JPH0995672A - 水易溶性ヤマモモ科植物抽出物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】水難溶性で取扱いにくいヤマモモ科植物抽出物
の改質を図り、水及び含水有機溶媒系に溶け、かつ安定
化させて、業界が要望する酸化防止剤を提供すると共
に、食品、医薬品、医薬部外品、化粧品又は飼料の酸化
による品質劣化の防止法を提供する。 【解決手段】ヤマモモ科植物抽出物とガラクトース残基
転移源の共存下で、ガラクトース残基転移活性を有する
酵素を作用させることによって、ヤマモモ科植物抽出物
にガラクトース残基を転移させた水易溶性ヤマモモ科植
物抽出物を発明した。これを食品、医薬品、医薬部外
品、化粧品、飼料などに使用することにより、酸化によ
る品質劣化を顕著に防止することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、酸化防止効果を有
する水易溶性ヤマモモ科植物抽出物に関する。本発明で
得られる水易溶性ヤマモモ科植物抽出物は食品、医薬
品、医薬部外品、化粧品又は飼料の製造に使用すること
ができる。

【０００２】

【従来の技術】油脂または油脂類を含有する食品、医薬
品、医薬部外品、化粧品、飼料などの製品が酸化され、
樹脂化、異臭、着色、変色、毒性物質の生成または栄養
価の低下を引き起こし、品質の劣化を招くことはよく知
られている。従来から酸化防止剤としてブチルヒドロキ
シアニソール（以下、ＢＨＡという）やブチルヒドロキ
シトルエン（以下、ＢＨＴという）などの合成酸化防止
剤が、また、天然物を起源とする酸化防止剤としてトコ
フェロール類、Ｌ−アスコルビン酸、ゴマ油中のセザモ
リン、コーヒー酸誘導体、メラノイジン、アミノ酸、フ
ィチン酸、茶葉抽出物、ローズマリーやセージなどの香
辛料抽出物、その他などの単独物またはそれらの混合物
が用いられている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、ヤマモ
モ科植物抽出物について詳細な検討を加えた結果、ヤマ
モモ科植物抽出物中に酸化防止効果の強い物質が含まれ
ていることを知り、中でも水難溶性画分に熱安定性の優
れた業界の要望に合致する酸化防止効果を示す物質が得
られることを見出した。この優れた機能を、産業上で有
効に利用するにあたっては、水難溶性で取扱いにくいヤ
マモモ科植物抽出物の改質を図り、水及び含水有機溶媒
系に溶け、かつ安定化させて、業界が要望する酸化防止
剤を提供すると共に、食品、医薬品、医薬部外品、化粧
品又は飼料の酸化による品質劣化の防止法を提供するこ
とが重要な課題である。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記問題
点を鑑みてヤマモモ科植物抽出物の持つ優れた酸化防止
効果を保持させつつ、水系又は含水有機溶媒系での溶解
性と安定性の改善方法について鋭意検討した。その結
果、ヤマモモ科植物抽出物とガラクトース残基転移源の
共存下で、ガラクトース残基転移活性を有する酵素を作
用させることによって、ヤマモモ科植物抽出物にガラク
トース残基を転移させた水易溶性ヤマモモ科植物抽出物
を発明し、これを食品、医薬品、医薬部外品、化粧品、
飼料などに使用することにより、品質劣化の防止方法と
して提供するに至ったものである。以下、詳細に説明す
る。

【０００５】本発明に使用する原料の酸化防止物質であ
る水難溶性のヤマモモ科植物抽出物は、ヤマモモ科ヤマ
モモ属のヤマモモ（Myrica rubra SIEB. et ZUCC.）及
び／またはヤチヤナギ（Myrica gale L.）から抽出す
る。これらのヤマモモ科植物から酸化防止物質を抽出す
るに先立って、樹皮、根茎、枝または葉などを粉砕機を
用いて粉砕する。酸化防止物質を抽出する方法には本出
願人が既に特許出願した方法（特開平５−１５６２４
９、特願平７−２５０９０２）を用いることができる。
すなわち該植物体を有機溶媒で浸漬などの一般的な手段
により酸化防止物質等を抽出し、次いで該抽出物からタ
ンニン、縮合型タンニン、カテキン類、糖質その他等の
水溶性物質を除去する方法や、また該植物体からこれら
の水溶性物質をあらかじめ除去した後、有機溶媒で酸化
防止物質を抽出する方法である。

【０００６】いずれの方法で得た抽出物も、水難溶性の
ヤマモモ科植物抽出物からなり、本発明に使用する原料
となりうる。この抽出に用いる有機溶媒には、炭素数１
から５までの脂肪族アルコール系有機溶媒としてメタノ
ール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、
ブタノール、イソブタノール、2-ブタノール、ペンタノ
ール、1,2-プロパンジオール、1,3-プロパンジオール、
グリセリンその他などが挙げられ、その他の有機溶媒と
しては、炭素数３から５までのカルボニル化合物である
アセトン、２−ブタノン、２−ペンタノン、３−ペンタ
ノンなど、水溶性酸アミドであるホルムアミド、N,N-ジ
メチルホルムアミド、N,N-ジエチルホルムアミド、N,N-
ジメチルアセトアミドなど、水溶性アミンとしてピリジ
ン、ブチルアミンなど、その他にジメチルスルホキシド
などが挙げられ、その中から単独でまたは適宜組合せて
使用することができる。また必要に応じて上記有機溶媒
に適宜水を併用してもよい。

