JPH10279561A

JPH10279561A - 抗ヘリコバクター・ピロリ剤

Info

Publication number: JPH10279561A
Application number: JP9085426A
Authority: JP
Inventors: Koichi Tanaka; 幸一田中; Masato Watanabe; 正人渡邊; Yasuyo Takeda; 靖代武田; Kenichi Koyama; 謙一小山; Seiji Washisaki; 清司鷲崎
Original assignee: Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1997-04-03
Filing date: 1997-04-03
Publication date: 1998-10-20
Anticipated expiration: 2017-04-03
Also published as: JP3879171B2

Abstract

(57)【要約】【課題】抗ヘリコバクター・ピロリ剤の提供。【解決手段】下記一般式（Ｉ）で示される２−（２−ヘ
プテニル）−３−メチル−４（１Ｈ）−キノロンを有効
成分とする抗ヘリコバクター・ピロリ剤。【化１】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明が属する技術分野】本発明は，医薬殊に抗ヘリコ
バクター・ピロリ作用を有する新規発酵生産物，並びに
ヘリコバクター・ピロリ感染が起因する種々の疾患の治
療に有用な抗ヘリコバクター・ピロリ剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】ヘリコバクター・ピロリは（Helicobact
er pylori）は，１９８３年に発見された病原性細菌で
あり，消化性潰瘍（例えば胃潰瘍又は十二指腸潰瘍
等），炎症（例えば胃炎等）又は胃ガン等の消化管上部
の疾患，もしくは慢性心疾患の病因と言われている。現
在，ヘリコバクター・ピロリ感染症の治療に関する研究
は活発になされており，該治療法としては，除菌を目的
としたもの，再発防止を目的としたもの等下記の如く多
数報告されている。例えば，ビスマス，抗生物質，プロ
トンポンプ阻害剤（ＰＰＩ），抗潰瘍剤等の単剤投与又
は前記薬物等を組み合わせた多剤併用法（２剤併用，３
剤併用）が挙げられる（内科，特集，７８巻１号（１９
９６），南江堂）。しかしながら，上記治療法は，例え
ば投与回数の頻度の多さ，常用量以上の大量投与を要す
る場合があること，薬物投与による下痢・便秘等の発
症，耐性菌の発生等まだまだ解決しなければならない点
が多い。また，本発明に関連する抗ヘリコバクター・ピ
ロリ剤として有用な下記化合物（ＩＩ）は，公知化合物
であり（Chem．Pharm．Bull.，１５（５），７１８−７
２０（１９６７），その用途は植物成長促進，又は抗植
物病原菌作用であり（Phytochemistry，４２，３６５−
３６８，（１９９６））。ヒト病原菌，特にヘリコバク
ター・ピロリ菌に関する抗菌活性については何ら報告さ
れていない。さらに，該化合物と構造類似の発酵生産
物，Pseudonocardia sp．３８４８９株産生物質が報告
されている（第回日本農芸化学会，要旨集，３Ｅａ５
（１９９７））。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は，優れ
た抗ヘリコバクター・ピロリ剤を提供することを目的と
し，又抗ヘリコバクター・ピロリ作用を有する新規発酵
生産物を提供することを目的とする。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは，上記状況
下天然に存在する多くの微生物が生産する物質について
鋭意検討した結果，シュードモナス（Pseudomonas）属
に属する細菌で，非常に優れた抗ヘリコバクター・ピロ
リ作用を有する物質を生産する能力を有する微生物を見
いだし，該微生物を培養し，培養物から下記公知物質
（ＩＩ）及び新規物質（ＩＩＩ）を単離することに成功
し本発明を完成した。また，該培養物から単離した下記
公知化合物（Ｉ及びＩＩ）の新規用途である優れた抗ヘ
リコバクター・ピロリ剤を見いだした。該抗ヘリコバク
ター・ピロリ剤は，選択性が高く，他の細菌に影響を与
えないことをも見いだした。さらに，本発明を詳述す
る。本発明は，下記式（Ｉ）で示される２−（２−ヘプ
テニル）−３−メチル−４（１Ｈ）−キノロンを有効成
分とする抗ヘリコバクター・ピロリ剤，

【０００５】

【化４】

【０００６】下記式（ＩＩ）で示される２−（２−ｃｉ
ｓ−ヘプテニル）−３−メチル−４（１Ｈ）−キノロン
（以下Ｑ３３１６０−Ｂという）を有効成分とする抗ヘ
リコバクター・ピロリ剤，

