JPH10279483A - 骨密度増加剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】副作用を回避または低減しながら効果的に骨密
度を増加させることができる医薬組成物を提供するこ
と。 【解決手段】エストロゲンとアロマターゼ非代謝性アン
ドロゲンとを含有する医薬組成物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、骨粗鬆症などの骨
密度低下を伴う疾患の予防や治療に有用な医薬組成物に
関する。また、本発明は骨密度増加に有用な医薬キッ
ト、骨密度を増加させる方法、その方法を実施するため
のプログラムを記録した記録媒体、およびその方法を実
施するための投与システムに関する。

【０００２】

【従来の技術】骨密度低下は、ステロイド投与による骨
粗鬆症、閉経または副甲状腺機能亢進による骨粗鬆症、
二次性骨粗鬆症、性腺機能不全による骨形成遅延などの
骨に関わる疾患の多くに認められ、骨折、骨変形、痛み
の原因になり、骨以外の臓器や部位の機能障害をもたら
すことがある。老齢人口の増加に伴って、このような骨
密度の低下に対処する有効な薬剤、特に骨密度を増加さ
せる医薬の開発が必要になっている。骨密度低下の原因
は、エストロゲンなどの女性ホルモンの減少に関係する
ことが知られている。このため、エストラジオ−ル等の
エストロゲンを補なって骨密度低下を予防するエストロ
ゲン補充療法が、特に閉経女性に対して用いられてい
る。しかしながら、エストロゲン補充療法には、子宮出
血、子宮頸癌あるいは乳癌などの腫瘍を発生させる副作
用を伴うことがある。このため、副作用を軽減するため
に、エストロゲンにプロゲステロンを併用する療法が試
みられているが、必ずしも満足の行く結果は得られてい
ない。

【０００３】一方、エストラジオールは皮質骨よりも海
面骨骨形成に関与すると一般に考えられている。このた
め、皮質骨骨形成に関与するテストステロンをエストロ
ゲンと併用すれば、エストロゲン単独療法よりも骨密度
が増加することが確認されている。テストステロンによ
る骨形成は、テストステロンそのもののアンドロゲン作
用によるものであるとする説や、テストステロンが体内
で代謝されて生成するエストラジオールやジヒドロテス
トステロン等の様々な物質の作用によるものであるとす
る説がある。また、テストステロンが体内で代謝されて
生成するジヒドロテストステロンは、骨形成作用を有す
ると考えられている一方、骨形成に必須なホルモンでは
ないという報告もなされている。このような相反する報
告もあって、テストステロンやジヒドロテストステロン
による骨形成機構は十分に解明されているとはいえな
い。

【０００４】このようなジヒドロテストステロンをエス
トラジオールと併用した場合の作用効果については種々
の報告がなされており、各々のホルモンが有する作用が
相殺されてしまうというインビトロ試験結果も報告され
ている（文献:Chamous E. etal J.Bone Miner. Res. 11
(Suppl 1); S431 1996）。また、ラットにジヒドロテ
ストステロンを単独投与した場合に認められていた海綿
骨の骨形成作用は、エストラジオールと併用することに
よって消失してしまうという報告もなされている（文
献:Vanin C. et al J. Bone Miner. Res. 10(Suppl 1):
S399 1996）。

【０００５】これに対して、ジヒドロテストステロンと
エストラジオールの投与量を限定して投与すれば、各々
を単独に投与した場合よりも骨密度が増加し、皮質骨の
骨形成が促進されるという報告もなされている（文献:C
oxam V. et al Bone 19:107-114, 1996）。この報告で
は、卵巣を摘出したラットの皮下にエストラジオール
（０．１ｍｇ）とジヒドロテストステロン（２．５ｍｇ
あるいは１０ｍｇ）とを含有する３０日間徐放可能なペ
レットを５７日間埋め込んで、併用による骨密度増加効
果を検討している。一日当たりの投与量はラット１匹
（平均体重３３４〜３４７ｇ）当たり、エストラジオー
ルが３．３３μｇ／日（体重１ｋｇに換算すると９．７
９μｇ／日）で、ジヒドロテストステロンが８３．３μ
ｇ／日（体重１ｋｇに換算すると２４５μｇ／日）ある
いは３３３μｇ／日（体重１ｋｇに換算すると９７９μ
ｇ／日）である。