【０００７】該植物体を有機溶媒で抽出し、次いで該抽
出物から水溶性物質を除去して酸化防止物質を得る方法
にあっては、該植物体を上記溶媒で浸漬など一般的な方
法で処理して得られる抽出液から、溶媒を蒸発または他
の一般的な手段により除去する。この操作により得た濃
縮液および濃縮乾固物に水を添加、混合して、カテキ
ン、タンニン、縮合型タンニンや糖質などの水溶性の物
質を水相側に移行させて除去し、水難溶性の酸化防止物
質を固形物として得る。得られたものが本発明に使用す
る水難溶性のヤマモモ科植物抽出物である。もう一つの
該植物体から水溶性物質を除去後有機溶媒で酸化防止物
質を抽出する方法では、樹皮、根茎、枝または葉などの
粉砕物を水に浸漬などの一般的な手段により、水溶性物
質を抽出して除去する。

【０００８】この際、必要に応じて、粉砕物に蒸煮処理
を施したのち抽出してもよい。また、水溶性物質をより
容易に抽出除去させるために水酸化ナトリウム、炭酸ナ
トリウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸
カリウム、炭酸水素カリウム、アンモニアガス、アンモ
ニア水、炭酸水素アンモニウムから選ばれる１種または
２種以上を用いて抽出時の液のｐＨを４から８までの範
囲に収るように調整してもよい。有機溶媒での抽出に当
り、溶媒の使用量を削減させたり、また溶媒の回収精製
作業を容易にする等の目的で、得られた粉砕物を冷風乾
燥、温風乾燥、凍結乾燥又はその他の方法等で乾燥して
もよい。また、抽出効率の向上を図ったり、作業性の改
善を図るためにこの粉砕物をペレット状や顆粒状等に成
型加工してもよい。このような処理を施した物が水溶性
物質除去ヤマモモ科植物粉砕物である。次いで、上記記
載の有機溶媒で浸漬又はその他の一般的な方法での抽出
により、水難溶性の酸化防止物質を得ることができる。
必要に応じて、さらに水または熱水で洗浄精製してもよ
いし、クロマトグラフィーまたは液液向流抽出法による
精製、あるいは有機溶媒または含水有機溶媒からの再結
晶法などにより精製してもよい。

【０００９】このような操作により得たヤマモモ科植物
抽出物は有効成分としてフラボノール配糖体であるミリ
シトリン（ミリセチン３−Ｏ−３ラムノシド）やその他
の化合物を含有しており、強い酸化防止効果を示すが、
水及び含水有機溶媒に難溶性であり、この優れた効能を
発揮させるためには取扱いにくい物質である。この溶解
度が低く取り扱いにくいという問題点は、ヤマモモ科植
物抽出物を構成する難溶性のミリシトリンその他のフラ
ボノール配糖体などの物質に、ガラクトース残基を転移
させた本発明品の水易溶性ヤマモモ科植物抽出物を使用
することによって解決された。

【００１０】本発明の水易溶性ヤマモモ科植物抽出物、
本発明に用いるガラクトース残基転移源は、ガラクトー
ス残基転移活性を有する酵素の基質となり、ガラクトー
ス残基の１分子以上がヤマモモ科植物抽出物に転移され
得るものであればよく、例えば、乳糖単独、乳糖に公知
の方法（Agric. Biol. Chem., ４８巻３０５３〜３０６
１頁（１９８４年））でガラクトース残基を転移させて
得られるガラクトオリゴ糖あるいは乳糖を起源とする市
販のガラクトオリゴ糖、または大豆などの豆を起源とす
るガラクトオリゴ糖、その他が挙げられ、この中から１
種または２種以上が採用される。ガラクトース残基源の
添加量は、反応混合物全体に対して１〜８０重量％（以
下、％で示す）の量でよく、望ましくは１０〜７０％、
より望ましくは２０〜６０％程度の量が有利である。

【００１１】この発明に使用するガラクトース残基転移
活性を有する酵素は、β−Ｄ−ガラクトシド ガラクト
ヒドラーゼ（ＥＣ ３．２．１．２３、以下β−ガラク
トシダーゼという）がよく、例えば、バチルス サーキ
ュランス (Bacillus circulans)、バチルス マセラン
ス (B. macerans)などのバチルス属、ラクトバチルスブ
ルガリカス (Lactobacillus bulgaricus)、ラクトバチ
ルス ラクチス (L.lactis)、ラクトバチルス プラン
タルム (L. plantarum) 等のラクトバチルス属、エシェ
リヒア コリ (Escherichia coli) 等のエシェリヒア
属、アスペルギルス オリーゼ (Aspergillus oryza
e)、アスペルギルス ニガー (A. niger)等のアスペル
ギルス属、クリベロミセス ラクチス (Kluyveromyces
lactis)、クリベロミセス フラギリス (K. fragilis)
等のクリベロミセス属、ストレプトコッカス サーモフ
ィルス (Streptococcus thermophilus)等のストレプト
コッカス属、ヘリクス ポマチア (Helix pomatia) 等
のヘリクス属、ペニシリウムクリソゲナム (Penicilliu
m crysogenum)、ペニシリウム ムルチカラー (P.multi
color)等のペニシリウム属、サッカロミセス フラギリ
ス（Saccharomycesfragilis）等のサッカロミセス属、
その他等の微生物を起源とするもの、ホラ貝（Chalonia
lampas）等の貝類を起源とするもの、ジャック ビー
ン（和名：タチナタマメ、Canavalia ensiformis）など
の植物を起源とするもの、あるいは牛の肝臓や哺乳動物
の小腸を起源とするものなどが挙げることができ、この
発明に自由に使用することができる。