【０００７】

【化５】

【０００８】下記式（ＩＩＩ）で示される２−（２−ｔ
ｒａｎｓ−ヘプテニル）−３−メチル−４（１Ｈ）−キ
ノロン（以下Ｑ３３１６０−Ａという）を有効成分とす
る抗ヘリコバクター・ピロリ剤，

【０００９】

【化６】

【００１０】もしくはＱ３３１６０−Ａ又はその塩であ
る。

【００１１】

【発明の実施の形態】以下本発明につき詳述する。本発
明に包含されるＱ３３１６０−Ａ及びＱ３３１６０−Ｂ
は，シュードモナス属に属する上記化合物生産菌を栄養
培地にて培養し，該化合物を蓄積させた培養物から常法
により得られる。本発明の製造方法において使用する微
生物は，シュードモナス属に属し，上記化合物の生産能
を有する微生物であればいずれも用いることができる。
このような微生物としては，具体的には例えば，奄美大
島で採取された土壌から分離された微生物シュードモナ
スエスピー（Pseudomonassp.）Ｑ３３１６０株を挙げ
ることができる。以下，この菌学的性状を説明する。

【００１２】シュードモナスエスピー（Pseudomonas
sp.）Ｑ３３１６０株の微生物学的性質１）形態肉汁寒天培地上で，２８℃，５日間培養した細胞は，
０．２〜０．５×０．５〜１．６μｍの桿菌でグラム染
色は陰性であり，運動性を有する。また胞子，ミクロシ
ストなどの形成は認められない。２）各種培地における生育状態肉汁寒天培地上で，うす黄茶色のコロニーを形成する。
コロニーの周辺はスムースで顕著な粘調性及び遊走性は
認められない。また，可溶性色素の生成は認められな
い。肉汁穿刺培養では培地全体が懸濁し，皮膜を形成す
る。リトマスミルクでの培養では，弱酸性を示す。３）生理学的性質

【００１３】

【表１】硝酸塩の還元陽性脱窒反応陰性ＭＲテスト陰性ＶＰテスト陰性インドールの生成陰性硫化水素の生成陰性デンプンの加水分解陰性クエン酸の利用陽性色素の生成陰性ウレアーゼ陰性オキシターゼ陽性カタラーゼ陽性ゼラチンの液化陽性生育温度範囲１０〜３７℃ 至適生育温度２０〜３２℃ 生育ｐＨ範囲ｐＨ５〜９至適生育ｐＨｐＨ６〜８嫌気条件での生育陰性ＯＦテスト酸化型アルギニン分解反応陰性ポリ−β−ハイドロキシブチレートの陽性菌体内蓄積ＮａＣｌ添加肉汁培地での生育３％では生育するが，６％では生育しない

【００１４】４）炭素源の利用性

【００１５】

【表２】Ｌ−アラビノース＋Ｄ−キシロース＋Ｄ−グルコース＋Ｄ−マンノース＋シュークロース＋イノシット＋ラムノース − ラフィノース＋Ｄ−マンニット＋Ｄ−ガラクトース＋マルトース＋トレハロース＋ラクトース ± Ｄ−ソルビット＋サリシン＋メリビオース＋グリセリン＋スターチ − キサンチン ± キチン −

【００１６】５）菌体成分の化学分析菌体イソプレノイド・キノンとして，Ｑ−８を有する。６）ＤＮＡのＧＣ含量（ＨＰＬＣ法による）ｍｏｌ％Ｇ＋Ｃ＝６９．３以上の微生物学的性質をまとめると，本菌株はグラム陰
性好気性の桿菌で運動性を有する。生育温度範囲は１０
〜３７℃で，オキシターゼ試験，カタラーゼ試験，硝酸
塩の還元性は陽性であり，ＯＦテストの結果は酸化型で
ある。また，ポリ−β−ハイドロキシブチレートの菌体
内蓄積が認められる。一方，デンプンの分解性，硫化水
素の生成，インドールの生成，ＶＰ試験結果は陰性であ
る。菌体イソプレノイド・キノンとして，Ｑ−８を有す
る。また，ＤＮＡの塩基組成は６９．３ｍｏｌ％である
（ＨＰＬＣ法）。このような性質を有する菌をバージー
ズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオ
ロジィ（Bergey'S Manualof Systematic Bacteriolo
gy，1989）及びその他の文献によって検索した結果，本
菌株はシュードモナス（Pseudomonas）属に属する細菌
であると判断した。さらに上に記した性質に基づき本菌
株とシュードモナス属の既知菌種とを各種文献により比
較検討した結果，類似菌種としてシュードモナスセパ
シア（Pseudomonas cepacia）があげられる。本菌株と
シュードモナスセパシア（P．cepacia）との文献値を
比較した。以下に相違点の概略を示す。

