JPH099997A - 安定なプラスミン溶液 - Google Patents
安定なプラスミン溶液Info
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 プラスミン、並びにリジン、アルギニン、グ
リシン、アラニン、アスパラギン酸及びメチオニンから
選ばれるアミノ酸からなるオリゴペプチドを含有するプ
ラスミン溶液。 【効果】 長期間保存してもプラスミン活性及びα２Ｐ
Ｉとの結合活性が低下することなく、安定に維持され
る。α２ＰＩの測定試薬等として有用であり、自動分析
機器にも適用することができる。
リシン、アラニン、アスパラギン酸及びメチオニンから
選ばれるアミノ酸からなるオリゴペプチドを含有するプ
ラスミン溶液。 【効果】 長期間保存してもプラスミン活性及びα２Ｐ
Ｉとの結合活性が低下することなく、安定に維持され
る。α２ＰＩの測定試薬等として有用であり、自動分析
機器にも適用することができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、血液凝固線溶因子の測
定試薬等に有用な安定なプラスミン溶液に関する。
定試薬等に有用な安定なプラスミン溶液に関する。
【０００２】
【従来の技術】生体内における酵素反応は、その活性化
物質やその反応を阻害する阻害物質により制御・調整さ
れ、機能の調節が図られている。例えば、血液凝固機構
においては、血管損傷部位以外での血液凝固反応や、過
度の凝固亢進・線溶亢進を阻害する酵素阻害物質が存在
し、これにより血液凝固・線溶の制御・調節が行われて
いる。血栓形成の進展状態を検査する血液学的検査にお
いては、酵素阻害物質の測定は重要であり、凝固・線溶
の状態を示す良い指標となることから、アンチトロンビ
ンIII（ＡＴIII）、α２−プラスミンインヒビター（α
２ＰＩ）などの酵素阻害物質の測定が行われている。
物質やその反応を阻害する阻害物質により制御・調整さ
れ、機能の調節が図られている。例えば、血液凝固機構
においては、血管損傷部位以外での血液凝固反応や、過
度の凝固亢進・線溶亢進を阻害する酵素阻害物質が存在
し、これにより血液凝固・線溶の制御・調節が行われて
いる。血栓形成の進展状態を検査する血液学的検査にお
いては、酵素阻害物質の測定は重要であり、凝固・線溶
の状態を示す良い指標となることから、アンチトロンビ
ンIII（ＡＴIII）、α２−プラスミンインヒビター（α
２ＰＩ）などの酵素阻害物質の測定が行われている。
【０００３】これらのうち、α２ＰＩは、血液の線維素
溶解現象を調節する線溶阻止因子の中でも最も重要な因
子であることが明らかにされ、生体内の線溶亢進状態を
知るための指標として注目されている。また、その血液
中レベルは汎発性血管内血液凝固症（ＤＩＣ）、肝疾患
で顕著に低下するなど種々の疾患、症状により変動する
ため、これら疾患のスクリーニング、病体解析、予後判
定及び線溶療法時の薬効判定の指標となっている。
溶解現象を調節する線溶阻止因子の中でも最も重要な因
子であることが明らかにされ、生体内の線溶亢進状態を
知るための指標として注目されている。また、その血液
中レベルは汎発性血管内血液凝固症（ＤＩＣ）、肝疾患
で顕著に低下するなど種々の疾患、症状により変動する
ため、これら疾患のスクリーニング、病体解析、予後判
定及び線溶療法時の薬効判定の指標となっている。
【０００４】従来、このような酵素阻害物質の測定法と
しては、測定対象である酵素阻害物質と過剰量の酵素と
を反応させ、残存する酵素を測定することにより酵素阻
害物質を測定することが行われている。例えば、生体試
料（検体）中のα２ＰＩ量を測定する場合には、α２Ｐ
Ｉが酵素プラスミンを阻害することを利用して、一定量
のプラスミンを検体中のα２ＰＩと反応させた後、残存
するプラスミンの活性を測定することにより、α２ＰＩ
量を求めることが行われている。そして、この場合に、
プラスミンの活性は、発色性合成基質の加水分解速度を
吸光度変化をもって測定する方法などにより求められて