【００１２】これらの酵素は、必ずしも精製して使う必
要はなく、通常は粗酵素で目的を達成しうる。また、市
販の酵素製剤（例えば、大和化成株式会社製、商品名Ｂ
ＩＯＬＡＣＴＡ Ｇ１０その他等）も使用することがで
きる。また、ヤマモモ科植物抽出物とガラクトース源を
添加した培養液に、β−ガラクトシダーゼを添加する代
りに、ガラクトース残基転移活性を有するβ−ガラクト
シダーゼ生産菌を植菌し、発酵法により糖転移反応を行
うこともできる。さらに、β−ガラクトシダーゼあるい
はβ−ガラクトシダーゼを生産する微生物を常法に従っ
て固定化したものを使用して反応を進めてもよい。これ
らのβ−ガラクトシダーゼは、単一種の微生物、植物又
は動物を起源とするものを用いても、起源の異なる２種
以上の酵素を併用することができるし、また、β−ガラ
クトシダーゼ生産菌を２種以上植菌して発酵法により糖
転移反応を行ってもよい。

【００１３】β−ガラクトシダーゼの使用量は、特に限
定されるものではない。この酵素の使用量は、起源およ
び酵素の剤形によって大きく変動する。例えば、同一酵
素を用いる場合でも、酵素溶液として使用するか、ある
いは固定化して用いるかによってもその使用量は大きく
異なる。そのため、一義的には決められないので一例を
挙げて示すと、ＢＩＯＬＡＣＴＡ Ｇ−１０を使用する
ときは通常１０〜２０００単位／ｇ基質程度の量が有利
である。尚、酵素単位については実施例において詳述さ
れる。また、酵素の活性化剤として、必要に応じてＭｎ
2+、Ｍｇ2+、Ｃａ2+等の金属イオンを酵素と併用しても
よい。その添加量は通常微量でよく、反応混合系に対し
て１〜５００ｐｐｍの範囲から選択される。この転移反
応における反応系のｐＨは、使用する酵素の至適ｐＨ付
近が望ましく、通常約２〜９の範囲から選択するのがよ
い。また、この転移反応の温度は、使用する酵素の至適
温度付近が望ましく、通常２０〜７０℃の範囲から選択
するのがよい。

【００１４】このようにして、本発明のガラクトース残
基転移ヤマモモ科植物抽出物が簡単な操作により、収率
よく製造することができ、本発明の水溶性ヤマモモ科植
物抽出物の製造の目的は達せられる。さらに、所望によ
り反応系をイオン交換樹脂又はイオン交換膜等による処
理、ポーラスポリマー構造を有する樹脂、シリカゲル、
アルミニウムオキシド、セルロース、その他等を吸着剤
とする吸着クロマトグラフ処理、活性炭、アルキルシリ
ル化シリカゲル又はアリールシリル化シリカゲル等を吸
着剤とする逆相分配クロマトグラフ処理その他の方法に
よって精製してもよい。

【００１５】上記方法で製造した改質されたヤマモモ科
植物抽出物であるガラクトース残基転移ヤマモモ科植物
抽出物（水易溶性ヤマモモ科植物抽出物）は、水難溶性
ヤマモモ科植物抽出物を構成するフラボノール配糖体の
糖鎖構造部にガラクトオリゴ糖残基が転移することによ
り、水及び含水有機溶媒に対する溶解度が改善されたも
のであって、酸化防止剤としての効果を発揮するだけで
はなく、水溶性の消臭剤としても利用でき、またオリゴ
糖鎖部を含有することにより、ビフィズス菌の成育促進
剤としての効果も期待される。

【００１６】本発明の水易溶性ヤマモモ科植物抽出物
は、酸化防止剤として、コーン油、ナタネ油、綿実油、
大豆油、サフラワ油、ヒマワリ油、ゴマ油、小麦胚芽
油、オリーブ油、月見草油、椿油、茶実油、アボガド
油、ひまし油、コーヒー油、カシューナッツ油、カカオ
ビーンズ油、落花生油、魚油、パーム油、パーム核油、
豚脂、牛脂、鶏脂などの動植物油脂やこれらの動植物油
脂の部分水素添加油脂又は完全水素添加油脂、オレイン
酸、リノール酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、エ
イコペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸などの不飽和脂
肪酸及びそのエステルあるいはその不飽和アルコールに
対して使用できるばかりか、バター、マーガリン、ショ
ートニング、ドレッシングなどの油脂加工食品に使用す
ることができる。

