JPH09512827A

JPH09512827A - 抗腫瘍活性を有する半合成タキサン

Info

Publication number: JPH09512827A
Application number: JP8505456A
Authority: JP
Inventors: ボンバルデッリ，エツィオ; デベッリス，パオロ; ブルーノ，ガベッタ
Original assignee: Indena SpA
Current assignee: Indena SpA
Priority date: 1994-07-26
Filing date: 1995-07-21
Publication date: 1997-12-22
Anticipated expiration: 2015-07-21
Also published as: EP0773938B1; CA2195844C; PL187579B1; CN1154109A; RO116549B1; DE69507702D1; CA2195844A1; CN1073105C; FI120398B; US5756776A; CN1120161C; DE69507702T2; SK281526B6; CZ293076B6; BG62851B1; HU222496B1; AU684218B2; CZ19997A3; HUT76829A; NO970296D0

Abstract

(57)【要約】本発明は、１０−デアセチルバッカチンIIIの酸化及び立体特異的な還元、続いて、種々に置換したイソセリン鎖でのエステル化によりタキソール類似体を調製することで得られる新規な誘導体に関する。本発明の生成物は、細胞毒性及び抗腫瘍活性を有し、適切に処方して、注射及び／又は経口投与することができる。

Description

【発明の詳細な説明】抗腫瘍活性を有する半合成タキサンタキサン骨格を有するジテルペン、及び特にタキソールは、多くのヒト腫瘍に対して抗腫瘍活性を有することが知られている。しかし、これらの薬剤、特にタキソールの使用は、望ましくない副作用による幾つかの欠点を有する。この理由から、そして、これらの抗腫瘍剤による治療が速やかに耐性を誘導することから、臨床使用において観察される問題を解消する新規な分子の開発が注目されている。本発明は、半合成により得られ、強力な抗腫瘍活性を有する、新規なタキサン骨格誘導体に関する。本発明の誘導体は、式（１）：を有する。これらは、２つの系列に分類することができる：ａ）１１，１２−位にオレフィン二重結合、そして１０α−位にヒドロキシ又はアシルオキシ基を有する、タキサン誘導体（式（１ａ）のタキサン）、及びｂ）１１及び１２位の炭素原子間に単結合を含有し、１２位のメチルがα−配置を有し、そして１０β位にヒドロキシ又はアシルオキシ基を有する、タキサン誘導体（式（１ｂ）のタキサン）。一般式（１）のタキサンにおいて、Ｒ₁及びＲ₂は、同一であるか又は異なって、Ｃ₁−Ｃ₈アルキル、Ｃ₂−Ｃ₈アルケニル、アリール（好適にはフェニル）又はヘテロアリール基である。Ｒ₂はまた、tert−ブトキシ基であることもできる。式（１ａ）の化合物において、Ｒ₃は、水素であり、そしてＲ₄は、ヒドロキシ又はＣ₂−Ｃ₈アシルオキシ基である。式（１ｂ）の化合物において、Ｒ₃は、ヒドロキシ又はＣ₂−Ｃ₈アシルオキシ基であり、そしてＲ₄は、水素である。式（１）のタキサンは、タキソール及びその類似体の半合成に関する文献に報告されるように、適切に活性化したイソセリン鎖をアシル化剤として使用して、式（２）の新規なシントンを１３−位でエステル化することにより調製される（例えば、EP-A-400971，1992，Fr．Dem．86，10400; E．Didier ら，Tetrahedron Letters 35，2349，1994; E．Didier ら，同文献 35，3063，1994を参照）。式（２）において、１１，１２−位にオレフィン二重結合が存在する場合、Ｒ₃は、水素原子であり、Ｒ₄及びＲ₅は、ヒドロキシ、Ｃ₂−Ｃ₈アシルオキシ、アルキルシリルオキシ又は２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルオキシ基であり；１１，１２−位にオレフィン二重結合が存在しない場合、１２−位のメチルは、α−配置を有し、Ｒ₄は、水素原子であり、Ｒ₃及びＲ₅は、ヒドロキシ、Ｃ₂− Ｃ₈アシルオキシ、アルキルシリルオキシ又は２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルオキシ基である。特に、式（２ａ）のシントンが、式（１ａ）の新規なタキサンの合成に使用される。一方、式（２ｂ）のシントンは、式（１ｂ）の新規なタキサンの合成に利用される。シントン（２ａ）においては、オレフィン二重結合が、１１，１２−位に存在し、そしてＣ₂−Ｃ₈アシルオキシ基、又は場合により保護されたヒドロキシ基が、１０α−位に存在する。