JPH09227388A - 大腸癌、食道癌及び乳癌より選ばれた癌に用いる抗悪性腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 副作用が少なく有効性の優れた抗悪性腫瘍剤
の提供。 【解決手段】 Ｌ−乳酸を窒素ガス雰囲気中で段階的減
圧及び昇温によって脱水縮合し、得られた反応液のエタ
ノール及びメタノール可溶成分を減圧乾燥した後、逆相
ＯＤＳカラムクロマトグラフィーを行い、ｐＨ２．０の
２５〜５０％アセトニトリル水溶液で溶離後、ｐＨ２．
０の１００％アセトニトリルで溶離した画分である縮合
度９〜１９の環状及び直鎖状の混合Ｌ−乳酸オリゴマー
を主成分とし、大腸癌、食道癌及び乳癌より選ばれた癌
に用いる抗悪性腫瘍剤からなる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、人を含む動物の大腸
癌、食道癌及び乳癌より選ばれた癌に用いる抗悪性腫瘍
剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】従来、外科手術、化学療法及び放射線療
法が悪性腫瘍の三大療法となっているが、未だ充分な成
果が上がっていないのが現状である。殊に、長期間繁用
される化学療法剤にあっては総じて副作用が極めて強い
のみならず、抗腫瘍効果が不定で、大腸癌、食道癌等の
固型癌に有効な薬物はほとんど存在しない。

【０００３】このため、抗腫瘍効果を高めることを期待
して様々な多剤併用療法が試みられているが、副作用の
重複や増強、新たな障害や薬害等をもたらし、著しい生
活の質（ＱＯＬ）の低下、治療による体力の消耗や寿命
の短縮等も少なからず発生している。

【０００４】悪性腫瘍に対する新しい療法として種々の
免疫療法が提案されているが、研究段階であり、副作用
の少ない有効な免疫療法剤の早期実現が待たれている。

【０００５】投与経路についても血管や腫瘍局所等への
注射が主体であり、有用性の高い経口用の抗悪性腫瘍剤
は皆無に等しいのが現状である。又、Ｌ−乳酸を常圧又
は減圧下で窒素ガス等の不活性ガスの雰囲気中で加熱
し、得られた反応液をメタノール又はエタノールに熱時
溶解後、濾過し、濾液を減圧乾燥後アセトニトリルに溶
かすか又は、直接アセトニトリルに溶かした溶液を予め
ｐＨ２〜３の２５％アセトニトリル水溶液で平衡化して
おいた逆相系ＯＤＳ又はＤＳカラムでクロマトグラフィ
ーを行い、ｐＨ２〜３の３０〜５０％アセトニトリル水
溶液で溶離後、ｐＨ２〜３の７０％以上のアセトニトリ
ル濃度の水溶液で溶離した画分であって縮合度が５〜２
３のＬ−乳酸直鎖状縮合物と縮合度が２〜１５のＬ−乳
酸環状縮合物との混合物よりなる人を含む動物の悪性腫
瘍細胞増殖抑制剤が特開平５−３１０５８１号として提
案されている。このものは人子宮頚部癌株細胞、人鼻咽
頭癌株細胞、人口腔底癌株細胞、マウス肺癌細胞、ウサ
ギ肝癌由来株細胞、吉田肉腫、人の胃癌、甲状腺癌、肺
癌及び子宮癌に対するものであった。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明者は、Ｌ−乳酸
オリゴマーの縮合度の違いによる抗腫瘍効果の差を検討
した結果、縮合度９〜１９のＬ−乳酸オリゴマーが大腸
癌、食道癌及び乳癌に対して特異的に強い抗腫瘍効果を
示し、悪性腫瘍に随伴する疼痛等の緩和を含む顕著な体
調改善作用を有することを発見した。

【０００７】本発明は、このように新たに特徴的な効果
の見出された縮合度９〜１９のＬ−乳酸オリゴマーを、
人を含む動物の抗悪性腫瘍剤として提供することを目的
とするものである。

【０００８】これは、悪性腫瘍の治療や発生予防等の場
面で状況に応じて選択できる非経口及び経口経路による
適用、ならびに最大効果を上げるための既存の抗腫瘍療
法との併用療法が含まれ、従来の治療方法の拡大と治癒
率の向上に資するものである。