【０００６】このようにジヒドロテストステロンとエス
トラジオールの投与量を特定の範囲に限定して投与する
ことによって、一定の骨密度増加を達成しうることが確
認されているが、これらの投与量は副作用を十分に防げ
るほど低いとは言えない。すなわち、エストラジオール
等のエストロゲンを多量に投与すると、子宮出血、子宮
頸癌あるいは乳癌などの腫瘍の発生や、体重増加抑制を
招くおそれがある。また、ジヒドロテストステロンを多
量に投与すると、多毛症やざ瘡等の副作用を生じる危険
が伴う（文献:Horton R. J. Androl. 13; 23-27, 199
2）。さらに、アロマターゼでエストラジオールとジヒ
ドロテストステロンに代謝されるテストステロンは、ジ
ヒドロテストステロン単独よりも前立腺腫瘍の発症のリ
スクが高いことが示唆されているため、多量のエストラ
ジオ−ルとジヒドロテストステロンを併用すると前立腺
が肥大する副作用が危惧される（文献:Bruno de Lignie
rs Ann. Medicine 25; p235-241, 1993）。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】このように、エストロ
ゲンやジヒドロテストステロンを投与する場合には、深
刻な副作用を伴うことがないように投与量を安全な範囲
に抑える必要がある。しかしながら、従来の研究では、
副作用を十分に防ぐことができる低用量でエストロゲン
やジヒドロテストステロンを投与して骨密度の増加を確
認したものはない。そこで本発明は、従来の研究におい
て骨密度増加のために必要とされていた投与量を減ら
し、活性成分を低投与量で投与することによって副作用
を極力抑えながら骨密度を増加させることを課題とし
た。とくに本発明は、骨密度増加に必要とされるエスト
ロゲンの投与量を低減し、過剰なホルモン作用による弊
害を回避しながら十分な骨密度の増加を達成することを
課題とした。より具体的には、本発明は、これらの目的
を達成しうる医薬組成物、医薬キット、骨密度増加法、
該骨密度増加法を実施するためのプログラムを記録した
記録媒体、および該骨密度増加法を実施するための投与
システムを提供することを課題とした。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本研究者らは、これらの
課題を解決するために鋭意研究を進めた結果、エストラ
ジオール等のエストロゲンにアロマターゼ非代謝性アン
ドロゲンを併用することによって、エストロゲンの投与
量を減らし、かつエストロゲンの骨密度増加作用を増強
ないし維持することができることを見い出して本発明を
完成させるに至った。すなわち、本発明は、（１）エス
トロゲンとアロマターゼ非代謝性アンドロゲンとを含有
する医薬組成物、（２）該エストロゲンがエストラジオ
ール、吉草酸エストラジオール、安息香酸エストラジオ
ール、プロピオン酸エストラジオール、エストロン、結
合型エストロゲンおよびプロピオン酸エストリオールか
らなる群から選択される前記医薬組成物、（３）該アロ
マターゼ非代謝性アンドロゲンがジヒドロテストステロ
ン、オキサアンドロロン、オキサメトロン、スタノゾロ
ール、メスタノロン、スタノロンおよびアンドロスタン
からなる群から選択される前記医薬組成物、（４）該エ
ストロゲンがエストラジオールであり、該アロマターゼ
非代謝性アンドロゲンがジヒドロテストステロンである
前記医薬組成物、（５）骨粗鬆症あるいは骨形成遅延の
予防または治療のための前記医薬組成物、（６）該エス
トロゲンおよび該アロマターゼ非代謝性アンドロゲンが
徐放される前記医薬組成物、（７）エストロゲンおよび
アロマターゼ非代謝性アンドロゲンが、キットを構成す
る複数の組成物のいずれかに含まれている医薬キット、
（８）１日につき体重１ｋｇあたりエストラジオール
０．２〜２μｇに相当する活性量のエストロゲンを、ア
ロマターゼ非代謝性アンドロゲンと同時にまたは個別に
哺乳類に投与する工程を含む、哺乳類の骨密度を増加さ
せる方法、（９）１日につき体重１ｋｇあたりエストラ
ジオール０．２〜１μｇに相当する活性量のエストロゲ
ンを投与する前記方法、（１０）１日につき体重１ｋｇ
あたりジヒドロテストステロン２０〜８０μに相当する
活性量のアロマターゼ非代謝性アンドロゲンを投与する
前記方法、（１１）１日につき体重１ｋｇあたり、エス
トラジオール０．２〜２μｇおよびジヒドロテストステ
ロン２０〜８０μｇを投与する工程を含む前記方法、
（１２）投与方法が経口、経皮、埋め込みまたは皮下投
与である前記方法、（１３）前記方法を実施するための
プログラムを記録した機械読み取り可能な記録媒体、
（１４）前記方法を実施するための、エストロゲンおよ
びアロマターゼ非代謝性アンドロゲンの投与システムを
提供する。