したがって、シントン（２ａ）においては、Ｒ₃は、水素であり、Ｒ₄及びＲ₅は、ヒドロキシ、アシルオキシ、アルキルシリルオキシ（トリエチルシリルオキシ、Ｏ−ＴＥＳなど）又は２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルオキシ（Ｏ−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ₂ＣＣｌ₃、Ｏ−ＴＲＯＣ）基である。シントン（２ｂ）においては、１１−及び１２−位の炭素原子は、単結合により結合し、１２−位のメチルは、α−配置を有し、そしてアシルオキシ基、又は場合により保護されたヒドロキシ基が、１０α−位に存在する。したがって、シントン（２ｂ）においては、Ｒ₄は、水素であり、Ｒ₃及びＲ₅は、ヒドロキシ、アシルオキシ、アルキルシリルオキシ（トリエチルシリルオキシ、Ｏ−ＴＥＳなど）又は２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルオキシ（Ｏ−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ₂ＣＣｌ₃、Ｏ−ＴＲＯＣ）基である。イソセリン鎖でシントン（２）を１３−位でエステル化後、文献で既知の従来法により保護基を脱離して、式（１）の新規なタキサンを得る。タキサス・バッカータ(Taxus Baccata)の葉から単離することができる１０− デアセチルバッカチンIII（10-Deacetylbaccatine III）（３）(G．Chauviere ら，C.R．Acad．Sc．Ser．III，293; 591(1981))は、シントン（２ａ）及び（２ｂ）の調製のための単一の出発物質として使用される。文献上知られていない式（２ａ）のシントンは、酢酸銅（II）での１０−位の酸化により（３）からジケトン（４）を得て、次にセリウム（III）塩の存在下で水素化ホウ素ナトリウムで還元することにより得られる（反応式１）。（３）の１０−位におけるエピマーである生じた生成物（２ａ、Ｒ₃＝Ｈ、Ｒ₄ ＝Ｒ₅＝ＯＨ）は、適切には７−及び１０−位で保護して、タキサン（１ａ）の合成に使用される。新規なセコタキサン（５）は、反応式１に示される一連の反応の副生成物として得られる。セコタキサン（５）は、強力な抗腫瘍活性を有する別のタキサンの合成に使用することができる。本発明はまた、半合成により調製される、強力な抗腫瘍活性を有する、新規なセコタキサン−骨格誘導体に関する。この誘導体は、式（５ａ）：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、同一であるか又は異なって、Ｃ₁−Ｃ₂₀アルキル、Ｃ₂− Ｃ₈アルケニル、アリール（好適にはフェニル）又はヘテロアリール基である〕を有する。Ｒ₂はまた、tert−ブトキシであることもできる。式（５ａ）のタキサンは、タキソール及びその類似体の半合成に関する文献に報告されるように、適切に活性化したイソセリン鎖をアシル化剤として使用して、式（５）の化合物を１３−位でエステル化することにより調製される（例えば、EP-A-400,971; E．Didier ら，Tetrahedron Letters 35，2349，1994; E．Did ier ら，同文献 35，3063，1994 を参照）。化合物（５）のヒドロキシ基は、場合により、従来法により適切な保護基で保護することができる。イソセリン鎖で化合物（５）を１３−位でエステル化後、文献で既知の従来法により保護基を脱離して、式（５ａ）のセコタキサンを得る。文献上知られていない式（２ｂ）のシントンも、１０−デアセチルバッカチン III（３）から得られる（反応式２）。ｍ−クロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）による（３）の酸化により、対応する１３−ケト誘導体（６）が得られることが認められている。塩化トリエチルシリル（ＴＥＳＣ１）による７ −位のヒドロキシルの保護後、セリウム（III）塩の存在下で水素化ホウ素ナトリウムで還元することにより、（６）から、式（１ｂ）のタキサンの合成に有用なシントン（２ｂ）（Ｒ₃＝ＯＨ、Ｒ₄＝Ｈ、Ｒ₅＝Ｏ−ＴＥＳ）を得る。シントン（２ｂ）の１２−位のメチルのα−配置は、核磁気共鳴を用いて検討することによって推定された。本発明の生成物は、種々の腫瘍細胞株に対する細胞毒性効果について、タキソールの作用と比較しながらスクリーニングした。表１は、タキソールで得られたＩＣ₅₀と比較した、化合物１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル］−１０−エピ−１０−デアセチルバッカチンIII（１ａ、Ｒ₁＝Ｐｈ、Ｒ₂＝ｔＢｕＯ、Ｒ₃＝Ｈ、Ｒ₄ ＝ＯＨ）、１３− 〔（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル］−１０−デアセチル−１１，１２−ジヒドロバッカチンIII（１ｂ）Ｒ₁＝Ｐｈ、Ｒ₂＝ｔＢｕＯ、Ｒ₃＝ＯＨ、Ｒ₄＝Ｈ）、１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル］−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチンIII（５ａ、Ｒ₁＝Ｐｈ、Ｒ₂＝ｔＢｕＯ）及び１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−イソブチル− ２−ヒドロキシ−３−カプロイルアミノ−プロパノイル〕−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチン（５ａ、Ｒ₁＝イソブチル、Ｒ₂＝カプロイル）のＩＣ₅₀のデータを示す。