JPH10130211A

JPH10130211A - ベンゾフルオレン化合物、中間体、組成物、および方法

Info

Publication number: JPH10130211A
Application number: JP9261612A
Authority: JP
Inventors: Thomas Alan Crowell; トーマス・アラン・クローウェル; Charles David Jones; チャールズ・デイビッド・ジョーンズ; Henry Uhlman Bryant; ヘンリー・アールマン・ブライアント
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1996-09-26
Filing date: 1997-09-26
Publication date: 1998-05-19
Also published as: DE69711527D1; ES2175277T3; US5958917A; DK0832881T3; DE69711527T2; EP0832881A2; CA2214935A1; EP0832881B1; EP0832881A3; PT832881E; ATE215536T1

Abstract

(57)【要約】【課題】新規ベンゾフルオレン化合物、中間体、組成
物、およびその使用方法を提供する。【解決手段】骨損失または骨再吸収、特に骨粗鬆症、
および高脂血症を含む心血管関連性の病理学的状態をと
いった閉経後症候群を予防、治療するのに有用な新規ベ
ンゾチオフェン化合物を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】骨粗鬆症は、単位体積当たりの骨質量の正
味の損失を特徴とする様々な病因から生じる一群の疾患
をいう。この骨質量の損失とその結果生じる骨折によ
る、身体を適切に支えるための骨格の機能不全である。
最も一般的なタイプの骨粗鬆症の１つは、閉経に関連す
るものである。大部分の女性では、月経停止後３年から
６年以内に骨小柱のコンパートメントの骨質量が約２０
％から約６０％損失する。この急速な損失は、一般に骨
の吸収及び形成の増加に関連するが、骨の吸収サイクル
がより顕著であるため、骨質量の正味の損失が生じる。
骨粗鬆症は閉経後の女性にとっては一般的で深刻な疾患
である。

【０００２】本疾患に悩まされている女性は、米国だけ
でも２５００万人に上ると見積もられている。骨粗鬆症
は当人に有害であるばかりでなく、慢性であることおよ
びその病気の後遺症により広範囲で長期間の介護（入院
及び在宅医療での看護）を必要とすることから大きな経
済的損失をもたらす。このことは、より高齢の患者に特
に当てはまる。

【０００３】さらに、骨粗鬆症は生命を脅かす病状であ
るとは一般に考えられていないが、高齢の女性の死亡率
の２０％〜３０％が股関節の骨折と関連している。この
高い死亡率のパーセントは閉経後骨粗鬆症を直接関連し
ていると考えられる。

【０００４】骨において、閉経後の骨粗鬆症の影響を最
も受け易い組織は小柱である。この組織はしばしば、海
綿状または網状骨と呼ばれ、特に骨の末端近く（関節の
近く）、及び脊柱の椎骨に集中している。小柱組織は、
他の小柱組織と互いに相互連結する小さな骨状構造、並
びに骨の外側表面及び中心幹を形成するより堅く密な皮
質性の組織を特徴とする。小柱のこの相互に連結したネ
ットワークは、外部皮質性構造を側方から支持し、構造
全体にわたる生体力学的強度にとって決定的なものであ
る。閉経後の骨粗鬆症においては、骨の不全及び骨折を
もたらすのは小柱の正味の吸収及び損失である。閉経後
の女性における小柱の損失からみれば、最も一般的な骨
折が、小柱の支持に大いに依存する骨、例えば椎骨、大
腿及び前腕のような重量を支える骨の頸に関連した骨折
であるということは意外なことではない。確かに、股関
節骨折、コリーズ（collies）骨折、及び椎骨の粉砕骨
折は、閉経後骨粗鬆症の際立った特質である。

【０００５】閉経後骨粗鬆症の治療に最も一般に用いら
れる方法は、エストロゲン置換療法である。治療は通常
はうまく行くが、患者のこの治療に対する同意は低いも
のである。主として、エストロゲン療法はしばしば好ま
しくない副作用を生ずるからである。更なる治療の方法
としては、例えば Fosomax（登録商標）（Merck ＆ Co.
社）のようなビスホスホネート化合物の投与があろう。

【０００６】閉経前の時期にわたって、大部分の女性
は、同年齢の男性よりも心臓血管の病気の発生率が低
い。しかし、閉経後は女性の心臓血管の病気の発生率は
男性にみられる割合に匹敵してゆっくりと増加する。こ
の保護の損失は、エストロゲンの損失、特に、血清脂質
レベルを調節するエストロゲンの能力の損失に関連して
いる。血清脂質を調節するエストロゲンの能力の性質は
よく理解さていないが、現在までのところ、エストロゲ
ンが過剰のコレステロールを除去する肝臓の低密度脂質
（ＬＤＬ）レセプターを上方調節し得ることを示す証拠
はある。さらに、エストロゲンは、コレステロールの生
合成にある影響を及ぼし、心臓血管の健康にとって別の
有益な影響を及ぼしているようである。

【０００７】エストロゲン置換療法を受けている閉経後
の女性において、血清脂質の濃度レベルが閉経前にみら
れた濃度に戻ることが文献に報告されている。したがっ
て、エストロゲンは、この状態のための合理的な治療で
あるように思われよう。しかし、エストロゲン置換療法
の副作用は、多くの女性にとっては受け入れられないも
のであり、したがって、この療法の使用が制限される。
この状態のための理想的な治療は、エストロゲンと同様
に血清脂質レベルを調節するが、副作用及びエストロゲ
ン療法に関連した危険性が全くない薬剤による治療であ
ろう。

【０００８】本発明はベンゾフルオレン化合物およびそ
の医薬製剤、ならびに少なくともそのような化合物の、
本明細書中に示した病状の阻害、治療、または予防にお
ける使用方法を提供するものである。

【０００９】本発明は式Ｉ：

【化３】［式中、Ｒ¹は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキ
ル）、−ＯＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、−Ｏ（ＣＯ）Ｏ
（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、−ＯＣＯＡr、−Ｏ（ＣＯ）Ｏ
Ａr（ここで、Ａrは、フェニルまたは所望により置換フ
ェニルである）、または−ＯＳＯ₂−（Ｃ₂−Ｃ₆アルキ
ル）であり；Ｒ²は、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキ
ル）、−ＯＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、−Ｏ（ＣＯ）Ｏ
（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、−ＯＣＯＡr、−Ｏ（ＣＯ）Ｏ
Ａr（ここで、Ａrは、フェニルまたは置換フェニルであ
る）、または−ＯＳＯ₂（Ｃ₂−Ｃ₆アルキル）であり；
Ｒ³は、１−ピペリジニル、１−ピロリジニル、メチル
−１−ピロリジニル、ジメチル−１−ピロリジニル、４
−モルホリノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジイ
ソプロピルアミノ、または１−ヘキサメチレンイミノで
あり、ｎは２または３である］で示される化合物、また
はその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物に関す
る。

【００１０】さらに本発明は、式Ｉの化合物を含む医薬
製剤、および少なくとも、骨損失または骨再吸収、特に
骨粗鬆症、高脂血症を含む心血管関連の病的状態、およ
びエストロゲン依存性癌を阻止するための該化合物の使
用方法を提供する。本発明は、下記式：

【化４】 [式中、Ｒ^1aは−Ｈまたは−ＯＲ⁵（ここでＲ⁵はヒドロ
キシ保護基である）であり、Ｒ^2aは−ＯＲ⁶（ここで、
Ｒ⁶はヒドロキシ保護基である）である］で示される、
本発明の医薬的に活性な化合物を製造するのに有用な式
ＩＩの中間体化合物、またはその医薬的に許容される塩
にも関する。

【００１１】本明細書に記載の化合物を説明するのに使
用している一般的な用語は、それらの通常の意味を有す
る。例えば、「Ｃ₁−Ｃ₆アルキル」は、炭素数１〜６の
直鎖または分岐鎖の脂肪族鎖を意味し、メチル、エチ
ル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｎ−ブチル、ペ
ンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシル等が含
まれる。同様に用語「−ＯＣ₁−Ｃ₄アルキル」は、例え
ば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロピル、イソプロポキ
シ等のような酸素を介して結合しているＣ₁−Ｃ₄アルキ
ル基を表す。これらのＣ₁−Ｃ₄アルコキシ基のうちメト
キシが大いに好ましい。

【００１２】「置換されたフェニル」なる語は、Ｃ₁−
Ｃ₄アルキル、−ＯＣ₁−Ｃ₄アルキル、ヒドロキシ、ニ
トロ、クロロ、フルオロ、またはトリ（クロロまたはフ
ルオロ）メチルからなる群から選択される１またはそれ
以上の置換基を有するフェニル基を意味する。「ヒドロ
キシ保護基」なる語は、一連の化学反応時にヒドロキシ
ル基を保護し、これを除去してフェノールを生じること
ができる、化学論文中で用いられている多くの機能性を
意味する。この基にはアシル、メシレート、トシレー
ト、ベンジル、アルキルシリルオキシ、およびＣ₁−Ｃ₄
アルキルなどが含まれる。そのような保護基を形成およ
び除去するための多くの反応は、例えば、Protective G
roups in Organic Hemistry, Plenum Press (London an
d New York, 1973)； Green, T.W., Protective Groups
in Organic Synthesis, Wiley, (New York, 1981)；
およびThe Peptides, Vol. I, SchrooderおよびLubke,
Academic Press (London and New York, 1965)を含む多
くの標準的研究中に記載されている。好ましいヒドロキ
シ保護基、特にメチルおよびアルキルシリルオキシを除
去する方法は、本質的に下記の実施例に記載の通りであ
る。

【００１３】所望により置換されたフェニルには、フェ
ニルおよびＣ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ、ヒ
ドロキシ、ニトロ、クロロ、フルオロ、またはトリ（ク
ロロまたはフルオロ）メチルで１ないし２回置換された
フェニルが含まれる。用語「溶媒和物」は、式Ｉの化合
物のような溶質の１またはそれ以上の分子を、溶媒の１
またはそれ以上の分子と共に含む凝集物を表す。「阻
害」なる語は、一般に受け入れられている意味を含み、
進行、重篤度の妨害（prohibiting）、予防(preventin
g)、抑制(restraining)、及び緩和(slowing)、停止(sto
pping)、もしくは逆転(reversing)、または生じた症状
もしくは影響の改善を包含する。

