JPH10262651A - シアン化合物分解菌 - Google Patents
シアン化合物分解菌Info
- Publication number
- JPH10262651A JPH10262651A JP9078620A JP7862097A JPH10262651A JP H10262651 A JPH10262651 A JP H10262651A JP 9078620 A JP9078620 A JP 9078620A JP 7862097 A JP7862097 A JP 7862097A JP H10262651 A JPH10262651 A JP H10262651A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- strain
- cyanide
- cells
- nickel
- complex
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Fire-Extinguishing Compositions (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
Abstract
新菌株フザリウム オキシスポルム(Fusarium oxyspor
um) N-10株、及び該菌株を用いたシアン化合物の処理方
法。 【効果】 シアン錯体等のシアン化合物の微生物による
効率的な分解除去が可能になる。
Description
する糸状菌で、シアン化合物、特にニッケルシアン錯体
に対して顕著な分解活性を有する、新規な微生物及びそ
の用途に関する。
の重金属による土壌・水質汚染が問題となっている。従
来から、このような土壌・水質汚染を微生物により分解
除去しようとするバイオレメディエーションの多数の試
みがなされている。しかしながら、シアン化合物は土壌
および水中で金属イオンと安定なシアン錯体を形成して
存在していることが多く、かかるシアン錯体を効率的に
分解できる微生物は未だ見出されていない。
ン化合物、とりわけシアン錯体に対して顕著な分解活性
を有する微生物を提供することにある。
を解決すべく、シアン錯体を分解できる微生物を日本各
地の土壌を対象としてスクリーニングした結果、ニッケ
ルシアン錯体をはじめ、遊離シアン、ニトリル類を含む
シアン化合物に優れた分解性を発揮する新規糸状菌、フ
ザリウム オキシスポルム N-10 株を分離することに成
功し、本発明を完成した。
解活性を有する新菌株フザリウムオキシスポルムN-10株
である。また、本発明は、上記の菌株を用いてシアン化
合物を分解することを特徴とするシアン化合物の処理方
法である。本発明者らは、シアン化合物に対して分解活
性を有する新菌株フザリウム オキシスポルム N-10株
を次のようにして分離した。
し、0.5mM のニッケルシアン錯体を窒素源とし、0.25%
のグルコースを炭素源とした合成無機培地(表1)を用
い、その5ml を含むガラス試験管に土壌試料を懸濁して
綿栓を施し、30℃で振盪培養を行った。約5日間の培養
後、その一部を同組成の培養液に植菌してさらに5日間
培養を行った。このような集積培養を5回程度繰り返し
た後、平板培地上でコロニーを形成させ、コロニーより
目的とする菌を純粋単離した。
性は、培養終了物中に残存する同錯体濃度を測定し、比
較した。この分解率の比較により、最も分解率の高いフ
ザリウム オキシスポルム N-10 株を選出した。
下の通りである。 〔1〕 培養的・形態的性質 (1) 生育速度(ポテトデキストロース寒天平板培地, 2
5℃, 4 日間) : コロニーの直径 44 〜46 mm (2) 集落表面の色調(ポテトデキストロース寒天平板
培地):白色〜赤色がかった白色 (3) 集落裏面の色調(ポテトデキストロース寒天平板
培地):赤色がかった灰色 集落裏面の色調(カーネーションリーフ寒天平板培
地):オレンジがかった白色〜白色 以下、(4) 〜(9) はカーネーションリーフ寒天平板培地
上での性状を示す。
円形、表面は羊毛状、束状、周囲は全縁 (5) スポロドキア : 形成する (6) 分生子形成細胞 : アンプル形のフィアライド 10
〜32×2 〜3 μm (7) 大型分生子 : 湾曲した流線形, 隔壁3〜5個,2
1〜35×3 〜4 μm (8) 小型分生子 : 豊富に形成, 楕円形〜円筒形, 直
線状, 湾曲, 隔壁0〜1個,集塊状に形成,6〜12×2
〜4 μm (9) 厚膜胞子 : 形成する(頂生、間生) 分生子形成細胞、および分生子の顕微鏡観察結果を図1
に示す。 〔2〕 生理学的性質 (1) 最適生育条件 温度20〜30℃ pH6.5〜7.5 (2) 生育の範囲 温度15〜35℃ pH 5 〜8 以上の菌学的諸性質から、本菌株は、楕円形の小型分生
子を形成し、厚膜胞子をよく形成するという点におい
て、フザリウム オキシスポルムと同定した。また、ニ
ッケルシアン錯体を窒素源として生育するものはいまま
