JPH10130156A

JPH10130156A - 点眼剤組成物

Info

Publication number: JPH10130156A
Application number: JP30566396A
Authority: JP
Inventors: Yukio Ishiguro; 幸男石黒; Masahiro Orihashi; 正浩折橋; Yuki Takeda; 由紀武田
Original assignee: Teika Pharamaceutical Co Ltd
Current assignee: Teika Pharamaceutical Co Ltd
Priority date: 1996-10-30
Filing date: 1996-10-30
Publication date: 1998-05-19

Abstract

(57)【要約】【課題】防腐剤の微量の配合によって、防腐剤による
副作用への危惧の軽減をを図ると共に、ホウ酸イオンを
加えることによって抗菌性を保ち、特に塩化ベンザルコ
ニウム耐性菌に対しても効果のある点眼剤に関する。【解決手段】０．００１〜０．００５重量％の塩化ベ
ンザルコニウム、および８．１４ｍＭ〜０．２４４Ｍ濃
度のホウ酸イオン、を含有する点眼剤組成物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は防腐剤の微量の配合
によって、防腐剤による副作用への危惧の軽減をを図る
と共に、ホウ酸イオンを加えることによって抗菌性を保
ち、特に塩化ベンザルコニウム耐性菌に対しても効果の
ある点眼剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】点眼剤は水を媒体とする医薬品組成物で
あることから、その保存において殺菌防腐剤を配合する
ことは必須な要素として考えられてきた。最近の研究報
告によると防腐剤の配合によって、角結膜障害、角膜上
皮障害をもたらす可能性があることを指摘している報告
もある（あたらしい眼科８（１０）：１５９９−１６０
３，１９９１、眼科３３：５３３−５３８（１９９
１）、ＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙａｎｄＡｐｐｌｉｅｄ
Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ６２，２５１１６１（１
９８２））。医薬品製剤として点眼剤が抗菌性を具備す
るのは当然のことであるが、上記のような障害発生の懸
念を未然に防止すべく防腐剤の量を低減し、且つ点眼剤
の抗菌性を保つことが望まれている。特公平０７−５４
５６号公報には塩化ベンザルコニウムとパラオキシ安息
香酸エステルを防腐剤とし更にキレート剤を配合してな
る、防腐剤の濃度が小さく、且つ殺菌効果をもち刺激性
の少ない点眼剤が開示されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、特公平
０７−５４５６号公報は、殺菌効果の強い塩化ベンザル
コニウムの量を少なくし、抗菌力のやや弱いパラオキシ
安息香酸エステルを加え、更に殺菌効果のあるエデト酸
ナトリウムを加えることによって物理的に防腐力を保っ
たものを単に開示しているに過ぎない。本発明は、強い
殺菌効果をもつと共に眼障害をおこす恐れのある防腐剤
である塩化ベンザルコニウムの濃度を少なくすることに
よってその危険性を減少させ、且つ抗菌性を維持し、し
かも抗菌性が問題となる塩化ベンザルコニウム耐性菌に
対しても強い殺菌効果を得ることに成功した。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明の点眼剤組成物
は、以下の（ａ）および（ｂ）成分を含有することを特
徴とする。（ａ）０．００１〜０．００５重量％の塩化ベンザルコ
ニウム。（ｂ）８．１４ｍＭ〜０．２４４Ｍ濃度のホウ酸イオ
ン。

【０００５】

【発明の実施の形態】本発明では防腐剤として（ａ）成
分の塩化ベンザルコニウムを配合する。塩化ベンザルコ
ニウムは、点眼剤で最も汎用されている防腐剤である
が、その欠点として耐性菌の存在があり、また、高濃度
に配合すると眼障害の発生のおそれや刺激性の問題があ
る。そこで本発明では、防腐効果の確保と眼障害・刺激
性防止の観点から、点眼剤組成物中への塩化ベンザルコ
ニウムの配合量を０．００１〜０．００５重量％、好ま
しくは０．００２〜０．００３重量％の微量範囲に設定
した。そして本発明では、上記塩化ベンザルコニウムの
微量範囲においても、（ｂ）成分としてホウ酸イオンを
適量配合することにより、抗菌作用、特に塩化ベンザル
コニウム耐性菌に対する抗菌作用が改善されることを見
い出した。

