅＯＨ／ＮＢＡ；内部標
準：ポリエチレングリコール６００）；Ｃ₃₃Ｈ₄₇Ｎ₄Ｏ₉
の計算値：６４３.３３４５ 融点：２４５℃ 〔α〕_D：＋２４.１２°（ｃ ０.４７５、ＭｅＯＨ） ＨＰＬＣ保持時間：５.４分〔４×（３０＋１００）mm
１０μl ODS Hypersil ^(R)カラム；移動相：０.０２Ｍ
水性リン酸ナトリウム緩衝液pH７.０中３５％アセトニ
トリル；流量：１ml／分；ＵＶ検出：２２０nm〕 ＵＶ λ_max(ＭｅＯＨ)：２４７，２６６，３１０ nm；
酸およびアルカリでシフト無し ＩＲ(ＫＢｒ)：図１¹ Ｈ ＮＭＲ： 図２（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）¹³ Ｃ ＮＭＲ： 図３（７５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）

【００２６】上記物理化学的特性および別の２Ｄ−ＮＭ
Ｒ試験並びに分解試験に基づけば、アルスリキチンの構
造は、４つの異なる単位のグルタミン酸、セリン、β−
ケトトリプロファンおよび２,４−ジメチル−３−ヒド
ロキシドデカン酸により形成された式Ｉのデプシペプチ
ドであると推定された。この構造は文献に報告されてい
ない。

【図面の簡単な説明】

【図１】アルスリキチンのＫＢｒ中におけるＩＲスペク
トルを示す。

【図２】アルスリキチンの¹Ｈ ＮＭＲを示す。

【図３】アルスリキチンの¹³Ｃ ＮＭＲを示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 5/093 Ｃ０７Ｋ 5/093 Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｎ 1/14 Ａ Ｃ１２Ｐ 21/04 Ｃ１２Ｐ 21/04 //(Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｐ 21/04 Ｃ１２Ｒ 1:645） (72)発明者 エツラ・コテスワラ・サチヤ・ビジヤヤク マル インド国ボンベイ400082．ムルンド／ウエ スト．アマルナガル．ヘキストクオーター ズ ケイ−３ (72)発明者 スニル・クマル・デシユムクー インド国セイン400601．マハラーシユト ラ．ケダルロークプラーム エイチ−８ ／030 (72)発明者 スガタ・チヤタジー インド国ボーパール462016．マデイアプラ デーシユ．アレーラコロニー イー−３− 218 (72)発明者 ビマル・ナレツシユ・ガングリ インド国セイン400607．マハラーシユト ラ．トウルシダームゴードブンダーロード マジワダ702／12 (72)発明者 ヘルベルト・コグラー ドイツ連邦共和国65779ケルクハイム．ブ レスラウアーシユトラーセ39 (72)発明者 ハンス−ヴオルフラム・フエールハーバー ドイツ連邦共和国24306プレーン．クニー フスベルクリング４

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記式Ｉ： 【化１】 のアルスリキチン、並びにその明らかな化学的等価物。
2. 【請求項２】 アルスリニウム・フェオスペルマムＹ−
   ９０，３０２２（ＤＭＳ ６２４５）、その突然変異株
   および／またはバリアントを炭素源および窒素源、無機
   栄養塩、および、微量元素を含有する栄養培地中好気的
   条件下培養し、常法により培養ブロスから化合物を単離
   精製することを包含する請求項１記載のアルスリキチン
   の調製方法。
3. 【請求項３】 約２４〜３０℃の温度および約６〜８の
   pHで培養を実施する請求項２記載の方法。
4. 【請求項４】 約２６℃（±１℃）およびpH約６.５で
   培養を実施する請求項２または３記載の方法。
5. 【請求項５】 液内醗酵として醗酵を行なう請求項２〜
   ４の１つ以上に記載の方法。
6. 【請求項６】 細胞壁形成の抑制のためのアルスリキチ
   ンの使用。
7. 【請求項７】 細胞壁形成の抑制のための組成物の製造
   のためのアルスリキチンの使用。
8. 【請求項８】 アルスリキチン活性量を場合により適当
   な製剤補助剤と共に含有する組成物。
9. 【請求項９】 アルスリキチンを場合により適当な補助
   剤と共に投与に適する形態とする請求項８記載の組成物
   の製造方法。
10. 【請求項１０】 微生物アルスリニウム・フェオスペル
    マム（ＤＭＳ ６２４５）。