JPH09503757A

JPH09503757A - 新規ビスヒスピジン誘導体、それらの製造方法及びそれらの化合物を含有する医薬製剤

Info

Publication number: JPH09503757A
Application number: JP7509552A
Authority: JP
Inventors: フォス，エドガー; ライター，ルドルフ; キルペルト，クラウス
Original assignee: ベーリンガーマンハイムゲゼルシャフトミットベシュレンクテルハフツング
Priority date: 1993-09-22
Filing date: 1994-09-17
Publication date: 1997-04-15
Also published as: CA2172256A1; DE4332203A1; DE59403326D1; ATE155136T1; US5731344A; EP0720608B1; WO1995008547A1; EP0720608A1; AU7808394A

Abstract

(57)【要約】本発明は、新規なビスヒスピジン誘導体、それらの製造方法及びそれらの化合物を含有する医薬製剤に関する。この新規メチレン−ビスヒスピジン誘導体は、後期糖尿病損傷の予防及び治療並びにアテローム性動脈硬化症及び動脈硬化症の予防及び治療のために使用することができる。

Description

【発明の詳細な説明】新規ビスヒスピジン誘導体、それらの製造方法及びそれらの化合物を含有する医薬製剤本発明は、メチレン−ビスヒスピジン誘導体、それらの製造方法、及びそれらの化合物を含有する医薬製剤に関する。本発明は、次の一般式（Ｉ）：（式中、Ａは水素、Ｃ₁−Ｃ₁₆アルキル、Ｃ₃−Ｃ₆シクロアルキル、次の基：を表わし、ここでＲ₁〜Ｒ₅は同時に又は他とは独立に、水素、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₆アシルオキシ、Ｃ₁−Ｃ₆アルコキシ、ベンジルオキシ、ハロゲン、シアノ、カルボキシ、アミノ、フェニル、アルキルチオ、カルボキシアルキル、ヘテロアルキル又はエステル基を表わし；Ｘは−ＣＲ₆＝ＣＲ₇−，−ＣＲ₈＝Ｎ−，−Ｎ＝ＣＲ₉−、酸素又は硫黄であり；Ａは−ＣＲ₆＝ＣＲ₇−，−ＣＲ₁₁＝Ｎ−，ＮＲ₁₀、酸素又は硫黄であり；Ｚは＝ＣＲ₁₁又は窒素であり、ここで、Ｒ₆〜Ｒ₁₁は他から独立に、水素、メチル、ハロゲン又はカルボキシを表わし；そしてＷは水素、場合によってはハロゲンにより置換されているＣ₁〜Ｃ₄アルキル、アリールアルキル、カルボキシ又はカルボキシエステルである）により表わされるメチレン−ビスヒスピジン誘導体、並びにその生理的に耐えられる塩又はエステルに関する。前記のアルキル、アルコキシ、アシルオキシ、アルキルチオ、カルボキシアルキル又はヘテロアルキル基中のアルキル基は直鎖でも分枝鎖でもよい。本発明におけるＣ₁−Ｃ₆アルキル残基はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル又はヘキシルである。ヘテロアルキルは、窒素、酸素又は硫黄により置換されたＣ₁−Ｃ₄アルキルである。アリールアルキルは、場合によってはハロゲン、ヒドロキシ又はメチルにより置換されたフェニル基がＣ₁−Ｃ₄アルキルに連結されたものである。カルボキシアルキルはＣ₁ −Ｃ₄アルキル基に連結されたカルボキシル基である。ハロゲンは本来、塩素、臭素又はヨウ素であり、好ましくは塩素である。驚くべきことに式（Ｉ）の化合物は価値ある薬理学的性質を有することが見出された。特に、これらは、後期糖尿病合併症の発達のために意味があることが示されている（A.Cerami，Trends Biochem，Sci．11，311（1980））AGE（進行したグリコシル化最終産物； Advanced Glycosylation Endproducts）の形成を阻害する。従って、血漿蛋白質をグリコースと共にインキュベートすることによりそれらの非酵素的グリコシル化をインビトロで刺激することができ、これらの蛋白質の再注入がインビボで典型的な後期糖尿病損傷を導く（H．Vlassaraら、Biabetes 41，Supp,１，９Ａ（1992））。AGEは系球体基礎膜の厚化に関与し、その過程は腎不全(renal insufficiency)及び腎機能不全(renal failure)を生じさせる。眼のレンズの蛋白質であるクリスタリン（crystallin）の非酵素的グリコシル化は SH基のジスルフィドへの酸化による三次構造の変化及び重合を導き、糖尿症性白内障の形成をもたらす(U．Monnier，Clin．Endocrinol．Metab．11，431(1982)) 。非酵素的グリコシル化の最終生成物により生ずる蛋白質の架橋がコラーゲンの溶解性を低下させ、そして血管の硬化症に関与する（H．Rosenburgら、Biochem ．