【０００９】

【課題を解決するための手段】上記の目的を達成するた
め、本発明の抗悪性腫瘍剤は、Ｌ−乳酸を窒素ガス雰囲
気中で段階的減圧及び昇温によって脱水縮合し、得られ
た反応液のエタノール及びメタノール可溶成分を減圧乾
燥した後、逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフィーを行
い、ｐＨ２．０の２５〜５０％アセトニトリル水溶液で
溶離後、ｐＨ２．０の１００％アセトニトリルで溶離し
た画分である縮合度９〜１９の環状及び直鎖状の混合Ｌ
−乳酸オリゴマーを主成分とし、大腸癌、食道癌及び乳
癌より選ばれた癌に用いる抗悪性腫瘍剤を利用するもの
である。

【００１０】Ｌ−乳酸オリゴマーは環状及び直鎖状の縮
合体で構成されるが、両者の間には一種の可逆平衡関係
が成立していること、Ｌ−乳酸オリゴマーの生物活性の
多様性や縮合度の異なる各画分の複合によって抗腫瘍効
果が発現していること等の事実に照らしてみても、環状
及び直鎖状の縮合体を相互分離して利用することの意義
は乏しい。

【００１１】実際の使用に供するために、縮合度９〜１
９のＬ−乳酸オリゴマーを分離精製してアルカリ中和し
た後、減圧乾燥したものを原粉末とし、これを所定の濃
度となるように適切な溶媒に無菌的に溶解又は懸濁して
バイアル瓶等に充填し、注射剤とする。

【００１２】経口剤は、前記同様に処理した原粉末を所
定の濃度となるように適切な分散剤、基剤、賦型剤等と
混合し、粉剤、カプセル剤、液剤等の形態に製剤化す
る。

【００１３】

【実施例】

製造例１ マントルヒーターに収めたセパラブルフラスコにＬ−乳
酸５００ｍｌを入れ、窒素ガス３００ｍｌ／分の流入及
び撹拌を行い、溜出水は保温した下降型接続管を経て還
流冷却器付フラスコに導ながら、１４５℃で３時間加熱
し、更に１５０ｍｍＨｇに減圧して３時間加熱した後、
３ｍｍＨｇの１５５℃で３時間、最後に３ｍｍＨｇの１
８５℃で１．５時間加熱し、反応生成物であるＬ−乳酸
オリゴマーを得た。

【００１４】得られたＬ−乳酸オリゴマーは１００℃に
保ち、エタノール１００ｍｌに続いてメタノール４００
ｍｌをそれぞれ滴下した後、放冷し、これを更にメタノ
ール５００ｍｌ中に加え、よく撹拌して静置した後、濾
過して精製し、その濾液を減圧乾燥してアセトニトリル
に溶解し、全量を２００ｍｌ（原液）とした。

【００１５】前記の原液を、予め平衡化した逆相ＯＤＳ
カラム（ＴＳＫ ｇｅｌ ＯＤＳ−８０ＴＭ）にかけ、
０．０１Ｍ塩酸を含む１５％、４５％及び１００％アセ
トニトリル（ｐＨ２．０）でステップワイズに溶離し、
１００％溶出画分であるＬ−乳酸オリゴマーＩ（縮合度
３〜８）を得た。

【００１６】製造例２ 前記同様に、０．０１Ｍ塩酸を含む２５％、５０％及び
１００％アセトニトリル（ｐＨ２．０）でステップワイ
ズに溶離し、５０％溶出画分であるＬ−乳酸オリゴマー
ＩＩ（縮合度５〜１５）及び１００％溶出画分であるＬ
−乳酸オリゴマーＩＩＩ（縮合度９〜１９）を得た。Ｌ
−乳酸オリゴマーＩＩＩの質量分析結果を図１に示す。

【００１７】この図の規則的なフラグメントイオンピー
クから明らかなように、Ｌ−乳酸オリゴマーＩＩＩは環
状低縮合物と直鎖状低縮合物とが混在した状態になって
いる。環状低縮合物は下記の化学構造式であると推測さ
れる。