【００１７】また、油脂を高含量含む食品、例えば、ド
ーナツ、油揚げ、油揚げ菓子、チョコレート、即席ラー
メンなどに添加使用することができる。さらに、おか
き、センベイ、おこし、まんじゅう、飴などの和菓子、
クッキー、ビスケット、クラッカー、パイ、スポンジケ
ーキ、カステラ、ドーナツ、ワッフル、プリン、バター
クリーム、カスタードクリーム、シュークリーム、チョ
コレート、チョコレート菓子、キャラメル、キャンデ
ー、チューインガム、ゼリー、ホットケーキ、パンなど
の各種洋菓子、ポテトチップスなどのスナック菓子、ア
イスクリーム、アイスキャンデー、シャーベットなどの
冷菓、乳酸菌飲料、乳性飲料、果汁飲料、無果汁飲料、
果肉飲料、機能性飲料、透明炭酸飲料、果汁入り炭酸飲
料、果実着色炭酸飲料などの清涼飲料、緑茶、紅茶、イ
ンスタントコーヒー、ココア、缶入りコーヒードリン
ク、業務用コーヒーなどの嗜好飲料、発酵乳、加工乳、
チーズなどの乳製品、豆腐、豆乳などの大豆加工食品、
ママレード、ジャム、果実のシロップ漬、フラワーペー
スト、ピーナツペースト、フルーツペーストなどのペー
スト類、漬物類、ハム、ソーセージ、ベーコン、ドライ
ソーセージ、ビーフジャーキーなどの畜肉製品類、魚肉
ハム、魚肉ソーセージ、蒲鉾、チクワ、ハンペン、てん
ぷらなどの魚介類練り製品、魚類、イカ、タコ、貝類な
どの各種干物類およびそれらの珍味類、鰹、鯖、鰺など
の各種節、煮干、ウニ、イカの塩辛、魚のみりん干、鮭
などの燻製品、のり、小魚、貝類、するめ、山菜、茸、
昆布などで作られる佃煮類、即席カレー、レトルトカレ
ー、缶詰カレーなどのカレー類、みそ、粉末みそ、醤
油、粉末醤油、もろみ、魚醤、ソース、ケチャップ、マ
ヨネーズ、固形ブイヨン、蠣油、焼肉のタレ、カレール
ー、シチューの素、スープの素、ダシの素などの各種調
味料類に使用することができるし、さらに、油脂及びそ
れらの誘導体を含有する各種レンジ食品及び冷凍食品な
どの各種飲食物、嗜好品にも使用することができる。

【００１８】その他、医薬品、医薬部外品及び化粧料と
してはドリンク剤、トローチ、肝油ドロップ、うがい
薬、口中清涼剤、口中香錠剤、歯磨き、日焼け止めスキ
ンローション、紫外線防止クリーム、口紅などに自由に
使うことができるし、また飼料としては、各種キャット
フード、ドッグフード、観賞魚の餌、養殖魚の餌などに
添加して使うことができる。

【００１９】本発明の水易溶性ヤマモモ科植物抽出物
は、対象とする製品の形状に応じて、粉末として使用し
ても、水や適当な溶媒、例えばエタノール、プロピレン
グリコール、グリセリンなどに溶解して、あるいは乳化
液として使用することができる。また、本発明品は他の
酸化防止剤など、例えばトコフェロール、Ｌ−アスコル
ビン酸、エリソルビン酸ナトリウム、ＢＨＡ、ＢＨＴな
どと併用して使用することもできる。本発明の水易溶性
ヤマモモ科植物抽出物を、食品、医薬品、医薬部外品、
化粧品、飼料などに使用する場合の添加量としては、通
常０．０００２〜５％（重量、以下同じ）であり、好ま
しくは０．００２〜２％である。以下に本発明の実施例
を示す。

【００２０】

【実施例】

抽出例１ ヤマモモ樹皮乾燥物の粉砕物1kgにメタノール10kgを加
え、約60℃で5時間抽出したのち、濾過し、残滓をメタ
ノール3kgで洗浄し、メタノール抽出液約10kgを得た。
この抽出液を濃縮後別の容器に移し替え、真空度5mmH
g、浴温60℃で減圧乾燥して黄色の粉末0.25kgを得た。
得られた固形物を粉砕後、室温で水5Lと懸濁したのち濾
過し、残った固形物を水5Lで洗浄した。次いで固形分を
真空度5mmHg、浴温80℃で減圧乾燥して黄白色の固形物
からなるヤマモモ科植物抽出物（抽出物１という）0.13
kgを得た。

【００２１】抽出例２ ヤマモモ樹皮乾燥物の粉砕物1kgに水10kgを加えて室温
で6時間60℃で攪〓混合後、遠心分離機を用いて水溶性
物質を除去し、得られた固形物を65℃の温風で乾燥して
水溶性物質が除去された樹皮粉砕物を780gを得た。この
乾燥物にエタノール8kgを加え、約80℃で5時間攪拌混合
したのち濾過し、残滓をエタノール3kgで洗浄し、エタ
ノール抽出液約9kgを得た。この抽出液を濃縮後別の容
器に移し替え、真空度5mmHg、浴温60℃で減圧乾燥して
黄色の粉末からなるヤマモモ科植物抽出物（抽出物２と
いう）0.21kgを得た。

