JPH0930953A

JPH0930953A - 皮膚外用剤

Info

Publication number: JPH0930953A
Application number: JP20776195A
Authority: JP
Inventors: Hitoshi Masaki; 仁正木; Atsuko Imahori; 篤子今堀
Original assignee: Noevir Co Ltd
Current assignee: Noevir Co Ltd
Priority date: 1995-07-21
Filing date: 1995-07-21
Publication date: 1997-02-04

Abstract

(57)【要約】（修正有）【課題】シスチンのエステルを配合することにより、美
白効果及び老化防止効果を有するシスチンの経皮及び細
胞膜透過性を高めて、表皮基底層に有効に到達させるこ
とを可能とし、皮膚の色黒，シミ，ソバカス、或いは日
焼けによる色素沈着を改善する、安全でさらに安定であ
る皮膚外用剤を提供する。【解決手段】下記式（１）（式中Ｒ_１，Ｒ_２は、水素又は炭素数１〜２０の直鎖又
は分岐鎖のアルキル基、アルケニル基、アルキルフェニ
ル基を示しかつＲ_１及びＲ_２の両方がともに水素である
ことはない）で表されるエステル、リン脂質エステル、
スフィンゴシン及びその誘導体のエステル、糖脂質エス
テル、糖エステル、ステロールエステルから選ばれた１
種又は２種以上を配合した皮膚外用剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明は、シスチンのエステル
を配合することにより、皮膚の色黒，シミ，ソバカス、
或いは日焼けによる色素沈着を改善し、また酸化反応に
基づく皮膚の老化を防止又は予防し、かつ皮膚刺激性が
低く、安全でさらに安定である皮膚外用剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】シスチンは、チロシナーゼ活性阻害及び
チロシナーゼ生合成阻害作用を有し美白効果のあるアミ
ノ酸として知られている。また、生体内で活性酸素種を
捕捉する抗酸化作用を有し、皮膚の老化を予防又は防止
することも知られている。そのためシスチンを配合した
皮膚外用剤は、美白作用と老化防止作用を合わせ持つ有
効な製剤として期待されている。

【０００３】しかしながらシスチンは、水及び油に難溶
性の性質を有しているため、皮膚外用剤への配合が困難
であり、固体状のまま配合しても経皮吸収されにくい性
質を有していた。そのため、シスチンの溶解性を向上さ
せるために、N,N'-ジアセチルシスチンジメチルを皮膚
外用剤に使用することが知られている（特開平６−１２
８１４３）。しかしながら、このN,N'-ジアセチルシス
チンジメチルは、水溶性の性質を有しているために、経
皮透過性及び細胞膜透過性が低く、有効な美白作用及び
抗酸化作用を発現させるためにはかなり高濃度を外用剤
基剤中に配合する必要があった。そのため、外用剤のｐ
Ｈ等に変動を生じて製剤の安定性に影響を及ぼしたり、
皮膚に対する刺激性が生じたりして、好ましい美白用及
び老化防止用皮膚外用剤を得ることは困難であった。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明は上記の課題を
解決し、皮膚刺激性や副作用の問題がなく、安全且つ安
定で、非常に優れた美白効果及び老化防止効果を発揮す
る皮膚外用剤を提供することを目的とする。すなわち、
美白効果及び老化防止効果を有するシスチンの経皮及び
細胞膜透過性を高めて、表皮基底層に有効に到達させる
ことを可能とするものである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】従って本発明において
は、シスチンの経皮及び細胞膜透過性を高めるため、エ
ステル化して用いることを試みた。その結果、シスチン
のカルボン酸をエステル化して配合することにより、こ
れらの経皮透過性は顕著に高まり、同一配合量における
チロシナーゼ活性或いは生合成阻害作用及び抗酸化作用
が驚くほど向上することを見出した。従って皮膚外用剤
基剤に対する前記シスチンエステルの配合量は少量でよ
く、外用剤の製剤安定性に及ぼす影響も小さく、さらに
皮膚刺激の発生等安全性上の問題もない。