イソセリン鎖に種々の置換基を有する化合物は、同様の挙動を示す。本化合物は、アドリアマイシン及びｃｉｓ−プラチナなどの他の抗腫瘍物質に耐性である細胞株に対して、タキソールを超える驚くべき利点を示す。タキソールとこれらの生成物の差は、ヒト腫瘍を移植した胸腺欠損ヌードマウスなどの、in vivoモデルにおいてもより明らかである。また、Ｒ₂が、アルキル又はアルケニル基である本発明の化合物は、タキソールやその既知の誘導体とは異なり、驚くべきことに心毒性を有さないことが認められ、したがってタキソールやその既知の誘導体で治療することのできない心疾患患者に好都合に使用することができる。本発明の化合物は、非経口及び経口投与用の適切な医薬処方物への配合に適している。静脈内投与のためには、ポリエトキシル化ヒマシ油及びエタノールの混合物、又は天然ホスファチジルコリンもしくは天然リン脂質の混合物からコレステロールの存在下で調製されたリポソーム製剤が主に使用される。以下に示す実施例により、更に本発明を説明する。実施例１：１０−デヒドロ−１０−デアセチルバッカチンIII（４）の調製１０−デアセチルバッカチンIII（３）１０ｇを、Ｃｕ（ＯＡｃ）₂６５ｇを添加したメタノール３５０mlに懸濁した。この懸濁液を室温で１２０時間連続して撹拌した。塩を濾去し、溶液をシリカゲル１００ｇのクロマトグラフィーに付し、６：４のヘキサン／酢酸エチル混合物で溶出した。リグロインから結晶化させて、（４）（Ｍ＋(m/z)５４２）９．５ｇを得た。実施例２：１０−デアセチル−１０−エピバッカチンIII（２ａ、Ｒ₃＝Ｈ、Ｒ₄ ＝Ｒ₅＝ＯＨ）及びＣ−セコ−１０−デアセチルバッカチンIII （５）の調製メタノール５mlに（４）３００mgを含む溶液に、ＣｅＣｌ₃・３Ｈ₂Ｏ１当量を添加し、室温で５分間撹拌し、次にＮａＢＨ₄８０mgを添加した。この溶液をＮＨ₄Ｃｌ溶液で処理し、酢酸エチルで抽出し、シリカゲルクロマトグラフィーに付し、３：７のヘキサン／酢酸エチル混合物で溶出した。（２ａ）（Ｍ＋(m/z) ５４４）９８mg及び（５）（Ｍ＋(m/z)５４６）１２０mgを得た。１０−デアセチル−１０−エピバッカチンIIIは、以下の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ₃）を有していた：H2，d 5.68 J 6.8; H3，d 4.26 J 6.8; H5，d 5 .03 J 7.1; H7/13，m 4.76; H10，br s 5.20; 10 OH，br s 3.44; H16，s 1.14; H17，s 1.68; H18，s 2.22; H19，s 1.13; H20a，d 4.33; H20b，d 4.18; Ac， s 2.31; Bnz，br 8.12 J 8，br t 7.60 J 8，br t 17.49 J 8。実施例３：１０−デアセチル−１３−デヒドロバッカチンIII（６）の調製メタ−クロロ過安息香酸３ｇ及び酢酸ナトリウム１ｇを、ＣＨ₂Ｃｌ₂１００ml に１０−デアセチルバッカチンIII（３）１ｇを含む懸濁液に添加した。この懸濁液を室温で１２０時間連続して撹拌し、次に５％Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液で希釈した。有機相を５％Ｎａ₂ＣＯ₃で洗浄し、蒸発乾固した。残渣を、シリカゲルで３：７のヘキサン／酢酸エチル混合物で溶出して精製した。（６）（Ｍ＋(m/z)５４２）７８９mgを得た。実施例４：１０−デアセチル−１１，１２−ジヒドロ−７−トリエチルシリル− バッカチンIII（２ｂ、Ｒ₃＝ＯＨ、Ｒ₄＝Ｈ、Ｒ₅＝Ｏ−ＴＥＳ）の調製（６）１．６ｇを塩化メチレンに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン３７０mg及び塩化トリエチルシリル２．５mlを添加した。室温で２時間後、この反応混合物を塩化メチレンで希釈し、水で洗浄した。有機相を濃縮して乾固した。残渣１．７２ｇを得、これを９５％エタノール１５０mlにとり、ＮａＢＨ₄９ｇで処理した。３時間後、この混合物をＮＨ₄Ｃｌ溶液で希釈し、生成物を酢酸エチルで抽出した。７：３のヘキサン／酢酸エチル混合物を使用するシリカゲルクロマトグラフィーに付した後、（２ｂ）（Ｒ₃＝ＯＨ、Ｒ₄＝Ｈ、Ｒ₅＝Ｏ−ＴＥＳ）８００mgを得た。実施例５：１１，１２−ジヒドロ−７−ＴＥＳ−バッカチンIII（２ｂ、Ｒ₃＝ＯＨ、Ｒ₄＝Ｈ、Ｒ₅＝Ｏ−ＴＥＳ）及び１１，１２−ジヒドロバッカチンIII（２ｂ．