いる。
しては、測定対象である酵素阻害物質と過剰量の酵素と
を反応させ、残存する酵素を測定することにより酵素阻
害物質を測定することが行われている。例えば、生体試
料（検体）中のα２ＰＩ量を測定する場合には、α２Ｐ
Ｉが酵素プラスミンを阻害することを利用して、一定量
のプラスミンを検体中のα２ＰＩと反応させた後、残存
するプラスミンの活性を測定することにより、α２ＰＩ
量を求めることが行われている。そして、この場合に、
プラスミンの活性は、発色性合成基質の加水分解速度を
吸光度変化をもって測定する方法などにより求められて
いる。
【０００５】しかし、このような酵素阻害物質の多くは
セリンプロテアーゼインヒビターであり、このような酵
素阻害物質を測定するための酵素はセンリプロテアーゼ
である。セリンプロテアーゼ等のプロテアーゼの多く
は、自己の分子内に自己の基質となる部位が存在するた
め、溶液中で速やかに分解を起こし、プロテアーゼ活性
あるいはプロテアーゼインヒビターとの結合活性の低下
が認められることがある。例えば、α２ＰＩの測定に用
いられるプラスミンは、ヒト由来のものでは、３７℃に
１時間放置するとプロテアーゼ活性の７２％が失活し、
Ｈ鎖、Ｌ鎖共に分解が生じる（Ｋ．Ｎ．Ｎ．Ｒｅｄｄ
ｙ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍ
ｍｕｎ．，９２，１０１６−１０２２（１９８０））。
セリンプロテアーゼインヒビターであり、このような酵
素阻害物質を測定するための酵素はセンリプロテアーゼ
である。セリンプロテアーゼ等のプロテアーゼの多く
は、自己の分子内に自己の基質となる部位が存在するた
め、溶液中で速やかに分解を起こし、プロテアーゼ活性
あるいはプロテアーゼインヒビターとの結合活性の低下
が認められることがある。例えば、α２ＰＩの測定に用
いられるプラスミンは、ヒト由来のものでは、３７℃に
１時間放置するとプロテアーゼ活性の７２％が失活し、
Ｈ鎖、Ｌ鎖共に分解が生じる（Ｋ．Ｎ．Ｎ．Ｒｅｄｄ
ｙ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍ
ｍｕｎ．，９２，１０１６−１０２２（１９８０））。
【０００６】一方、プラスミンのプロテアーゼ活性は、
フィブリノーゲン、ε−アミノカプロン酸、高イオン強
度、グリセロールの添加（Ｊ．Ｊｅｓｐｅｒｓｅｎ，Ｔ
ｈｒｏｍｂ．Ｒｅｓ．，３７，３９５−４０４（１９８
６））、更に、ε−アミノカプロン酸やリジンの添加
（Ｋ．Ｎ．Ｎ．Ｒｅｄｄｙ，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎＦ
ｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ，３７４−３７９（１９８
１））等により、安定性が向上することが知られてい
る。しかしながら、これらの方法では極めて短時間の安
定化が図れるのみであり、例えば３７℃で１時間放置す
ると、活性は著しく低下してしまう。また、５０％グリ
セロールのように、プロテアーゼ活性の安定性が比較的
保てるものであっても、プロテアーゼインヒビターとの
結合活性が低下するなどの問題があった（Ｍ．Ｓｈｉｍ
ｏｋａｗａ，Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，
１０，５３３−５３６（１９９４））。
フィブリノーゲン、ε−アミノカプロン酸、高イオン強
度、グリセロールの添加（Ｊ．Ｊｅｓｐｅｒｓｅｎ，Ｔ
ｈｒｏｍｂ．Ｒｅｓ．，３７，３９５−４０４（１９８
６））、更に、ε−アミノカプロン酸やリジンの添加
（Ｋ．Ｎ．Ｎ．Ｒｅｄｄｙ，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎＦ
ｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ，３７４−３７９（１９８
１））等により、安定性が向上することが知られてい
る。しかしながら、これらの方法では極めて短時間の安