【００１４】本発明の化合物は、以下のごとくRing Ind
ex, The American Chemical Societyに従ってベンゾ
［ａ］フルオレンの誘導体として命名される。

【化５】

【００１５】式 I の化合物には以下のものが含まれる
が、これに限定されるものではない：3, 8-ジメトキシ-
11- [4- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニル] -
11H-ベンゾ [a] フルオレン;3, 8-ジヒドロキシ-11- [4
- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニル] -11H-ベ
ンゾ [a] フルオレン;3 -ヒドロキシ-8-メトキシ-11-
[ 4- [2 - (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニル] -11
H-ベンゾ [a] フルオレン;3-メトキシ-8-ヒドロキシ-11
- [4- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニル]-11H
-ベンゾ [a] フルオレン;3,8,9-トリメトキシ-11- [4-
[2- (1-ピペリジニル) エトキシ]フェニル] -11H-ベン
ゾ [a] フルオレン;3,8,10-トリメトキシ-11- [4- [2-
(1-ピペリジニル) エトキシ]フェニル] -11H-ベンゾ
[a] フルオレン;9-フルオロ-3, 8-ジメトキシ-11- [4-
[2- (1-ピペリジニル) エトキシ]フェニル] -11H-ベン
ゾ [a] フルオレン;9-クロロ-3, 8-ジメトキシ-11- [4-
[2- (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニル] -11H-ベ
ンゾ [a] フルオレン;3, 8-ジメトキシ-9-メチル-11-
[4- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニル] -11H-
ベンゾ [a] フルオレン;3, 8-ジメトキシ-9-エチル-11-
[4- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ]フェニル]-11H-
ベンゾ [a] フルオレン;8-メトキシ-11- [4- [2- (1-ピ
ペリジニル) エトキシ] フェニル] -11H-ベンゾ[a] フ
ルオレン;8-ヒドロキシ-11- [4- [2- (1-ピペリジニル)
エトキシ] フェニル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン;8,
9-ジメトキシ-11- [4- [2- (1-ピペリジニル) エトキ
シ]フェニル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン;8,10-ジメ
トキシ-11- [4- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ]フェ
ニル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン;9-フルオロ-8-メト
キシ-11- [4- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニ
ル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン;9-クロロ-8-メトキシ
-11- [4- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニル]
-11H-ベンゾ [a] フルオレン;8-メトキシ-9-メチル-11-
[4- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニル] -11H
-ベンゾ [a] フルオレン;8-メトキシ-9-エチル-11- [4-
[2- (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニル] -11H-ベ
ンゾ [a] フルオレン;3, 8-ジメトキシ-11- [4- [2- (1
-ピロリジニル) エトキシ] フェニル] -11H-ベンゾ [a]
フルオレン;3, 8-ジヒドロキシ-11- [4- [2- (1-ピロ
リジニル) エトキシ] フェニル] -11H-ベンゾ [a] フル
オレン;3-ヒドロキシ-8 -メトキシ-11- [4- [2- ( 1-ピ
ロリジニル) エトキシ] フェニル ] -11H-ベンゾ [a]
フルオレン;3-メトキシ-8-ヒドロキシ-11- [4- [2 - (1
-ピロリジニル) エトキシ] フェニル] -11H-ベンゾ [a]
フルオレン;8-メトキシ-11- [4- [2- (1-ピロリジニ
ル) エトキシ] フェニル] -11H-ベンゾ[a] フルオレン;
8-ヒドロキシ-11- [4- [2- (1-ピロリジニル) エトキ
シ] フェニル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン;8,9-ジメ
トキシ-11- [4- [2- (1-ピロリジニル) エトキシ] フェ
ニル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン;8, 10-ジメトキシ-
11- [4- [2- (1-ピロリジニル) エトキシ] フェニル] -
11H-ベンゾ [a] フルオレン;3,8-ジメトキシ-11- [4-
[2- (1-メチルピロリジニル) エトキシ] フェニル]-11H
-ベンゾ [a] フルオレン;3,8-ジヒドロキシ-11- [4- [2
- (1 -ヘキサメチレンイミノ) エトキシ] フェニル] -1
1H-ベンゾ la] フルオレン;3-ヒドロキシ-8-メトキシ-1
1- [4- [2- (1-モルホリノ) エトキシ] フェニル] -11H
-ベンゾ [a] フルオレン;3-メトキシ-8-ヒドロキシ-11-
[4- [2- (N, N-ジメチルアミノ) エトキシ] フェニル]
-11H-ベンゾ [a] フルオレン;3,8,9-トリメトキシ-11-
[4- [2-(N,N,-ジエチルアミノ) エトキシ]フェニル] -
11H-ベンゾ [a] フルオレン;3,8,10-トリメトキシ-11-
[4-[2- (1-メチルピロリジニル) エトキシ] フェニル]-
11H-ベンゾ [a] フルオレン;9-フルオロ-3,8-ジメトキ
シ-11- [4- [2- (N,N-ジメチルアミノ) エトキシ] フェ
ニル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン;9-クロロ-3, 8-ジ
メトキシ-11- [4- [2- (N,N-ジイソプロピルアミノ) エ
トキシ] フェニル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン;8-メ
トキシ-11- [4- [2- (1-ピロリジニル) エトキシ] フェ
ニル] -11H-ベンゾ[a] フルオレン;8-ヒドロキシ-11-
[4- [2- (1-メチルピロリジニル ) エトキシ] フェニ
ル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン;8,9-ジメトキシ-11-
[4- [2- (1-メチルピロリジニル ) エトキシ] フェニ
ル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン; および8,10-ジメト
キシ-11- [4- [2- (1-メチルピロリジニル) エトキシ]
フェニル] -11H-ベンゾ [a] フルオレンなど。

【００１６】式IIの化合物には以下のものが含まれるが
これらに限定されるものではない：4- (3,8-ジメトキシ
-11H-ベンゾ [a] フルオレン-11-イル)フェノール;4-
(3,8,9-トリメトキシ-11H-ベンゾ [a] フルオレン-11-
イル)フェノール;4- (3,8-10-トリメトキシ-11H-ベンゾ
[a] フルオレン-11-イル)フェノール;4- (9-フルオロ-
3, 8-ジメトキシ-11H-ベンゾ [a] フルオレン-11-イル)
フェノール;4- (9-クロロ-3, 8-ジメトキシ-11H-ベンゾ
[a] フルオレン-11-イル) フェノール;4- (3,8-ジメト
キシ-9-メチル-11H-ベンゾ [a] フルオレン-11-イル)
フェノール;4- (3,8-ジメトキシ-9-エチル-11H-ベンゾ
[a] フルオレン-11-イル) フェノール;4- (8-メトキシ-
11H-ベンゾ [a] フルオレン-11-イル) フェノール;4-
(8,9-ジメトキシ-11H-ベンゾ [a] フルオレン-11-イル)
フェノール;4- (8,10-ジメトキシ-11H-ベンゾ [a] フル
オレン-11-イル)フェノール;4- (9-フルオロ-8-メトキ
シ-11H-ベンゾ [a] フルオレン-11-イル)フェノール;4-
(9-クロロ-8-メトキシ-11H-ベンゾ [a] フルオレン-11
-イル) フェノール;4- (8-メトキシ-9-メチル-11H-ベン
ゾ [a] フルオレン-11-イル) フェノール;および4- (8-
メトキシ-9-エチル-11H-ベンゾ [a] フルオレン-11-イ
ル)フェノールなど。

【００１７】本発明の化合物を製造するための出発物質
は、式III：

【化６】 [式中、R^1aは−Ｈ、または−ＯＲ⁵（ここで、Ｒ⁵はヒド
ロキシ保護基である）である]で示される化合物であ
る。

【００１８】式IIIの化合物は当該分野で知られてお
り、実質的にJonesら、米国特許第4,400,543号およびJo
nesら、米国特許第5,147,880号の記載に従って製造され
る（これらの開示内容は本明細書の一部を構成する）
（Jonesら、J.Med.Chem., 35:931-8 (1992)およびJones
ら、J. Med. Chem., 22: 962 (1979)も参照）。

【００１９】本発明の化合物を製造するには、一般には
式IIIの1-アシル化-2-テトラロンを塩基で処理してその
対応するアニオンを形成させ、これをジフェニルクロロ
ホスフェートと反応させて式IVのエノールホスフェート
誘導体を得る。式IVの化合物は、アリールGrignard試薬
で処理すると反応の形としては付加−排除を受け、アリ
ール部分による2-ホスフェート置換基による置換を生
じ、式Vの化合物が生じる。チオレートアニオン脱メチ
ル化試薬選択（selectives)による式Ｖの化合物の脱ア
ルキル化では、電子吸引カルボニル基に対してパラ−に
位置する基が脱アルキル化される。そのような選択的脱
アルキル化の結果、式VIのフェノール化合物が生じ、こ
れを酸触媒の影響下で環状化することができる。式VIの
中間体の環状化には、式IIの生成物において完全に芳香
族のナフタレン環を生成する脱水工程が伴う。式Ｉの化
合物は本発明の化合物の中間体として役立つ。この合成
経路は下記反応式Ｉに示す通りである（ここで、R^1aお
よびR^2aは前記と同意義である）。

【００２０】

【化７】

【００２１】

【化８】

【００２２】この工程の第１段階において式IIIの化合
物は、実質的にJonesら、J. Med. Chem., 35: 931-8 (1
992)に記載の２段階プロトコールにより式IIのジヒドロ
ナフタレン誘導体に変換される。式IIIのエノール化合
物は、ジアリールクロロ−またはジアリールブロモ−ホ
スフェートおよび好ましくはジフェニルクロロホスフェ
ートであるホスホリル化試薬の１またはそれ以上の当量
によってホスホリル化される。この反応はエーテル、TH
F、ジオキサン、酢酸エチル、トルエン、およびアセト
ニトリルを含む種々の不活性溶媒中、および水素化アル
カリ金属、水酸化アルカリ金属、もしくは炭酸アルカリ
金属、またはトリエチルアミンのようなトリアルキルア
ミンといった酸スカベンジャーの存在下で実施すること
ができよう。アルカリ金属塩基または第３級アミンはホ
スホリル化工程において塩基性触媒として作用させるこ
ともできよう。本反応は望ましくない副生成物を避ける
ために氷浴温度で行うことが好ましいが、上昇した温度
も使用することができる。しかし、それらはホスホリル
化反応を完結させるには通常必要ではない。ホスホリル
化反応の生成物、式IVのエノールホスフェート誘導体
は、クロマトグラフィーのような通常の技術によって単
離することができよう。しかしながら、該反応の次の段
階（Grignard試薬の添加）と適合性の溶媒／酸スカベン
ジャー混合物を用いてエノールホスフェートを生成する
のが最も好都合である。このように、窒素環境下でTHF
中の水素化ナトリウムの混合物が好ましく、式IVの化合
物を生じる急速なホスホリル化をもたらす。

