JPH10185920A - アッセイ装置およびそれを用いるアッセイ方法 - Google Patents
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】使用者が特別な注意をはらわなくても簡便かつ
短時間に、微量にしか採取できない液体状の生体試料を
測定することができる簡易アッセイ装置およびそれを用
いた測定方法を提供する。 【解決手段】液体状の試料に接触させるだけで試料を一
定量採取することができる第一の部材と、試料を採取し
た第一の部材を組み込むことにより試料を受けとること
が出来る第二の部材より構成され、試料を採取する時に
は両者は毛細管で連結しておらず、クロマト法あるいは
フロースルー法を測定原理とする、分析対象物質あるい
は分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質を
固定化した多孔性膜上で反応を行う簡易測定装置、及び
これを用いる試料中の特定成分の分析方法。
短時間に、微量にしか採取できない液体状の生体試料を
測定することができる簡易アッセイ装置およびそれを用
いた測定方法を提供する。 【解決手段】液体状の試料に接触させるだけで試料を一
定量採取することができる第一の部材と、試料を採取し
た第一の部材を組み込むことにより試料を受けとること
が出来る第二の部材より構成され、試料を採取する時に
は両者は毛細管で連結しておらず、クロマト法あるいは
フロースルー法を測定原理とする、分析対象物質あるい
は分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質を
固定化した多孔性膜上で反応を行う簡易測定装置、及び
これを用いる試料中の特定成分の分析方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は液体状の試料、特に
微量の液体状の生体試料を簡便に採取し、該試料中の特
定物質（分析対象物質）を生物学的親和性を利用して、
短時間に測定できる簡易アッセイ装置およびそれを用い
た測定方法に関する。
微量の液体状の生体試料を簡便に採取し、該試料中の特
定物質（分析対象物質）を生物学的親和性を利用して、
短時間に測定できる簡易アッセイ装置およびそれを用い
た測定方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、臨床診断の分野において、家庭、
診療室、診療所等での使用に適し、使用者の熟練や手間
をほとんど必要としない免疫反応を測定原理とした簡易
アッセイ装置が普及してきている。
診療室、診療所等での使用に適し、使用者の熟練や手間
をほとんど必要としない免疫反応を測定原理とした簡易
アッセイ装置が普及してきている。
【０００３】その一つの形態はクロマト法アッセイ装置
である（特公平７−１８８７６、特公平７−７８５０
３、特公平７−３６０１７、特公平６−２７７３８、特
開平１−２４４３７０号公報などに開示されてい
る。）。たとえば、アッセイ形式がサンドイッチ形式の
典型例としては、液体が毛管現象で移動することができ
る多孔性のシート状ストリップの一部に、分析対象物質
に特異的に反応する抗体が固定化されており、その上流
に金コロイドなどの着色粒子で標識された分析対象物質
に特異的な抗体（標識抗体）がストリップ上に固定され
ていない状態で配置（塗布・乾燥等により配置）されて
いるクロマト法アッセイ装置があり、これに標識抗体の
上流から液体試料を添加すると、試料はストリップ中の
毛管を伝わって浸透し標識抗体を溶解し、さらに、標識
抗体とともにストリップの抗体を固定化した部位を通過
してストリップの下流に移動して、試料中に分析対象物
質が存在する場合には、溶解した標識抗体と反応し、つ
いでストリップに固定化された抗体に「分析対象物質−
標識抗体」複合体として捕獲される。未反応の標識抗体
は下流に移動してしまうため、分析対象物質が存在する
場合にだけストリップの抗体を固定化した部分に金コロ
イドによる着色が観察される。
である（特公平７−１８８７６、特公平７−７８５０
３、特公平７−３６０１７、特公平６−２７７３８、特
開平１−２４４３７０号公報などに開示されてい
る。）。たとえば、アッセイ形式がサンドイッチ形式の
典型例としては、液体が毛管現象で移動することができ
る多孔性のシート状ストリップの一部に、分析対象物質
に特異的に反応する抗体が固定化されており、その上流
に金コロイドなどの着色粒子で標識された分析対象物質
に特異的な抗体（標識抗体）がストリップ上に固定され
ていない状態で配置（塗布・乾燥等により配置）されて
いるクロマト法アッセイ装置があり、これに標識抗体の
上流から液体試料を添加すると、試料はストリップ中の
毛管を伝わって浸透し標識抗体を溶解し、さらに、標識
抗体とともにストリップの抗体を固定化した部位を通過
してストリップの下流に移動して、試料中に分析対象物
質が存在する場合には、溶解した標識抗体と反応し、つ
いでストリップに固定化された抗体に「分析対象物質−
標識抗体」複合体として捕獲される。未反応の標識抗体
は下流に移動してしまうため、分析対象物質が存在する
場合にだけストリップの抗体を固定化した部分に金コロ
イドによる着色が観察される。
【０００４】もう一つの形態はフロースルー法アッセイ
装置である（特公平７−３４０１６、特公平７−１１３
６３７、特開平３−１１８４７３、特開平１−２４７６
８号公報などに開示されている。）。この装置は、分析
対象物質に特異的に反応する抗体が固定化されていて液
体が通過できる毛管を有する多孔性のメンブレンとその
下面で毛管が連絡して接触している吸水用部品より構成
される。メンブレンの上面から液体試料を添加すると、
メンブレンを通過して吸水用部品に吸収され、その時、
試料中に分析対象物質が存在する場合には、分析対象物
質はメンブレンに固定化された抗体上に捕獲される。そ
の後、西洋ワサビなどの酵素で標識した分析対象物質に
特異的な抗体（標識抗体）を添加し、メンブレンに固定
化された抗体上に捕獲された分析対象物質と反応させサ
ンドイッチ複合体を形成させる。さらに、洗浄液でメン
ブレンの毛管中にある未反応の標識抗体を吸水用部品に
吸収させた後、標識酵素により発色する基質液を添加す
ることにより、メンブレンの抗体を固定化した部分に着
色が観察される。
装置である（特公平７−３４０１６、特公平７−１１３
６３７、特開平３−１１８４７３、特開平１−２４７６
８号公報などに開示されている。）。この装置は、分析
対象物質に特異的に反応する抗体が固定化されていて液
体が通過できる毛管を有する多孔性のメンブレンとその
下面で毛管が連絡して接触している吸水用部品より構成
される。メンブレンの上面から液体試料を添加すると、
メンブレンを通過して吸水用部品に吸収され、その時、
試料中に分析対象物質が存在する場合には、分析対象物
質はメンブレンに固定化された抗体上に捕獲される。そ
の後、西洋ワサビなどの酵素で標識した分析対象物質に
特異的な抗体（標識抗体）を添加し、メンブレンに固定
化された抗体上に捕獲された分析対象物質と反応させサ
ンドイッチ複合体を形成させる。さらに、洗浄液でメン
ブレンの毛管中にある未反応の標識抗体を吸水用部品に
吸収させた後、標識酵素により発色する基質液を添加す
ることにより、メンブレンの抗体を固定化した部分に着
色が観察される。
【０００５】ところで、液体状の生体試料中の物質を測
定して診断を行う場合、その物質がある濃度以上あるい
はある濃度以下であることをもって判断する。一方、こ
れらの簡易アッセイ装置を用いた判定はストリップある
いはメンブレンに着色が観察されるか否かで行われ、着
色が観察されるか否かは、添加した試料中の分析対象物
質の絶対量で決まる。従って、生体試料中の分析対象物
質の濃度に対応した正確な判定をするためには、スポイ
トやピペットなどを用いて一定の液量の試料を正確に装
置に添加する必要がある。クロマト法の場合には抗体を
固定化した部分より下流のストリップの面積を調節した
り、吸水用の部材をストリップの端に付けることによ
り、試料を正確な液量で添加しなくとも抗体を固定化し
た部分を通過する試料液量をある程度調節できるが、ス
トリップや取り付けた吸収用部材を濡らすのに十分な比
較的多量の試料を添加しなければならない。
定して診断を行う場合、その物質がある濃度以上あるい
はある濃度以下であることをもって判断する。一方、こ
れらの簡易アッセイ装置を用いた判定はストリップある
いはメンブレンに着色が観察されるか否かで行われ、着
色が観察されるか否かは、添加した試料中の分析対象物
質の絶対量で決まる。従って、生体試料中の分析対象物
質の濃度に対応した正確な判定をするためには、スポイ
トやピペットなどを用いて一定の液量の試料を正確に装
置に添加する必要がある。クロマト法の場合には抗体を
固定化した部分より下流のストリップの面積を調節した
り、吸水用の部材をストリップの端に付けることによ
り、試料を正確な液量で添加しなくとも抗体を固定化し
た部分を通過する試料液量をある程度調節できるが、ス
トリップや取り付けた吸収用部材を濡らすのに十分な比
較的多量の試料を添加しなければならない。
【０００６】ところが、乳癌などでみられる異常乳頭分
泌液や皮膚からの浸出液あるいは指先を直接刺棘して得
られる血液などは微量しか採取できない。そのため、使
用者はキャピラリーなどの特別な用具を使用して注意深
く試料を扱わなければならず、正確な量の取り扱いには
熟練を要した。従って、これらの試料を前記従来の簡易
アッセイ装置に適用するのは難しかった。
泌液や皮膚からの浸出液あるいは指先を直接刺棘して得
られる血液などは微量しか採取できない。そのため、使
用者はキャピラリーなどの特別な用具を使用して注意深
く試料を扱わなければならず、正確な量の取り扱いには
熟練を要した。従って、これらの試料を前記従来の簡易
アッセイ装置に適用するのは難しかった。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、使用者が特
別な注意を払わなくても簡便で正確に一定量の試料を採
取して試験ができる簡易アッセイ装置を提供することを
目的とする。また、本発明はこの様な簡易アッセイ装置
を使用したアッセイ方法を提供することを目的とする。
別な注意を払わなくても簡便で正確に一定量の試料を採
取して試験ができる簡易アッセイ装置を提供することを
目的とする。また、本発明はこの様な簡易アッセイ装置
を使用したアッセイ方法を提供することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意検討した結果、本発明を完成し
た。すなわち、本発明は
を解決するために鋭意検討した結果、本発明を完成し
た。すなわち、本発明は
【０００９】（１）生物学的親和性を利用したクロマト
法あるいはフロースルー法に基づくアッセイ装置であっ
て、液体状の試料に接触させることにより一定量の液体
試料を採取できる第一の部材と、試料を採取した第一の
部材を組み込むことにより試料を受けとることのできる
第二の部材から構成され、試料を採取する時には第一の
部材と第二の部材は毛細管で連結していないアッセイ装
置、
法あるいはフロースルー法に基づくアッセイ装置であっ
て、液体状の試料に接触させることにより一定量の液体
試料を採取できる第一の部材と、試料を採取した第一の
部材を組み込むことにより試料を受けとることのできる
第二の部材から構成され、試料を採取する時には第一の
部材と第二の部材は毛細管で連結していないアッセイ装
置、
【００１０】（２）第一の部材によって採取される液体
状試料量が５０μｌ以下である上記（１）に記載のアッ
セイ装置、 （３）第一の部材が、液体状試料を採取し保持するため
の平面、溝、くぼみまたは穴構造を有する上記（１）又
は（２）に記載のアッセイ装置、
状試料量が５０μｌ以下である上記（１）に記載のアッ
セイ装置、 （３）第一の部材が、液体状試料を採取し保持するため
の平面、溝、くぼみまたは穴構造を有する上記（１）又
は（２）に記載のアッセイ装置、
【００１１】（４）第一の部材が、吸収により液体状試
料を採取するための吸水性材料を構成部品として有する
上記（１）又は（２）に記載のアッセイ装置、 （５）吸水性材料が、繊維マトリクス、多孔性膜、濾
紙、ガラス繊維濾紙、焼結体のいずれかである上記
（４）に記載のアッセイ装置、 （６）吸水性材料が濾紙である上記（４）に記載のアッ
セイ装置、
料を採取するための吸水性材料を構成部品として有する
上記（１）又は（２）に記載のアッセイ装置、 （５）吸水性材料が、繊維マトリクス、多孔性膜、濾
紙、ガラス繊維濾紙、焼結体のいずれかである上記
（４）に記載のアッセイ装置、 （６）吸水性材料が濾紙である上記（４）に記載のアッ
セイ装置、
【００１２】（７）クロマト法に基づくアッセイ装置で
あって、第二の部材は少なくとも分析対象物質あるいは
分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質が固
定化された部位を有するクロマトグラフィー用基材を有
し、第一の部材を第二の部材に組み込むことにより、該
クロマトグラフィー用基材の分析対象物質あるいは分析
対象物質と生物学的親和性により結合する物質が固定化
された部位あるいはその上流から試料を該クロマトグラ
フィー用基材に浸透させることが可能になり、かつ、浸
透した試料を該クロマトグラフィー用基材中を毛管現象
によって下流に移動させることにより分析対象物質を測
定する上記（１）から（６）のいずれかに記載のアッセ
イ装置、
あって、第二の部材は少なくとも分析対象物質あるいは
分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質が固
定化された部位を有するクロマトグラフィー用基材を有
し、第一の部材を第二の部材に組み込むことにより、該
クロマトグラフィー用基材の分析対象物質あるいは分析
対象物質と生物学的親和性により結合する物質が固定化
された部位あるいはその上流から試料を該クロマトグラ
フィー用基材に浸透させることが可能になり、かつ、浸
透した試料を該クロマトグラフィー用基材中を毛管現象
によって下流に移動させることにより分析対象物質を測
定する上記（１）から（６）のいずれかに記載のアッセ
イ装置、
【００１３】（８）クロマト法に基づくアッセイ装置で
あって、第二の部材のクロマトグラフィー用基材上で、
第一の部材を組み込む部位より上流の部位に、クロマト
グラフィー用基材中を試料を移動させるための展開液を
添加するための部位が設けられている上記（７）に記載
のアッセイ装置、
あって、第二の部材のクロマトグラフィー用基材上で、
第一の部材を組み込む部位より上流の部位に、クロマト
グラフィー用基材中を試料を移動させるための展開液を
添加するための部位が設けられている上記（７）に記載
のアッセイ装置、
【００１４】（９）クロマト法に基づくアッセイ装置で
あって、第二の部材のクロマトグラフィー用基材が、分
析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和性によ
り結合する物質が固定化された部位を有する部分（Ａ）
と展開液を添加する部分（Ｂ）の少なくとも２つに分か
れており、第一の部材が組み込まれるまでは部分（Ａ）
と部分（Ｂ）は毛細管でつながっておらず液体の移動は
できないが、第一の部材を組み込むことにより液体の移
動が可能になる上記（７）又は（８）に記載のアッセイ
装置、
あって、第二の部材のクロマトグラフィー用基材が、分
析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和性によ
り結合する物質が固定化された部位を有する部分（Ａ）
と展開液を添加する部分（Ｂ）の少なくとも２つに分か
れており、第一の部材が組み込まれるまでは部分（Ａ）
と部分（Ｂ）は毛細管でつながっておらず液体の移動は
できないが、第一の部材を組み込むことにより液体の移
動が可能になる上記（７）又は（８）に記載のアッセイ
装置、
【００１５】（１０）クロマト法に基づくアッセイ装置
であって、第二の部材のクロマトグラフィー用基材中を
試料を移動させるための展開液を、第二の部材に組み込
んだ第一の部材を介して添加する上記（７）に記載のア
ッセイ装置、
であって、第二の部材のクロマトグラフィー用基材中を
試料を移動させるための展開液を、第二の部材に組み込
んだ第一の部材を介して添加する上記（７）に記載のア
ッセイ装置、
【００１６】（１１）フロースルー法に基づくアッセイ
装置であって、第二の部材は少なくとも分析対象物質あ
るいは分析対象物質と生物学的親和性により結合する物
質が固定された多孔性メンブレンとその下面に接してい
る吸水用部品を有し、第一の部材を第二の部材に組み込
むことにより試料を該メンブレン上面から該メンブレン
中に浸透させることができ、毛管現象によって該メンブ
レンを通過させ吸水用部品に吸収させることにより分析
対象物質を測定する上記（１）から（６）のいずれかに
記載のアッセイ装置、
装置であって、第二の部材は少なくとも分析対象物質あ
るいは分析対象物質と生物学的親和性により結合する物
質が固定された多孔性メンブレンとその下面に接してい
る吸水用部品を有し、第一の部材を第二の部材に組み込
むことにより試料を該メンブレン上面から該メンブレン
中に浸透させることができ、毛管現象によって該メンブ
レンを通過させ吸水用部品に吸収させることにより分析
対象物質を測定する上記（１）から（６）のいずれかに
記載のアッセイ装置、
【００１７】（１２）フロースルー法に基づくアッセイ
装置であって、第二の部材は少なくとも吸水用部品を有
し、第一の部材が分析対象物質あるいは分析対象物質と
生物学的親和性により結合する物質が固定された多孔性
メンブレンを構成部品として有し、第一の部材を第二の
部材に組み込むことにより第一の部材の多孔性メンブレ
ンは第二の部材の吸水用部品と毛細管で繋がる上記
（１）から（６）のいずれかに記載のアッセイ装置、
装置であって、第二の部材は少なくとも吸水用部品を有
し、第一の部材が分析対象物質あるいは分析対象物質と
生物学的親和性により結合する物質が固定された多孔性
メンブレンを構成部品として有し、第一の部材を第二の
部材に組み込むことにより第一の部材の多孔性メンブレ
ンは第二の部材の吸水用部品と毛細管で繋がる上記