【００１７】

【表３】

【００１８】上記の表に示したように，可溶性色素の産
生，４０℃における生育，細胞の大きさの点で本菌株
は，シュードモナスセパシア（P．cepacia）とは異な
っていた。従って，本菌株をシュードモナス属の新種と
判断し，シュードモナスエスピー（Pseudomonas s
p.）Ｑ３３１６０と命名した。なお，本菌株は工業技術
院生命工学工業技術研究所にＦＥＲＭＰ−１６１７７
として寄託されている。なお，微生物は人工的に，また
自然に変異を起こしやすいが，本発明において用いられ
るシュードモナスエスピー（Pseudomonas sp.) Ｑ
３３１６０株は，天然から分離された菌株の他に，これ
を紫外線，Ｘ線，化学薬剤などで人工的に変異させたも
の，及びそれらの天然変異株についても包含するもので
ある。

【００１９】（製造法）本発明の新規抗生物質の製造法
を実施するに当たり，該物質の生産菌株シュードモナス
エスピーＱ３３１６０株を各種栄養源を含有する培
地に接種し，好気的に発育させることにより本発明の新
規物質を含む培養物が得られる。培養に用いられる培地
は，使用する微生物が生育可能な培地であればよく，合
成培地，半合成培地あるいは天然培地を用いることがで
きる。培地に添加する栄養物としては，細菌の栄養源と
して公知のものを使用できる。例えば窒素源（炭素源）
としては，市販されているペプトン類，肉エキス類，コ
ーンスティープリカー，綿実粕，落花生粉，大豆粉，酵
母エキス，ＮＺ−アミン，小麦胚芽，カゼイン類，魚
粉，デンプン類，オウギ，及び硝酸ナトリウム，硝酸ア
ンモニウム等の無機又は有機物，炭素源としては市販さ
れている糖蜜，グルコース，マルトース，フルクトー
ス，マンニトール，ポテトスターチ，コーンスターチ，
デキストリン，可溶性デンプン等の炭水化物あるいは油
脂，脂肪類などが使用できる。また金属塩としては，Ｎ
ａ，Ｋ，Ｍｇ，Ｃａ，Ｚｎ，Ｆｅ，Ｍｎ，Ｃｏ，Ｃｕ，
等の硫酸鉛，塩酸塩，硝酸塩，燐酸塩，炭酸塩等を必要
に応じて添加できる。さらに必要に応じてバリン，ロイ
シン，イソロイシン，フェニルアラニン，トリプトファ
ン，メチオニン，リジン，アルギニン，グルタミン酸，
アスパラギン酸等のアミノ酸や，ビタミン類，オレイン
酸，オレイン酸メチル，ラード油，シリコン油，海面活
性剤等の二次代謝物生産促進物質又は消泡剤を適宜使用
できる。これらのもの以外でも，本発明化合物生産菌が
利用し，本発明化合物の生産に役立つものであれば，い
ずれの添加物も使用することができる。培養法として
は，一般の抗生物質などの培養法と同様に行えば良く，
その培養方法は固体培養でも液体培養でも良い。液体培
養の場合は静置培養，振とう培養，攪拌培養のいずれを
実施してもよいが，特に通気攪拌培養が望ましい。培養
条件として，培養温度は生産菌が発育し，本発明の抗生
物質を生産しうる温度，すなわち１５℃〜３７℃の範囲
で適宜適用できるが約２８℃が好ましい。ｐＨは，ｐＨ
４〜９の範囲で適宜適用できるが，ｐＨ６〜８が好まし
い。培養時間は種々の条件によって異なり，１０時間〜
１６８時間であるが，通常２４〜１２０時間程度で培養
液中に蓄積される本発明の物質が最高力価に達する。