定化が図れるのみであり、例えば３７℃で１時間放置す
ると、活性は著しく低下してしまう。また、５０％グリ
セロールのように、プロテアーゼ活性の安定性が比較的
保てるものであっても、プロテアーゼインヒビターとの
結合活性が低下するなどの問題があった（Ｍ．Ｓｈｉｍ
ｏｋａｗａ，Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，
１０，５３３−５３６（１９９４））。
【０００７】このため、このような酵素阻害物質の測定
試薬は、プラスミンを溶液状態で保存できないことか
ら、凍結乾燥品として製造されており、測定の際には用
時調製が必要であり、経済性や操作性、迅速性などの点
で問題があった。また、従来用いられているプラスミン
溶液では、粘性が高いことや、プラスミン活性及びプラ
スミンのα２ＰＩ結合活性が著しく低下するため、α２
ＰＩの測定試薬として自動分析機器に応用することは困
難であった。
試薬は、プラスミンを溶液状態で保存できないことか
ら、凍結乾燥品として製造されており、測定の際には用
時調製が必要であり、経済性や操作性、迅速性などの点
で問題があった。また、従来用いられているプラスミン
溶液では、粘性が高いことや、プラスミン活性及びプラ
スミンのα２ＰＩ結合活性が著しく低下するため、α２
ＰＩの測定試薬として自動分析機器に応用することは困
難であった。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、プラスミンを溶液状態で保存してもプラスミン活性
及びプラスミンのα２ＰＩとの結合活性が、長期間安定
に維持できるプラスミン溶液を提供することにある。
は、プラスミンを溶液状態で保存してもプラスミン活性
及びプラスミンのα２ＰＩとの結合活性が、長期間安定
に維持できるプラスミン溶液を提供することにある。
【０００９】
【課題を解決するための手段】かかる実情において、本
発明者らは鋭意研究を行った結果、プラスミンが基質を
切断することにより生じる特定のアミノ酸からなるオリ
ゴペプチドを用いれば、プラスミンが長期間安定で、α
２ＰＩ測定用試薬等として有用なプラスミン溶液が得ら
れることを見出し、本発明を完成した。
発明者らは鋭意研究を行った結果、プラスミンが基質を
切断することにより生じる特定のアミノ酸からなるオリ
ゴペプチドを用いれば、プラスミンが長期間安定で、α
２ＰＩ測定用試薬等として有用なプラスミン溶液が得ら
れることを見出し、本発明を完成した。
【００１０】すなわち、本発明は、プラスミン、並びに
リジン、アルギニン、グリシン、アラニン、アスパラギ
ン酸及びメチオニンから選ばれるアミノ酸からなるオリ
ゴペプチドを含有するプラスミン溶液を提供するもので
ある。
リジン、アルギニン、グリシン、アラニン、アスパラギ
ン酸及びメチオニンから選ばれるアミノ酸からなるオリ
ゴペプチドを含有するプラスミン溶液を提供するもので
ある。
【００１１】本発明で用いられるプラスミンとしては、
メチオニル型（そのＮ末がメチオニンである）、グルタ
ミル型（そのＮ末がグルタミン酸である）、リジル型
（そのＮ末がリジンである）などのいずれでも良く、ク
ロモジェニックス社などから市販されているものを使用
することができる。これらのプラスミンは単独又は混合
物として用いることができ、活性として０．１〜１０nk
at／ml、特に０．３〜５nkat／mlとなるような範囲で用
いるのが好ましい。なお、１nkatは、１秒間に１nmolの
プラスミン合成基質（Ｓ−２２５１）を分解するプラス
ミン量をいう。
メチオニル型（そのＮ末がメチオニンである）、グルタ
ミル型（そのＮ末がグルタミン酸である）、リジル型
（そのＮ末がリジンである）などのいずれでも良く、ク
ロモジェニックス社などから市販されているものを使用
することができる。これらのプラスミンは単独又は混合
物として用いることができ、活性として０．１〜１０nk
at／ml、特に０．３〜５nkat／mlとなるような範囲で用
いるのが好ましい。なお、１nkatは、１秒間に１nmolの