【００２２】抽出例３ ヤチヤナギ樹皮乾燥物の粉砕物100gにエタノール800gを
加え、約80℃で5時間抽出したのち濾過し、残滓をエタ
ノール200gで洗浄し、エタノール抽出液800gを得た。こ
の抽出液を濃縮後別の容器に移し替え、真空度5mmHg、
浴温60℃で減圧乾燥して黄褐色の粉末20gを得た。得ら
れた固形物を粉砕後、室温で水200mlと懸濁したのち濾
過し、残った固形物を水100mlで洗浄した。次いで固形
分を真空度5mmHg、浴温80℃で減圧乾燥して黄褐色の固
形物からなるヤマモモ科植物抽出物（抽出物３という）
8.5gを得た。

【００２３】β−ガラクトシダーゼ活性の測定法 0.1％ｐ−ニトロフェニル−β−Ｄ−ガラクトグリコシ
ドを含有する0.05Mリン酸緩衝液（ｐＨは酵素の至適ｐ
Ｈに調整する）0.2mlに、0.05Mリン酸緩衝液に適度に希
釈した酵素溶液（２〜５ミリ単位）0.1mlを加えて40℃
で15分反応させた後、反応液に1M炭酸ナトリウム液2ml
を加えて反応を止め、分光光度計を用いて1M炭酸ナトリ
ウム液を対照として420nmでの吸光度を測定し、次式に
より酵素単位を求める。 酵素単位＝吸光度×0.01×１／酵素濃度（g／ml） 尚、これらの条件下でのｐ−ニトロフェノールの分子吸
光係数は15,000であって、上記式より求めた１酵素単位
は１分間当りｐ−ニトロフェニル−β−Ｄ−ガラクトシ
ドからｐ−ニトロフェノールの１μMを遊離させる量に
相当する。

【００２４】（ガラクトース残基転移ヤマモモ科植物抽
出物の分析法）高速液体クロマトグラフィーにより、下
記の条件で測定した。 カラム：マイクロボンダパック Ｃ18、カラム径 ４.６
ｍｍ、カラム長２５０ｍｍ 溶媒：メタノール／アセトニトリル／酢酸／水＝７／１
／１／１２ 流速：１ml／分 検出器：紫外・可視分光検出器 測定波長：３５０ｎｍ 尚、この測定条件では、原料のヤマモモ科植物抽出物の
ピークと反応生成物のピークは完全に分離した。

【００２５】実施例１ 0.1Mリン酸緩衝液（pH7.0）100mlに乳糖250ｇを加えて6
0℃に加熱・溶解させ、この溶液に抽出物１を20g含有す
るジメチルスルフォキシド液100mlと大和化成株式会社
製バチルス サーキュランス由来のβ−ガラクトシダー
ゼ（酵素力価20,000）1gを加えて60℃で4時間攪拌し
た。反応終了後混合物を水１Lで希釈し、スチレン−ジ
ビニールベンゼン共重合体からなるポーラスポリマー70
0mlを充填したカラムに１時間で通液し、次いでイオン
交換水5Lを1.5時間で通液した。次いで、40V/V%メタノ
ール2Lを１時間で通液して吸着物を溶出した。このメタ
ノール液を濃縮して、黄色の固形物である水易溶性ヤマ
モモ科植物抽出物（本発明品１という）25gを得た。得
られた固形物から1mgを取りだし、これにイオン交換水1
0mlを加えて溶かし、水易溶性ヤマモモ科植物抽出物の
分析に供した。その結果、水易溶性ヤマモモ科植物抽出
物は、原料の抽出物１の高速液体クロマトグラムとは異
なり、数多くのガラクトース残基が転移したフラボノー
ル配糖体で構成されていた。

【００２６】本発明品１の100mgを5%塩酸15mlに溶かし
て3時間100℃で加熱し、加水分解した。20℃まで冷却後
5%水酸化ナトリウム液でpH5まで中和し、冷蔵庫で一夜
静置した後析出物と濾過液に分割した。析出物は、アグ
リコンの分析試料に、濾過液は糖の分析に供した。析出
物と糖の分析は高速液体クロマトグラフを用いて下記の
条件で行った。

【００２７】 析出物の分析 カラム：マイクロボンダパック Ｃ18、カラム径 4.6m
m、カラム長250mm 溶媒：メタノール／5%酢酸水溶液＝２／３ 流速：1ml／分 検出器：紫外・可視分光検出器 測定波長：350nm 分析の結果、水易溶性ヤマモモ科植物抽出物に相当する
ピークは消失し、アグリコンとしてミリセチンなどのフ
ラボノイドのピークを検出した。また、この濾過液の分
析を同一の条件で行ったが、水易溶性ヤマモモ科植物抽
出物に相当するピークは消失していた。