Ｒ₃＝ＯＡｃ、Ｒ₄＝Ｈ、Ｒ₅＝ＯＨ）の調製１０−デアセチル−１１，１２−ジヒドロ−７−トリエチルシリルバッカチン III（２ｂ、Ｒ₃＝ＯＨ、Ｒ₄＝Ｈ、Ｒ₅＝Ｏ−ＴＥＳ）５００mgを無水ピリジン中で塩化アセチル３当量と０℃で６時間反応させた。この反応混合物を水で希釈し、塩化メチレンで抽出した。溶媒の留去後、残渣をアセトン／ヘキサンから結晶化した。１１，１２−ジヒドロ−７−ＴＥＳ−バッカチンIII（Ｍ＋(m/z)７０２）５１０mgを得た。生成物をメタノールに溶解し、完全に脱シリル化するまで希ＨＣｌで処理した。この反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、水性メタノールから結晶化した。１１，１２−ジヒドロバッカチンIII（Ｍ＋(m/z)５８８）４００mgを得た。実施例６：１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert −ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル〕−１１，１２−ジヒドロバッカチンIII（１ｂ）Ｒ₁＝Ｐｈ、Ｒ₂＝ｔＢｕＯ、Ｒ₃＝ＯＡｃ、Ｒ₄＝Ｈ）の調製１１，１２−ジヒドロバッカチンIII（２ｂ、Ｒ₃＝ＯＡｃ、Ｒ₄＝Ｈ、Ｒ₅＝Ｏ −ＴＥＳ）５００mgを、（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−２，２−ジメチルフェニル−５−オキサゾリジンカルボン酸０．４５ｇ、ジシクロヘキシルカルボジイミド（１．０３当量）及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（０．２当量）と共に８０℃で２時間トルエン２０mlに溶解した。この反応混合物を、過剰の試薬が除去されるまで水で洗浄し、次に濃縮して乾固した。残渣を、１％ギ酸を含有するメタノールで、室温で４時間処理した。このメタノール溶液を水で希釈し、中和し、酢酸エチルで抽出した。有機相を濃縮して乾固し、残渣を、テトラヒドロフラン１５mlに炭酸ジ−tert−ブチル及び重炭酸ナトリウム１．５当量を含有する溶液で処理した。この反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、ヘテロ酢酸相を濃縮して乾固した。完全に脱シリル化するように、残渣を塩酸酸性メタノールにとった。次にこの溶液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。ヘテロ酢酸相の蒸発により得られた残渣を、シリカゲルのクロマトグラフィーに付し、１：１のアセトン／ヘキサン混合物で溶出して、反応不純物を除去した。生成物（Ｍ＋(m/z)８５１）５８０mgを得た。実施例７：１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−ベンゾイルアミノ−３−フェニル−２ −ヒドロキシプロパノイル〕−１１，１２−ジヒドロバッカチンIII（１ｂ、Ｒ₁ ＝Ｒ₂＝Ｐｈ、Ｒ₃＝ＯＡｃ、Ｒ₄＝Ｈ）の調製１１，１２−ジヒドロ−７−ＴＥＳ−バッカチン（２ｂ、Ｒ₃＝ＯＡｃ、Ｒ₄＝Ｈ、Ｒ₅＝Ｏ−ＴＥＳ）５００mgを、（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−ベンゾイル−２，２ −ジメチル−４−フェニル−５−オキサゾリジンカルボン酸１．５ｇ、ジシクロヘキシルカルボジイミド（１．０３当量）及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（０．２当量）と共に、トルエン２０mlに８０℃で２時間溶解した。この反応混合物を、過剰の試薬が除去されるまで水で洗浄し、次に濃縮して乾固した。残渣を、１％ギ酸を含有するメタノールで、室温で４時間処理した。このメタノール溶液を水で希釈し、中和し、酢酸エチルで抽出した。有機相を濃縮して乾固し、完全に脱シリル化するように、残渣を塩酸酸性メタノールにとった。次にこの溶液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。ヘテロ酢酸相の蒸発により得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーに付し、１：１のアセトン／ヘキサン混合物で溶出して、反応不純物を除去した。生成物（Ｍ＋(m/z)８５５）５３０mgを得た。実施例８：１３−〔（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert −ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル］−１０−エピ−１０−デアセチルバッカチンIII（１ａ、Ｒ₁＝Ｐｈ、Ｒ₂＝ｔＢｕＯ、Ｒ₃＝Ｈ、Ｒ₄＝ＯＨ）の調製１０−デアセチル−１０−エピバッカチンIII（２ａ、Ｒ₃＝Ｈ、Ｒ₄＝Ｒ₅＝ＯＨ）５００mgを無水ピリジン１５mlに溶解し、塩化トリクロロエトキシカルボニル（ＴＲＯＣ−Ｃ１）３当量で、８０℃で５分間処理し、次に室温に冷却した。