プラスミン合成基質（Ｓ−２２５１）を分解するプラス
ミン量をいう。
【００１２】本発明で用いられるアミノ酸のオリゴペプ
チドとしては、リジン、アルギニン、グリシン、アラニ
ン、アスパラギン酸及びメチオニンから選ばれるアミノ
酸の１種又は２種以上を組合わせたジペプチド、トリペ
プチド等が挙げられる。これらのうち、１種のアミノ酸
からなるジペプチド又はトリペプチドが好ましく、特に
グリシルグリシン、グリシルグリシルグリシン、アラニ
ルアラニンが好ましい。
チドとしては、リジン、アルギニン、グリシン、アラニ
ン、アスパラギン酸及びメチオニンから選ばれるアミノ
酸の１種又は２種以上を組合わせたジペプチド、トリペ
プチド等が挙げられる。これらのうち、１種のアミノ酸
からなるジペプチド又はトリペプチドが好ましく、特に
グリシルグリシン、グリシルグリシルグリシン、アラニ
ルアラニンが好ましい。
【００１３】これらのオリゴペプチドは、１種又は２種
以上を組合わせて用いることができる。オリゴペプチド
は、全組成中に１〜２０重量％（以下、単に％で示
す）、特に５〜２０％配合するのが好ましい。また、溶
液中のプラスミンに対して１〜２０００mg／nkat、特に
１０〜７００mg／nkatの範囲で配合するのが好ましい。
以上を組合わせて用いることができる。オリゴペプチド
は、全組成中に１〜２０重量％（以下、単に％で示
す）、特に５〜２０％配合するのが好ましい。また、溶
液中のプラスミンに対して１〜２０００mg／nkat、特に
１０〜７００mg／nkatの範囲で配合するのが好ましい。
【００１４】また、これらのオリゴペプチドと、リジ
ン、アルギニン、グリシン、アラニン、アスパラギン酸
及びメチオニンから選ばれる１種又は２種以上のアミノ
酸を組合わせて用いることができ、より安定なプラスミ
ン溶液を得ることができる。この場合には、これらのア
ミノ酸は全組成中に１〜２０％、特に５〜２０％配合す
るのが好ましい。
ン、アルギニン、グリシン、アラニン、アスパラギン酸
及びメチオニンから選ばれる１種又は２種以上のアミノ
酸を組合わせて用いることができ、より安定なプラスミ
ン溶液を得ることができる。この場合には、これらのア
ミノ酸は全組成中に１〜２０％、特に５〜２０％配合す
るのが好ましい。
【００１５】本発明のプラスミン溶液には、更に多価ア
ルコールを配合することができ、より安定なプラスミン
溶液を得ることができる。ここで、多価アルコールとし
ては、グリセロール、エチレングリコール、ポリエチレ
ングリコール等が好ましい。多価アルコールを配合する
場合には、全組成中に１〜５０％、特に５〜３０％配合
するのが好ましい。
ルコールを配合することができ、より安定なプラスミン
溶液を得ることができる。ここで、多価アルコールとし
ては、グリセロール、エチレングリコール、ポリエチレ
ングリコール等が好ましい。多価アルコールを配合する
場合には、全組成中に１〜５０％、特に５〜３０％配合
するのが好ましい。
【００１６】本発明のプラスミン溶液は、α２ＰＩの測
定試薬、プラスミンの標準液等として有用なものであ
る。測定試薬とする場合には、通常用いられる発色性合
成基質を使用することにより、検体中のα２ＰＩを精度
良く定量することができる。発色性合成基質としては、
特に制限されず、例えばクロモジェニック社製のＳ−２
２５１（Ｈ−Ｄ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−パラニトロ
アニリン）、Ｓ−２４０３（Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−
パラニトロアニリン）などを好適に使用することができ
る。
定試薬、プラスミンの標準液等として有用なものであ
る。測定試薬とする場合には、通常用いられる発色性合
成基質を使用することにより、検体中のα２ＰＩを精度
良く定量することができる。発色性合成基質としては、
特に制限されず、例えばクロモジェニック社製のＳ−２