【０００６】シスチンのエステルとしては、細胞膜親和
性の高いものであれば特に限定されないが、一般式
（１）

【化１】で表されるエステル，リン脂質エステル，スフ
ィンゴシンエステル，糖脂質エステル，糖エステル，ス
テロールエステル等が好ましいものとして挙げられる。

【０００７】上記一般式（１）で示されるシスチンのエ
ステルとしては、シスチンオクチルエステルのような直
鎖脂肪族エステル、シスチンイソステアリルエステルの
ような分岐脂肪族エステル、シスチンフェニルエチルエ
ステルのようなフェニルアルキルエステル、シスチンオ
レイルエステルのような不飽和脂肪族エステル等が例示
される。

【０００８】リン脂質エステルに用いられるリン脂質と
しては、ホスファチジン酸，リゾホスファチジン酸，レ
シチン、ホスファチジルエタノールアミン，ホスファチ
ジルセリン，ホスファチジルイノシトール，ホスファチ
ジルグリセロール，ホスファチジルコリン等のグリセロ
リン脂質があげられる。これらグリセロリン脂質の１位
又は２位にシスチニル基をエステル交換反応により導入
する。シスチンは、ホスホリパーゼＡ1又はホスホリパ
ーゼＡ2によるエステル交換反応により、効率よくリン
脂質の１位又は２位にエステル結合させることができ
る。

【０００９】さらに、リン脂質エステルに用いられるリ
ン脂質としては、スフィンゴミエリン，セラミドホスホ
エタノールアミン，セラミドホスホイノシトールのよう
なスフィンゴリン脂質を用いることもできる。

【００１０】スフィンゴシン及びその誘導体のエステル
は次の一般式（２）で示される。

【化２】

【００１１】糖脂質エステルに用いられる糖脂質として
は、グリセロ糖脂質，スフィンゴ糖脂質のいずれでも良
い。グリセロ糖脂質としては、モノアシルグリコシルグ
リセロール，ジアシルガラクトシルグリセロール，グル
コサミルホスファチジルグリセロール等が、また、スフ
ィンゴ糖脂質の例としては、セレブロシド類，スルファ
チド類，セラミドオリゴヒキソシド類，グロボシド類，
ガングリオシド類等が挙げられる。

【００１２】糖エステルに用いられる糖としては、細胞
膜親和性の点から単糖類又は２糖類〜３糖類くらいのオ
リゴ糖が好ましい。本発明の目的には、エリスロース，
トレオース等のテトロース類、アラビノース，キシロー
ス，リボース等のペントース類、ガラクトース，グルコ
ース，マンノース，プシコース，フルクトース等のヘキ
ソース類、N-アセチルガラクトサミン，N-アセチルグル
コサミン，マンノサミン等のアミノ糖類、マルトース，
ラクトース，ショ糖，セロビオース等の２糖類、セロト
リオース等の３糖類などが例示される。

【００１３】シスチンの糖エステルは、シスチンをエス
テル化し、これと糖とを水酸化ナトリウム等のアルカリ
触媒存在下にて反応させ、エステル交換反応等により合
成することができる。なお、副生成物のアルコールを系
から除去すると、反応を効率よく進ませることができ
る。

【００１４】ステロールエステルに用いられるステロー
ルとしては、動物起源のもの，植物起源のもの，及び合
成によるもののいずれを用いても良い。かかるステロー
ルとしては、コレステロール，ラノステロール，ジヒド
ロステロール及びこれらの混合物であるイソコレステロ
ール，フィトステロール，シトステロール，スチグマス
テロール，カンペステロール，デスモステロール，7-デ
ヒドロコレステロール，及びこれらステロールの還元物
等を挙げることができる。

【００１５】シスチンのステロールエステルは、従来公
知のエステル化反応により行わせることができ、たとえ
ば無触媒又はパラトルエンスルホン酸，塩化スズ等の触
媒の存在下に、シスチン及びステロールの混合物を約１
００〜２５０℃程度に加熱すればよい。この反応の終点
は、酸価を測定することにより知ることができる。

【００１６】上記のシスチンエステルを通常の皮膚外用
剤基剤中に配合して皮膚外用剤とする。配合量は、製剤
中の有効濃度や製剤の安定性等を考慮して０.００１〜
１０重量％程度が適当である。外用剤の形態としては、
ローション，乳剤，クリーム，軟膏等、種々の形態をと
ることができる。また、化粧水，美容液，乳液等の老化
防止用及び美白用化粧料としても提供することができ
る。

