JPH09235233A - トレハロースを含有する眼科用医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 角膜組織の保護作用に優れた眼科領域におけ
る医薬組成物を提供する。 【解決手段】 式（１） 【化１】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、眼科領域の医療に
関連する組成物に関し、更に詳しくは、角膜保護作用を
有する有用で安全な眼内灌流・洗浄剤、点眼剤および眼
軟膏剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】角膜は眼組織の最も外側にあって外界に
露出された部分であり、その適切な保護は眼科領域の医
療において極めて重要である。角膜は、上皮、実質、内
皮の３層から成るが、角膜上皮と内皮は実質に対してバ
リアー機能を持ち、それぞれに大切な役目を担ってい
る。即ち、角膜では、受動的な水分侵入と、能動的水分
排泄のバランスが適切に保たれて角膜全体の水分を適量
に調節し機能を維持しているが、このような角膜全体の
機能を維持する上で中心となるのが角膜内皮細胞のポン
プ機能である。このように、角膜内皮細胞は、代謝及び
透明性の維持に重要な役割を果たしているので、内皮細
胞が障害を受けて角膜の正常な生理機能が損なわれる
と、流体バランスが崩れ、角膜が膨潤し、透明性が失わ
れることになる。角膜内皮細胞は、重要な役割を担って
いるにもかかわらず、成人においては分裂能力が極めて
低く、障害を受けると修復が非常に困難である。

【０００３】眼科領域における白内障手術や硝子体手術
を代表とする外科的療法は、技術の発展と共に近年増加
の傾向にある。これらの手術中は、長時間にわたって眼
内圧の維持、露出される組織の破壊防止、視野を不明瞭
にするような血液や組織片の洗浄のために、手術部位に
眼内灌流・洗浄剤が絶えず送り込まれる。望ましくない
眼内灌流・洗浄剤は、連続的な接触により角膜内皮細胞
へ障害を引き起こし、ひいては術後の治癒過程に影響を
及ぼし角膜混濁の原因となる。更には、緑内障や網膜炎
などを併発させる恐れがある。そのため、眼科手術にお
いて角膜内皮細胞の保護作用に優れた眼内灌流・洗浄剤
が望まれている。

【０００４】初期の眼内灌流剤では、標準的な塩濃度
０.９％の等張な溶液が広範に用いられたが、この等張
液は角膜の膨潤を引き起こし、角膜内皮細胞の障害が問
題であった。現在では、眼内灌流剤は房水組成にできる
だけ近いものが好ましいとして、酸化型グルタチオンを
添加したＢＳＳ ＰＬＵＳ（商品名）や、塩バランス溶
液であるオペガード ＭＡ（商品名）が使用されてい
る。しかしながら、これら従来製品も依然として角膜内
皮細胞保護作用の点で問題を有している。

【０００５】一方、角膜上皮細胞は、外界との境界であ
り、眼球乾燥やコンタクトレンズ等の外的要因による機
械的障害によって障害を受け易いことが知られている。
ドライアイは最近増加傾向にあり、不定愁訴を伴う疾患
であることから、患者のquality of lifeの向上とい
う点からも、その適切な処置が重要になっている。更に
現代の視覚情報化社会と、コンタクトレンズの普及によ
り、眼疾患は益々多様化し、外界の危険因子に常に曝さ
れている角膜上皮細胞の保護は深刻な問題である。従っ
て、乾燥や異物による障害に対する保護作用を持ち、角
膜上皮細胞の機能を正常に維持するための点眼剤、眼軟
膏剤等が必要である。現在、角膜上皮障害の治療法とし
て人工涙液の点眼剤などがあるが、必ずしも満足できる
効果をあげていない。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、眼組
織、とりわけ角膜の保護作用に優れた、有用で安全性の
高い、眼内灌流・洗浄剤、点眼剤及び眼軟膏剤等の眼科
用の医薬組成物を提供することにある。しかし、これら
組成物の適用部位である眼組織は極めて精巧に造られた
感覚器であり、生理的特性が他の臓器と顕著に異なって
いるために、その開発においては、眼組織の特異性に由
来する様々な問題を解決しなければならない。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、眼科領域
での様々な医療に用いる組成物の有効成分として有用な
物質を見出すために鋭意研究を続けた結果、キノコ類、
パン酵母、海草類、海老類など多くの食品にその存在が
確認されており、長年の間、人間が食品として食してき
た公知の２糖類の一つであるトレハロースが、優れた眼
組織保護作用を有することを見出し、本発明を完成する
に至った。即ち、本発明は、式（１）