【００１８】

【化１】

【００１９】製造例３ 更に前記同様に、３０％、３５％、４０％、４２．５
％、４５％、５０％、６０％及び１００％アセトニトリ
ル（ｐＨ２．０）でステップワイズに溶離し、３０％か
ら４２．５％までのアセトニトリルで溶出した全画分
（縮合度５〜１２、Ｌ−乳酸オリゴマーＡ）、４５及び
５０％アセトニトリルで溶出した画分（縮合度９〜１
４、Ｌ−乳酸オリゴマーＢ）、６０％アセトニトリル溶
出画分（縮合度１３〜１６、Ｌ−乳酸オリゴマーＣ）及
び１００％アセトニトリル溶出画分（縮合度１５〜１
９、Ｌ−乳酸オリゴマーＤ）を得た。

【００２０】製剤例１ 製造例２で得たＬ−乳酸オリゴマーＩＩＩ（縮合度９〜
１９）を１Ｎ水酸化ナトリウムで中和処理し、減圧乾燥
したものを１００ｍｇ／ｍｌ濃度になるように、７０〜
８０℃の局方プロピレングリコールに溶解し、０．４５
μｍフィルターで濾過滅菌した後、バイアル瓶に１５ｍ
ｌずつ無菌的に分注、充填し、注射剤を調製した。

【００２１】製剤例２ 上記同様に、製造例２で得たＬ−乳酸オリゴマーＩＩＩ
（縮合度９〜１９）を１Ｎ水酸化ナトリウムで中和処理
し、減圧乾燥したものをソルビトール１ｇ中に２５０ｍ
ｇ含まれるように加えて混合し、経口用粉剤を調製し
た。

【００２２】抗癌効果比較実験 製造例１〜３で作製した縮合度の異なるＬ−乳酸オリゴ
マー７種を用いて、ウサギ肝臓に移植したＶＸ２癌に対
する抗癌効果を比較検討した。Ｌ−乳酸オリゴマーは５
％糖液に溶解し、６ｍｇ／匹（２．７ｍｇ／ｋｇ相当）
用量でウサギ固有肝動脈に１回注射した後、１週間後に
ＶＸ２癌を検査した。実験結果を表１に示す。

【表１】

【００２３】前記の結果から明らかなように、Ｌ−乳酸
オリゴマーＩＩＩ（縮合度９〜１９）の注射でＶＸ２癌
の完全壊死が認められ、顕著な抗癌効果を示した。しか
し、縮合度５〜２０の付近で細分画したもの、すなわち
Ｌ−乳酸オリゴマーのＡ（縮合度５〜１２）、Ｂ（縮合
度９〜１４）、Ｃ（縮合度１３〜１６）及びＤ（縮合度
１５〜１９）では抗癌効果がほとんど認められないこ
と、更に、これらのＬ−乳酸オリゴマーのＡ、Ｂ、Ｃお
よびＤを混合すると、Ｌ−乳酸オリゴマーＩＩＩと同等
の効果が認められることが判明し、抗癌効果の発現には
縮合度９〜１９の混合分画が必須であることが確認され
た。

【００２４】毒性実験１ Ｌ−乳酸オリゴマーＩＩＩの安全性を確認するために，
雄性ＩＣＲ系マウスに１５、３０及び６０ｍｇ／ｋｇを
２週間毎日静脈内注射した。いずれの投与群も投与期間
中の死亡はなく、運動協調性、排便、排尿を含む行動及
び身体状態の変化は認められず、体重も順調に推移し、
投与期間中の体重増加量は溶媒対照群の１４．６ｇに対
して低、中及び高用量群では１４．４〜１４．９ｇの範
囲であった。

【００２５】毒性実験２ 人での臨床適用（点滴静注）を想定して、犬２匹にＬ−
乳酸オリゴマーＩＩＩの４０ｍｇ／ｋｇを１５日間毎日
点滴静注（約６０滴／分）し、その安全性を評価した。
投与期間中の異常症状及び死亡はなく、体温、心拍数等
の身体状態も正常であった。血液学的検査値も正常範囲
内で、貧血、炎症又は肝機能及び腎機能障害を示唆する
所見は認められず、病理学的にも諸臓器及び組織に病変
のないことが確認された。主要項目の測定結果を表２に
示す。