でに知られていないことから、本菌株を、フザリウム
オキシスポルムの新菌株として、フザリウム オキシス
ポルム N-10 株と命名した。
究所に寄託番号FERM P-16160として寄託されている(寄
託日平成9年3月27日)。本菌株の培養には、通常の微
生物の培養に使用される炭素源、窒素源、無機物を含む
各種培地を使用することができる。炭素源としては、例
えばグルコース、フラクトース、デンプン等の各種糖
類、窒素源としては、酵母エキス、肉エキス、ペプト
ン、各種アミノ酸等の有機窒素類、また硝酸アンモニウ
ム、硫酸アンモニウム等の各種無機窒素である。炭素
源、窒素源とも、単独または組合わせて用いられる。そ
の他の無機物として、リン、ナトリウム、カリウム、カ
ルシウム、微量金属類等、必要に応じて添加する。
工場廃液などの処理に使用することができる。上記処理
は、本菌株の菌体、菌体処理物、またそれらの固定化物
で用いて行うことができる。菌体とは、本菌株を培地に
培養し、その培養物の中から回収した菌体自体をいい、
生細胞、凍結物、または凍結乾燥物のいずれでも良い。
また、菌体処理物とは、菌体破砕物、または培養物(菌
体、培養上清を含む)からの抽出物をいう。また、固定
化物とは、該菌体または菌体処理物を担体等に固定化し
たものをいう。
るシアン化合物の分解 (1) 高濃度ニッケルシアン錯体の分解 フザリウム オキシスポルムN-10株(以下、N-10株とい
う)による高濃度ニッケルシアン錯体の分解を検討し
た。
0 から50mMの範囲で添加する以外は表1と同組成の合成
無機培地でN-10株を30℃で振盪培養し、N-10株の菌体の
生育と培養液中の残存基質量を経時的に測定した。生育
は培養液の濁度の増加を610nm の吸光度の上昇として測
定した。基質の分解は表2に示す条件下で高速液体クロ
マトグラフィーを用いて測定した。結果を図2および3
に示す。 N-10 株は20mM (約5000ppm)の高濃度において
も速やかに生育し、10mMのニッケルシアン錯体を1週間
の培養で分解した。
ついて検討した。
してシアン化カリウムを初発濃度を1mM で添加した合成
無機培地(表1)にてN-10株を30℃で振盪培養し、48時
間毎に1mM のシアン化カリウムを添加して菌体の生育を
観察した。結果を図4に示す。N-10株は最終的に250ppm
のシアン化カリウムの添加に同調して生育したことか
ら、本菌が遊離シアンを窒素源として旺盛に生育でき、
遊離シアン分解活性を有することが確認された。
否かについて検討した。ニッケルシアン錯体の代わり
に、窒素源としてニトリル化合物を0.2%になるように添
加した合成無機培地(表1)にてN-10株を30℃で振盪培
養し、菌株の生育を観察した。結果を図5に示す。N-10
株はアセトニトリル、プロピオニトリル、ブチロニトリ
ル、サクシニトリルなどの脂肪族ニトリル、ベンゾニト
リルなどの芳香族ニトリルを窒素源として生育できるこ
とが明らかとなった。
アン錯体を窒素源とした結果も併せて図5に示す。 〔実施例2〕 N-10 株による金属シアン錯体分解代謝物
の分析 (1) N-10 株の休止菌体を用いたニッケルシアン錯体と
遊離シアンの分解1mM のニッケルシアン錯体を含む合成
無機培地(表1)で48時間生育させたN-10株を集菌した
後、100mM のリン酸カリウム緩衝液(pH7.0) で洗菌し
た。休止菌体反応(1.0ml) は、10mMニッケルシアン錯体
またはシアン化カリウム、100mM リン酸緩衝液(pH7.0)
、N-10株休止菌体(湿重量:0.26mg) からなる反応液
中で30℃で攪拌した。経時的に試料を採取し、反応生成
物として推定されるホルムアミドはGC分析(表3)に
より、アンモニアはアンモニアテストワコーによる比色
定量により、ギ酸はベーリンガー・マンハイム社のF−
キットを用いた定量により、それぞれ測定した。
ルムアミド、ギ酸、およびアンモニアが生成された(図
6)。N-10株休止菌体は、24時間で1200ppm のニッケル
シアン錯体を分解する高性能分解菌であった。一方、N-
10株の10mM(600ppm)のシアン化カリウムからのホルミア
ミドへの分解活性は極めて高く、菌体との反応によりシ
アン化カリウムは瞬時に変換された。変換されたホルム
アミドの減少に伴い、ギ酸およびアンモニアが生成され
た(図7)。以上のように、高い毒性を有する遊離型シ
アンに対してもN-10株休止菌体は、24時間で600ppmのシ
アンを完全にギ酸とアンモニアに分解する高性能菌であ
った。
液を用いたニッケルシアン錯体と遊離シアンの分解 1mM のニッケルシアン錯体を含む合成無機培地(表1)
で48時間生育させたN-10株を集菌し、菌体を100mM のリ
ン酸カリウム緩衝液(pH7.0) で洗菌した。1gの洗浄菌体
に対し、1.5gの海砂と2ml の100mM リン酸カリウム緩衝
液(pH7.0, 1mM2-メルカプトエタノールを含む) を添加
して、氷冷しつつ乳鉢中で破砕した。得られた破砕液の
1000rpm 遠心分離上清を無細胞抽出液とした。酵素反応