【０００９】本発明で使用するエストロゲンとして、エ
ストラジオール、吉草酸エストラジオール、安息香酸エ
ストラジオール、プロピオン酸エストラジオール、エス
トロン、結合型エストロゲンおよびプロピオン酸エスト
リオールを例示することができる。中でもエストラジオ
ールを使用するのが好ましい。エストラジオールは、１
７β−エストラジオール、エストラ−１,３,５（１０）
−トリエン−３,１７−ジオール、ジヒドロキシエスト
リンとも呼ばれ、動物の卵巣、胎盤、睾丸等に存在して
いる。エストラジオールは、エストロンを化学的あるい
は微生物的に還元することによって合成することができ
る。また、特定の芳香化酵素（アロマターゼ）によっ
て、テストステロンから生合成される。

【００１０】一方、本発明で使用するアロマターゼ非代
謝性アンドロゲンは、ステロイド骨核のＡ環の５α位が
還元された構造を有し、アンドロゲン活性を有し、アロ
マタ−ゼによって代謝されないステロイドホルモンであ
る。アロマターゼ非代謝性アンドロゲンの具体例とし
て、ジヒドロテストステロン、オキサアンドロロン、オ
キサメトロン、スタノゾロール、メスタノロン、スタノ
ロンおよびアンドロスタンを挙げることができる。この
中でも特にジヒドロテストステロンを使用するのが好ま
しい。ジヒドロテストステロンは、（５α，１７β）−
１７−ヒドロキシアンドロスタン−３−オン、４−ジヒ
ドロテストステロンまたはスタノロンとも呼ばれ、テス
トステロンの二重結合が５αに還元された構造を有す
る。ジヒドロテストステロンは、テストステロンに５α
−リダクターゼを作用させることによって生合成するこ
とができる。本発明で使用するエストロゲンおよびアロ
マターゼ非代謝性アンドロゲンは、文献記載の方法また
はそれに類する方法によって得たもの、動物から取得し
たもの、合成品、市販品であってもよい。

【００１１】エストロゲンとアロマターゼ非代謝性アン
ドロゲンを含有する本発明の医薬組成物は、従来試みら
れていなかった低い用量で有意な骨密度増加作用を示す
点に特徴がある。従来は、骨密度を増加させるために比
較的高い用量でエストロゲンを投与していたため、エス
トロゲンによる副作用の発現防止が必ずしも有効になさ
れていなかった。本発明によってエストロゲンをアロマ
ターゼ非代謝性アンドロゲンと併用すれば、エストロゲ
ンの用量を１日につき体重１ｋｇあたりエストラジオー
ル２μｇの活性量以下に抑えることができる。特にエス
トラジオールを０．２μｇ／ｋｇ／日（６０ｋｇのヒト
当たり１２μｇ）という低用量で投与して骨密度増加を
検討した例は現在迄にまったく報告されていない。この
ように、本発明によれば、少量のエストロゲン投与によ
って有効に骨密度を増加させ、かつエストロゲン投与に
伴う副作用の発現を大幅に抑制することができる。

【００１２】本発明では、１日につき体重１ｋｇあたり
エストラジオール０．２〜２μｇに相当する活性量のエ
ストロゲンを投与するのが好ましい。中でも１日につき
体重１ｋｇあたりエストラジオール０．２〜１μｇに相
当する活性量のエストロゲンを投与するのが好ましい。
また、本発明では、エストロゲン投与に伴って、１日に
つき体重１ｋｇあたりジヒドロテストステロン２０〜８
０μｇに相当する活性量のアロマターゼ非代謝性アンド
ロゲンを投与するのが好ましい。

【００１３】このようにジヒドロテストステロンを併用
することによってエストラジオールの投与量を減らすこ
とができるため、本発明の医薬組成物はエストラジオー
ルを投与することによる副作用が懸念される場合に特に
有用である。すなわち、従来より行われているエストロ
ゲン療法には、月経の再開、子宮内膜癌や乳癌の発生と
いった副作用が伴うが、本発明の医薬組成物を使用すれ
ばこれらの副作用を回避ないし軽減することができる。
したがって、本発明の医薬組成物は、従来の医薬に比べ
てより長期にわたって安全に使用することができる。