【化２】 で表される化合物を含有する眼科用の医薬組成物を提供
するものである。上記の式（１）で示されるトレハロー
スは、従来、食品としての用途以外に、化粧品、精子保
存液、移植臓器用溶液（特開平6-40801）などに用いう
ることが知られているが、眼科用の医薬組成物の成分と
して有用であることは未だ知られていない。本発明のト
レハロース含有医薬組成物の例として、眼内灌流・洗浄
剤、点眼剤および眼軟膏剤を挙げることができる。トレ
ハロースを含有する組成物は、後述の試験例に示すよう
に、角膜保護作用に優れており、上記の本発明の目的の
達成に有用である。

【０００８】トレハロースの製造法については、例えば
MERCK INDEX、第11版、1508頁の9496 Trehaloseの項
に記載の文献を参照して製することができ、また、市販
のものを利用することもできる（和光純薬工業K.K.）。
なお、これらの入手可能なトレハロースが水和物の形を
とっている場合、該水和物も、水和していない化合物と
同様に本発明組成物の有効成分として有用であること
は、当業者ならば容易に理解しうることである。さら
に、製剤の分野では、有効成分である化合物を、生体内
で同一の作用を発揮する製剤的に許容される塩又はエス
テル等の誘導体の形に修飾して投与することが一般的で
あり、溶解性や安定性等の面で適当に修飾することが好
ましい場合もある。従って、本発明の組成物の有効成分
であるトレハロースも、同等の所望の角膜保護作用を示
すことを条件として、当該技術分野で既知の方法で得ら
れる製剤的に許容される塩又はエステルを含む誘導体の
形で用いることができ、そのようにして得られる組成物
も本発明の範囲内に含まれる。エステルの例としては、
酢酸エステル、硫酸エステル等を挙げることができる。
トレハロースの誘導体のうち、硫酸エステルは、既に皮
膚保護作用を有することが知られており（特開平４−２
９０８０８）、角膜に対しても保護効果を示すことが期
待される。従って、トレハロースの硫酸エステルは本発
明組成物の有効成分として有用である。そのような誘導
体は、当業者既知の方法又は文献（例、Schweiger R.G.
ら、Carbohydrate Research 21, 219-229 (1972)）既知
の方法で合成することができる。

【０００９】

【発明の実施の形態】本発明の眼科用組成物が眼内灌流
・洗浄剤及び点眼剤である場合、該組成物は予め液剤の
形にしておいてもよく、あるいは固形剤として使用時に
溶解して用いるようにしてもよい。固形剤の場合、例え
ば精製水や生理食塩液などに適量を溶解、懸濁または乳
化させるとよい。固形剤としては、錠剤、顆粒剤や散剤
などが挙げられ、これらは公知の方法により適宜製造す
ることができる。これらの製剤は、無菌濾過や加熱滅菌
などの公知の方法により無菌とするのがよい。

【００１０】本発明の組成物中のトレハロースの含量
は、最終濃度として、通常、約０.０１％〜２０％の範
囲であるが、好ましい濃度範囲は個々の製剤で若干異な
り、通常、角膜保護効果、浸透圧、イオンバランス問う
の様々な因子を考慮して決定される。トレハロースの配
合量を増加させることにより、角膜内皮及び上皮に対す
る保護効果を高めることができる。そのためには、好ま
しくはトレハロースを組成物中に０.１％以上、より好
ましくは０.３％以上配合するとよい。一方、本発明の
組成物は眼粘膜に直接適用されることから、製剤中にト
レハロースを配合する場合には、同時に塩類含量を適切
に調節し、細胞のイオンバランスに影響を与えないよう
注意が必要である。従って、イオンバランスの崩壊を防
ぐためには、塩類配合量との関係から、製剤中のトレハ
ロースの含量を好ましくは５％以下、より好ましくは
３.５％以下にすることが望ましい。

【００１１】以上の点を総合すると、トレハロースの最
終濃度は、眼内灌流・洗浄剤の場合、通常、０.０１％
〜１０％、好ましくは０.１％〜５％、特に好ましく
は、０.３％〜３.５％の範囲、点眼剤および眼軟膏剤の
場合、通常０.０１％〜２０％、好ましくは１％〜１０
％、特に好ましくは、０.５〜５％とすることができ
る。また、本発明の組成物のｐＨは、眼内灌流・洗浄
剤、点眼剤および眼軟膏剤として用いる場合、公知の方
法によって、６.５〜８.０に調整するのがよい。さら
に、点眼剤として用いる場合、浸透圧は公知の方法によ
って０.５〜５圧比、好ましくは０.８〜２圧比に調整す
るのがよい。眼内灌流・洗浄剤として用いる場合は、
０.８〜１.５圧比、好ましくは１.０〜１.２圧比に調整
するのがよい。

【００１２】本発明の組成物は、使用目的に応じて、当
該技術分野で用いられている通常の成分に上記した濃度
範囲内でトレハロース又はその誘導体を加え、要すれば
ｐＨ及び浸透圧を調整することにより、常法通り製造す
ることができる。本発明組成物が眼内灌流・洗浄剤であ
る場合、本発明の目的に反しない限り、通常、眼内灌流
・洗浄剤に用いられるその他の成分、例えば塩化カルシ
ウム、塩化マグネシウム、硫酸マグネシウム、酢酸ナト
リウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸
ナトリウムおよび炭酸水素ナトリウム等の各種の電解
質、ブドウ糖等の単糖類、グルタチオンおよびグルタチ
オンジスルフィド等のペプタイド類、ペニシリンＧ等の
抗生物質などを通常用いられる量を適宜配合することが
できる。本発明組成物が点眼剤である場合、本発明の目
的に反しない限り、通常点眼剤に用いられる添加剤、例
えば、クロロブタノール、デヒドロ酢酸ナトリウム、塩
化ベンザルコニウム、塩化セチルピリジウム、フェネチ
ルアルコール、パラオキシ安息香酸メチル、塩化ベンゼ
トニウム等の保存剤、硼砂、硼酸、リン酸２水素カリウ
ム等の緩衝剤、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセ
ルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプ
ロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコール、カル
ボキシメチルセルロースナトリウム、コンドロイチン硫
酸等の増粘剤、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレ
ン硬化ヒマシ油６０等の溶解補助剤、エデト酸ナトリウ
ム、亜硫酸水素ナトリウム等の安定化剤を適宜配合する
ことができる。本発明組成物が眼軟膏剤である場合、慣
用の基剤を使用でき、具体的には、眼科用白色ワセリ
ン、プロペト、プラスチベース等を例示できる。添加剤
としては、流動パラフィン等を使用する。

【００１３】本発明の眼内灌流・洗浄剤の用法・用量
は、患者の年齢、術式等により変動するが、通常、白内
障手術で約２０〜５００ｍｌ、硝子体手術で約５０〜
４，０００ｍｌ、緑内障手術で約２０〜５０ｍｌであ
る。本発明の点眼剤の用法・用量は、患者の症状、年齢
等により変動するが、通常、１日１〜６回、１回１〜２
滴が点眼される。眼軟膏剤の場合には、通常１日１〜２
回、結膜嚢内に適量を塗布して使用される。以下、実施
例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれに限定さ
れるものではない。

【００１４】

【実施例】実施例１ 眼内灌流・洗浄剤 １００ｍｌ中 トレハロース（２水和物） ３.５ｇ 塩化ナトリウム ０.３７５ｇ 塩化カリウム ０.０３５８ｇ 塩化カルシウム（無水） ０.０１３３ｇ 硫酸マグネシウム（無水） ０.０１４５ｇ 酢酸ナトリウム（３水和物） ０.０５９９ｇ クエン酸ナトリウム（無水） ０.０８７８ｇ 炭酸水素ナトリウム（無水） ０.２１ｇ Ｄ−グルコース（無水） ０.１５ｇ １Ｎ 塩酸 適 量 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して眼内灌流・洗浄剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.
１。

【００１５】実施例２ 眼内灌流・洗浄剤 １００ｍｌ中 トレハロース（２水和物） ０.３ｇ 塩化ナトリウム ０.６３６ｇ 塩化カリウム ０.０３５８ｇ 塩化カルシウム（無水） ０.０１３３ｇ 硫酸マグネシウム（無水） ０.０１４５ｇ 酢酸ナトリウム（３水和物） ０.０５９９ｇ クエン酸ナトリウム（無水） ０.０８７８ｇ 炭酸水素ナトリウム（無水） ０.２１ｇ Ｄ−グルコース（無水） ０.１５ｇ １Ｎ 塩酸 適 量 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して眼内灌流・洗浄剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.
１。

【００１６】実施例３ 眼内灌流・洗浄剤 １００ｍｌ中 トレハロース（２水和物） ５ｇ 塩化ナトリウム ０.３７５ｇ 塩化カリウム ０.０３５８ｇ 塩化カルシウム（無水） ０.０１３３ｇ 硫酸マグネシウム（無水） ０.０１４５ｇ 酢酸ナトリウム（３水和物） ０.０５９９ｇ クエン酸ナトリウム（無水） ０.０８７８ｇ 炭酸水素ナトリウム（無水） ０.２１ｇ Ｄ−グルコース（無水） ０.１５ｇ １Ｎ 塩酸 適 量 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して眼内灌流・洗浄剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.
２。

【００１７】実施例４ 眼内灌流・洗浄剤 １００ｍｌ中 トレハロース（２水和物） １０ｇ 塩化ナトリウム ０.１９５ｇ 塩化カリウム ０.０３５８ｇ 塩化カルシウム（無水） ０.０１３３ｇ 硫酸マグネシウム（無水） ０.０１４５ｇ 酢酸ナトリウム（３水和物） ０.０５９９ｇ クエン酸ナトリウム（無水） ０.０８７８ｇ 炭酸水素ナトリウム（無水） ０.２１ｇ Ｄ−グルコース（無水） ０.１５ｇ １Ｎ 塩酸 適 量 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して眼内灌流・洗浄剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.
５。

【００１８】実施例５ 点眼剤 １００ｍｌ中 トレハロース（２水和物） ３.５ｇ 塩化ナトリウム ０.４ｇ 塩化カリウム ０.１５ｇ リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ 硼砂 ０.１６ｇ 塩化ベンザルコニウム ０.００４ｇ 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して点眼剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.１。

【００１９】実施例６ 点眼剤 １００ｍｌ中 トレハロース（２水和物） ０.３ｇ 塩化ナトリウム ０.８ｇ 塩化カリウム ０.１５ｇ リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ 硼砂 ０.１６ｇ 塩化ベンザルコニウム ０.００４ｇ 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して点眼剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.１。

【００２０】実施例７ 点眼剤 １００ｍｌ中 トレハロース（２水和物） ０.５ｇ 塩化ナトリウム ０.６ｇ 塩化カリウム ０.１５ｇ リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ 硼砂 ０.１６ｇ 塩化ベンザルコニウム ０.００４ｇ 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して点眼剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.１。

【００２１】実施例８ 点眼剤 １００ｍｌ中 トレハロース（２水和物） ５.０ｇ 塩化ナトリウム ０.３ｇ 塩化カリウム ０.１５ｇ リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ 硼砂 ０.１６ｇ 塩化ベンザルコニウム ０.００４ｇ 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して点眼剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.１。

【００２２】実施例９ 点眼剤 １００ｍｌ中 トレハロース（２水和物） １０ｇ 塩化ナトリウム ０.３ｇ 塩化カリウム ０.１５ｇ リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ 硼砂 ０.２ｇ 塩化ベンザルコニウム ０.００４ｇ 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して点眼剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.５。

【００２３】実施例１０ 点眼剤 １００ｍｌ中 トレハロース（２水和物） ２０ｇ 塩化ナトリウム ０.０４ｇ 塩化カリウム ０.０２ｇ リン酸２水素ナトリウム ０.０３ｇ 硼砂 ０.０４ｇ 塩化ベンザルコニウム ０.００４ｇ 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して点眼剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比２.０。

【００２４】実施例１１ 眼内灌流・洗浄剤 １００ｍｌ中 トレハロース（硫酸エステル） ３.５ｇ 塩化ナトリウム ０.３７５ｇ 塩化カリウム ０.０３５８ｇ 塩化カルシウム（無水） ０.０１３３ｇ 硫酸マグネシウム（無水） ０.０１４５ｇ 酢酸ナトリウム（３水和物） ０.０５９９ｇ クエン酸ナトリウム（無水） ０.０８７８ｇ 炭酸水素ナトリウム（無水） ０.２１ｇ Ｄ−グルコース（無水） ０.１５ｇ １Ｎ 塩酸 適 量 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して眼内灌流・洗浄剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.
１。

【００２５】実施例１２ 点眼剤 １００ｍｌ中 トレハロース（硫酸エステル） ５.０ｇ 塩化ナトリウム ０.３ｇ 塩化カリウム ０.１５ｇ リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ 硼砂 ０.１６ｇ 塩化ベンザルコニウム ０.００４ｇ 滅菌精製水 適 量 全 量 １００ml 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して点眼剤とする。ｐＨ７.４、浸透圧比１.１。