(1.0ml)は、10mMニッケルシアン錯体またはシアン化カ
リウム、100mM リン酸緩衝液(pH7.0)、無細胞抽出液
(1.4mg protein) からなる反応液中で30℃で行った。
経時的に試料を採取し、反応生成物として推定されるホ
ルムアミド、アンモニア、ギ酸をそれぞれ(1) と同様に
して定量分析した。
解に伴い、ホルムアミド、ギ酸、およびアンモニアが生
成された(図8)。シアン化カリウムの場合では、10mM
(600ppm) のシアン化カリウムからのホルムアミドへの
分解活性は極めて高く、シアン化カリウムは瞬時に変換
された。変換されたホルムアミドの減少に伴い、ギ酸お
よびアンモニアが生成された(図9)。
アン化合物に対して顕著な分解活性を有するため、この
微生物を種々の方法で培養し、種々の形態で利用するこ
とにより、シアン化合物がもたらす土壌・水質汚染の微
生物による効率的な分解除去が可能になる。
分生子(写真2)の顕微鏡写真である。
10株の生育を示す図である。
解を示す図である。
育を示す図である。
生育を示す図である。
錯体の分解を示す図である。
ムの分解を示す図である。
アン錯体の分解を示す図である。
リウムの分解を示す図である。
Claims (3)
- 【請求項1】 シアン化合物に対して分解活性を有する
新菌株フザリウムオキシスポルム(Fusarium oxysporu
m) N-10株。 - 【請求項2】 請求項1記載の菌株を用いてシアン化合
物を分解することを特徴とするシアン化合物の処理方
法。 - 【請求項3】 菌株の菌体、菌体処理物、またはそれら
の固定化物を用いることを特徴とする請求項2記載のシ
アン化合物の処理方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07862097A JP3685583B2 (ja) | 1997-03-28 | 1997-03-28 | シアン化合物分解菌 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07862097A JP3685583B2 (ja) | 1997-03-28 | 1997-03-28 | シアン化合物分解菌 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10262651A true JPH10262651A (ja) | 1998-10-06 |
| JP3685583B2 JP3685583B2 (ja) | 2005-08-17 |
Family
ID=13666942
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP07862097A Expired - Fee Related JP3685583B2 (ja) | 1997-03-28 | 1997-03-28 | シアン化合物分解菌 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3685583B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000035816A1 (en) * | 1998-12-14 | 2000-06-22 | Billiton Sa Limited | Biodegradation of thiocyanate and cyanide |
| JP2002078499A (ja) * | 2000-06-21 | 2002-03-19 | Tokyo Gas Co Ltd | 化合物を分解する生物を検出する方法 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100279387A1 (en) | 2007-10-22 | 2010-11-04 | Showa Denko K.K. | Method for remediation of soil containing cyanogen compound, and microorganism for use in the remediation method |
-
1997
- 1997-03-28 JP JP07862097A patent/JP3685583B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000035816A1 (en) * | 1998-12-14 | 2000-06-22 | Billiton Sa Limited | Biodegradation of thiocyanate and cyanide |