Biophys．Res．Commun．91，498(1979)）。さらなる結果は低密度リポ蛋白質の捕捉である(M．Brownleeら、Science 232，1629(1986))。内皮上でのこれらの LDL蛋白質の極在は、アテローム性の動脈硬化の強い刺激となる（D．Steinberg ら、J．Clin．Invest.，88，1785（1991）；D．Leake，Current Opinion in Lip ido logy，２，301（1991））。従って、式（Ｉ）の化合物は、後期糖尿病損傷（例えば、網膜症、腎臓病症及び、神経症）の予防及び治療のため、並びにエテローム性動脈硬化症及び動脈硬化症の予防及び治療のために適当である。一般式（Ｉ）の好ましい化合物は、Ａが水素、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₃−Ｃ₆シクロアルキル、又は次の基：（式中、Ｒ₁及びＲ₅は水素である）である化合物である。一般式（Ｉ）の特に好ましい化合物はＲ³が水素、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ、シアノ、カルボキシ又はハロゲンであり、Ｒ²及びＲ⁴が他から独立にそしてＲ³から独立に、水素、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキルオキシ又はＣ₁−Ｃ₄ アルキルであり、そしてＲ₁及びＲ₅が水素原子である化合物である。一般式（Ｉ）の特に好ましい化合物は、Ａが次の基：（式中、Ｘは−CH＝CH−，NH，−CH＝Ｎ、酸素又は硫黄であり；Ｙは−CH＝CH−，−CH＝Ｎ−又は硫黄であり；そしてＸは＝CH−又は窒素である）を示す化合物である。一般式（Ｉ）中のＷは好ましくは水素、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル又はカルボキシルエステルである。Ａ及びＷが前記の意味を有する式（Ｉ）の化合物は、ヒスピジン（II）と、式（II）のアルデヒド又はケトンとの縮合：により製造され、この場合Ａ及びＷは前記の意味を有する。この反応は、極性有機溶剤中で好ましくはプロトン性溶剤、例えば単純脂肪族アルコール、特にメタノール又はエタノール中で触媒量の鉱酸、例えば塩基又は硫酸の存在下で、前記２つの化合物を加熱することにより行なうことができる。反応はまた、二極性非プロトン性溶剤、例えばジメチルホルムアミド中で、触媒として酢酸ピペリジンを添加して、トルエンと共に共沸脱水しながら行なうこともできる。一般式（Ｉ）の合成された化合物が酸性又は塩基性であれば、所望であれば、生理的に耐えられる塩に転換することができ、そしてカルボン酸の場合には、生理的に許容されるアルコールを用いてそれらをエステルに転換することができる。生理的に許容される無機又は有機塩基、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、メチレングルコサミン、モルホリン又はエタノールアミンが一般式（Ｉ）のカルボン酸からの塩の形成のために適当である。一般式（Ｉ）の塩基と共に塩を形成するのに適当な酸は例えば塩酸、硫酸、酢酸、クエン酸、マレイン酸、フマル酸、及び酒石酸である。一般式（Ｉ）の化合物がカルボキシル官能基を含有する場合、考慮しているこれらのカルボン酸のエステルは、低級一価アルコール（例えば、メタノール又はエタノール）と共に、あるいは多価アルコール（例えば、グリゼールのごとき）と共に生成されるエステルである。一般式（Ｉ）の化合物の製造のために使用される出発化合物ヒスピジン（II）は、R.L.Edwardsら（ポリホルス・ヒスピズス（Polyporus hispidus）から単離；J．Chem．Soc．1961，4995）及びA．Uenoら（ファエオルス．シュバイニッチー（Phaeolus schweinifziiから単離；Chem．Pharm．Bull．12，376（1964））によりほとんど同時に発見されそして特徴付けられた。しかしながら、担糸菌からの抽出によって得ることができるヒスピジンの量は、広範な合成及び深い薬理学的研究のための出発物質として役立つにはあまりに少なすぎる。従って、ヒスピジンの効果的な化学的製造方法の開発が緊急に求められていた。最初のしかしあまり効果的ではないヒスピジン合成がEdwardsらにより1961年に記載された。この方法においては、３，４−ジ（メトキシメトキシ）ベンズアルデヒドを、メタノール中マグネシウムメタノレートの存在下で４−メトキシメトキシ−６−メチル−２−ピロンと反応せしめるが生成物の非常に複雑な混合物が生成するので、収率はヒスピジンのわずか２％である。メタノール中マグネシウムメタノレートの存在下での３，４−ジ（メトキシメトキシ）ベンズアルデヒドと４−メトキシ−６−メチル−２−ピロンとの反応が、上に引用した刊行物における代替法として述べられる。