（１）から（６）のいずれかに記載のアッセイ装置、
【００１８】（１３）分析対象物質あるいは分析対象物
質と生物学的親和性により結合する物質を固定するクロ
マトグラフィー用基材あるいは多孔性メンブレンが、ニ
トロセルロース膜、ナイロン膜、濾紙、ガラス繊維濾紙
のいずれかからなる上記（７）から（１２）いずれかに
記載のアッセイ装置、 （１４）生物学的親和性が免疫反応に基づく親和性であ
る上記（１）から（１３）いずれかに記載のアッセイ装
置、
質と生物学的親和性により結合する物質を固定するクロ
マトグラフィー用基材あるいは多孔性メンブレンが、ニ
トロセルロース膜、ナイロン膜、濾紙、ガラス繊維濾紙
のいずれかからなる上記（７）から（１２）いずれかに
記載のアッセイ装置、 （１４）生物学的親和性が免疫反応に基づく親和性であ
る上記（１）から（１３）いずれかに記載のアッセイ装
置、
【００１９】（１５）クロマトグラフィー用基材あるい
は多孔性メンブレンに固定化された物質が抗体または抗
体断片であり、信号を得るための標識を結合した物質
（標識結合体）として標識抗体を用い、クロマトグラフ
ィー用基材あるいは多孔性メンブレン上にサンドイッチ
複合体を作ることにより信号を得る上記（７）から（１
４）のいずれかに記載のアッセイ装置、 （１６）信号を得るための標識が金属コロイド、非金属
コロイドまたは着色ラテックス粒子であり、試料中の分
析対象物質の検出あるいはその濃度測定を視覚的にある
いは色差計で行なうことができる上記（１５）に記載の
アッセイ装置、
は多孔性メンブレンに固定化された物質が抗体または抗
体断片であり、信号を得るための標識を結合した物質
（標識結合体）として標識抗体を用い、クロマトグラフ
ィー用基材あるいは多孔性メンブレン上にサンドイッチ
複合体を作ることにより信号を得る上記（７）から（１
４）のいずれかに記載のアッセイ装置、 （１６）信号を得るための標識が金属コロイド、非金属
コロイドまたは着色ラテックス粒子であり、試料中の分
析対象物質の検出あるいはその濃度測定を視覚的にある
いは色差計で行なうことができる上記（１５）に記載の
アッセイ装置、
【００２０】（１７）上記（１）から（１６）のいずれ
かに記載のアッセイ装置を使用して、液体状の試料中の
分析対象物質を測定する方法、 （１８）試料をクロマトグラフィー用基材中で展開させ
るあるいは多孔性メンブレンを通過して吸水用部品に吸
収させるために、試料以外に別に用意した展開液を用い
る上記（１７）に記載の方法、
かに記載のアッセイ装置を使用して、液体状の試料中の
分析対象物質を測定する方法、 （１８）試料をクロマトグラフィー用基材中で展開させ
るあるいは多孔性メンブレンを通過して吸水用部品に吸
収させるために、試料以外に別に用意した展開液を用い
る上記（１７）に記載の方法、
【００２１】（１９）展開液が標識物質を含有する溶液
である上記（１８）に記載の方法、 （２０）試料が乳頭分泌液、皮膚からの浸出液、又は血
液である上記（１７）から（１９）のいずれかに記載の
方法、 （２１）分析対象物質が乳頭分泌液中のＣＥＡ、ＮＣＣ
−ＳＴ−４３９、ヘモグロビンのいずれかである上記
（１７）から（２０）のいずれかに記載の方法、 （２２）乳癌検診用の上記（１）から（１６）のいずれ
かに記載のアッセイ装置、に関する。
である上記（１８）に記載の方法、 （２０）試料が乳頭分泌液、皮膚からの浸出液、又は血
液である上記（１７）から（１９）のいずれかに記載の
方法、 （２１）分析対象物質が乳頭分泌液中のＣＥＡ、ＮＣＣ
−ＳＴ−４３９、ヘモグロビンのいずれかである上記
（１７）から（２０）のいずれかに記載の方法、 （２２）乳癌検診用の上記（１）から（１６）のいずれ
かに記載のアッセイ装置、に関する。
【００２２】
【発明の実施の形態】本発明において、クロマト法に基
づくアッセイ装置とは、その特定部位に分析対象物質あ
るいは分析対象物質に結合する物質が固定化されたクロ
マトグラフィー用基材中を毛管現象により試料を移動さ
せ、試料中の分析対象物質、標識をつけたこれと結合す
ることができる物質あるいは標識をつけた分析対象物質
の該特定部位での捕獲を検出することにより試料のアッ
セイを行なう装置をいう。なお、この検出は、該特定部
位で直接行なうことができるが、場合によってはその下
流において行なうこともできる。又、フロースルー法に
基づくアッセイ装置とは、分析対象物質あるいは分析対
象物質に結合する物質が固定化された多孔性メンブレン
の上面から下面に試料を通過させ、試料中の分析対象物
質、標識をつけたこれと結合することができる物質ある
いは標識をつけた分析対象物質の該メンブレンでの捕獲
を検出することにより試料のアッセイを行なう装置をい
う。
づくアッセイ装置とは、その特定部位に分析対象物質あ
るいは分析対象物質に結合する物質が固定化されたクロ
マトグラフィー用基材中を毛管現象により試料を移動さ
せ、試料中の分析対象物質、標識をつけたこれと結合す
ることができる物質あるいは標識をつけた分析対象物質
の該特定部位での捕獲を検出することにより試料のアッ
セイを行なう装置をいう。なお、この検出は、該特定部
位で直接行なうことができるが、場合によってはその下
流において行なうこともできる。又、フロースルー法に
基づくアッセイ装置とは、分析対象物質あるいは分析対
象物質に結合する物質が固定化された多孔性メンブレン
の上面から下面に試料を通過させ、試料中の分析対象物
質、標識をつけたこれと結合することができる物質ある
いは標識をつけた分析対象物質の該メンブレンでの捕獲
を検出することにより試料のアッセイを行なう装置をい
う。
【００２３】生物学的親和性としては、抗原−抗体相互
作用やハプテン−抗体相互作用のような免疫反応に基づ
く親和性や、糖蛋白質を含む糖−レクチン相互作用、ホ
ルモンなどの生理活性物質−レセプター相互作用、相補
的な核酸オリゴマー間の相互作用などが挙げられる。特
に好ましくは免疫反応に基づく親和性である。以下、免
疫反応に基づく親和性を利用したアッセイ装置を例にと
り説明するが、本発明はこれに限定されるものではな
い。
作用やハプテン−抗体相互作用のような免疫反応に基づ
く親和性や、糖蛋白質を含む糖−レクチン相互作用、ホ
ルモンなどの生理活性物質−レセプター相互作用、相補
的な核酸オリゴマー間の相互作用などが挙げられる。特
に好ましくは免疫反応に基づく親和性である。以下、免
疫反応に基づく親和性を利用したアッセイ装置を例にと
り説明するが、本発明はこれに限定されるものではな
い。
【００２４】測定形式としては、例えばＰ．ＴＩＪＳＳ
ＥＮの「エンザイムイムノアッセイ（生化学実験方法１
１、東京化学同人、１９８９年）」２９７〜３１４ペー
ジに記載されるような抗体あるいは抗原を固定化した固
相を用いる種々の公知の形式を用いることができる。
ＥＮの「エンザイムイムノアッセイ（生化学実験方法１
１、東京化学同人、１９８９年）」２９７〜３１４ペー
ジに記載されるような抗体あるいは抗原を固定化した固
相を用いる種々の公知の形式を用いることができる。
【００２５】その代表例としては、「従来の技術」の項
で説明したサンドイッチ形式がある。また、結合阻害形
式あるいは競合形式も用いることができる。クロマト法
による結合阻害形式の例としては、液体が毛管現象で移
動することができる多孔性のシート状ストリップの特定
部位に、測定対象である抗原が固定化されており、その
上流に金コロイドなどの着色粒子で標識された標識抗体
がストリップ上に固定されていない状態で配置（塗布・
乾燥等により配置）されている。標識抗体の上流から液
体状試料（液体試料）を添加すると、試料はストリップ
中の毛管を伝わって標識抗体を溶解し、さらに、ストリ
ップの抗原を固定化した部位を通過して下流に移動す
る。試料中に抗原が存在するとき、標識抗体は試料中の
抗原と先に反応するので、ストリップに固定化した抗原
とは反応できない。そのため抗原固定化部位に着色は観
察されず、抗原固定化部位の下流に着色が観察される。
試料中に抗原が存在しないときには、標識抗体は固定化
した抗原に捕獲されるため、抗原固定化部位に着色が観
察され、抗原固定化部位の下流には着色が観察されな
い。
で説明したサンドイッチ形式がある。また、結合阻害形
式あるいは競合形式も用いることができる。クロマト法
による結合阻害形式の例としては、液体が毛管現象で移
動することができる多孔性のシート状ストリップの特定
部位に、測定対象である抗原が固定化されており、その
上流に金コロイドなどの着色粒子で標識された標識抗体
がストリップ上に固定されていない状態で配置（塗布・
乾燥等により配置）されている。標識抗体の上流から液
体状試料（液体試料）を添加すると、試料はストリップ
中の毛管を伝わって標識抗体を溶解し、さらに、ストリ
ップの抗原を固定化した部位を通過して下流に移動す
る。試料中に抗原が存在するとき、標識抗体は試料中の
抗原と先に反応するので、ストリップに固定化した抗原
とは反応できない。そのため抗原固定化部位に着色は観
察されず、抗原固定化部位の下流に着色が観察される。
試料中に抗原が存在しないときには、標識抗体は固定化
した抗原に捕獲されるため、抗原固定化部位に着色が観
察され、抗原固定化部位の下流には着色が観察されな
い。
【００２６】クロマト法による競合形式の例としては、
多孔性のシート状ストリップの特定部位に測定対象であ
る抗原に対する抗体が固定化されており、その上流に金
コロイドなどの着色粒子で標識された標識抗原がストリ
ップ上に固定されていない状態で配置（塗布・乾燥等に
より配置）されている。標識抗原の上流から液体試料を
添加すると、試料はストリップ中の毛管を伝わって標識
抗原を溶解し、さらに、ストリップの抗体を固定化した
部位を通過して下流に移動する。試料中に抗原が存在す
るとき、固定化した抗体は試料中の抗原と反応し、標識
抗原との反応は妨害される。従って、ストリップの抗体
固定化部位に着色は観察されず、抗体固定化部位の下流
に着色が観察される。試料中に抗原が存在しないときに
は、固定化した抗体に標識抗原が捕獲されるため、抗体
固定化部位に着色が観察され、抗体固定化部位の下流に
は着色が観察されない。
多孔性のシート状ストリップの特定部位に測定対象であ
る抗原に対する抗体が固定化されており、その上流に金
コロイドなどの着色粒子で標識された標識抗原がストリ
ップ上に固定されていない状態で配置（塗布・乾燥等に
より配置）されている。標識抗原の上流から液体試料を
添加すると、試料はストリップ中の毛管を伝わって標識
抗原を溶解し、さらに、ストリップの抗体を固定化した
部位を通過して下流に移動する。試料中に抗原が存在す
るとき、固定化した抗体は試料中の抗原と反応し、標識
抗原との反応は妨害される。従って、ストリップの抗体
固定化部位に着色は観察されず、抗体固定化部位の下流
に着色が観察される。試料中に抗原が存在しないときに
は、固定化した抗体に標識抗原が捕獲されるため、抗体
固定化部位に着色が観察され、抗体固定化部位の下流に
は着色が観察されない。
【００２７】また、試料中に存在する特定の抗原に対す
る抗体を検出する場合には、抗原を固定化した多孔性膜
と標識した抗抗体を用いれば、抗体が存在すれば、抗原
を固相化した部分に着色が観察される。
る抗体を検出する場合には、抗原を固定化した多孔性膜
と標識した抗抗体を用いれば、抗体が存在すれば、抗原
を固相化した部分に着色が観察される。
【００２８】本発明において、液体状の試料としてあら
ゆる形態の溶液やコロイド溶液などが使用できる。好ま
しくは生体由来の試料、例えば血液、血漿、血清、尿、
脳脊髄液、唾液、羊水、乳、乳頭分泌液、涙、汗、皮膚
からの浸出液、組織や細胞および便からの抽出液等が挙
げられる。特に好ましくは、微量しか採取できない、乳
頭分泌液、皮膚からの浸出液、皮膚を直接刺棘して得ら
れる微量の血液などが挙げられる。
ゆる形態の溶液やコロイド溶液などが使用できる。好ま
しくは生体由来の試料、例えば血液、血漿、血清、尿、
脳脊髄液、唾液、羊水、乳、乳頭分泌液、涙、汗、皮膚
からの浸出液、組織や細胞および便からの抽出液等が挙
げられる。特に好ましくは、微量しか採取できない、乳
頭分泌液、皮膚からの浸出液、皮膚を直接刺棘して得ら
れる微量の血液などが挙げられる。
【００２９】本発明のアッセイ装置は、液体状の試料に
接触させるだけで一定量の試料を採取できる第一の部材
を必須の構成要素として含んでいる。従って、使用者は
一定量の試料を採取しアッセイ装置に添加するために、
ピペットやスポイトなどの採取用具を使用して注意深く
目盛りを読んで採取量の確認を行ったり、マイクロピペ
ットなどの採取用具の目盛りを調節して採取量の設定を
行ったりするような特別の操作を必要としない。この様
な採取部材は微量の試料に対して特に有効である。微量
の試料は試験管などの容器に移してから一定量採取しよ
うとすると、その間に試料のロスがおこり、必要量を採
取することができなくなってしまう。通常は容器に移し
替えることなく、身体などの試料を採取する部分から直
接簡易アッセイ装置に一定量採取することが要望され、
本発明のアッセイ装置はそれに対応したものであるが、
もちろん、試験管などの別の容器に取った試料にも適用
できることは言うまでもない。
接触させるだけで一定量の試料を採取できる第一の部材
を必須の構成要素として含んでいる。従って、使用者は
一定量の試料を採取しアッセイ装置に添加するために、
ピペットやスポイトなどの採取用具を使用して注意深く
目盛りを読んで採取量の確認を行ったり、マイクロピペ
ットなどの採取用具の目盛りを調節して採取量の設定を
行ったりするような特別の操作を必要としない。この様
な採取部材は微量の試料に対して特に有効である。微量
の試料は試験管などの容器に移してから一定量採取しよ
うとすると、その間に試料のロスがおこり、必要量を採
取することができなくなってしまう。通常は容器に移し
替えることなく、身体などの試料を採取する部分から直
接簡易アッセイ装置に一定量採取することが要望され、
本発明のアッセイ装置はそれに対応したものであるが、
もちろん、試験管などの別の容器に取った試料にも適用
できることは言うまでもない。
【００３０】第一の部材に一定量の液体試料を採取する
機能を保持させるためには種々の方法を用いることがで
き、そのために第一の部材は種々の材質のものを用いる
ことができ、種々の形状にすることができる。身体など
から直接採取するために指などで摘むための形状部分が
付加されていて良い。例えば液状試料の界面現象による
濡れを利用して固体表面に一定量採取する場合、採取部
分が一定の表面積を持つ平面からなる形状、円や多角形
などの適当な形のくぼみまたは穴（反対側まで突き抜け
ていて両端で開口していても、途中で行き止まりになっ
ていても良い）を有する形状、適当な形の溝を有する形
状などをもつプラスチック、金属、ガラス等の成形体を
第一の部材とすることができる。
機能を保持させるためには種々の方法を用いることがで
き、そのために第一の部材は種々の材質のものを用いる
ことができ、種々の形状にすることができる。身体など
から直接採取するために指などで摘むための形状部分が
付加されていて良い。例えば液状試料の界面現象による
濡れを利用して固体表面に一定量採取する場合、採取部
分が一定の表面積を持つ平面からなる形状、円や多角形
などの適当な形のくぼみまたは穴（反対側まで突き抜け
ていて両端で開口していても、途中で行き止まりになっ
ていても良い）を有する形状、適当な形の溝を有する形
状などをもつプラスチック、金属、ガラス等の成形体を
第一の部材とすることができる。
【００３１】試料採取部分が平面である場合、この平面
はクロマト法のストリップ（クロマトグラフィー用基
材）あるいはフロースルー法のメンブレンの幅を超えな
い大きさとする。形態は円形、楕円形、正方形、長方形
等のいずれでも良い。幅および長さは通常２〜３０ｍ
ｍ、好ましくは３〜２０ｍｍ、より好ましくは４〜１５
ｍｍである。試料採取部分がくぼみ又は穴である場合、
その断面の幅はクロマト法のストリップあるいはフロー
スルー法のメンブレンの幅よりも小さいものとし、通常
０．１〜１０ｍｍ、好ましくは０．２ｍｍ〜５ｍｍ、よ
り好ましくは０．４ｍｍから３ｍｍであり、その深さは
通常０．０５ｍｍ〜３０ｃｍ、好ましくは０．１ｍｍ〜
２０ｃｍ、より好ましくは０．２ｍｍ〜１５ｃｍであ
る。試料採取部分が溝の構造の場合、その溝は表面張力
で液状試料を保持できる大きさであるが、溝の断面の形
態は特に限定されない。溝の長さはクロマト法のストリ
ップの幅を超えない長さが好ましく、溝の断面が長方形
の形態では、溝の幅および深さは通常０．０５〜５ｍ
ｍ、好ましくは０．１〜４ｍｍ、より好ましくは０．２
〜３ｍｍである。
はクロマト法のストリップ（クロマトグラフィー用基
材）あるいはフロースルー法のメンブレンの幅を超えな
い大きさとする。形態は円形、楕円形、正方形、長方形
等のいずれでも良い。幅および長さは通常２〜３０ｍ
ｍ、好ましくは３〜２０ｍｍ、より好ましくは４〜１５
ｍｍである。試料採取部分がくぼみ又は穴である場合、
その断面の幅はクロマト法のストリップあるいはフロー
スルー法のメンブレンの幅よりも小さいものとし、通常
０．１〜１０ｍｍ、好ましくは０．２ｍｍ〜５ｍｍ、よ
り好ましくは０．４ｍｍから３ｍｍであり、その深さは
通常０．０５ｍｍ〜３０ｃｍ、好ましくは０．１ｍｍ〜
２０ｃｍ、より好ましくは０．２ｍｍ〜１５ｃｍであ
る。試料採取部分が溝の構造の場合、その溝は表面張力
で液状試料を保持できる大きさであるが、溝の断面の形
態は特に限定されない。溝の長さはクロマト法のストリ
ップの幅を超えない長さが好ましく、溝の断面が長方形
の形態では、溝の幅および深さは通常０．０５〜５ｍ
ｍ、好ましくは０．１〜４ｍｍ、より好ましくは０．２
〜３ｍｍである。
【００３２】また、吸水性材料を構成部品として第一の
部材を作製することができる。吸水性材料として、シリ
カ、チタニア、ジルコニア、セリアおよびアルミナ等の
セラミック微粒子や有機高分子の微粒子、セルロースや
その誘導体、デキストラン誘導体、アガロース誘導体、
ポリメタクリル酸２−ヒドロキシエチル、ポリアクリル
酸およびポリビニルアルコール−ポリアクリル酸複合体
等の多孔質ゲル、多孔性構造を有する金属や無機材料あ
るいは有機材料の焼結体、ポリウレタン、ポリエステ
ル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニリ
デン、ナイロン、酢酸セルロースなどのセルロース誘導
体等の繊維マトリクスや多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾
紙、布、綿等があげられる。微粒子はそれ自体が多孔性
でなくとも、充填された状態では微粒子間に空隙が生
じ、毛管現象により液体試料を採取できる。
部材を作製することができる。吸水性材料として、シリ
カ、チタニア、ジルコニア、セリアおよびアルミナ等の
セラミック微粒子や有機高分子の微粒子、セルロースや
その誘導体、デキストラン誘導体、アガロース誘導体、
ポリメタクリル酸２−ヒドロキシエチル、ポリアクリル
酸およびポリビニルアルコール−ポリアクリル酸複合体
等の多孔質ゲル、多孔性構造を有する金属や無機材料あ
るいは有機材料の焼結体、ポリウレタン、ポリエステ
ル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニリ
デン、ナイロン、酢酸セルロースなどのセルロース誘導
体等の繊維マトリクスや多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾
紙、布、綿等があげられる。微粒子はそれ自体が多孔性
でなくとも、充填された状態では微粒子間に空隙が生
じ、毛管現象により液体試料を採取できる。
【００３３】これらの吸水性材料は、一定の厚みを持っ
た薄い膜の形で使用することができる。液体試料を一定
量吸収させるため、膜の体積は一定にしなければならな
いが、その吸水量は膜の空隙率、厚さ、ポアサイズ等の
影響を受ける。クロマト法のストリップあるいはフロー
スルー法のメンブレンの幅よりも小さいものであるのが
望ましい。形状は円形、楕円形、正方形、長方形等のい
ずれでも良い。膜の幅および長さは通常１〜３０ｍｍ、
好ましくは２〜２０ｍｍ、より好ましくは３〜１５ｍｍ
である。また、厚さは通常０．０１〜５ｍｍ、好ましく
は０．０２〜４ｍｍ、より好ましくは０．０５〜３ｍｍ
である。
た薄い膜の形で使用することができる。液体試料を一定
量吸収させるため、膜の体積は一定にしなければならな
いが、その吸水量は膜の空隙率、厚さ、ポアサイズ等の
影響を受ける。クロマト法のストリップあるいはフロー
スルー法のメンブレンの幅よりも小さいものであるのが
望ましい。形状は円形、楕円形、正方形、長方形等のい
ずれでも良い。膜の幅および長さは通常１〜３０ｍｍ、
好ましくは２〜２０ｍｍ、より好ましくは３〜１５ｍｍ
である。また、厚さは通常０．０１〜５ｍｍ、好ましく
は０．０２〜４ｍｍ、より好ましくは０．０５〜３ｍｍ
である。
【００３４】これらの材料は濡れ特性を良くするために
界面活性剤などで処理したり、牛血清アルブミンやカゼ
インなどで処理して試料中の分析対象物質が吸着しない
ようにしておくこともできる。また、試料が採取された
ことを知らせるために水分によって色の変化する物質、
例えば無水硫酸銅等を含浸させておくこともできる。こ
れらの材料は、保持するためのプラスチック等でできた
容器や支持体とともに使用することもできる。微粒子や
多孔質ゲルは必要に応じ適当な水透過性の膜で挟むなど
して保持することもできる。
界面活性剤などで処理したり、牛血清アルブミンやカゼ
インなどで処理して試料中の分析対象物質が吸着しない
ようにしておくこともできる。また、試料が採取された
ことを知らせるために水分によって色の変化する物質、
例えば無水硫酸銅等を含浸させておくこともできる。こ
れらの材料は、保持するためのプラスチック等でできた
容器や支持体とともに使用することもできる。微粒子や
多孔質ゲルは必要に応じ適当な水透過性の膜で挟むなど
して保持することもできる。
【００３５】本発明の第一の部材は、５０μｌを超える
多量の試料を採取するためにも用いることができるが、
５０μｌ以下の試料の採取に適しており、特に２０μｌ
以下の試料の採取に有用である。試料の好適な採取量は
０．１〜２０μｌであり、特に好ましい採取量は０．５
〜１０μｌである。
多量の試料を採取するためにも用いることができるが、
５０μｌ以下の試料の採取に適しており、特に２０μｌ
以下の試料の採取に有用である。試料の好適な採取量は
０．１〜２０μｌであり、特に好ましい採取量は０．５
〜１０μｌである。
【００３６】第一の部材で採取した液体試料は、第一の
部材を第二の部材に組み込むことにより、第二の部材の
クロマトグラフィー用基材あるいは多孔性メンブレンに
移すことが可能になる。第二の部材はクロマトグラフィ
ー用基材あるいは多孔性メンブレンを含み、その他にそ
れを収納するケースなどから構成されていて良い。第一
の部材と第二の部材は試料採取時には毛細管で連結して
おらず、第一の部材から第二の部材に液体の移動はでき
ないようになっていなければならない。第一の部材と第
二の部材は完全に独立していてもよいし、同一のケース
に納められてはいるが、第一の部材と第二の部材のクロ
マトグラフィー用基材あるいは多孔性メンブレンは毛細
管で繋がっておらず分離していて、どちらか一方を動か
して繋げる構造にしてもよい。
部材を第二の部材に組み込むことにより、第二の部材の
クロマトグラフィー用基材あるいは多孔性メンブレンに
移すことが可能になる。第二の部材はクロマトグラフィ
ー用基材あるいは多孔性メンブレンを含み、その他にそ
れを収納するケースなどから構成されていて良い。第一
の部材と第二の部材は試料採取時には毛細管で連結して
おらず、第一の部材から第二の部材に液体の移動はでき
ないようになっていなければならない。第一の部材と第
二の部材は完全に独立していてもよいし、同一のケース
に納められてはいるが、第一の部材と第二の部材のクロ
マトグラフィー用基材あるいは多孔性メンブレンは毛細
管で繋がっておらず分離していて、どちらか一方を動か
して繋げる構造にしてもよい。
【００３７】本発明の第二の部材がクロマト法による場
合、第二の部材は毛管現象により試料や非固定化試薬を
必要により展開液を用いて移動させることのできるクロ
マトグラフィー用基材を有し、少なくとも分析対象物質
あるいは分析対象物質と生物学的親和性により結合する
物質が該基材の特定部位に固定化されている。該基材の
形状は一般的には長方形であるが、液体の展開を均一に
するために切れ込みを入れたり、ジグザグの形状にした
りすることもできる。
合、第二の部材は毛管現象により試料や非固定化試薬を
必要により展開液を用いて移動させることのできるクロ
マトグラフィー用基材を有し、少なくとも分析対象物質
あるいは分析対象物質と生物学的親和性により結合する
物質が該基材の特定部位に固定化されている。該基材の
形状は一般的には長方形であるが、液体の展開を均一に
するために切れ込みを入れたり、ジグザグの形状にした
りすることもできる。
【００３８】クロマトグラフィー用基材としては、ペー
パークロマトグラフィーに用いる織った繊維状物質、織
ってない繊維状物質あるいは多孔性膜状物質や薄層クロ
マトグラフィーに用いる微粒子物質がある。より具体的
にはシリカ、チタニア、ジルコニア、セリアおよびアル
ミナ等のセラミック微粒子や有機高分子の微粒子、ポリ
ウレタン、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニ
ル、ポリフッ化ビニリデン、ナイロン、ニトロセルロー
スや酢酸セルロースなどのセルロース誘導体等の繊維マ
トリクスや多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾紙紙、布、綿
等があげられる。好ましくはナイロンやセルロース誘導
体の多孔性膜や濾紙、ガラス繊維濾紙等であり、より好
ましくはニトロセルロース膜、混合ニトロセルロースエ
ステル（ニトロセルロースと酢酸セルロースの混合物）
膜、ナイロン膜、濾紙である。多孔性膜や濾紙の有する
細孔径は０．１μｍ以上、好ましくは１〜５０μｍ、よ
り好ましくは１〜２０μｍである。また、強度を増大さ
せるために水不透過性のプラスチック等で裏打して使用
することもできる。
パークロマトグラフィーに用いる織った繊維状物質、織
ってない繊維状物質あるいは多孔性膜状物質や薄層クロ
マトグラフィーに用いる微粒子物質がある。より具体的
にはシリカ、チタニア、ジルコニア、セリアおよびアル
ミナ等のセラミック微粒子や有機高分子の微粒子、ポリ
ウレタン、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニ
ル、ポリフッ化ビニリデン、ナイロン、ニトロセルロー
スや酢酸セルロースなどのセルロース誘導体等の繊維マ
トリクスや多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾紙紙、布、綿
等があげられる。好ましくはナイロンやセルロース誘導
体の多孔性膜や濾紙、ガラス繊維濾紙等であり、より好
ましくはニトロセルロース膜、混合ニトロセルロースエ
ステル（ニトロセルロースと酢酸セルロースの混合物）
膜、ナイロン膜、濾紙である。多孔性膜や濾紙の有する
細孔径は０．１μｍ以上、好ましくは１〜５０μｍ、よ
り好ましくは１〜２０μｍである。また、強度を増大さ
せるために水不透過性のプラスチック等で裏打して使用
することもできる。
【００３９】クロマトグラフィー用基材の寸法は感度、
時間、試料の使用量を考慮して決定する必要がある。好
ましい長さは、通常約２〜４０ｃｍ、好ましくは３〜２
５ｃｍ、より好ましくは４〜２０ｃｍであるが、クロマ
トグラフィー用基材が検出部と標識物質添着部の間で分
離している場合には、それぞれのクロマトグラフィー用
基材の長さは前記寸法の半分程度が望ましい。また、幅
は通常２〜３０ｍｍ、好ましくは３〜２０ｍｍ、より好
ましくは４〜１０ｍｍである。
時間、試料の使用量を考慮して決定する必要がある。好
ましい長さは、通常約２〜４０ｃｍ、好ましくは３〜２
５ｃｍ、より好ましくは４〜２０ｃｍであるが、クロマ
トグラフィー用基材が検出部と標識物質添着部の間で分
離している場合には、それぞれのクロマトグラフィー用
基材の長さは前記寸法の半分程度が望ましい。また、幅
は通常２〜３０ｍｍ、好ましくは３〜２０ｍｍ、より好
ましくは４〜１０ｍｍである。
【００４０】分析対象物質としては、抗原、ハプテン、
糖蛋白質を含む糖、ホルモン等の生理活性物質、核酸オ
リゴマー等種々のものが挙げられ、又これと生物学的親
和性により結合する抗体、レクチン、レセプター、核酸
オリゴマー等も分析対象物質として挙げられる。即ち、
これらは分析対象物質となりうるし、又、分析対象物質
と生物学的親和性により結合する物質にもなりうる。分
析対象物質と生物学的親和性により結合する物質のうち
好ましいものは抗体である。抗体は、ＩｇＧ，ＩｇＭ、
ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＹ抗体のうちの１種また
は２種以上の混合物であってもよく、モノクローナル抗
体、ポリクローナル抗体のどちらでも使用できる。抗体
はペプシンやパパイン等の酵素処理や還元等の化学処理
により、Ｆ（ａｂ’）2 、Ｆａｂ’、Ｆａｂの様な抗体
断片にして使用することもできる。抗体は周知の方法
で、ウサギ、モルモット、マウス、ヤギ、ヒツジ、ウマ
などの哺乳動物や、ニワトリ、アヒル、ガチョウなどの
鳥類に抗原や、ハプテン等を免役して得られるものや、
細胞融合などの技術を用いて得られるものでよく、ま
た、モノクローナル抗体はマウス腹水や培養上清等より
得られるものであって良い。
糖蛋白質を含む糖、ホルモン等の生理活性物質、核酸オ
リゴマー等種々のものが挙げられ、又これと生物学的親
和性により結合する抗体、レクチン、レセプター、核酸
オリゴマー等も分析対象物質として挙げられる。即ち、
これらは分析対象物質となりうるし、又、分析対象物質
と生物学的親和性により結合する物質にもなりうる。分
析対象物質と生物学的親和性により結合する物質のうち
好ましいものは抗体である。抗体は、ＩｇＧ，ＩｇＭ、
ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＹ抗体のうちの１種また
は２種以上の混合物であってもよく、モノクローナル抗
体、ポリクローナル抗体のどちらでも使用できる。抗体
はペプシンやパパイン等の酵素処理や還元等の化学処理
により、Ｆ（ａｂ’）2 、Ｆａｂ’、Ｆａｂの様な抗体
断片にして使用することもできる。抗体は周知の方法
で、ウサギ、モルモット、マウス、ヤギ、ヒツジ、ウマ
などの哺乳動物や、ニワトリ、アヒル、ガチョウなどの
鳥類に抗原や、ハプテン等を免役して得られるものや、
細胞融合などの技術を用いて得られるものでよく、ま
た、モノクローナル抗体はマウス腹水や培養上清等より
得られるものであって良い。
【００４１】抗体のクロマトグラフィー用基材への固定
化は直接的または間接的に行われる。直接的固定化とし
ては物理吸着を利用しても良いし、共有結合によって固
定しても良い。一般にニトロセルロース膜、または混合
ニトロセルロースエステル膜の場合、物理吸着で行うこ
とができる。共有結合するための試薬としては一般的に
臭化シアン、グルタルアルデヒドおよびカルボジイミド
等が用いられるが、これらに限定されるものではない。
間接的な固定化としては不溶性微粒子に抗体を結合させ
た後に多孔性膜やガラス繊維濾紙などに固定化する方法
がある。微粒子への抗体の固定化には物理吸着、共有結
合のいずれの方法も用いることができる。微粒子の粒径
は多孔性膜に補足されるが移動できないサイズのものを
使用して多孔性膜に固定化する。これらの粒子としては
抗原抗体反応に使用されるものが種々知られており、本
発明でもこれら公知の粒子が特に限定されずに使用でき
る。例えば、ポリスチレン、スチレン−ブタジエン共重
合体、スチレン−メタクリル酸共重合体、ポリグリシジ
ルメタクリレート、アクロレイン−エチレングリコール
ジメタクリレート共重合体などの乳化重合法によって得
られる有機高分子ラテックス粒子などの有機高分子物質
の微粒子、ゼラチン、ベントナイト、アガロース、架橋
デキストランなどの微粒子、シリカ、シリカ−アルミ
ナ、アルミナなどの無機酸化物や無機酸化物にシランカ
ップリング処理などで官能基を導入した無機粒子等が挙
げられる。
化は直接的または間接的に行われる。直接的固定化とし
ては物理吸着を利用しても良いし、共有結合によって固
定しても良い。一般にニトロセルロース膜、または混合
ニトロセルロースエステル膜の場合、物理吸着で行うこ
とができる。共有結合するための試薬としては一般的に
臭化シアン、グルタルアルデヒドおよびカルボジイミド
等が用いられるが、これらに限定されるものではない。
間接的な固定化としては不溶性微粒子に抗体を結合させ
た後に多孔性膜やガラス繊維濾紙などに固定化する方法
がある。微粒子への抗体の固定化には物理吸着、共有結
合のいずれの方法も用いることができる。微粒子の粒径
は多孔性膜に補足されるが移動できないサイズのものを
使用して多孔性膜に固定化する。これらの粒子としては
抗原抗体反応に使用されるものが種々知られており、本
発明でもこれら公知の粒子が特に限定されずに使用でき
る。例えば、ポリスチレン、スチレン−ブタジエン共重
合体、スチレン−メタクリル酸共重合体、ポリグリシジ
ルメタクリレート、アクロレイン−エチレングリコール
ジメタクリレート共重合体などの乳化重合法によって得
られる有機高分子ラテックス粒子などの有機高分子物質
の微粒子、ゼラチン、ベントナイト、アガロース、架橋
デキストランなどの微粒子、シリカ、シリカ−アルミ
ナ、アルミナなどの無機酸化物や無機酸化物にシランカ
ップリング処理などで官能基を導入した無機粒子等が挙
げられる。
【００４２】抗体を固定化した後、クロマトグラフィー
用基材は、試料中の妨害物質による干渉を防ぐために必
要に応じて公知の方法でブロッキング処理を行うことが
できる。一般にブロッキング処理はウシ血清アルブミ
ン、スキムミルク、カゼイン、ゼラチン等の蛋白質、ツ
イーン２０、トリトンＸ−１００、ＳＤＳ等の界面活性
剤、ポリビニルアルコール、エタノールアミンなどのう
ちの１つまたは２つ以上を組み合わせて行われる。ブロ
ッキング処理を必要としないエタノールアミン基を導入
した濾紙等も本発明では使用できる。
用基材は、試料中の妨害物質による干渉を防ぐために必
要に応じて公知の方法でブロッキング処理を行うことが
できる。一般にブロッキング処理はウシ血清アルブミ
ン、スキムミルク、カゼイン、ゼラチン等の蛋白質、ツ
イーン２０、トリトンＸ−１００、ＳＤＳ等の界面活性
剤、ポリビニルアルコール、エタノールアミンなどのう
ちの１つまたは２つ以上を組み合わせて行われる。ブロ
ッキング処理を必要としないエタノールアミン基を導入
した濾紙等も本発明では使用できる。
【００４３】クロマトグラフィー用基材への分析対象物
質あるいは分析対象物質と生物学的親和性により結合す
る物質の固定化には、いろいろな方法が使用可能であ
る。例えば、マイクロシリンジ、調節ポンプ付きペン、
シルクスクリーン印刷、グラビア印刷、転写プリント、
インキ噴射印刷等いろいろな印刷技術が使用可能であ
る。形態としては特に限定されないが、円形のスポット
やクロマト方向に垂直にのびるラインとして固定化する
ことができる。さらに、半定量を可能にするため複数の
固定化部位を設けたりすることも可能である。さらに試
料中の複数の分析対象物質を検出するために複数の物質
を固定化することも可能である。
質あるいは分析対象物質と生物学的親和性により結合す
る物質の固定化には、いろいろな方法が使用可能であ
る。例えば、マイクロシリンジ、調節ポンプ付きペン、
シルクスクリーン印刷、グラビア印刷、転写プリント、
インキ噴射印刷等いろいろな印刷技術が使用可能であ
る。形態としては特に限定されないが、円形のスポット
やクロマト方向に垂直にのびるラインとして固定化する
ことができる。さらに、半定量を可能にするため複数の
固定化部位を設けたりすることも可能である。さらに試
料中の複数の分析対象物質を検出するために複数の物質
を固定化することも可能である。
【００４４】本発明のアッセイ装置を使用して試料中の
分析対象物質を測定する際に、第一の部材は、第二の部
材のクロマトグラフィー用基材の分析対象物質あるいは
分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質を固