| JP2002078499A (ja) * | 2000-06-21 | 2002-03-19 | Tokyo Gas Co Ltd | 化合物を分解する生物を検出する方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3685583B2 (ja) | 2005-08-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4529697A (en) | Process for producing L-glutamic acid by fermentation | |
| Yanase et al. | Degradation of the metal-cyano complex tetracyanonickelate (II) by Fusarium oxysporum N-10 | |
| JP2001037469A (ja) | エピクロロヒドリンの微生物分解 | |
| US4274955A (en) | Process for the degradation of cyanuric acid | |
| KR0150465B1 (ko) | 발효법에 의한 아미노산의 제조법 | |
| KR100339723B1 (ko) | 미생물을사용한아미드화합물의제조방법 | |
| US4492756A (en) | Microorganisms of the genus Hyphomicrobium and process for degrading compounds wich contain methyl groups in aqueous solutions | |
| JPH0338836B2 (ja) | ||
| JPH10262651A (ja) | シアン化合物分解菌 | |
| US20030124691A1 (en) | Method for producing amide compounds | |
| CN1260004A (zh) | 大量产生ε-聚-L-赖氨酸的菌株和生产方法 | |
| US3630842A (en) | Production of 3{40 ,5{40 -cyclic adenylic acid with micro-organisms | |
| US5116752A (en) | Process for preparing neuraminidase | |
| JP4626930B2 (ja) | シアン化合物分解微生物 | |
| KR0134131B1 (ko) | 세파로스포린 c를 생산하는 미생물 및 이를 이용한 세파로스포린 c의 제조방법 | |
| JPH0767619A (ja) | 高親和性細菌のスクリーニング方法及びフェノール高親和性細菌 | |
| US4699883A (en) | Process for producing N-acylneuraminate aldolase | |
| WO2007010855A1 (ja) | 微生物によるn-アセチル-d-グルコサミンの醗酵生産方法 | |
| KR100463115B1 (ko) | 당질전분폐수의 생물학적 처리 방법 및 미생물 | |
| KR0146493B1 (ko) | 발효법에 의한 l-알라닌의 제조 방법 | |
| CA1310925C (en) | Quality improvement of alcoholic liquors | |
| JPH02100674A (ja) | 細菌の培養法 | |
| JPH07107967A (ja) | 新規微生物 | |
| KR830001259B1 (ko) | 미생물에 의한 l-글루타민의 제조방법 | |
| KR960004037B1 (ko) | 세팔로스포린 c를 생산하는 미생물 및 이를 이용한 세팔로스포린 c의 제조방법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050222 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20050421 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20050524 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20050531 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080610 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090610 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100610 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100610 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110610 Year of fee payment: 6 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |