JPH10262647A - 培養容器アセンブリ、これに用いる蓋およびこれを用いた細胞培養方法 - Google Patents
培養容器アセンブリ、これに用いる蓋およびこれを用いた細胞培養方法Info
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- JPH10262647A JPH10262647A JP10071050A JP7105098A JPH10262647A JP H10262647 A JPH10262647 A JP H10262647A JP 10071050 A JP10071050 A JP 10071050A JP 7105098 A JP7105098 A JP 7105098A JP H10262647 A JPH10262647 A JP H10262647A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 培養容器アセンブリを出入りするガスの拡散
速度を変化させるための手段および生物学的汚染物の出
入りを実質的に最低限にするための手段を備えたインビ
トロで細胞成長または組織培養するための培養容器アセ
ンブリ、これを用いる蓋およびこれを用いた組織培養方
法を提供すること。 【解決手段】 開放端３２およびプレートの外縁を形成
する直立した側壁２８を有する複数のウェル２６を備え
たプレート２０と、ガス透過性膜７４をそれぞれ取り付
けた複数のオリフィス７２を有する平らなカバー５２に
さらに取り外しできるようにガス不透過性フィルムを備
えた蓋５０から組織培養アセンブリ１０を作製する。そ
の際、各オリフィス７２を各ウェル２６に位置合わせし
て配列することによりガスの交換を改善することがで
き、ガス不透過性フィルムを完全にまたは部分的に引き
剥がすことによってガスの拡散を調節することができ
る。
速度を変化させるための手段および生物学的汚染物の出
入りを実質的に最低限にするための手段を備えたインビ
トロで細胞成長または組織培養するための培養容器アセ
ンブリ、これを用いる蓋およびこれを用いた組織培養方
法を提供すること。 【解決手段】 開放端３２およびプレートの外縁を形成
する直立した側壁２８を有する複数のウェル２６を備え
たプレート２０と、ガス透過性膜７４をそれぞれ取り付
けた複数のオリフィス７２を有する平らなカバー５２に
さらに取り外しできるようにガス不透過性フィルムを備
えた蓋５０から組織培養アセンブリ１０を作製する。そ
の際、各オリフィス７２を各ウェル２６に位置合わせし
て配列することによりガスの交換を改善することがで
き、ガス不透過性フィルムを完全にまたは部分的に引き
剥がすことによってガスの拡散を調節することができ
る。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明はインビトロ（in vit
ro）で細胞成長または組織培養するのための装置および
方法に関する。より詳述すると、本発明はアセンブリを
出入りするガスの拡散速度を変化させるための手段、お
よびそのアセンブリ内の細胞または組織培養に関して生
物学的汚染を実質的に最低限にするための手段を有する
培養容器アセンブリ、これに用いる蓋およびこれを用い
た細胞培養方法に関するものである。
ro）で細胞成長または組織培養するのための装置および
方法に関する。より詳述すると、本発明はアセンブリを
出入りするガスの拡散速度を変化させるための手段、お
よびそのアセンブリ内の細胞または組織培養に関して生
物学的汚染を実質的に最低限にするための手段を有する
培養容器アセンブリ、これに用いる蓋およびこれを用い
た細胞培養方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】培養容器は、米国特許第4,495,289 号、
第5,026,649 号、第5,358,871 号および第5,366,893 号
ならびにヨーロッパ特許出願公開第0 483 620 A2号およ
び英国特許出願公開第GB 2 268 187 A号に記載されてい
る。培養容器は、ウェル（wells ）を備えており、それ
らのウェルは一般的に円形の形状をしているとともに細
胞の付着、成長、および分化がその上で起こる膜を有す
る細胞培養挿入部（cellculture insert ）をそれらの
ウェル内に導入できるサイズを有する。ウェルを含んだ
培養容器は、典型的には矩形であり、標準の分析装置に
適合するように標準サイズを有する。培養容器に使用さ
れる細胞培養挿入部は、米国特許第4,871,674 号、第5,
026,649 号および第5,366,893 号に記載されている（こ
れは引用することで本明細書の一部とする）。
第5,026,649 号、第5,358,871 号および第5,366,893 号
ならびにヨーロッパ特許出願公開第0 483 620 A2号およ
び英国特許出願公開第GB 2 268 187 A号に記載されてい
る。培養容器は、ウェル（wells ）を備えており、それ
らのウェルは一般的に円形の形状をしているとともに細
胞の付着、成長、および分化がその上で起こる膜を有す
る細胞培養挿入部（cellculture insert ）をそれらの
ウェル内に導入できるサイズを有する。ウェルを含んだ
培養容器は、典型的には矩形であり、標準の分析装置に
適合するように標準サイズを有する。培養容器に使用さ
れる細胞培養挿入部は、米国特許第4,871,674 号、第5,
026,649 号および第5,366,893 号に記載されている（こ
れは引用することで本明細書の一部とする）。
【０００３】細胞の培養は、細胞損傷が生じることなく
細胞に充分に酸素を供給する能力に依存する。細胞呼吸
用の酸素は、細胞の上にある上部空間中の大気から液体
培養培地を通って供給される。
細胞に充分に酸素を供給する能力に依存する。細胞呼吸
用の酸素は、細胞の上にある上部空間中の大気から液体
培養培地を通って供給される。
【０００４】例えば、スパージング、表面のエアレーシ
ョン、培地灌流といった培養の通気は、酸素の利用性を
増加することができる。しかしながら、かかる方法では
細胞損傷が起こる可能性がある。シリコーンゴム製の管
を用いてウェルと大気の間の配管（tubing）を行うこと
により細胞培養におけるガス交換を改善することがなさ
れているが、かかる方法は不便であり、細胞懸濁液に汚
染が生じることがある。
ョン、培地灌流といった培養の通気は、酸素の利用性を
増加することができる。しかしながら、かかる方法では
細胞損傷が起こる可能性がある。シリコーンゴム製の管
を用いてウェルと大気の間の配管（tubing）を行うこと
により細胞培養におけるガス交換を改善することがなさ
れているが、かかる方法は不便であり、細胞懸濁液に汚
染が生じることがある。
【０００５】多数の培養容器が市販され、特許公報に記
載されているけれども、培養容器アセンブリを出入する
ガスの拡散速度を変化させるための手段を提供するにも
かかわらず、依然として密閉系を提供し、それにより容
器に対する生物学的汚染物の出入口が実質的に最低限に
されるような培養容器は入手可能ではないと思われる。
載されているけれども、培養容器アセンブリを出入する
ガスの拡散速度を変化させるための手段を提供するにも
かかわらず、依然として密閉系を提供し、それにより容
器に対する生物学的汚染物の出入口が実質的に最低限に
されるような培養容器は入手可能ではないと思われる。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、培養容器アセンブリを出入りするガスの拡散速度を
変化させるための手段および生物学的汚染物の出入りを
実質的に最低限にするための手段をを有する培養容器ア
センブリ、これに用いる蓋およびこれを用いた細胞培養
方法を提供することにある。
は、培養容器アセンブリを出入りするガスの拡散速度を
変化させるための手段および生物学的汚染物の出入りを
実質的に最低限にするための手段をを有する培養容器ア
センブリ、これに用いる蓋およびこれを用いた細胞培養
方法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】請求項１に記載のアセン
ブリは、試験プレートおよび該試験プレート上に配置さ
れる取り外しできる蓋を備えたアセンブリであって、前
記試験プレートは組織培養培地または細胞培養挿入部を
受け入れるための開口部を有する複数のウェルおよび前
記プレートの外縁を形成する直立した側壁を有し、前記
プレート上に置かれる取り外しできる蓋は、前記ウェル
をおおって広がった本質的に平らなカバーを備えてお
り、該カバーは上面、下面、および該カバーを包囲する
スカートを備え、該スカートは前記カバー上の複数の角
部を形成し、かつ前記プレートの前記側壁から離隔して
下向きに延びて、内面および外面を有する側壁を形成
し、前記平らなカバーにおける複数のオリフィスはガス
透過性膜をそれぞれ備えており、前記オリフィスは前記
試験プレートの前記ウェルに位置合わせして配列されて
いることを特徴とする。
ブリは、試験プレートおよび該試験プレート上に配置さ
れる取り外しできる蓋を備えたアセンブリであって、前
記試験プレートは組織培養培地または細胞培養挿入部を
受け入れるための開口部を有する複数のウェルおよび前
記プレートの外縁を形成する直立した側壁を有し、前記
プレート上に置かれる取り外しできる蓋は、前記ウェル
をおおって広がった本質的に平らなカバーを備えてお
り、該カバーは上面、下面、および該カバーを包囲する
スカートを備え、該スカートは前記カバー上の複数の角
部を形成し、かつ前記プレートの前記側壁から離隔して
下向きに延びて、内面および外面を有する側壁を形成
し、前記平らなカバーにおける複数のオリフィスはガス
透過性膜をそれぞれ備えており、前記オリフィスは前記
試験プレートの前記ウェルに位置合わせして配列されて
いることを特徴とする。
【０００８】請求項２に記載のアセンブリは、請求項１
において、前記アセンブリを出入りするガスの拡散を補
助できるように前記カバーに完全にまたは部分的に取り
外しできるように取り付けられかつ各オリフィスに連結
されたガス不透過性フィルムをさらに備えることを特徴
とする。
において、前記アセンブリを出入りするガスの拡散を補
助できるように前記カバーに完全にまたは部分的に取り
外しできるように取り付けられかつ各オリフィスに連結
されたガス不透過性フィルムをさらに備えることを特徴
とする。
【０００９】請求項３に記載のアセンブリは、請求項１
において、前記プレートの前記側壁は上の区分および下
の区分を備えた２段階の区分から成ることを特徴とす
る。
において、前記プレートの前記側壁は上の区分および下
の区分を備えた２段階の区分から成ることを特徴とす
る。
【００１０】請求項４に記載のアセンブリは、請求項３
において、前記側壁の前記下の区分は、環状肩部によっ
て前記上の区分から段状になっており、前記蓋の前記ス
カートは前記プレートの前記環状肩部に隣接した位置に
延びているが前記環状肩部と接触はせず、前記ウェルは
さらに、本質的に直交した列および行に配列しているこ
とを特徴とする。
において、前記側壁の前記下の区分は、環状肩部によっ
て前記上の区分から段状になっており、前記蓋の前記ス
カートは前記プレートの前記環状肩部に隣接した位置に
延びているが前記環状肩部と接触はせず、前記ウェルは
さらに、本質的に直交した列および行に配列しているこ
とを特徴とする。
【００１１】請求項５に記載のアセンブリは、請求項１
において、前記プレートおよび前記蓋は透明なプラスチ
ックから成ることを特徴とする。
において、前記プレートおよび前記蓋は透明なプラスチ
ックから成ることを特徴とする。
【００１２】請求項６に記載のアセンブリは、請求項１
において、さらに、前記試験プレートは前記プレートの
前記側壁から内方に離隔しかつ前記側壁と前記ウェルの
間に延びている棚を備えており、ここで前記側壁は棚の
上方位置まで延び、それによって前記棚の周辺にリムを
形成していることを特徴とする。
において、さらに、前記試験プレートは前記プレートの
前記側壁から内方に離隔しかつ前記側壁と前記ウェルの
間に延びている棚を備えており、ここで前記側壁は棚の
上方位置まで延び、それによって前記棚の周辺にリムを
形成していることを特徴とする。
【００１３】請求項７に記載の組織培養プレートと関連
して用いる蓋は、上面と下面を備えている本質的に平ら
なカバー、前記カバー上に複数の角部を形成し、かつ下
向きに延びて、内面および外面を有する側壁を形成する
前記カバーを包囲するスカート、それぞれにガス透過性
膜を備えている前記カバーにおける複数のオリフィス、
および、前記オリフィスおよび前記ガス透過性膜のそれ
ぞれをおおった前記カバーに完全にまたは部分的に取り
外しできるように取り付けたガス不透過性フィルムを備
え、前記ガス不透過性フィルムは剥ぎ取り式ラベルであ
り、前記蓋はさらに、前記スカートから内方に離隔して
おり、かつ前記カバーの前記下面から下向きに延びてい
る複数のフランジを備えていることを特徴とする。
して用いる蓋は、上面と下面を備えている本質的に平ら
なカバー、前記カバー上に複数の角部を形成し、かつ下
向きに延びて、内面および外面を有する側壁を形成する
前記カバーを包囲するスカート、それぞれにガス透過性
膜を備えている前記カバーにおける複数のオリフィス、
および、前記オリフィスおよび前記ガス透過性膜のそれ
ぞれをおおった前記カバーに完全にまたは部分的に取り
外しできるように取り付けたガス不透過性フィルムを備
え、前記ガス不透過性フィルムは剥ぎ取り式ラベルであ
り、前記蓋はさらに、前記スカートから内方に離隔して
おり、かつ前記カバーの前記下面から下向きに延びてい
る複数のフランジを備えていることを特徴とする。
【００１４】請求項８に記載のインビトロにおける細胞
成長または組織培養のための装置は、本体および取り外
しできる蓋を備える装置であって、前記本体は上面、下