【０００６】ホウ酸イオンは、ホウ酸バッファー等で点
眼剤に利用されており、抗菌作用があることも知られて
いる。また、ホウ酸イオン濃度が０．２４４Ｍを超える
と、アレルギーを起こすことがあることも知られてい
る。しかしながら、ホウ酸バッファーと低濃度の塩化ベ
ンザルコニウムとの組合せは、他のバッファー、例えば
クエン酸バッファー、リン酸バッファー、酢酸バッファ
ーとの組み合わせに比較して、後述の実験例１のよう
に、明らかに抗菌性に優れており、また、同じく後述す
る実験例２のように、配合する薬剤成分に依らずに効果
を発揮する。しかも検討の結果、用いるホウ酸イオンと
塩化ベンザルコニウムとの組合せは、一定の配合量の範
囲内で有効であることを見い出した。

【０００７】（ｂ）成分のホウ酸イオンは、本発明の点
眼剤組成物中に８．１４ｍＭ（ミリモル）〜０．２４４
Ｍ（モル）、好ましくは１０ｍＭ〜０．２Ｍの範囲で含
有されるように配合される。この配合量が８．１４ｍＭ
未満であると本発明の抗菌効果が得られず、一方、０．
２４４Ｍを超えるとアレルギー発生の懸念を生じる。ホ
ウ酸イオンは、ホウ酸、ホウ砂などのホウ酸塩から供給
され、なお、ホウ酸／ホウ酸塩を組み合わせてホウ酸バ
ッファーとする。

【０００８】本発明の点眼剤組成物は、上記（ａ），
（ｂ）両必須成分に加え、種々の任意成分を配合するこ
とができ、例えば、マレイン酸チモロール、塩酸アゼラ
スチン、ヒアルロン酸ナトリウム等の薬剤、ポリソルベ
ート８０、ステアリン酸ポリオキシル、ポリオキシエチ
レン硬化ヒマシ油誘導体等の非イオン性界面活性剤を用
いることができる。また、溶剤としてエタノール、プロ
ピレングリコール、グリセリン、ポリエチレングリコー
ル等の多価アルコール、キレート剤としてのエデト酸ナ
トリウムなどを配合することができる。本発明の点眼剤
組成物は、ｐＨ５〜８程度がよい。また、浸透圧比は通
常１になるように配合すればよく、塩化ナトリウム、塩
化カリウムまたはグリセリン等の多価アルコールで調整
できる。

【０００９】

【発明の効果】本発明によれば、刺激性や眼障害の生じ
るおそれがない低濃度範囲で防腐剤としての塩化ベンザ
ルコニウムを配合し、これに特定量のホウ酸イオンを存
在せしめることにより、抗菌性を高めることができ、特
に塩化ベンザルコニウム耐性菌に対しても優れた効果を
示す。

【００１０】

【実施例】

実施例１０．００４部の濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精
製水９０部に加え、エデト酸ナトリウム０．００５部、
ホウ酸１．５部（０．２４３Ｍ）、ホウ砂０．０１９部
（０．４９ｍＭ）、塩化ナトリウム０．１３部を順次加
えて撹拌、溶解し、滅菌精製水を適量加えて１００ｍｌ
とする。この液を０．２２μｍのメンブランフィルター
を通してろ過し本発明の点眼剤組成物とする。なお、
「部」は特に断りがない限り重量規準である。また、
「濃塩化ベンザルコニウム液５０」は、塩化ベンザルコ
ニウムの５０〜５５％液を示す。点眼剤組成物における
塩化ベンザルコニウムの含有量は０．００２％である。
実施例１の点眼剤組成物のホウ酸イオン濃度は０．２４
３Ｍである。