定化した部位あるいはその上流部位に、試料が第二の部
材のクロマトグラフィー用基材に毛管現象により移動で
きるように組み込まれる。第二の部材のクロマトグラフ
ィー用基材をケースに収納する場合は、クロマトグラフ
ィー用基材の検出結果表示部分は直接観察できるように
ケースに窓を設ける。クロマトグラフィー用基材の結果
検出部分はサンドイッチ形式では分析対象物質あるいは
分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質を固
定化した部位にあり、競合あるいは阻害形式の場合は分
析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和性によ
り結合する物質を固定化した部位あるいはその下流に設
ける。
分析対象物質を測定する際に、第一の部材は、第二の部
材のクロマトグラフィー用基材の分析対象物質あるいは
分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質を固
定化した部位あるいはその上流部位に、試料が第二の部
材のクロマトグラフィー用基材に毛管現象により移動で
きるように組み込まれる。第二の部材のクロマトグラフ
ィー用基材をケースに収納する場合は、クロマトグラフ
ィー用基材の検出結果表示部分は直接観察できるように
ケースに窓を設ける。クロマトグラフィー用基材の結果
検出部分はサンドイッチ形式では分析対象物質あるいは
分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質を固
定化した部位にあり、競合あるいは阻害形式の場合は分
析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和性によ
り結合する物質を固定化した部位あるいはその下流に設
ける。
【００４５】第二の部材は分析対象物質あるいは分析対
象物質と生物学的親和性により結合する物質を固定化し
た部位を有するクロマトグラフィー用基材やそれを納め
るケース以外に、クロマトグラフィー用基材中を展開す
る液量を調節したり血液中から血球や特定の成分を除去
するための部品等を含んで構成することもできる。例え
ばクロマトグラフィー用基材中を展開する液量を調節す
るため該クロマトグラフィー用基材の上流及び／又は下
流側末端の先にあるいは上流及び／又は下流側末端部分
の上側及び／又は下側に重ねて、毛管が連絡している状
態で別の吸水性材料（吸水用部品）を繋げることもでき
る。
象物質と生物学的親和性により結合する物質を固定化し
た部位を有するクロマトグラフィー用基材やそれを納め
るケース以外に、クロマトグラフィー用基材中を展開す
る液量を調節したり血液中から血球や特定の成分を除去
するための部品等を含んで構成することもできる。例え
ばクロマトグラフィー用基材中を展開する液量を調節す
るため該クロマトグラフィー用基材の上流及び／又は下
流側末端の先にあるいは上流及び／又は下流側末端部分
の上側及び／又は下側に重ねて、毛管が連絡している状
態で別の吸水性材料（吸水用部品）を繋げることもでき
る。
【００４６】第一の部材による試料採取量が微量の場
合、試料は第一の部材あるいは第二の部材のクロマトグ
ラフィー用基材中の一部分に留まり、十分クロマトグラ
フィー用基材中を移動することができない。その場合
は、試料を移動させるための展開液を別に使用する。展
開液を添加するための部位は第二の部材の第一の部材を
組み込む部位の上流に設置することができる。展開液を
添加する部位はクロマトグラフィー用基材上でも、又、
その上流側末端の先にあるいは上流側部分の上側に重ね
て繋げた吸水用部品の部分でもよい。又、第一の部材を
介して添加することもできる。更に、展開液を適当な容
器に入れて、第一の部材あるいは第二の部材の構成部品
の一つとして用いることもできる。
合、試料は第一の部材あるいは第二の部材のクロマトグ
ラフィー用基材中の一部分に留まり、十分クロマトグラ
フィー用基材中を移動することができない。その場合
は、試料を移動させるための展開液を別に使用する。展
開液を添加するための部位は第二の部材の第一の部材を
組み込む部位の上流に設置することができる。展開液を
添加する部位はクロマトグラフィー用基材上でも、又、
その上流側末端の先にあるいは上流側部分の上側に重ね
て繋げた吸水用部品の部分でもよい。又、第一の部材を
介して添加することもできる。更に、展開液を適当な容
器に入れて、第一の部材あるいは第二の部材の構成部品
の一つとして用いることもできる。
【００４７】第一の部材の試料採取部分が濾紙や多孔性
膜等の吸水性材料である場合、採取した試料を完全に移
動させるために、第二の部材のクロマトグラフィー用基
材を分析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和
性により結合する物質が固定化された部位を有する部分
（Ａ）と展開液を添加する部分（Ｂ）の少なくとも２つ
に分け、部分（Ａ）と部分（Ｂ）が第一の部材を組み込
むことにより毛細管でつながるようにするのが好まし
い。部分（Ａ）および（Ｂ）に用いるクロマトグラフィ
ー用基材は同一であっても異なっていても良い。
膜等の吸水性材料である場合、採取した試料を完全に移
動させるために、第二の部材のクロマトグラフィー用基
材を分析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和
性により結合する物質が固定化された部位を有する部分
（Ａ）と展開液を添加する部分（Ｂ）の少なくとも２つ
に分け、部分（Ａ）と部分（Ｂ）が第一の部材を組み込
むことにより毛細管でつながるようにするのが好まし
い。部分（Ａ）および（Ｂ）に用いるクロマトグラフィ
ー用基材は同一であっても異なっていても良い。
【００４８】また、第一の部材から展開液を入れられる
構造にし、第一の部材を介して第二の部材のクロマトグ
ラフィー用基材に展開液を添加する方法も、採取した試
料を完全に第二の部材のクロマトグラフィー用基材に移
すことができるので好ましい。
構造にし、第一の部材を介して第二の部材のクロマトグ
ラフィー用基材に展開液を添加する方法も、採取した試
料を完全に第二の部材のクロマトグラフィー用基材に移
すことができるので好ましい。
【００４９】展開液としては一般的に使用される緩衝液
が使用できる。例えばリン酸、トリス−塩酸、酢酸、ホ
ウ酸、炭酸、グッドの緩衝塩類を含む緩衝液などが使用
でき、食塩などを添加して使用することもできる。ま
た、生物学的親和性に基づく反応を制御したり、非特異
的反応を抑制するために公知の添加剤も使用できる。例
えば、抗原抗体反応の促進あるいは非特異反応の抑制の
ために牛血清アルブミン、カゼイン、ゼラチンなどの蛋
白質、ポリエチレングリコール、デキストラン、メチル
セルロース、ポリビニルピロリドン等の高分子化合物
や、ツイーン２０、トリトンＸ−１００などの非イオン
性界面活性剤や他のイオン性界面活性剤、デキストラン
硫酸、ヘパリン、ポリスチレンスルホン酸、ヒアルロン
酸、コンドロイチン硫酸等のポリアニオンまたはその塩
など、アジ化ナトリウム、チメロサール、ケーソンＣ
Ｇ、長鎖アルキル４級アンモニウム塩などの抗菌剤など
を添加することもできる。
が使用できる。例えばリン酸、トリス−塩酸、酢酸、ホ
ウ酸、炭酸、グッドの緩衝塩類を含む緩衝液などが使用
でき、食塩などを添加して使用することもできる。ま
た、生物学的親和性に基づく反応を制御したり、非特異
的反応を抑制するために公知の添加剤も使用できる。例
えば、抗原抗体反応の促進あるいは非特異反応の抑制の
ために牛血清アルブミン、カゼイン、ゼラチンなどの蛋
白質、ポリエチレングリコール、デキストラン、メチル
セルロース、ポリビニルピロリドン等の高分子化合物
や、ツイーン２０、トリトンＸ−１００などの非イオン
性界面活性剤や他のイオン性界面活性剤、デキストラン
硫酸、ヘパリン、ポリスチレンスルホン酸、ヒアルロン
酸、コンドロイチン硫酸等のポリアニオンまたはその塩
など、アジ化ナトリウム、チメロサール、ケーソンＣ
Ｇ、長鎖アルキル４級アンモニウム塩などの抗菌剤など
を添加することもできる。
【００５０】本発明のアッセイ装置がフロースルー法に
よる場合、その一つの形態においては、第二の部材は分
析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和性によ
り結合する物質が固定化された多孔性メンブレンとその
下面に接している吸水用部品を含む。多孔性メンブレン
としては、例えば濾過用メンブレンとして使用されてい
るメンブレンが使用でき、例えば前記クロマトグラフィ
ー用基材として挙げた繊維マトリクス、多孔性膜、濾
紙、ガラス繊維濾紙、布、綿等が挙げられる。又、吸水
用部品としては、前記第一の部材で記載した吸水性材料
を使用することができる。この形態のアッセイ装置を目
視による判定に使用する場合は、分析対象物質あるいは
分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質が固
定化される面積は繊維マトリクス、多孔性膜、濾紙、ガ
ラス繊維濾紙等の多孔性メンブレンの目で見える面積よ
り小さいことが好ましいが、特に限定されるものではな
い。分析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和
性により結合する物質を固定化する方法およびブロッキ
ング処理する方法はクロマト法と同様な方法を用いるこ
とができる。
よる場合、その一つの形態においては、第二の部材は分
析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和性によ
り結合する物質が固定化された多孔性メンブレンとその
下面に接している吸水用部品を含む。多孔性メンブレン
としては、例えば濾過用メンブレンとして使用されてい
るメンブレンが使用でき、例えば前記クロマトグラフィ
ー用基材として挙げた繊維マトリクス、多孔性膜、濾
紙、ガラス繊維濾紙、布、綿等が挙げられる。又、吸水
用部品としては、前記第一の部材で記載した吸水性材料
を使用することができる。この形態のアッセイ装置を目
視による判定に使用する場合は、分析対象物質あるいは
分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質が固
定化される面積は繊維マトリクス、多孔性膜、濾紙、ガ
ラス繊維濾紙等の多孔性メンブレンの目で見える面積よ
り小さいことが好ましいが、特に限定されるものではな
い。分析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和
性により結合する物質を固定化する方法およびブロッキ
ング処理する方法はクロマト法と同様な方法を用いるこ
とができる。
【００５１】試料を採取した第一の部材は第二の部材に
組み込み、第一の部材の試料採取部分を第二の部材の分
析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和性によ
り結合する物質が固定化した繊維マトリクス、多孔性
膜、濾紙、ガラス繊維濾紙等の多孔性メンブレンと接触
させることにより、試料は第二の部材の多孔性メンブレ
ンを通過して吸水用部品まで移動できるようになる。試
料を移動させるために、第一の部材を介して展開液を添
加することができる。展開液としてはクロマト法と同様
な溶液を用いることができる。
組み込み、第一の部材の試料採取部分を第二の部材の分
析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和性によ
り結合する物質が固定化した繊維マトリクス、多孔性
膜、濾紙、ガラス繊維濾紙等の多孔性メンブレンと接触
させることにより、試料は第二の部材の多孔性メンブレ
ンを通過して吸水用部品まで移動できるようになる。試
料を移動させるために、第一の部材を介して展開液を添
加することができる。展開液としてはクロマト法と同様
な溶液を用いることができる。
【００５２】フロースルー法の他の形態は、第一の部材
の吸水性材料自体が分析対象物質あるいは分析対象物質
と生物学的親和性により結合する物質が固定化した繊維
マトリクス、多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾紙等の多孔
性メンブレンであるか又はこれを含んで構成され、第二
の部材は吸水用部品を必須の要素として構成される。生
物学的親和性に基づく反応は試料採取と同時に起こる。
第一の部材を第二の部材に組み込み、繊維マトリクス、
多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾紙等の多孔性メンブレン
を吸水用部品に接触させ、必要により第一の部材を介し
て展開液を添加することにより、試料は第二の部材の吸
水用部品に吸収させることができる。
の吸水性材料自体が分析対象物質あるいは分析対象物質
と生物学的親和性により結合する物質が固定化した繊維
マトリクス、多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾紙等の多孔
性メンブレンであるか又はこれを含んで構成され、第二
の部材は吸水用部品を必須の要素として構成される。生
物学的親和性に基づく反応は試料採取と同時に起こる。
第一の部材を第二の部材に組み込み、繊維マトリクス、
多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾紙等の多孔性メンブレン
を吸水用部品に接触させ、必要により第一の部材を介し
て展開液を添加することにより、試料は第二の部材の吸
水用部品に吸収させることができる。
【００５３】フロースルー法の場合にも、第二の部材は
上記の分析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親
和性により結合する物質が固定化した繊維マトリクス、
多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾紙等の多孔性メンブレン
や吸水用部品の他に、必要に応じそれを納めるケース等
とともに構成することができる。
上記の分析対象物質あるいは分析対象物質と生物学的親
和性により結合する物質が固定化した繊維マトリクス、
多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾紙等の多孔性メンブレン
や吸水用部品の他に、必要に応じそれを納めるケース等
とともに構成することができる。
【００５４】フロースルー法の多孔性メンブレンは円
形、楕円形、正方形、長方形等いずれの形態でも使用で
きる。幅および長さあるいは径は通常２〜１００ｍｍ、
好ましくは３〜８０ｍｍ、より好ましくは４〜５０ｍｍ
である。吸水用部品は多孔性メンブレンより大きく、多
孔性メンブレンの全面が接触する面積を有することが好
ましく、また、試料又は試料及び展開液を完全に吸収す
るために十分な体積を有することが好ましい。吸水用部
品の吸水能力は通常０．１〜５０ｍＬ、好ましくは通常
０．３〜２０ｍＬである。
形、楕円形、正方形、長方形等いずれの形態でも使用で
きる。幅および長さあるいは径は通常２〜１００ｍｍ、
好ましくは３〜８０ｍｍ、より好ましくは４〜５０ｍｍ
である。吸水用部品は多孔性メンブレンより大きく、多
孔性メンブレンの全面が接触する面積を有することが好
ましく、また、試料又は試料及び展開液を完全に吸収す
るために十分な体積を有することが好ましい。吸水用部
品の吸水能力は通常０．１〜５０ｍＬ、好ましくは通常
０．３〜２０ｍＬである。
【００５５】本発明のアッセイ装置は、サンドイッチ形
式や結合阻害形式あるいは競合形式で試料中の分析対象
物質を測定するが、分析対象物質あるいは分析対象物質
と生物学的親和性により結合する物質と任意の手段によ
り信号を取り出せる物質（標識）を結合した標識結合体
を用いる。標識としては、ラジオアイソトープ、酵素、
蛍光物質、有色又は着色粒子などがある。肉眼での色調
観察、色差計を用いた色濃度の測定、発光強度や蛍光強
度の測定などが可能であるが、特別な装置を使用せずに
肉眼によって結果を知るためには、発色基質との反応に
よって着色を得ることのできる酵素やそのまま着色が観
察できる有色又は着色粒子による標識が好ましい。
式や結合阻害形式あるいは競合形式で試料中の分析対象
物質を測定するが、分析対象物質あるいは分析対象物質
と生物学的親和性により結合する物質と任意の手段によ
り信号を取り出せる物質（標識）を結合した標識結合体
を用いる。標識としては、ラジオアイソトープ、酵素、
蛍光物質、有色又は着色粒子などがある。肉眼での色調
観察、色差計を用いた色濃度の測定、発光強度や蛍光強
度の測定などが可能であるが、特別な装置を使用せずに
肉眼によって結果を知るためには、発色基質との反応に
よって着色を得ることのできる酵素やそのまま着色が観
察できる有色又は着色粒子による標識が好ましい。
【００５６】酵素としては、アルカリフォスファター
ゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダー
ゼ、ウレアーゼ、グルコースオキシダーゼ等があり、例
えば石川栄治らの「酵素免疫測定法第３版（医学書院、
１９８７年）」に記載されるような公知の方法により標
識結合体を調製することができる。また、それぞれの酵
素に対応する発色基質も公知のものが使用でき、場合に
よっては第二の部材の構成部品に含浸させておくことも
できるし、あるいは後から添加することもできる。ま
た、発色反応の前に多孔性メンブレンやクロマトグラフ
ィー用基材中に残留する酵素結合体を除くために洗浄液
などを添加することもできる。
ゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダー
ゼ、ウレアーゼ、グルコースオキシダーゼ等があり、例
えば石川栄治らの「酵素免疫測定法第３版（医学書院、
１９８７年）」に記載されるような公知の方法により標
識結合体を調製することができる。また、それぞれの酵
素に対応する発色基質も公知のものが使用でき、場合に
よっては第二の部材の構成部品に含浸させておくことも
できるし、あるいは後から添加することもできる。ま