【００２８】濾過液の分析 カラム：化学修飾型アミノプロピルシリカ（東京化成工
業株式会社製；Kaseisorb LC NH2 Super） カラム径4.
6mm、カラム長250mm 溶媒：アセトニトリル／水＝４／１ 流速：１ml／分 検出器：示差屈折計 分析の結果、濾過液からガラクトースに該当するピーク
を主成分として、ラムノースと少量のグルコースに相当
する３本のピークを検出した。別途調整した標準液との
ピーク面積の比較から、ガラクトース、ラムノースとグ
ルコースの組成比を求めるとその比は2.4：１：0.2であ
った。

【００２９】高速液体クロマトグラフィー分析結果から
明らかなように、本発明品１はヤマモモ科植物抽出物に
ガラクトース残基が１モル以上転移したヤマモモ科植物
抽出物であることは明らかである。

【００３０】実施例２ 抽出物２ 10gを熱水100mlに懸濁させ、50%水酸化ナトリ
ウム液を少しずつ加えて抽出物２を溶解させ、次いで酢
酸を添加してpH7.0に調整後乳糖250gを加えて６５℃に
調整sした。この溶液にバチルス サーキュランス由来
のβ−ガラクトシダーゼ（酵素力価20,000）0.5gを加え
て均質とし、65℃で8時間攪拌した。得られた反応液0.0
2mlを純水２mlに希釈し、水易溶性ヤマモモ科植物抽出
物の分析に供した。実施例１と同一条件での分析の結
果、反応液は数多くのガラクトース残基が転移したヤマ
モモ科植物抽出物からなっていた。次いで、スチレン−
ジビニールベンゼン共重合体からなるポーラスポリマー
700mlを充填したカラムを用いて実施例１と同一の方法
で精製し、淡黄色の固形物である水易溶性ヤマモモ科植
物抽出物（本発明品２という）15gを得た。

【００３１】この固形物100mgを実施例１と同一の方法
で加水分解を行い、析出物と濾過液を高速液体クロマト
グラフ分析を行った。その結果、析出物はミリセチン等
のフラボノイドからなり、また濾過液から配糖化された
ヤマモモ科植物抽出物に相当するピークは消失してい
た。濾過液中の糖分析の結果、ガラクトース、ラムノー
スとグルコースが検出され、その組成比は、2.5：１：
0.2であった。高速液体クロマト分析の結果から、本発
明品はヤマモモ科植物抽出物にガラクトース残基が１モ
ル以上転移したものであることが明らかである。

【００３２】実施例３ 0.05Ｍリン酸緩衝液（pH6.8）5mlに乳糖5.0gを加えて、
この溶液に抽出物３ 50mg含有ジメチルスルフォキシド
液0.25mlとバチルス サーキュランス由来のβ−ガラク
トシダーゼ（酵素力価２０，０００）5mgを加えて60℃
で5時間反応させた。得られた反応液０.０２mlを純水２
mlで希釈し、実施例１と同一の条件で高速液体クロマト
グラフィーによる糖転移反応の分析に供した。その結
果、実施例１と同様に多数のガラクトース残基が転移し
たヤマモモ科植物抽出物を検出した。水１ｌを加えて希
釈し、オクタデシルシリル化シリカゲル１００mlを充填
した分取カラムを用いて下記の条件で反応生成物と未反
応物を分画し、淡黄褐色粉末からなる水易溶性ヤマモモ
科植物抽出物（本発明品３という）１５ｍｇを得た。

【００３３】溶媒：１５％テトラヒドロフラン水溶液 流速：５０ｍｌ／分 検出器：紫外・可視分光検出器 測定波長：３５０ｎｍ 反応生成物５ｍｇを実施例１と同一の方法で加水分解物
し、析出物と溶液に分離し、それぞれを高速液体クロマ
ト分析に供した。その結果、析出物からフラボノイド配
糖体のアグリコンであるミリセチンなどのフラボノイド
を検出した。糖分析の結果、ガラクトース、ラムノース
とグルコースを検出し、その組成は２．６：１：０．２
であった。これらの事実は、本発明品がヤマモモ科植物
抽出物にガラクトース残基が転移したものであることを
証明している。

【００３４】実施例４ ０.０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６.８）１mlに大豆オリゴ
糖１.５ｇを加えて、この溶液に抽出物２を２５ｍｇ含
有するジメチルスルフォキシド液０.０５mlとバチルス
サーキュランス由来のβ−ガラクトシダーゼ（酵素力
価２０，０００）１ｍｇを加えて６０℃で５時間反応さ
せた。得られた反応液０.０２mlを純水２mlで希釈し、
ガラクトース残基転移ヤマモモ科植物抽出物の分析に供
した。その結果、反応生成物は４成分のガラクトース残
基の転移したヤマモモ科植物抽出物で構成されていた。

【００３５】本発明の効果を明らかにするため、純水中
での溶解度の比較と酸化防止効果の試験を実施した。 試験例１ 純水中での溶解度の比較 純水に実施例１による本発明品１及び実施例２による本
発明品２の水溶液と原料である抽出物１を加熱溶解した
水溶液を、４℃で１週間放置したときの沈殿の有無及び
その量を観察した。その結果を表１に示す。