【００１１】実施例２０．００４部の濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精
製水９０部に加え、ホウ酸１．５部（０．２４３Ｍ）、
ホウ砂０．０１５部（０．３９ｍＭ）、塩化ナトリウム
０．１３部を順次加えて撹拌、溶解し、滅菌精製水を適
量加えて１００ｍｌとする。この液を０．２２μｍのメ
ンブランフィルターを通してろ過して本発明の点眼剤組
成物とする。実施例２の点眼剤組成物のホウ酸イオン濃
度は０．２４３Ｍである。

【００１２】実施例３０．００４部の濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精
製水９０部に加え、エデト酸ナトリウム０．００５部、
ホウ酸１．５部（０．２４３Ｍ）、ホウ砂０．１４部
（３．６７ｍＭ）、塩化ナトリウム０．１２部を順次加
え撹拌、溶解し、滅菌精製水を適量加えて１００ｍｌと
する。この液を０．２２μｍのメンブランフィルターを
通してろ過し本発明の点眼剤組成物とする。実施例３の
点眼剤組成物のホウ酸イオン濃度は０．２４３Ｍであ
る。

【００１３】実施例４０．００４部の濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精
製水９０部に加え、エデト酸ナトリウム０．００５部、
ホウ酸０．０５部（０．００８Ｍ）、ホウ砂０．００２
部（０．０５２ｍＭ）、塩化ナトリウム０．８７５部を
順次加え撹拌、溶解し、滅菌精製水を適量加えて１００
ｍｌとする。この液を０．２２μｍのメンブランフィル
ターを通してろ過し本発明の点眼剤組成物とする。実施
例４の点眼剤組成物のホウ酸イオン濃度は０．００８Ｍ
である。

【００１４】実施例５０．００４部の濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精
製水９０部に加え、エデト酸ナトリウム０．００５部、
ホウ酸０．５部（０．０８１Ｍ）、ホウ砂０．００５部
（０．１３１ｍＭ）、塩化ナトリウム０．６７部を順次
加え撹拌、溶解し滅菌精製水を適量加えて１００ｍｌと
する。この液を０．２２μｍのメンブランフィルターを
通してろ過し、本発明の点眼剤組成物とする。実施例５
の点眼剤組成物のホウ酸イオン濃度は０．０８１Ｍであ
る。

【００１５】実施例６０．００４部の濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精
製水９０部に加え、エデト酸ナトリウム０．００５部、
ホウ酸１部（０．１６２Ｍ）、ホウ砂０．００９部
（０．２３６ｍＭ）、塩化ナトリウム０．３部を順次加
え、撹拌、溶解し、滅菌精製水を適量加えて１００ｍｌ
とする。この液を０．２２μｍのメンブランフィルター
を通してろ過し、本発明の点眼剤組成物とする。実施例
６の点眼剤組成物のホウ酸イオン濃度は０．１６２Ｍで
ある。

【００１６】比較例１０．００４部の濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精
製水９０部に加え、エデト酸ナトリウム０．００５部、
クエン酸ナトリウム０．３部、クエン酸０．０２３部、
塩化ナトリウム０．８２部を順次加え撹拌、溶解し、滅
菌精製水を加えて１００ｍｌとする。この液を０．２２
μｍのメンブランフィルターを通してろ過し、比較例の
点眼剤組成物とする。

【００１７】比較例２０．００４部の濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精
製水９０部に加え、エデト酸ナトリウム０．００５部、
酢酸ナトリウム０．３部、氷酢酸０．０４５部、塩化ナ
トリウム０．７７部を順次加え撹拌、溶解し、滅菌精製
水を加えて１００ｍｌとする。この液を０．２２μｍの
メンブランフィルターを通してろ過し比較例の点眼剤組
成物とする。