た、発色反応の前に多孔性メンブレンやクロマトグラフ
ィー用基材中に残留する酵素結合体を除くために洗浄液
などを添加することもできる。
【００５７】有色又は着色粒子としては金、銀、白金、
プラチナ、銅のような金属コロイド、酸化鉄のような金
属酸化物コロイド、硫黄、セレン、テルルなどの非金属
コロイド、顔料粒子、ラテックス粒子を染色したもの、
リポソームなどが挙げられるが、これらに限定されるも
のではない。有色又は着色粒子が毛管現象によりクロマ
トグラフィー用基材を移動したり濾過用メンブレンを通
過するためには、粒子径が毛管より小さい必要があり、
平均粒径は１μｍ以下、とくに０．５μｍ以下であるこ
とが好ましい。有色又は着色粒子に分析対象物質あるい
は分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質を
結合するには、物理吸着や化学結合などの公知の方法が
使用できる。例えば、金コロイドに抗体を結合した金コ
ロイド標識抗体は、金コロイド溶液に抗体を加えて物理
吸着させた後、牛血清アルブミン溶液を添加して金コロ
イドの抗体未結合表面をブロックすることにより調製さ
れる。
プラチナ、銅のような金属コロイド、酸化鉄のような金
属酸化物コロイド、硫黄、セレン、テルルなどの非金属
コロイド、顔料粒子、ラテックス粒子を染色したもの、
リポソームなどが挙げられるが、これらに限定されるも
のではない。有色又は着色粒子が毛管現象によりクロマ
トグラフィー用基材を移動したり濾過用メンブレンを通
過するためには、粒子径が毛管より小さい必要があり、
平均粒径は１μｍ以下、とくに０．５μｍ以下であるこ
とが好ましい。有色又は着色粒子に分析対象物質あるい
は分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質を
結合するには、物理吸着や化学結合などの公知の方法が
使用できる。例えば、金コロイドに抗体を結合した金コ
ロイド標識抗体は、金コロイド溶液に抗体を加えて物理
吸着させた後、牛血清アルブミン溶液を添加して金コロ
イドの抗体未結合表面をブロックすることにより調製さ
れる。
【００５８】標識結合体は、第二の部材の構成部品に含
まれる試薬としてクロマトグラフィー用基材や多孔性メ
ンブレンに塗布・乾燥等により配置させることもできる
し、標識結合体液として後から添加することもできる。
また、前記展開液に加えて使用することもでき、標識結
合体液を別に単独で用意するより、展開液に加えて用い
る方が好ましい。標識結合体を塗布・乾燥等により配置
する場合、分析対象物質あるいは分析対象物質と生物学
的親和性により結合する物質を固定化したクロマトグラ
フィー用基材や多孔性メンブレンに含浸又は塗布・乾燥
により配置させても良いし、別途作成した標識結合体含
有物をクロマトグラフィー用基材や多孔性メンブレンに
毛細管で繋がるようにして配置しても良い。また、液体
試料や展開液などにふれたときの再溶解性を好くするた
めに、あらかじめサッカロース、マルトース、ラクトー
ス等の糖類、マンニトール等の糖アルコールをクロマト
グラフィー用基材又は多孔性メンブレンにコーティング
しておくことも可能である。標識結合体を配置するため
には、マイクロシリンジ、調節ポンプ付きペン、シルク
スクリーン印刷、グラビア印刷、転写プリント、インキ
噴射印刷等いろいろな印刷技術が使用可能である。
まれる試薬としてクロマトグラフィー用基材や多孔性メ
ンブレンに塗布・乾燥等により配置させることもできる
し、標識結合体液として後から添加することもできる。
また、前記展開液に加えて使用することもでき、標識結
合体液を別に単独で用意するより、展開液に加えて用い
る方が好ましい。標識結合体を塗布・乾燥等により配置
する場合、分析対象物質あるいは分析対象物質と生物学
的親和性により結合する物質を固定化したクロマトグラ
フィー用基材や多孔性メンブレンに含浸又は塗布・乾燥
により配置させても良いし、別途作成した標識結合体含
有物をクロマトグラフィー用基材や多孔性メンブレンに
毛細管で繋がるようにして配置しても良い。また、液体
試料や展開液などにふれたときの再溶解性を好くするた
めに、あらかじめサッカロース、マルトース、ラクトー
ス等の糖類、マンニトール等の糖アルコールをクロマト
グラフィー用基材又は多孔性メンブレンにコーティング
しておくことも可能である。標識結合体を配置するため
には、マイクロシリンジ、調節ポンプ付きペン、シルク
スクリーン印刷、グラビア印刷、転写プリント、インキ
噴射印刷等いろいろな印刷技術が使用可能である。
【００５９】なお、分析対象物質が酵素や酵素活性物質
である場合には、標識結合体を必要としない場合があ
る。例えば、ヘモグロビンはペルオキシダーゼ活性を有
しており、酵素活性を阻害しない固定化された抗ヘモグ
ロビン抗体に捕獲されたヘモグロビンは、ジアミノベン
ジジンやテトラメチルベンジジン等と過酸化水素よりな
る発色液を使用して検出できる。本発明のアッセイ装置
はこのような場合に使用するものも含まれる。
である場合には、標識結合体を必要としない場合があ
る。例えば、ヘモグロビンはペルオキシダーゼ活性を有
しており、酵素活性を阻害しない固定化された抗ヘモグ
ロビン抗体に捕獲されたヘモグロビンは、ジアミノベン
ジジンやテトラメチルベンジジン等と過酸化水素よりな
る発色液を使用して検出できる。本発明のアッセイ装置
はこのような場合に使用するものも含まれる。
【００６０】本発明のアッセイ装置には、測定操作が完
全に行われたことを確認するための公知の機能を付与す
ることができる。例えば、標識抗体がマウス抗体の場合
にクロマトグラフィー用基材上の分析対象物質を検出す
る部位の下流に抗マウス抗体を固定化しておくと、操作
が完全に行われた場合には、その部分に信号を得られ
る。また、溶液が展開する末端の部位あるいは吸収され
て濡れた先端の部分に水と接触すると発色が出る無水金
属塩などを含浸させておくと、測定操作完了時に発色が
観察できる。
全に行われたことを確認するための公知の機能を付与す
ることができる。例えば、標識抗体がマウス抗体の場合
にクロマトグラフィー用基材上の分析対象物質を検出す
る部位の下流に抗マウス抗体を固定化しておくと、操作
が完全に行われた場合には、その部分に信号を得られ
る。また、溶液が展開する末端の部位あるいは吸収され
て濡れた先端の部分に水と接触すると発色が出る無水金
属塩などを含浸させておくと、測定操作完了時に発色が
観察できる。
【００６１】本発明のアッセイ装置は尿や静脈より採取
した血液、血清、血漿等を試料としても使用できるが、
特に有用なのは微量にしか採取できない乳頭分泌液や皮
膚を刺棘して得られる微量の血液、皮膚からの浸出液等
である。中でも近年乳癌は増加傾向にあり、触診などで
も判らない場合もあり、簡便なスクリーニング方法が求
められていた。乳癌では乳頭からの異常な分泌液が観察
される場合があり、乳頭分泌液中のＣＥＡ（癌胎児性抗
原）やＮＣＣ−ＳＴ−４３９抗原等が増加することが知
られている。また、良性疾患でも乳頭分泌液が観察され
る場合があるが、乳癌の場合には血性である場合が多
く、ヘモグロビンにより血性の有無が判定できる。本発
明のアッセイ装置およびアッセイ方法は乳頭分泌液中の
ＣＥＡ（癌胎児性抗原）、ＮＣＣ−ＳＴ−４３９抗原、
ヘモグロビンの検出に対して特に有用である。
した血液、血清、血漿等を試料としても使用できるが、
特に有用なのは微量にしか採取できない乳頭分泌液や皮
膚を刺棘して得られる微量の血液、皮膚からの浸出液等
である。中でも近年乳癌は増加傾向にあり、触診などで
も判らない場合もあり、簡便なスクリーニング方法が求
められていた。乳癌では乳頭からの異常な分泌液が観察
される場合があり、乳頭分泌液中のＣＥＡ（癌胎児性抗
原）やＮＣＣ−ＳＴ−４３９抗原等が増加することが知
られている。また、良性疾患でも乳頭分泌液が観察され
る場合があるが、乳癌の場合には血性である場合が多
く、ヘモグロビンにより血性の有無が判定できる。本発
明のアッセイ装置およびアッセイ方法は乳頭分泌液中の
ＣＥＡ（癌胎児性抗原）、ＮＣＣ−ＳＴ−４３９抗原、
ヘモグロビンの検出に対して特に有用である。
【００６２】本発明のアッセイ装置を用いる場合、第一
の部材の平面、溝、くぼみまたは穴等の構造を有するか
もしくは吸水性材料からなる試料採取部分を試料に直接
接触させるだけで一定量の試料を採取でき、試料を採取
した後第一の部材を第二の部材に組み込み、必要により
展開液等を添加するだけで、試料中の分析対象物質の検
出を容易に行なうことができ、本発明のアッセイ装置は
極めて簡易なアッセイ装置である。特に、今までは簡易
な装置で行なうことが非常に難しかった微量にしか採取
できない試料の分析を、本発明の簡易なアッセイ装置を
用いることにより容易に実施することができる。
の部材の平面、溝、くぼみまたは穴等の構造を有するか
もしくは吸水性材料からなる試料採取部分を試料に直接
接触させるだけで一定量の試料を採取でき、試料を採取
した後第一の部材を第二の部材に組み込み、必要により
展開液等を添加するだけで、試料中の分析対象物質の検
出を容易に行なうことができ、本発明のアッセイ装置は
極めて簡易なアッセイ装置である。特に、今までは簡易
な装置で行なうことが非常に難しかった微量にしか採取
できない試料の分析を、本発明の簡易なアッセイ装置を
用いることにより容易に実施することができる。
【００６３】以下に、具体的な簡易アッセイ装置の例を
図によって説明するが、本発明はこれに限定されるもの
ではない。
図によって説明するが、本発明はこれに限定されるもの
ではない。
【００６４】図１はクロマト法による簡易アッセイ装置
の一例の概略図である。簡易アッセイ装置は、試料採取
部分として半円形の溝を有するプラスチック成形体１か
らなる第一の部材と構成部品をプラスチック製ケース２
に納めた第二の部材からなる。プラスチック製ケース２
は展開液添加口３、第１の部材を組み込み試料を添加す
る試料添加口４および判定窓５を有する。図２は図１で
示した簡易アッセイ装置の第２の部材の側断面図であ
る。クロマト用ストリップ６は両面テープ７でケース２
に接着されている。クロマト用ストリップ６の最上流で
展開液添加口３の直下と、最下流の位置には吸水用部品
８、９を置き、ケースによって固定されている。クロマ
ト用ストリップ６は判定窓５の直下に抗体を固定化した
部位を有し、さらに展開液添加口３の下流で試料添加口
４の上流の位置に金コロイド粒子標識抗体添着部１０を
有する。試料を採取した第一の部材を試料添加口４に組
み込むと、試料はクロマト用ストリップ６に吸収され
る。展開液添加口３から添加された展開液により金コロ
イド粒子標識抗体と試料がクロマトされる。試料に分析
対象物質が含まれる場合、金コロイドの着色が判定窓５
より観察できる。
の一例の概略図である。簡易アッセイ装置は、試料採取
部分として半円形の溝を有するプラスチック成形体１か
らなる第一の部材と構成部品をプラスチック製ケース２
に納めた第二の部材からなる。プラスチック製ケース２
は展開液添加口３、第１の部材を組み込み試料を添加す
る試料添加口４および判定窓５を有する。図２は図１で
示した簡易アッセイ装置の第２の部材の側断面図であ
る。クロマト用ストリップ６は両面テープ７でケース２
に接着されている。クロマト用ストリップ６の最上流で
展開液添加口３の直下と、最下流の位置には吸水用部品
８、９を置き、ケースによって固定されている。クロマ
ト用ストリップ６は判定窓５の直下に抗体を固定化した
部位を有し、さらに展開液添加口３の下流で試料添加口
４の上流の位置に金コロイド粒子標識抗体添着部１０を
有する。試料を採取した第一の部材を試料添加口４に組
み込むと、試料はクロマト用ストリップ６に吸収され
る。展開液添加口３から添加された展開液により金コロ
イド粒子標識抗体と試料がクロマトされる。試料に分析
対象物質が含まれる場合、金コロイドの着色が判定窓５
より観察できる。
【００６５】図３はクロマト法による簡易アッセイ装置
の別の一例の概略図である。第一の部材はプラスチック
製の持ち手部分１１に吸水性材料１２からなる試料採取
部分が接着されている。第二の部材は展開液添加口１
４、第一の部材を組み込み試料を添加する試料添加口１
５および判定窓１６を有するプラスチック製ケース１３
に構成部品が納められている。図４は図３で示した簡易
アッセイ装置の第二の部材の側断面図である。抗体固定
化ストリップ１７と金コロイド粒子標識抗体ストリップ
１８は両面テープ１１０でケース１３に接着されてい
る。金コロイド粒子標識抗体ストリップの最上流で展開
液添加口１４の直下と、抗体固定化ストリップの最下流
の位置には吸水用部品１１１、１１２が置かれ、ケース
によって固定されている。抗体固定化ストリップ１７は
判定窓１６の直下に抗体を固定化した部位を有し、金コ
ロイド粒子標識抗体ストリップ１８は展開液添加口１４
の下流で試料添加口１５の上流の位置に金コロイド粒子
標識抗体添着部１９を有する。金コロイド粒子標識抗体
ストリップ１８と抗体固定化ストリップ１７は第一の部
材が組み込まれた時、その吸水性材料１２がそれらと一
部分重なって毛管で繋がるように分離して配置されてい
る。試料を採取した第一の部材を試料添加口１５に組み
込み、展開液添加口１４より展開液を添加すると、試料
中に分析対象物質が存在する場合は、金コロイドの着色
が判定窓１６より観察できる。
の別の一例の概略図である。第一の部材はプラスチック
製の持ち手部分１１に吸水性材料１２からなる試料採取
部分が接着されている。第二の部材は展開液添加口１
４、第一の部材を組み込み試料を添加する試料添加口１
５および判定窓１６を有するプラスチック製ケース１３
に構成部品が納められている。図４は図３で示した簡易
アッセイ装置の第二の部材の側断面図である。抗体固定
化ストリップ１７と金コロイド粒子標識抗体ストリップ
１８は両面テープ１１０でケース１３に接着されてい
る。金コロイド粒子標識抗体ストリップの最上流で展開
液添加口１４の直下と、抗体固定化ストリップの最下流
の位置には吸水用部品１１１、１１２が置かれ、ケース
によって固定されている。抗体固定化ストリップ１７は
判定窓１６の直下に抗体を固定化した部位を有し、金コ
ロイド粒子標識抗体ストリップ１８は展開液添加口１４
の下流で試料添加口１５の上流の位置に金コロイド粒子
標識抗体添着部１９を有する。金コロイド粒子標識抗体
ストリップ１８と抗体固定化ストリップ１７は第一の部
材が組み込まれた時、その吸水性材料１２がそれらと一
部分重なって毛管で繋がるように分離して配置されてい
る。試料を採取した第一の部材を試料添加口１５に組み
込み、展開液添加口１４より展開液を添加すると、試料
中に分析対象物質が存在する場合は、金コロイドの着色
が判定窓１６より観察できる。
【００６６】図５もクロマト法による簡易アッセイ装置
の一例の概略図である。第一の部材は中空のプラスチッ
ク材料２１に吸水性材料２２を固定し、展開液添加口２
１０を有する。第二の部材は第一の部材を組み込む試料
添加口２４と判定窓２５を有するプラスチック製ケース
２３に構成部品が納められている。図６は図５で示した
簡易アッセイ装置の側断面図である。抗体固定化ストリ
ップ２６は両面テープ２７でケース２３に固定されてい
る。抗体固定化ストリップの最上流と最下流には吸水用
部品２８、２９がケースによって固定されている。抗体
固定化ストリップ２６は判定窓２５の直下に抗体を固定
化した部分を有する。試料を採取した第一の部材は第二
の部材の試料添加口２４に組み込まれる。金コロイド粒
子標識抗体を含む展開液を第一の部材の展開液添加口２
１０より添加すると、展開液とともに試料はクロマトさ
れ、試料中に分析対象物質が含まれる場合は金コロイド
の着色が判定窓２５より観察できる。
の一例の概略図である。第一の部材は中空のプラスチッ
ク材料２１に吸水性材料２２を固定し、展開液添加口２
１０を有する。第二の部材は第一の部材を組み込む試料
添加口２４と判定窓２５を有するプラスチック製ケース
２３に構成部品が納められている。図６は図５で示した
簡易アッセイ装置の側断面図である。抗体固定化ストリ
ップ２６は両面テープ２７でケース２３に固定されてい
る。抗体固定化ストリップの最上流と最下流には吸水用
部品２８、２９がケースによって固定されている。抗体
固定化ストリップ２６は判定窓２５の直下に抗体を固定
化した部分を有する。試料を採取した第一の部材は第二
の部材の試料添加口２４に組み込まれる。金コロイド粒
子標識抗体を含む展開液を第一の部材の展開液添加口２
１０より添加すると、展開液とともに試料はクロマトさ
れ、試料中に分析対象物質が含まれる場合は金コロイド
の着色が判定窓２５より観察できる。
【００６７】図７はフロースルー法による簡易アッセイ
装置の一例の概略図である。第一の部材はシリンダー状
のプラスチック成形体３１に円形の濾紙３２がはめ込ま
れている。第二の部材は第一の部材を組み込む開口部３
３および空気抜き穴３６を有する。図８は図７で示した
簡易アッセイ装置の側断面図である。第二の部材はプラ
スチック成形体３４に抗体固定化メンブレン３５を抗体
が固定化された部分がプラスチック成形体の開口部３３
の中心にくるように挿入し、さらに厚手の濾紙を重ねて
作製した吸水用部品３７を挿入し、プラスチック成形体
３４の開口部３３と抗体固定化メンブレン３５および抗
体固定化メンブレン３５と吸水用部品３７が完全に密着
し、展開液を開口部から添加しても周りに漏れずに抗体
固定化メンブレン３５を通過して吸水用部品３７に吸収
されるように下から蓋３８がしてある。試料を採取した
第一の部材を開口部３３に組み込み、濾紙３２と抗体固
定化メンブレン３５を密着させる。金コロイド粒子標識
抗体を含む展開液標識抗体を第一の部材の展開液添加口
３９から添加する。展開液を完全に吸収させた後、さら
に洗浄液を加えて吸収させる。その後、第一の部材を取
り除くと、試料中に分析対象物質が含まれる場合、抗体
固定化メンブレン３５の抗体固定化部位に金コロイドの
着色が観察できる。
装置の一例の概略図である。第一の部材はシリンダー状
のプラスチック成形体３１に円形の濾紙３２がはめ込ま
れている。第二の部材は第一の部材を組み込む開口部３
３および空気抜き穴３６を有する。図８は図７で示した
簡易アッセイ装置の側断面図である。第二の部材はプラ
スチック成形体３４に抗体固定化メンブレン３５を抗体
が固定化された部分がプラスチック成形体の開口部３３
の中心にくるように挿入し、さらに厚手の濾紙を重ねて
作製した吸水用部品３７を挿入し、プラスチック成形体
３４の開口部３３と抗体固定化メンブレン３５および抗
体固定化メンブレン３５と吸水用部品３７が完全に密着
し、展開液を開口部から添加しても周りに漏れずに抗体
固定化メンブレン３５を通過して吸水用部品３７に吸収
されるように下から蓋３８がしてある。試料を採取した
第一の部材を開口部３３に組み込み、濾紙３２と抗体固
定化メンブレン３５を密着させる。金コロイド粒子標識
抗体を含む展開液標識抗体を第一の部材の展開液添加口
３９から添加する。展開液を完全に吸収させた後、さら
に洗浄液を加えて吸収させる。その後、第一の部材を取
り除くと、試料中に分析対象物質が含まれる場合、抗体
固定化メンブレン３５の抗体固定化部位に金コロイドの
着色が観察できる。
【００６８】図９はフロースルー法による簡易アッセイ
装置の別の一例の概略図である。抗体固定化メンブレン
４２を抗体を固定化した部分を中心に円形に切り抜いて
シリンダー状のプラスチック成形体４１に固定し第一の
部材とする。第二の部材は第一の部材を組み込む開口部
４３および空気抜き穴４４を有する。図１０は図９で示
した簡易アッセイ装置の第一および第二の部材の側断面
図である。第一の部材はプラスチック成形体４５に厚手
の濾紙を重ねて作製した吸水用部品４６を挿入し、プラ
スチック成形体４５の開口部に吸水用部品４６が完全に
密着するように下から蓋４７がしてある。試料を採取し
た第一の部材を第二の部材に組み込み、抗体固定化メン
ブレン４２を吸水用部品４６に密着させる。金コロイド
粒子標識抗体を含む展開液を第一の部材の開口部４８か
ら添加し、展開液が完全に吸収されるまで待つ。さらに
洗浄液を添加し吸収させる。試料に分析対象物が含まれ
る場合、抗体固定化部位に着色が観察できる。
装置の別の一例の概略図である。抗体固定化メンブレン
４２を抗体を固定化した部分を中心に円形に切り抜いて
シリンダー状のプラスチック成形体４１に固定し第一の
部材とする。第二の部材は第一の部材を組み込む開口部
４３および空気抜き穴４４を有する。図１０は図９で示
した簡易アッセイ装置の第一および第二の部材の側断面
図である。第一の部材はプラスチック成形体４５に厚手
の濾紙を重ねて作製した吸水用部品４６を挿入し、プラ
スチック成形体４５の開口部に吸水用部品４６が完全に
密着するように下から蓋４７がしてある。試料を採取し
た第一の部材を第二の部材に組み込み、抗体固定化メン
ブレン４２を吸水用部品４６に密着させる。金コロイド
粒子標識抗体を含む展開液を第一の部材の開口部４８か
ら添加し、展開液が完全に吸収されるまで待つ。さらに
洗浄液を添加し吸収させる。試料に分析対象物が含まれ
る場合、抗体固定化部位に着色が観察できる。
【００６９】
【実施例】以下に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細
に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるも
のではない。
に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるも
のではない。
【００７０】実施例１ クロマト法に用いる採取装置
（第一の部材）の作製と試料採取量の測定 （１）プラスチック成形体による採取装置の作製 図１の１に示すように、先端が厚さ２ｍｍ、幅３ｍｍで
半径１ｍｍの半円柱の溝を彫り込んだプラスチック成形
体を作製し、採取装置とした。 （２）濾紙による採取装置の作製１ 図３に示すように、東洋濾紙社製の濾紙Ｎｏ．５０を４
×６ｍｍの長方形にカットし（図中の１２）、４×６ｍ
ｍの底面有するプラスチック成形体１１の底面に両面テ
ープで貼り付け、採取装置とした。 （３）濾紙による採取装置の作製２ 図５および図６に示すように、ワットマン社製の濾紙３
１ＥＴ Ｃｈｒを４×６ｍｍの長方形にカットし（図中
の２２）、外形６×８ｍｍのプラスチック成形体（高さ
は１０ｍｍ）２１に接着し、採取装置とした。
（第一の部材）の作製と試料採取量の測定 （１）プラスチック成形体による採取装置の作製 図１の１に示すように、先端が厚さ２ｍｍ、幅３ｍｍで
半径１ｍｍの半円柱の溝を彫り込んだプラスチック成形
体を作製し、採取装置とした。 （２）濾紙による採取装置の作製１ 図３に示すように、東洋濾紙社製の濾紙Ｎｏ．５０を４
×６ｍｍの長方形にカットし（図中の１２）、４×６ｍ
ｍの底面有するプラスチック成形体１１の底面に両面テ
ープで貼り付け、採取装置とした。 （３）濾紙による採取装置の作製２ 図５および図６に示すように、ワットマン社製の濾紙３
１ＥＴ Ｃｈｒを４×６ｍｍの長方形にカットし（図中
の２２）、外形６×８ｍｍのプラスチック成形体（高さ
は１０ｍｍ）２１に接着し、採取装置とした。
【００７１】（４）試料採取量の測定 ７％ＢＳＡ水溶液をパラフィルム上に滴下して液滴と
し、試料採取装置（第一の部材）の試料採取部分を液滴
に接触させた。接触させる前の重量と接触後の重量を測
定し、その差から試料採取量を求めた。測定は１０回繰
り返し再現性を求めた。なお（２）および（３）の採取
装置では接触後の重量を量る前に濾紙に軽く押しつけ、
余分な液を吸い取った。結果を表１に示す。使用した採
取装置で採取量は異なるが、各採取装置とも良好な再現
性が得られた。
し、試料採取装置（第一の部材）の試料採取部分を液滴
に接触させた。接触させる前の重量と接触後の重量を測
定し、その差から試料採取量を求めた。測定は１０回繰
り返し再現性を求めた。なお（２）および（３）の採取
装置では接触後の重量を量る前に濾紙に軽く押しつけ、
余分な液を吸い取った。結果を表１に示す。使用した採
取装置で採取量は異なるが、各採取装置とも良好な再現
性が得られた。
【００７２】
【表１】 試料採取量（ｍｇ） 装置（１） 装置（２） 装置（３） 1 2.9 4.4 9.9 2 3.1 5.0 10.0 3 3.2 4.8 12.2 4 3.1 4.9 9.4 5 3.3 4.7 9.9 6 2.7 6.0 11.3 7 3.6 4.1 10.9 8 3.0 5.6 8.9 9 2.8 3.8 8.8 10 2.9 4.6 8.3 平均 3.1 4.8 10.0 ＳＤ 0.26 0.62 1.15 ＣＶ（％） 8.6 12.9 11.6
【００７３】実施例２ クロマト法によるＣＥＡ標準液
および乳頭分泌液中ＣＥＡの測定１ （１）金コロイドの調製 濃度０．０１重量％の塩化金酸水溶液２００ｍｌを沸騰
させ、これに濃度１重量％のクエン酸ナトリウム水溶液
３ｍｌを加え、溶液の色が赤色に変わるまで加熱沸騰を
行い、平均粒径２５ｎｍの金コロイド分散液を調製し
た。
および乳頭分泌液中ＣＥＡの測定１ （１）金コロイドの調製 濃度０．０１重量％の塩化金酸水溶液２００ｍｌを沸騰
させ、これに濃度１重量％のクエン酸ナトリウム水溶液
３ｍｌを加え、溶液の色が赤色に変わるまで加熱沸騰を
行い、平均粒径２５ｎｍの金コロイド分散液を調製し
た。
【００７４】（２）金コロイド粒子標識抗体の調製 上記の金コロイド分散液１０ｍｌに０．１Ｍ塩酸−炭酸
カリウム緩衝液ｐＨ９．０を０．５ｍｌ加えてｐＨを調
整し、これにウサギ抗ヒトＣＥＡ抗体を、金コロイド分
散液１ｍｌあたり３０μｇとなるように加えて室温で１
時間緩やかに振とうした。その後、その１０ｍｌに８重
量％ＢＳＡを含む２ｍＭホウ酸緩衝液ｐＨ９．０を１．
５ｍｌ加え、室温で３０分間緩やかに振とうした。さら
に、この分散液を４℃で１０，０００ｒｐｍ１時間遠心
して上清を除いた後、得られたペレットに濃度１重量％
のＢＳＡを含む２ｍＭトリス−塩酸緩衝液ｐＨ７．６を
１０ｍｌ加えて再懸濁した。同様にして遠心操作をさら
に２回繰り返した後、上記トリス−塩酸緩衝液にてＯＤ
（５２０ｎｍ）＝２０になるように再懸濁して金コロイ
ド粒子標識抗体を調製した。
カリウム緩衝液ｐＨ９．０を０．５ｍｌ加えてｐＨを調
整し、これにウサギ抗ヒトＣＥＡ抗体を、金コロイド分
散液１ｍｌあたり３０μｇとなるように加えて室温で１
時間緩やかに振とうした。その後、その１０ｍｌに８重
量％ＢＳＡを含む２ｍＭホウ酸緩衝液ｐＨ９．０を１．
５ｍｌ加え、室温で３０分間緩やかに振とうした。さら
に、この分散液を４℃で１０，０００ｒｐｍ１時間遠心
して上清を除いた後、得られたペレットに濃度１重量％
のＢＳＡを含む２ｍＭトリス−塩酸緩衝液ｐＨ７．６を
１０ｍｌ加えて再懸濁した。同様にして遠心操作をさら
に２回繰り返した後、上記トリス−塩酸緩衝液にてＯＤ
（５２０ｎｍ）＝２０になるように再懸濁して金コロイ
ド粒子標識抗体を調製した。
【００７５】（３）クロマト用ストリップの作製 ５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２に溶解したマウス
抗ＣＥＡモノクローナル抗体（濃度１．２ｍｇ／ｍｌ）
を５×５０ｍｍに切断したミリポア社製ニトロセルロー
スメンブレン（ハイフローメンブレン、マイラーバッ
ク）の図１で示す検出部位５に相当する位置に幅１ｍｍ
のライン状に添着し風乾した。その後、濃度５重量％カ
ゼインを含む５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２に室
温で２時間浸漬し、再び風乾した。さらに図２の１０の
位置に相当する部位に５重量％のサッカロースを添加し
た（２）で調製した金コロイド粒子標識抗体液を５μｌ
ずつ、乾燥させながら２回添着し、クロマト用ストリッ
プを作製した。
抗ＣＥＡモノクローナル抗体（濃度１．２ｍｇ／ｍｌ）
を５×５０ｍｍに切断したミリポア社製ニトロセルロー
スメンブレン（ハイフローメンブレン、マイラーバッ
ク）の図１で示す検出部位５に相当する位置に幅１ｍｍ
のライン状に添着し風乾した。その後、濃度５重量％カ
ゼインを含む５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２に室
温で２時間浸漬し、再び風乾した。さらに図２の１０の
位置に相当する部位に５重量％のサッカロースを添加し
た（２）で調製した金コロイド粒子標識抗体液を５μｌ
ずつ、乾燥させながら２回添着し、クロマト用ストリッ
プを作製した。
【００７６】（４）クロマト装置（第二の部材）の作製 第二の部材は図１に示すように、展開液添加口３、第一
の部材を組み込み試料を添加する試料添加口４および判
定窓５を有するポリエチレン製ケース２にその構成部品
を納めて作製した。図２示すように、上記（３）で作製
したクロマト用ストリップ６のマイラーバックの面を両
面テープ７でケース２に接着し、その両端（展開液添加
口３の直下と最下流の位置）に、ワットマン社製ガラス
繊維濾紙ＧＦ／Ｄ ５×８ｍｍを吸水用部品８，９とし
て置き、ポリエチレン製ケースにより吸水用部品をクロ
マト用ストリップの上に固定しクロマト装置とした。
の部材を組み込み試料を添加する試料添加口４および判
定窓５を有するポリエチレン製ケース２にその構成部品
を納めて作製した。図２示すように、上記（３）で作製
したクロマト用ストリップ６のマイラーバックの面を両
面テープ７でケース２に接着し、その両端（展開液添加
口３の直下と最下流の位置）に、ワットマン社製ガラス
繊維濾紙ＧＦ／Ｄ ５×８ｍｍを吸水用部品８，９とし
て置き、ポリエチレン製ケースにより吸水用部品をクロ
マト用ストリップの上に固定しクロマト装置とした。
【００７７】（５）測定 標準液として濃度０、２００、４００、１０００、３０
００ｎｇ／ｍｌのＣＥＡと濃度１重量％のＢＳＡを含む
５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２及び乳癌患者の乳
頭分泌液をパラフィルム上に滴下して液滴とし、実施例
１の（１）で示した採取装置（第一の部材）を用いて採
取した。採取装置をクロマト装置（第二の部材）の試料
添加口４に組み入れ、展開液として５０ｍＭリン酸生理
食塩水ｐＨ７．２を１００μｌ展開液添加口３から吸水
用部品８の上に添加し、１０分後に判定を行った。結果
は表２に示す。標準液のＣＥＡ濃度４００nｇ／ｍｌ以
上で判定窓の中に金コロイドによる赤色のバンドが観察
された。既知濃度の乳頭分泌液でもそれに対応する濃度
で陽性・陰性が判定された。また、ＣＥＡ標準液を用い
て５回測定し再現性を試験したが、表３に示すように良
好な結果であった。
００ｎｇ／ｍｌのＣＥＡと濃度１重量％のＢＳＡを含む
５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２及び乳癌患者の乳
頭分泌液をパラフィルム上に滴下して液滴とし、実施例
１の（１）で示した採取装置（第一の部材）を用いて採
取した。採取装置をクロマト装置（第二の部材）の試料
添加口４に組み入れ、展開液として５０ｍＭリン酸生理
食塩水ｐＨ７．２を１００μｌ展開液添加口３から吸水
用部品８の上に添加し、１０分後に判定を行った。結果
は表２に示す。標準液のＣＥＡ濃度４００nｇ／ｍｌ以
上で判定窓の中に金コロイドによる赤色のバンドが観察
された。既知濃度の乳頭分泌液でもそれに対応する濃度
で陽性・陰性が判定された。また、ＣＥＡ標準液を用い
て５回測定し再現性を試験したが、表３に示すように良
好な結果であった。
【００７８】実施例３ クロマト法によるＣＥＡ標準液
および乳頭分泌液中ＣＥＡの測定２ （１）抗体固定化ストリップの作製 ５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２に溶解したマウス
抗ＣＥＡモノクローナル抗体（濃度１．２ｍｇ／ｍｌ）
を５×２６ｍｍに切断したミリポア社製ニトロセルロー
スメンブレン（ハイフローメンブレン、マイラーバッ
ク）の図３で示す検出部位１６に相当する位置に幅１ｍ
ｍのライン状に添着し風乾した。その後、濃度５重量％
カゼインを含む５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２に
室温で２時間浸漬し、再び風乾して抗体固定化ストリッ
プを作製した。
および乳頭分泌液中ＣＥＡの測定２ （１）抗体固定化ストリップの作製 ５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２に溶解したマウス
抗ＣＥＡモノクローナル抗体（濃度１．２ｍｇ／ｍｌ）
を５×２６ｍｍに切断したミリポア社製ニトロセルロー
スメンブレン（ハイフローメンブレン、マイラーバッ
ク）の図３で示す検出部位１６に相当する位置に幅１ｍ
ｍのライン状に添着し風乾した。その後、濃度５重量％
カゼインを含む５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２に
室温で２時間浸漬し、再び風乾して抗体固定化ストリッ
プを作製した。
【００７９】（２）金コロイド粒子標識抗体ストリップ
の作製 東洋濾紙社製の濾紙Ｎｏ．５０を５×２０ｍｍの大きさ
に切断し、濃度５重量％カゼインを含む５０ｍＭリン酸
生理食塩水ｐＨ７．２に室温で２時間浸漬したのち乾燥
させた。さらに、図４の１９の位置に相当する部位に５
重量％のサッカロースを添加した実施例２の（２）で調
製した金コロイド粒子標識抗体液を５μｌずつ、乾燥さ
せながら２回添着し、金コロイド粒子標識抗体ストリッ
プを作製した
の作製 東洋濾紙社製の濾紙Ｎｏ．５０を５×２０ｍｍの大きさ
に切断し、濃度５重量％カゼインを含む５０ｍＭリン酸
生理食塩水ｐＨ７．２に室温で２時間浸漬したのち乾燥
させた。さらに、図４の１９の位置に相当する部位に５
重量％のサッカロースを添加した実施例２の（２）で調
製した金コロイド粒子標識抗体液を５μｌずつ、乾燥さ
せながら２回添着し、金コロイド粒子標識抗体ストリッ
プを作製した
【００８０】（３）クロマト装置（第二の部材）の作製 第二の部材は図３に示すように、展開液添加口１４、第
一の部材を組み込み試料を添加する試料添加口１５およ
び判定窓１６を有するポリエチレン製ケース１３にその
構成部品を納めて作製した。図４に示すように、上記
（１）で作製した抗体固定化ストリップ１７（マイラー
バックの面）および（２）で作製した金コロイド粒子標
識抗体ストリップ１８を両面テープ１１０でケース１３
に接着し、実施例２と同様に展開液添加口１４の直下と
最下流の位置に、ワットマン社製ガラス繊維濾紙ＧＦ／
Ｄ５×８ｍｍを吸水用部品１１１，１１２として置き、
ポリエチレン製ケースにより吸水用部品を抗体固定化ス
トリップおよび金コロイド粒子標識抗体ストリップの上
に固定しクロマト装置とした。
一の部材を組み込み試料を添加する試料添加口１５およ
び判定窓１６を有するポリエチレン製ケース１３にその
構成部品を納めて作製した。図４に示すように、上記
（１）で作製した抗体固定化ストリップ１７（マイラー
バックの面）および（２）で作製した金コロイド粒子標
識抗体ストリップ１８を両面テープ１１０でケース１３
に接着し、実施例２と同様に展開液添加口１４の直下と
最下流の位置に、ワットマン社製ガラス繊維濾紙ＧＦ／
Ｄ５×８ｍｍを吸水用部品１１１，１１２として置き、
ポリエチレン製ケースにより吸水用部品を抗体固定化ス
トリップおよび金コロイド粒子標識抗体ストリップの上
に固定しクロマト装置とした。
【００８１】（４）測定 標準液として濃度０、２００、４００、１０００、３０
００ｎｇ／ｍｌのＣＥＡと濃度１重量％のＢＳＡを含む
５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２及び乳癌患者の乳
頭分泌液をパラフィルム上に滴下して液滴とし、実施例
１の（２）で示した採取装置（第一の部材）の採取部分
１２を接触させて採取した。軽く濾紙に押しつけて余分
の水分を除いたのち、採取装置をクロマト装置（第二の
部材）の試料添加口１５に組み入れ、採取装置の試料採
取部分１２をクロマト装置のストリップ１７，１８とを
密着させた。その後、展開液として５０ｍＭリン酸生理
食塩水ｐＨ７．２を１００μｌ展開液添加口１４から吸
水用部品１１１の上に添加し、１０分後に判定を行っ
た。結果は表２に示す。標準液のＣＥＡ濃度４００ｎｇ
／ｍｌ以上で判定窓の中に金コロイドによる赤色のバン
ドが観察された。既知濃度の乳頭分泌液でもそれに対応
する濃度で陽性・陰性が判定された。
００ｎｇ／ｍｌのＣＥＡと濃度１重量％のＢＳＡを含む
５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２及び乳癌患者の乳
頭分泌液をパラフィルム上に滴下して液滴とし、実施例
１の（２）で示した採取装置（第一の部材）の採取部分
１２を接触させて採取した。軽く濾紙に押しつけて余分
の水分を除いたのち、採取装置をクロマト装置（第二の
部材）の試料添加口１５に組み入れ、採取装置の試料採
取部分１２をクロマト装置のストリップ１７，１８とを
密着させた。その後、展開液として５０ｍＭリン酸生理
食塩水ｐＨ７．２を１００μｌ展開液添加口１４から吸
水用部品１１１の上に添加し、１０分後に判定を行っ
た。結果は表２に示す。標準液のＣＥＡ濃度４００ｎｇ
／ｍｌ以上で判定窓の中に金コロイドによる赤色のバン
ドが観察された。既知濃度の乳頭分泌液でもそれに対応
する濃度で陽性・陰性が判定された。
【００８２】
【表２】 測定結果 濃度（ｎｇ/ｍｌ） 実施例２ 実施例３ ０ − − ＣＥＡ標準液 ２００ − − ４００ ± ＋ １０００ ＋ ＋ ３０００ ＋＋ ＋＋ 乳頭分泌液（Ａ） １６０ − − （Ｂ） ４６０ ± ＋ （Ｃ） ８４０ ＋ ＋ （Ｄ）１２００ ＋ ＋
【００８３】
【表３】 再現性 濃度（ｎｇ/ｍｌ）１回 ２回 ３回 ４回 ５回 ＣＥＡ標準液 ２００ − − − − − ４００ ± ± ± ＋ ± １０００ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋
【００８４】実施例４ クロマト法によるＮＣＣ−ＳＴ
−４３９抗原の測定 （１）金コロイド粒子標識抗体を含む展開液の調製 実施例２の（１）の金コロイド分散液１０ｍｌに０．１
Ｍ塩酸−炭酸カリウム緩衝液ｐＨ９．０を０．５ｍｌ加
えてｐＨを調整し、これにマウス抗ＮＣＣ−ＳＴ−４３
９モノクローナル抗体を、金コロイド分散液１ｍｌあた
り４０μｇとなるように加えて室温で１時間緩やかに振
とうした。その後、その１０ｍｌに８重量％ＢＳＡを含
む２ｍＭホウ酸緩衝液ｐＨ９．０を１．５ｍｌ加え、室
温で３０分間緩やかに振とうした。さらに、この分散液
を４℃で１０，０００ｒｐｍ１時間遠心して上清を除い
た後、得られたペレットに濃度１重量％のＢＳＡを含む
２ｍＭトリス−塩酸緩衝液ｐＨ７．６を１０ｍｌ加えて
再懸濁した。同様にして遠心操作をさらに２回繰り返し
た後、上記トリス−塩酸緩衝液にてＯＤ（５２０ｎｍ）
＝２０になるように再懸濁し、さらにＯＤ（５２０ｎ
ｍ）＝５になるように５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ
７．２で希釈し、金コロイド粒子標識抗体を含む展開液
を調製した。
−４３９抗原の測定 （１）金コロイド粒子標識抗体を含む展開液の調製 実施例２の（１）の金コロイド分散液１０ｍｌに０．１
Ｍ塩酸−炭酸カリウム緩衝液ｐＨ９．０を０．５ｍｌ加
えてｐＨを調整し、これにマウス抗ＮＣＣ−ＳＴ−４３
９モノクローナル抗体を、金コロイド分散液１ｍｌあた
り４０μｇとなるように加えて室温で１時間緩やかに振
とうした。その後、その１０ｍｌに８重量％ＢＳＡを含
む２ｍＭホウ酸緩衝液ｐＨ９．０を１．５ｍｌ加え、室
温で３０分間緩やかに振とうした。さらに、この分散液
を４℃で１０，０００ｒｐｍ１時間遠心して上清を除い
た後、得られたペレットに濃度１重量％のＢＳＡを含む
２ｍＭトリス−塩酸緩衝液ｐＨ７．６を１０ｍｌ加えて
再懸濁した。同様にして遠心操作をさらに２回繰り返し
た後、上記トリス−塩酸緩衝液にてＯＤ（５２０ｎｍ）
＝２０になるように再懸濁し、さらにＯＤ（５２０ｎ
ｍ）＝５になるように５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ
７．２で希釈し、金コロイド粒子標識抗体を含む展開液
を調製した。
【００８５】（２）抗体固定化ストリップの作製 ５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２に溶解したマウス
抗ＮＣＣ−ＳＴ−４３９モノクローナル抗体（濃度５ｍ
ｇ／ｍｌ）を５×３０ｍｍに切断したミリポア社製ニト
ロセルロースメンブレン（ハイフローメンブレン、マイ
ラーバック）の図５で示す検出部位２５に相当する位置
に幅１ｍｍのライン状に添着し風乾した。その後、濃度
５重量％カゼインを含む５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ
７．２に室温で２時間浸漬し、再び風乾して抗体固定化
ストリップを作製した。
抗ＮＣＣ−ＳＴ−４３９モノクローナル抗体（濃度５ｍ
ｇ／ｍｌ）を５×３０ｍｍに切断したミリポア社製ニト
ロセルロースメンブレン（ハイフローメンブレン、マイ
ラーバック）の図５で示す検出部位２５に相当する位置
に幅１ｍｍのライン状に添着し風乾した。その後、濃度
５重量％カゼインを含む５０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ
７．２に室温で２時間浸漬し、再び風乾して抗体固定化
ストリップを作製した。
【００８６】（３）クロマト装置（第二の部材）の作製 図５で示すように、第一の部材を組み込み試料を添加す
る試料添加口２４および判定窓２５の２か所に開口部を
持つプラスチックケース２３にその構成部品を納めて作
製した。図６示すように、上記（２）で作製した抗体固
定化ストリップ２６のマイラーバックの面を両面テープ
２７でケース２３に接着し、その両端に、ワットマン社
製ガラス繊維濾紙ＧＦ／Ｄ ５×８ｍｍを吸水用部品２
８，２９として置き、ポリエチレン製ケースにより吸水
用部品を抗体固定化メンブレンの上に固定しクロマト装
置とした。
る試料添加口２４および判定窓２５の２か所に開口部を
持つプラスチックケース２３にその構成部品を納めて作
製した。図６示すように、上記（２）で作製した抗体固
定化ストリップ２６のマイラーバックの面を両面テープ
２７でケース２３に接着し、その両端に、ワットマン社
製ガラス繊維濾紙ＧＦ／Ｄ ５×８ｍｍを吸水用部品２
８，２９として置き、ポリエチレン製ケースにより吸水
用部品を抗体固定化メンブレンの上に固定しクロマト装
置とした。
【００８７】（４）測定 ＮＣＣ−ＳＴ−４３９抗原濃度が既知の乳癌患者の乳頭
分泌液をパラフィルム上に滴下して液滴とし、実施例１
の（３）で示した採取装置（第一の部材）の採取部分２
２を接触させて採取した。軽く濾紙に押しつけて余分の
水分を除いたのち、採取装置をクロマト装置（第二の部
材）の試料添加口２４に組み入れ、採取装置の試料採取
部分とクロマト装置の吸水用部品２８を密着させた。５
０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２からなる展開液を採
取装置（第一の部材）の展開液添加口２１０から採取装
置の試料採取部分に５０μｌ添加し、完全に吸収された
後に、更に金コロイド粒子標識抗体を含む展開液を１０
０μｌ添加し、１０分後に判定を行った。結果は表４に
示す。既知濃度の乳頭分泌液で濃度に対応して陽性・陰
性が判定された。
分泌液をパラフィルム上に滴下して液滴とし、実施例１
の（３）で示した採取装置（第一の部材）の採取部分２
２を接触させて採取した。軽く濾紙に押しつけて余分の
水分を除いたのち、採取装置をクロマト装置（第二の部
材）の試料添加口２４に組み入れ、採取装置の試料採取
部分とクロマト装置の吸水用部品２８を密着させた。５
０ｍＭリン酸生理食塩水ｐＨ７．２からなる展開液を採
取装置（第一の部材）の展開液添加口２１０から採取装
置の試料採取部分に５０μｌ添加し、完全に吸収された
後に、更に金コロイド粒子標識抗体を含む展開液を１０
０μｌ添加し、１０分後に判定を行った。結果は表４に
示す。既知濃度の乳頭分泌液で濃度に対応して陽性・陰
性が判定された。
【００８８】
【表４】
【００８９】実施例５ フロースルー法による乳頭分泌
液中のヘモグロビンの測定 （１）採取装置（第一の部材）の作製 図７および図８に示すように、シリンダー状のプラスチ
ック成形体３１に直径５．０ｍｍの円形に切り抜いたワ
ットマン社製濾紙１７Ｃｈｒ（図中の３２）をはめ込
み、採取装置とした。
液中のヘモグロビンの測定 （１）採取装置（第一の部材）の作製 図７および図８に示すように、シリンダー状のプラスチ
ック成形体３１に直径５．０ｍｍの円形に切り抜いたワ
ットマン社製濾紙１７Ｃｈｒ（図中の３２）をはめ込
み、採取装置とした。
【００９０】（２）抗体固定化メンブレンの作製 濃度８ｍｇ／ｍｌのマウス抗ヒトヘモグロビン抗体を含
む５０ｍＭのリン酸生理食塩水ｐＨ７．２をポール社製
イムノダイン イムノアフィニティーメンブレン（３μ
ｍ）に０．５μｌドットし風乾した。その後メンブレン
を濃度２．５重量％のカゼインナトリウムと濃度８重量
％のサッカロースを含む５０ｍＭのリン酸生理食塩水ｐ
Ｈ７．２に室温２時間漬けた後、濾紙上にメンブレンを
取り出し水分を吸い取り、乾燥して抗体固定化メンブレ
ンを作製した。
む５０ｍＭのリン酸生理食塩水ｐＨ７．２をポール社製
イムノダイン イムノアフィニティーメンブレン（３μ
ｍ）に０．５μｌドットし風乾した。その後メンブレン
を濃度２．５重量％のカゼインナトリウムと濃度８重量
％のサッカロースを含む５０ｍＭのリン酸生理食塩水ｐ
Ｈ７．２に室温２時間漬けた後、濾紙上にメンブレンを
取り出し水分を吸い取り、乾燥して抗体固定化メンブレ
ンを作製した。
【００９１】（３）フロースルー装置（第二の部材）の
作製 図７および図８に示すように、採取装置を取り付ける開
口部３３と空気穴３６のあるプラスチック成形体３４に
（２）で作製したメンブレン３５をメンブレンの抗体が
ドットされた部分がプラスチック成形体の開口部３３の
中心にくるように挿入し、さらに厚手の濾紙を重ねて作
製した吸水用部品３７を重ねて挿入し、プラスチック成
形体の開口部とメンブレンおよびメンブレンと吸水用部
品が完全に密着し、展開液を開口部から添加しても周り
に漏れずにメンブレンを通過して吸水用部品に吸収され
るように下から蓋３８をしてフロースルー装置とした。
作製 図７および図８に示すように、採取装置を取り付ける開
口部３３と空気穴３６のあるプラスチック成形体３４に
（２）で作製したメンブレン３５をメンブレンの抗体が
ドットされた部分がプラスチック成形体の開口部３３の
中心にくるように挿入し、さらに厚手の濾紙を重ねて作
製した吸水用部品３７を重ねて挿入し、プラスチック成
形体の開口部とメンブレンおよびメンブレンと吸水用部
品が完全に密着し、展開液を開口部から添加しても周り
に漏れずにメンブレンを通過して吸水用部品に吸収され
るように下から蓋３８をしてフロースルー装置とした。
【００９２】（４）展開液の調製 ０．１Ｍの尿素および濃度０．１重量％のツイーン２０
を含む５０ｍＭのリン酸生理食塩水ｐＨ７．２を展開液
とした。
を含む５０ｍＭのリン酸生理食塩水ｐＨ７．２を展開液
とした。
【００９３】（５）発色液の調製 濃度３ｍｇ／ｍｌになるようにテトラメチルベンジジン
をジメチルホルムアミドに溶解し、その４ｍｌを９６ｍ
ｌの０．０１２６重量％の過酸化水素を含む０．１Ｍ酢
酸ナトリウムクエン酸緩衝液ｐＨ６．０に加えて良く混
合し、発色液とした。
をジメチルホルムアミドに溶解し、その４ｍｌを９６ｍ
ｌの０．０１２６重量％の過酸化水素を含む０．１Ｍ酢
酸ナトリウムクエン酸緩衝液ｐＨ６．０に加えて良く混
合し、発色液とした。
【００９４】（６）測定 ヘモグロビンの有無が既知である乳癌患者の乳頭分泌液
をパラフィルム上に滴下して液滴とし、採取装置の採取
部分３２を接触させて採取した。軽く濾紙に押しつけて
余分の水分を除いたのち、フロースルー装置の開口部３
３に挿入して試料採取部分３２を抗体固定化メンブレン
３５に押しつけた。その後、展開液を２００μｌ採取装
置の開口部３９から添加し完全に展開液が吸収されるま
で待った。これを３回繰り返した後、採取装置を取り外
し、メンブレンの抗体をドットした部分に発色液を２０
０μｌ滴下して、３分後にメンブレンの着色を観察し
た。結果を表５に示す。ヘモグロビン陽性検体Ｉ、Ｊで
は着色が観察されたが、陰性検体Ｋでは着色が観察され
なかった。
をパラフィルム上に滴下して液滴とし、採取装置の採取
部分３２を接触させて採取した。軽く濾紙に押しつけて
余分の水分を除いたのち、フロースルー装置の開口部３
３に挿入して試料採取部分３２を抗体固定化メンブレン
３５に押しつけた。その後、展開液を２００μｌ採取装
置の開口部３９から添加し完全に展開液が吸収されるま
で待った。これを３回繰り返した後、採取装置を取り外
し、メンブレンの抗体をドットした部分に発色液を２０
０μｌ滴下して、３分後にメンブレンの着色を観察し
た。結果を表５に示す。ヘモグロビン陽性検体Ｉ、Ｊで
は着色が観察されたが、陰性検体Ｋでは着色が観察され
なかった。
【００９５】
【表５】
【００９６】実施例６ フロースルー法によるＣＥＡ標
準液の測定 （１）抗体固定化メンブレンの作製 濃度２．４ｍｇ／ｍｌのマウス抗ＣＥＡ抗体を含む５０
ｍＭのリン酸生理食塩水ｐＨ７．２をポール社製イムノ
ダイン イムノアフィニティーメンブレン（３μｍ）に
０．５μｌドットし風乾した。その後メンブレンを濃度
２．５重量％のカゼインナトリウムと濃度８重量％のサ
ッカロースを含む５０ｍＭのリン酸生理食塩水ｐＨ７．
２に室温２時間漬けた後、濾紙上にメンブレンを取り出
し水分を吸い取り、乾燥して抗体固定化メンブレンを作
製した。
準液の測定 （１）抗体固定化メンブレンの作製 濃度２．４ｍｇ／ｍｌのマウス抗ＣＥＡ抗体を含む５０
ｍＭのリン酸生理食塩水ｐＨ７．２をポール社製イムノ
ダイン イムノアフィニティーメンブレン（３μｍ）に
０．５μｌドットし風乾した。その後メンブレンを濃度
２．５重量％のカゼインナトリウムと濃度８重量％のサ
ッカロースを含む５０ｍＭのリン酸生理食塩水ｐＨ７．
２に室温２時間漬けた後、濾紙上にメンブレンを取り出
し水分を吸い取り、乾燥して抗体固定化メンブレンを作
製した。
【００９７】（２）採取装置（第一の部材）の作製 図９および図１０に示すように、シリンダー状のプラス
チック成形体４１に（１）で作製した抗体固定化メンブ
レンの抗体をドットした部分を中心に直径１ｃｍの円形
に切り抜いたもの４２を接着剤で貼り付け、採取装置と
した。
チック成形体４１に（１）で作製した抗体固定化メンブ
レンの抗体をドットした部分を中心に直径１ｃｍの円形
に切り抜いたもの４２を接着剤で貼り付け、採取装置と
した。
【００９８】（３）第二の部材の作製 図９および図１０に示すように、採取装置を取り付ける
開口部４３と空気穴４４のあるプラスチック成形体４５
に厚手の濾紙を重ねて作製した吸水用部品４６を挿入
し、プラスチック成形体の開口部に吸水用部品が完全に
密着するように下から蓋４７をしてフロースルー装置と
した。
開口部４３と空気穴４４のあるプラスチック成形体４５
に厚手の濾紙を重ねて作製した吸水用部品４６を挿入
し、プラスチック成形体の開口部に吸水用部品が完全に
密着するように下から蓋４７をしてフロースルー装置と
した。
【００９９】（３）西洋ワサビペルオキシダーゼ標識抗
ＣＥＡ抗体液 東洋紡社製西洋ワサビペルオキシダーゼ２ｍｇを０．５
ｍｌの蒸留水に溶解し、５０ｍＭ過ヨウ素酸ナトリウム
０．１ｍｌを加えて攪拌しながら室温で３０分間反応し
た。さらに２００ｍＭエチレングリコール０．１ｍｌを
加えて３０分間反応した。反応液を１ｍＭ酢酸緩衝液
（ｐＨ４．５）に対して４℃で一夜透析した。４ｍｇの
ウサギ抗ＣＥＡ抗体を２００ｍＭ炭酸緩衝液（ｐＨ９．
５）１ｍｌに溶解し、透析後の西洋ワサビペルオキシダ
ーゼ溶液を加えて、室温で攪拌しながら３時間反応させ
た。２００ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ９．０）０．
１ｍｌ加え、室温で撹拌しながら１時間反応した。５０
ｍＭリン酸生理食塩水（ｐＨ７．４）を溶出液として、
ウルトロゲルＡｃＡ４４を充填したゲル濾過カラム
（２．６ｃｍ×９０ｃｍ）で分画し、西洋ワサビペルオ
キシダーゼ標識抗ＣＥＡ抗体を得た。これを濃度１重量
％の牛血清アルブミンを含む５０ｍＭのリン酸生理食塩
水ｐＨ７．２に抗体濃度として０．５μｇ／ｍｌになる
ように希釈して、西洋ワサビペルオキシダーゼ標識抗Ｃ
ＥＡ抗体液とした。
ＣＥＡ抗体液 東洋紡社製西洋ワサビペルオキシダーゼ２ｍｇを０．５
ｍｌの蒸留水に溶解し、５０ｍＭ過ヨウ素酸ナトリウム
０．１ｍｌを加えて攪拌しながら室温で３０分間反応し
た。さらに２００ｍＭエチレングリコール０．１ｍｌを
加えて３０分間反応した。反応液を１ｍＭ酢酸緩衝液
（ｐＨ４．５）に対して４℃で一夜透析した。４ｍｇの
ウサギ抗ＣＥＡ抗体を２００ｍＭ炭酸緩衝液（ｐＨ９．
５）１ｍｌに溶解し、透析後の西洋ワサビペルオキシダ
ーゼ溶液を加えて、室温で攪拌しながら３時間反応させ
た。２００ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ９．０）０．
１ｍｌ加え、室温で撹拌しながら１時間反応した。５０
ｍＭリン酸生理食塩水（ｐＨ７．４）を溶出液として、
ウルトロゲルＡｃＡ４４を充填したゲル濾過カラム
（２．６ｃｍ×９０ｃｍ）で分画し、西洋ワサビペルオ
キシダーゼ標識抗ＣＥＡ抗体を得た。これを濃度１重量
％の牛血清アルブミンを含む５０ｍＭのリン酸生理食塩
水ｐＨ７．２に抗体濃度として０．５μｇ／ｍｌになる
ように希釈して、西洋ワサビペルオキシダーゼ標識抗Ｃ
ＥＡ抗体液とした。
【０１００】（４）洗浄液および発色液の調製 実施例５と同一の展開液および発色液を洗浄液および発
色液として使用した。
色液として使用した。
【０１０１】（５）測定 ＣＥＡ標準液をパラフィルム上に滴下して液滴とし、採
取装置の採取部分を接触させて採取した。軽く濾紙に押
しつけて余分の水分を除いたのち、第二の部材の開口部
に挿入して第二の部材の吸水用部品に押しつけた。その
後西洋ワサビペルオキシダーゼ標識抗ＣＥＡ抗体液を２
００μｌ採取装置の開口部４８から添加し、完全に標識
抗体液が吸収されるまで待った。その後、洗浄液を２０
０μｌ添加して再び完全に吸収されるまで待った。この
洗浄操作を３回繰り返した後、発色液を２００μｌ滴下
して、３分後にメンブレンの着色を観察した。結果を表
６に示す。ＣＥＡ濃度２００ｎｇ／ｍｌ以上の濃度で着
色が観察された。
取装置の採取部分を接触させて採取した。軽く濾紙に押
しつけて余分の水分を除いたのち、第二の部材の開口部
に挿入して第二の部材の吸水用部品に押しつけた。その
後西洋ワサビペルオキシダーゼ標識抗ＣＥＡ抗体液を２
００μｌ採取装置の開口部４８から添加し、完全に標識
抗体液が吸収されるまで待った。その後、洗浄液を２０
０μｌ添加して再び完全に吸収されるまで待った。この
洗浄操作を３回繰り返した後、発色液を２００μｌ滴下
して、３分後にメンブレンの着色を観察した。結果を表
６に示す。ＣＥＡ濃度２００ｎｇ／ｍｌ以上の濃度で着
色が観察された。
【０１０２】
【表６】
【０１０３】
【発明の効果】本発明によれば、使用者は熟練や手間を
ほとんど必要とせずに、微量にしか採取できない生体試
料中の分析対象物質を簡便に採取して再現性よく測定す
ることができる。
ほとんど必要とせずに、微量にしか採取できない生体試
料中の分析対象物質を簡便に採取して再現性よく測定す
ることができる。
【図１】実施例２で示したクロマト法による簡易アッセ
イ装置の概略図
イ装置の概略図
【図２】図１で示した簡易アッセイ装置の第二の部材の
側断面図
側断面図
【図３】実施例３で示したクロマト法による簡易アッセ
イ装置の概略図
イ装置の概略図
【図４】図３で示した簡易アッセイ装置の第二の部材の
側断面図
側断面図
【図５】実施例４で示したクロマト法による簡易アッセ
イ装置の概略図
イ装置の概略図
【図６】図５で示した簡易アッセイ装置の第二の部材の
側断面図
側断面図
【図７】実施例５で示したフロースルー法による簡易ア
ッセイ装置の概略図
ッセイ装置の概略図
【図８】図７で示した簡易アッセイ装置の第一および第
二の部材の側断面図
二の部材の側断面図
【図９】実施例６で示したフロースルー法による簡易ア
ッセイ装置の概略図
ッセイ装置の概略図
【図１０】図９で示した簡易アッセイ装置の第一および
第二の部材の側断面図
第二の部材の側断面図
Claims (22)
- 【請求項１】生物学的親和性を利用したクロマト法ある
いはフロースルー法に基づくアッセイ装置であって、液
体状の試料に接触させることにより一定量の液体試料を
採取できる第一の部材と、試料を採取した第一の部材を
組み込むことにより試料を受けとることのできる第二の
部材から構成され、試料を採取する時には第一の部材と
第二の部材は毛細管で連結していないアッセイ装置。 - 【請求項２】第一の部材によって採取される液体状試料
量が５０μｌ以下である請求項１に記載のアッセイ装
置。 - 【請求項３】第一の部材が、液体状試料を採取し保持す
るための平面、溝、くぼみまたは穴構造を有する請求項
１又は２に記載のアッセイ装置。 - 【請求項４】第一の部材が、吸収により液体状試料を採
取するための吸水性材料を構成部品として有する請求項
１又は２に記載のアッセイ装置。 - 【請求項５】吸水性材料が、繊維マトリクス、多孔性
膜、濾紙、ガラス繊維濾紙、焼結体のいずれかである請
求項４に記載のアッセイ装置。 - 【請求項６】吸水性材料が濾紙である請求項４に記載の
アッセイ装置。 - 【請求項７】クロマト法に基づくアッセイ装置であっ
て、第二の部材は少なくとも分析対象物質あるいは分析
対象物質と生物学的親和性により結合する物質が固定化
された部位を有するクロマトグラフィー用基材を有し、
第一の部材を第二の部材に組み込むことにより、該クロ
マトグラフィー用基材の分析対象物質あるいは分析対象
物質と生物学的親和性により結合する物質が固定化され
た部位あるいはその上流から試料を該クロマトグラフィ
ー用基材に浸透させることが可能になり、かつ、浸透し
た試料を該クロマトグラフィー用基材中を毛管現象によ
って下流に移動させることにより分析対象物質を測定す
る請求項１から６のいずれかに記載のアッセイ装置。 - 【請求項８】クロマト法に基づくアッセイ装置であっ
て、第二の部材のクロマトグラフィー用基材上で、第一
の部材を組み込む部位より上流の部位に、クロマトグラ
フィー用基材中を試料を移動させるための展開液を添加
するための部位が設けられている請求項７に記載のアッ
セイ装置。 - 【請求項９】クロマト法に基づくアッセイ装置であっ
て、第二の部材のクロマトグラフィー用基材が、分析対
象物質あるいは分析対象物質と生物学的親和性により結
合する物質が固定化された部位を有する部分（Ａ）と展
開液を添加する部分（Ｂ）の少なくとも２つに分かれて
おり、第一の部材が組み込まれるまでは部分（Ａ）と部
分（Ｂ）は毛細管でつながっておらず液体の移動はでき
ないが、第一の部材を組み込むことにより液体の移動が
可能になる請求項７又は８に記載のアッセイ装置。 - 【請求項１０】クロマト法に基づくアッセイ装置であっ
て、第二の部材のクロマトグラフィー用基材中を試料を
移動させるための展開液を、第二の部材に組み込んだ第
一の部材を介して添加する請求項７に記載のアッセイ装
置。 - 【請求項１１】フロースルー法に基づくアッセイ装置で
あって、第二の部材は少なくとも分析対象物質あるいは
分析対象物質と生物学的親和性により結合する物質が固
定された多孔性メンブレンとその下面に接している吸水
用部品を有し、第一の部材を第二の部材に組み込むこと
により試料を該メンブレン上面から該メンブレン中に浸
透させることができ、毛管現象によって該メンブレンを
通過させ吸水用部品に吸収させることにより分析対象物
質を測定する請求項１から６のいずれかに記載のアッセ
イ装置。 - 【請求項１２】フロースルー法に基づくアッセイ装置で
あって、第二の部材は少なくとも吸水用部品を有し、第
一の部材が分析対象物質あるいは分析対象物質と生物学
的親和性により結合する物質が固定された多孔性メンブ
レンを構成部品として有し、第一の部材を第二の部材に
組み込むことにより第一の部材の多孔性メンブレンは第
二の部材の吸水用部品と毛細管で繋がる請求項１から６
のいずれかに記載のアッセイ装置。 - 【請求項１３】分析対象物質あるいは分析対象物質と生
物学的親和性により結合する物質を固定するクロマトグ
ラフィー用基材あるいは多孔性メンブレンが、ニトロセ
ルロース膜、ナイロン膜、濾紙、ガラス繊維濾紙のいず
れかからなる請求項７から１２のいずれかに記載のアッ
セイ装置。 - 【請求項１４】生物学的親和性が免疫反応に基づく親和
性である請求項１から１３のいずれかに記載のアッセイ
装置。 - 【請求項１５】クロマトグラフィー用基材あるいは多孔
性メンブレンに固定化された物質が抗体または抗体断片
であり、信号を得るための標識を結合した物質として標
識抗体を用い、クロマトグラフィー用基材あるいは多孔
性メンブレン上にサンドイッチ複合体を作ることにより
信号を得る請求項７から１４のいずれかに記載のアッセ
イ装置。 - 【請求項１６】信号を得るための標識が金属コロイド、
非金属コロイドまたは着色ラテックス粒子であり、試料
中の分析対象物質の検出あるいはその濃度測定を視覚的
にあるいは色差計で行なうことができる請求項１５に記
載のアッセイ装置。 - 【請求項１７】請求項１から１６のいずれかに記載のア
ッセイ装置を使用して、液体状の試料中の分析対象物質
を測定する方法。 - 【請求項１８】試料をクロマトグラフィー用基材中で展
開させるあるいは多孔性メンブレンを通過して吸水用部
品に吸収させるために、試料以外に別に用意した展開液
を用いる請求項１７に記載の方法。 - 【請求項１９】展開液が標識物質を含有する溶液である
請求項１８に記載の方法。 - 【請求項２０】試料が乳頭分泌液、皮膚からの浸出液、
又は血液である請求項１７から１９のいずれかに記載の
方法。 - 【請求項２１】分析対象物質が乳頭分泌液中のＣＥＡ、
ＮＣＣ−ＳＴ−４３９、ヘモグロビンのいずれかである
請求項１７から２０のいずれかに記載の方法。 - 【請求項２２】乳癌検診用の請求項１から１６のいずれ
かに記載のアッセイ装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35464696A JP3640278B2 (ja) | 1996-12-20 | 1996-12-20 | アッセイ装置およびそれを用いるアッセイ方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35464696A JP3640278B2 (ja) | 1996-12-20 | 1996-12-20 | アッセイ装置およびそれを用いるアッセイ方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10185920A true JPH10185920A (ja) | 1998-07-14 |
| JP3640278B2 JP3640278B2 (ja) | 2005-04-20 |
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ID=18438959
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP35464696A Expired - Fee Related JP3640278B2 (ja) | 1996-12-20 | 1996-12-20 | アッセイ装置およびそれを用いるアッセイ方法 |
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|---|---|
| JP (1) | JP3640278B2 (ja) |
Cited By (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002527726A (ja) * | 1998-10-09 | 2002-08-27 | フレクッスサイト ダイアノスティックス，インク． | 生体サンプルの採取装置及び採取方法 |
| WO2002088737A1 (en) * | 2001-04-23 | 2002-11-07 | Wakamoto Pharmaceutical Co., Ltd. | Immunochromatographic test piece and diagnosis kit |
| JP2003506717A (ja) * | 1999-08-06 | 2003-02-18 | フアルマシア・ダイアグノステイクス・アー・ベー | 分析方法及び装置 |
| JP2005512090A (ja) * | 2001-12-12 | 2005-04-28 | プロテオム システムズ インテレクチュアル プロパティ プロプライエタリー リミテッド | 診断検査方法 |
| JP2006502404A (ja) * | 2002-10-11 | 2006-01-19 | ゼットビーエックス コーポレーション | 診断装置 |
| JP2006215044A (ja) * | 2006-03-31 | 2006-08-17 | Denka Seiken Co Ltd | 簡易メンブレンアッセイ法及びキット |
| JP2007524813A (ja) * | 2003-06-06 | 2007-08-30 | アドバンテイジ ダイアグノスティックス コーポレイション | サンプル中の分析物についての診断試験 |
| JP2008292326A (ja) * | 2007-05-24 | 2008-12-04 | Bl:Kk | ヒアルロン酸存在下における免疫測定法及びそれに用いられる物 |
| JP2009229343A (ja) * | 2008-03-25 | 2009-10-08 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | イムノクロマトグラフィー測定装置 |
| JP2011511948A (ja) * | 2008-02-11 | 2011-04-14 | バイオテックファーマ・コーポレイション | 被分析物試験、確認、および提供者身元検証のための総合デバイス |
| JP2012501447A (ja) * | 2008-08-26 | 2012-01-19 | リオッタ，ランス，エー． | ヒドロゲルナノ粒子に基づく免疫測定 |
| US8404479B2 (en) | 2003-12-24 | 2013-03-26 | Denka Seiken Co., Ltd | Simple membrane assay method and kit |
| WO2014051141A1 (ja) * | 2012-09-28 | 2014-04-03 | 積水メディカル株式会社 | 無希釈系イムノクロマトグラフ法試薬において希釈試料を測定するための添加物 |
| WO2014119725A1 (ja) * | 2013-01-31 | 2014-08-07 | デンカ生研株式会社 | 生体粘膜由来検体測定イムノアッセイにおいて偽陰性を抑制する方法 |
| KR20160037842A (ko) * | 2013-05-14 | 2016-04-06 | 파이브로티엑스 오유 | 측방 유동 분석 디바이스 |
| JP2020003319A (ja) * | 2018-06-27 | 2020-01-09 | 株式会社ニチレイバイオサイエンス | 検査キット |
-
1996
- 1996-12-20 JP JP35464696A patent/JP3640278B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002527726A (ja) * | 1998-10-09 | 2002-08-27 | フレクッスサイト ダイアノスティックス，インク． | 生体サンプルの採取装置及び採取方法 |
| JP2003506717A (ja) * | 1999-08-06 | 2003-02-18 | フアルマシア・ダイアグノステイクス・アー・ベー | 分析方法及び装置 |
| WO2002088737A1 (en) * | 2001-04-23 | 2002-11-07 | Wakamoto Pharmaceutical Co., Ltd. | Immunochromatographic test piece and diagnosis kit |
| JP2005512090A (ja) * | 2001-12-12 | 2005-04-28 | プロテオム システムズ インテレクチュアル プロパティ プロプライエタリー リミテッド | 診断検査方法 |
| JP2006502404A (ja) * | 2002-10-11 | 2006-01-19 | ゼットビーエックス コーポレーション | 診断装置 |
| JP4851321B2 (ja) * | 2003-06-06 | 2012-01-11 | アドバンテイジ ダイアグノスティックス コーポレイション | サンプル中の分析物についての診断試験 |
| JP2007524813A (ja) * | 2003-06-06 | 2007-08-30 | アドバンテイジ ダイアグノスティックス コーポレイション | サンプル中の分析物についての診断試験 |
| US8404479B2 (en) | 2003-12-24 | 2013-03-26 | Denka Seiken Co., Ltd | Simple membrane assay method and kit |
| JP2006215044A (ja) * | 2006-03-31 | 2006-08-17 | Denka Seiken Co Ltd | 簡易メンブレンアッセイ法及びキット |
| JP2008292326A (ja) * | 2007-05-24 | 2008-12-04 | Bl:Kk | ヒアルロン酸存在下における免疫測定法及びそれに用いられる物 |
| JP2011511948A (ja) * | 2008-02-11 | 2011-04-14 | バイオテックファーマ・コーポレイション | 被分析物試験、確認、および提供者身元検証のための総合デバイス |
| JP2009229343A (ja) * | 2008-03-25 | 2009-10-08 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | イムノクロマトグラフィー測定装置 |
| JP2012501447A (ja) * | 2008-08-26 | 2012-01-19 | リオッタ，ランス，エー． | ヒドロゲルナノ粒子に基づく免疫測定 |
| WO2014051141A1 (ja) * | 2012-09-28 | 2014-04-03 | 積水メディカル株式会社 | 無希釈系イムノクロマトグラフ法試薬において希釈試料を測定するための添加物 |
| JP5562508B1 (ja) * | 2012-09-28 | 2014-07-30 | 積水メディカル株式会社 | 無希釈系イムノクロマトグラフ法試薬において希釈試料を測定するための添加物 |
| WO2014119725A1 (ja) * | 2013-01-31 | 2014-08-07 | デンカ生研株式会社 | 生体粘膜由来検体測定イムノアッセイにおいて偽陰性を抑制する方法 |
| KR20150113162A (ko) * | 2013-01-31 | 2015-10-07 | 덴카 세이켄 가부시키가이샤 | 생체 점막 유래 검체 측정 면역검정에 있어서 위음성을 억제하는 방법 |
| KR20160037842A (ko) * | 2013-05-14 | 2016-04-06 | 파이브로티엑스 오유 | 측방 유동 분석 디바이스 |
| JP2016521368A (ja) * | 2013-05-14 | 2016-07-21 | フィブロテックス エー | 側方流動分析装置 |
| US11519910B2 (en) | 2013-05-14 | 2022-12-06 | Fibrotx Oü | Lateral flow assay device |
| JP2020003319A (ja) * | 2018-06-27 | 2020-01-09 | 株式会社ニチレイバイオサイエンス | 検査キット |
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| Publication number | Publication date |
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