【００２３】次いで、単離またはin situで生成された
中間体エノールホスフェートをアリールGrignard試薬ま
たはアリールリチウム有機キュープレート試薬の１また
はそれ以上の当量と反応させることもできよう。アリー
ル臭化マグネシウムの１またはそれ以上の当量が好まし
く、フェニル臭化マグネシウムまたは4-メトキシフェニ
ル臭化マグネシウムが特に好ましい。典型的には、該反
応は、副反応を最小化するために氷浴温度で実施される
が、反応速度を増大させるために上昇した温度を使用す
ることができる。アリール部分の添加、次いでホスフェ
ート脱離基の除去（反応の形としては付加、除去工程）
は式Ｖのジヒドロナフタレン誘導体を生じ、これを結晶
化またはクロマトグラフィーのような通常の技術によっ
て単離することができる。

【００２４】次に、得られる式Ｖのジヒドロナフタレン
誘導体を脱メチル化し、式VIの中間体を得る。カルボニ
ルに対してパラ位のメトキシ基において位置選択的脱メ
チル化を完結させるには求核性脱メチル化試薬を用い、
アルカリ金属チオレート（有機チオールのアルカリ金属
塩）が好ましい。特に好ましいのは、基質に対して該脱
メチル化試薬が1.2またはそれ以上の当量の程度に過剰
なリチウムチオエチレートまたはリチウムチオメチレー
トである。反応は脱メチル化試薬を保存するために不活
性環境下で、そしてチオール化試薬の求核性の性質に対
して事実上不活性な溶媒中で実施される。脱メチル化に
適した溶媒は２分子の求核性置換反応を最も誘導する溶
媒であり、それらにはジメチルスルホキシド、ジメチル
ホルムアミド、ジメチルアセトアミド、およびTHFが含
まれ、無水ジメチルホルムアミドが好ましい。十分な反
応速度を達成すると同時に、カルボニル基に対してパラ
位の部位を脱メチル化するための選択性の良好な制御も
得るには、反応温度を注意深く制御することが重要であ
る。脱メチル化工程は60℃から120℃の温度範囲で生じ
るであろうが、所望の生成物の収率を最大とするには80
〜90℃の範囲の温度を使用するのが有利である。80℃の
温度が特に好ましい。好ましい反応条件下では、式VIの
化合物から式Ｖの化合物への変換は、示した温度で約２
〜４時間加熱した後に完結する。

【００２５】反応式Ｉに示す最終変換において、式VIの
ジヒドロナフタレン誘導体は環状化−脱水工程を受け、
式IIのベンゾフルオレン誘導体が生成される。この工程
は酸触媒され、種々の無機酸、Lewis酸、および有機酸
を使用することができよう。これらの触媒としては、ア
ルキルスルホン酸、アリールスルホン酸、硫酸、塩酸、
臭化水素酸、ポリリン酸、および三フッ化ホウ素エタレ
ートが挙げられる。メタンスルホン酸（生（き））、お
よび三フッ化ホウ素エタレートが好ましく、メタンスル
ホン酸が特に好ましい。典型的には、該反応は室温で進
行するが、反応速度を速めるにはより高い温度が有利で
あろう。好ましい反応条件下では、式VIの化合物から式
IIの化合物への変換は、周囲温度で約５分間〜約３時間
撹拌した後に完結する。式IIの化合物は本発明の式Ｉの
医薬的に活性な化合物を製造するのに有用である。式II
の化合物を製造する際に、該化合物を式VII： R³-(CH₂)_n-Ｑ VII [式中、Ｒ³およびｎは前記と同意義であり、Ｑはブロ
モ、または好ましくは、クロロ部分である］で示される
化合物と反応させ、式Ｉａの化合物が形成される。次
に、式Iaの化合物は、Ｒ⁵および／またはＲ⁶ヒドロキシ
保護基が存在する場合は脱保護され、式Ibの化合物が形
成される。これらの工程段階は下記の反応式IIに示され
る。反応式II

【００２６】

【化９】

【００２７】

【化１０】 [式中、Ｒ^1a、Ｒ^2a、Ｒ³およびｎは前記と同意義であ
り、Ｒ^1bは−Ｈまたは−ＯＨであり、Ｒ^2bは−ＯＨであ
る]

【００２８】反応式IIに示す工程の第１段階において、
該アルキル化は標準的手順によって行われる。式VIIの
化合物は市販のものを利用するか、当業者によく知られ
た方法によって製造される。好ましくは、式VIIの化合
物の塩酸塩、特に2-クロロエチルピペリジン塩酸塩が用
いられる。一般的には、少なくとも約４当量の炭酸アル
カリ金属、好ましくは炭酸セシウムまたは炭酸カリウ
ム、および適切な溶媒の存在下で、式IIの基質の少なく
とも約１当量を式VIIの化合物の２当量と反応させる。
この反応の溶媒は反応を通して不活性のままである溶媒
または溶媒混合物である。N,N-ジメチルホルムアミド、
特にその無水形が好ましい。

【００２９】この段階で使用する温度はこのアルキル化
反応を完結させるのに十分なものであるべきである。周
囲温度が十分かつ好ましいことが多いが、場合によって
はより高い温度が必要かも知れない。好ましくは、本反
応は不活性環境、特に窒素下で行われる。好ましい反応
条件下では、この反応は約16〜約20時間で完結するよう
に行われよう。もちろん、該反応の進行は標準的クロマ
トグラフィー技術によりモニターすることができる。

【００３０】式Ｉａの化合物を製造するための別の方法
として、式ＩＩの化合物をアルカリ溶液の存在下で過剰
の式：Ｑ−（ＣＨ₂）_n−Ｑ’ ［式中、ＱおよびＱ’はそれぞれ、アルカリ溶液中の同
じまたは異なる脱離基である。］で示されるアルキル化
剤と反応させる。適切な脱離基にはメタンスルホネー
ト、4-ブロモベンゼンスルホネート、トルエンスルホネ
ート、エタンスルホネート、イソプロピルスルホネー
ト、4-メトキシベンゼンスルホネート、4-ニトロベンゼ
ンスルホネート、2-クロロベンゼンスルホネート、およ
びトリフラートなどのようなスルホネート、ブロモ、ク
ロロおよびヨードのようなハロゲン、および他の関連脱
離基が含まれる。

【００３１】本アルキル化反応のための好ましいアルカ
リ溶液は、例えば、メチルエチルケトン（ＭＥＫ）また
はＤＭＦのような不活性溶媒中の炭酸カリウムが含まれ
る。この溶液中には式ＩＩの化合物のフェノール部分の
４−ヒドロキシ基がフェノキシドイオンとして存在し、
アルキル化剤の脱離基の１つと置換する。本反応は、反
応体と試薬を含むアルカリ溶液を還流させて完結させる
のが最良である。ＭＥＫを好ましい溶媒として用いる場
合の反応時間は約６時間〜約２０時間である。

【００３２】次に、この段階からの反応生成物を、標準
的技術により１−ピペリジン、１−ピロリジン、メチル
−１−ピロリジン、ジメチル−１−ピロリジン、４−モ
ルホリン、ジメチルアミン、ジエチルアミンもしくは１
−ヘキサメチレンイミン、または他の第２級アミンと反
応させ、式Ｉａの化合物を形成させる。好ましくは、ピ
ペリジンの塩酸塩を、無水ＤＭＦのような不活性溶媒中
で式IIｂのアルキル化された化合物と反応させ、約６０
℃〜約１１０℃の範囲の温度に加熱する。該混合物を約
９０℃の好ましい温度に加熱する場合は、反応は約３０
分〜約１時間しかかからない。しかしながら、反応条件
の変化は、この反応が完結するのに要する時間の量に影
響するであろう。もちろん、標準的クロマトグラフィー
技術を用いて本反応段階の進行をモニターすることがで
きる。

【００３３】本発明の化合物を製造するための別の経路
を反応式IIIに示す（ここで、Ｒ^1a、Ｒ^2a、およびＲ³は
前記と同意義である）。反応式III

【００３４】

【化１１】

【００３５】

【化１２】

【００３６】この別の経路では、出発物質、式VIIIの1-
アシル化-2-テトラロンはすでに塩基性側鎖部分を含ん
でいる。式VIIIの化合物を塩基で処理し、その対応する
アニオンを形成させ、これをジフェニルクロロホスフェ
ートと反応させて、式IXのエノールホスフェート誘導体
を得る。式IXの化合物はアリールGrignard試薬で処理す
ると反応の形としては付加−除去を受け、アリール部分
による2-ホスフェート置換基の置換が生じ、式Ｘのジヒ
ドロナフタレン化合物が生成される。式Ｘの化合物を、
酸性条件下で環状化し、本発明の式Iaの化合物とするこ
とができる。

【００３７】既に塩基性側鎖を保持している式VIIIのエ
ノール化合物は、ジアリールクロロ−またはジアリール
ブロモ−ホスフェート、および好ましくはジフェニルク
ロロホスフェートである、ホスホリル化試薬の１または
それ以上の当量によってホスホリル化される。この反応
は、水素化アルカリ金属、水酸化アルカリ金属もしくは
炭酸アルカリ金属、またはトリエチルアミンのようなト
リアルキルアミンといった酸スカベンジャーの存在下
で、エーテル、THF、ジオキサン、酢酸エチル、トルエ
ン、およびアセトニトリルを含む種々の不活性溶媒中で
実施することができよう。アルカリ金属塩基または第3
級アミンは、ホスホリル化工程中で塩基性触媒として作
用することもできよう。本反応は望ましくない副生成物
を避けるために氷浴温度で行うことが望ましいが、上昇
した温度も使用することができる。しかし、それらはホ
スホリル化反応を完結させるには通常必要ではない。ホ
スホリル化反応の生成物、式IXのエノールホスフェート
誘導体は、クロマトグラフィーのような通常の技術によ
って単離することができよう。しかしながら、該反応の
次の段階（Grignard試薬の添加）と適合性（融和性）の
溶媒／酸スカベンジャー混合物を用いてエノールホスフ
ェートを生成するのが最も好都合である。このように、
窒素環境下でTHF中の水素化ナトリウムの混合物が好ま
しく、式IXの化合物を生じる急速なホスホリル化をもた
らす。