これに続くアルカリ鹸化及び酸再閉環が非常に複雑な反応混合物を導き、生成したヒスピジンは、ド− Ｏ−アセチル化合物としてアセチル化した後にのみ単離することができる（収率５％）。次に、遊離ヒスピジンの単離は、大きなロスを伴うさらなる段階を必要とする。 Edwardsらにより記載された両方法において、使用される出発物質の調製はさらに、工学的適用を実際的には排除する高度に発癌性のクロロメチルエーテルの使用を必要とする。従って本発明の対象は、リチウムジイソプロピルアミドの存在下での３，４− ジベンジルオキシ−ベンズアルデヒド（IV）と４−ベンジルオキシ−６−メチル −２−ピロンＶとの反応に基礎を置く方法である。生成するアルドール化合物VI は非常に穏和な条件下で触媒的水素化により脱ベンジル化してテトラヒドロキシ化合物VIIを生成せしめることができる。このものは、希酸により容易にヒスピジン（II）に脱水される。本発明の方法は30％の非常に再現性のよい全収率（IV →II）を有し、そしてそれ故にヒスピジンの調製のために従来から知られていた方法に対して非常に卓越している。医薬製剤の製造のため、一般式（Ｉ）の化合物が適当な医薬キャリー質、芳香物質、香味料及び色素と周知の方法で調合され、そして例えば錠剤又は糖衣丸に形成され、あるいは水又は油、例えばオリーブ油に、対応する助剤の添加と共に懸濁又は溶解される。一般式（Ｉ）のメチレン−ビスヒスピジン誘導体は液体又は固体の形で経口投与又は非経口投与することができる。注射溶液のための通常の安定剤、溶解剤及び／又は緩衝剤を含有する水が注射媒体として好適に使用される。この様な添加剤は、例えば、酒石酸緩衝液又は硼酸緩衝液、エタノール、ジメチルホキシド、錯化剤（例えば、エチレンジアミン四酢酸）、粘度調製用高分子ポリマー（例えば、液体ポリエチレンオキサイド）、又はソルビトール無水物のポリエチレン誘導体である。固体キャリヤーは例えば澱粉、ラクトース、マンニトール、メチルセルロース、タルク、高分散珪酸、高分子量ポリマー（例えば、ポリエチレングリコール）である。経口投与のために適当な調製物は、所望により、香味料及び甘味料を含有することができる。投与量は年令、受容者の健康状態及び体重、病気の重症度、所望により同時に行われる他の治療のタイプ、並びに望まれる効果のタイプに依存する。活性成分の用量に過労0.1〜50mg／kg体重である。１日当り１回又は数回の投与で0.5〜 40mg／kg／日、そして好ましくは1.0〜20mg／kg／日が通常、所望の結果を得るために効果的である。本発明の意味において、実施例に記載する化合物に加えて下記の化合物、及び請求項に記載する置換基のすべての意味の組合せにより導かれる化合物であって、場合によっては塩又はエステルとして存在してもよいものが、考慮される。１．３，３′−（４−ヒドロキンベンジリテン）ビス（〔６−〔２−（３，４ −ジヒドロキシフエニル）ビニル〕−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕２．３，３′−（２−ピロリルメチレン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル〕−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕３．３，３′−（２−フェニルエチリデン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル〕−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕４．３，３′−（４−カルボキシベンジリデン）ビス〔６−〔２−（３，４− ジヒドロキシフェニル）ビニル〕−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕適用の例ヒスピジン（II）の合成ｉ）４−ベンジルオキシ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２−オン（Ｖ） 124.4ｇ（0.900mol）の炭酸カリウム及び63ml（0.547mol）の塩化ベンジルを、900mlの無水、ジメチルホルムアシド中56.7ｇ（0.450mol）の４−ヒドロキシ −６−メチル−２Ｈ−ピラン−２−オンAm1.0ｇ（0.004mol）の18−クラウン− ６の溶液に連続して添加した。これを、70〜75℃の内部温度において４、５時間激しく攪拌した。これを吸引濾過し、そして残渣を酢酸エチルでよく洗浄した。一緒にした溶液を真空中で十分に蒸発せしめ、そして次に氷水に注いだ。吸引した沈澱物をヒーブチルメチルから再結晶化し、乾燥後69.0ｇ（71％）の化合物（Ｖ）を得た。 