【００３６】

【表１】

【００３７】試験例２ 酸化防止効果の比較 実施例１、実施例２、実施例３で調製された水易溶性ヤ
マモモ科植物抽出物と、一般に広く用いられているＢＨ
Ｔと天然ビタミンＥを比較実験のために用意した。尚、
天然ビタミンＥは高速液体クロマトグラフィーによる分
析の結果、α、β、γ、δ型の異性体の混合物で構成さ
れており、総トコフェロール含量は７０％であった。

【００３８】パーム油を使用して各々、本発明品１、本
発明品２、本発明品３と、他の酸化防止剤を添加して酸
化防止効果の比較試験を行った。この方法は、メトロー
ム社製のランシマット（自動油脂安定性試験装置）を使
用した。この原理は加熱した油脂に空気を吹込み、この
空気を次いで純水中に吹込む。油脂の酸化に伴って揮発
性二次生成物質が生じてくる。油脂層に吹込んだ空気に
より二次生成物質が運ばれ、水層に移行する。それに伴
って水の導電率が変化する。時間に対して導電率をプロ
ットして、得られた曲線の変曲点を求め、この時間を誘
導時間とするものである。油脂の安定性の判定は、油脂
の安定性の増加に伴って誘導時間が伸びることにより誘
導時間の長短の比較によりおこなうものである。測定条
件として加熱温度100℃、空気流量20L/時、試料量3.5g
で行った。尚、被試験酸化防止剤である本発明品１、本
発明品２と本発明品３は含水エタノールに、ＢＨＴはエ
タノールに溶かして油脂に添加した。その結果を表１に
示した。

【００３９】

【表２】

【００４０】本発明品は、パーム油に対して少量の添加
量で、他の酸化防止剤と比較してより強力な酸敗を遅延
させる効果を発揮した。

【００４１】試験例３ コーン油を使用して酸化防止剤の添加量を変化させた以
外は試験例１と同様の条件で実験を行った。その結果を
表２に示した。

【００４２】

【表３】

【００４３】本発明品はコーン油に対して、他の酸化防
止剤と比較してより強力な酸敗誘導時間の遅延効果を発
揮した。

【００４４】試験例４ 純ラードを使用して、測定条件として加熱温度を110℃
に変化させた以外は試験例２と同様の条件で実験を行っ
た。その結果を表４に示す。

【００４５】

【表４】

【００４６】本発明品は、純ラードに対して、他の酸化
防止剤と比較してより強力な酸敗誘導時間の遅延効果を
発揮した。以上の結果から、本発明の改質されたヤマモ
モ科植物抽出物は、ビタミンＥ及び合成酸化防止剤ＢＨ
Ｔに比べてより優れた酸化防止力があることがわかっ
た。

【００４７】試験例５ アジを腹開きし、内臓を除去した後水洗してから真水に
浸漬して血抜きした。本発明品１を0.01%添加した１０
％食塩水を準備し、血抜きしたアジをこの食塩水に１時
間浸浸後冷風乾燥してアジの干物を調製した。対照品と
して本発明品の無添加品を同様にして調製した。それぞ
れのアジの干物をポリエチレンフィルムで包み、３℃で
１ヵ月保存した。両面に平均的に焼き色が着くように焼
き上げた後官能評価したところ、本発明品を添加した物
は油の酸化臭がしなかったが、無添加の物では油の酸化
臭がして変質していた。調製直後と２週間保存後のアジ
の干物を細かく刻み、ソックスレー抽出器を用いてエチ
ルエーテルで抽出し、粗脂肪を得た。得られた粗脂肪の
過酸化物の量をR. B. Koch, B. Stern と C. G. Ferrar
iが提案しているロダン鉄法（Archivesof Biochemistry
and Biophysics. 78, 165-179 (1958))により測定し
た。その結果を表５に示す。

【００４８】

【表５】

【００４９】尚、吸光度が０．３以上になると酸化が始
るとされている。この結果から明らかなように、本発明
品１を添加した食塩水に浸漬したアジの干物は、無添加
の食塩水に浸漬しものと比較して、明らかに酸化を抑制
していた。

【００５０】試験例６ 本発明品１を0.01%添加した市販サラダ油で生麺を170±
5℃で約１分間フライして揚げ麺を調製した。同様に無
添加の市販サラダ油でフライした揚げ麺を対照品として
調製した。フライ麺をポリエチレン袋に入れて50℃の孵
卵器のなかで１ヵ月保存したのち取りだして官能比較を
行ったところ、本発明品１を添加したものは製造直後の
ものと殆ど変りがなかったが、無添加のものは油の酸化
臭がして、また味も変わっていた。

【００５１】試験例７ 牛、豚の合挽肉670g、牛脂30g、パン粉50g、全卵50g、
玉葱170g、食塩7g、ビーフエキス3g、ホワイトペパー末
1.5g、ナツメグ0.5gと本発明品２を0.01%添加して十分
に混合し、成型した。対照品として本発明品２の無添加
のものを同様に調製した。両面に平均的に焼き色が着く
ように焼き上げたのち、ポリエチレン袋に入れて-20℃
の冷凍庫で６ヵ月間保存したのち取りだし、解凍後官能
評価を行ったところ本発明品２を。添加したものは製造
直後と殆ど変わっていなかったが、無添加のものは油や
けの臭いがして、また味も少し変わっていた。