【００３８】式IXの中間体エノールホスフェートを単離
またはin situで生成させ、次いで、アリールGrignard
試薬またはアリールリチウム有機キュープレート試薬の
１またはそれ以上の当量と反応させることもできよう。
アリール臭化マグネシウムの１またはそれ以上の当量が
好ましく、フェニル臭化マグネシウムまたは4-メトキシ
フェニル臭化マグネシウムが特に好ましい。典型的に
は、該反応は、副反応を最小化するために氷浴温度で実
施されるが、反応速度を増大させるために上昇した温度
を使用することができる。アリール部分の添加、次いで
ホスフェート脱離基の除去（反応の形としては付加、除
去工程）は式Xのジヒドロナフタレン誘導体を直接生
じ、これを遊離塩基または塩の結晶化または前者のクロ
マトグラフィーのような通常の技術によって単離するこ
とができる。

【００３９】反応式IIIに示す最終の変換において、式
Ｘのジヒドロナフタレン誘導体は環状化−脱水工程を経
て、式Iaのベンゾフルオレン誘導体が生成される。この
工程は酸触媒され、種々の無機酸、Lewis酸および有機
酸を用いてよい。これらの触媒として、アルキルスルホ
ン酸、アリールスルホン酸、硫酸、塩酸、臭化水素酸、
ポリリン酸、および三フッ化ホウ素エタレートが挙げら
れる。メタンスルホン酸（生（き））、および三フッ化
ホウ素エタレートが好ましく、エタンスルホン酸が特に
好ましい。典型的には、該反応は室温で進行するが、反
応速度を速めるにはより高い温度が有利であろう。好ま
しい反応条件下では、式Xの化合物から式IIaの化合物へ
の変換は、周囲温度で約５分間〜約３時間撹拌した後に
完結する。

【００４０】式Ia（ここで、Ｒ⁵および／またはＲ⁶は、
（存在する場合は）Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、好ましくはメチ
ルである）の化合物は、本明細書に記載の方法において
医薬的に活性である。したがって、そのような化合物は
式Ｉの化合物の本明細書中の定義に含まれる。式Ｉの好
ましい化合物は、よく知られた手順により、式Ｉａの化
合物のＲ⁵およびＲ⁶ヒドロキシ保護基（存在する場合
は）を開裂させることによって得られる。そのような保
護基を形成および除去するための多くの反応は、例え
ば、Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum
Press (London and New York, 1973); Green, T. W.,
Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, (Ne
wYork, 1981); および The Peptides, Vol. I, Schrood
er and Lubke, AcademicPress (London and New York,
1965)を含む多くの標準的研究中に記載されている。好
ましいＲ⁵および／またはＲ⁶ヒドロキシ保護基、特にメ
チルを除去する方法は、本質的に下記の実施例中に記載
の通りである。他の式Ｉの好ましい化合物は、３および
／または８−位のヒドロキシ部分（存在する場合は）を
よく知られた手順により式：−Ｏ−ＣＯ−(Ｃ₁−Ｃ₆ア
ルキル）または−Ｏ−ＳＯ₂−（Ｃ₂−Ｃ₆アルキル）の
部分で置換することにより製造される（例えば、米国特
許第4,358,593号参照、この開示内容は本明細書の一部
を構成する）。

【００４１】例えば、−Ｏ−ＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）
基を所望するときは、式Ｉのモノ−またはジヒドロキシ
化合物を、アシルクロリド、ブロミド、シアニドもしく
はアジドのようなアシル化剤、または適切な無水物また
は混合無水物と反応させる。該反応は、ピリジン、ルチ
ジン、キノリンもしくはイソキノリンのような塩基性溶
媒中、またはトリエチルアミン、トリブチルアミン、メ
チルピペリジンなどのような第３級アミン溶媒中で好都
合に行われる。該反応は、第３級アミンのような酸スカ
ベンジャー（下記のものを除く）の少なくとも１当量を
加えた、酢酸エチル、ジメチルホルムアミド、ジメチル
スルホキシド、ジオキサン、ジメトキシエタン、アセト
ニトリル、アセトン、メチルエチルケトンなどのような
不活性溶媒中で実施することもできよう。所望により、
4-ジメチルアミノピリジンまたは4-ピロリジノピリジン
のようなアシル化触媒を使用してよい（例えば、Haslam
ら、Tetrahedron, u:2409-2433 (1980)参照）。

【００４２】本発明は、しばしば窒素ガスのような不活
性環境下で、約-25℃〜約100℃の範囲で、適度の温度で
実施される。しかしながら、該反応を行うには、通常、
周囲温度が適当である。３−位および／または８−位の
ヒドロキシ基のアシル化は、不活性有機溶媒中の適切な
カルボン酸の酸触媒反応によって実施することもできよ
う。硫酸、ポリリン酸、メタンスルホン酸などのような
酸触媒が用いられる。前記の式ＩのＲ¹および／または
Ｒ²基は、ジクロロヘキシルカルボジイミド、アシルイ
ミダゾール、ニトロフェノール、ペンタクロロフェノー
ル、Ｎ−ヒドロキシサクシニミド、および１−ヒドロキ
シベンゾトリアゾールのようなそのような知られた試薬
によって形成されたエステルのような適切な酸の活性エ
ステルを形成することによって得ることもできよう（例
えば、Bull. Chem. Soc. Japan, 38: 1979 (1965)、およ
びChem. Ber., 788および2024 (1970)参照）。

【００４３】−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）部分を
提供する上記の各技術は、上記のごとく溶媒中で実施さ
れる。該反応の経過中に酸生成物を生じないそれらの技
術は、もちろん、反応混合物中の酸スカベンジャーの使
用を必要としない。式Ｉの化合物の３−および／または
８−位のヒドロキシ基が式：−Ｏ−ＳＯ₂−（Ｃ₂−Ｃ₆
アルキル）で示される基に変換される式Ｉの化合物を所
望する場合は、モノ−またはジヒドロキシ化合物は、例
えば、KingおよびMonoir、J. Am. Chem. Soc., 97:2566
-2567 (1975)に記載の、スルホン酸無水物もしくはスル
ホニルクロリド、ブロミドのような適切なスルホン酸の
誘導体、またはスルホニルアンモニウム塩と反応させ
る。ジヒドロ化合物を適切なスルホン酸無水物または混
合スルホン酸無水物と反応させることもできる。そのよ
うな反応は酸ハロゲン化物などを用いる反応の考察にお
いて上記に説明したような条件下で実施される。

【００４４】式Ｉの化合物の遊離塩基形は本発明の方法
において使用することができるが、医薬的に許容される
塩の形を製造して使用することが好ましい。本発明の方
法に使用される化合物は、主として、広範囲の有機酸及
び無機酸と医薬的に許容される酸付加塩を形成し、薬化
学においてしばしば使用される生理学的に許容し得る塩
を含む。このような塩もまた、本発明の一部を構成す
る。このような塩の形成に使用される典型的な無機酸に
は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リ
ン酸、次リン酸などが含まれる。脂肪族のモノ及びジカ
ルボン酸、フェニル置換されたアルカン酸、ヒドロキシ
アルカン酸及びヒドロキシアルカン二酸、芳香族の酸、
脂肪族及び芳香族のスルホン酸などの有機の酸から誘導
される塩もまた使用し得る。従って、このような医薬的
に許容される塩には酢酸塩、フェニル酢酸塩、トリフル
オロ酢酸塩、アクリル酸塩、アスコルビン酸塩、安息香
酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロ
キシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸
塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、ナフタレン−２−安息
香酸塩、臭化物、イソ酪酸塩、フェニル酪酸塩、β−ヒ
ドロキシ酪酸塩、ブチン−１，４−二酸塩、ヘキシン−
１，４−二酸塩、カプリン酸塩、カプリル酸塩、塩化
物、ケイ皮酸塩、クエン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グ
リコール酸塩、ヘプタン酸塩、馬尿酸塩、乳酸塩、リン
ゴ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロ
ン酸塩、マンデル酸塩、メシラート、ニコチン酸塩、イ
ソニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、フタル酸塩、テ
レフタル酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水
素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、プロピオル酸塩、
プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、サリチル酸
塩、セバシン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、硫酸
塩、重硫酸塩、ピロ硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、ス
ルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−ブロモフェニ
ルスルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エタン
スルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、メ
タンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナ
フタレン−２−スルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸
塩、キシレンスルホン酸塩、酒石酸塩などが含まれる。
好ましい塩は塩酸塩である。

【００４５】医薬的に許容される酸付加塩は、典型的に
は式Ｉの化合物を等モルまたは過剰量の酸と反応させる
ことによって形成する。反応成分は一般に、ジエチルエ
ーテルまたは酢酸エチルなどの相互溶媒中で混合する。
塩は普通、約１時間から１０日以内に溶液から沈殿し、
濾過によって分離するかまたは慣用の方法によって溶媒
を除去し得る。

【００４６】さらに、本発明は、治療の必要な、ヒトを
含む哺乳類に投与するための、有効量の式Ｉの化合物と
医薬的に許容される希釈剤または担体とを含有する医薬
的に許容される製剤を提供する。

【００４７】本明細書中に使用される「有効量」なる用
語は、さらに、骨損失または骨再吸収、特に骨粗鬆症、
および高脂血症を含む心血管関連の病的状態ならびに他
の心血管系の病状に罹患したヒトを含む哺乳動物の症状
を阻害し、軽減し、改善し、治療し、もしくは予防する
ことができる本発明の化合物の量を意味する。エストロ
ゲン依存性願の場合には、用語「有効量」はヒトを含む
哺乳動物における癌および／またはその症状を治療し、
予防し、癌の増殖を軽減し、改善し、もしくは阻害する
ことができる本発明の化合物の量を意味する。