過剰のＴＲＯＣ−Ｃ１を分解するために、メタノール１mlを添加した。この溶液を氷水で希釈し、クロロホルムで抽出し、有機相を希塩酸溶液で洗浄した。有機相を蒸発乾固し、残渣を、（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−２，２−ジメチル−４−フェニル−５−オキサゾリジンカルボン酸３当量、ジシクロヘキシルカルボジイミド３当量及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン０．２当量を含有するトルエン溶液で、室温で２４時間処理した。この反応混合物を水で洗浄し、有機相を真空下で蒸発乾固した。残渣をメタノールにとり、ｐ−トルエンスルホン酸１当量で４８時間処理し、次に水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を真空下で蒸発させ、残渣を１：１の酢酸／酢酸エチル混合物２００mlにとり、亜鉛粉末１１当量で３０℃で３時間処理した。この固体物質を濾去し、溶液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、シリカゲルクロマトグラフィーに付し、１：４の酢酸エチル／ヘキサン混合物で溶出した。生成物（１ａ）（Ｍ＋ (m/z)８０７）５１２mgを得た。実施例９：７，９−ジトリエチルシリル−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチンIIIの調製無水ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（５ml）に（５）（２００mg、０．３７ mmol）を含む溶液に、イミダゾール（７５mg、１．１１mmol、３mol当量）及び塩化トリエチルシリル（ＴＥＳ）（１８６ml、１６７．３mg、１．１１mmol、３ mol当量）を添加し、反応混合物を室温で１０分間撹拌した。反応をＴＬＣ（３：７のヘキサン−酢酸エチル、出発物質のＲｆ０．１０、生成物のＲｆ０．８０）によりチェックした。水及びセライト（登録商標）の添加により反応を停止させ、沈殿物を濾過し、水で洗浄してＤＭＦを除去し、次にＣＨＣｌ₃で洗浄して生成物をとり出した。カラムクロマトグラフィー（９：１のヘキサン／酢酸エチルでシラノールを溶出し、次に６：４のヘキサン／酢酸エチルで生成物を溶出する）による精製後、標題生成物１４６mg（５１％）を得た。実施例１０：１３−〔（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−te rt−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル］−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチンIII（５ａ、Ｒ₁＝Ｐｈ、Ｒ₂＝ｔＢｕＯ）の調製無水トルエン（５ml）に実施例９で得られた生成物（１２６mg、０．１６mmol ）を含む溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド６７．５mg（０．３２７mmol 、２mol当量）、（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ− Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−フェニル−５−オキサゾリジンカルボン酸１０５mg（０．３２７mmol、２mol当量）及び４−ジメチルアミノピリジン５mgを添加した。この混合物を６０℃に２４時間加熱し、ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液及び酢酸エチルで希釈した。残渣をカラムクロマトグラフィー（８：２のヘキサン−酢酸エチル）により精製して、１３−エステル１７５mg（９５％）を得た。残渣をメタノール／ＨＣｌ（０．０１％）５０mlにとり、反応混合物を室温で１時間放置した。この溶液をpH５までアルカリ性にし、真空下で濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、９８：２の塩化メチレン−メタノール混合物で溶出した。酢酸エチルから結晶化後、標題化合物８５mgを得た。実施例１１：１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−イソブチル−２−ヒドロキシ−３− カプロイルアミノ−プロパノイル〕−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチンII I（５ａ、Ｒ₁＝Ｐｈ，Ｒ₂＝カプロイル）の調製無水トルエン（５ml）に実施例９で得られた生成物（１２６mg、０．１６mmol ）を含む溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド６７．