【００２６】 実施例１１ 眼軟膏剤 １００ｇ中 トレハロース（２水和物） ３.５ｇ 流動パラフィン ５ｇ 眼科用白色ワセリン 適 量 全 量 １００ｇ 上記の成分を用いて、公知の方法により無菌製剤を調製
して眼軟膏剤とする。

【００２７】試験例１ トレハロースの角膜内皮細胞保護作用を評価するため、
本発明化合物を配合した組成物およびこれを除いた組成
物を調製し、ウサギ強角膜片を用いて内皮細胞の保護作
用について比較検討した。 ［被験物質］実施例１に示したトレハロースを含有する
製剤（トレハロース(＋)製剤）、及び対照としてその処
方からトレハロースを除き滲透圧を約１.１とした製剤
（トレハロース(−)製剤）を用いて試験した。 ［試験方法］眼に異常のない日本白色種雄性ウサギ４匹
を用い、屠殺後眼球を摘出して強角膜片とした。Dikste
inらの方法（S. Dikstein and D. M. Maurice: The Met
abolic Basis to the Fluid Pump in the Cornea. J.
Physiol. 221:29-41, 1972)に従って、灌流チャンバー
に固定し、直ちにシリンジポンプを用いて流速1.6ml/
h、角膜内圧約15mmHgの条件で、片眼をトレハロースを
含有する製剤、僚眼をトレハロースを除いた製剤で３７
℃、８時間灌流した。灌流後、輪部に沿って強膜部を切
除し、角膜片のみにして湿重量を測定した。その後、12
0℃で24時間乾燥し、乾燥重量を測定した。湿重量およ
び乾燥重量から次式により含水率を算出した。

【数１】角膜含水率＝（湿重量−乾燥重量）／乾燥重量 ［試験結果］試験物質を８時間灌流した後の角膜含水率
は、トレハロースを含有する製剤で5.24±0.21（平均値
±標準誤差 ｎ＝４）、トレハロースを除いた製剤で6.
89±0.25（平均値±標準誤差 ｎ＝４）であり、前者の
ほうが後者に比べて有意に低かった(p<0.05、図１参
照）。従って、トレハロースを配合することによって角
膜内皮細胞が保護され、角膜の膨潤が抑制されることが
明らかとなった。

【００２８】試験例２ トレハロースの角膜上皮細胞に対する保護作用を評価す
るために、ニュートラルレッドアッセイ法を用いて、塩
化ベンザルコニウムによって障害を与えた家兎角膜上皮
細胞に対する本化合物の保護作用を検討した。 ［被験物質］トレハロースを培養液で７％に調製した液
(トレハロース有）を被験溶液として、食塩を培養液で
０.６０２１％に調製した液（トレハロース無）を対照
溶液として試験した。 ［試験方法］試験物質の細胞保護作用の評価は、コルネ
パックキット（クラボウ（株））に添付されているウサ
ギ角膜上皮細胞を用いたニュートラルレッドアッセイ法
に準じて行った。１次培養凍結細胞を２つの２５ｃｍ²
フラスコに４０００ｃｅｌｌｓ／ｃｍ²で接種し、３６.
５℃、５％ ＣＯ₂の条件下で５日間培養した後(２次培
養)、９６穴マルチプレートに１００μｌずつ２５００
ｃｅｌｌｓ／ウエルで接種し、３７℃、５％ ＣＯ₂で３
日間培養した(３次培養)。培養した角膜上皮細胞に塩化
ベンザルコニウム溶液（２５×１０^-6、５０×１０^-6、
７５×１０^-6、１０×１０^-5％）を５０μｌ添加し、さ
らに被験溶液（７％トレハロース）または対照溶液
（０.６０２１％食塩）を５０μｌ（計１００μｌ）添
加し、３６.５℃、５％ＣＯ₂のインキュベーター内で２
日間培養した。なお、培養液のみを１００μｌ添加した
ものを未処理コントロールとした。ニュートラルレッド
溶液を各ウエルに１００μｌずつ添加し、３６.５℃、
５％ＣＯ₂で３時間インキュベートした。上清を捨てた
後、１％塩化カルシウムを含む１％ホルマリン溶液２０
０μｌで細胞を１分間固定・洗浄した。続いて上清を捨
て、水洗後、１％酢酸を含む５０％エタノール溶液１０
０μｌを用いて細胞からニュートラルレッドを２０分間
抽出し、生存する細胞に摂取されたニュートラルレッド
の吸光度（５４０ｎｍ）を測定した。測定値からブラン
ク（未処理コントロールと同じ条件で細胞を培養した
後、ニュートラルレッドの非存在下、同様に処理して得
た測定値）の平均吸光度を差し引いた補正吸光度を求
め、下式より、未処理コントロールとの比から細胞生存
率を算出した。