面、本質的に前記上面および下面の間に配置された複数
のウェル、前記本体の外縁を形成する直立した側壁を備
え、前記取り外しできる蓋は上壁および前記上壁から延
びた周縁スカートおよび前記上壁において前記装置を出
入するガスの拡散を許容する複数の手段を備えており、
該複数の手段は前記本体の前記ウェルに位置合わせして
配列していることを特徴とする。
成長または組織培養のための装置は、本体および取り外
しできる蓋を備える装置であって、前記本体は上面、下
面、本質的に前記上面および下面の間に配置された複数
のウェル、前記本体の外縁を形成する直立した側壁を備
え、前記取り外しできる蓋は上壁および前記上壁から延
びた周縁スカートおよび前記上壁において前記装置を出
入するガスの拡散を許容する複数の手段を備えており、
該複数の手段は前記本体の前記ウェルに位置合わせして
配列していることを特徴とする。
【００１５】請求項９に記載の装置は、請求項８におい
て、前記装置を出入するガスの拡散を許容する前記複数
の手段は、複数のオリフィスおよび前記オリフィスに連
結しかつ前記本体の前記ウェルに直接位置合わせして配
列したガス不透過性フィルムであり、前記装置はさらに
前記オリフィスをおおって前記カバーに対して取り外し
できるように取り付けられた複数のガス不透過性フィル
ムを備え、それにより前記装置においてガスの拡散を補
助するように前記フィルムを完全にまたは部分的に取り
外すことができ、さらに前記本体の側壁は上の区分およ
び下の区分から成る２段階の区分ならびに環状肩部を備
え、前記下の区分は前記環状肩部によって前記上の区分
から段状になっていることを特徴とする。
て、前記装置を出入するガスの拡散を許容する前記複数
の手段は、複数のオリフィスおよび前記オリフィスに連
結しかつ前記本体の前記ウェルに直接位置合わせして配
列したガス不透過性フィルムであり、前記装置はさらに
前記オリフィスをおおって前記カバーに対して取り外し
できるように取り付けられた複数のガス不透過性フィル
ムを備え、それにより前記装置においてガスの拡散を補
助するように前記フィルムを完全にまたは部分的に取り
外すことができ、さらに前記本体の側壁は上の区分およ
び下の区分から成る２段階の区分ならびに環状肩部を備
え、前記下の区分は前記環状肩部によって前記上の区分
から段状になっていることを特徴とする。
【００１６】請求項１０に記載の細胞培養方法は、下記
工程を備えることを特徴とする： （ａ）組織培養培地を受け入れるための開口部を有する
複数のウェルおよび当該プレートの外縁を形成する直立
した側壁を備える試験プレート、前記プレート上に取り
外しできるように置かれ、前記ウェルをおおって広がる
本質的に平らなカバーを備える蓋、前記カバーの複数の
角部を形成し、かつ下向きに延びて内面および外面を有
する側壁を形成する該カバーを包囲するスカート、ガス
透過性膜をそれぞれ備え、前記プレートの前記ウェルに
直接配列する前記平らなカバーにおける複数のオリフィ
ス、および前記オリフィスに連結し前記膜をカバーする
取り外しできるラベルを備える培養容器を用意し、
（ｂ）前記培養容器から前記蓋を取り外し、（ｃ）前記
培養容器の前記ウェル内に、膜を備える細胞挿入部を置
き、（ｄ）前記培養容器内の前記細胞挿入部のそれぞれ
の膜の上に細胞の層を沈着し、（ｅ）細胞の層を成長培
地で覆い、（ｆ）前記ウェルをカバーするために前記プ
レートの上に前記蓋を置き、（ｇ）前記オリフィスをお
おった前記ラベルを完全にまたは部分的に取り外し、再
び取り付けることで、前記培養容器の前記蓋におけるオ
リフィスを通って空気が押し入って到達することができ
るようにすることにより、細胞挿入部の膜を直接的に換
気する。
工程を備えることを特徴とする： （ａ）組織培養培地を受け入れるための開口部を有する
複数のウェルおよび当該プレートの外縁を形成する直立
した側壁を備える試験プレート、前記プレート上に取り
外しできるように置かれ、前記ウェルをおおって広がる
本質的に平らなカバーを備える蓋、前記カバーの複数の
角部を形成し、かつ下向きに延びて内面および外面を有
する側壁を形成する該カバーを包囲するスカート、ガス
透過性膜をそれぞれ備え、前記プレートの前記ウェルに
直接配列する前記平らなカバーにおける複数のオリフィ
ス、および前記オリフィスに連結し前記膜をカバーする
取り外しできるラベルを備える培養容器を用意し、
（ｂ）前記培養容器から前記蓋を取り外し、（ｃ）前記
培養容器の前記ウェル内に、膜を備える細胞挿入部を置
き、（ｄ）前記培養容器内の前記細胞挿入部のそれぞれ
の膜の上に細胞の層を沈着し、（ｅ）細胞の層を成長培
地で覆い、（ｆ）前記ウェルをカバーするために前記プ
レートの上に前記蓋を置き、（ｇ）前記オリフィスをお
おった前記ラベルを完全にまたは部分的に取り外し、再
び取り付けることで、前記培養容器の前記蓋におけるオ
リフィスを通って空気が押し入って到達することができ
るようにすることにより、細胞挿入部の膜を直接的に換
気する。
【００１７】
【発明の実施の形態】本発明は、インビトロで細胞成長
または組織培養するためのアセンブリに関するものであ
る。そのアセンブリは、組織培養挿入部のような挿入部
または組織培養培地を受け入れるのに適用した形状のウ
ェルおよび取り外しできる蓋を有する試験プレートを備
えたものである。
または組織培養するためのアセンブリに関するものであ
る。そのアセンブリは、組織培養挿入部のような挿入部
または組織培養培地を受け入れるのに適用した形状のウ
ェルおよび取り外しできる蓋を有する試験プレートを備
えたものである。
【００１８】好適には、試験プレートは、上面、下面、
および複数のウェルを備えている。各ウェルは、本質的
に試験プレートの上面および下面の間に配置される。
および複数のウェルを備えている。各ウェルは、本質的
に試験プレートの上面および下面の間に配置される。
【００１９】アセンブリは、さらに試験プレートの上面
をおおって置くことができる取り外しできる蓋を含んで
いる。その蓋は、ウェルの上壁およびこの上壁から下向
きに延びた、周縁スカート（peripheral skirt）を含ん
でいる。その蓋は、ウェルの内部からのサンプルの損失
を防ぎ、周囲からアセンブリ内の内容物を保護し、有害
な物質または潜在的に有害な物質が含まれていればアセ
ンブリ内の内容物から使用者を保護するのに役立つ。
をおおって置くことができる取り外しできる蓋を含んで
いる。その蓋は、ウェルの上壁およびこの上壁から下向
きに延びた、周縁スカート（peripheral skirt）を含ん
でいる。その蓋は、ウェルの内部からのサンプルの損失
を防ぎ、周囲からアセンブリ内の内容物を保護し、有害
な物質または潜在的に有害な物質が含まれていればアセ
ンブリ内の内容物から使用者を保護するのに役立つ。
【００２０】試験プレートおよび関連する取り外しでき
る蓋は、異なるサイズおよび形状に形成して異なるサイ
ズおよび形状の細胞培養挿入部を使用するようにしても
よい。プレートの上面をおおって蓋の位置を変える場合
に、ウェルの間の相互汚染を減少させるために、取り外
しできる蓋は、一つの方向でプレートの上面をおおって
置かれるように形成してもよい。プレートおよび取り外
しできる蓋は、ウェルおよび細胞培養挿入部が容易に見
えるように、光学的に透明なプラスチックから製造され
たものが好ましい。
る蓋は、異なるサイズおよび形状に形成して異なるサイ
ズおよび形状の細胞培養挿入部を使用するようにしても
よい。プレートの上面をおおって蓋の位置を変える場合
に、ウェルの間の相互汚染を減少させるために、取り外
しできる蓋は、一つの方向でプレートの上面をおおって
置かれるように形成してもよい。プレートおよび取り外
しできる蓋は、ウェルおよび細胞培養挿入部が容易に見
えるように、光学的に透明なプラスチックから製造され
たものが好ましい。
【００２１】蓋は、プレートのウェルを出入してガスが
拡散できるようにするための手段を備えていることが好
ましい。プレートのウェルを出入してガスが拡散できる
ようにする手段には、少なくとも１つの出入口（ポー
ト）があり、さらに出入口はガスが透過できる膜と連結
していることが最も望ましい。このガス透過性膜は液体
に対して不透過性であることが最も望ましい。最も好適
には、蓋は相方のプレート中にあるウェルと同じ数の出
入口を備えている。さらに、最も好適には、出入口はウ
ェルに合わせて位置づけるかまたは整列させる。したが
って、蓋がプレートをおおって置かれたとき、各ウェル
は蓋の上の出入口と連結している。ウェルに合わせて出
入口を位置づけると、直接にそのウェルのガス交換が改
善されるという利点が得られる。さらに、ガス交換はウ
ェル毎により直接的に調節することができるが、この場
合、各ウェルには、使用者によってガス交換について個
別的に配慮がなされるようにしてもよい。
拡散できるようにするための手段を備えていることが好
ましい。プレートのウェルを出入してガスが拡散できる
ようにする手段には、少なくとも１つの出入口（ポー
ト）があり、さらに出入口はガスが透過できる膜と連結
していることが最も望ましい。このガス透過性膜は液体
に対して不透過性であることが最も望ましい。最も好適
には、蓋は相方のプレート中にあるウェルと同じ数の出
入口を備えている。さらに、最も好適には、出入口はウ
ェルに合わせて位置づけるかまたは整列させる。したが
って、蓋がプレートをおおって置かれたとき、各ウェル
は蓋の上の出入口と連結している。ウェルに合わせて出
入口を位置づけると、直接にそのウェルのガス交換が改
善されるという利点が得られる。さらに、ガス交換はウ
ェル毎により直接的に調節することができるが、この場
合、各ウェルには、使用者によってガス交換について個
別的に配慮がなされるようにしてもよい。
【００２２】さらに、蓋に結びつけられているのは、試
験プレートから蓋を取り外すことなしに、ガス透過性膜
を選択的に閉塞するための手段である。膜を選択的に閉
塞する手段としては、薄い不透過性のフィルムが好適で
ある。薄いフィルムを個々の出入口をおおう蓋の上に取
り外しできるように取り付けて、ガス透過性膜を大気に
さらすことを制限するようにしてもよい。蓋を試験プレ
ートから持ち上げたりまたは取り外したりする必要がな
いので、薄い不透過性のフィルムは、ウェル内環境の生
物学的な安全性を維持するのを助ける。最も好適には、
選択的に膜を閉塞するための手段は、剥ぎ取り式ガス不
透過性ラベル（ｌａｂｅｌ ）である。最も好適には、
ラベルはプラスチックである。好適なラベルの材料とし
ては、ガスおよび液体に不透過性のポリマー性基質樹脂
（polymeric substrate resins）があるが、これらに限
定はされない。ラベルは透明でもまたは色を指定しても
よい。さらに、ラベルの表面は、追加の情報をラベルの
上に手書きできるようにすることもできる。
験プレートから蓋を取り外すことなしに、ガス透過性膜
を選択的に閉塞するための手段である。膜を選択的に閉
塞する手段としては、薄い不透過性のフィルムが好適で
ある。薄いフィルムを個々の出入口をおおう蓋の上に取
り外しできるように取り付けて、ガス透過性膜を大気に
さらすことを制限するようにしてもよい。蓋を試験プレ
ートから持ち上げたりまたは取り外したりする必要がな
いので、薄い不透過性のフィルムは、ウェル内環境の生
物学的な安全性を維持するのを助ける。最も好適には、
選択的に膜を閉塞するための手段は、剥ぎ取り式ガス不
透過性ラベル（ｌａｂｅｌ ）である。最も好適には、
ラベルはプラスチックである。好適なラベルの材料とし
ては、ガスおよび液体に不透過性のポリマー性基質樹脂
（polymeric substrate resins）があるが、これらに限
定はされない。ラベルは透明でもまたは色を指定しても
よい。さらに、ラベルの表面は、追加の情報をラベルの
上に手書きできるようにすることもできる。
【００２３】円形であるラベルを提供することは本発明
の範囲内であるけれども、異なる形状のラベルを提供す
ることもできる。
の範囲内であるけれども、異なる形状のラベルを提供す
ることもできる。
【００２４】このラベルを用いると使用者は試験プレー
ト中のガス交換を調節できるので、試験プレート中で細
胞培養の所望の成長を得るのが容易になるが、同時に試
験プレートのウェル内に微生物または他の汚染物が侵入
するのを本質的に防ぐ密封系を依然として提供すること
ができる。ラベルは、ガス交換をほぼ実質的に最大にす
る一方で、試験プレートのウェルにおける汚染の可能性
を最小にする。さらなる利点としては、蓋を取り外すか
または部分的に開く必要なしにもっぱら膜を通してガス
交換が起こることがある。
ト中のガス交換を調節できるので、試験プレート中で細
胞培養の所望の成長を得るのが容易になるが、同時に試
験プレートのウェル内に微生物または他の汚染物が侵入
するのを本質的に防ぐ密封系を依然として提供すること
ができる。ラベルは、ガス交換をほぼ実質的に最大にす
る一方で、試験プレートのウェルにおける汚染の可能性
を最小にする。さらなる利点としては、蓋を取り外すか
または部分的に開く必要なしにもっぱら膜を通してガス
交換が起こることがある。
【００２５】ラベルは、試験プレートの滅菌性を弱めた
りまたは漏出を招来するものではない。ラベルは再利用
できるので製造かつ経済的に引き合うということは他の
利点である。
りまたは漏出を招来するものではない。ラベルは再利用
できるので製造かつ経済的に引き合うということは他の
利点である。
【００２６】最も著しいのは、本発明のアセンブリが以
降の利点を提供することである。すなわち、（１）通気
口がある閉じた環境で滅菌性を維持し、かつガス交換を
調節していること、（２）潜在的に有害なサンプルを収
容すること、および（３）酵母、バクテリア、および／
またはウィルスのような周囲の／外因性の汚染物でアセ
ンブリ内の試料が汚染されることを最小限にすることで
ある。
降の利点を提供することである。すなわち、（１）通気
口がある閉じた環境で滅菌性を維持し、かつガス交換を