【００１４】さらに、本発明の医薬組成物は体内のホル
モンバランスを崩すことなく使用することができる。す
なわち、本発明の医薬組成物の活性成分であるエストロ
ゲンとアロマターゼ非代謝性アンドロゲンのホルモン作
用は、一部が互いに拮抗しており、一方の作用が過度に
働くのを互いに牽制する場合がある。このため、本発明
の医薬組成物を用いれば、いずれか一方の活性成分によ
る弊害を防ぐことが可能である。例えば、エストラジオ
ールなどのエストロゲンには体重増加抑制作用があり、
ジヒドロテストステロンなどのアロマターゼ非代謝性ア
ンドロゲンには体重増加作用があるが、本発明の医薬組
成物を使用すれば体重の過度の増減を抑制することがで
きる。また、エストロゲンやアロマターゼ非代謝性アン
ドロゲンを単独で投与した場合に懸念される他の副作用
も、本発明によれば回避することが可能である。

【００１５】本発明の医薬組成物による骨密度増加作用
は、骨全体にわたって発現する。ただし、骨密度増加の
程度は骨の部位によって異なる。例えば、大腿骨の場合
は、近位端および遠位端における骨密度の増加が比較的
大きい。特に近位端における骨密度の増加は顕著であ
る。大腿骨近位端は体を支えるうえで大きな荷重がかか
る部位であり、近位端にはその荷重に十分に耐え得る強
度が要求されることから、本発明の医薬組成物は必要な
部位の骨密度を効果的に増加させることができるもので
ある。なお、本発明の医薬組成物を用いて特定の部位の
骨密度を特に増加させたいときには、本発明の医薬組成
物を局所投与すればよい。

【００１６】本発明の医薬組成物は、骨粗鬆症をはじめ
とする骨密度の低下を伴う疾患の予防または治療のため
に適用することができる。骨粗鬆症には、老人性骨粗鬆
症や閉経後骨粗鬆症といった退行期骨粗鬆症、若年性骨
粗鬆症、突発性骨粗鬆症などがある。また、これらの原
発性骨粗鬆症の他に、基礎疾患により引き起こされる続
発性骨粗鬆症もある。たとえば、甲状腺機能亢進症、性
腺機能不全症などの内分泌疾患によるもの、吸収不良症
候群、アルコール中毒などの栄養障害、慢性関節リウマ
チによるもの、不動性骨粗鬆によるもの、さらには性腺
機能不全による骨形成遅延などの骨に関する疾患による
ものがある。ここに例示されていない疾患に対しても、
骨密度増加を目的とする疾病に適用することができる。

【００１７】本発明の医薬組成物には、エストロゲンと
アロマターゼ非代謝性アンドロゲンをともに含む単一組
成物のみならず、複数の組成物から構成される医薬キッ
トも含まれる。エストロゲンとアロマターゼ非代謝性ア
ンドロゲンは、この医薬キットを構成する組成物のいず
れかに含まれていればよい。例えば、エストロゲンを含
む組成物とアロマターゼ非代謝性アンドロゲンを含む組
成物からなるキットであってもよいし、エストロゲンと
アロマターゼ非代謝性アンドロゲンの存在比が異なる複
数の組成物からなるキットであってもよい。使用の際
は、これらの組成物を適宜組み合わせて投与する。本発
明の医薬組成物のキットを構成する複数の組成物は、同
時または連続して投与してもよいし、場合によっては一
定の間隔で投与してもよい。ただし、副作用が発現しな
いように注意しなければならない。特に、エストロゲン
のみを含む組成物とアロマターゼ非代謝性アンドロゲン
のみを含む組成物を投与する場合には、同時または連続
して投与するのが好ましい。

【００１８】本発明の投与形態は特に制限されず、経口
的にまたは非経口的に投与することが可能である。非経
口投与としては、皮下投与または経皮投与するのが好ま
しい。また、本発明の医薬組成物の剤型は特に制限され
ず、投与経路等に応じて適宜選択することができる。例
えば、経口投与に適した製剤として、錠剤、カプセル
剤、散剤、細粒剤、液剤、シロップ剤等を挙げることが
できる。非経口剤に適した製剤として、埋め込み剤、経
皮吸収剤、経粘膜吸収剤、貼付剤などが挙げられ、薬物
吸収制御経皮吸収剤あるいはマイクロスフェアー製剤で
あってもよい。これらの製剤には、必要に応じて薬理学
的および製剤学的に許容しうる添加物を使用することが
できる。例えば、賦形剤、崩壊剤または崩壊補助剤、結
合剤、滑沢剤、コ−ティング剤、色素、希釈剤、基剤、
溶解剤または溶解補助剤、等張化剤、pH調節剤、安定化
剤、粘着剤等を使用することができる。さらに、種々の
ドラッグ・デリバリー・システムを応用して、本発明の
医薬を持続的に血中に放出させたりすることもできる。

