JPH10245552A

JPH10245552A - 柑橘果実由来の抗酸化性物質

Info

Publication number: JPH10245552A
Application number: JP9065554A
Authority: JP
Inventors: Masahiko Atobe; 昌彦跡部; Yoshiaki Miyake; 義明三宅; Toshihiko Osawa; 俊彦大澤; Kojiro Morimitsu; 康次郎森光
Original assignee: Pokka Corp
Current assignee: Pokka Corp
Priority date: 1997-03-05
Filing date: 1997-03-05
Publication date: 1998-09-14
Anticipated expiration: 2017-03-05
Also published as: JP4188433B2

Abstract

(57)【要約】【解決手段】６，８−ジ−Ｃ−グルコシルジオスミン
（ジオスミン−６，８−Ｃ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノ
シド）、又は、６−Ｃ−グルコシルジオスミン（ジオス
ミン−６−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシド）を有効成分
とする抗酸化剤。【効果】本グルコシルジオスミンは柑橘類から抽出し
た天然物であるため、すぐれた安全性の高い抗酸化剤が
得られ、飲食品、医薬品、化粧品、その他工業製品にお
ける酸化防止に広く利用することができ、生体内での酸
化防止作用も期待され、健康飲食品としても有利に利用
できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、抗酸化システムに
関するものであって、更に詳細には、柑橘果実の果皮、
果汁から新規抗酸化性物質（６，８−ジ−Ｃ−グルコシ
ルジオスミン、及び／又は、６−Ｃ−グルコシルジオス
ミン）を抽出し、これを抗酸化剤、特に飲食品用抗酸化
剤として応用したり、または、これを飲料、食品に添加
強化し、生体内抗酸化の食品素材として生活慣習病（成
人病）、癌予防食品に応用するトータルシステムに関す
るものである。

【０００２】

【従来の技術】従来より、飲食品、医薬品、化粧品のほ
か各種工業製品において、天然色素の経時的変色ないし
退色、植物性油脂や魚油の変敗、β−カロチンやビタミ
ンＣ等有効成分の酸化分解、フレーバーの経時的劣化
等、成分の酸化による各種の被害が重要な問題となって
いる。

【０００３】また近年になって、活性酸素の害作用がク
ローズアップされるようになり、例えば、食品中に含ま
れるリノール酸、リノレン酸などの栄養学的に必須な不
飽和脂肪酸は、空気中の酸素により容易に過酸化されて
過酸化脂肪酸や、反応性ラジカル（フリーラジカル）を
生成すると共に、マロンジアルデヒドなどの発がん性物
質を生成することが報告されている。また脂質中の不飽
和脂肪酸分子が過酸化されて生成する過酸化脂質は、化
学反応により、生体中の蛋白や核酸を変質させるため、
生体に発がん作用などの影響を与えることも報告されて
いる。

【０００４】このような酸素による害作用を防止するた
めに、抗酸化剤が開発され、例えばブチルヒドロキシア
ニソール（ＢＨＡ）やブチルヒドロキシトルエン（ＢＨ
Ｔ）などの合成抗酸化剤が多用されるようになった。ま
た、天然抗酸化剤についても、ビタミンＥ、ビタミン
Ｃ、β−カロチン、カテキン類が知られており、一部は
実用に供されている。

【０００５】しかしながら、合成抗酸化剤は、天然物嗜
好の強い現在の消費者のニーズには、適合しないし、従
来の天然抗酸化剤は、例えばビタミンＥ、ビタミンＣ等
は極端な脂溶性ないし水溶性という性質を有しているた
め、その利用には自ずから限度があり、充分なものとは
いえない。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】酸素による重大な害作
用に鑑み、飲食品、医薬品、化粧品その他工業製品にお
ける酸化、あるいは生体内での過酸化を防止するため
に、ＢＨＡやＢＨＴ等合成抗酸化剤に代る新しいタイプ
の抗酸化剤を開発する目的で、本発明はなされたもので
ある。