【００４８】「医薬的に許容される製剤」とは、担体、
希釈剤、添加剤及び塩が活性成分（式Ｉの化合物）と適
合しなければならず、その受容者に有害であってはなら
ないことを意味する。医薬製剤は当技術分野において知
られている手法によって製造することができる。例え
ば、本発明の化合物は、一般的な添加剤、希釈剤、また
は担体と共に製剤化することができ、錠剤、カプセル剤
などに形成することができる。このような製剤に適当な
賦形剤、希釈剤、及び担体の例には次のものが含まれ
る：デンプン、糖類、マンニトール及びケイ酸誘導体な
どの賦形剤及び展開剤、カルボキシメチルセルロース及
び他のセルロース誘導体、アルギン酸塩、ゼラチン、及
びポリビニル−ピロリドンなどの結合剤、グリセリンな
どの湿潤剤、寒天、炭酸カルシウム及び重炭酸ナトリウ
ムなどの崩壊剤、パラフィンなどの溶出遅延剤、第四級
アンモニウム化合物などの吸収促進剤、セチルアルコー
ル、グリセリンモノステアラートなどの界面活性剤、カ
オリン及びベントナイトなどの吸着担体、タルク、ステ
アリン酸カルシウム及びステアリン酸マグネシウム、及
び固体のポリエチレングリコールなどの滑沢剤。

【００４９】最終的な剤形は、使用する添加剤によって
次のようなものであってよい：丸剤、錠剤、散剤、トロ
ーチ、シロップ剤、エアゾール、サシェ剤、カシェ剤、
エリキシル剤、懸濁剤、エマルジョン剤、軟膏、坐剤、
滅菌注射用液剤、または滅菌包装された散剤など。

【００５０】さらに本発明の化合物は、徐放性の投与剤
形の製剤によく適合する。該製剤は、唯一または好まし
くは腸管の特定部分において、できるだけ一定期間活性
成分を放出するように構成することもできる。このよう
な製剤は、高分子物質またはワックス類から製造し得
る、コーティング、外被、または保護マトリックスを含
むであろう。

【００５１】本発明では、前記疾患に罹患しているヒト
を含む哺乳類の症状及び／または疾患を阻止するのに必
要な、式Ｉの化合物の具体的な投与量は、具体的な疾
患、症状、及び重症度に依存するであろう。投与量、投
与の経路、及び投与の頻度は、担当の医師が決定するの
がもっともよい。一般に、受け入れられ、効果的である
投与量（dosage)は、１５ｍg〜１０００ｍgであり、よ
り典型的には、１５ｍg〜８０ｍg（１〜３回／日）であ
ろう。このような投与量を、治療の必要な患者に対し、
通常少なくとも１カ月間、より典型的には６カ月間、ま
たは慢性的に投与する。

【００５２】以下の製剤例は、説明を目的とするもので
あって、何ら限定を意図するものではない。このような
製剤中の全活性成分は製剤重量の０.１％〜９９.９％を
構成する。「活性成分」なる語は、式Ｉの化合物を意味
する。

【００５３】製剤例１：ゼラチンカプセル成分量（ｍg/カプセル）活性成分０．１−１０００デンプンＮＦ０−５００デンプン（流動性粉末）０−５００シリコーン液３５０センチストーク０− １５成分を混合し、Ｎo.４５メッシュＵ.Ｓ.シーブに通し、
硬質ゼラチンカプセル中へ充填する。

【００５４】製剤例２：錠剤成分量（ｍg／錠剤）活性成分２．５−１０００デンプン１０− ５０セルロース（微結晶）１０− ２０ポリビニルピロリドン（１０％水溶液）５ナトリウムカルボキシメチルセルロース５ステアリン酸マグネシウム１タルク１−５活性成分、デンプン及びセルロースをＮo.４５メッシュ
Ｕ.Ｓ.シーブに通し、十分に混合する。この粉末とポリ
ビニルピロリドンの溶液を混合し、次いでＮo.１４メッ
シュＵ.Ｓ.シーブに通す。このようにして得られる顆粒
を５０〜６０℃で乾燥し、Ｎo.１８メッシュＵ.Ｓ.シー
ブに通す。あらかじめＮo.６０メッシュＵ.Ｓ.シーブに
通したナトリウムカルボキシメチルセルロース、ステア
リン酸マグネシウム、及びタルクを上記顆粒に加え、十
分に混合する。得られる物質を、打錠器で圧縮して錠剤
を得る。

【００５５】製剤例３：エアロゾル剤成分量（重量％）活性成分０.２５エタノール２９.７５プロペラント２２（クロロジフルオロメタン）７０.００合計１００.００活性成分をエタノールと混合し、この混合物をプロペラ
ント２２の部分に加え、−３０℃に冷却して充填器に移
す。次いで所要量をステンレススチールの容器に入れ残
りのプロペラントで希釈する。次にバルブユニットをこ
の容器に取り付ける。

【００５６】製剤例４：坐剤成分量（ｍg）活性成分１５０飽和脂肪酸グリセリド３０００活性成分をＮo.６０メッシュＵ.Ｓ.シーブに通して、あ
らかじめ融点に加熱した脂肪酸グリセリドに懸濁する。
この混合物を坐剤用の鋳型に入れ、冷却する。

【００５７】製剤例５：懸濁剤５ｍL用量あたり、式Ｉの化合物を０．１−１０００ｍg
含有する懸濁剤。成分量活性成分０．１−１０００ｍｇナトリウムカルボキシメチルセルロース５０ｍg シロップ１.２５ｍL 安息香酸溶液（０.１Ｍ）０.１０ｍL 香料ｑ.ｖ. 着色料ｑ.ｖ. 精製水を加えて５ｍLとする式Ｉの化合物をＮo.４５メッシュＵ.Ｓ.シーブに通し、
ナトリウムカルボキシメチルセルロース及びシロップと
混合してなめらかなペーストにする。水で希釈した安息
香酸溶液、香料、及び着色料を加え、混合物を十分に撹
拌する。さらに水を最終の容量まで加えて製剤を得る。

【００５８】以下の実施例及び製造例は、本発明の実施
をよりよく説明するためのものであって、本発明の範囲
を限定するものと解釈すべきではない。当業者は、本発
明の精神と範囲から離れることなく様々な改変を加える
ことができるということを認識するであろう。本明細書
に示したすべての刊行物及び特許出願は、本発明が関係
する当業者の水準を示すものである。

【００５９】以下の実施例のNMRデータはGE 300 MHz NM
R装置から得られ、溶媒には特記しないかぎり無水CDCl₃
を用いた。¹³C NMRスペクトルのフィールドの強度は特
記しない限り75.5 MHzであった。

【００６０】

【実施例】製造例1 3, 4-ジヒドロ-1- (4 -メトキシベンゾイル)] -6-メト
キシ-2- ナフタレニルジフェニルリン酸エステル

【化１３】

【００６１】N₂下、5℃の15 mLのCH₂Cl₂中の3, 4-ジヒ
ドロ-6-メトキシ-1- (4-メトキシベンゾイル) -2 (lH)
-ナフタレノン (1. 50 g, 0. 0048 mol)の溶液に、ジフ
ェニルクロロホスフェート (1. 36 g, 0. 0051 mol)お
よび4-ジメチルアミノピリジン(5mg)を加えた。次に、
反応温度を5℃以下に保ちながら、CH₂Cl₂ (20 mL)中の
トリエチルアミン(0. 514 g, 0. 0051 mol)を10分間か
けて滴加した。得られる混合物を一夜撹拌し、次いでそ
れを塩水および氷に注ぎ、粗成生物をEtOAc (50mL)で抽
出した。有機層を塩水でよく洗浄し、無水K₂CO₃で乾燥
し、蒸発させて黄色油状物2. 92 gを得た。トルエン中
の10% EtOAcを利用するシリカゲルクロマトグラフィー
により黄色油状の所望の生成物2.17 g (83%)を得た。こ
の物質は M/e542でのフィールドデソープションマスス
ペクトルにおいて強いピークを生じ、NMR分光学により
実質的に単一成分であった。それにも関わらず、該物質
は結晶化することができず、満足な炭素の燃焼分析結果
は得られなかった。質量分析：(C₃₁H₂₇PO₇)として理論値: C,68. 63; H, 5. 02; O, 12. 96。実測値: C,65. 37; H, 4. 89; O, 13. 26。^l H NMR (CDCl₃) δ 7. 91 (d, J = 8. 8 Hz, 2H),
7. 20-6. 97 (m, 9H),6. 95-6. 73 (m, 5H), 6. 5
8 (dd, J = 8. 5 Hz, J = 2. 4 Hz, lH), 3. 83 (s,
3H), 3. 75 (s, 3H), 3. 07 (t, J = 7. 8 Hz, 2
H), 2. 88 (t,J = 7. 8 Hz, 2H); MS (FD) m/e 54
2 (M+)

【００６２】製造例2 3, 4-ジヒドロ-1- [4- [2- (1-ピペリジニル) エトキ
シ]ベンゾイル)] -6- メトキシ-2-ナフタレニルジフェ
ニルリン酸エステル

【化１４】

【００６３】本化合物は製造例１の化合物と類似の方法
により製造された。外観: 暗黄色油状物。¹ H NMR (CDCl₃) δ 7. 85 (d, J = 8. 7 Hz, 2H) , 7.
39-6. 92 (m, 9H), 6.92-6. 69 (m, 5H), 6. 57 (dd,
J = 8. 5 Hz, J = 2. 4 Hz, lH), 4. 03 (t,J = 5.
9 Hz, 2H), 3. 77 (s, 3H), 3. 07 (t, J = 8.1 Hz,
2H), 2. 89 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 2. 78 (t, J = 7.
2, 2H), 2. 62-2. 42 (m, 4H), 1. 77-1. 55 (m, 4
H), 1. 55-1. 37 (m, 2H); MS (FD) m/e 639 (M+)。

【００６４】製造例3 3, 4-ジヒドロ-6-メトキシ-2- (3 -メトキシフェニル)
-1- ナフタレニル(4-メトキシフェニル) メタノン

【化１５】

【００６５】水素化ナトリウム(鉱物油中60％、5. 4g,
0.135 mol)を窒素環境下で無水THF(80 mL)に懸濁し、混
合物を氷浴中で5℃に冷却した。THF (150 mL)中の 3, 4
-ジヒドロ-6-メトキシ-1- (4-メトキシベンゾイル) -2
(1H)-ナフタレノン (38. 0g, 0. 122 mol)およびジフェ
ニルクロロホスフェート (36. 3 g, 28. 0 mL,0. 135
mol)からなる溶液を、反応混合物の温度が10℃以下に保
たれるような速度で加えた。最初の急速な酸素ガスの放
出後、反応混合物を、氷浴での冷却を続けながら２時間
撹拌した。TLC (SiO₂, トルエン-EtOAc 9-1)による少
量の試料の分析により、エノールホスフェート中間体の
実質的に定量的な形成が示された。反応混合物を０℃付
近に維持し、3-メトキシフェニル臭化マグネシウム(THF
中の0. 74 M 溶液250 mL, 0.185 mol)を、約５分間かけ
てカニューレで加えた。得られる混合物を２時間０℃で
撹拌し、次いで一夜25℃に温めた。TLC分析では、エノ
ールホスフェートの減少は、高Rfで移動する主要生成物
の形成を伴っていた。大量の過剰な氷冷NH₄Cl 溶液に注
いで反応を止め、粗生成物を酢酸エチルで抽出した。有
機抽出物を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥さ
せた。濾過し、溶媒を除去した後、褐色油状物を得た。
該油状物をヘキサン／クロロホルム勾配を用いるシリカ
ゲルクロマトグラフィーにより精製した。適切な分画を
プールして濃縮することにより、琥珀色油状物40. 3 g
(83%)を得た。¹ H NMR (CDCl₃) δ 7. 85 (d, J = 8. 6 Hz, 2H),
7. 10- 7. 0 (m, 1H), 6. 90-6. 70 (m, 6H), 6.
70-6. 60 (m, 2H), 3. 80 (s, 6H), 3. 67(s, 3
H), 3.10-2. 90 (m, 2H), 2. 90-2. 70 (m, 2H); MS
(FD) m/e 400(M+); 質量分析：C₂₆H₂₄O₄として理論値: C, 77. 98; H, 6, 04; N, 0. 00。実測値: C, 77. 49; H, 6. 20; N, 0. 00。

【００６６】製造例4 [3, 4- ジヒドロ-6-メトキシ-2- (3-メトキシフェニル)
-1- ナフタレニル][4-[2- (1-ピペリジニル) エトキ
シ] フェニル] メタノン塩酸塩

【化１６】

【００６７】水素化ナトリウム (鉱物油中60%, 2. 68
g, 0. 067 mol)を窒素環境下で無水THF (300 mL)中に懸
濁させ、この懸濁液を５℃に冷却した。最少量のTHF中
の製造例2 の化合物(26. 0 g, 0. 0638 mol)からなる溶
液を滴加し、水素の放出が静まった後、混合物を冷却し
たまま１時間撹拌し、エノレートの形成を完結させた。
冷却を続けながら、THF (75 mL)中のジフェニルクロロ
ホスフェート(17.1 g, 13. 2 mL, 0. 0638 mol)を、反
応混合物の温度が10℃以下に保たれるような速度で加え
た。添加終了後、撹拌を続けながら反応混合物を室温に
温めた。TLC (SiO₂, トルエン-EtOAc 9-1)による少量の
試料の分析により、エノールホスフェート中間体の実質
的に定量的な形成が示された。反応混合物を5℃付近に
維持し、3-メトキシフェニル臭化マグネシウム(THF中
の0. 64 M溶液150 mL, 0. 096 mol)をカニューレで加え
た。得られる混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで25℃
に温め、さらに１時間撹拌した。反応物を冷却したまま
に保ち、1N硫酸50 mLを徐々に加えて注意深く反応を止
めた。pHを7.0に調整した後、THFのほとんどを減圧下で
除去した。水性残留物を水およびクロロホルム間に分配
した。有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾
燥させた。濃縮して油状物を得、これをクロロホルム〜
95:5 クロロホルム: メタノールの勾配を利用するシリ
カゲルクロマトグラフィーで精製して生成物を溶出し
た。適切な分画から粗遊離塩基36 gを得、これをメタノ
ールに溶解し、過剰の5N HCl 溶液で処理し、次いで濃
縮し、乾燥させた。残留物をメタノール-酢酸エチルか
ら再結晶し、所望の塩酸塩27. 8 g (82%)を得た。¹ H NMR (DMSO-d₆) δ 10. 09 (bs, 1H), 7. 76 (d, J
= 8. 7 Hz, 1H), 7.11-7. 02 (m, 2H), 6. 94 (d, J
= 8. 8 Hz, 1H), 6. 86 (d, J = 1. 2 Hz, 1H),6. 81-
6. 72 (m, 2H), 6. 66 (dd, J = 8. 2 Hz, 2. 5, 1H),
6. 61 (d, J= 3.1 Hz, 1H), 4. 37 (t, J = 4. 6 H
z, 2H), 3. 69 (s, 3H), 3. 57 (s, 3H), 3. 01-2. 8
2 (m, 4H), 2. 78-2. 63 (m, 2H), 1. 81-1. 58 (m,
5H), 1.31 (m, 1H);MS (FD) m/e 497 (M+; HClの低
下); 質量分析：C₃₂H₃₆ClNO₄として理論値: C, 71. 96; H, 6. 79; N, 2. 62。実測値: C, 71. 69; H, 6. 77; N, 2. 48。

【００６８】製造例5 3, 4-ジヒドロ-6-メトキシ-2- (3-メトキシフェニル) -
1- ナフタレニル](4-ヒドロキシフェニル) メタノン

【化１７】

【００６９】１Ｌ一首RBフラスコ中の乾燥窒素環境下に
て-78℃で、無水エチルエーテル(300 mL中のEtSH (12.
5 g, 14. 9 mL. 0. 20 mol)に、1. 6M n-BuLi (113 mL,
0.180 mol) をシリンジで１時間かけて徐々に加えた。
添加終了後、減圧下でエーテルを除去し、無水DMF (150
mL)中の3, 4-ジヒドロ-6-メトキシ-2- (3-メトキシフ
ェニル) -1-ナフタレニル](4 -メトキシフェニル) メタ
ノン(24. 0 g, 0. 065mol)の溶液を加えた。反応混合物
を2.5時間70-80℃に加熱し、次いで20時間65℃に加熱し
た。TLC分析 (SiO₂, トルエン-EtOAc 9-1) により出発
物質がほとんどなくなったことが示された。低Ｒｆでは
２つのスポットが存在した。これらは所望の生成物と対
応するジフェノール（最も低いスポット）のものであっ
た。反応混合物を冷却させ、次いで500 mLの氷冷1N HCl
溶液中に注ぎ入れた。粗生成物はEtOAC中に抽出され
た。EtOAc層を飽和水性NaCl溶液で洗浄し、無水MgSO₄で
乾燥し、蒸発させて黄色油状物を得た。該生成物を、95
: 5 クロロホルム : メタノールに直線的に変化するク
ロロホルムからなる勾配を用いるシリカゲルクロマトグ
ラフィーにより精製した。適切な分画を蒸発させた後に
黄色油状物を得、これをエチルエーテルから再結晶して
所望の生成物21. 3 g, (54%)を得た。融点 197-8℃。¹ H NMR (CDCl₃) δ ７．７６（ｄ，Ｊ＝
８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．１０−７．００
（ｍ，１Ｈ），６．９０−６．７０
（ｍ，４Ｈ），６．７０−６．６０（ｍ，
４Ｈ），６．０７（ｂｓ，１Ｈ），
３．７８（ｓ，３Ｈ），３．６２（ｓ，３
Ｈ），３．１０−２．９０（ｍ，２Ｈ），
２．９０−２．７０（ｍ，２１Ｈ）；ＭＳ
（ＦＤ）ｍ／ｅ３８６（Ｍ＋）；質量分析：Ｃ_２５Ｈ_２２Ｏ_４として理論値: C, 77. 70; H, 5. 74。実測値: C, 77. 45; H, 5. 66。

【００７０】製造例6 3, 4-ジヒドロ-6-メトキシ-2- (3-メトキシフェニル) -
1- ナフタレニル][4- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ]
フェニルメタノン

【化１８】

【００７１】3, 4-ジヒドロ-6-メトキシ-2- (3-メトキ
シフェニル) -1-ナフタレニル](4-ヒドロキシフェニル
) メタノン (3. 5 g, 9. 0 mmol)、無水K₂CO₃ (6. 25
g, 45mmol)、N-2 -クロロエチル-ピペリジン塩酸塩(1.
75 g, 9. 5 mmol, AldrichChem. Co.)、KI 10 mg、お
よび無水DMF (150 mL)を窒素環境下で混合し、得られる
混合物を室温で16時間撹拌した。DMF を減圧下で除去
し、残留物を水および酢酸エチル中に分配した。有機層
を分離し、塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥さ
せた。油状物に濃縮した後、生成物をクロロホルム〜95
: 5 クロロホルム:メタノールの勾配を用いるカラムシ
リカゲルクロマトグラフィーにより精製した。適切な分
画について、溶媒を蒸発させ、残留物を80℃で一夜減圧
乾燥させ、油状物3.1 g (69%)を得た。¹ H NMR (CDCl₃) δ 7. 80 (d, J = 9. 0 Hz, 2H), 7.1
0-7. 00 (m, 1H), 6. 90-6. 70 (m, 6H), 6. 70-6. 6
8 (m, 2H), 4. 09 (t, J = 5. 9 Hz, 2H), 3.78 (s,
3H), 3. 65 (s, 3H), 3. 02 (t, J = 8.1 Hz, 2H),
2. 90-2. 70 (m,4H), 2. 60-2. 40 (m, 3H), 1. 70-
1. 50 (m, 5H), 1. 50-1. 01 (m, 2H);MS (FD) m/e 49
7 (M+); 質量分析：C₃₂H₃₅NO₄として理論値: C, 77. 24; H, 7. 09; N, 2. 82。実測値: C, 77. 05; H, 7. 19; N, 3. 05。