【００１７】

【作用】本発明で用いるシスチンエステルのメラニン色
素白色化作用、チロシナーゼ活性阻害作用及びチロシナ
ーゼ生合成阻害作用について以下に示す。シスチンエス
テルは、アルキルエステルとしてシスチン-2-イソプロ
ピルエステルを、リン脂質エステルとしてシスチニル基
を２位に導入したシスチニルホスファチジン酸を、糖エ
ステルとしてシスチニルグルコシドを、ステロールエス
テルとして、シスチンコレステロールエステルを用い
た。比較のため、シスチンで同様の作用の測定を行っ
た。

【００１８】メラニン色素白色化作用は、シスチンエス
テルを９５重量％エタノールに溶解して試料とし、マウ
スＢ16メラノーマ細胞の懸濁液（細胞数５０,０００程
度）に添加し、３日間培養を行った後、細胞を分離し、
測色して評価した。シスチンエステルを添加せず同様に
処理した系を対照としてＬ値の差を求め、図１に示し
た。シスチンを添加した系と比較して、シスチンエステ
ルを添加した系では、Ｌ値の差が３倍以上大きくなって
おり、シスチンをエステル化して配合することにより、
細胞膜透過性が向上しメラニン色素白色化作用が顕著に
上昇した。

【００１９】チロシナーゼ活性阻害作用は、シスチンエ
ステルを９５重量％エタノールに溶解して試料とし、酵
素溶液としてチロシナーゼ（５０,０００units，シグマ
社製）を精製水で６００倍希釈したものを用い、チロシ
ン５０ｍｇを精製水１００ｍｌに溶解して基質溶液とし
て評価した。シスチンエステルは、最終濃度が１.０μ
Ｍ〜１００ｍＭの範囲で段階的に変化するように添加し
た。

【００２０】酵素反応は、試料溶液２ｍｌ，１／１５Ｍ
リン酸緩衝液（ｐＨ６.８）２ｍｌ，基質溶液０.５ｍ
ｌ，酵素溶液０.５ｍｌを混合し、３７℃にて１時間イ
ンキュベートして行わせた。反応後４７５ｎｍにおける
吸光度（Ａs）を測定した。さらに試料溶液の代わりに
精製水を添加した系，及び基質溶液の代わりに精製水を
添加した系において同様に反応させ、それぞれの場合に
おける吸光度（Ａb及びＡ0）を測定した。チロシナーゼ
活性阻害率は数式１により求めた。

【数１】

【００２１】チロシナーゼ生合成阻害作用の評価は次の
ようにして行った。上記シスチンエステルの９５重量％
エタノール溶液をマウスＢ16メラノーマ細胞の懸濁液
（細胞数５０,０００程度）に添加し、３日間培養を行
った後、以下の方法により細胞中のチロシナーゼ活性を
測定した。すなわち、１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
６.８）２ｍｌに１.０重量％のドーパ水溶液０.５ｍｌ
及び培養細胞液０.５ｍｌを混合し、３７℃にて１時間
インキュベートした後、４０５ｎｍにおける吸光度（Ａ
s）を測定した。対照として溶媒の９５重量％エタノー
ル水溶液のみを同様に添加して培養し、同様に培養細胞
液とドーパ水溶液とをインキュベートして吸光度（Ａ
b）を測定し、数式２によりチロシナーゼ生合成阻害率
を求めた。シスチンエステルは、最終濃度が１.０μＭ
〜１００ｍＭの範囲で段階的に変化するように添加し
た。

【数２】

【００２２】各試料について、ドーズレスポンス曲線を
作成し、５０％阻害濃度（ＩＤ50）を求めて、表１にま
とめて示した。表１において、シスチンエステルのチロ
シナーゼ活性阻害作用及びチロシナーゼ生合成阻害作用
についてのＩＤ50は、シスチン単独の場合の１／５８〜
１／２７及び１／６３〜１／２４となり、シスチンをエ
ステル化することにより、同一濃度で添加した場合、チ
ロシナーゼ活性阻害作用及びチロシナーゼ生合成阻害作
用は大幅に向上する。

【表１】

【００２３】シスチンエステルの活性酸素種による細胞
傷害防御作用は、ヒト線維芽細胞に活性酸素種を暴露
し、その際の細胞生存率を指標として評価できる。培養
したヒト線維芽細胞に、シスチンエステルを作用させた
後、洗浄し、ヒポキサンチン-キサンチンオキシダーゼ
系にて活性酸素種（スーパーオキシド及びヒドロキシラ
ジカル）を暴露した。暴露後の細胞生存率はＭＴＴ還元
法により測定した。

【００２４】その結果、図２に示すように、細胞膜透過
性に優れるシスチンエステルで処理した場合は、７０〜
８０％の良好な細胞生存率を示した。これに対し、エス
テル化していないシスチンで処理した場合は、細胞膜透
過性が低いため、細胞生存率は４０％弱と低かった。

【００２５】

【実施例】さらに、本発明について実施例により詳細に
説明する。

【００２６】本発明に係るエッセンスオイルとして実施
例１〜４及び比較例１の処方を表２に示す。(１)〜(８)
の成分を７０℃に加熱混合均一化後、室温まで冷却して
調製する。

【表２】

【００２７】本発明に係る美容液として実施例５〜８及
び比較２の処方を表３に示す。(４)〜(９)の成分を(３)
に溶解均一化した後、(１)，(２)及び(10)を順次加えて
調製する。

【表３】

【００２８】本発明にかかる乳液として実施例９〜１２
及び比較例３の処方を表４に示す。(1)〜(5)の油相成分
を混合し７５℃に加熱して溶解，均一化する。一方(6),
(13),(17)の水相成分を混合，溶解して７５℃に加熱
し、前記の油相成分を添加して予備乳化する。(14)を添
加した後ホモミキサーにて均一に乳化し、(15)を加えて
ｐＨを調整する。冷却後４０℃にて、(8)〜(11)の成分
を(7)に溶解して添加，混合，均一化する。

【表４】

【００２９】本発明にかかるＷ／Ｏ乳化型クリームとし
て実施例１３〜１６及び比較例４の処方を表５に示す。
(1)〜(8)の油相成分を混合し７５℃に加熱して溶解，均
一化する。一方(9)〜(11)の水相成分を混合，溶解して
７５℃に加熱し、前記の油相成分に添加してホモミキサ
ーにて均一に乳化する。冷却後４０℃にて、(13)〜(17)
の成分を(12)に溶解して添加，混合，均一化する。

【表５】

【００３０】本発明にかかるＯ／Ｗ型乳剤性軟膏として
実施例１７〜２０及び比較例５の処方を表６に示す。
(1)〜(4)の油相成分を混合し７５℃に加熱して溶解，均
一化する。７５℃に加熱した(5)に油相成分を添加して
乳化する。冷却後４０℃にて、(7)〜(11)の成分を(6)に
溶解して添加，混合，均一化する。

【表６】

【００３１】本発明の実施例について製剤の安定性を２
５℃恒温槽にて観察した。１カ月，３カ月，６カ月後の
状態は分離及び結晶の析出の有無で評価した。分離及び
結晶の析出が認められないものは○，分離及び結晶の析
出が認められるものは×として結果を表７に示した。美
容液及び乳剤である比較例２及び３においては１ヶ月後
にすでに結晶の析出が見られ、比較例１，４及び５でも
３カ月後には分離及び結晶の析出が認められた。しかし
ながら、実施例においては、６カ月を過ぎた段階でも分
離及び結晶の析出しているサンプルはなく、製剤の安定
性が向上していることが明らかであった。

【表７】

【００３２】本発明の実施例について、皮膚の老化防止
効果を皮膚のしわ発生防止効果を評価することにより検
討した。試験を行ったサンプルは、実施例１，２，３，
４，５，１０，１５，２０及び比較例１〜５である。ヘ
アレスマウス５匹を一群とし、各群について本発明の実
施例及び比較例をそれぞれ１日１回背部に塗布し、１Ｊ
／平方ｃｍ／週のＵＶＡを５０週間照射し、しわの発生
状況を経時的に肉眼観察により評価した。しわの発生状
況は、「発生せず；０点」，「微小なしわがわずかに発
生；１点」，「軽微なしわが明確に発生；２点」，「中
程度のしわが発生；３点」，「深いしわが発生；４点」
として点数化し、各群の平均点を算出して、表８に示し
た。その際、精製水を塗布した群を対照とした。

【表８】

【００３３】表８より、シスチンエステルを配合した実
施例塗布群においては、いずれもしわの発生が顕著に抑
制されており、ＵＶＡを５０週間照射した後において
も、各群とも微小なしわの発生を認めただけであった。
これに対してシスチンを配合した比較例１〜５において
は、対照に比べ若干のしわ発生抑制効果は認められる
が、いずれにおいても明確なしわの形成が見られ、形成
されたしわはほぼ中程度の深さにまで達していた。

【００３４】続いて、本発明の実施例及び比較例につい
て使用試験を行った。試験を行ったサンプルは、実施例
１，２，３，４，６，１１，１６，１７及び比較例１〜
５である。皮膚の弾性の低下及びシミ，ソバカス，日焼
け等の色素沈着を主な症状として有するパネラー２０名
を一群とし、各群にそれぞれ実施例及び比較例をブライ
ンドにて顔面及び手に使用させ、皮膚弾性及び色素沈着
の変化を観察し、評価した。使用期間は４月から１０月
の６カ月間とした。皮膚弾性については、「上昇」，
「やや上昇」，「変化なし」，「低下」の４段階で、美
白効果については、「改善」，「やや改善」，「変化な
し」の３段階にて評価をし、各評価を得たパネラー数に
て表９に示した。

【表９】

【００３５】表９より明らかなように、シスチンエステ
ルを配合した実施例を使用したパネラーは全員皮膚弾性
の上昇及び色素沈着の改善が認められている。これに対
し、比較例１〜５を使用したパネラーは、弾性がやや上
昇したパネラーもいるが、明確に上昇の認められたパネ
ラーはおらず、美白効果に関しても、はっきりと改善が
認められたパネラーはおらず、３５〜５０％のパネラー
で変化を認めなかった。以上の結果より、シスチンをエ
ステル化して配合することにより、シスチンを配合した
場合と比較して、老化防止効果及び美白効果が飛躍的に
向上していることがわかる。

【００３６】なお、上記の使用期間において、いずれの
実施例を使用した群においても、痛み、痒み等の皮膚刺
激やアレルギー反応等の皮膚症状を訴えたパネラーはい
なかった。また、乳化状態の悪化や配合成分の沈降，変
質等も認められなかった。

【００３７】

【発明の効果】以上詳述したように、本発明により、少
量のシスチンエステルを配合することにより、非常に優
れた美白効果及び老化防止効果を発揮する皮膚外用剤を
提供することができる。本発明に係る皮膚外用剤におい
ては、有効成分であるシスチンが良好に表皮，真皮及び
表皮基底層のメラノサイトに到達でき、低濃度の配合で
優れた老化防止効果及び美白効果を示す。従って、皮膚
刺激性や感作性の発現するおそれがない。またシスチン
をエステル化することにより溶媒への溶解度が向上し、
製剤の安定性が向上した。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明で用いるシスチンエステルと、シスチン
のメラニン色素白色化作用を示す図である。

【図２】本発明で用いるシスチンエステルと、シスチン
における活性酸素種による細胞傷害防御作用を示す図で
ある。

【符号の説明】

１．シスチン-2-イソプロピルエステル２．シスチニルホスファチジン酸３．シスチニルグルコシド４．シスチンコレステロールエステル５．シスチン

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ａ６１Ｋ 7/00 Ａ６１Ｋ 7/00 Ｗ 31/22 ＡＤＡ 31/22 ＡＤＡ 31/66 31/66 31/70 31/70

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】シスチンのエステルを配合してなる皮膚
外用剤。
【請求項２】シスチンのエステルが一般式（１）【化１】で表されるエステル、リン脂質エステル、スフィンゴシ
ン及びその誘導体のエステル、糖脂質エステル、糖エス
テル、ステロールエステルから選ばれた１種又は２種以
上であることを特徴とする、請求項１に記載の皮膚外用
剤。
【請求項３】皮膚外用剤が、化粧料であることを特徴
とする請求項１及び２に記載の皮膚外用剤。