２５１（Ｈ−Ｄ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−パラニトロ
アニリン）、Ｓ−２４０３（Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−
パラニトロアニリン）などを好適に使用することができ
る。
【００１７】
【発明の効果】本発明のプラスミン溶液は、長期間保存
してもプラスミン活性及びα２ＰＩとの結合活性が低下
することなく、安定に維持され、α２ＰＩの測定試薬等
として有用である。また、溶液の状態で安定に保存する
ことができるため、測定時にそのまま使用することがで
き、経済性及び操作性に優れ、簡便かつ迅速に測定を行
うことができる。更に、粘性が低いため、自動分析機器
にも好適に使用することができる。
してもプラスミン活性及びα２ＰＩとの結合活性が低下
することなく、安定に維持され、α２ＰＩの測定試薬等
として有用である。また、溶液の状態で安定に保存する
ことができるため、測定時にそのまま使用することがで
き、経済性及び操作性に優れ、簡便かつ迅速に測定を行
うことができる。更に、粘性が低いため、自動分析機器
にも好適に使用することができる。
【００１８】
【実施例】次に、実施例を挙げて本発明を更に説明する
が、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
が、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００１９】実施例１ 下記組成の第１試薬２５０μl に、正常血漿検体（所定
量のα２ＰＩを含む）又は生理食塩液をそれぞれ３μl
加え、３７℃で５分間反応させ、次いで下記組成の第２
試薬１００μl を添加した後、波長４０５nmでの吸光度
の１分間当たりの変化量を測定した。生理食塩液を用い
た時の吸光度の変化量はプラスミン活性を示し、プラス
ミンの合成基質（Ｓ−２２５１）を加水分解する力価を
示している。また、生理食塩液のプラスミン活性から正
常血漿検体を反応させた時のプラスミンの残存活性を減
じた値がプラスミンのα２ＰＩ結合活性を示している。
なお、第２試薬のそれぞれのプラスミン溶解液は、表２
に示す添加物を添加した２０％グリセロール溶液を用い
た。これら溶液は水酸化ナトリウム又は塩酸でpH７．４
に調整し、プラスミンを溶解した後、半分を用いて作成
当日に測定を行い、残り半分は密閉して３７℃で４日間
放置した後測定を行った。なお、比較として、５０％グ
リセロール及び２０％グリセロールを用いた。結果を表
２に示す。
量のα２ＰＩを含む）又は生理食塩液をそれぞれ３μl
加え、３７℃で５分間反応させ、次いで下記組成の第２
試薬１００μl を添加した後、波長４０５nmでの吸光度
の１分間当たりの変化量を測定した。生理食塩液を用い
た時の吸光度の変化量はプラスミン活性を示し、プラス
ミンの合成基質（Ｓ−２２５１）を加水分解する力価を
示している。また、生理食塩液のプラスミン活性から正
常血漿検体を反応させた時のプラスミンの残存活性を減
じた値がプラスミンのα２ＰＩ結合活性を示している。
なお、第２試薬のそれぞれのプラスミン溶解液は、表２
に示す添加物を添加した２０％グリセロール溶液を用い
た。これら溶液は水酸化ナトリウム又は塩酸でpH７．４
に調整し、プラスミンを溶解した後、半分を用いて作成
当日に測定を行い、残り半分は密閉して３７℃で４日間
放置した後測定を行った。なお、比較として、５０％グ
リセロール及び２０％グリセロールを用いた。結果を表
２に示す。
【００２０】
【表１】 第１試薬： Ｈ−Ｄ−バリル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−リジル−ｐ−ニトロアニリン（S-2251） １．２mM ２５mM トリス緩衝液（pH７．４） 第２試薬： プラスミン ３nKat／ml それぞれのプラスミン溶液（pH７．４）
【００２１】
【表２】
【００２２】表２の結果から明らかなように、グリシル
グリシンを含有する本発明のプラスミン溶液は、プラス
ミン活性及びα２ＰＩ結合活性が低下することなく、安
定に維持された。また、プラスミン溶液の粘性も低いも
のであった。
グリシンを含有する本発明のプラスミン溶液は、プラス
ミン活性及びα２ＰＩ結合活性が低下することなく、安
定に維持された。また、プラスミン溶液の粘性も低いも
のであった。
【００２３】実施例２ 表３に示す組成の各種プラスミン溶液を用い、実施例１
と同様にして、製造時及び３７℃で２日間保存した後の
プラスミン活性及びプラスミンのα２ＰＩ結合活性を測
定した。結果を表３に示す。
と同様にして、製造時及び３７℃で２日間保存した後の
プラスミン活性及びプラスミンのα２ＰＩ結合活性を測
定した。結果を表３に示す。
【００２４】
【表３】
【００２５】表３の結果から明らかなように、グリシル
グリシンを含有する本発明のプラスミン溶液は、プラス
ミン活性及びα２ＰＩ結合活性が低下することなく、安
定に維持された。また、プラスミン溶液の粘性も低いも
のであった。
グリシンを含有する本発明のプラスミン溶液は、プラス
ミン活性及びα２ＰＩ結合活性が低下することなく、安
定に維持された。また、プラスミン溶液の粘性も低いも
のであった。
【００２６】実施例３ 表４に示す組成の各種プラスミン溶液を用い、実施例１
と同様にして、製造時及び３７℃で２５日間保存した後
のプラスミン活性及びプラスミンのα２ＰＩ結合活性を
測定した。なお、生理食塩液及び正常血漿検体の液量は
５μl とした。結果を表４に示す。
と同様にして、製造時及び３７℃で２５日間保存した後
のプラスミン活性及びプラスミンのα２ＰＩ結合活性を
測定した。なお、生理食塩液及び正常血漿検体の液量は
５μl とした。結果を表４に示す。
【００２７】
【表４】
【００２８】表４の結果から明らかなように、グリシル
グリシンを含有する本発明のプラスミン溶液は、プラス
ミン活性及びα２ＰＩ結合活性が低下することなく、安
定に維持された。また、プラスミン溶液の粘性も低いも
のであった。
グリシンを含有する本発明のプラスミン溶液は、プラス
ミン活性及びα２ＰＩ結合活性が低下することなく、安
定に維持された。また、プラスミン溶液の粘性も低いも
のであった。
【００２９】実施例４ 表５に示す組成の各種プラスミン溶液を用い、実施例１
と同様にして、製造時及び３７℃で９日間保存した後の
プラスミン活性及びプラスミンα２ＰＩ結合活性を測定
した。なお、生理食塩液及び正常血漿液検体の液量は５
μl とした。結果を表５に示す。
と同様にして、製造時及び３７℃で９日間保存した後の
プラスミン活性及びプラスミンα２ＰＩ結合活性を測定
した。なお、生理食塩液及び正常血漿液検体の液量は５
μl とした。結果を表５に示す。
【００３０】
【表５】
【００３１】表５の結果から明らかなように、グリシル
グリシンを含有する本発明のプラスミン溶液は、プラス
ミン活性及びα２ＰＩ結合活性が低下することなく、安
定に維持された。また、Ｎｏ．２の１０％グリシルグリ
シン及び１０％グリセロールを含有するプラスミン溶液
の粘度は、ＶＩＳＣＯＭＡＴＥ（ヤマイチ電機工業社
製）を用いて２５℃において測定したときに１．８９cp
であった。これに対し、５０％グリセロールを含有する
プラスミン溶液の２５℃における粘度は６．９８cpであ
った。本発明のプラスミン溶液は粘性も低いものであ
り、自動分析機器にも使用可能である。
グリシンを含有する本発明のプラスミン溶液は、プラス
ミン活性及びα２ＰＩ結合活性が低下することなく、安
定に維持された。また、Ｎｏ．２の１０％グリシルグリ
シン及び１０％グリセロールを含有するプラスミン溶液
の粘度は、ＶＩＳＣＯＭＡＴＥ（ヤマイチ電機工業社
製）を用いて２５℃において測定したときに１．８９cp
であった。これに対し、５０％グリセロールを含有する
プラスミン溶液の２５℃における粘度は６．９８cpであ
った。本発明のプラスミン溶液は粘性も低いものであ
り、自動分析機器にも使用可能である。
【００３２】実施例５ １０％グリセロールを含む１０％グリシルグリシンのプ
ラスミン溶液を用い、実施例１と同様にして、０〜２０
０％濃度のα２ＰＩ検体（ｎ＝２測定）及び５０又は１
００％濃度のα２ＰＩ検体（ｎ＝１０測定）の活性測定
を行い、検量線性及び再現性の検討をした。なお、検量
線性の検討では、正常血漿検体の原液を２００％濃度に
α２ＰＩとして設定したため、検体量は１０μl とし
た。また、再現性の検討では、正常血漿検体の原液を１
００％濃度のα２ＰＩとして設定したため、検体量は５
μl とした。その結果を図１及び表６に示す。
ラスミン溶液を用い、実施例１と同様にして、０〜２０
０％濃度のα２ＰＩ検体（ｎ＝２測定）及び５０又は１
００％濃度のα２ＰＩ検体（ｎ＝１０測定）の活性測定
を行い、検量線性及び再現性の検討をした。なお、検量
線性の検討では、正常血漿検体の原液を２００％濃度に
α２ＰＩとして設定したため、検体量は１０μl とし
た。また、再現性の検討では、正常血漿検体の原液を１
００％濃度のα２ＰＩとして設定したため、検体量は５
μl とした。その結果を図１及び表６に示す。
【００３３】
【表６】
【００３４】図１の結果より、検量線性は良好であり、
表６の結果より、再現性も良好であった。
表６の結果より、再現性も良好であった。
【図１】実施例５において、検量線性を検討したとき
の、α２ＰＩ濃度と測定値（ΔＡｂｓ／ｍｉｎ）の関係
を示す図である。
の、α２ＰＩ濃度と測定値（ΔＡｂｓ／ｍｉｎ）の関係
を示す図である。
Claims (5)
- 【請求項１】 プラスミン、並びにリジン、アルギニ
ン、グリシン、アラニン、アスパラギン酸及びメチオニ
ンから選ばれるアミノ酸からなるオリゴペプチドを含有
するプラスミン溶液。 - 【請求項２】 更に、リジン、アルギニン、グリシン、
アラニン、アスパラギン酸及びメチオニンから選ばれる
１種以上のアミノ酸を含有する請求項１記載のプラスミ
ン溶液。 - 【請求項３】 更に、多価アルコールを含有する請求項
１又は２記載のプラスミン溶液。 - 【請求項４】 プラスミン溶液に、リジン、アルギニ
ン、グリシン、アラニン、アスパラギン酸及びメチオニ
ンから選ばれるアミノ酸からなるオリゴペプチドを添加
することを特徴とするプラスミン溶液の安定化方法。 - 【請求項５】 更に、リジン、アルギニン、グリシン、
アラニン、アスパラギン酸及びメチオニンから選ばれる
１種以上のアミノ酸を添加する請求項４記載のプラスミ
ン溶液の安定化方法。
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|---|---|---|---|---|
| JP2003514790A (ja) * | 1999-11-13 | 2003-04-22 | バイエル・コーポレーシヨン | 可逆的に不活性化された酸性化プラスミンの局所送達による血栓溶解の方法 |
-
1995
- 1995-06-26 JP JP15933095A patent/JP3761925B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (3)
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|---|---|---|---|---|
| JP2003514790A (ja) * | 1999-11-13 | 2003-04-22 | バイエル・コーポレーシヨン | 可逆的に不活性化された酸性化プラスミンの局所送達による血栓溶解の方法 |
| JP2003514789A (ja) * | 1999-11-13 | 2003-04-22 | バイエル・コーポレーシヨン | 可逆的不活性化酸性化プラスミン |
| JP4988115B2 (ja) * | 1999-11-13 | 2012-08-01 | グリフオルス・セラピユーテイクス・インコーポレーテツド | 可逆的に不活性化された酸性化プラスミンの局所送達による血栓溶解の方法 |
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