JPH09234060A - 新規微生物 - Google Patents
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- JPH09234060A JPH09234060A JP4249696A JP4249696A JPH09234060A JP H09234060 A JPH09234060 A JP H09234060A JP 4249696 A JP4249696 A JP 4249696A JP 4249696 A JP4249696 A JP 4249696A JP H09234060 A JPH09234060 A JP H09234060A
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- sludge
- novel microorganism
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- bacillus
- bacillus stearothermophilus
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- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
- Treatment Of Sludge (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 有機性／生物性汚泥の固形分を可溶化する性
能を有するバチルス・ステアロサーモフィラス(Bacillu
s stearothermophilus) に属する新規微生物を提供す
る。 【解決手段】 余剰汚泥やデンプン排水などの有機性／
生物性汚泥の固形分を特異的に可溶化する性能を備えた
バチルス・ステアロサーモフィラス(Bacillus stearoth
ermophilus) に属する新規微生物、バチルス・ステアロ
サーモフィラス SPT2-1 (Bacillus stearothermophilus
SPT2-1)。
能を有するバチルス・ステアロサーモフィラス(Bacillu
s stearothermophilus) に属する新規微生物を提供す
る。 【解決手段】 余剰汚泥やデンプン排水などの有機性／
生物性汚泥の固形分を特異的に可溶化する性能を備えた
バチルス・ステアロサーモフィラス(Bacillus stearoth
ermophilus) に属する新規微生物、バチルス・ステアロ
サーモフィラス SPT2-1 (Bacillus stearothermophilus
SPT2-1)。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、有機性／生物性汚泥の
固形分を効率的に可溶化する性能を備えた新規微生物に
関する。
固形分を効率的に可溶化する性能を備えた新規微生物に
関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】従来
より、下水処理場ならびにし尿処理場などの事業所から
排出される生物性汚泥、あるいは食品工場などから排出
される有機性高濃度汚泥の処理方法として、細菌などを
汚泥に作用させて生物学的に汚泥を分解処理する、次の
ような有機性汚泥の可溶化のための方法ならびに該方法
への応用が期待される菌株がこれまでに報告されてい
る。
より、下水処理場ならびにし尿処理場などの事業所から
排出される生物性汚泥、あるいは食品工場などから排出
される有機性高濃度汚泥の処理方法として、細菌などを
汚泥に作用させて生物学的に汚泥を分解処理する、次の
ような有機性汚泥の可溶化のための方法ならびに該方法
への応用が期待される菌株がこれまでに報告されてい
る。
【０００３】例えば、酵母エキス残渣を特異的に分解す
る酵素を生産する菌株、オエルスコフィア属に属する細
菌(Oerskovia sp.24 (FERM P-13692):特願平５−211081
号参照) を用いた酵母エキス残渣の処理方法（特開平７
−184640号参照) ；下水汚泥コンポストから好気的にか
つ高温条件下で単離した、65℃の至適生育温度を有す
る、バチルス・ステアロサーモフィラス(Bacillus stea
rothermophilus) に属する９つの菌株と、サーマス(The
rmus sp.) 属に属する２つの菌株からなる菌体混合物を
用いた汚泥の消化 (Shigeru KUME, et al., "DIGESTION
OF MUNICIPAL SEWAGE SLUDGE BY A MIXTURE OF THERMO
PHILIC BACILLI AND THEIR CULTURE EXTRACT", J. Gen.
Appl. Microbiol., 36, 189-194 (1990))；および滅菌
済余剰汚泥を嫌気的条件下で特異的に可溶化する、Clos
tridium bifermentansに属する嫌気性の菌株（「バイオ
テクノロジーを活用した新排水処理システムの開発報告
書（下水道編）」、pp.73-77、（財）土木研究センター
（平成３年２月))、などがある。
る酵素を生産する菌株、オエルスコフィア属に属する細
菌(Oerskovia sp.24 (FERM P-13692):特願平５−211081
号参照) を用いた酵母エキス残渣の処理方法（特開平７
−184640号参照) ；下水汚泥コンポストから好気的にか
つ高温条件下で単離した、65℃の至適生育温度を有す
る、バチルス・ステアロサーモフィラス(Bacillus stea
rothermophilus) に属する９つの菌株と、サーマス(The
rmus sp.) 属に属する２つの菌株からなる菌体混合物を
用いた汚泥の消化 (Shigeru KUME, et al., "DIGESTION
OF MUNICIPAL SEWAGE SLUDGE BY A MIXTURE OF THERMO
PHILIC BACILLI AND THEIR CULTURE EXTRACT", J. Gen.