【０００７】

【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に各方面から検討した結果、安全性の高い、天然由来の
抗酸化性物質は、生体内における抗酸化的な生体の防御
機構を支援する物質として食品、特に健康食品や栄養食
品のほか、医薬品や化粧品の技術分野において、非常に
期待されている点に着目した。

【０００８】そして鋭意研究の結果、レモン等の柑橘類
から抽出した糖誘導体である６，８−ジ−Ｃ−グルコシ
ルジオスミン、６−Ｃ−グルコシルジオスミンにきわめ
てすぐれた抗酸化性がありしかも安全性にも問題がない
ことを確認し、こ（れら）の物質を有効成分とする抗酸
化剤に関する本発明を完成するに至った。以下、本発明
について詳しく説明する。

【０００９】本発明に係る抗酸化剤の有効成分として使
用するグルコシルジオスミンの内、６，８−ジ−Ｃ−グ
ルコシルジオスミンは、分子式Ｃ₂₈Ｈ₃₂Ｏ₁₆（分子量：
６２４）を有し、下記化１に示される構造式を有する化
合物である（構造式名：ジオスミン−６，８−Ｃ−ジ−
β−Ｄ−グルコピラノシド）。

【００１０】

【化１】

【００１１】本発明に係る抗酸化剤の有効成分として使
用するグルコシルジオスミンの内、６−Ｃ−グルコシル
ジオスミンは、分子式Ｃ₂₂Ｈ₂₂Ｏ₁₁（分子量：４６２）
を有し、下記化２に示される構造式を有する化合物であ
る（構造式名：ジオスミン−６−Ｃ−β−Ｄ−グルコピ
ラノシド）。

【００１２】

【化２】

【００１３】これらのグルコシルジオスミンは柑橘類に
存在し、特にレモンやライムに多く含まれ、オレンジ類
の柑橘果実にも存在するが、該グルコシルジオスミンが
すぐれた抗酸化特性を有することは従来全く知られてお
らず、新規な知見である。

【００１４】本グルコシルジオスミンは、柑橘類、特に
その果汁、果肉、果皮、果皮含有物、及び／又は搾り粕
を原料とし、これを抽出して採取するものである。そし
て必要あれば、天然物化学において常用される各種精製
処理（イオン交換樹脂、膜分画、吸着クロマトグラフィ
ー、（高速）液体クロマトグラフィー、逆相クロマトグ
ラフィー、親和クロマトグラフィー、その他のクロマト
グラフィー、再結晶等の各処理）を単独で又は組み合わ
せて用いて、精製グルコシルジオスミンを得る。

【００１５】本発明に係る抗酸化性物質グルコシルジオ
スミンは、水、水溶性溶媒又はこれらの混合溶媒で抽出
する。かかる水溶性溶媒としては、メタノール、エタノ
ール、ｎ−プロピルアルコール、イソプロピルアルコー
ル等の低級アルコール類、アセトン、ジメチルアセトン
アミド、ジメチルホルムアミド等が挙げられる。

【００１６】柑橘類としては、レモン、ライム、グレー
プフルーツ、ユズ、ネーブルオレンジ、バレンシアオレ
ンジ、サワーオレンジ、はっさく、温州ミカン、アマナ
ツ、キンカン、イヨカン、夏ミカン、ダイダイ、ブンタ
ン、カボス、スダチ、ポンカンその他柑橘類が１種又は
２種以上使用される。

【００１７】本グルコシルジオスミンを製造するには、
先ず柑橘類を上記したように水、有機溶媒、又はこれら
の混合物で抽出する。抽出は室温〜高温で行う。次いで
抽出物は、必要あれば（減圧）濃縮した後、上記したよ
うに樹脂処理、膜処理、クロマトグラフィー等の精製処
理を行い、活性画分をそれぞれ集めて、凍結乾燥等によ
って乾燥処理して、本グルコシルジオスミンの精製粉末
をそれぞれ得る。