【００７２】実施例 1 4- (3, 8-ジメトキシ-11H-ベンゾ [a] フルオレン-11-
イル)フェノール

【化１９】

【００７３】3, 4-ジヒドロ-6-メトキシ-2- (3-メトキ
シフェニル)-1-ナフタレニル](4-メトキシフェニル )
メタノン(5. 0 g, 12. 95 mmol)を98%メタンスルホン酸
(50mL)に加え、これを25℃、窒素環境下で勢いよく撹
拌した。得られる暗色の反応混合物を15分間撹拌し、次
いで氷(300 g)を加えて反応を止めた。次に、粗生成物
を酢酸エチルの２ｘ100 mL部分で抽出した。混合抽出物
を塩水および飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、無水
硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。得られる油状固
形物を、最初トルエン : 酢酸エチル 95 : 5 からな
り、直線的に75 :25へと変化する勾配系を用いるシリカ
ゲルクロマトグラフィーにより流速 150 mL/分で40分間
かけて精製した。適切な分画を混合し、濃縮して非晶質
固形の所望の生成物3. 0 gを得た。¹ H NMR (DMSO-d₆) δ 9. 18 (s, 1H), 8. 02 (d, J =
8. 4 Hz, 1H), 7. 85 (d, J = 8. 5 Hz, 1H), 7. 51-
7. 43 (m, 2H), 7. 36 (s, 1H), 7. 07 (d, J= 8. 2
Hz, 1H), 7. 00 (dd, J = 9. 0 Hz, J = 2. 5 Hz, l
H), 6. 79 (d, J= 8. 4 Hz, 2H), 6. 72 (dd, J = 8.
4 Hz, J = 2. 3 Hz, lH), 6. 57 (d, J= 8. 3 Hz, 2
H), 5. 27 (s, 1H), 3. 80 (s, 3H), 3. 79 (s, 3
H); MS (FD)m/e 368 (M+); 質量分析：C₂₅H₂₀O₃として理論値: C, 81. 50; H, 5. 47; O, 13. 03. 実測値: C, 81. 21; H, 5. 63。

【００７４】実施例 23, 8-メトキシ-11- [4- [2- (1-
ピペリジニル) エトキシ]フェニル] -11H- ベンゾ [a]
フルオレン

【化２０】

【００７５】実施例1で使用したのと類似の手順によ
り、製造例4の生成物の塩酸塩(300 mg)をメタンスルホ
ン酸(3 mL)を用いて環状化した。反応を15分間進行さ
せ、次いで大量の過剰な氷冷飽和重炭酸ナトリウム溶液
に反応混合物を少しずつ注意深く加えて反応を止めた。
発泡が止まったときに、生成物を酢酸エチル２ｘ100 mL
部分で抽出した。混合有機抽出物を塩水で洗浄し、無水
硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮してクリーム色固形の
所望の生成物(253 mg, 94%)を得た。融点 158-9℃。^l H NMR (DMSO-d₆) δ 8. 04 (d, J = 8. 6 Hz, 1H),
7. 87 (d, J = 8. 6 Hz,1H), 7. 51-7. 43 (m, 2H),
7. 36 (d, J = 1. 9 Hz, 1H), 7. 09-6. 94 (m,2H),
6. 90 (d, J = 8. 3 Hz, 2H), 6. 80-6. 65 (m, 3H),
5. 34 (s, 1H),3. 94 (t, J = 5. 7 Hz, 2H), 3. 81
(s, 3H), 3. 79 （s, 3H), 2. 55 (t, J = 5. 65 Hz,
2H), 2. 40-2. 22 (m, 4H), 1. 51-1. 32 (m, 5H),
1. 31-1. 22 (m, 1H), (M+); 質量分析：C₃₂H₃₃NO₃ 0. 5 mol H₂O 理論値: C, 80. 14; H, 6. 93; N, 2. 92。実測値: C, 78. 66; H, 7. 01, N, 2. 87。

【００７６】実施例 3 3, 8-ジヒドロキシ-11- [4- [2- (1-ピペリジニル) エ
トキシ] フェニル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン塩酸
塩

【化２１】

【００７７】０℃、N₂下で、無水塩化メチレン500 mL中
の[3, 4-ジヒドロ-6-メトキシ-2- (3-メトキシフェニ
ル)-l-ナフタレニル][4- [2- (1-ピペリジニル) エトキ
シ]フェニルメタノン塩酸塩(10. 00 g, 18. 7 mmol)の
溶液に、三臭化ホウ素(8. 85 mL, 0. 00 mmol)を加え
た。得られた混合物を０〜５℃で５時間撹拌した。次
に、反応物を冷飽和重炭酸ナトリウム（大過剰の）の撹
拌溶液に注ぎ入れた。ガスの発泡が止まったときに、水
性層を5% メタノール/クロロホルム (3 x 200 mL)で抽
出した。有機層を混合し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、
減圧下で濃縮して油状物を得た。油状物を、溶出溶媒に
THF : メタノール 9 : 1を用いるシリカゲルクロマトグ
ラフィーにより精製した。帯緑色固形の粗遊離塩基8. 4
6 gをメタノール100 mLに溶解し、5N塩酸4 mLで処理
し、次いで濃縮して乾燥させた。得られる固形物を1:1
クロロホルム:メタノールで洗浄し、濾過して回収し、
減圧下で乾燥させた。乾燥後、白色結晶固形の所望の生
成物5.5 g (60%)を得た。融点 183-4℃^l H NMR (DMSO-d₆) δ 9. 93 (bs, 1H), 9. 70 (s, 1
H), 9. 36 (s, lH), 7.85 (d, J = 8. 3 Hz, 1H),
7. 72 (d, J = 8. 5 Hz, 1H), 7. 43 (d, J = 8.9 Hz,
1H), 7.18 (d, J = 14. 2 Hz, 2H), 7. 00-6. 9 (m,
4H), 6. 81 (d,J = 8. 40 Hz, 2H), 6. 56 (d, J =
8. 4 Hz, lH), 5. 28 (s, 1H) , 4. 30-4. 20 (m, 2
H), 3. 50-3. 30 (m, 4H), 3. 00-2. 80 (m, 2H),
1. 80-1. 50 (m, 5H , 1. 32 (bs, 1H); MS (FD) m/
e 452 (M+); 質量分析：C₃₀H₃₀NO₃ 理論値: C, 73. 84; H, 6. 20; N, 2. 87。実測値: C, 73. 46; H, 6. 16; N, 2. 76 。

【００７８】実施例 4 3, 8-ジヒドロキシ-11- [4- [2- (1-ピペリジニル) エ
トキシ] フェニル] -11H-ベンゾ [a] フルオレン, 塩酸
塩

【化２２】

【００７９】無水塩化メチレン(300 mL)中の [3, 4-ジ
ヒドロ-6-メトキシ-2- (3-メトキシフェニル) -1-ナフ
タレニル][4- [2- (1-ピペリジニル) エトキシ] フェニ
ルメタノン]塩酸塩(8. 4 g, 16. 9 mmol)の溶液を、０
℃付近に冷却し、 AlCl₃ (15. 4 g, 118 mmol)、次いで
エタンチオール(10. 4 g, 12. 5 mL, 16. 9 mmol)で処
理した。反応物を冷却したままに保ち、赤色沈殿物が生
じる間30分間撹拌した。エタンチオールをさらに加えて
（80 mL）沈殿物のいくらかを溶解させ、氷浴温度でさ
らに２時間撹拌し続けた。反応混合物をTHF 100 mLで処
理し、これに多くの今や豊富になった赤色沈殿物を溶解
させた。次に、メタノール (200 mL）を加え、赤色沈殿
物を完全に溶解させた。反応混合物を濃縮してほぼ乾燥
させ、得られる白色懸濁液を過剰の炭酸ナトリウムと氷
に注いだ。得られる混合物を温クロロホルム:メタノー
ル 85 : 15で抽出し、抽出物を蒸発させて乾燥させた。
残留物をシリカゲルパッドに注ぎ、シリカゲルカラムの
上端におき、これを75 : 25 酢酸エチル:メタノールで
溶出した。適切な分画から、粗生成物4.1 gを得、これ
について、再結晶化（メタノール、酢酸エチル、および
クロロホルムの混合物から)により精製を試みた。最終
的に、少量の結晶が塩酸塩として単離され、所望の物質
0. 49 g (6%)を得た。

【００８０】試験手順方法を例示した実施例において、閉経後モデルを用いて
循環脂質に対する種々の処理の影響を検討した。75日齢
の雌Sprague Dawley ラット(体重の範囲、200〜225g)を
Charles RiverLaboratories (Portage, MI)から得た。C
harles River Liboratoriesにおいて、動物に対し両側
性に卵巣摘出(OVX)またはシャム外科処置を実施し、次
いで１週間後に輸送した。到着時に、動物を金属製のつ
り下げケージに１ケージあたり３〜４匹に群分けして収
容し、１週間不断給餌(カルシウム含量約0. 5%)および
給水とした。室温を22. 20 +1. 7 ℃に、最小相対湿度
を40%に維持した。室内の光周期を12時間明および12時
間暗とした。

【００８１】投与管理および組織の回収。１週間の
環境順化期間の後(従って、OVX後２週間)、被験化合物
の連日投与を開始した。17α-エチニルエストラジオー
ルまたは被験化合物を、特記しない限り1% カルボキシ
メチルセルロール中の懸濁液としてかまたは20％シクロ
デキストリンに溶解して経口投与した。動物に対し4日
間毎日投与を行った。投与管理後、動物の体重を測定し
てケタミン：キシラジン(2:1, V:V)混合物で麻酔し、心
臓穿刺により血液試料を回収した。次に、動物をCO₂で
窒息させて屠殺し、正中線切開により子宮を取り出し、
湿子宮重量を測定した。

【００８２】コレステロール分析。血液試料を室温
で2時間凝固させ、次いで3000rpmで10分間遠心して血清
を得た。血清コレステロールはBoehringer Mannheim Di
agnostics高性能コレステロールアッセイを用いて測定
した。簡単にはコレステロールをコレスタ-4-エン-3-オ
ンおよび過酸化水素で酸化させた。次に、過酸化水素を
パーオキシダーゼの存在下でフェノールおよび4-アミノ
フェナゾンと反応させ、p-キノンイミン色素を生成さ
せ、これを分光光度計を用いて500 nmで計測した。次
に、コレステロール濃度を標準曲線に対して計算した。

【００８３】子宮好酸球パーオキシダーゼ(EPO)アッセ
イ。子宮を、酵素分析を行う時まで4℃で維持した。
次に、子宮を0. 005% Triton X-100を含む50 mM トリス
緩衝液(pH 8. 0) 50容量中でホモゲナイズした。トリス
緩衝液中の0. 01% 過酸化水素および10 mM O-フェニレ
ンジアミン(最終濃度)を加え、吸光度の増加を450 nmで
１分間モニターした。子宮中の好酸球の存在は、化合物
のエストロゲン様活性を示す。15秒間隔の最大速度を反
応曲線の初期、線形部分にわたって測定した。化合物の供給源: 17α-エチニルエストラジオール
はSigma Chemical Co.,St. Louis, MOから得た。