【００１９】エストロゲンとアロマターゼ非代謝性アン
ドロゲンの投与量は、治療または予防の目的、患者の性
別、体重、年齢、疾患の種類や程度、剤型、投与経路な
どの種々の条件に応じて適宜決定する。一般にアロマタ
ーゼ非代謝性アンドロゲンをエストロゲンより多く投与
することが好ましい。具体的には、ヒトを含む哺乳類に
対するエストラジオールの投与量は０．２〜２μｇ／ｋ
ｇ／日、ジヒドロテストステロンの投与量は２０〜８０
μｇ／ｋｇ／日で、それぞれ体重６０ｋｇのヒトに換算
すると１日当たりエストラジオールが０．０１２〜０．
１２ｍｇ、ジヒドロテストステロンの投与量は１．２〜
４．８ｍｇとするのが好ましい。また、エストラジオー
ルあるいはジヒドロテストステロン以外の成分を使用す
る場合には、ヒト体重１ｋｇあたり、１日につき、エス
トロゲンをエストラジオール０．２〜２μｇに相当する
活性量およびアロマターゼ非代謝性アンドロゲンをジヒ
ドロテストステロン２０〜８０μｇに相当する活性量を
投与することが好ましい。投与量は、これらの範囲内で
組み合わせるのが好ましいが、ここに記載された数値範
囲外の量を採用することもできる。

【００２０】エストラジオールとアロマターゼ非代謝性
アンドロゲンを上記の好ましい範囲内の投与量で投与す
るために、投与システムを用いることができる。投与シ
ステムには、骨密度を増加させるために本発明にしたが
ってエストラジオールとアロマターゼ非代謝性アンドロ
ゲンを体内に投与する機構および手段がすべて包含され
る。例えば、エストラジオールまたはアロマターゼ非代
謝性アンドロゲンの注入手段、または注入量を制御する
手段を備えたシステムが広く包含される。注入量を制御
する手段は手動であってもコンピューター制御された自
動制御手段であってもよい。また、このような自動制御
手段を制御するためのプログラムを記録した記録媒体も
システムの一部を構成する。これらの投与システムおよ
び記録媒体も本発明を実施する手段として理解されるべ
きである。

【００２１】

【実施例】以下に実施例および試験例を挙げて本発明を
さらに具体的に説明する。ただし、ここに記載されてい
るものは例示にすぎず、本発明の範囲はこれらの記載に
よって限定的に解釈されるものではない。

【００２２】実施例１：錠剤の調製 ジヒドロテストステロン１〜４．８重量部とエストラジ
オール０．０２〜０．１２重量部に、スターチ７０重量
部と乳糖２５重量部を混合し、打錠して錠剤を調製し
た。

【００２３】実施例２：注射剤の調製 ジヒドロテストステロン０．５〜２．４重量部とエスト
ラジオール０．０１〜０．０６重量部をエタノール１重
量部に溶解した。得られた溶液に大豆油レシチン２．５
重量部、ポリエチレングリコール２．５重量部およびミ
リスチルγ−塩化ピコリニウム０．２５重量部を添加
し、混合物を攪拌して均一化した。さらに得られた混合
物の７倍容量の生理食塩液を添加することによって水性
懸濁液を調製し、注射剤とした。

【００２４】実施例３：埋め込み剤の調製 ジヒドロテストステロン０．０３〜２６．４重量部、エ
ストラジオール０．０００６〜０．００６重量部および
ポリＬ乳酸０．５〜２．２重量部の混合物を７０℃に加
温した。得られた溶液を室温に冷却した後に粉砕し、得
られた粉砕物を円柱状の型に入れ圧力をかけて成型し、
１ケ月用の徐放剤とした。

【００２５】実施例４：マイクロスフェアー剤の調製 ジヒドロテストステロン０．０３〜２６．４重量部、エ
ストラジオール０．０００６〜０．００６重量部および
ポリＬ乳酸０．５〜２．２重量部を６０℃に加温して塩
化メチレンに溶解した。得られた溶液を、ポリビニ−ル
アルコ−ル２重量部とゼラチン１重量部を含有する水溶
液に添加して撹拌しながら減圧放置して、溶媒を揮発さ
せた。水洗し、篩いにかけてサイズを揃え、凍結乾燥す
ることによってマイクロスフェア−剤を調製した。

【００２６】実施例５：貼付剤の調製 ジヒドロテストステロン５〜２４重量部とエストラジオ
ール０．１〜０．６重量部を含有するエタノール溶液を
調製した。得られたエタノール溶液１０重量部とプロピ
レングリコール５重量部をアクリル系重合体溶液（アク
リル酸２−エチルヘキシルとビニルピロリドン（６５：
３５）の共重合体の酢酸エチル溶液）８５重量部に添加
して、均一に撹拌した。その後、混合液をシリコンコ−
トした剥離紙上に塗布し乾燥することによって、粘着層
を形成した。この粘着層の上に、ポリエステル及びナイ
ロン^TMの１：１混紡編み物からなる厚さ５０μmの支持
体を圧着して、経皮吸収を目的とする貼付剤を調製し
た。

【００２７】試験例１：インビボ試験（１） ［試験方法］１２週齢のＳＤ系雌性ラット（体重２３０
−２４０ｇ）を一群６匹として計１１群用意し、１０群
をジエチルエーテルで麻酔した。次いで、各個体の腹部
を剪毛し、正中線に沿って皮膚および白線から筋層を切
開し開腹した。左右の卵巣を体外に引き出して輸卵管と
子宮の間を結紮し、電気メスで卵巣を輸卵管と共に切除
した。この後、開腹部にペニシリンＧナトリウム−スト
レプトマイシン溶液（ペニシリンＧ１０，０００Ｕ／ｍ
ｌ,ストレプトマイシン１０，０００μｇ／ｍｌ：ＧＩ
ＢＣＯ社製）を生理食塩水で１０倍希釈した溶液０．１
ｍｌを滴下した。残る１群のラットに対しても、同様に
開腹し、ペニシリンＧナトリウム−ストレプトマイシン
溶液を滴下したが、輸卵管と卵巣の摘出は行わなかっ
た。

【００２８】手術翌日から、カルシウム濃度０．４％の
カルシウム制限餌（オリエンタル酵母社製）を試験期間
に亘って給餌するとともに、術後４週間経過したところ
で各群に対して、それぞれ特定の試料の投与を開始し
た。すなわち、９群の卵巣摘出ラットに対しては、表１
に記載される量のジヒドロテストステロン（フルカ社
製）とエストラジオール（シグマ社製）をオリーブ油に
溶解した試料を皮下投与した（ＥＳＴ群１〜４、ＤＨＴ
群１、併用群１〜４）。残りの卵巣摘出ラット１群には
対照群としてプラセボを投与した（対照群１）。また、
偽手術を施した卵巣保有ラット１群にもプラセボを投与
した（偽手術群１）。各投与は１日１回とし、５日連続
投与して２日間休薬するサイクルを８週間繰り返した。
８週間の投薬の前後で各ラットの体重を測定し、投薬に
よる体重増加量を調べた。投薬試験後、ラットに二酸化
炭素を吸入して安楽死させ、大腿骨を採取して直ちに１
０％中性ホルマリン緩衝液に浸して固定した。固定した
各ラットの大腿骨の平均骨密度を二重Ｘ線骨塩測定装置
（ＤＳＣ−６００形、アロカ社製）により測定した。

【００２９】

【表１】

【００３０】［結果］各群ラットの大腿骨の平均骨密度
を測定した結果を図１に示す。エストラジオール単独投
与群では、投与量に相関した骨密度の増加が認められた
（ＥＳＴ群１〜４）。しかし、エストラジオールの投与
量が少ないＥＳＴ群では、対照群を上回る骨密度は認め
られなかった。一方、エストラジオールをジヒドロテス
トステロンと併用することによって、エストラジオール
低投与量群を含むすべての併用群で骨密度が高まった
（併用群１〜４）。また、エストラジオール０．２μｇ
／ｋｇ／日以上の併用群において、対照群より有意に高
い骨密度が確認された。併用群３および併用群４では、
それぞれ対応する用量のＤＨＴ群１、ＥＳＴ群３および
ＥＳＴ群４よりも高い骨密度を示した。中でも、ＥＳＴ
群４と併用群２との比較、あるいはＥＳＴ群３と併用群
１との比較から、エストラジオールにジヒドロテストス
テロンを併用することにより、エストラジオ−ルの投与
量を減量できることが確認された。

【００３１】各群ラットへの試料投与による体重増加量
を測定した結果を図２に示す。卵巣を摘出した対照群の
体重増加量は偽手術群より大きかった。また、エストラ
ジオール単独投与群では、投与量を増すことによって体
重の増加が抑制された（ＥＳＴ群１〜４）。一方、ジヒ
ドロテストステロン単独投与群では、逆に対照群よりも
体重が増加する傾向を示した。このようなジヒドロテス
トステロンの体重増加作用は、併用群ではエストラジオ
ールの投与量に依存して低下した。特に、併用群３およ
び４では、体重増加量が偽手術群とほぼ同じであった。
また、ＥＳＴ群と併用群の比較により、エストラジオー
ルの体重増加抑制作用をジヒドロテストステロンが軽減
する傾向が認められた。

【００３２】試験例２：インビボ試験（２） ［試験方法］試験例１と同じ方法によって、卵巣摘出ラ
ット９群と偽手術を施した卵巣保有ラット１群を用意し
た（１群７匹）。全てのラットに手術の翌日からカルシ
ウム濃度０．４％のカルシウム制限餌を給餌した。ま
た、手術から４週間経過したところで各群に対して、そ
れぞれ特定の試料の投与を開始した。すなわち、８群の
卵巣摘出ラットに対しては、表２に記載される量のエス
トラジオールとジヒドロテストステロンを含有するよう
に実施例２に準じて調製した水性懸濁液を皮下投与した
（ＥＳＴ群２１〜２２、ＤＨＴ群２１〜２２、併用群２
１〜２４）。残りの卵巣摘出ラット１群には対照群とし
てプラセボを投与した。また、偽手術を施した卵巣保有
ラット１群にもプラセボを投与した。各投与は１日１回
とし、５日連続投与して２日間休薬するサイクルを１２
週間繰り返した。１２週間の投薬の前後で各ラットの体
重を測定し、投薬による体重増加量を調べた。投薬試験
後、ラットに二酸化炭素を吸入して安楽死させ、大腿骨
を採取して直ちに１０％中性ホルマリン緩衝液に浸して
固定した。固定した各ラットの大腿骨の平均骨密度を二
重Ｘ線骨塩測定装置（ＤＳＣ−６００形、アロカ社製）
により測定した。測定は、大腿骨近位端から１ｃｍまで
の部位、大腿骨遠位端から１ｃｍまでの部位、および大
腿骨全体について行った。

【００３３】

【表２】

【００３４】［結果］各群ラットの大腿骨の平均骨密度
を測定した結果を表３に示す。表中の骨密度は（平均
値）±（標準偏差）で示した。

【表３】

【００３５】この試験によって、試験例１よりもジヒド
ロテストステロンの投与量を低くしても、エストラジオ
ールと併用することによって骨密度を増加させることが
できることが確認された。すなわち、ジヒドロテストス
テロンは２０〜８０μｇ／ｋｇ／日で十分にエストラジ
オールの骨密度増加作用を増強することが確認された。
また、骨密度の増加は近位端（大腿骨頸部側）と遠位端
（膝関節側）で大きく、中でも近位端において大きな骨
密度増加が認められた（ＥＳＴ群２２、２３、２４）。
エストラジオールを０．２μｇ／ｋｇ／日（６０ｋｇの
ヒト当たり１２μｇ）という低用量で投与して骨密度増
加を確認した例は現在迄に報告されていない。エストラ
ジオールをジヒドロテストステロンと併用することによ
って、このような低用量であっても十分な骨密度の増加
が期待できる。

【００３６】各群ラットへの試料投与による体重増加量
を測定した結果を図３に示す。エストラジオール２μｇ
／ｋｇ／日投与群（ＥＳＴ群２２）では体重増加が抑制
され、その作用はジヒドロテストステロン８０μｇ／ｋ
ｇ／日を併用しても確認された（併用群２４）。しか
し、エストラジオール０．２μｇ／ｋｇ／日投与群（Ｅ
ＳＴ群２１）では体重増加抑制は認められなかった。一
方、ジヒドロテストステロン２０μｇ／ｋｇ／日投与群
（ＤＨＴ群２１）では体重に影響は認められなかった
が、ジヒドロテストステロン８０μｇ／ｋｇ／日投与群
（ＤＨＴ群２２）では体重増加の傾向が認められた。し
かし、その作用はエストラジオールを併用することによ
って軽減された（併用群２３、２４）。この体重増加量
測定結果は、エストラジオールとジヒドロテストステロ
ンのホルモン作用が相互に拮抗することを示している。
従って、ジヒドロテストステロンの体重増加作用は、エ
ストラジオールを併用することによって抑制できると考
えられる。

【００３７】

【発明の効果】本発明の医薬を用いれば、副作用を回避
または低減しながら効果的に骨密度を維持あるいは増加
させることができる。このため、骨粗鬆症をはじめとす
る骨密度低下を伴う疾患に対して、本発明は極めて有効
である。

【図面の簡単な説明】

【図１】ラット大腿骨の平均骨密度を示す図である（試
験例１）。

【図２】ラットへの試料投与による体重増加量を示す図
である（試験例１）。

【図３】ラットへの試料投与による体重増加量を示す図
である(試験例２）。

【符号の説明】

図１（ＤＵＮＮＥＴの片側検定法による検定結果） ＋＋ 偽手術群１に対して危険率１％で有意 ＊ 対照群１に対して危険率５％で有意 ＊＊ 対照群１に対して危険率１％で有意 ＃＃ ＤＨＴ群１に対して危険率５％で有意 ＃ ＤＨＴ群１に対して危険率１％で有意 ＄＄１ ＥＳＴ群１に対して危険率１％で有意 ＄＄３ ＥＳＴ群３に対して危険率１％で有意 ＄４ ＥＳＴ群４に対して危険率１％で有意 図２（ＤＵＮＮＥＴの片側検定法による検定結果） ＊ 対照群１に対して危険率５％で有意 ＊＊ 対照群１に対して危険率１％で有意 ＃ ＤＨＴ群１に対して危険率５％で有意（併用群１〜
４についてのみ検定） ＃＃ ＤＨＴ群２に対して危険率１％で有意（併用群１
〜４についてのみ検定） 図３（ＤＵＮＮＥＴの片側検定法による検定結果） ＊＊ 対照群２に対して危険率１％で有意

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 森田 佳子 京都府京都市山科区四ノ宮南河原町14番地 科研製薬株式会社総合研究所内 (72)発明者 青山 行雄 京都府京都市山科区四ノ宮南河原町14番地 科研製薬株式会社総合研究所内

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 エストロゲンとアロマターゼ非代謝性ア
   ンドロゲンとを含有する医薬組成物。
2. 【請求項２】 エストロゲンがエストラジオール、吉草
   酸エストラジオール、安息香酸エストラジオール、プロ
   ピオン酸エストラジオール、エストロン、結合型エスト
   ロゲンおよびプロピオン酸エストリオールからなる群か
   ら選択される請求項１に記載の医薬組成物。
3. 【請求項３】 アロマターゼ非代謝性アンドロゲンがジ
   ヒドロテストステロン、オキサアンドロロン、オキサメ
   トロン、スタノゾロール、メスタノロン、スタノロンお
   よびアンドロスタンからなる群から選択される請求項１
   に記載の医薬組成物。
4. 【請求項４】 エストロゲンがエストラジオールであ
   り、アロマターゼ非代謝性アンドロゲンがジヒドロテス
   トステロンである請求項１に記載の医薬組成物。
5. 【請求項５】 骨粗鬆症あるいは骨形成遅延の予防また
   は治療のための請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組
   成物。
6. 【請求項６】 エストロゲンおよびアロマターゼ非代謝
   性アンドロゲンが徐放される請求項１〜５のいずれかに
   記載の医薬組成物。
7. 【請求項７】 エストロゲンおよびアロマターゼ非代謝
   性アンドロゲンが、キットを構成する複数の組成物のい
   ずれかに含まれている医薬キット。
8. 【請求項８】 １日につき体重１ｋｇあたりエストラジ
   オール０．２〜２μｇに相当する活性量のエストロゲン
   を、アロマターゼ非代謝性アンドロゲンと同時にまたは
   個別に哺乳類に投与する工程を含む、哺乳類の骨密度を
   増加させる方法。
9. 【請求項９】 １日につき体重１ｋｇあたりエストラジ
   オール０．２〜１μｇに相当する活性量のエストロゲン
   を投与する請求項８に記載の方法。
10. 【請求項１０】 １日につき体重１ｋｇあたりジヒドロ
    テストステロン２０〜８０μｇに相当する活性量のアロ
    マターゼ非代謝性アンドロゲンを投与する請求項８また
    は９に記載の方法。
11. 【請求項１１】 １日につき体重１ｋｇあたり、エスト
    ラジオール０．２〜２μｇおよびジヒドロテストステロ
    ン２０〜８０μｇを投与する工程を含む、請求項８に記
    載の方法。
12. 【請求項１２】 投与方法が経口、経皮、埋め込みまた
    は皮下投与である請求項８〜１１のいずれかに記載の方
    法。
13. 【請求項１３】 請求項８〜１１のいずれかに記載の工
    程を実施するためのプログラムを記録した機械読み取り
    可能な記録媒体。
14. 【請求項１４】 請求項８〜１１のいずれかに記載の工
    程を実施するための、エストロゲンおよびアロマターゼ
    非代謝性アンドロゲンの投与システム。