【００１８】比較例３０．００４部の濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精
製水９０部に加え、エデト酸ナトリウム０．００５部、
リン酸水素ナトリウム１．３部、リン酸水素二ナトリウ
ム０．８部、塩化ナトリウム０．１部を順次加え撹拌、
溶解し、滅菌精製水を加えて１００ｍｌとする。この液
を０．２２μｍのメンブランフィルターを通してろ過
し、比較例の点眼剤組成物とする。

【００１９】実施例７マレイン酸チモロール０．００３４２部、および０．０
０４部の濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精製水９
０部に加え、エデト酸ナトリウム０．００５部、ホウ酸
０．５部（０．０８１Ｍ）、ホウ砂０．００１５部
（０．０３９ｍＭ）、塩化ナトリウム０．６４部を順次
加え撹拌、溶解し、滅菌精製水を適量加えて１００ｍｌ
とする。この液を０．２２μｍのメンブランフィルター
を通してろ過し、本発明の点眼剤組成物とする。実施例
７の点眼剤組成物のホウ酸イオン濃度は０．０８１Ｍで
ある。

【００２０】実施例８塩酸アゼラスチン０．０２５部、および０．００４部の
濃塩化ベンザルコニウム液５０を滅菌精製水９０部に加
え、エデト酸ナトリウム０．０１部、ホウ酸１．５部
（０．２４３Ｍ）、ホウ砂０．０４９部（０．００１
Ｍ）、塩化ナトリウム０．１部を順次加え撹拌、溶解
し、滅菌精製水を適量加えて１００ｍｌとする。この液
を０．２２μのメンブランフィルターを通してろ過し、
本発明の点眼剤組成物とする。実施例８の点眼剤組成物
のホウ酸イオン濃度は０．２４４Ｍである。

【００２１】［実験例］以下の実験例においては下記の
手法により、抗菌効果を評価した。（１）接種菌液の調製細菌：ＳＣＤ寒天斜面培地を用い３７℃で、少なくとも
３日前より毎日移植を繰り返し、充分に発育する事を確
認する。もし充分な発育が認められなければ、充分な発
育が認められるまで継代培養を繰り返す。使用前日にＳ
ＣＤ寒天培地よりＳＣＤ培地３０ｍｌに当該菌を１白金
耳移植し、３７℃で１６〜１８時間培養する。培養後、
滅菌遠沈管に培養後のＳＣＤ培地を入れ、３，０００ｒ
ｐｍ、５分間遠心分離する。上澄み液をデカンテーショ
ンで取り除き、滅菌ＰＢＳ３０ｍｌを用い、同条件で２
回洗浄する。細菌計数板を用いて、滅菌ＰＢＳで希釈
し、４×１０⁶〜２×１０⁷個／ｍｌの菌濃度の浮遊液
を調製し接種菌液とする。さらにＳＣＤ寒天培地を用い
て寒天平板混釈法により生菌数を測定する。

【００２２】真菌：１）Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａ
ｎｓＧＰ寒天斜面培地を用いて２５℃で、細菌と同様に培養
し、調製する。２）Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ、Ａｓｐｅｒ
ｇｉｌｌｕｓｐｕｌｌｕｌａｎｓＧＰ寒天斜面培地を用い２５℃で、７日間以上培養し、
培地上に発育した分生子を３０ｍｌの滅菌ＰＢＳに浮遊
し、滅菌したガーゼでろ過する。ろ液を滅菌遠沈管に取
り、３０００ｒｐｍ、５分間分離する。上澄み液をデカ
ンテーションで取り除き、滅菌ＰＢＳ３０ｍｌを用い、
同条件で２回洗浄する。細菌計算板を用いて、滅菌ＰＢ
Ｓで希釈し、４×１０⁶〜２×１０⁷個／ｍｌの菌濃度
の浮遊液を調製し接種菌液とする。さらに、ＧＰ寒天培
地を用いて寒天平板混釈法により生菌数を測定する。