ii）４−ベンジルオキシ−６−〔２−（３，４−ジベンジルオキシフェニル）−２−ヒドロキシエチル〕−２Ｈ−ピラン−２オン（VI） 150mlのテトラヒドロフラン中10.1ｇ(14.0ml，100mmol)のジイソプにピルアミンの溶液を、窒素の下−78℃にて、41.0ml(95mmol)のブチルリチウム（Ｍ−ヘキサン中2.3Ｍ）と混合した。100mlの無水テトラヒドロフラン中19.0ｇ（88mmol）の４−ベンジルオキシ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２オン（Ｖ）の溶液を滴加した後、−78℃にてさらに45分間攪拌し、そして次に150mlの無水テトラヒドロフラン中12.8g（40mmol）の３，４−ジベンジルオキシベンズアルデヒド（IV）の溶液を滴加した。内部温度が徐々に−30℃に上昇し、そしてこれを過剰量の飽和塩化アンモニアム溶液と混合した。６Ｎ HClにより酸性にした後、酢酸エチルにより抽出し、一緒にした有機相を乾燃し、そして蒸発せしめた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（移動相：酢酸エチル／ヘプタン１：２）による残渣の精製が14.4ｇ（68％）の化合物（VI）をもたらした。融点109−1 10℃（エーテル）。 iii）４−ヒドロキシ−６−〔２−（３，４ジヒドロキシフエニル）−２−ヒドロキシエチル〕−２Ｈ−ピラン−２−オン（VII ） 35.6ｇ（66.6mmol）の４−ベンジルオキシ−６−〔２−〔３，４−ジベンジルオキシフェニル）−２−ヒドロキシ−エチル）〕−２Ｈ−ピラン２−オン（VI）を、６時間室温にて、44mbarの水素圧のもとで1200mlのエタノール中で10ｇＷ２ラネーニッケルを用いて水素化した。4.4Ｌの水素を吸収した後、吸引濾過により触媒を除去し、そしてテトラヒドロフランにより数回再洗浄した。蒸発した溶液をエーテルと共にすりつぶした後、12.2（70％）の化合物（VII）が得られた。融点153℃（分解）。 iv）６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル〕−４ −ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン（ヒスピジン）（II）２mlの３Ｎ HClを、8.0ｇ（30mmol）の４−ヒドロキシ−６−〔２−（３，４ −ジヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシエチル〕−２Ｈ−ピラン−２オン（ VII）と300mlのテトラヒドロフランとの懸溶液に加えた。生ずる透明石溶液を、もはや出発物質が検出できなくなるまで（TLCコントロール、移動相：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸）還流下で２〜３時間加熱した。硫酸ナトリウムで乾燥した後、溶液を強く蒸発せしめ（残留体積約50ml）、そしてエーテルとの混合により結晶化させた。収量4.7ｇ（63％）のヒスピジン（II）。融点232-234℃（分解）、又は融点253℃（分解；トルエン／ギ酸エチルからの針状の束）。一般式（Ｉ）のメチレン−ビスピジン誘導体の合成実施例1. ３，３′−（４−クロロベンジリデン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル〕−４ −ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕(1) 49ｇ(0.02mol)のヒスピジンを、100mlのメタノール中7.0ｇ(0.05mol)の４−クロロベンズアルデヒドの溶液に添加し、そしてこれを次に2.0mlの塩酸と混合した。この混合物を50℃にて、反応が完了するまで（TLCにより工程をモニターした；種溶剤：トルエン／ギ酸エチル／ギ酸５：４：１）攪拌した。反応混合物を 500mlの水に攪拌しながら入れ、そして褐色の沈殿物を吸引濾取した（収量6.1ｇ）精製のため、酢酸エチル／ヘプタンから沈澱せしめた。3.1ｇ（50％）。融点1 93℃（分解）。実施例2. ３，３′−（４−メチレンベンジリデン）ビス〔６− 〔２−（３，４ジヒドロキシフェニル）ビニル〕−４ −ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕(2) 実施例１と同様にして、ヒスピジンと４−メチルベレズアルデヒドとから得た化合物を、シリカゲル上でのフラッシュクにマトグラフィー（移動溶剤：トルエン／ジオキサン／氷酢酸72:20:8）による吸引粗生成物の精製の後、エーテルと共に攪拌した。収率43％、融点192℃（分解）。実施例3. ３，３′（３−ヒドロキシ−４−メトキシベンジリデン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル〕−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２− オン〕（３）実施例２と同様にして、ヒスピジンと３−ヒドロキシ−４−メトキシベンズアルデヒドから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、 0.5％ギ酸。収率36％。融点181℃（分解）。実施例4. ３，３′（４−ヒドロキシ−3.5−（ビス−１，１− ジメチルエチル）ベンジリデン〕ビス〔６−〔２−（ 3.4 −ジヒドロキシフェニル）ビニル〕−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン）(4) 実施例２と同様にして、ヒスピジンと４−ヒドロキシ−3.5−（ビス−１，１− ジーメチルエチル）−ベンズアルデヒドから得た。移動溶剤トルエン／ジオキサン／氷酢酸72:20:8）。収率40％融点148℃（分解）。実施例5. ３，３′−（４−メトキシベンジリデン）ビス〔６− 〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４ −ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕(5) 実施例２と同様にして、ヒスピジンと４−メトキシベンズアルデヒドとから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、１％ギ酸。収率28 ％。融点167℃（分解）。実施例6. ３，３′−（３，４−ジメトキシベンジリデン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕(6) 実施例２と同様にして、ヒスピジンと３，４−ジメトキシ−ベンズアルデヒドとから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸。収率32％。融点177℃（分解）。実施例7. ３，３′−（３，４−ジヒトロキシベンジリデン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕(7) 実施例２と同様にして、ヒスピジンと３，４−ジヒドロキシ−ベンズアルデヒドとから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、１％ギ酸。収率41％。融点238℃（分解）。実施例8. ３，３′−（４−シアノベンジリデン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４− ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕(8) 実施例１と同様にして、ヒスピジンと４−シアノベンズアルデヒドとから得た。酢酸エチル／ヘブタンから再結晶化した。収率41％。収率41％。融点198℃（分解）。実施例9. ３，３′−ベンジリデンビス〔６−〔２−（３，４− ジヒドロキシフェニル）ビニル−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕（９）実施例２と同様にして、ヒスピジンとベンズアルデヒトとから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸。収率33％。融点1 63℃（分解）。実施例10．３，３′−メチレンビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４−ヒドロキシ−２Ｈ− ピラン−２−オン〕（10）実施例２と同様にして、1.00ｇ（4.00mmol）のヒスピジンと15ml（0.2mol）の 35％ホルマリン溶液から得た。テトラヒドロフラン／イソヘキサンから再沈澱した。収率28％。融点290℃（分解）。実施例11．３，３′（２−チエニルメチレン）ビス〔６−〔２− （３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕（11）実施例２と同様にして、ヒスピジンとチオフエン−２−アルデヒドから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸。収率31 ％。融点＞300℃。実施例12．３，３′−（２−ピリジルメチレン）ビス〔６−〔２ −（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕塩酸塩（12）実施例１と同様にして、ヒスピジンとピリジン−２−アルデヒドとから得た。吸引した沈澱物を酢酸エチルで充分に洗浄した。収率 55％。融点228％（分解）。実施例13．３，３′−（３，４，５−トリメトキシベンジリデン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕（13）実施例２と同様にして、ヒスピジンと３，４，５−トリメトキシベンズアルデヒドとから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0. 5％ギ酸。収率30％。融点208℃（分解）。実施例14．３，３′−（４−チエニルメチレン）ビス〔６−〔２ −（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕（14）実施例２と同様にして、ヒスピジンとチオフェン−３−アルデヒドとから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸。収率35 ％。融点243℃（分解）。実施例15．３，３′−（１−ヘキシリデン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕（15）実施例２と同様にして、1.00ｇ（4.00mmol）のヒスピジンと9.6ml(80mmol)のヘキサメールとから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸。収率45％。融点109℃（分解）。実施例16．３，３′−（２−イミダゾリルメチレン）ビス〔６− 〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４ −ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕塩酸塩（16 ）実施例２と同様にして、ヒスピジンイミダゾール−２−アルデヒドとから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸。収率４％。融点147℃（分解）。実施例17．３，３′−（４−ブロモベンジリデン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４− ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕（17）実施例２と同様にして、ヒスピジンと４−ブロモベンズアルデヒドとから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸。収率2 7％。融点228℃（分解）。実施例18．３，３′−（４−ベンジルオキシベンジリデン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕（18 ）実施例２と同様にして、ヒスピジンと４−ベンギルオキシベンズアルデヒドとから得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸。収率11％。融点180℃（分解）。実施例19．３，３′−メトキシカルボニルメチレンビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４− ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕（19）実施例２と同様にして、ヒスピジンとグリオキサル酸から得た。移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸。収率18％。融点203℃ （分解）。実施例20．３，３′−（シクロヘキシルメチレン）ビス〔６−〔２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）ビニル−４− ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン〕（20）実施例２と同様にして、1.00ｇ（4.00mmol）のヒスピジンと6.7ｇ(60mmol)のシクロヘキサンアルデヒドとから、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（移動溶剤：トルエン／ギ酸エチル／メタノール５：４：１、0.5％ギ酸）による吸引沈澱物の精製により得た。収率36％。融点154℃（分解）。実験の記載リゾチームを、100mmol／Ｌのリン酸カリウム緩衝液ＣpH7.4)に20mg／mlの最終濃度で溶解する。4.5mmol／Ｌのナトリウムアジドを防腐剤として添加する。2 00mmol／Ｌのグルコース又はキシロースの添加によりAGEの形成を開始する。被検物質又は参照物質を種々の濃度で加えてAGE形成に対する阻害活性を定量する。溶剤対照及び対照混合物も、補正の目的で200ml／Ｌのソルビトール又はキシリットの存在下で実験する。反応混合物のインキュベーション期間は、使用する糖に依存して24〜120時間であり、主としてダイマーが生成し、他のより高い分子量のオリゴマー生成物がわずかにしか生成しないように選択する。サンプルを調製し、そしてSDSゲル電気泳動を文献に従って行う。要約すれば、サンプルを４倍量の同じ緩衝液（50mmol／Ｌ Tris酢酸、pH7.5、１％ SDS、５mmol／Ｌジチオスレイトール）で希釈し、そして95℃にて３分間加熱する。アリコートを８〜18％グラジエント〜SDSゲルに適用する。分子量を決定するため、14〜340kDの範囲の分子量マーカーも使用する。次の操作条件下で分子量による分離を行う：電圧：600Ｖ、電流強度：50mA、電力：30Ｗ、討験時間：60分間。ゲル電気泳動の後、標準的方法に従ってゲルを固定し、そしてクマッシーブルーにより染色する。一夜脱色及び乾燥を行った後、ゲルをデンシトメーターにより測定する（Pharmaua Ultra Scan XL，GelScan XLソフトウェアー使用）。被検物質の限界濃度及びIC₅₀値を決定するため、物質の討験濃度に対して、半対数的にダイマーの形成をプロットし、そして上記のパラメーターを計算する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/44 9454−4ＣＡ６１Ｋ 31/44 Ｃ０７Ｄ 405/14 ２０９ 9159−4ＣＣ０７Ｄ 405/14 ２０９２１３ 9159−4Ｃ２１３２３３ 9159−4Ｃ２３３ 409/14 ３０９ 9159−4Ｃ 409/14 ３０９ (72)発明者キルペルト，クラウスドイツ連邦共和国，デー―68305 マンハイム，エシェンホフ５

Claims

【特許請求の範囲】１．次の一般式（Ｉ）：（式中、Ａは水素、Ｃ₁−Ｃ₁₆アルキル、Ｃ₃−Ｃ₆シクロアルキル、次の基：を表わし、ここでＲ₁−Ｒ₅は同時に又は他として独立に、水素、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₆アシルオキシ，Ｃ₁−Ｃ₆アルコキシ、ベンジルオキシ、ハロゲン，シアノ、カルボキシ、アミノ、フェニル、アルキルチオ、カルボキシアルキル、ヘテロアルキル又はエステル基を表わし；Ｘは−CR₆＝CR₇−、−CR₈＝Ｎ−、−Ｎ＝CR₉−、酸素又は硫黄であり；Ａは−CR₆＝CR₇−、−CR₁₁＝Ｎ−、NR₁₀、酸素又は硫黄であり；Ｚは−CR₁₁又は窒素であり、ここで、Ｒ₆−Ｒ₁₁は他から独立に、水素、メチル、ハロゲン又はカルボキシを表わし；そしてＷは水素、場合によってはハロゲンにより置換されているＣ₁−Ｃ₄アルキル、アリールアルキル、カルボキシ又はカルボキシエステルである）により表わされるメチレン−ビスヒスピジン誘導体、並びにその生理的に耐えられる塩又はエステル。２．Ａが水素、Ｃ₁−Ｃ₆がキル、Ｃ₃−Ｃ₆シクロアルキル、又は次の基：（式中、Ｒ₁及びＲ₅は水素である）である、請求項１に記載のメチレン−ビスヒスプジン誘導体。３．Ｒ³が水素、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ、シアノ、カルボキシ又はハロゲンであり、Ｒ²及びＲ⁴が他から独立にそしてＲ³から独立に、水素、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ又はＣ₁−Ｃ₄アルキルである。請求項２に記載のメチレン−ジスヒスピジン誘導体。４．Ａが次の寸：（式中、Ｘは−CH＝CH−、NH、−CH＝Ｎ、酸素又は硫黄であり；Ｙは−CH＝CH−、−CH＝Ｎ−又は硫黄であり；そしてＸは＝CH−又は窒素である）を示す請求項１に記載のメチレン−ビスヒスピジン誘導体。５．Ｗが水素、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル又はカルボキシルエステルである。請求項１〜４のいずれか１項に記載のメチレン−ビスヒスピジン誘導体。６．請求項１〜５のいずれか１項に記載の少なくとも１種のメチレン−ヒスピジン誘導体並びに通常のキャリヤー及び助剤物物質を含有する医薬製剤。７．後期糖尿病損傷、アテローム性動脈硬化症及び動脈硬化症の予防及び治療のための、請求項１〜４のいずれか１項に記載のメチレン−ビスヒスピジン誘導体の使用。８．請求項１〜５のいずれか１項に記載の一般式（Ｚ）のメチレン−ビスヒスピジン誘導体の製造方法であって、ヒスピジン（II）：を、次の式（III）：（式中、Ａ及びＷは前記の意味を有する）で示されるアルデヒド又はケトンと、触媒量の鉱酸の存在下で極性有機溶剤中で、又は触媒量の酢酸ピペリジンの存在下で二極性非プロトン性溶剤中共沸脱水条件下で加熱することにより反応せしめることを特徴とする方法。９．前記ヒスピジン（II）を製造するために、３，４−ジベンジルオキシベンズアルデヒド（IV）：と、４−ベンジルオキシ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２−オン（Ｖ）：とを、リチウムジイソプロピルアミドの存在下で反応せしめることにより、アルドール化合物（VI）：を生成せしめ、次にこれを触媒的水素化により脱ベンジル化して、テトラヒドロキシ化合物（VII）：を生成せしめ、そして最後に化合物（VII）を希鉱酸により脱水してヒスピジン（II）を生成せしめる、ことを特徴とする請求項８に記載の方法。