【表２】

【００２６】毒性実験３ 経口投与による安全性を確認するために、雌雄のＩＣＲ
系マウスにＬ−乳酸オリゴマーＩＩＩの最大投与可能量
である２０００ｍｇ／ｋｇを単回経口投与し、２週間観
察した。投与後の異常症状及び死亡の発生はなく、経口
投与による致死量は２０００ｍｇ／ｋｇを超えるものと
推定された。投与マウスの体重は溶媒対照群と同様に推
移し、剖検においても肉眼的病変は認められなかった。

【００２７】免疫賦活及び癌転移抑制実験 Ｂ１６メラノーマ移植マウスにＬ−乳酸オリゴマーＩＩ
Ｉを７日間経口（５００ｍｇ／ｋｇ）又は静脈内注射
（１０ｍｇ／ｋｇ）し、投与開始時と終了時にＮＫ活性
（ナチュラルキラー細胞の癌細胞傷害活性）を測定し
た。その結果、対照の担癌マウスではＮＫ活性が投与開
始時の３０％に低下するのに対して、Ｌ−乳酸オリゴマ
ーＩＩＩの経口及び静脈内投与群ではＮＫ活性の低下が
認められず、癌増殖による免疫能の低下を抑えることが
確認された。これに伴って肺に転移した癌コロニー数も
対照群に比較して減少した。

【００２８】鎮痛実験 酢酸を腹腔内注射したマウスにＬ−乳酸オリゴマーＩＩ
Ｉを２回経口投与（５００ｍｇ／ｋｇ×２）又は１回皮
下注射（１０ｍｇ／ｋｇ）し、酢酸によって誘発される
疼痛（苦悶）反応数を測定した。Ｌ−乳酸オリゴマーＩ
ＩＩの投与で疼痛（苦悶）反応数が減少し、特に皮下注
射群では対照群の５２％にまで減少し、著明な鎮痛効果
が認められた。

【００２９】発癌予防実験 遺伝子組換え技術により癌抑制遺伝子（ｐ５３）を欠損
したマウスにＬ−乳酸オリゴマーＩＩＩの５０ｍｇ／ｋ
ｇを週３回、２０週間にわたって経口投与し、癌発生率
及び死亡率を評価した。対照群では８週目から癌死が発
生し始め、その後徐々に増加し、２０週後には１０例中
１例（１０％）のみの生存であったのに対して、Ｌ−乳
酸オリゴマーＩＩＩ投与群では２０週後の生存率が５０
％であり、癌発生予防及び延命効果のあることが示唆さ
れた。

【００３０】点滴静注による臨床治療 手術不能の末期癌、術後の残遺癌や転移癌、再発癌の見
られる約５０名の重度の患者を対象に、患者、家族等の
同意及び要請に基づいて、製剤例１で調製したＬ−乳酸
オリゴマー注射剤の点滴静注による抗癌療法を実施し
た。標準療法は、Ｌ−乳酸オリゴマー２０００ｍｇ／人
／日の２０日間点滴静注を１クールとし、点滴静注では
当該注射剤２０ｍｌ／日を輸液（ブドウ糖液、電解質
液、キシリトール）５００ｍｌに混合溶解して適用し
た。

【００３１】Ｌ−乳酸オリゴマー注射剤で治療した各種
の原発癌のうち大腸癌、食道癌及び乳癌に対して、最も
顕著な増殖抑制効果が認められ、これらの癌の再発及び
脳、骨髄等への転移癌も抑制されることが判明した。特
に、放射線療法あるいは外科的摘除術による治療直後の
癌患者（約１４名）に見られる残遺癌に対しては、抗癌
効果が著明で、患者の７０〜８０％で改善が認められ、
このうち８名は臨床的にほぼ治癒したものと判断され
た。更に、本注射剤では明らかな抗腫瘍効果のみなら
ず、栄養及び貧血状態の改善、倦怠感等の自覚症状から
の回復が著しく、放射線療法や抗癌剤投与の副作用であ
る白血球数の減少及び肝機能障害が早期に回復したこと
は特記すべき変化であり、既存の治療法との併用により
高い抗癌効果を期待できることを示唆している。