Appl. Microbiol., 36, 189-194 (1990))；および滅菌
済余剰汚泥を嫌気的条件下で特異的に可溶化する、Clos
tridium bifermentansに属する嫌気性の菌株（「バイオ
テクノロジーを活用した新排水処理システムの開発報告
書（下水道編）」、pp.73-77、（財）土木研究センター
（平成３年２月))、などがある。
【０００４】しかしながら、上記した特開平７−184640
号の方法によれば、分解処理できる対象が実質的に酵母
エキス残渣に限定されてしまい、また、KUMEらの方法な
らびに土木研究センターによる菌株では、汚泥の消化処
理（可溶化）効率が、それぞれ、10日間で25％、20日間
で40〜50％という低さであり、この処理効率の低さが当
該菌株の工業的利用に向けての課題として依然として残
っている。
号の方法によれば、分解処理できる対象が実質的に酵母
エキス残渣に限定されてしまい、また、KUMEらの方法な
らびに土木研究センターによる菌株では、汚泥の消化処
理（可溶化）効率が、それぞれ、10日間で25％、20日間
で40〜50％という低さであり、この処理効率の低さが当
該菌株の工業的利用に向けての課題として依然として残
っている。
【０００５】また、これまでに、有機性／生物性汚泥の
固形分を効率的に可溶化する性能を備えた最近の分離・
精製、および種の同定に至る報告は行われていなかっ
た。
固形分を効率的に可溶化する性能を備えた最近の分離・
精製、および種の同定に至る報告は行われていなかっ
た。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上述した
従来技術での背景に鑑みて、有機性／生物性汚泥の固形
分を効率的に可溶化する性能を備えた微生物を検索すべ
く鋭意検討を重ねた結果、好気高温消化槽より採取した
消化汚泥から、所望の特性を有した細菌を単離し、その
種まで同定するに至り、本願発明を完成ならしめたので
ある。
従来技術での背景に鑑みて、有機性／生物性汚泥の固形
分を効率的に可溶化する性能を備えた微生物を検索すべ
く鋭意検討を重ねた結果、好気高温消化槽より採取した
消化汚泥から、所望の特性を有した細菌を単離し、その
種まで同定するに至り、本願発明を完成ならしめたので
ある。
【０００７】すなわち、本願発明の要旨とするところ
は、有機性／生物性汚泥の固形分を効率的に可溶化する
性能を有するバチルス・ステアロサーモフィラス(Bacil
lus stearothermophilus) に属する新規微生物である。
は、有機性／生物性汚泥の固形分を効率的に可溶化する
性能を有するバチルス・ステアロサーモフィラス(Bacil
lus stearothermophilus) に属する新規微生物である。
【０００８】本願発明によって取得された新規微生物の
生物学的特徴を決定するために、この微生物が有する菌
学的性質、すなわち、形態的性質、培地における生育状
態、および生理学的性質に関して検定を行った。 その
結果を以下にまとめた。
生物学的特徴を決定するために、この微生物が有する菌
学的性質、すなわち、形態的性質、培地における生育状
態、および生理学的性質に関して検定を行った。 その
結果を以下にまとめた。
【０００９】本願新規微生物の菌学的性質 Ａ．形態的性質 (1) 細胞の形および大きさ： 標準ブイヨンで、65℃、48
時間培養したところ、 2.5〜 3.5× 0.3〜 0.5μのグラ
ム陽性の直桿菌であり、短連鎖、束状に集合するものが
認められた。 同様に、標準寒天培地で、培養後室温に
４日間放置した場合、菌の形態に大きな変化が認めら
れ、長い連鎖状のものが多くなり、湾曲したＳ字状のも
のや、一端に芽胞の形成が認められるもの、細胞内に顆
粒が認められるものなどがあり、殆どがグラム陰性に染
色された。
時間培養したところ、 2.5〜 3.5× 0.3〜 0.5μのグラ
ム陽性の直桿菌であり、短連鎖、束状に集合するものが
認められた。 同様に、標準寒天培地で、培養後室温に
４日間放置した場合、菌の形態に大きな変化が認めら
れ、長い連鎖状のものが多くなり、湾曲したＳ字状のも
のや、一端に芽胞の形成が認められるもの、細胞内に顆
粒が認められるものなどがあり、殆どがグラム陰性に染
色された。
【００１０】(2) 運動性の有無：運動性は懸滴標本、半
流動培地で確認できたが、周毛性の運動であり、比較的
緩やかな滑走運動であった。
流動培地で確認できたが、周毛性の運動であり、比較的