【００２０】培養物から目的とする化合物を単離するに
は，微生物の産生する代謝産物を単離する際に用いる通
常の抽出，精製の手段が適宜利用できる。培養物中の該
物質は培養液をそのままか，又は遠心分離あるいは培養
物に濾過助剤を加えて濾過して得られた培養濾液に酢酸
エチル，クロロホルム，ベンゼン，トルエン等の水と混
和しない有機溶剤を加えて抽出する。また，培養液を適
宜の坦体に接触させ，濾液中の生産物質を吸着させ，次
いで適当な溶媒で溶出することにより該物質を抽出する
ことができる。例えば，アンバーライトＸＡＤ−２，ダ
イヤイオンＨＰ−２０，ダイヤイオンＣＨＰ−２０，又
はダイヤイオンＳＰ−９００のような多孔性吸着樹脂に
接触させて該物質を吸着させる。次いでメタノール，エ
タノール，アセトン，アセトニトリル等の有機溶媒と水
の混合液を用いて該物質を溶出させる。このときの有機
溶媒の混合比率を低濃度より段階的に又は連続的に高濃
度まで上げていくことにより，該物質の含まれる比率の
より高い画分を得ることができる。次に，上記の各操作
法を用いて得た該物質含有画分は，シリカゲル，ＯＤＳ
等を用いたカラムクロマトグラフィー，遠心液々分配ク
ロマトグラフィー，ＯＤＳを用いた高速液体クロマトグ
ラフィー（ＨＰＬＣ）等の常法により，さらに純粋に分
離精製することができる。本発明化合物は，二重結合を
有するのでｃｉｓ体，ｔｒａｎｓ体又は互変異性体が存
在する。本発明化合物の塩としては，無機酸若しくは有
機酸との酸付加塩，あるいは無機若しくは有機塩基との
塩であり，製薬学的に許容しうる塩が好ましい。これら
の塩としては，具体的には塩酸，臭化水素酸，ヨウ化水
素酸，硫酸，硝酸若しくはリン酸等の鉱酸，又は，ギ
酸，酢酸，プロピオン酸，シュウ酸，マロン酸，コハク
酸，フマル酸，マレイン酸，乳酸，リンゴ酸，酒石酸，
クエン酸，メタンスルホン酸若しくはエタンスルホン酸
等の有機酸，又はアスパラギン酸若しくはグルタミン酸
などの酸性アミノ酸との酸付加塩，ナトリウム，カリウ
ム，マグネシウム，カルシウム，アルミニウムなど無機
塩基，メチルアミン，エチルアミン，エタノールアミン
などの有機塩基，リジン，オルニチンなどの塩基性アミ
ノ酸との塩等を挙げることができる。また，本発明化合
物の水和物，各種溶媒和物，また互変異性体等が含まれ
る。更に，本発明化合物には，結晶多形を有する化合物
もあり，それらの結晶形をすべて包含するものである。
以下に本発明化合物の製剤化法，投与方法を詳述する。
式（Ｉ），（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）で示される化合物や
その製薬学的に許容される塩の１種又は２種以上を有効
成分として含有する医薬組成物は，通常用いられている
製剤用の担体や賦形剤，その他の添加剤を用いて，錠
剤，散剤，細粒剤，顆粒剤，カプセル剤，丸剤，液剤，
注射剤，坐剤，軟膏，貼付剤等に調製され，経口的又は
非経口的に投与される。本発明化合物のヒトに対する臨
床投与量は適用される患者の症状，体重，年令や性別等
を考慮して適宜決定される。通常成人１日当り経口で
０．１〜５００ｍｇ，非経口で０．０１〜１００ｍｇで
あり，これを１回あるいは数回に分けて投与する。投与
量は種々の条件で変動するので，上記投与量範囲より少
ない量で十分な場合もある。