【００３２】Ｌ−乳酸オリゴマーの副作用は実質的に認
められず、標準投与量の２倍である２０００ｍｇ×２／
日で点滴静注した場合ならびに毎日連続して長期間（約
３カ月間）点滴静注した場合にも特段の異常は発生して
なく、安全性は極めて高いと言える。健康人では発生し
ない癌患者特有の変化として、特に初回の点滴静注時に
一過性に発熱することもあるが、軽度であり、患者の不
安を除く目的でサクシゾン（コハク酸デヒドロコーチゾ
ン）の１００〜２００ｍｇ／回を併用したのみであっ
た。

【００３３】症例１：大腸癌 膵臓への浸潤及び癒着を伴う横行結腸癌があり、外科的
切除術及びバイパス手術を施したものの、完全切除がで
きずに残遺癌の見られた６０歳の男性に、約２年間にわ
たり上記の標準療法による本注射剤の点滴静注を行っ
た。その結果、Ｘ線や超音波エコーで癌の増殖抑制が確
認されるとともに、癌の転移及び再発の明らかな抑制効
果が認められた。更に、本注射剤による特徴的変化とし
て、治療開始後約３日〜１０日で疼痛、倦怠感、易疲労
感、悪心等の身体症状の軽減、食欲回復及び体重の増加
による栄養状態の改善が認められ、これに伴って元気が
復調し、心理的不安や精神荒廃状態からも解放され、生
活活動性の向上が見られた。

【００３４】症例２：大腸癌の肺転移癌 大腸癌の外科的切除後、肺への広範性の転移癌が発見さ
れ、無気肺状で余命３〜４カ月と判断された６０歳の男
性に、同様の点滴静注による治療を行った。肺の陰影は
残存するものの、約３年間の治療期間を通じて肺機能は
極めて良好で、癌病巣の拡大所見及び他臓器への転移は
なく、著しい延命効果が認められた。本例でも食欲及び
栄養状態は良好で、疼痛等の身体症状を伴うこともな
く、生活活動性はほぼ正常な状態であった。

【００３５】症例３：食道癌 食道癌のために胃全摘を含む外科的切除を受けた５０歳
の男性で、その１７カ月後に吐血が起こり、食欲不振及
び燕下困難を訴え、内視鏡検査により外科術の吻合部に
再発性食道癌（約６ｃｍ）及び狭窄が発見された当該患
者に、同様の点滴静注を施した。治療開始後１０日で摂
食可能となり、内視鏡的にも癌の縮小化及び消化管の疎
通が確認され、その後の経過観察でも良好な状態を維持
している。

【００３６】症例４：乳癌 乳癌の手術後３年目に寛骨及び肋骨の疼痛を訴え、骨シ
ンチグラムで転移癌が発見された４２歳の女性に本注射
剤を同様に点滴静注して治療した。本患者は癌発見後４
カ月間にわたって抗癌剤の治療を受けており、治療開始
時の検査では白血球数の減少（２，９００）、貧血所見
（赤血球数３８４万、ヘモグロビン値１０．７ｇ／ｄ
ｌ）及び肝障害（ＧＰＴ値１０２Ｕ）が認められた。点
滴静注開始後４日目に白血球数の回復（８，１００）、
貧血及び肝機能の改善（ＧＰＴ値２１Ｕ）があり、７日
目には倦怠感、胸痛及び骨痛等の自覚症状が消失した。
１クールの点滴静注を終了し、２年経過後の時点でも自
覚症状なく推移しており、転移癌増殖の抑制又は停止が
確認されている。婦人科系の癌に対しては本注射剤の効
果が比較的高い傾向を示し、長期生存又は著効例が比較
的多い。一般に、乳癌患者では点滴静注時に癌局所の違
和感を訴えたことから、癌に対する直接的な作用が窺わ
れ、肝動注等の癌局所療法が本注射剤の有用な適用経路
の一つであることも裏付けられた。

【００３７】乳酸等の短鎖脂肪酸の代謝及び生理作用か
ら予想されたことであるが、糖及び脂質代謝異常に対す
る改善効果も示唆され、本臨床例に合併した糖尿病、高
脂血症等の所見、すなわち上昇した血清及び尿中の糖、
血清コレステロールやトリグリセライド値が正常に回復
した。これらは本注射剤の肝機能改善効果等と併せ、悪
性腫瘍の改善に有利に作用しているものと考えられた。
又、点滴静注と製剤例２で調製した経口用粉剤との併用
を試みた結果、本注射剤による効果の維持と増強に有用
であることが判明した。