５mg（０．３２７mmol 、２mol当量）、（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−カプロイル−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−５−オキサゾリジンカルボン酸１４０mg（０．３２７mmol、２mol当量）及び４−ジメチルアミノピリジン５mgを添加した。この混合物を６０℃に２４時間加熱し、ＮａＨＣＯ₃飽和水溶液及び酢酸エチルで希釈した。残渣をカラムクロマトグラフィー（８：２のヘキサン−酢酸エチル）により精製して、１３−エステル１７５mg（９５％）を得た。残渣をメタノール／ＨＣｌ（０．０１％）５０mlにとり、反応混合物を室温で１時間放置した。この溶液をpH５までアルカリ性にし、真空下で濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、９８：２の塩化メチレン−メタノール混合物で溶出した。酢酸エチルから結晶化後、標題化合物８８mgを得た。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９６年７月８日【補正内容】明細書抗腫瘍活性を有する半合成タキサンタキサン骨格を有するジテルペン、及び特にタキソールは、多くのヒト腫瘍に対して抗腫瘍活性を有することが知られている。しかし、これらの薬剤、特にタキソールの使用は、望ましくない副作用による幾つかの欠点を有する。この理由から、そして、これらの抗腫瘍剤による治療が速やかに耐性を誘導することから、臨床使用において観察される問題を解消する新規な分子の開発が注目されている。１９９３年２月４日付のＷＯ93/02067号（Nippon Steel）は、例えば、顕著な細胞毒性活性を有するTaxus種の胚乳の組織培養物から抽出した１０−α−アセチル−タキソールを開示している。本発明は、半合成により得られ、強力な抗腫瘍活性を有する、新規なタキサン骨格誘導体に関する。本発明の誘導体は、式（１）：を有する。これらは、２つの系列に分類することができる：ａ）１１，１２−位にオレフィン二重結合、そして１０α−位にヒドロキシ又はアシルオキシ基を有する、タキサン誘導体（式（１ａ）のタキサン）、及び得られることが認められている。塩化トリエチルシリル（ＴＥＳＣ１）による７ −位のヒドロキシルの保護後、セリウム（III）塩の存在下で水素化ホウ素ナトリウムで還元することにより、（６）から、式（１ｂ）のタキサンの合成に有用なシントン（２ｂ）（Ｒ₃＝ＯＨ、Ｒ₄＝Ｈ、Ｒ₅＝Ｏ−ＴＥＳ）を得る。シントン（２ｂ）の１２−位のメチルのα−配置は、核磁気共鳴を用いて検討することによって推定された。本発明の生成物は、種々の腫瘍細胞株に対する細胞毒性効果について、タキソールの作用と比較しながらスクリーニングした。表１は、タキソールで得られたＩＣ₅₀と比較した、化合物１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル〕−１０−エピ−１０−デアセチルバッカチンIII（１ａ、Ｒ₁＝Ｐｈ、Ｒ₂＝ｔＢｕＯ、Ｒ₃＝Ｈ、Ｒ₄ ＝ＯＨ）、１３− 〔（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル］−１０−デアセチル−１１，１２−ジヒドロバッカチンIII（１ｂ、Ｒ₁＝Ｐｈ、Ｒ₂＝ｔＢｕＯ、Ｒ₃＝ＯＨ、Ｒ₄＝Ｈ）、１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル］−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチンIII（５ａ、Ｒ₁＝Ｐｈ、Ｒ₂＝ｔＢｕＯ）及び１３−〔（２Ｒ，３Ｓ）−３−イソブチル− ２−ヒドロキシ−３−カプロイルアミノ−プロパノイル］−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチン（５ａ、Ｒ₁＝イソブチル、Ｒ ₂ ＝ペンチル）のＩＣ₅₀のデータを示す。Ｂｏｃ−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−フェニル−５−オキサゾリジンカルボン酸１０５mg（０．３２７mmol、２mol当量）及び４−ジメチルアミノピリジン５mgを添加した。この混合物を６０℃に２４時間加熱し、ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液及び酢酸エチルで希釈した。残渣をカラムクロマトグラフィー（８：２のヘキサン−酢酸エチル）により精製して、１３−エステル１７５mg（９５％）を得た。残渣をメタノール／ＨＣｌ（０．０１％）５０mｌにとり、反応混合物を室温で１時間放置した。この溶液をpH５までアルカリ性にし、真空下で濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、９８：２の塩化メチレン−メタノール混合物で溶出した。