JPH10274637A - 蛍光画像可視化装置 - Google Patents
蛍光画像可視化装置Info
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Abstract
た試料の電気泳動画像を可視化することのできる蛍光画
像可視化装置を提供することを、その課題とするもので
ある。 【解決手段】 本発明によれば、この課題は、複数の青
色LED2(発光ダイオード)を備えた青色LEDアレ
イ3と、青色LEDアレイ上に位置し、蛍光物質により
標識され、電気泳動させられた試料を含むゲル5を載置
可能な拡散部材4を備えた蛍光画像可視化装置1によっ
て解決される。
Description
装置に関するものであり、さらに詳細には、安全に、蛍
光物質により標識された試料の電気泳動画像を可視化す
ることのできる蛍光画像可視化装置に関するものであ
る。
検出(fluorescence) システムが知られている。この蛍
光検出システムによれば、蛍光画像の読み取ることによ
って、遺伝子配列、遺伝子の発現レベル、蛋白質の分
離、同定、あるいは、分子量、特性の評価などをおこな
うことができ、たとえば、電気泳動させるべき複数のD
NA断片を含む溶液中に、蛍光色素を加えた後に、複数
のDNA断片をゲル支持体上で電気泳動させ、あるい
は、蛍光色素を含有させたゲル支持体上で、複数のDN
A断片を電気泳動させ、あるいは、複数のDNA断片
を、ゲル支持体上で、電気泳動させた後に、ゲル支持体
を蛍光色素を含んだ溶液に浸すなどして、電気泳動され
たDNA断片を標識し、励起光により、蛍光色素を励起
して、生じた蛍光を検出することによって、画像を生成
し、ゲル支持体上のDNAを分布を検出したり、あるい
は、複数のDNA断片を、ゲル支持体上で、電気泳動さ
せた後に、DNAを変性(denaturation) し、次いで、
サザン・ブロッティング法により、ニトロセルロースな
どの転写支持体上に、変性DNA断片の少なくとも一部
を転写し、目的とするDNAと相補的なDNAもしくは
RNAを蛍光色素で標識して調製したプローブと変性D
NA断片とをハイブリダイズさせ、プローブDNAもし
くはプローブRNAと相補的なDNA断片のみを選択的
に標識し、励起光により、蛍光色素を励起して、生じた
蛍光を検出することにより、画像を生成し、転写支持体
上の目的とするDNAを分布を検出したりすることがで
きる。さらに、標識物質により標識した目的とする遺伝
子を含むDNAと相補的なDNAプローブを調製して、
転写支持体上のDNAとハイブリダイズさせ、酵素を、
標識物質により標識された相補的なDNAと結合させた
後、蛍光基質と接触させて、蛍光基質を蛍光を発する蛍
光物質に変化させ、励起光によって、生成された蛍光物
質を励起して、生じた蛍光を検出することにより、画像
を生成し、転写支持体上の目的とするDNAの分布を検
出したりすることもできる。この蛍光検出システムは、
放射性物質を使用することなく、簡易に、遺伝子配列な
どを検出することができるという利点がある。
より標識された試料をゲル上で電気泳動させ、得られた
画像を観察し、特定の目的物質が分布した部分を切り出
したり、吸い出したりして、取り出し、さらに処理を加
えて、種々の分析をする場合がある。そのような場合、
従来は、365nmや315nmの波長の紫外線を電気
泳動させた試料に照射して、電気泳動画像を可視化し
て、目視により観察し、目的物質が分布したバンド部分
を見い出して、メスで切り出したり、吸い出したりし
て、取り出すのが一般であった。
ーザーが紫外線に被爆することは避けられないという問
題があった。したがって、本発明は、安全に、蛍光物質
により標識された試料の電気泳動画像を可視化すること
のできる蛍光画像可視化装置を提供することを目的とす
るものである。
複数の青色LED(発光ダイオード)を備えた青色LE
Dアレイ基板と、前記青色LEDアレイ基板上に位置
し、蛍光物質により標識され、電気泳動させられた試料
を含むゲルを載置可能な拡散部材を備えた蛍光画像可視
化装置によって達成される。本発明によれば、試料を標
識している蛍光物質は、青色LEDから発せられたたと
えば、450nmの波長の光により励起され、蛍光画像
を可視化することが可能になるから、紫外線に被爆する
おそれはなく、安全に、蛍光物質によって標識された試
料の電気泳動画像を可視化して、目的物質が分布したバ
ンド部分を見い出して、メスにより切り出したり、吸い
出したりして、取り出し、さらに処理を加えて、目的物
質を分析することが可能になる。
D(発光ダイオード)を備えた青色LEDアレイ基板
と、前記青色LEDアレイ基板上に位置し、試料を電気
泳動させることのできるゲルを収容可能な電気泳動槽を
載置可能な拡散部材を備えた蛍光画像可視化装置によっ
て達成される。本発明によれば、その場で、試料を電気
泳動させ、試料の電気泳動画像を可視化して、目的物質
が分布したバンド部分を見い出して、メスによって切り
出したり、吸い出したりして、取り出し、さらに処理を
加えて、目的物質を分析することが可能になる。
光画像可視化装置は、さらに、CCDカメラを備えてい
る。本発明の好ましい実施態様によれば、試料の電気泳
動画像を、冷却CCDカメラにより、CRTなどの表示
手段上に、可視化して、目的物質が分布したバンド部分
を見い出して、メスによって切り出したり、吸い出した
りして、取り出し、さらに処理を加えて、目的物質を分
析することが可能になる。本発明において、試料を標識
するために使用可能な蛍光色素は、青色LEDによって
励起され、蛍光を発する蛍光色素であれば、とくに限定
されるものではなく、たとえば、Fluorescein (C.I. N
o. 45350) 、構造式(1) で示されるFluorescein-X 、構
造式(2) で示される YOYO-1 、構造式(3) で示される T
OTO-1 、構造式(4) で示される YO-PRO-1 、構造式(5)
で示されるCy-3(登録商標)、構造式(6) で示されるNi
le Red、構造式(7) で示されるBCECF 、構造式(8) で示
される Cy-5 (登録商標)、構造式(9) で示される Eth
idium Bromide 、構造式(10)で示されるTexas Red 、構
造式(11)で示される Propidium Iodide 、構造式(12)で
示される POPO-3 、Rhodamine 6G (C.I. No. 45160)、
SYBR Green(C2H6OS)、Acridine Orange (C.I. No. 46
005) 、Quantum Red 、R-Phycoerythrin、Red 613 、R
ed 670 、Fluor X 、Fluorescein 標識アミダイト、FAM
、AttoPhos、Bodipy phosphatidylcholine、SNAFL 、C
alcium Green 、Fura Red、Fluo 3、AllPro、NBD phosp
hoethanolamine 、Carboxyrhodamine (R6G)、JOE 、HEX
、Ethidium homodimer、Lissamine rhodamine B pepti
de 、Allphycocyaninなどが挙げられる。
明にかかる好ましい実施態様につき、詳細に説明を加え
る。図1は、本発明の好ましい実施態様にかかる蛍光画
像可視化装置の略分解図であり、図2はその略斜視図で
ある。図1および図2において、蛍光画像可視化装置1
は、複数の青色LED2を備えた青色LEDアレイ基板
3と、青色LEDアレイ基板3上に載置されたバンドパ
スフィルタ4と、オパールガラス、白濁させたアクリル
などにより形成された拡散板5と、拡散板5上に載置さ
れた透明カバーガラス6を備えている。透明カバーガラ
ス6上には、電気泳動させられ、蛍光色素によって標識
された試料を含むゲル7が載置されている。ここに、バ
ンドパスフィルタ4は、蛍光画像のコントラストを向上
させるために設けられ、また、透明カバーガラス6は、
目的物質のバンド部分を、メスなどにより切り取る場合
に、拡散板5が傷つけられるのを防止するために設けら
れている。
置1をやや暗い環境下に置き、青色LEDアレイ基板3
の複数の青色LED2をオンさせると、複数の青色LE
D2から青色の光が発せられ、バンドパスフィルタ4を
透過した青色の光は、拡散板5を透過することにより無
指向性の光とされて、透明カバーガラス6を介して、ゲ
ル7に入射する。ゲル7には、電気泳動させられた後、
蛍光色素によって標識された試料のバンド8が形成され
ており、ゲル7に入射したたとえば450nmの波長の
光によって、蛍光色素が励起され、バンド8から蛍光が
発せられる。この蛍光は目視により観察可能であり、こ
うして、試料の電気泳動画像を可視化することができ
る。この場合、ユーザーが青色LED2から発せられる
励起光の波長の光をカットするサングラスなどを着用す
ると、蛍光色素から発せられた光の光量が小さくとも、
バンド8を目視することができる。本実施態様によれ
ば、安全に、ゲル7上で電気泳動させられ、蛍光色素に
よって標識された試料のバンド8を目視することがで
き、目的物質が分布したバンド部分を見い出して、メス
で切り出したり、吸い出したりして、取り出し、さらに
処理を加えて、目的物質を分析することが可能になる。
かかる蛍光画像可視化装置の略斜視図である。図3に示
されるように、本発明の別の好ましい実施態様にかかる
蛍光画像可視化装置1は、複数の青色LED2を備えた
青色LEDアレイ基板3と、青色LEDアレイ基板3上
に載置されたバンドパスフィルタ4と、拡散板5と、拡
散板5上に載置された透明カバーガラス6を備えてい
る。本実施態様においては、透明カバーガラス6上に、
電極10、11を備えた電気泳動槽12が載置され、電
気泳動槽12内には、ゲル7がセットされており、ゲル
57で、蛍光色素によって標識された試料を電気泳動す
ることができるように構成されている。
置き、電極10、11を通じて、ゲル7に電圧を加え、
試料を電気泳動槽12内のゲル7上で電気泳動させる。
その後、青色LEDアレイ基板3の複数の青色LED2
をオンさせ、前記実施態様と全く同様にして、試料の電
気泳動画像を可視化し、観察して、目的物質が分布した
バンド部分を見い出し、メスにより切り出したり、吸い
出したりして、取り出して、さらに処理を加え、目的物
質を分析する。本実施態様によれば、その場で、試料を
電気泳動させ、試料の電気泳動画像を可視化することが
可能になる。
光画像可視化装置を含む画像生成装置の略正面図であ
る。図4において、画像生成装置は、撮像装置20、蛍
光画像可視化装置が設けられた暗箱21およびパーソナ
ルコンピュータ22を備えている。パーソナルコンピュ
ータ22は、CRT23とキーボード24を備えてい
る。図5は、本発明の他の実施態様にかかる撮像装置2
0の略縦断面図である。図5に示されるように、撮像装
置20は、CCD25と、アルミニウムなどの金属によ
って作られた伝熱板26と、CCD25を冷却するため
のペルチエ素子27と、CCD25の前面に配置された
シャッタ28と、CCD25が生成したアナログ画像デ
ータをディジタル画像データに変換するA/D変換器2
9と、A/D変換器29によってディジタル化された画
像データを一時的に記憶する画像データバッファ30
と、撮像装置20の動作を制御するカメラ制御回路31
とを備えている。暗箱21との間に形成された開口部
は、ガラス板32によって閉じられており、撮像装置2
0の周囲には、ペルチエ素子27が発する熱を放熱する
ための放熱フィン33が、長手方向のほぼ1/2にわた
って形成されている。撮像装置20に設けられたガラス
板32の前面には、暗箱21内に配置されたイメージ・
インテンシファイア34が設けられ、イメージ・インテ
ンシファイア34の前面には、カメラレンズ35が取付
けられている。
6に示されるように、暗箱21内には、たとえば、45
0nmの励起光を発する複数の青色LEDを備えた青色
LEDアレイ基板43と、青色LEDアレイ基板43上
に載置されたバンドパスフィルタ44と、オパールガラ
ス、白濁させたアクリルなどにより形成された拡散板4
5と、拡散板45上に載置された透明カバーガラス46
を備えている。透明カバーガラス46上には、電気泳動
させられ、蛍光色素により標識された試料を含むゲル4
7が載置されている。カメラレンズ35の前面には、複
数の青色LEDから発せられる励起光の波長の光をカト
するフィルタ36が取付けられている。
辺のブロックダイアグラムであり、図7に示されるよう
に、パーソナルコンピュータ22は、撮像装置20の露
出を制御するCPU50と、撮像装置1の生成した画像
データを画像データバッファ30から読み出す画像デー
タ転送手段51と、画像データ転送手段51によって読
み出された画像データに画像処理を施し、画像データ記
憶手段52に記憶させる画像処理手段53と、画像デー
タ記憶手段52に記憶された画像データに基づいて、C
RT23の画面上に可視画像を表示する画像表示手段5
4とを備えている。複数の青色LED42は、光源制御
手段55により制御されており、光源制御手段55に
は、キーボード24から、CPU50を介して、指示信
号が入力されるように構成されている。CPU50は、
撮像装置20のカメラ制御回路31に種々の信号を出力
可能に構成されている。
ード24を介して、レンズフォーカス調整信号を入力す
ると、CPU50は、カメラ制御回路31にレンズフォ
ーカス調整モード制御信号を出力し、レンズフォーカス
調整モード制御信号を受けると、カメラ制御回路31
は、読み出し制御回路(図示せず)を制御して、所定時
間毎に、CCD25が電荷の形で蓄積した画像データ
を、A/D変換器29に出力させるように構成されてい
る。蛍光画像の読み取りにあたっては、まず、ユーザー
によって、透明カバーガラス46上に、ゲル47が載置
され、カメラレンズ16が操作されて、レンズフォーカ
スが調整される。レンズフォーカス合わせが完了する
と、暗箱21が閉じられる、その後、ユーザーが、キー
ボード24に露出開始信号を入力すると、光源制御手段
55により、複数の青色LED42光源がオンされて、
ゲル47に向けて、励起光が発せられる。同時に、露出
開始信号は、CPU30を介して、撮像装置20のカメ
ラ制御回路31に入力され、カメラ制御回路31によっ
て、シャッタ28が開かれ、CCD25の露出が開始さ
れる。
光色素によって標識された試料のバンドが形成されてお
