JPH093095A - 新規なフエネチルアミド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 細胞成長抑制作用及び／又は抗新生物作用を
有しており、抗癌、抗腫瘍剤として有用なペプチド誘導
体を提供する。 【解決手段】 本発明は一般式 【化１】 式中、Ｒは（Ｒ）−又は（Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−
フェニルエチルアミノ基、２−フェニルシクロプロピル
アミノ基又は１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリ
ン−２−イル基を表わす、で示されるペプチド誘導体又
はその塩に関する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は新規なペプチド化合物に
関する。本発明の化合物は細胞成長抑制作用及び／又は
抗新生物作用を有しており、抗癌、抗腫瘍剤として有用
である。

【０００２】

【従来の技術】海の軟体動物であるアメフラシ類縁のタ
ツナミガイ（Dolabella auricularia）から細胞生長抑
制作用及び／又は抗新生物作用を有する化合物の単離は
今までにいくつかなされており、それらの化合物はドラ
スタチン１〜１５と称されている。このうち、ドラスタ
チン１０は、１９８７年ペチット等によりインド洋産の
タツナミガイから抽出された下記構造式をもつペンタペ
プチドで、既知の化合物の中で最強の細胞生長抑制作用
を有する化合物として知られている（ペチット等，ジャ
ーナル・オブ・ジ・アメリカン・ケミカル・ソサイアテ
ィー，１０９巻，６８８３頁，１９８７年及び特開平２
−１６７２７８号公報参照）。

【０００３】

【化２】

【０００４】また、最近になって、ドラスタチン１０の
全合成についても報告された（アメリカ特許第４９７８
７４４号明細書参照）。

【０００５】一方、本発明者らは先に、ある種のドラス
タチン１０誘導体について開示した（国際公開ＷＯ９３
／０３０５４号パンフレット参照）。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題及び課題を解決するため
の手段】今回、本発明者らは、ドラスタチン１０のＣ末
端のドラフェニン（α−（チアゾリル）フェネチルアミ
ン）を他の置換基に代替したある種のドラスタチン１０
誘導体が、ドラスタチン１０に比べてはるかに強い抗腫
瘍作用を有することを見いだした。

【０００７】しかして、本発明によれば、一般式（Ｉ）

【０００８】

【化３】

【０００９】式中、Ｒは（Ｒ）−又は（Ｓ）−２−ヒド
ロキシ−２−フェニルエチルアミノ基、２−フェニルシ
クロプロピルアミノ基又は１，２，３，４−テトラヒド
ロイソキノリン−２−イル基を表わす、で示されるペプ
チド誘導体又はその塩が提供される。

【００１０】本発明の前記式（Ｉ）の化合物において、
イソプロピル基、ｓｅｃ−ブチル基、メトキシ基及びメ
チル基がそれぞれ結合している炭素原子は不整炭素原子
であるので、それらは任意の（Ｒ）−又は（Ｓ）−の立
体配置を有することができ、それらは全て本発明の範囲
に包含されるが、薬理活性の点からみると、ドラスタチ
ン１０と同じ立体配置を有する化合物が好ましい。

【００１１】前記式（Ｉ）のペプチド化合物は、また、
塩として存在することができ、そのような塩の例として
は、塩酸塩、臭化水素酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ｐ−
トルエンスルホン酸塩、酢酸塩等を挙げることができ
る。

【００１２】本発明によれば、前記式（Ｉ）のペプチド
化合物は、例えばペプチド化学の分野で周知の液相合成
法（イー・シュレーダー及びケイ・リュブケ著「ザ・ペ
プタイズ」第１巻、７６〜１３６頁、１９６５年アカデ
ミック・プレス発行参照）に従って、各アミノ酸又はペ
プチドフラグメントを縮合させることにより製造するこ
とができる。

【００１３】例えば、縮合時におけるラセミ化を避ける
ためには、下記式（ＩＩ）

【００１４】

【化４】

【００１５】のトリペプチドフラグメントと、下記式
（ＩＩＩ）

【００１６】

【化５】

【００１７】式中、Ｒは前記の意味を有する、のフラグ
メントとを縮合させることにより合成するのが好適であ
る。

【００１８】また、数多くの本発明化合物を効率よく合
成するには、下記式（ＩＶ）

【００１９】

【化６】

【００２０】のテトラペプチドフラグメントと、下記式
（Ｖ） Ｈ−Ｒ （Ｖ） 式中、Ｒは前記の意味を有する、のフラグメントとを縮
合させることにより行うのが好ましい。

【００２１】縮合反応は、一般に、不活性溶媒、例えば
クロロホルム、酢酸エチル、テトラヒドロフラン（ＴＨ
Ｆ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリ
ル等の中で、必要に応じて有機塩基、例えばトリエチル
アミン、Ｎ−メチルモルホリン、ジイソプロピルエチル
アミン（ＤＩＥＡ）等の存在下に、縮合剤、例えばジシ
クロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ジフェニルホ
スホリルアジド（ＤＰＰＡ）、シアノリン酸ジエチル
（ＤＥＰＣ）、ＢＯＰ試薬等で処理することにより行う
ことができる。

【００２２】反応温度は、通常−１０℃乃至室温、好ま
しくは０℃前後であり、式（ＩＩ）の化合物に対する式
（ＩＩＩ）の化合物、有機塩基及び縮合剤の各々の使用
割合は、式（ＩＩ）の化合物１モル当り、式（ＩＩＩ）
の化合は少なくとも１モル、好ましくは１．０〜１．１
モル程度、有機塩基は１〜２モル程度、そして縮合剤は
等モル程度用いるのが有利である。

【００２３】また、式（ＩＶ）の化合物と式（Ｖ）の化
合物との反応も、上記の式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩ
Ｉ）の化合物との反応と同様の条件下に行なうことがで
きる。

【００２４】かくして、得られる式（Ｉ）のペプチド化
合物の反応混合物からの単離、精製は、再結晶、イオン
交換クロマトグラフィー、ゲルろ過、高速液体クロマト
グラフィー等により行うことができる。

【００２５】なお、前記反応において出発原料として使
用される前記式（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は従来
の文献に未載の新規な化合物であるが、その構成成分で
ある各アミノ酸を液相合成法で縮合することにより容易
に製造することができる。

【００２６】本発明の式（Ｉ）のペプチド化合物は、ド
ラスタチン１０よりも強い抗腫瘍作用を有しており、ま
た治療比も大きく、例えば白血病、非小細胞肺癌、小細
胞肺癌、大腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、
胃癌、膀胱癌などの処置又は治療に有用である。

【００２７】本発明の式（Ｉ）の化合物の抗腫瘍作用は
次のようにして測定することができる。

【００２８】７週齢のＣＤＦ１マウスの腹腔内に、マウ
ス白血病Ｐ３８８細胞を０．１ｍｌ（１０⁶cells／マウ
ス）ずつ移植した。移植第一日目（移植翌日）及び第五
日目に薬物を腹腔内に投与し、マウスの生死を６０日間
観察した結果から下記式により延命率（ＩＬＳ，％）を
算出した。なお、下記式中、Ｔは薬物投与群のメディア
ン生存日数、Ｃはコントロール群のメディアン生存日数
を意味している。

【００２９】

【数１】

【００３０】その結果を下記表に示す。なお、抗腫瘍作
用は、ドラスタチン１０の延命率を１とした場合の相対
比で表わした。

【００３１】 本発明に係る化合物は、薬剤として用いる場合、その用
途に応じて、固体形態（例えば錠剤、硬カプセル剤、軟
カプセル剤、顆粒剤、散剤、細粒剤、丸剤、トローチ錠
など）、半固体形態（例えば坐剤、軟膏など）又は液体
形態（注射剤、、乳剤、懸濁液、ローション、スプレー
など）のいずれかの製剤形態に調製して用いることがで
きる。しかして、上記製剤に使用し得る無毒性の添加物
としては、例えばでん粉、ゼラチン、ブドウ糖、乳糖、
果糖、マルトース、炭酸マグネシウム、タルク、ステア
リン酸マグネシウム、メチルセルロース、カルボキシメ
チルセルロース又はその塩、アラビアゴム、ポリエチレ
ングリコール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸アルキルエステ
ル、シロップ、エタノール、プロピレングリコール、ワ
セリン、カーボワックス、グリセリン、塩化ナトリウ
ム、亜硫酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、クエン酸等
が挙げられる。該薬剤はまた、治療学的に有用な他の薬
剤を含有することもできる。

【００３２】該薬剤中における本発明の化合物の含有量
はその剤形に応じて異なるが、一般に固体及び半固体形
態の場合には０．１〜５０重量％の濃度で、そして液体
形態の場合には０．０５〜１０重量％の濃度で含有して
いることが望ましい。

【００３３】本発明の化合物の投与量は、対象とする人
間をはじめとする温血動物の種類、投与経路、症状の軽
重、医者の診断等により広範に変えることができるが、
一般に１日当たり、０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ程度とす
ることができる。しかし、患者の症状の軽重、医者の診
断に応じて上記範囲の下限よりも少ない量又は上限より
も多い量を投与することはもちろん可能である。上記投
与量は１日１回又は数回に分けて投与することができ
る。

【００３４】

【実施例】以下、参考例及び実施例により本発明をさら
に説明する。

【００３５】なお、参考例及び実施例において用いる化
合物番号に対応する化合物の構造については、以下のフ
ローシートを参照されたい。ここで、Ｂｕ^tはｔｅｒｔ
−ブチル基、Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
基、Ｂｚｌはベンジル基、Ｍｅはメチル基を表わし、Ｒ
は前記の意味を有する。

【００３６】

【化７】

【００３７】参考例１ 化合物１ ８３０．７ｍｇ（１．７１ミリモル）を氷冷
下５０％トリフルオロ酢酸／ジクロルメタン２０ｍｌに
溶かし、室温にて２時間撹拌したのち減圧乾固し、残渣
をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）５ｍｌに溶かし氷冷
下トリエチルアミン２．４ｍｌを加えて減圧乾固する。

【００３８】一方、化合物２ ６４４．３ｍｇ（１．７
１ミリモル）を氷冷下４Ｎ塩化水素／ジオキサン８．６
ｍｌに溶かし、室温で１．５時間撹拌したのち減圧乾固
する。

【００３９】この両方を合わせてＤＭＦ７ｍｌに溶か
し、氷冷撹拌下シアノリン酸ジエチル（ＤＥＰＣ）３５
２ｍｇ（２．１６ミリモル）とトリエチルアミン０．５
３ｍｌ（３．８２ミリモル）とを加え、０゜から室温に
て一夜撹拌をつづける。反応液を酢酸エチル−ベンゼン
（４：１）混液でうすめ、飽和重曹水および飽和食塩水
で洗浄し乾燥する。溶媒を留去して残る油状物１．３５
ｇをヘキサン−メタノール−ジクロルメタン（４：５：
１５）を溶出液とするセファデックスＬＨ−２０のカラ
ムクロマトグラフィで精製して、目的の化合物３を無定
形物として得た。１．０６ｇ（収率８９．７％）。

【００４０】［α］²⁸ _D−48.2゜(c=0.375, MeOH)¹ H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.27(3H, d, J=6.8H
z)、1.6-2.2(m)、2.25(6H, s)、2.3-2.6(m)、3.02(3H,
s)、3.30(3H, s)、3.35(3H, s)、3.9-4.3(m)、4.80(1H,
dd, J=9.2Hz, 6.4Hz)、5.13(2H, s)、6.86(1H, br.
d)、7.34(5H, s)。

【００４１】参考例２ 化合物３ ６８８ｍｇ（１．００ミリモル）をｔ−ブタ
ノール−水（９：１）１０ｍｌに溶かし、５％パラジウ
ム炭素０．１ｇを加え、水素気流下５時間撹拌する。触
媒を濾別、洗浄し、濾洗液を減圧乾固して、目的の化合
物４を無色泡状物として得た。５９０ｍｇ（収率９８．
７％）。

【００４２】［α］²⁶ _D−57.3゜(c=0.955, MeOH)¹ H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.17(3H, d, J=4.4H
z)、1.6-2.2(m)、2.54(6H, s)、3.04 and 3.08(3H,
s)、3.27 and 3.31(3H, s)、3.36 and 3.42(3H, s)、4.
0-4.3(m)、4.6-5.0(m)、5.0-5.4(m)、6.97(1H, br.
d)。

【００４３】実施例１ 化合物４ ３０mg（５０マイクロモル）、（Ｒ）−２−
ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミン塩酸塩１０ｍｇ
（５８マイクロモル）をＤＭＦ０．５ｍｌに溶かし、氷
冷撹拌下でＤＥＰＣ９．５ｍｇ（５８マイクロモル）と
トリエチルアミン１６μｌ（１１．５マイクロモル）を
加え、０゜から室温にて一夜撹拌をつづける。反応液を
ジクロルメタンでうすめ、飽和重曹水および飽和食塩水
で洗浄、乾燥し、溶媒を留去して残った残渣を分取ＴＬ
Ｃ（展開溶媒：ジクロルメタン−メタノール（１０：
１））、ついでヘキサン−メタノール−ジクロルメタン
（４：５：１５）を溶出液とするセファデックスＬＨ−
２０のカラムクロマトグラフィで精製して、目的の化合
物５−Ａ（化合物５においてＲが（Ｒ）−２−ヒドロキ
シ−２−フェニルエチルアミノ基である化合物）を無定
形物として得た。２５．１ｍｇ（収率６９．９％）。

【００４４】［α］²³ _D−43.8゜(c=0.319, MeOH)¹ H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.27(3H, d, J=7.0H
z)、1.6-2.2(m)、2.27(6H, s)、2.3-2.6(m)、3.02(3H,
s)、3.32(3H, s)、3.43(3H, s)、3.82(1H, br. d)、4.0
-4.2(m)、4.77(1H, dd, J=9.0Hz, 6.8Hz)、6.6-7.0
(m)、7.2-7.5(5H, m)。

【００４５】実施例２ 実施例１と同様にして化合物４と（Ｓ）−２−ヒドロキ
シ−２−フェニルエチルアミンとから化合物５−Ｂ（化
合物５においてＲが（Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−フェ
ニルエチルアミノ基である化合物）を得た（収率７９．
１％）。

【００４６】［α］²⁸ _D−44.5゜(c=0.330, MeOH)¹ H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.26(3H, d, J=7.0H
z)、1.5-2.2(m)、2.65(6H, s)、3.02(3H, s)、3.32(3H,
s)、3.40(3H, s)、3.85(1H, dd, J=9.5Hz, 1.5Hz)、4.
0-4.2(m)、4.71(1H, dd, J=8.1Hz, 6.8Hz)、4.8-5.1
(m)、6.7-6.9(m)、7.2-7.5(5H, m)。

【００４７】実施例３ 実施例１と同様にして化合物４とｄｌ−ｔｒａｎｓ−２
−フェニルシクロプロピルアミンとから化合物５−Ｃ
（化合物５においてＲが２−フェニルシクロプロピルア
ミノ基である化合物）を得た（収率８２．１％）。

【００４８】［α］²⁴ _D−52.4゜(c=0.354, MeOH)¹ H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.2(m)、1.2-1.4(m)、1.6-2.2
(m)、2.37(6H, s)、3.02(3H, s)、3.33 and 3.35(3H,
s)、3.41(3H, s)、3.8-4.3(m)、4.76(1H, dd, J=8.7Hz,
6.9Hz)、7.26(5H, s)。

【００４９】実施例４ 実施例１と同様にして化合物４と１，２，３，４−テト
ラヒドロイソキノリンとから化合物５−Ｄ（化合物５に
おいてＲが１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン
−２−イル基である化合物）を得た（収率６６．２
％）。

【００５０】［α］²³ _D−48.2゜(c=0.320, MeOH)¹ H-NMR(CDCl₃,δ) 0.6-1.1(m)、1.1-1.3(m)、1.5-2.2
(m)、2.55(6H, s)、2.7-3.0(m)、3.00(3H, s)、3.30(3
H, s)、3.44(3H, s)、3.55-4.0(m)、4.0-4.3(m)、4.5-
5.0(m)、7.15 and 7.19(4H, s)。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 杉村 明広 神奈川県川崎市中原区下小田中１−22−12 (72)発明者 小林 基博 神奈川県川崎市高津区千年458−２

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式 【化１】 式中、Ｒは（Ｒ）−又は（Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−
   フェニルエチルアミノ基、２−フェニルシクロプロピル
   アミノ基又は１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリ
   ン−２−イル基を表わす、で示されるペプチド誘導体又
   はその塩。