【００２１】本発明による経口投与のための固体組成物
としては，錠剤，散剤，顆粒剤等が用いられる。このよ
うな固体組成物においては，一つ又はそれ以上の活性物
質が，少なくとも一つの不活性な希釈剤，例えば乳糖，
マンニトール，ブドウ糖，ヒドロキシプロピルセルロー
ス，微結晶セルロース，デンプン，ポリビニルピロリド
ン，メタケイ酸，アルミン酸マグネシウムと混合され
る。組成物は，常法に従って，不活性な希釈剤以外の添
加剤，例えばステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤
や繊維素グリコール酸カルシウムのような崩壊剤，ラク
トースのような安定化剤，グルタミン酸又はアスパラギ
ン酸のような可溶化乃至は溶解補助剤を含有していても
よい。錠剤又は丸剤は必要によりショ糖，ゼラチン，ヒ
ドロキシプロピルセルロース，ヒドロキシプロピルメチ
ルセルロースフタレートなどの胃溶性あるいは腸溶性物
質のフィルムで被膜してもよい。経口投与のための液体
組成物は，薬剤的に許容される乳濁剤，溶液剤，懸濁
剤，シロップ剤，エリキシル剤等を含み，一般的に用い
られる不活性な希釈剤，例えば精製水，エチルアルコー
ルを含む。この組成物は不活性な希釈剤以外に可溶化乃
至溶解補助剤，湿潤剤，懸濁剤のような補助剤，甘味
剤，風味剤，芳香剤，防腐剤を含有していてもよい。非
経口投与のための注射剤としては，無菌の水性又は非水
性の溶液剤，懸濁剤，乳濁剤を包含する。水性の溶液
剤，懸濁剤の希釈剤としては，例えば注射剤用蒸留水及
び生理食塩水が含まれる。非水溶性の溶液剤，懸濁剤の
希釈剤としては，例えばプロピレングリコール，ポリエ
チレングリコール，オリーブ油のような植物油，エチル
アルコールのようなアルコール類，ポリソルベート８０
（商品名。ポリオキシエチレンソルビタン高級脂肪酸エ
ステル）等がある。このような組成物は，さらに等張化
剤，防腐剤，湿潤剤，乳化剤，分散剤，安定化剤（例え
ば，ラクトース），可溶化乃至溶解補助剤のような添加
剤を含んでもよい。これらは例えばバクテリア保留フィ
ルターを通す濾過，殺菌剤の配合又は照射によって無菌
化される。これらは又無菌の固体組成物を製造し，使用
前に無菌水又は無菌の注射用溶媒に溶解して使用するこ
ともできる。

【００２２】本発明化合物の溶解性が低い場合には，可
溶化処理を施してもよい。可溶化処理としては，医薬製
剤に適用できる公知の方法，例えば界面活性剤（ポリオ
キシエチレン硬化ヒマシ油類，ポリオキシエチレンソル
ビタン高級脂肪酸エステル類，ポリオキシエチレンポリ
オキシプロピレングリコール類，ショ糖脂肪酸エステル
類等）を添加する方法，薬物と可溶化剤例えば高分子
（ハイドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭ
Ｃ），ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ），ポリエチレン
グリコール（ＰＥＧ）等の水溶性高分子，カルボキシメ
チルエチルセルロース（ＣＭＥＣ），ハイドロキシプロ
ピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ），メタ
アクリル酸メチル−メタアクリル酸共重合体（オイドラ
ギットＬ，Ｓ，商品名；ローム・アンド・ハース社製）
等の腸溶性高分子）との固体分散体を形成する方法が挙
げられる。更に必要により，可溶性の塩にする方法，サ
イクロデキストリン等を用いて包接化合物を形成させる
方法等も採用できる。可溶化の手段は，目的とする薬物
に応じて適宜変更できる［「最近の製剤技術とその応
用」，内海勇ら，医薬ジャーナル１５７−１５９（１９
８３）及び「薬学モノグラフＮｏ．１，生物学的利用
能」，永井恒司ら，ソフトサイエンス社，７８−８２
（１９８８）］。このうち，好ましくは，薬物と可溶化
剤との固体分散体を形成させ溶解性を改善する方法が採
用される（特開昭５６−４９３１４号，ＦＲ２４６０６
６７号）。

【００２３】本発明によれば前記活性化合物を単独ばか
りでなく，他の抗菌剤と組み合わせて（好ましくは１〜
３種）使用することができる。このような他の抗菌剤と
は，例えば，ニトロイミダゾール抗生物質（例えばチニ
ダゾール及びメトロニダゾール），テトラサイクリン系
薬剤（テトラサイクリン，ミノサイクリン，ドキシサイ
クリン），ペニシリン系薬剤（例えばアモキシリン，ア
ンピシリン，タランピシリン，バカンピシリン，レナン
ピシリン，メズロシリン，スルタミシリン），セファロ
スポリン系薬剤（例えば，セファクロル，セファドロキ
シル，セファレキシン，セフポドキシムプロキセチル，
セフィキシム，セフジニル，セフチブテン，セフオチア
ムヘクセチル，セフタメットピボキシル，セフロキシム
アクセチル），ペネム系薬剤（例えば，フロペネム，リ
チペネムアコキシル），マクロライド系薬剤（例えば，
エリスロマイシン，オレアンドマイシン，ジョサマイシ
ン，ミデカマイシン，ロキタマイシン，クラリスロマイ
シン，ロキシスロマイシン，アジスロマイシン），リン
コマイシン系薬剤（例えば，リンコマイシン，クリンダ
マイシン），アミノグリコシド系薬剤（例えば，パロモ
マイシン），キノロン系薬剤（例えば，オフロキサシ
ン，レボフロキサシン，ノルフロキサシン，エノキサシ
ン，シプロフロキサシン，ロメフロキサシン，トスフロ
キサシン，フレロキサシン，スパフロキサシン，テマフ
ロキサシン，ナジフォキサシン，グレパフロキサシン，
パズフォキサシン）並びにニトロフラントインを上げる
ことができる。また，酸に関連した疾患の治療に用いら
れる医薬化合物｛例えば，酸ポンプ阻害剤（オメプラゾ
ール及びランソプラゾール）｝又はＨ２アンタゴニスト
（例えば，ラニチジン，シメチジン及びファモチジン）
と前記活性化合物との組み合わせも，本発明の範囲内に
含まれる。

【００２４】

【実施例】以下，本発明を製造例，試験例により，さら
に詳しく説明するが，本発明はもちろんこれらの例に限
定されるものではない。

【００２５】実施例１グルコース１．０％，ポテトスターチ２．０％，酵母エ
キス０．５％，ポリペプトン０．５％，炭酸カルシウム
０．４％を含む種培地（ｐＨ７．０）を作成し，５００
ｍｌの三角フラスコに１００ｍｌずつ分注した。この培
地を１２１℃で２０分間滅菌した後，ベネット寒天上に
良く生育させたシュードモナスエスピー（Pseudomona
s sp.）Ｑ３３１６０株の菌体をかき取って接種し，２
８℃で７２時間振盪培養を行って種培養液とした。次に
生産培地として，グリセロール４．０％，コンスティプ
リカー３．０％，硝酸ナトリウム０．４％，炭酸カルシ
ウム０．２％，硫酸マグネシウム０．０２％，を含む培
地（ｐＨ５．５）を作成し，５００ｍｌの三角フラスコ
に１００ｍｌずつ分注した。この培地を１２１℃で２０
分間滅菌したものに，上記種培養液で得られた培養物を
２％の割合で接種し，２８℃で７２時間振盪培養した。

【００２６】このようにして培養した５ｌの培養液に２
０ｌのアセトンを加え，攪拌して一夜放置した後，濾過
して上清と沈澱物に分離した。上清を減圧下で濃縮しア
セトンを除去した後，得られた濃縮液をｐＨ８．５に調
整し，酢酸エチル５ｌで２回抽出した。酢酸エチル層を
減圧下で濃縮乾固し，粗抽出物を得た。この粗抽出物
を，ＯＤＳ−７５１５−１２Ａ（センシュウ科学社製）
を用いたフラッシュクロマトグラフィーに付し，メタノ
ール／水（８：１）及び（９：１）で溶出した活性画分
８９．７ｍｇを得た。最終的に，ＳＵＰＥＬＣＯＳＩＬ
ＬＣＡＢＺ＋ＰＬＵＳ（スペルコ社製）２１．２φ
×２５０ｍｍのカラムを用い，メタノール：水（７５：
２５）を用いたＨＰＬＣにより精製を行い，３２．７分
に溶出されてくる活性画分Ｑ３３１６０−Ａ物質４７．
９ｍｇ及び３３．９分に溶出されてくる活性画分Ｑ３３
１６０−Ｂ物質１７．７ｍｇを単離した。液体クロマト
グラフィー（ＨＰＬＣ）の条件は以下の通りである。カラム：ＳＵＰＥＬＣＯＳＩＬＬＣ−ＡＢＺ＋ＰＬＵ
Ｓ（スペルコ社製，２１．２φ×２５０ｍｍ）溶出溶媒：メタノール：水（＝７５：２５）の混合溶液流出速度：４ｍｌ／ｍｉｎ検出波長：２１０ｎｍ上記抽出，分離，精製されたＱ３３１６０−Ａ物質は下
記の物理化学的性質を有する。（１）色及び形状：白色粉末。（２）酸性，中性，塩基性の区分：中性。（３）溶解性：メタノール，クロロホルムには溶けるが
水，ヘキサンにはほとんど溶けない。（４）紫外部吸収スペクトル：２１４，２３９，３２
３，３３５ｎｍに吸収極大を示し，第１図通りである
（溶剤：メタノール）。（５）分子量：２５５．３６（６）マススペクトル（ＦＡＢ−Ｍａｓｓ）：２５６
［Ｍ＋Ｈ］⁺，２５４［Ｍ−Ｈ］^- （７）分子式：Ｃ₁₇Ｈ₂₁ＮＯ（８）赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ）は，第２図通りで
ある。（９）¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ₃）：Ｑ３３１６０−Ａ物質の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル
は第３図の通りである。（１０）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＣＤ
Ｃｌ₃）：Ｑ３３１６０−Ａ物質の¹³Ｃ−ＮＭＲスペク
トルは第４図の通りである。上記の物理化学的性質からＱ３３１６０−Ａ物質の化学
構造式は下記のように決定された。

【００２７】

【化７】

【００２８】上記抽出，分離，精製されたＱ３３１６０
−Ｂ物質は下記の物理化学的性質を有する。（１）色及び形状：白色粉末。（２）酸性，中性，塩基性の区分：中性。（３）溶解性：メタノール，クロロホルムには溶けるが
水，ヘキサンにはほとんど溶けない。（４）紫外部吸収スペクトル：２１３，２４１，３２
２，３３５ｎｍに吸収極大を示し，第５図通りである
（溶剤：メタノール）。（５）分子量：２５５．３６（６）マススペクトル（ＦＡＢ−Ｍａｓｓ）：２５６
［Ｍ＋Ｈ］⁺，２５４［Ｍ−Ｈ］^- （７）分子式：Ｃ₁₇Ｈ₂₁ＮＯ（８）赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ）は，第６図通りで
ある。（９）¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ₃）：Ｑ３３１６０−Ｂ物質の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル
は第７図の通りである。（１０）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＣＤ
Ｃｌ₃）：Ｑ３３１６０−Ｂ物質の¹³Ｃ−ＮＭＲスペク
トルは第８図の通りである。上記の物理化学的性質からＱ３３１６０−Ｂ物質の化学
構造式は下記のように決定された。

【００２９】

【化８】

【００３０】前記活性化合物のインビトロ活性は以下の
方法により示すことができる。実施例２前記物質のインビトロ活性測定は以下の方法により示す
ことができる。抗菌活性の測定抗菌物質含有寒天平板の作製評価する物質を１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳ
Ｏ）に溶解し，２倍系列希釈した。本希釈液を滅菌丸シ
ャーレに入れ，そこに滅菌後５０℃に保温しておいた１
０ｍｌのブルセラ寒天培地（０．１％β−サイクロデキ
ストリン）に加え，混和後，固めた。ＤＭＳＯの最終濃
度は１％以下となる。接種材料の調製と結果判定ブルセラ寒天培地（５％仔牛血清含有）を用いてマルチ
ガスインキュベーター（Ｎ₂８０％，ＣＯ₂１５％，Ｏ₂
５％）で３７℃にて３日間培養したヘリコバクター・ピ
ロリ菌，例えばヘリコバクター・ピロリＡＴＣＣ４３５
０４を，濁度により約１０⁸個／１ｍｌになるようにブ
ルセラブロスを用いて調製した。本菌液を，同様にブル
セラブロスを用いて１００倍希釈した液を，薬剤を含有
する寒天培地に，ミクロプランターを用いて約５μｌを
寒天表面に接種した。接種した寒天平板を，上記マルチ
ガスインキュベーターに３７℃で３日間（７２時間）培
養する。培養を終了した寒天平板を観察し，増殖の観察
されない薬剤濃度をＭＩＣとした。その結果，Ｑ３３１
６０−Ａ物質でのＭＩＣは０．００６μｇ／ｍｌ，Ｑ３
３１６０−Ｂ物質でのＭＩＣは，０．０２５μｇ／ｍｌ
であった。