【００８４】式 I の化合物の血清コレステロールに対
する影響とアゴニスト／非−アゴニスト活性の測定下記表１に示すデータは、卵巣摘出ラット、17α-エチ
ニルエストラジオール(EE₂; 経口投与可能な形のエスト
ロゲン）処置ラット、および本発明のある化合物で処置
したラット間の比較結果を示している。EE₂は 0.1 mg/k
g/日の経口投与により血清コレステロールの低下をもた
らすが、EE₂は子宮に対する刺激作用をも示し、EE₂処置
群の子宮重量は卵巣摘出試験動物の子宮重量より実質的
に大きかった。エストロゲンに対するこの子宮の反応
は、当該分野でよく知られている。卵巣摘出コントロー
ル動物と比べたとき、本発明の化合物は一般に血清コレ
ステロールを低下させるだけでなく、子宮重量は試験し
た処方化合物の大多数において最小限の増加ないしわず
かな減少を示した。当該分野で知られているエストロゲ
ン様化合物に比べて、子宮重量に有害な影響を及ぼすこ
となく血清コレステロールを低下させる利点は全くまれ
であり、望ましいものである。

【００８５】下記のデータが示すように、エストロゲン
性は子宮内への好酸球浸潤を生じる有害反応を評価する
ことによっても評価された。エストラジオールは予期さ
れた実質的な好酸球浸潤の増加を生じたが、本発明の化
合物は卵巣摘出ラットの間質層中に観察された好酸球数
の増加を生じなかった。下記表１および２に示すデータ
は処置あたりラット５〜６匹の反応を表している。

【００８６】

【表１】

【００８７】

【表２】 ^a mg/kg PO^b 卵巣摘出コントロールに対する子宮重量増加％^c 好酸球パーオキシダーゼ、Ｖ_max ^d 卵巣摘出コントロールに対する血清コレステロールの
減少^e １７−α-エチニル−エストラジオール

【００８８】本発明の化合物の証明された利点に加え
て、上記データは明らかに式Ｉの化合物がエストロゲン
模倣物ではないことを示している。さらに、いかなる処
置においても有害な毒物学的影響(例えば、生存数)は観
察されなかった。

【００８９】骨粗鬆症試験手順以下の一般的製造手順に従って、ラットを35日間毎日処
置し(処置群あたりラット6匹)、36日目に二酸化炭素で
窒息させて屠殺した。本明細書の記載に従って測定した
骨密度の減少が最大となるには35日の期間で十分であっ
た。屠殺時に子宮を取り出し、外部組織が付着していな
いことを確認し、液状内容物を除去して湿重量を測定
し、完全な卵巣摘出術に関連したエストロゲン欠乏を確
認した。子宮重量は通常、卵巣摘出術に反応して約75％
減少する。次に、さらに組織学的分析を行うために子宮
を10% 中性緩衝ホルマリン中に入れる。右大腿骨を摘出
し、遠位骨端線で生じたＸ−線をデジタル化し、画像分
析プログラム（NIH画像）により分析した。これら動物
の脛骨の近位の特徴も定量的コンピュータ化トモグラフ
ィによってスキャンされる。上記手順に従って、20% ヒ
ドロキシプロピルβ-シクロデキストリン中の本発明の
化合物およびエチニルエストラジオール(EE₂)を試験動
物に経口投与する。遠位大腿骨骨端線および近位脛骨の
データは完全および卵巣摘出試験動物と比較した式Ｉの
化合物での治療結果であった。結果は下記表３に示す通
り、卵巣摘出術に対する防御％で示している。まとめる
と、試験動物の卵巣摘出術は完全、ビークル処置コント
ロールに比べて大腿骨密度の有意な低下をもたらす。経
口投与したエチニルエストラジオール（ＥＥ₂）はこの
損失を予防するが、この治療による子宮刺激の危険性が
絶えず存在する。

【００９０】

【表３】

【００９１】MCF-7増殖アッセイ MCF-7乳腺癌細胞（ATCC HTB 22）は、10％ウシ胎児血清
（FBS）（V/V）、L-グルタミン（２mM）、ピルビン酸ナ
トリウム（１mM）、ＨＥＰＥＳ｛（N-［2-ヒドロキシエ
チル]ピペラジン-N'-［2-エタンスルホン酸]10mM｝、非
必須アミノ酸、、およびウシインスリン（１ug/mL）を
添加したMEM（最小必須培地、無フェノールレット、Sig
ma, St. Louis, MO)中で維持された。アッセイの１０日
前に、MCF-7細胞を、ステロイドの内部貯蔵量を枯渇さ
せるため、10％ＦＢＳのかわりに10％デキストランコー
ト木炭で除去した（stripped)ウシ胎児血清を添加した
維持培地に移した。MCF-7細胞を、細胞分離培地（10mM
ＨＥＰＥＳおよび2mM ＥＤＴＡ添加、無Ca++／Mg++ HBS
S（無フェノールレッド））を用いて維持フラスコから
取り出した。細胞をアッセイ培地で２回洗浄し、80000
個／mLに調整した。約100mL（細胞8000個）を平底微小
培養ウェル（Costar 3596)に加え、５％CO₂加湿孵卵器
中にて37℃で48時間インキュベーションし、移した後の
細胞の付着と平衡化を行った。薬剤の連続希釈物または
ＤＭＳＯ（希釈液コントロール）をアッセイ培地中で調
製し、50mLをトリプリケートで、次いで50mLのアッセイ
培地を微小培養に移し、終量200mLとした。さらに、５
％CO₂加湿孵卵器中にて37℃で48時間インキュベーショ
ンした後、微小培養をトリチウム化チミジン（１uCi/ウ
ェル）で４時間パルスした。-70℃で24時間凍結して培
養を終量させ、次いで融解し、Skatron Semiautomatic
Cell Hervesterを用いて微量培養を回収した。Wallace
BetaPlace βカウンターを用いる液体シンチレーション
により試料をカウントした。式Ｉの化合物は腫瘍細胞増
殖の阻害において活性があり、有力であり、例えば、実
施例３の化合物のIC₅₀は0.11 nMである。

【００９２】DMBA-誘発乳癌阻害雌Sprague-Dawleyラット（Harlan Industries, Indiana
polis, Indianaから購入）にエストロゲン依存性乳癌を
生じさせる。約55日齢で、ラットに7,12-ジメチルベン
ゾ[a]アントラセン（DMBA）20mgを１回経口摂取させ
る。DMBA投与の約６週後に、乳腺を１週間間隔で触診し
て腫瘍の出現を観察する。１またはそれ以上の腫瘍が出
現したときは、各腫瘍の長径および短径をメートル法の
測径器で測定し、測定値を記録し、その動物を試験用に
選択した。試験群間に平均サイズの腫瘍が同等に分布す
るように、処置群とコントロール群に種々のサイズの腫
瘍が均一に分布するよう試みた。各試験毎にコントロー
ル群と試験群は動物５〜９匹を含む。式Ｉの化合物は２
％アカシア中の腹腔内注射によるかまたは経口的に投与
される。経口投与される化合物は、0.2mLコーン油中に
溶解または懸濁させる。アカシアおよびコーン油コント
ロール処置を含む各処置は各試験動物に１日１回投与さ
れる。試験動物の最初の腫瘍の測定および選択後、腫瘍
を上記方法により各週測定する。動物の処置および測定
を３〜５週間続け、その時点で腫瘍の最終面積を測定す
る。各化合物およびコントロール処置について、平均腫
瘍面積の変化を測定する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 31/535 ＡＥＤＡ６１Ｋ 31/535 ＡＥＤ 31/55 ＡＤＦ 31/55 ＡＤＦＣ０７Ｃ 43/13 Ｃ０７Ｃ 43/13 Ｃ 69/18 69/18 69/28 69/28 309/65 309/65 Ｃ０７Ｄ 295/08 Ｃ０７Ｄ 295/08 ＺＣ０７Ｆ 7/18 Ｃ０７Ｆ 7/18 Ａ // Ｃ０７Ｃ 39/12 Ｃ０７Ｃ 39/12 Ｃ０７Ｄ 207/06 Ｃ０７Ｄ 207/06 (72)発明者チャールズ・デイビッド・ジョーンズアメリカ合衆国46227インディアナ州インディアナポリス、イースト・ブランズウィック・アベニュー223番 (72)発明者ヘンリー・アールマン・ブライアントアメリカ合衆国46250インディアナ州インディアナポリス、キャメルバック・ドライブ7840番

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式Ｉ：【化１】［式中、Ｒ¹は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキ
ル）、−ＯＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、−Ｏ（ＣＯ）Ｏ
（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、−ＯＣＯＡr、−Ｏ（ＣＯ）Ｏ
−Ａr（ここで、Ａrはフェニルまたは所望により置換フ
ェニルである）、または−ＯＳＯ₂（Ｃ₂−Ｃ₆アルキ
ル）であり；Ｒ²は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₄ア
ルキル）、−ＯＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、−Ｏ（Ｃ
Ｏ）Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、−ＯＣＯＡr、−Ｏ（Ｃ
Ｏ）ＯＡr（ここで、Ａrはフェニルまたは所望により置
換フェニルである）、または−ＯＳＯ₂（Ｃ₂−Ｃ₆アル
キル）であり；Ｒ³は１−ピペリジニル、１−ピロリジ
ニル、メチル−１−ピロリジニル、ジメチル−１−ピロ
リジニル、４−モルホリノ、ジメチルアミノ、ジエチル
アミノ、ジイソプロピルアミノ、または１−ヘキサメチ
レンイミノであり、ｎは２または３である]で示される化合物、またはその
医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項２】式ＩＩ：【化２】［式中、Ｒ^1aは−Ｈまたは−ＯＲ⁵（ここでＲ⁵はヒドロ
キシ保護基である）であり、Ｒ^2aは−ＯＲ⁶（ここで、
Ｒ⁶はヒドロキシ保護基である）である］で示される化
合物、またはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和
物。
【請求項３】請求項１に記載の式Ｉの化合物を活性成
分とし、１またはそれ以上の医薬的に許容される賦形
剤、担体、または希釈剤と共に含有する抗閉経後症候群
医薬製剤。