り、複数の青色LED42から励起光が照射されると、
蛍光色素から蛍光が発せられる。蛍光色素から発せられ
た蛍光は、フィルタ36およびカメラレンズ35を介し
て、イメージ・インテンシファイア34の蛍光面に入射
し、画像を形成する。CCD25は、こうして、イメー
ジ・インテンシファイア34の蛍光面に形成された画像
の光を受け、これを電荷の形で蓄積する。フィルタ36
によって、励起光の波長の光がカットされるため、ゲル
47の蛍光色素から発せられた蛍光のみが、撮像装置2
0のCCD25によって受光される。所定の露出時間が
経過すると、CPU50は、撮像装置20のカメラ制御
回路31に露出完了信号を出力する。カメラ制御回路3
1は、CPU50から露出完了信号を受けると、CCD
25が電荷の形で蓄積したアナログ画像データをA/D
変換器29に転送して、ディジタル化させ、画像データ
バッファ30に一時的に記憶させる。同時に、CPU5
0は、画像データ転送手段51にデータ転送信号を出力
し、撮像装置20の画像データバッファ30に一時的に
記憶されたディジタル画像データを読み出させ、画像処
理手段53に入力させる。画像処理手段53は、画像デ
ータ転送手段51から入力された画像データに画像処理
を施し、画像データ記憶手段52に記憶させる。
生成信号を入力すると、画像表示手段55により、デー
タ記憶手段53に記憶された画像データが読み出され、
読み出された画像データに基づいて、CRT23の画面
上に、試料のバンドからなる蛍光画像が表示される。本
実施態様によれば、試料の電気泳動画像を、CCD25
を含む撮像装置20により、CRT23の画面上に、可
視化して、目的物質が分布したバンド部分を見い出し
て、メスによって切り出したり、吸い出したりして、取
り出し、さらに処理を加えて、目的物質を分析すること
が可能になる。本発明は、以上の実施態様に限定される
ことなく、特許請求の範囲に記載された発明の範囲内で
種々の変更が可能であり、それらも本発明の範囲内に包
含されるものであることがいうまでもない。
態様においては、電気泳動された試料の電気泳動画像
を、撮像装置20により、CRT24の画面上に可視化
しているが、図3に示された実施態様と同様に、透明カ
バーガラス46上に、電気泳動槽を載置して、電気泳動
槽内にセットしたゲル上で、試料を電気泳動させ、試料
の電気泳動画像を可視化して、目的物質が分布した部分
を見い出し、切り出したり、吸い出したりして、取り出
して、さらに処理を加え、目的物質を分析するようにし
てもよい。また、前記実施態様においては、試料の電気
泳動画像を可視化して、目的物質が分布した部分を見い
出し、切り出したり、吸い出したりして、取り出して、
さらに処理を加え、目的物質を分析するように構成され
ているが、単に、試料の電気泳動画像を可視化するのみ
でもよい。
パスフィルタ4、44を設けているが、バンドパスフィ
ルタ4は必ずしも必要がない。また、前記実施態様にお
いては、透明カバーガラス6、46が拡散板5、45上
に設けられているが、拡散板5、45が傷つきにくい材
料により作られているときは、透明カバーガラス6、4
6を設ける必要はない。さらに、図4ないし図7に示さ
れた実施態様においては、イメージ・インテンシファイ
ア34が設けられているが、イメージ・インテンシファ
イア34を設けることは必ずしも必要がない。また、図
4ないし図7に示された実施態様においては、撮像装置
20は、CCD25を冷却するためのペルチエ素子27
や、撮像装置20の周囲にペルチエ素子27が発する熱
を放熱するための放熱フィン33を備えているが、青色
LED2、42から発せられた光により励起された試料
を標識した蛍光色素が発する蛍光は、それほど、微弱な
光ではないので、ペルチエ素子27や放熱フィン33を
設けることは必ずしも必要ではない。
り標識された試料の電気泳動画像を可視化することので
きる蛍光画像可視化装置を提供することが可能となる。
光画像可視化装置の略分解図である。
光画像可視化装置の略斜視図である。
る蛍光画像可視化装置の略斜視図である。
る蛍光画像可視化装置を含む画像生成装置の略正面図で
ある。
置の略縦断面図である。
ックダイアグラムである。
Claims (3)
- 【請求項1】 複数の青色LED(発光ダイオード)を
備えた青色LEDアレイ基板と、前記青色LEDアレイ
基板上に位置し、蛍光物質により標識され、電気泳動さ
せられた試料を含むゲルを載置可能な拡散部材を備えた
ことを特徴とする蛍光画像可視化装置。 - 【請求項2】 複数の青色LED(発光ダイオード)を
備えた青色LEDアレイ基板と、前記青色LEDアレイ
基板上に位置し、試料を電気泳動させることのできるゲ
ルを収容可能な電気泳動槽を載置可能な拡散部材を備え
たことを特徴とする蛍光画像可視化装置。 - 【請求項3】 さらに、CCDカメラを備えたことを特