調節していること、（２）潜在的に有害なサンプルを収
容すること、および（３）酵母、バクテリア、および／
またはウィルスのような周囲の／外因性の汚染物でアセ
ンブリ内の試料が汚染されることを最小限にすることで
ある。
【００２７】さらに、本発明のアセンブリが特に有利な
のは、無菌およびガス交換が制御された条件において皮
膚移植のためのケラチン生成細胞を複数層生成すること
が望ましい皮膚の培養のように、複数層の細胞を培養す
る場合である。
のは、無菌およびガス交換が制御された条件において皮
膚移植のためのケラチン生成細胞を複数層生成すること
が望ましい皮膚の培養のように、複数層の細胞を培養す
る場合である。
【００２８】さらに、本発明は、細胞挿入部（cell ins
ert ）の膜の表面にある分裂中の細胞に対して直接に酸
素を制御して通過することを可能にする。
ert ）の膜の表面にある分裂中の細胞に対して直接に酸
素を制御して通過することを可能にする。
【００２９】本発明のアセンブリの原理にしたがって、
現在知られておりかつ入手可能であるマルチウェル（mu
ltiwell ）組織培養アセンブリに対して著しい改良が提
供される。最も重要なのは、本発明は、アセンブリを出
入りするガスの拡散を本質的に改良するが、同時にマル
チウェルプレートの内容物の滅菌性を維持し、かつウェ
ルと外部の環境との間で充分なガス交換が起こるように
している。従って、本発明のアセンブリは、細胞培養方
法のための条件を最適にするために生物学的に密閉され
た環境を提供するものであり、その際生物学的な汚染
物、ガスおよび／または液体の出入りは、本質的に最小
にされる。
現在知られておりかつ入手可能であるマルチウェル（mu
ltiwell ）組織培養アセンブリに対して著しい改良が提
供される。最も重要なのは、本発明は、アセンブリを出
入りするガスの拡散を本質的に改良するが、同時にマル
チウェルプレートの内容物の滅菌性を維持し、かつウェ
ルと外部の環境との間で充分なガス交換が起こるように
している。従って、本発明のアセンブリは、細胞培養方
法のための条件を最適にするために生物学的に密閉され
た環境を提供するものであり、その際生物学的な汚染
物、ガスおよび／または液体の出入りは、本質的に最小
にされる。
【００３０】添付図面に図示し以下に詳細に説明するの
は好適な本発明の実施態様である。本発明は多くの異な
る形態の実施態様によって本発明が満たされるけれど
も、ただし本開示は、本発明の原理の一例であり、本発
明を例示した実施態様に限定することを意図するもので
はない。種々の他の変形は、本発明の範囲および精神か
らそれることなしに当業者によって理解されおよび容易
になされる。本発明の範囲は、添付された請求項および
それらの均等物によって判断される。
は好適な本発明の実施態様である。本発明は多くの異な
る形態の実施態様によって本発明が満たされるけれど
も、ただし本開示は、本発明の原理の一例であり、本発
明を例示した実施態様に限定することを意図するもので
はない。種々の他の変形は、本発明の範囲および精神か
らそれることなしに当業者によって理解されおよび容易
になされる。本発明の範囲は、添付された請求項および
それらの均等物によって判断される。
【００３１】図２および図３に示したように組織培養を
成長させるための装置１０は、培養容器プレート２０お
よび蓋５０を備えている。図２および図３に示したよう
に、培養容器プレート２０は、上面２２および下面２４
を含んでいる。さらに培養容器プレートは、プレートの
上面２２からプレートの下面２４まで延びた側壁２８を
各々備えた多数のウェル２６を含んでいる。各ウェル
は、上部３０および底部３６を備えている。上部３０
は、開放端３２を備えており、それは閉塞端３８を備え
た底部３６に向かって延びている。
成長させるための装置１０は、培養容器プレート２０お
よび蓋５０を備えている。図２および図３に示したよう
に、培養容器プレート２０は、上面２２および下面２４
を含んでいる。さらに培養容器プレートは、プレートの
上面２２からプレートの下面２４まで延びた側壁２８を
各々備えた多数のウェル２６を含んでいる。各ウェル
は、上部３０および底部３６を備えている。上部３０
は、開放端３２を備えており、それは閉塞端３８を備え
た底部３６に向かって延びている。
【００３２】６個、１２個、２４個、４８個、および９
６個のウェルプレートは一般に知られており、かつ入手
可能であるけれども、プレート２０においては、ウェル
の数はいくつでもよい。図１では、単に例示的な目的の
ために６個のウェルを有するプレートが例示されてい
る。最も標準的なマルチウェルプレートは、使用される
個々のウェルを明らかに同定できるようにするために直
交した列と行に配置されたウェルを有する。もちろん、
本発明により、いかなるウェルの配置も考えられるの
で、プレート２０におけるウェルの配置は、本質的に本
発明を限定するものではない。
６個のウェルプレートは一般に知られており、かつ入手
可能であるけれども、プレート２０においては、ウェル
の数はいくつでもよい。図１では、単に例示的な目的の
ために６個のウェルを有するプレートが例示されてい
る。最も標準的なマルチウェルプレートは、使用される
個々のウェルを明らかに同定できるようにするために直
交した列と行に配置されたウェルを有する。もちろん、
本発明により、いかなるウェルの配置も考えられるの
で、プレート２０におけるウェルの配置は、本質的に本
発明を限定するものではない。
【００３３】図に例示したようにプレート２０は、典型
的には、透明であって、かつ例えば、ポリビニルクロラ
イドまたはポリスチレンから成る成形品でもよい。
的には、透明であって、かつ例えば、ポリビニルクロラ
イドまたはポリスチレンから成る成形品でもよい。
【００３４】ウェルを囲み、プレート２０の外側の縁取
り（border）を形成しているのが側壁４０である。本発
明の実施態様において、プレート２０は６個の側壁を有
する。組織培養プレートが矩形または四辺形の形である
ことは周知であるが、本発明の目的のためには、プレー
トは任意の実用的な形状に、かつ任意数のウェルを含む
ように作製することができる。
り（border）を形成しているのが側壁４０である。本発
明の実施態様において、プレート２０は６個の側壁を有
する。組織培養プレートが矩形または四辺形の形である
ことは周知であるが、本発明の目的のためには、プレー
トは任意の実用的な形状に、かつ任意数のウェルを含む
ように作製することができる。
【００３５】側壁４０の内側に、かつプレート２０の上
面の周りに設けられているのは、埋め込み式の棚（rece
ssed ledge）２１であり、これは図２および図３でより
明らかに分かる。棚２１は、プレート２０の上面２２の
ウェルを囲んで縁取りを形成し、さらにそこで側壁４０
は棚の上に高くした位置まで伸び、それによって棚の周
辺にリム（rim ）を形成している。
面の周りに設けられているのは、埋め込み式の棚（rece
ssed ledge）２１であり、これは図２および図３でより
明らかに分かる。棚２１は、プレート２０の上面２２の
ウェルを囲んで縁取りを形成し、さらにそこで側壁４０
は棚の上に高くした位置まで伸び、それによって棚の周
辺にリム（rim ）を形成している。
【００３６】側壁４０は、上の区分４２および下の区分
４６を備えた２段階の区分から成る。下の区分４６は、
上と下の区分の間の環状肩部４４によって上の区分４２
から段状になったものである。それ故、上の区分４２
は、上面２２から環状肩部４４まで延びており、下の区
分４６は、環状肩部４４から下面２４の底面４８まで延
びている。
４６を備えた２段階の区分から成る。下の区分４６は、
上と下の区分の間の環状肩部４４によって上の区分４２
から段状になったものである。それ故、上の区分４２
は、上面２２から環状肩部４４まで延びており、下の区
分４６は、環状肩部４４から下面２４の底面４８まで延
びている。
【００３７】本発明のマルチウェル組織培養アセンブリ
が使用中のときは、下の区分４６は、プレート２０に対
して環状の基板として働く。
が使用中のときは、下の区分４６は、プレート２０に対
して環状の基板として働く。
【００３８】蓋５０は独立していて、プレートのウェル
の全てをカバーする取り外しできる部材である。図面の
全てに蓋５０が例示されているけれども、蓋５０の詳細
は、図３および図４に最もよく例示されている。蓋５０
は、プレートのウェルの全てをおおって広がるのに充分
に大きい、本質的に平らなカバー５２を有している。平
らなカバー５２は、上面５４および底面５６を有する。
カバー５２の形状は、プレート２０の形状に合致する。
最も好適なのは、図１に示したように、蓋５０は、使用
者がプレートをおおった蓋の位置を変えることを試みた
場合に、ウェルの間の相互汚染を減少させるために一つ
の方向でプレートの上面をおおって置かれるように形成
することである。
の全てをカバーする取り外しできる部材である。図面の
全てに蓋５０が例示されているけれども、蓋５０の詳細
は、図３および図４に最もよく例示されている。蓋５０
は、プレートのウェルの全てをおおって広がるのに充分
に大きい、本質的に平らなカバー５２を有している。平
らなカバー５２は、上面５４および底面５６を有する。
カバー５２の形状は、プレート２０の形状に合致する。
最も好適なのは、図１に示したように、蓋５０は、使用
者がプレートをおおった蓋の位置を変えることを試みた
場合に、ウェルの間の相互汚染を減少させるために一つ
の方向でプレートの上面をおおって置かれるように形成
することである。
【００３９】カバー５２の周りに延びた部分は、垂れ下
がったスカート（skirt ）５８であり、これは蓋５０の
周りに縁取りを形成する。スカート５８は、内壁面６０
および外壁面６２、ならびに各々がカバーから底止め面
（bottom stop surface ）６４まで下向きに延びている
６個の側面を有している。内部に向かって、スカート５
８から配列され、および平らなカバーの底面５６から下
向きに延びているのがリブ（rib ）６６である。かかる
リブは、本質的にスカート５８の各々の側面に対して平
行に横たわっており、プレート中の埋め込み式の棚２１
に下向きに付属するようにカバーの上に位置する。
がったスカート（skirt ）５８であり、これは蓋５０の
周りに縁取りを形成する。スカート５８は、内壁面６０
および外壁面６２、ならびに各々がカバーから底止め面
（bottom stop surface ）６４まで下向きに延びている
６個の側面を有している。内部に向かって、スカート５
８から配列され、および平らなカバーの底面５６から下
向きに延びているのがリブ（rib ）６６である。かかる
リブは、本質的にスカート５８の各々の側面に対して平
行に横たわっており、プレート中の埋め込み式の棚２１
に下向きに付属するようにカバーの上に位置する。
【００４０】図４に示したように、蓋５０がプレート２
０をおおって置かれるとき、スカート５８はプレートの
環状肩部４４に向かって延びており、それによって環状
肩部４４と底止め面６４のその間に空間６８が残る。そ
れ故、図４に示したように、スカート５８の内壁面６０
とプレートの側壁の上の区分４２との間に第２の空間７
０がある。
０をおおって置かれるとき、スカート５８はプレートの
環状肩部４４に向かって延びており、それによって環状
肩部４４と底止め面６４のその間に空間６８が残る。そ
れ故、図４に示したように、スカート５８の内壁面６０
とプレートの側壁の上の区分４２との間に第２の空間７
０がある。
【００４１】図１から図３に示したように、多数のオリ
フィス７２をカバー５２上に設置する。ガスに対して透
過性であり、液体に対して不透過性である膜７４は、図
１から図３に示したように各オリフィスと連結してい
る。カバーがプレートをおおって置かれるときに、オリ
フィスおよび膜がプレートの個々のウェルとそれぞれ連
結するように、オリフィスおよび連結した膜をカバー上
に配置する。
フィス７２をカバー５２上に設置する。ガスに対して透
過性であり、液体に対して不透過性である膜７４は、図
１から図３に示したように各オリフィスと連結してい
る。カバーがプレートをおおって置かれるときに、オリ
フィスおよび膜がプレートの個々のウェルとそれぞれ連
結するように、オリフィスおよび連結した膜をカバー上
に配置する。
【００４２】ガス透過性膜の材料は、試験プレートに酸
素および二酸化炭素のようなガスを自由に通過するけれ
ども、バクテリアおよび真菌のような微生物の通過を防
ぐ限りにおいて、任意の適当なガス透過性材料から作成
することができる。これらの材料としては、ポリエチレ
ン、ポリカーボネート、アクリル系コポリマーおよびポ
リテトラフルオロエチレンが含まれる。
素および二酸化炭素のようなガスを自由に通過するけれ
ども、バクテリアおよび真菌のような微生物の通過を防
ぐ限りにおいて、任意の適当なガス透過性材料から作成
することができる。これらの材料としては、ポリエチレ
ン、ポリカーボネート、アクリル系コポリマーおよびポ
リテトラフルオロエチレンが含まれる。
【００４３】図５に示したように、本発明の他の実施態
様としては、図１の構成要素と本質的に同一である多く
の構成要素を含んでいる。従って、同様の機能を果たす
同様の構成要素は、図５においてそれらの同様の構成要
素を同定するのに接尾辞“ａ”を用いることを除いて
は、図１におけるそれらの構成要素と全く同じに番号を
つける。
様としては、図１の構成要素と本質的に同一である多く
の構成要素を含んでいる。従って、同様の機能を果たす
同様の構成要素は、図５においてそれらの同様の構成要
素を同定するのに接尾辞“ａ”を用いることを除いて
は、図１におけるそれらの構成要素と全く同じに番号を
つける。
【００４４】図５に示されたように、任意的な剥ぎ取り
式の薄いフィルムのラベル（以下薄膜ラベルともいう）
７６は、カバー５２ａに取り外しできるように取り付け
られてオリフィス７２ａの膜７４ａを選択的に閉塞す
る。フィルムは、特定な培養の要求にしたがって、完全
にまたは部分的に取り外すか、あるいは置いたままにし
ておくことができる。
式の薄いフィルムのラベル（以下薄膜ラベルともいう）
７６は、カバー５２ａに取り外しできるように取り付け
られてオリフィス７２ａの膜７４ａを選択的に閉塞す
る。フィルムは、特定な培養の要求にしたがって、完全
にまたは部分的に取り外すか、あるいは置いたままにし
ておくことができる。
【００４５】慣用的な方法を用いて、カバーに対して剥
ぎ取り式の薄膜ラベルを適用する。これらの方法は、感
圧接着材料のような接着材料を含んでおり、そこで薄膜
ラベルは、必要に応じてカバーから完全にまたは部分的
に取り外すことが容易にでき、そして必要に応じて適用
することができる。薄膜ラベル材料はポリエチレンまた
はポリエチレンテレフタレートから作成してもよく、接
着材料はアクリル系接着剤を含んでなるものであっても
よい。
ぎ取り式の薄膜ラベルを適用する。これらの方法は、感
圧接着材料のような接着材料を含んでおり、そこで薄膜
ラベルは、必要に応じてカバーから完全にまたは部分的
に取り外すことが容易にでき、そして必要に応じて適用
することができる。薄膜ラベル材料はポリエチレンまた
はポリエチレンテレフタレートから作成してもよく、接
着材料はアクリル系接着剤を含んでなるものであっても
よい。
【００４６】図５に示したように、各剥ぎ取り式薄膜ラ
ベル７６は、円形であり、および使用しやすいようにつ
まみ７７を有する。円形の剥ぎ取り式薄膜を提供するこ
とは、本発明の範囲内であるけれども、異なる形状およ
び寸法にしてもよい。
ベル７６は、円形であり、および使用しやすいようにつ
まみ７７を有する。円形の剥ぎ取り式薄膜を提供するこ
とは、本発明の範囲内であるけれども、異なる形状およ
び寸法にしてもよい。
【００４７】図６に示したように本発明の他の実施態様
としては、図２の構成要素と本質的に同一である多くの
構成要素を含んでいる。従って、同様の機能を果たす同
様の構成要素は、図６においてそれらの同様の構成要素
を同定するのに接尾辞“ｂ”を用いることを除いては、
図２におけるそれらの構成要素と全く同じ番号をつけ
る。
としては、図２の構成要素と本質的に同一である多くの
構成要素を含んでいる。従って、同様の機能を果たす同
様の構成要素は、図６においてそれらの同様の構成要素
を同定するのに接尾辞“ｂ”を用いることを除いては、
図２におけるそれらの構成要素と全く同じ番号をつけ
る。
【００４８】図６に示すようにラベル７９は、アセンブ
リ１０ｂとともに使用できるラベルの他の実施態様であ
る。図６に示したように本発明のこの実施態様は、蓋５
０ｂの平面的な被覆表面の全体をカバーするラベル７９
である。
リ１０ｂとともに使用できるラベルの他の実施態様であ
る。図６に示したように本発明のこの実施態様は、蓋５
０ｂの平面的な被覆表面の全体をカバーするラベル７９
である。
【００４９】使用の際には、本発明は以下のように細胞
の培養に使用することができる。すなわち、 ａ．培養容器アセンブリから蓋を取り除き、 ｂ．培養容器内で細胞挿入部の膜の上に細胞の層を沈着
させ、 ｃ．細胞の層を成長培地で覆い、 ｄ．容器をおおって蓋を置き、そして ｅ．オリフィスをおおったラベルを取り外したりまたは
部分的に取り外したりおよび再び取り付けることによっ
て、培養容器の蓋のオリフィスを通って空気が押し入っ
て到達することができるようにして各細胞挿入部の膜を
直接的に換気する。
の培養に使用することができる。すなわち、 ａ．培養容器アセンブリから蓋を取り除き、 ｂ．培養容器内で細胞挿入部の膜の上に細胞の層を沈着
させ、 ｃ．細胞の層を成長培地で覆い、 ｄ．容器をおおって蓋を置き、そして ｅ．オリフィスをおおったラベルを取り外したりまたは
部分的に取り外したりおよび再び取り付けることによっ
て、培養容器の蓋のオリフィスを通って空気が押し入っ
て到達することができるようにして各細胞挿入部の膜を
直接的に換気する。
【００５０】当業者に理解されるように、本発明の培養
容器アセンブリは、単純な成形できる部品から作製する
ことができ、それは、例えば、ポリエチレン、ポリスチ
レン、ポリエチレンテレフタレートおよびポリプロピレ
ンを含む種々の材料から大量生産が可能である。さら
に、当業者に理解されるように、材料は、成長した培養
細胞を引き続き検査するのに、使用しやすいように僅か
な弾性度を与える物質を選ぶことが望ましい。
容器アセンブリは、単純な成形できる部品から作製する
ことができ、それは、例えば、ポリエチレン、ポリスチ
レン、ポリエチレンテレフタレートおよびポリプロピレ
ンを含む種々の材料から大量生産が可能である。さら
に、当業者に理解されるように、材料は、成長した培養
細胞を引き続き検査するのに、使用しやすいように僅か
な弾性度を与える物質を選ぶことが望ましい。
【００５１】
【発明の効果】以上のように、本発明により、培養容器
アセンブリを出入するガスの拡散を本質的に改善し、同
時にマルチウェルプレートの内容物の滅菌性を維持し、
かつウェルと外部の環境との間で充分なガス交換が起こ
るようにすることができる。さらに培養容器アセンブリ
は生物学的な汚染物、ガスおよび／または液体の出入り
を実質的に最低限にすることができ、細胞培養の条件に
最適な生物学的に密閉された環境を提供することができ
る。
アセンブリを出入するガスの拡散を本質的に改善し、同
時にマルチウェルプレートの内容物の滅菌性を維持し、
かつウェルと外部の環境との間で充分なガス交換が起こ
るようにすることができる。さらに培養容器アセンブリ
は生物学的な汚染物、ガスおよび／または液体の出入り
を実質的に最低限にすることができ、細胞培養の条件に
最適な生物学的に密閉された環境を提供することができ
る。
【図１】本発明のアセンブリの透視図である。
【図２】蓋を取り外した本発明のアセンブリの透視図で
ある。
ある。
【図３】図１の線３−３に沿って分けたアセンブリの断
面図である。
面図である。
【図４】図３のアセンブリの部分断面図を拡大した図で
ある。
ある。
【図５】各オリフィス（orifice ）をカバーするラベル
を有する本発明の他の実施態様に関する透視図である。
を有する本発明の他の実施態様に関する透視図である。
【図６】全ての蓋をカバーするラベルを有する本発明の
他の実施態様に関する透視図である。
他の実施態様に関する透視図である。
１０、１０ａ、１０ｂ 培養容器アセンブリ、装置 ２０ 培養容器プレート ２１ 埋め込み式棚 ２２ 上面 ２４ 下面 ２６ ウェル ２８ 側壁 ３０ 上部 ３２ 開放端、開口部 ３６ 底部 ３８ 閉塞端 ４０ 側壁 ４２ 上の区分 ４４ 環状肩部 ４６ 下の区分 ４８ 底面 ５０、５０ｂ 蓋 ５２、５２ａ カバー ５４ 上面 ５６ 底面 ５８ スカート ６０ 内壁面 ６２ 外壁面 ６４ 底止め面 ６６ リブ ６８ 空間 ７０ 第２の空間 ７２、７２ａ オリフィス、出入口（ポート） ７４、７４ａ 膜 ７６ 剥ぎ取り式薄膜ラベル ７７ つまみ ７９ ラベル
【手続補正書】
【提出日】平成１０年３月２７日
【手続補正１】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図２
【補正方法】変更
【補正内容】
【図２】
【手続補正２】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図４
【補正方法】変更
【補正内容】
【図４】
【手続補正３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図５
【補正方法】変更
【補正内容】
【図５】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (71)出願人 595117091 １ ＢＥＣＴＯＮ ＤＲＩＶＥ， ＦＲＡ ＮＫＬＩＮ ＬＡＫＥＳ， ＮＥＷ ＪＥ ＲＳＥＹ 07417−1880， ＵＮＩＴＥＤ ＳＴＡＴＥＳ ＯＦ ＡＭＥＲＩＣＡ (72)発明者 タデューズ エイ．ティンドルフ アメリカ合衆国 07226 ニュージャージ ー州 マナラパン サンドパイパー ドラ イブ ８ (72)発明者 スーザン エル．バーカー アメリカ合衆国 07670 ニュージャージ ー州 テナフライ ハイウッド アヴェニ ュ 152
Claims (10)
- 【請求項１】 試験プレートおよび該試験プレート上に
配置される取り外しできる蓋を備えたアセンブリであっ
て、前記試験プレートは組織培養培地または細胞培養挿
入部を受け入れるための開口部を有する複数のウェルお
よび前記プレートの外縁を形成する直立した側壁を有
し、 前記プレート上に置かれる取り外しできる蓋は、前記ウ
ェルをおおって広がった本質的に平らなカバーを備えて
おり、該カバーは上面、下面、および該カバーを包囲す
るスカートを備え、該スカートは前記カバー上の複数の
角部を形成し、かつ前記プレートの前記側壁から離隔し
て下向きに延びて、内面および外面を有する側壁を形成
し、 前記平らなカバーにおける複数のオリフィスはガス透過
性膜をそれぞれ備えており、前記オリフィスは前記試験
プレートの前記ウェルに位置合わせして配列されている
ことを特徴とするアセンブリ。 - 【請求項２】 前記アセンブリを出入りするガスの拡散
を補助できるように前記カバーに完全にまたは部分的に
取り外しできるように取り付けられかつ各オリフィスに
連結されたガス不透過性フィルムをさらに備えることを
特徴とする請求項１に記載のアセンブリ。 - 【請求項３】 前記プレートの前記側壁は上の区分およ
び下の区分を備えた２段階の区分から成ることを特徴と
する請求項１に記載のアセンブリ。 - 【請求項４】 前記側壁の前記下の区分は、環状肩部に
よって前記上の区分から段状になっており、前記蓋の前
記スカートは前記プレートの前記環状肩部に隣接した位
置に延びているが前記環状肩部と接触はせず、前記ウェ
ルはさらに、本質的に直交した列および行に配列してい
ることを特徴とする請求項３に記載のアセンブリ。 - 【請求項５】 前記プレートおよび前記蓋は透明なプラ
スチックから成ることを特徴とする請求項１に記載のア
センブリ。 - 【請求項６】 さらに、前記試験プレートは前記プレー
トの前記側壁から内方に離隔しかつ前記側壁と前記ウェ
ルの間に延びている棚を備えており、ここで前記側壁は
棚の上方位置まで延び、それによって前記棚の周辺にリ
ムを形成していることを特徴とする請求項１に記載のア
センブリ。 - 【請求項７】 上面と下面を備えている本質的に平らな
カバー、前記カバー上に複数の角部を形成し、かつ下向
きに延びて、内面および外面を有する側壁を形成する前
記カバーを包囲するスカート、 それぞれにガス透過性膜を備えている前記カバーにおけ
る複数のオリフィス、および、 前記オリフィスおよび前記ガス透過性膜のそれぞれをお
おった前記カバーに完全にまたは部分的に取り外しでき
るように取り付けたガス不透過性フィルムを備え、前記
ガス不透過性フィルムは剥ぎ取り式ラベルであり、前記
蓋はさらに、前記スカートから内方に離隔しており、か
つ前記カバーの前記下面から下向きに延びている複数の
フランジを備えていることを特徴とする組織培養プレー
トと関連して用いる蓋。 - 【請求項８】 本体および取り外しできる蓋を備える装
置であって、 前記本体は上面、下面、本質的に前記上面および下面の
間に配置された複数のウェル、前記本体の外縁を形成す
る直立した側壁を備え、前記取り外しできる蓋は上壁お
よび前記上壁から延びた周縁スカートおよび前記上壁に
おいて前記装置を出入するガスの拡散を許容する複数の
手段を備えており、該複数の手段は前記本体の前記ウェ
ルに位置合わせして配列していることを特徴とするイン
ビトロにおける細胞成長または組織培養のための装置。 - 【請求項９】 前記装置を出入するガスの拡散を許容す
る前記複数の手段は、複数のオリフィスおよび前記オリ
フィスに連結しかつ前記本体の前記ウェルに直接位置合
わせして配列したガス不透過性フィルムであり、前記装
置はさらに前記オリフィスをおおって前記カバーに対し
て取り外しできるように取り付けられた複数のガス不透
過性フィルムを備え、それにより前記装置においてガス
の拡散を補助するように前記フィルムを完全にまたは部
分的に取り外すことができ、さらに前記本体の側壁は上
の区分および下の区分から成る２段階の区分ならびに環
状肩部を備え、前記下の区分は前記環状肩部によって前
記上の区分から段状になっていることを特徴とする請求
項８に記載の装置。 - 【請求項１０】 下記工程を備えることを特徴とする細
胞培養方法： （ａ）組織培養培地を受け入れるための開口部を有する
複数のウェルおよび当該プレートの外縁を形成する直立
した側壁を備える試験プレート、 前記プレート上に取り外しできるように置かれ、前記ウ
ェルをおおって広がる本質的に平らなカバーを備える
蓋、 前記カバーの複数の角部を形成し、かつ下向きに延びて
内面および外面を有する側壁を形成する該カバーを包囲
するスカート、 ガス透過性膜をそれぞれ備え、前記プレートの前記ウェ
ルに直接配列する前記平らなカバーにおける複数のオリ
フィス、および前記オリフィスに連結し前記膜をカバー
する取り外しできるラベルを備える培養容器を用意し、 （ｂ）前記培養容器から前記蓋を取り外し、 （ｃ）前記培養容器の前記ウェル内に、膜を備える細胞
挿入部を置き、 （ｄ）前記培養容器内の前記細胞挿入部のそれぞれの膜
の上に細胞の層を沈着し、 （ｅ）細胞の層を成長培地で覆い、 （ｆ）前記ウェルをカバーするために前記プレートの上
に前記蓋を置き、 （ｇ）前記オリフィスをおおった前記ラベルを完全にま
たは部分的に取り外し、再び取り付けることで、前記培
養容器の前記蓋におけるオリフィスを通って空気が押し
入って到達することができるようにすることにより、細
胞挿入部の膜を直接的に換気する。
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