【００３８】経口投与による臨床治療例 乳癌の摘出術で肝臓転移が発見され、手術不能により余
命３カ月と宣告された女性患者に、製剤例２で調製した
経口用粉剤を処方し、約８ｇ／日（Ｌ−乳酸オリゴマー
として約２４００ｍｇ／日）を継続摂取中である。つご
う７カ月間摂取後の検査では肝機能の改善及び職務を全
うできる体調の好転があり、癌の明らかな増殖抑制及び
延命効果が確認されている。

【００３９】

【発明の効果】本発明は、縮合度９〜１９のＬ−乳酸オ
リゴマーが大腸癌、食道癌及び乳癌に対して特に優れた
増殖抑制を示すとともに、これらの癌の転移及び再発を
抑制し、顕著な体調改善作用を有することを明らかにし
たものであり、輸液等に添加した当該物質の点滴静注
が、これらの悪性腫瘍に対する有効な治療法になり得る
ことを示している。当該Ｌ−乳酸オリゴマーは、生体成
分に由来するＬ−乳酸の低縮合体であることから、生体
適合性は極めて高く、最も過酷な血管内注射でも副作用
は皆無に等しいこと、ならびに皮下や経口経路でも抗腫
瘍効果の認められることが大きな特徴である。このよう
な特性から、病期の初期から末期までの各段階及び処置
困難な患者の状態でも適用可能であり、既存の抗腫瘍療
法と適宜組み合わせて最大の治療効果を期待できると同
時に、白血球の減少や肝機能障害等の既存の抗癌療法に
よる副作用を軽減又は除去することを可能にしている。
更に、長期間の継続的摂取を安全かつ容易ならしめるも
のであり、実験的に示唆された発癌予防等にも供し得
る。Ｌ−乳酸オリゴマーの作用機作として、腫瘍細胞に
対する親和性と増殖機構への干渉、特異な腫瘍血管の閉
塞等が推定されているが、新たに免疫賦活作用ならびに
糖脂質代謝を中心とした肝機能及び消化機能の改善作用
が抗腫瘍効果に係わっていることが実証され、このこと
は強力な細胞傷害作用を示す既存の抗悪性腫瘍剤とは異
なり、Ｌ−乳酸オリゴマーが重篤な副作用を伴わずに比
較的広い抗癌スペクトルを示す一因になっているものと
推察される。更に、慢性的疾患に伴う悪液質の緩和療法
や抗エイズ療法にも有用であることを示しており、難治
性疾患の治療においても大きな意義を有している。臨床
経験では、食欲不振及び体重減少を含む栄養不良や貧
血、疼痛、倦怠感等の身体症状ならびに精神的、肉体的
介助を必要とする生活活動性の低下に対して優れた改善
効果のあることが判明した。特に、悪性腫瘍において免
疫能及び体力の低下を起こし、死亡の決定的要因となる
食欲の不振又は廃絶を著しく改善する作用があり、本剤
の重要な効果として挙げられる。このように、Ｌ−乳酸
オリゴマーは単に抗癌効果のみならず、悪性腫瘍の随伴
症状を改善する作用を併有し、患者の生活の質（ＱＯ
Ｌ）の向上を図るための有効な手段になることを示して
おり、総合的にみて既存の抗悪性腫瘍剤を凌駕するもの
と言える。

【図面の簡単な説明】

【図１】

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 Ｌ−乳酸を窒素ガス雰囲気中で段階的減
   圧及び昇温によって脱水縮合し、得られた反応液のエタ
   ノール及びメタノール可溶成分を減圧乾燥した後、逆相
   ＯＤＳカラムクロマトグラフィーを行い、ｐＨ２．０の
   ２５〜５０％アセトニトリル水溶液で溶離後、ｐＨ２．
   ０の１００％アセトニトリルで溶離した画分である縮合
   度９〜１９の環状及び直鎖状の混合Ｌ−乳酸オリゴマー
   を主成分とし、大腸癌、食道癌及び乳癌より選ばれた癌
   に用いる抗悪性腫瘍剤。