緩やかな滑走運動であった。
【００１１】(3) 胞子の有無：芽胞を形成し、形は卵円
形で菌体より膨張している。 位置は端立であるが、形
成初期には準端立に認められるものもある。 オタマジ
ャクシ様のものも認められた。
形で菌体より膨張している。 位置は端立であるが、形
成初期には準端立に認められるものもある。 オタマジ
ャクシ様のものも認められた。
【００１２】(4) グラム染色：細胞の多形性は著しく、
特に、培養温度の影響を受けるのか、至適温度の60〜65
℃で正常な形態を示した。 グラム染色性も不定とな
る。
特に、培養温度の影響を受けるのか、至適温度の60〜65
℃で正常な形態を示した。 グラム染色性も不定とな
る。
【００１３】Ｂ．培地における生育状態 (1) 標準寒天平板培養： 65℃、48時間の培養での集落の
形状は、 0.5〜１mmのスムーズな半球形の正円で光沢が
あるが、やや不透明な集落で一部周辺に膜状に僅かに拡
散しているものも認められる。 しかし、一部のバチル
ス(Bacillus)属に属する細菌に認められる被膜状の拡散
集落ではない。 また、色素の産生も認められなかっ
た。
形状は、 0.5〜１mmのスムーズな半球形の正円で光沢が
あるが、やや不透明な集落で一部周辺に膜状に僅かに拡
散しているものも認められる。 しかし、一部のバチル
ス(Bacillus)属に属する細菌に認められる被膜状の拡散
集落ではない。 また、色素の産生も認められなかっ
た。
【００１４】(2) 標準ブイヨン培養：65℃、48時間の培
養では、ブイヨンは一様に混濁し、発育良好である。
しかし、培地表面での菌膜の形成等は認められなかっ
た。 長時間室温にて放置すると、管底に雲恕状の沈殿
を生じた。
養では、ブイヨンは一様に混濁し、発育良好である。
しかし、培地表面での菌膜の形成等は認められなかっ
た。 長時間室温にて放置すると、管底に雲恕状の沈殿
を生じた。
【００１５】(3) 標準ゼラチン穿刺培養：培養して72時
間後に、ゼラチン表層５mm、水平に液化した。 １週間
後に、氷室に静置してもゼラチンは凝固しなくなった。
間後に、ゼラチン表層５mm、水平に液化した。 １週間
後に、氷室に静置してもゼラチンは凝固しなくなった。
【００１６】(4) リトマス・ミルク：培地色は酸性化し
たが、凝固は認められなかった。 培養して72時間後
に、表層より液化が始まり、１週間後に培地の1/3 が透
明となった。
たが、凝固は認められなかった。 培養して72時間後
に、表層より液化が始まり、１週間後に培地の1/3 が透
明となった。
【００１７】Ｃ．生理学的性質 (1) グラム染色性： ＋ (2) 硝酸塩の還元能： ＋ (3) 脱窒反応〔硝酸塩ブイヨンでのガス産生〕： ＋ (4) ＭＲテスト： ＋ (5) ＶＰテスト： − (6) インドールの生成： − (7) 硫化水素の生成： − (8) デンプンの加水分解： ＋ (9) クエン酸の利用〔Simmns培地,Christensen培地共〕： − (10)無機窒素源の利用〔硝酸塩、アンモニウム塩〕： ＋ (11)色素の生成： −（非水溶性） (12)ウレアーゼ： − (13)オキシダーゼ： ＋ (14)カタラーゼ： ＋ (15)生育の範囲： 温度； 45〜70℃／ ｐＨ； 5.0〜 7.0 (16)酸素に対する態度： 好気性〜通性嫌気性 (17)Ｏ−Ｆ試験〔Hugh leifson法〕： フラクトース（＋） (18)糖類の利用と酸およびガス生成：
【００１８】
【表２】
【００１９】上記した新規微生物の諸性質は、バチルス
・ステアロサーモフィラス (Bacillus stearothermophi
lus)が有する諸性質とよく対応したので、バチルス・ス
テアロサーモフィラス SPT2-1 (Bacillus stearothermo
philus SPT2-1)と命名した。なお、本願発明にて得られ
た、バチルス・ステアロサーモフィラス SPT2-1(Bacill
us stearothermophilus SPT2-1)は、平成８年１月18日
に、本願出願人によって、茨城県つくば市東町１丁目１
番３号に所在の通商産業省工業技術院生命工学工業技術
研究所にて寄託され、そして、受託番号 FERM P-15395
が付与されており、本願発明は、この寄託微生物自体は
もちろん、前述した能力を有するその変異体および子孫
まで意図するものである。
・ステアロサーモフィラス (Bacillus stearothermophi
lus)が有する諸性質とよく対応したので、バチルス・ス