【００２３】（２）被験資料の分取被験試料１９．５ｍｌを滅菌した試験管または適当な容
器に分取する。対照としてＰＢＳを用いる。被験試料及
び対照は全て０．２２μｍのメンブランフィルターを用
いてろ過する。

【００２４】（３）菌の接種被験試料及び対照の１９．５ｍｌに接種菌液０．５ｍｌ
を接種し、よく混合して菌接種試料（試験液）とする。
この試験液２０ｍｌ中の濃度（個／ｍｌ）を接種菌数と
する。例えば接種菌液２．０×１０⁷個／ｍｌの場合、
接種菌数は５．０×１０⁵個／ｍｌとなる。

【００２５】（４）菌接種試料の保存及びサンプリング細菌を接種した試験液は３０〜３２℃に、真菌を接種し
た試験液は２０〜２５℃にそれぞれ保存し、接種直後、
６時間後、１、４、７日後によく撹拌または混合し、試
験液１ｍｌを無菌的にサンプリングし、寒天平板混釈法
により生菌数の経時的減少を測定する。

【００２６】（５）生菌数の測定：寒天平板混釈法によ
る。寒天平板の調製細菌用にＳＣＤ寒天培地、真菌用にＧＰ寒天培地を使用
する。試験液１ｍｌをＬＰ希釈液９ｍｌに懸濁して試料
１０倍希釈液とする。１０倍希釈液１ｍｌを用いて同操
作を繰り返し試料の１０倍段階希釈液を調製する。各段
階希釈液をそれぞれ１ｍｌづつ、それぞれ２枚の滅菌シ
ャーレに入れる。ついで、予め滅菌溶解し、約５０°に
保った所定の寒天培地１５〜２０ｍｌを無菌的に注ぎ、
シャーレのふたに付着しないように注意しながら試料と
培地をよく混和したのち、冷却固化させる。

【００２７】（６）培養平板を上下転倒して培養する。細菌用（ＳＣＤ寒天培
地）は、３０℃で３日間培養する。真菌用（ＧＰ寒天培
地）は、２５℃で７日間培養する。（７）集落数の算定培養後ただちに発生した集落数を計数する。集落数の算
定は、拡散集落がなく一平板に２０〜２００個の集落が
みられる平板を選んで行なう。（８）菌数計算得られた１平板当たりの集落数（平均値）と、希釈倍数
から試験液１ｍｌ中の生菌数を測定する。

【００２８】（９）残存率の計算以下の数１により接種菌数に対する百分率で表す。

【数１】

【００２９】（１０）使用指標菌株Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃｅｐａｃｉａ：ＩＦＯ１４
５９５Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃｅｐａｃｉａ耐性：ＩＦＯ
１５１２４Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ：ＩＦＯ１５９４Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ：ＩＦＯ４４１４Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｐｕｌｌｕｌａｎｓ：ＩＦＯ
５３５３（１１）判定細菌（Ｐｓ．ｃｅｐａｃｉａ，耐性Ｐｓ．ｃｅｐａｃｉ
ａ）：６時間で０．１％以下、２４時間で陰性、以後７
日まで陰性であるものが合格とする真菌（Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ，Ａｓｐｅｒ
ｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ，Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）：７日で０．０１％以下、以後増
殖なしであるものが合格とする

【００３０】実験例１実施例１および比較例１〜３の点眼剤について、Ｐｓ．
ｃｅｐａｃｉａ、耐性Ｐｓ．ｃｅｐａｃｉａに対する抗
菌効果を確認し、後記の表１および表２に示した。ホウ
酸イオンを含有せしめてホウ酸バッファーとした実施例
１の点眼剤が優れた抗菌効果を示したのに対し、クエン
酸バッファー、リン酸バッファー、酢酸バッファーを用
いた比較例１〜３ではいずれも抗菌性が認められなかっ
た。