徴とする請求項1または2に記載の蛍光画像可視化装
置。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9079441A JPH10274637A (ja) | 1997-03-31 | 1997-03-31 | 蛍光画像可視化装置 |
| EP97118850A EP0840114B1 (en) | 1996-10-31 | 1997-10-29 | Image Producing Apparatus |
| DE69732510T DE69732510T2 (de) | 1996-10-31 | 1997-10-29 | Bilderzeugende Vorrichtung |
| US08/960,598 US5856866A (en) | 1996-10-31 | 1997-10-30 | Image producing apparatus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9079441A JPH10274637A (ja) | 1997-03-31 | 1997-03-31 | 蛍光画像可視化装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10274637A true JPH10274637A (ja) | 1998-10-13 |
| JPH10274637A5 JPH10274637A5 (ja) | 2005-01-20 |
Family
ID=13689974
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9079441A Pending JPH10274637A (ja) | 1996-10-31 | 1997-03-31 | 蛍光画像可視化装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10274637A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6512236B2 (en) | 1997-03-07 | 2003-01-28 | Clare Chemical Research, Inc. | Fluorometric detection using visible light |
| US6914250B2 (en) | 1997-03-07 | 2005-07-05 | Clare Chemical Research, Inc. | Fluorometric detection using visible light |
| JP2006329891A (ja) * | 2005-05-27 | 2006-12-07 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 電気泳動システム |
| JP2007163186A (ja) * | 2005-12-09 | 2007-06-28 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 電気泳動システム |
-
1997
- 1997-03-31 JP JP9079441A patent/JPH10274637A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6512236B2 (en) | 1997-03-07 | 2003-01-28 | Clare Chemical Research, Inc. | Fluorometric detection using visible light |
| US6914250B2 (en) | 1997-03-07 | 2005-07-05 | Clare Chemical Research, Inc. | Fluorometric detection using visible light |
| JP2006329891A (ja) * | 2005-05-27 | 2006-12-07 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 電気泳動システム |
| JP2007163186A (ja) * | 2005-12-09 | 2007-06-28 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 電気泳動システム |
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| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20050523 |