【００１８】このようにして得られた６，８−ジ−Ｃ−
グルコシルジオスミン、６−Ｃ−グルコシルジオスミン
の理化学的性質は、それぞれ、下記の表１、表２に示す
とおりである。

【００１９】

【表１】

【００２０】

【表２】

【００２１】本発明に係る抗酸化剤は、こ（れら）のグ
ルコシルジオスミンを有効成分とするものであるが、グ
ルコシルジオスミンとしては、精製物を使用できること
はもちろんであるが、例えば飲食品等に添加使用する場
合等、必らずしも精製物を使用する必要がない場合に
は、精製工程で得られる各種の粗製品も充分に使用する
ことができる。グルコシルジオスミンは各々を単用して
もよいし、両者を適当な比率で併用してもよいし、両者
を含有する画分を直接使用してもよい。また、他の合成
又は天然の抗酸化剤との併用も可能である。

【００２２】本グルコシルジオスミンは、天然物由来の
成分であり、既に食経験があるレモン、ライム等の柑橘
果汁に数ｍｇ／１００ｍｌと多量に含まれており、生体
への安全性は問題ない。Ｒｅｃ−ａｓｓａｙ法やＡｍｅ
ｓ法による変異原性試験でも陰性であり、安全性を確認
した。

【００２３】本発明に係る抗酸化物質６，８−ジ−Ｃ−
グルコシルジオスミン、又は、６−Ｃ−グルコシルジオ
スミンは、ジュース、炭酸飲料、スポーツドリンク、調
味料、キャンディー、スープ等の飲料、食品に添加し、
健康性飲料、食品とすることができる。その使用量は、
従来の酸化防止剤と同様であって、従来法にならって添
加使用すれば良く、この点も本発明の特徴のひとつであ
る。以下、本発明の実施例について述べる。

【００２４】

【実施例１】レモン果皮１．５Ｋｇをホモジナイザーで
粉砕し、５Ｌのメタノールに浸漬し、室温３日間放置し
た。その後、抽出液を濾過して濾液を得た。これを、エ
バポレーターで減圧濃縮して抽出液を得た。次に、２０
０ｍｌの水に溶かし、逆相樹脂カラム（４．０ｃｍ×５
０ｃｍ、Ｃｏｓｍｏｓｉｌ７５Ｃ１８−ＯＰＮ；
（株）ナカライテスク）に供した。順次、１．５Ｌの
水、２０％メタノール、４０％メタノール、６０％メタ
ノール、８０％メタノール、１００％メタノールで溶出
した。そこで、４０％メタノール溶出画分を減圧濃縮
し、濃縮物を５ｍｌのメタノールに溶かした。これを、
分取高速液体クロマトグラフィー（流速１０ｍｌ／ｍｉ
ｎ、溶出溶媒４０％メタノール、検出波長２８０ｎｍ、
カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ２５０×２０ｍｍ、（株）ワ
イエムシイ）により、各ピークを分取することにより、
６，８−ジ−Ｃ−グルコシルジオスミン、６−Ｃ−グル
コシルジオスミンのピークを得、これを濃縮乾固した。
純度を上げるには、再結晶化を行った。

【００２５】

【実施例２：リノール酸を用いた抗酸化力測定】油脂の
抗酸化度を調べるために、リノール酸を用いた抗酸化力
測定を行った。それには、リノール酸の自動酸化で生じ
るヒドロペルオキシドをチオシアン酸で発色させるロダ
ン鉄法を用いて、抗酸化物価を測定することにより行っ
た。なお、コントロール（無添加）及び天然抗酸化剤で
あるα−トコフェロールについても抗酸化力測定を行っ
た。

【００２６】すなわち、リノール酸（和光純薬工業製）
を特級エタノールに溶解し、１．３％濃度としたものを
基質とした。この基質１０ｍｌに、サンプルを一定量添
加し、５０ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ７．０で全量を２５ｍ
ｌとした液を、５０ｍｌ容共栓付き三角フラスコに移
し、５０℃のインキュベーターに遮光保存した。１週間
後にこの反応液１．０ｍｌを採取し、試験管に取り、７
５％エタノール４．７ｍｌ、３０％チオシアン酸アンモ
ニウム０．１ｍｌを添加した。次いで、０．０２Ｍ塩化
第一鉄の３．５％塩酸溶液０．１ｍｌを加え、３分後、
５００ｎｍにおける吸光度を測定した。コントロール
（無添加）の吸光値を１００％とし、過酸化度を算出し
た。結果を下記表３に示した。数値が低いほど抗酸化が
高いと判断した。

【００２７】

【表３】

【００２８】

【実施例３：リポソーム膜を用いた抗酸化力測定】抗酸
化剤の生体での抗酸化力を調べることを目的に、卵レシ
チンから擬似生体膜であるリポソーム膜を調製した。抗
酸化力測定は、卵由来レシチンから調製したリポソーム
膜を酸化誘導させ、これによって生じる過酸化物を定量
測定することにより行った。なお、コントロール（無添
加）及び天然抗酸化剤であるα−トコフェロールについ
ても抗酸化力測定を行った。

【００２９】すなわち、卵由来レシチン１００ｍｇを１
０ｍｌの１０ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ７．４に溶かし、超
音波洗浄機で処理した。次ぎに、カップホーンタイプの
超音波破砕機で１２０Ｗ、２０分超音波処理を行いリポ
ソーム膜溶液を調製した。反応系に終濃度が１ｍｇ／ｍ
ｌリポソーム膜溶液、１ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ７．４、
２ｍＭ２，２′−アゾビス（２−アミジノプロパン）二
塩酸塩になるように各試薬を添加し、３７℃で６時間イ
ンキュベートした。そして、生成された過酸化物のマロ
ンジアルデヒド及びＭＤＡ様物質（ＴＢＡＲＳ）が酸性
条件下でチオバルビツール酸と縮合して生成する赤色物
質を、５３２ｎｍの吸光度を測定した。モル吸光係数を
１．５６×１０⁵（Ｍ-¹×ｃｍ-¹）として、ＴＢＡＲＳ
量を算出した。コントロール（無添加）のＴＢＡＲＳ量
を１００％とし、過酸化度を算出した。結果を下記表４
に示した。数値が低いほど抗酸化力が高いと判断した。

【００３０】

【表４】

【００３１】

【実施例４：赤血球膜ゴーストを用いた抗酸化力測定】
抗酸化剤の生体での抗酸化力を調べることを目的に、ウ
サギ血液より実際の生体膜である赤血球膜ゴーストを調
製し、これを酸化誘導させこれによって生じる過酸化物
を定量測定することにより抗酸化力測定を行った。

【００３２】すなわち、ウサギ血液から遠心分離をくり
返すことにより、ウサギ赤血球膜ゴーストを調製した。
反応系に終濃度１．０ｍｇ／ｍｌ蛋白質のウサギ赤血球
膜ゴースト、０．３ｍＭｔｅｒｔ−ブチルヒドロペル
オキシド、１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）、１５
２ｍＭ塩化ナトリウムになるように各試薬を添加し、３
７℃、３０分間インキュベートした。そして、生成され
た過酸化物のマロンジアルデヒド及びＭＤＡ様物質（Ｔ
ＢＡＲＳ）が酸性条件下でチオバルビツール酸と縮合し
て生成する赤色物質を、５３２ｎｍの吸光度を測定し
た。モル吸光係数を１．５６×１０⁵（Ｍ-¹×ｃｍ-¹）
として、ＴＢＡＲＳ量を算出した。コントロール（無添
加）のＴＢＡＲＳ量を１００％とし、過酸化度を算出し
た。結果を下記表５に示した。数値が低いほど抗酸化力
が高いと判断した。

【００３３】

【表５】

【００３４】

【実施例５】濃縮グレープフルーツジュース１００ｇ、
糖類１５０ｇ、蜂蜜１５ｇ、６，８−ジ−Ｃ−グルコシ
ルジオスミン１．５ｇ、香料適量に水を加えて１ｋｇと
し、これを９５℃で２０分間殺菌し、１００ｍｌずつ無
菌的にビンに充填して、グレープフルーツジュースドリ
ンクを製造した。

【００３５】

【実施例６】薬用ニンジンエキス２００ｇ、６−Ｃ−グ
ルコシルジオスミン５ｇ、硝酸チアミン１０ｇ、ニコチ
ン酸アミド２０ｇ、無水カフェイン５０ｇ、香料適量に
脱イオン水を加えて全量を３０リットルとし、殺菌した
後３０ｍｌずつ無菌的にビンに充填して、医薬品タイプ
の健康ドリンクを製造した。

【００３６】

【発明の効果】本発明によれば、６，８−ジ−Ｃ−グル
コシルジオスミン、又は、６−Ｃ−グルコシルジオスミ
ンを有効成分とする抗酸化剤が提供される。こ（れら）
のグルコシルジオスミンは、抗酸化作用にすぐれている
だけでなく、天然物由来であるため、安全性にも問題が
なく、飲料、食品、医薬品、化粧品、その他工業製品の
抗酸化剤として広範に使用することができる。

【００３７】また、最近は、天然抗酸化剤のビタミン
Ｅ、β−カロチンや、緑茶中のカテキン類は、ラジカル
補足能、活性酸素消去能から生体内での酸化防止効果が
あることが示されている。これは、高血圧防止効果や、
心筋梗塞のような血管疾患、癌予防効果等があることが
示されており、生活慣習病（成人病）予防食品の素材と
して注目されている。柑橘由来の抗酸化性を示す、本グ
ルコシルジオスミンは、同様な効果が期待でき、これを
利用した生活慣習病（成人病）予防食品、飲料としても
利用することができ、本グルコシルジオスミンを添加し
た飲食品は、健康飲食品としても有利に利用することが
できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者跡部昌彦愛知県西春日井郡師勝町大字熊之庄字十二社 45−２株式会社ポッカコーポレーション中央研究所内 (72)発明者三宅義明愛知県西春日井郡師勝町大字熊之庄字十二社 45−２株式会社ポッカコーポレーション中央研究所内 (72)発明者大澤俊彦愛知県春日井市押沢台７−９−８ (72)発明者森光康次郎愛知県名古屋市天白区植田山１の805

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】抗酸化性物質６，８−ジ−Ｃ−グルコ
シルジオスミン（ジオスミン−６，８−Ｃ−ジ−β−Ｄ
−グルコピラノシド）、又は、６−Ｃ−グルコシルジオ
スミン（ジオスミン−６−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド）を有効成分とする抗酸化剤。
【請求項２】柑橘類の果汁、果皮、果皮含有物及び／
又は搾り粕を、水、有機溶媒又はこれらの混合物で抽出
し、得られた抽出物を逆相樹脂処理、液体クロマトグラ
フィー等の精製処理を組み合わせて行うこと、を特徴と
する抗酸化性物質６，８−ジ−Ｃ−グルコシルジオスミ
ン、又は、６−Ｃ−グルコシルジオスミンの製造方法。
【請求項３】抗酸化剤が飲食品用抗酸化剤であるこ
と、を特徴とする請求項１に記載の抗酸化剤。
【請求項４】請求項１又は請求項３に記載の抗酸化剤
を飲食品に添加してなること、を特徴とする健康飲食
品。
【請求項５】柑橘類がレモン、ライム、グレープフル
ーツ、ユズ、ネーブルオレンジ、バレンシアオレンジ、
サワーオレンジ、はっさく、温州ミカン、アマナツ、キ
ンカン、イヨカン、夏ミカン、ダイダイ、ブンタン、カ
ボス、スダチ、ポンカンから選択されたものであるこ
と、を特徴とする請求項１〜請求項４のいずれかに記載
された抗酸化剤、その製造方法又は飲食品。