【００３１】

【表１】表１：実験例１（残存率：％）Ｐｓ．ｃｅｐａｃｉａ経時実施例１比較例１比較例２比較例３０時間 7.6 65 12 43 ６時間 0 44 2.6 2.7 １日 0 129 1.5 25 ４日 0 106 1.8 65 ７日 0 171 38 153

【００３２】

【表２】表２：実験例１（残存率：％）Ｐｓ．ｃｅｐａｃｉａ耐性経時実施例１比較例１比較例２比較例３０時間 0.067 27 3.3 32 ６時間 0 17 1.9 52 １日 0 133 5.6 253 ４日 0 173 12 267 ７日 0 160 95 147

【００３３】実験例２異なる薬剤を配合した本発明の点眼剤〔実施例７の（マ
レイン酸チモロール）、実施例８（塩酸アゼラスチ
ン）〕についての抗菌効果を確認し、その結果を表３に
示した。本発明の点眼剤は、配合薬剤に依ることなく抗
菌効果を発揮することが判る。

【００３４】

【表３】表３：実験例２（残存率：％）Ｐｓ．ＣｅｐａｃｉａＰｓ．Ｃｅｐａｃｉａ（耐性）経時実施例７実施例８実施例７実施例８０時間 29 18 52 41 ６時間 0 0 0.01 0.01 １日 0 0 0 0 ４日 0 0 0 0 ７日 0 0 0 0

【００３５】実験例３各種の指標菌株について、ホウ酸イオン濃度を変化させ
て本発明の点眼剤の抗菌力を確認した。ホウ酸イオン濃
度８．１４ｍＭ〜０．２４４Ｍの範囲で優れた抗菌力を
示すことが判る。

【００３６】

【表４】表４：実験例３（残存率：％）Ｐｓ．ｃｅｐａｃｉａ経時実施例１実施例２実施例３実施例４実施例５実施例６０時間 7.6 0.16 0.026 53 20.1 13.4 ６時間 0 0 0 0.058 0 0 １日 0 0 0 0 0 0 ４日 0 0 0 0 0 0 ７日 0 0 0 0 0 0

【００３７】

【表５】表５：実験例３（残存率：％）Ｐｓ．ｃｅｐａｃｉａ耐性経時実施例１実施例２実施例３実施例４実施例５実施例６０時間 0.067 0.036 0.01 50 53.4 3.3 ６時間 0 0 0 0.04 0.02 0.01 １日 0 0 0 0 0 0 ４日 0 0 0 0 0 0 ７日 0 0 0 0 0 0

【００３８】

【表６】表６：実験例３（残存率：％）Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ経時実施例１実施例２実施例３実施例４実施例５実施例６０時間 0.17 0 0 34 20.4 2.1 ６時間 0 0 0 0 0 0 １日 0 0 0 0 0 0 ４日 0 0 0 0 0 0 ７日 0 0 0 0 0 0

【００３９】

【表７】表７：実験例３（残存率：％）Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ経時実施例１実施例２実施例３実施例４実施例５実施例６０時間 10 0 0 105 84.1 20.3 ６時間 0 0 0 0.24 0.15 0.02 １日 0 0 0 0.017 0 0 ４日 0 0 0 0.014 0 0 ７日 0 0 0 0.005 0 0

【００４０】

【表８】表８：実験例３（残存率：％）Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｐｕｌｌｕｌａｎｓ経時実施例１実施例２実施例３実施例４実施例５実施例６０時間 0 0.03 0.01 17 3.2 0.05 ６時間 0 0 0 0 0 0 １日 0 0 0 0 0 0 ４日 0 0 0 0 0 0 ７日 0 0 0 0 0 0

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】（ａ）０．００１〜０．００５重量％の
塩化ベンザルコニウム、および（ｂ）８．１４ｍＭ〜
０．２４４Ｍ濃度のホウ酸イオン、を含有することを特
徴とする点眼剤組成物。