テアロサーモフィラス SPT2-1 (Bacillus stearothermo
philus SPT2-1)と命名した。なお、本願発明にて得られ
た、バチルス・ステアロサーモフィラス SPT2-1(Bacill
us stearothermophilus SPT2-1)は、平成８年１月18日
に、本願出願人によって、茨城県つくば市東町１丁目１
番３号に所在の通商産業省工業技術院生命工学工業技術
研究所にて寄託され、そして、受託番号 FERM P-15395
が付与されており、本願発明は、この寄託微生物自体は
もちろん、前述した能力を有するその変異体および子孫
まで意図するものである。
【００２０】本発明のその他の態様および利点は、以下
に例示的に示した実施例の開示から明らかである。
に例示的に示した実施例の開示から明らかである。
【００２１】
【実施例】実施例１：バチルス・ステアロサーモフィラス SPT2-1
の単離 ３ヶ月連続して運転した好気高温消化槽（70℃）での消
化汚泥より、菌株分離用に汚泥を採取した。
の単離 ３ヶ月連続して運転した好気高温消化槽（70℃）での消
化汚泥より、菌株分離用に汚泥を採取した。
【００２２】採取した汚泥を、１×10-3〜10-5倍に滅菌
水で適当に希釈した後、ＹＰ寒天プレート(DIFCO社製）
に塗布した。 このプレートを、65℃で一晩培養し、単
コロニーを得た。
水で適当に希釈した後、ＹＰ寒天プレート(DIFCO社製）
に塗布した。 このプレートを、65℃で一晩培養し、単
コロニーを得た。
【００２３】得られた単コロニーに関して、デンプンの
分解能、スキムミルクの分解能、滅菌汚泥の分解能を、
基質混合培地でのハロ形成の有無で確認し、ハロを形成
した株でも、特に汚泥分解能が大きいものを特徴株とし
て選抜した。 なお、デンプンおよびスキムミルクの分
解能の検定は、R. BEAUDET, C. GAGNON, J.G. BISAILLO
N and M. ISHAQUE, "Microbiological Aspects of Aero
bic Thermophilic Treatment of Swine Waste", Applie
d and Environmental Microbiology, pp.971-976, Apri
l 1990の変法によった。
分解能、スキムミルクの分解能、滅菌汚泥の分解能を、
基質混合培地でのハロ形成の有無で確認し、ハロを形成
した株でも、特に汚泥分解能が大きいものを特徴株とし
て選抜した。 なお、デンプンおよびスキムミルクの分
解能の検定は、R. BEAUDET, C. GAGNON, J.G. BISAILLO
N and M. ISHAQUE, "Microbiological Aspects of Aero
bic Thermophilic Treatment of Swine Waste", Applie
d and Environmental Microbiology, pp.971-976, Apri
l 1990の変法によった。
【００２４】これら特徴株について、滅菌汚泥の分解活
性をさらに検討し、最も活性の高い株をSPT2-1株と命名
した。 また、同様に滅菌汚泥の分解活性を示した株(S
PT1-6)を、比較用の株として選抜した。
性をさらに検討し、最も活性の高い株をSPT2-1株と命名
した。 また、同様に滅菌汚泥の分解活性を示した株(S
PT1-6)を、比較用の株として選抜した。
【００２５】実施例２：SPT2-1株の活性に対するpHおよ
び温度が与える影響 0.1N塩酸（和光純薬社製）および／または0.1N水酸化ナ
トリウム（和光純薬社製）で、測定対象のpH（pH 4.8、
5.0、 5.2、 5.5、 5.7、 6.8、 7.0) に調整したYP培
地(DIFCO社製：イーストエキス４ｇ、ペプトン８ｇ、水
１ｌ；pH6.8)を調製し、この培地に菌株（SPT2-1株）を
接種し、70℃で６時間培養した SPT2-1株の増殖菌体量
を観察し、その生育度を定性的に測定した。 その結果
を、下記表３に示した。
び温度が与える影響 0.1N塩酸（和光純薬社製）および／または0.1N水酸化ナ
トリウム（和光純薬社製）で、測定対象のpH（pH 4.8、
5.0、 5.2、 5.5、 5.7、 6.8、 7.0) に調整したYP培
地(DIFCO社製：イーストエキス４ｇ、ペプトン８ｇ、水
１ｌ；pH6.8)を調製し、この培地に菌株（SPT2-1株）を
接種し、70℃で６時間培養した SPT2-1株の増殖菌体量
を観察し、その生育度を定性的に測定した。 その結果
を、下記表３に示した。
【００２６】
【表３】
【００２７】表３の結果から、SPT2-1株が、pH 5.0〜
6.8の範囲のpHにおいて活発に生育することが判明し
た。
6.8の範囲のpHにおいて活発に生育することが判明し
た。
【００２８】一方で、0.1N塩酸（和光純薬社製）および
／または0.1N水酸化ナトリウム（和光純薬社製）で、pH
6.8に調整したYP培地(DIFCO社製：イーストエキス４
ｇ、ペプトン８ｇ、水１ｌ；pH6.8)を調製し、この培地
に菌株（SPT2-1株）を接種し、測定対象の温度（10、2
5、45、55、60、65、70および80℃）で、６時間培養し
たSPT2-1株の増殖菌体量を観察し、その生育度を定性的
に測定した。 その結果を、下記表４に示した。
／または0.1N水酸化ナトリウム（和光純薬社製）で、pH
6.8に調整したYP培地(DIFCO社製：イーストエキス４
ｇ、ペプトン８ｇ、水１ｌ；pH6.8)を調製し、この培地
に菌株（SPT2-1株）を接種し、測定対象の温度（10、2
5、45、55、60、65、70および80℃）で、６時間培養し
たSPT2-1株の増殖菌体量を観察し、その生育度を定性的
に測定した。 その結果を、下記表４に示した。
【００２９】
【表４】
【００３０】表４の結果から、SPT2-1株が、45〜70℃、
特に、60〜70℃の温度範囲において活発な生育状態を示
すことが判明した。
特に、60〜70℃の温度範囲において活発な生育状態を示
すことが判明した。
【００３１】実施例３：汚泥可溶化効率の検定 供試菌株（一白金耳：SPT2-1株とSPT1-6株）を、YP培地
(DIFCO社製：イーストエキス４ｇ、ペプトン８ｇ、水１
ｌ；pH6.8)の培地で、70℃で、15時間培養する。 培養
した菌株を、１％（vol./vol.)の濃度になるように滅菌
汚泥（初発ＶＭ（Volatile Matter:全有機物質）：1100
0ppm、ＶＳＳ：11000ppm）に接種して、70℃で振とう培
養を行った。 振とう培養を終えて一定時間（24時間お
よび48時間）後に、試料採取を行い、試料中の有機性固
形分（ＶＳＳ：Volatile Suspended Solids)の測定を行
い、以下の関係式に基づいて、固形分の減少量から可溶
化率を求めた。
(DIFCO社製：イーストエキス４ｇ、ペプトン８ｇ、水１
ｌ；pH6.8)の培地で、70℃で、15時間培養する。 培養
した菌株を、１％（vol./vol.)の濃度になるように滅菌
汚泥（初発ＶＭ（Volatile Matter:全有機物質）：1100
0ppm、ＶＳＳ：11000ppm）に接種して、70℃で振とう培
養を行った。 振とう培養を終えて一定時間（24時間お
よび48時間）後に、試料採取を行い、試料中の有機性固
形分（ＶＳＳ：Volatile Suspended Solids)の測定を行
い、以下の関係式に基づいて、固形分の減少量から可溶
化率を求めた。
【００３２】
【数１】
【００３３】その結果を、下記表５と図１に示した。
なお、滅菌汚泥は、「バイオテクノロジーを活用した新
排水処理システムの開発報告書（下水道編）」、第73頁
〜第77頁、（財）土木研究センター（平成３年２月）の
記載に従って調製した。 また、ＶＳＳの測定は、下水
試験法（1984年版）に準じて行った。
なお、滅菌汚泥は、「バイオテクノロジーを活用した新
排水処理システムの開発報告書（下水道編）」、第73頁
〜第77頁、（財）土木研究センター（平成３年２月）の
記載に従って調製した。 また、ＶＳＳの測定は、下水
試験法（1984年版）に準じて行った。
【００３４】
【表５】
【００３５】実施例４：熱難分解性デンプン含有排水
（デンプン工場排水）の可溶化効率の検定 供試菌株を、YP培地(DIFCO社製：イーストエキス４ｇ、
ペプトン８ｇ、水１ｌ；pH6.8)の培地で、70℃で、15時
間培養する。 培養した菌株を、１％（vol./vol.)の濃
度になるように、熱難分解性デンプン含有排水（デンプ
ン工場排水、初発ＶＭ：10,000ppm 、ＶＳＳ：7,000pp
m）に接種して、70℃で、24時間、48時間および72時間
振とう培養を行った。 各々の培養時間後に試料採取を
行い、試料中の有機性固形分（ＶＳＳ）の測定を行い
（前掲の下水試験法（1984年版）に従った）、以下の関
係式に基づいて、固形分の減少量から可溶化率を求め
た。
（デンプン工場排水）の可溶化効率の検定 供試菌株を、YP培地(DIFCO社製：イーストエキス４ｇ、
ペプトン８ｇ、水１ｌ；pH6.8)の培地で、70℃で、15時
間培養する。 培養した菌株を、１％（vol./vol.)の濃
度になるように、熱難分解性デンプン含有排水（デンプ
ン工場排水、初発ＶＭ：10,000ppm 、ＶＳＳ：7,000pp
m）に接種して、70℃で、24時間、48時間および72時間
振とう培養を行った。 各々の培養時間後に試料採取を
行い、試料中の有機性固形分（ＶＳＳ）の測定を行い
（前掲の下水試験法（1984年版）に従った）、以下の関
係式に基づいて、固形分の減少量から可溶化率を求め
た。
【００３６】
【数２】
【００３７】その結果を、下記表６と図２に示した。
【００３８】
【表６】
【００３９】
【発明の効果】本発明により、有機性汚泥あるいは生物
性汚泥の固形分、特に、余剰汚泥およびデンプン廃液等
を特異的に効率良く可溶化する性能を有する、バチルス
・ステアロサーモフィラス(Bacillus stearothermophil
us) に属する新規微生物、バチルス・ステアロサーモフ
ィラスSPT2-1 (Bacillus stearothermophilus SPT2-1)
が提供されるのである。 すなわち、本発明によって提
供された新規微生物は、有機性汚泥あるいは生物性汚泥
の固形分を効率よく可溶化するなどの効果を奏する。
性汚泥の固形分、特に、余剰汚泥およびデンプン廃液等
を特異的に効率良く可溶化する性能を有する、バチルス
・ステアロサーモフィラス(Bacillus stearothermophil
us) に属する新規微生物、バチルス・ステアロサーモフ
ィラスSPT2-1 (Bacillus stearothermophilus SPT2-1)
が提供されるのである。 すなわち、本発明によって提
供された新規微生物は、有機性汚泥あるいは生物性汚泥
の固形分を効率よく可溶化するなどの効果を奏する。
【図１】 バチルス・ステアロサーモフィラス SPT2-1
の滅菌汚泥の可溶化効率の検定結果を示すグラフであ
る。
の滅菌汚泥の可溶化効率の検定結果を示すグラフであ
る。
【図２】 バチルス・ステアロサーモフィラス SPT2-1
の熱難分解性デンプン含有排水固形分の可溶化効率の検
定結果を示すグラフである。
の熱難分解性デンプン含有排水固形分の可溶化効率の検
定結果を示すグラフである。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成８年４月５日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項４
【補正方法】変更
【補正内容】
【表１】 の菌学的性質を有する請求項１に記載の新規微生物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００９】本願新規微生物の菌学的性質 Ａ．形態的性質 (1) 細胞の形および大きさ： 普通ブイヨンで、65℃、48
時間培養したところ、 2.5〜 3.5× 0.3〜 0.5μのグラ
ム陽性の直桿菌であり、短連鎖、束状に集合するものが
認められた。 同様に、普通寒天培地で、培養後室温に
４日間放置した場合、菌の形態に大きな変化が認めら
れ、長い連鎖状のものが多くなり、湾曲したＳ字状のも
のや、一端に芽胞の形成が認められるもの、細胞内に顆
粒が認められるものなどがあり、殆どがグラム陰性に染
色された。
時間培養したところ、 2.5〜 3.5× 0.3〜 0.5μのグラ
ム陽性の直桿菌であり、短連鎖、束状に集合するものが
認められた。 同様に、普通寒天培地で、培養後室温に
４日間放置した場合、菌の形態に大きな変化が認めら
れ、長い連鎖状のものが多くなり、湾曲したＳ字状のも
のや、一端に芽胞の形成が認められるもの、細胞内に顆
粒が認められるものなどがあり、殆どがグラム陰性に染
色された。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１３】Ｂ．培地における生育状態 (1) 普通寒天平板培養： 65℃、48時間の培養での集落の
形状は、 0.5〜１mmのスムーズな半球形の正円で光沢が
あるが、やや不透明な集落で一部周辺に膜状に僅かに拡
散しているものも認められる。 しかし、一部のバチル
ス(Bacillus)属に属する細菌に認められる被膜状の拡散
集落ではない。 また、色素の産生も認められなかっ
た。
形状は、 0.5〜１mmのスムーズな半球形の正円で光沢が
あるが、やや不透明な集落で一部周辺に膜状に僅かに拡
散しているものも認められる。 しかし、一部のバチル
ス(Bacillus)属に属する細菌に認められる被膜状の拡散
集落ではない。 また、色素の産生も認められなかっ
た。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１４】(2) 普通ブイヨン培養：65℃、48時間の培
養では、ブイヨンは一様に混濁し、発育良好である。
しかし、培地表面での菌膜の形成等は認められなかっ
た。 長時間室温にて放置すると、管底に雲恕状の沈殿
を生じた。
養では、ブイヨンは一様に混濁し、発育良好である。
しかし、培地表面での菌膜の形成等は認められなかっ
た。 長時間室温にて放置すると、管底に雲恕状の沈殿
を生じた。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１５】(3) ゼラチン穿刺培養：培養して72時間後
に、ゼラチン表層５mm、水平に液化した。 １週間後
に、氷室に静置してもゼラチンは凝固しなくなった。
に、ゼラチン表層５mm、水平に液化した。 １週間後
に、氷室に静置してもゼラチンは凝固しなくなった。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１７】Ｃ．生理学的性質 (1) グラム染色性： ＋ (2) 硝酸塩の還元能： ＋ (3) 脱窒反応〔硝酸塩ブイヨンでのガス産生〕： ＋ (4) ＭＲテスト： ＋ (5) ＶＰテスト： − (6) インドールの生成： − (7) 硫化水素の生成： − (8) デンプンの加水分解： ＋ (9) クエン酸の利用〔Simmns培地,Christensen培地共〕： − (10)無機窒素源の利用〔硝酸塩、アンモニウム塩〕： ＋ (11)色素の生成： −（非水溶性） (12)ウレアーゼ： − (13)オキシダーゼ： ＋ (14)カタラーゼ： ＋ (15)生育の範囲： 温度； 45〜70℃／ ｐＨ； 5.0〜 7.0 (16)酸素に対する態度： 好気性〜通性嫌気性 (17)Ｏ−Ｆ試験〔Hugh leifson法〕： Ｆ（発酵） (18)糖類の利用と酸およびガス生成：
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:07）
Claims (5)
- 【請求項１】 有機性汚泥あるいは生物性汚泥の固形分
を可溶化する性能を有する、バチルス・ステアロサーモ
フィラス(Bacillus stearothermophilus) に属する新規
微生物。 - 【請求項２】 前記有機性汚泥あるいは生物性汚泥が、
下水余剰汚泥である請求項１に記載の新規微生物。 - 【請求項３】 前記有機性汚泥が、デンプン廃液である
請求項１に記載の新規微生物。 - 【請求項４】 前記バチルス・ステアロサーモフィラス
に属する新規微生物が、以下の菌学的性質、すなわち； Ａ．形態的性質 (1) 細胞の形： 桿菌 (2) 運動性の有無： ＋ (3) 胞子の有無： ＋ (4) グラム染色： ± Ｂ．培地における生育状態 (1) 標準寒天平板培養： ＋ (2) 標準ブイヨン培養： ＋ (3) 標準ゼラチン穿刺培養： − (4) リトマス・ミルク： ＋ Ｃ．生理学的性質 (1) グラム染色性： ＋ (2) 硝酸塩の還元能： ＋ (3) 脱窒反応〔硝酸塩ブイヨンでのガス産生〕： ＋ (4) ＭＲテスト： ＋ (5) ＶＰテスト： − (6) インドールの生成： − (7) 硫化水素の生成： − (8) デンプンの加水分解： ＋ (9) クエン酸の利用〔Simmns培地,Christensen培地共〕： − (10)無機窒素源の利用〔硝酸塩、アンモニウム塩〕： ＋ (11)色素の生成： −（非水溶性） (12)ウレアーゼ： − (13)オキシダーゼ： ＋ (14)カタラーゼ： ＋ (15)生育の範囲： 温度； 45〜70℃／ ｐＨ； 5.0〜 7.0 (16)酸素に対する態度： 好気性〜通性嫌気性 (17)Ｏ−Ｆ試験〔Hugh leifson法〕： フラクトース（＋） (18)糖類の利用と酸およびガス生成： 【表１】 の菌学的性質を有する請求項１に記載の新規微生物。 - 【請求項５】 前記バチルス・ステアロサーモフィラス
に属する新規微生物が、バチルス・ステアロサーモフィ
ラス(Bacillus stearothermophilus) SPT2-1[FERM P-15
395] である請求項４に記載の新規微生物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4249696A JP3547105B2 (ja) | 1996-02-29 | 1996-02-29 | 新規微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4249696A JP3547105B2 (ja) | 1996-02-29 | 1996-02-29 | 新規微生物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09234060A true JPH09234060A (ja) | 1997-09-09 |
| JP3547105B2 JP3547105B2 (ja) | 2004-07-28 |
Family
ID=12637680
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4249696A Expired - Lifetime JP3547105B2 (ja) | 1996-02-29 | 1996-02-29 | 新規微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3547105B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20030038967A (ko) * | 2001-11-09 | 2003-05-17 | 대한제당 주식회사 | 음식물 쓰레기의 고온 액체발효 방법 |
| JP2004267127A (ja) * | 2003-03-10 | 2004-09-30 | Kobelco Eco-Solutions Co Ltd | 新規微生物及びその微生物を用いた有機性固形物の処理方法 |
| WO2005023997A1 (ja) * | 2003-08-27 | 2005-03-17 | Kobelco Eco-Solutions Co., Ltd. | 新規微生物及びその微生物を用いた有機性固形物の処理方法 |
| WO2009028481A1 (ja) | 2007-08-28 | 2009-03-05 | Diamond Engineering Co., Ltd. | 活性汚泥資材、生物反応槽内の余剰汚泥の減量方法、及び生物反応槽の維持管理方法 |
-
1996
- 1996-02-29 JP JP4249696A patent/JP3547105B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20030038967A (ko) * | 2001-11-09 | 2003-05-17 | 대한제당 주식회사 | 음식물 쓰레기의 고온 액체발효 방법 |
| JP2004267127A (ja) * | 2003-03-10 | 2004-09-30 | Kobelco Eco-Solutions Co Ltd | 新規微生物及びその微生物を用いた有機性固形物の処理方法 |
| WO2005023997A1 (ja) * | 2003-08-27 | 2005-03-17 | Kobelco Eco-Solutions Co., Ltd. | 新規微生物及びその微生物を用いた有機性固形物の処理方法 |
| WO2009028481A1 (ja) | 2007-08-28 | 2009-03-05 | Diamond Engineering Co., Ltd. | 活性汚泥資材、生物反応槽内の余剰汚泥の減量方法、及び生物反応槽の維持管理方法 |
| US8603339B2 (en) | 2007-08-28 | 2013-12-10 | Diamond Engineering Co., Ltd. | Activated sludge material, method for reducing excess sludge production in bioreactor, and method of controlling bioreactor |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3547105B2 (ja) | 2004-07-28 |
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