酢酸エチルから結晶化後、標題化合物８５mgを得た。実施例１１：１３−〔（２Ｒ，３Ｓ）−３−イソブチル−２−ヒドロキシ−３− カプロイルアミノ−プロパノイル〕−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチンII I（５ａ、Ｒ₁＝Ｐｈ、Ｒ₂ペンチル）の調製無水トルエン（５ml）に実施例９で得られた生成物（１２６mg、０．１６mmol ）を含む溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド６７．５mg（０．３２７mmol 、２mol当量）、（４Ｓ，５Ｒ）−Ｎ−カプロイル−２−（２，４−ジメトキシフェニル）−４−イソブチル−５−オキサゾリジンカルボン酸１４０mg（０．３２７mmol、２mol当量）及び４−ジメチルアミノピリジン５mgを添加した。この混合物を６０℃に２４時間加熱し、ＮａＨＣＯ₃飽和水溶液及び酢酸エチルで希釈した。残渣をカラムクロマトグラフィー（８：２のヘキサン−酢酸エチル）により精製して、１３−エステル１７５mg（９５％）を得た。残渣をメタノール／ＨＣｌ（０．０１％）５００mlにとり、反混合物を室温で１時間放置した。この溶液をpH５までアルカリ性にし、真空下で濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、９８：２の塩化メチレン−メタノール混合物で溶出した。酢酸エチルから結晶化後、標題化合物８８mgを得た。請求の範囲１．式（１）：［式中、Ｒ₁及びＲ₂は、同一であるか又は異なって、Ｃ₁−Ｃ₈アルキル、Ｃ₂−Ｃ₈アルケニル、アリール又はヘテロアリール基であり；Ｒ₂は、tert−ブトキシ基であることもでき；１１、１２位にオレフィン二重結合が存在する場合、Ｒ₃は、水素原子であり、Ｒ₄は、ヒドロキシ又はＣ₂−Ｃ₈−アシルオキシ基であり；１１、１２位にオレフィン二重結合が存在しない場合、１２位のメチルは、α −配置を有し、Ｒ₃は、ヒドロキシ又はＣ₂−Ｃ₈−アシルオキシ基であり、そしてＲ₄は、水素である。ただし、Ｒ₁及びＲ₂がフェニルであり、１１位と１２位が二重結合で接続されている場合、Ｒ₄は、アセチルではない］で示される半合成タキサン。２．式（１ａ）：〔式中、Ｒ₁＝フェニル、Ｒ₂＝tert−ブトキシ、Ｒ₃＝Ｈ、Ｒ₄＝ＯＨ〕で示される、１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル］−１０−エピ−１０−デアセチルバッカチンIIIである、請求項１記載の化合物。３．式（１ｂ）：〔式中、Ｒ₁＝フェニル、Ｒ₂＝tert−ブトキシ、Ｒ₃＝アセトキシ、そしてＲ₄＝Ｈ〕で示される、１３−〔（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３ −tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル〕−１１，１２−ジヒドロバッカチンIIIである、請求項１記載の化合物。４．請求項１記載の化合物の製造方法であって、式（２）：〔式中、７．式（５ａ）：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、同一であるか又は異なって、Ｃ₁−Ｃ₂₀アルキル、Ｃ₂−Ｃ₈アルケニル、アリール又はヘテロアリール基であり、Ｒ₂は、tert−ブトキシ基であることもできる〕で示される半合成セコタキサン。８．式（５ａ）：〔式中、Ｒ₁＝フェニル、Ｒ₂＝tert−ブトキシ〕で示される、１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert−ブトキシカルボニルアミノ −プロパノイル〕−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチンIIIである、請求項７記載の化合物。９．式（５ａ）［式中、Ｒ₁＝イソブチル、Ｒ₂＝ペンチル〕で示される、１３− ［（２Ｒ，３Ｓ）−３−イソブチル−２−ヒドロキシ−３−カプロイルアミノ− プロパノイル〕−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチンIIIである、請求項７記載の化合物。１０．請求項７記載の化合物の製造方法であって、式（５）：で示される化合物を、従来法により、イソセリン鎖を適切に活性化及び／又は保護した誘導体でエステル化して、１３−位にアシル基：（式中、Ｒ₁及びＲ₂は、請求項７と同義である）を導入し、次に従来法により保護基を脱離することを特徴とする方法。１１．請求項１〜３及び７〜９記載のタキサンを含有する、医薬組成物。１２．抗腫瘍活性を有する、請求項１１記載の医薬組成物。１３．ガンの治療に有用な医薬の製造のための、請求項１〜３及び７〜９記載のタキサンの用途。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．