【００５２】試験例８ クリームチーズ50gと粉糖29gをクリーム状に練り、上白
糖5gと50%クエン酸水溶液2gを加えてさらに滑らかにな
るまで混和した。この中に、本発明品１の10%エタノー
ル溶液0.1g、着香料1gと着色料0.2gを添加後薄力粉100
g、ベーキングパウダー2g、キサンタンガム0.5gと植物
油脂40gからなる混合物を加え、軽く混合し、冷蔵庫で
１時間寝かせた後成型し、170℃で10分間焼き上げてク
ッキーを調製した。対照品として本発明品１を添加して
いないものを同様に調製し、焼き上げた。ポリエチレン
袋にそれぞれを入れ、35℃で３ヵ月保存したところ、本
発明品１を添加していないものは過酸化物に由来する異
臭がするが、添加したクッキーでは焼き上げた直後のも
のと変わらなかった。

【００５３】試験例９ 下記処方の薬用バニシングクリーム用原料を用意した。
Ａ，Ｂそれぞれを８０℃に加熱して溶解した。Ａを攪拌
しながらＢをＡに加え、乳化した。混合物の内温が４０
℃になるまで攪拌を続け、次いで広口瓶に移し替えた。
同様にして本発明品３を添加していない対照品を調製し
た。それぞれを１２ヵ月35℃で保存したところ、本発明
品を添加した物は調製直後の物と全く変らなかったが、
対照品である無添加の物は油の酸化に由来する異臭が生
じていた。

【００５４】 Ａ バニシングクリームの処方 （重量比） ポリエチレングリコールモノステアレート ２．８ ソルビタンモノパルミテート １．２ 脱水ラノリン １．０ スクワラン ３．０ ステアリン酸 ８．５ オリーブ油 ２．０ セタノール ４．０ ワセリン ４．０ ジフェンヒドラミン １．０ 流動パラフィン ３．０ メチルパラベン ０．１ Ｂ 本発明品３ ２．５ プロピレングリコール ５．０ ホウ酸 ０．３ 精製水 ６１．６

【００５５】試験例１０ 下記の処方のコールドクリーム用原料を用意した。Ａ，
Ｂそれぞれを８２℃まで加熱し、均一に溶解した。Ａを
よく攪拌しながらＢをＡに加え、乳化した。対照品とし
て本発明品１を添加していないものを同様にして調製し
た。それぞれを広口瓶に移し替え、35℃で６ヵ月保存し
たところ、本発明品１を添加したものは調製直後のもの
と変りがなかったが、無添加のものは、油脂の酸化によ
る異臭を生じていた。

【００５６】 コールドクリームの処方 （重量比） Ａ ソルビタンモノステアレート １．０ ソルビタンモノイソステアレート ４．０ モノステアリン酸バチル １．０ 流動パラフィン ２５．０ セタノール ４．０ ミツロウ １５．０ ワセリン ５．０ メチルパラベン ０．１ Ｂ ホウ砂 ０．８ 本発明品１ ０．５ 精製水 ４２．１

【００５７】試験例１１ 北洋漁粉６００ｇ、魚肝末５０ｇ、カゼイン１００ｇ、
α−デンプン１５０ｇ、ビタミンミネラル混合物１００
ｇ、コーン油５０ｇからなる混合物に、本発明品１の10
％エタノール液３ｇを加えてよく混合し、顆粒化後乾燥
して養殖魚用飼料を調製した。対照品として本発明品１
を添加していない飼料を同様にして調製した。ビニール
袋にそれぞれを入れて３５℃で２ヵ月保存したところ、
本発明品１を添加したものは調製直後のものと殆ど変化
がなかったが、対照品の無添加物は、変色して油脂の酸
化臭が強くした。

【００５８】

【発明の効果】本発明の水易溶性ヤマモモ科植物抽出物
は、原料のヤマモモ科植物抽出物と比較して以下の特徴
を有している。 （１） 水に対する溶解性が極めてよい。 （２） 酸化防止効果が強い。 （３） 水に対する溶解性が改善されたため、水を含有
する食品、医薬品、医薬部外品、化粧品中で高濃度で使
用しても析出物の生成の問題がなく、任意の濃度で使用
することができる。 これらの特徴は、ヤマモモ科植物抽出物にガラクトース
残基を転移させた結果、水に対する溶解度が極めて高く
改善されたことによるもので、水溶性の酸化防止剤とし
て、食品、医薬品、医薬部外品、化粧品又は飼料などに
利用することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ｃ１２Ｐ 19/44 Ｃ１２Ｐ 19/44

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 酸化防止効果を有するヤマモモ科植物抽
   出物とガラクトース残基転移源の共存下で、ガラクトー
   ス残基転移活性を有する酵素を作用させてヤマモモ科植
   物抽出物にガラクトース残基を転移させることを特徴と
   する水易溶性ヤマモモ科植物抽出物。
2. 【請求項２】 ヤマモモ科植物抽出物がヤマモモ科ヤマ
   モモ属植物から有機溶媒を用いて抽出したものであるこ
   とを特徴とする請求項１記載の水易溶性ヤマモモ科植物
   抽出物。