【００２９】

【数２】 ［試験結果］培養角膜上皮細胞に塩化ベンザルコニウム
を２５×１０^-6〜１０×１０^-5％添加すると、細胞生存
率は濃度依存的に低下した。一方、この細胞生存率の低
下は、トレハロースを同時に添加することにより、いず
れの塩化ベンザルコニウムの濃度においても明らかに軽
減された（図２）。この結果は、トレハロースが障害を
受けた角膜上皮細胞に対して保護作用を有することを示
している。

【００３０】試験例３ トレハロースの眼内灌流液としての有用性を評価するた
め、本発明のトレハロース含有組成物でウサギ眼球内を
灌流した。 ［被験物質］試験例１と同様に調製した、トレハロース
（＋）製剤及び、対照としてトレハロース（−）製剤を
用いて試験した。 ［試験方法］眼に異状のない日本種雄性ウサギ６匹に全
身麻酔を施し、角膜輪部から強膜側へ２ｍｍの位置で強
膜を幅３ｍｍ切開し、切開口より前房内に白内障手術用
灌流装置（ハーグ・ストルツ・ＡＧ社)の超音波水晶体
乳化吸引チップを挿入し、被験物質で前房内を室温で６
０分間（６００mｌ）灌流した。灌流直後、１、２、７
日後に超音波パキメーター（メンター社）で角膜厚を測
定した。

【００３１】［試験結果］灌流１日後の角膜厚は、トレ
ハロースを含有する製剤の場合、0.322±0.005 mm （平
均値±標準偏差，ｎ＝３）、トレハロースを含有しない
製剤の場合、0.349±0.001 mm （平均値±標準偏差，ｎ
＝３）であり、前者の方が後者に比べて有意に低かった
（ｐ＜０.０１、図３参照）。従って、トレハロースを
配合することによって角膜内皮細胞が保護され、灌流後
の角膜の膨潤が抑制されることが明らかになった。

【００３２】

【発明の効果】本発明の組成物は、眼内組織、特に眼科
手術の際に損傷を最も受けやすい角膜内皮細胞の保護の
点で優れているので、各種眼科手術を安全に行うことが
できる。また、本発明の組成物は、これに含有されるト
レハロースが角膜上皮細胞に対して保護作用を有するこ
とから、点眼剤あるいは眼軟膏剤として角膜障害の治療
に有利に用いることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 本発明組成物の角膜組織保護作用を表すグラ
フである。

【図２】 トレハロースの角膜上皮細胞に対する保護作
用を表すグラフである。

【図３】 トレハロースの角膜内皮細胞に対する保護作
用を示すグラフである。

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【手続補正書】

【提出日】平成９年２月２７日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３０

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３０】試験例３ トレハロースの眼内潅流液としての有用性を評価するた
め、本発明のトレハロース含有組成物でウサギ眼球内を
潅流した。 ［被験物質］試験例１と同様に調製した、トレハロース
（＋）製剤及び、対照としてトレハロース（−）製剤を
用いて試験した。 ［試験方法］眼に異状のない日本白色種雄性ウサギ６匹
に全身麻酔を施し、角膜輪部から強膜側へ１ｍｍの位置
で強膜を幅３ｍｍ切開し、切開口より前房内に白内障手
術用潅流装置（ストルツ社)の吸引潅流チップを挿入
し、被験物質で前房内を室温で３０分間（３００mｌ）
潅流した。潅流直後、１、２、７日後に超音波パキメー
ター（シルコ社）で角膜厚を測定した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 和田 昌子 大阪府東大阪市吉田２丁目４−40 サンハ ウスグリーン405号

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式（１） 【化１】 で表される化合物を含有する眼科用の医薬組成物。
2. 【請求項２】 点眼剤である請求項１記載の組成物。
3. 【請求項３】 眼軟膏剤である請求項１記載の組成物。
4. 【請求項４】 化合物（１）の含有量が、０.０１〜２
   ０％の範囲である請求項２又は３記載の組成物。
5. 【請求項５】 眼内灌流・洗浄剤である請求項１記載の
   組成物。
6. 【請求項６】 化合物（１）の含有量が、０.０１〜１
   ０％の範囲である請求項５記載の組成物。