式（１）：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、同一であるか又は異なって、Ｃ₁−Ｃ₈アルキル、Ｃ₂−Ｃ₈アルケニル、アリール又はヘテロアリール基であり；Ｒ₂は、tert−ブトキシ基であることもでき；１１．１２位にオレフィン二重結合が存在する場合、Ｒ₃は、水素原子であり、Ｒ₄は、ヒドロキシ又はＣ₂−Ｃ₈−アシルオキシ基であり；１１、１２位にオレフィン二重結合が存在しない場合、１２位のメチルは、α −配置を有し、Ｒ₃は、ヒドロキシ又はＣ₂−Ｃ₈−アシルオキシ基であり、そしてＲ₄は、水素である］で示される半合成タキサン。２．式（１ａ）：〔式中、Ｒ₁＝フェニル、Ｒ₂＝tert−ブトキシ、Ｒ₃＝Ｈ、Ｒ₄＝ＯＨ］で示される、１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル〕−１０−エピ−１０−デアセチルバッカチンIIIである、請求項１記載の化合物。３．式（１ｂ）：〔式中、Ｒ₁＝フェニル、Ｒ₂＝tert−ブトキシ、Ｒ₃＝アセトキシ、そしてＲ₄＝Ｈ］で示される、１３−〔（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３ −tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロパノイル〕−１１，１２−ジヒドロバッカチンIIIである、請求項１記載の化合物。４．請求項１記載の化合物の製造方法であって、式（２）：〔式中、１１、１２位にオレフィン二重結合が存在する場合、Ｒ₃は、水素であり、Ｒ₄ 及びＲ₅は、ヒドロキシ、Ｃ₂−Ｃ₈−アシルオキシ、アルキルシリルオキシ又は２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルオキシ基であり；１１、１２位にオレフィン二重結合が存在しない場合、１２位のメチルは、α −配置を有し、Ｒ₄は、水素であり、Ｒ₃及びＲ₅は、ヒドロキシ、Ｃ₂−Ｃ₈−アシルオキシ、アルキルシリルオキシ又は２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルオキシ基である〕で示されるシントンを、既知の方法により、適切に活性化及び／又は保護したイソセリン誘導体でエステル化して、１３位にアシル基：（式中、Ｒ₁及びＲ₂は、請求項１と同義である）を導入し、次に既知の方法により保護基を脱離することを特徴とする方法。５．中間体としての、式（２）：［式中、１１、１２位にオレフィン二重結合が存在する場合、Ｒ₃は、水素であり、Ｒ₄ 及びＲ₅は、ヒドロキシ、Ｃ₂−Ｃ₈−アシルオキシ、アルキルシリルオキシ又は２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルオキシ基であり；１１、１２位にオレフィン二重結合が存在しない場合、１２位のメチルは、α −配置を有し、Ｒ₄は、水素原子であり、Ｒ₃及びＲ₅は、ヒドロキシ、Ｃ₂−Ｃ₈ −アシルオキシ、アルキルシリルオキシ又は２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルオキシ基である］で示される化合物。６．中間体としての、式（５）：で示される化合物。７．式（５ａ）：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、同一であるか又は異なって、Ｃ₁−Ｃ₂₀アルキル、Ｃ₂−Ｃ₈アルケニル、アリール又はヘテロアリール基であり、Ｒ₂は、tert−ブトキシ基であることもできる〕で示される半合成セコタキサン。８．式（５ａ）：〔式中、Ｒ₁＝フェニル、Ｒ₂＝tert−ブトキシ〕で示される、１３−〔（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニル−２−ヒドロキシ−３−tert−ブトキシカルボニルアミノ −プロパノイル］−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチンIIIである、請求項７記載の化合物。９．式（５ａ）〔式中、Ｒ₁＝イソブチル、Ｒ₂＝カプロイル〕で示される、１３ −〔（２Ｒ，３Ｓ）−３−イソブチル−２−ヒドロキシ−３−カプロイルアミノ −プロパノイル〕−Ｃ−セコ−１０−デアセチルバッカチンIIIである、請求項７記載の化合物。１０．請求項７記載の化合物の製造方法であって、式（５）：で示される化合物を、従来法により、イソセリン鎖を適切に活性化及び／又は保護した誘導体でエステル化して、１３−位にアシル基：（式中、Ｒ₁及びＲ₂は、請求項７と同義である）を導入し、次に従来法により保護基を脱離することを特徴とする方法。１１．請求項１〜３及び７〜９記載のタキサンを含有する、医薬組成物。１２．抗腫瘍活性を有する、請求項１１記載の医薬組成物。１３．ガンの治療に有用な医薬の製造のための、請求項１〜３及び７〜９記載のタキサンの用途。１４．心疾患患者のガンの治療に有用な医薬の製造のための、Ｒ₂が、アルキル又はアルケニル基である、請求項１又は７記載のタキサンの用途。