【００３１】実施例３通性嫌気性菌，好気性菌に対するインビトロ活性測定は
以下の方法により測定する。抗菌物質含有寒天平板の作製評価する物質を１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳ
Ｏ）に溶解し，２倍系列希釈した。本希釈液を滅菌丸シ
ャーレに入れ，そこに滅菌後５０℃に保温しておいた１
０ｍｌのミューラーヒントン寒天培地に加え，混和後，
固めた。ＤＭＳＯの最終濃度は１％以下となる。接種材料の調製と結果判定ミューラーヒントンブロスを用いて，３７℃に設定した
フラン器で終夜培養した菌液を，ミューラーヒントンブ
ロスを用いて約１０⁶個／１ｍｌになるように希釈調製
した。本菌液を，薬剤を含有する寒天培地に，ミクロプ
ランターを用いて約５μｌを寒天表面に接種した。接種
した寒天平板を，３７℃のフラン器で１８時間培養し
た。培養を終了した寒天平板を観察し，増殖の観察され
ない薬剤濃度をＭＩＣとした。結果Ｑ３３１６０−Ａ，Ｑ３３１６０−Ｂは，スタフィロコ
ッカスアウレウス（Staphylococcus oureus）ＦＤＡ
２０９Ａ，エシェリシアコリ（Escherichiacolｉ）Ｏ
−１，シュードモナスエルギノザ（Pseudomonas aer
uginosa）ＮＣＴＣ１０４９０のような代表的通性嫌気
性菌，好気性菌に対するＭＩＣが５０μｇ／ｍｌよりも
大きな値を示した。

【００３２】実施例４嫌気性菌に対するインビトロ活性測定は以下の方法によ
り測定する。抗菌物質含有寒天平板の作製評価する物質を１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳ
Ｏ）に溶解し，２倍系列希釈した。本希釈液を滅菌丸シ
ャーレに入れ，そこに滅菌後５０℃に保温しておいた１
０ｍｌのＧＡＭ寒天培地に加え，混和後，固めた。ＤＭ
ＳＯの最終濃度は１％以下となる。接種材料の調製と結果判定ＧＡＭブイヨンを用いて，Ｎ₂８０％ＣＯ₂１０％Ｈ₂１
０％の混合ガスでガス置換した嫌気性菌培養装置を用い
て３７℃にて終夜培養した菌液を，同じＧＡＭブイヨン
を用いて約１０⁶個／１ｍｌになるように調製した。本
菌液を，薬剤を含有する寒天培地に，ミクロプランター
を用いて約５μｌを寒天表面に接種した。接種した寒天
平板を，上記の３７℃に設定してある嫌気性菌培養装置
で１８時間培養した。培養を終了した寒天平板を観察
し，増殖の観察されない薬剤濃度をＭＩＣとした。結果Ｑ３３１６０−Ａ，Ｑ３３１６０−Ｂは，ビフィドバク
テリウムビフィダム（Bifidobacterium bifidum）Ｃ
ＡＹＡ２１−１，ペプトストレプトコッカスプロダクタ
ス（Peptostreptococcus productus）ＣＡＹＡ１２−
２，バクテロイデスフラジリス（Bacteroides fragi
ris）ＧＡ１５５６２のような扁性嫌気性菌に対するＭ
ＩＣは５０μｇ／ｍｌより大きな値を示した。

【００３３】

【発明の効果】本発明は，ヘリコバクター・ピロリに対
して抗菌作用を示し，ヒトにおけるヘリコバクター・ピ
ロリ及び動物における関連するヘリコバクター属に属す
る細菌感染の治療に有効である。また，本発明抗ヘリコ
バクター・ピロリ剤は，消化性潰瘍（例えば胃及び十二
指腸潰瘍），炎症（胃炎，十二指腸炎），胃癌等の消化
管上部の疾患，もしくは慢性心疾患等の治療にも有効で
ある。

【００３４】

【図面の簡単な説明】

【図１】Ｑ３３１６０−Ａ物質の紫外部吸収スペクトル
を示す。

【図２】Ｑ３３１６０−Ａ物質の赤外部吸収スペクトル
を示す。

【図３】Ｑ３３１６０−Ａ物質の¹Ｈ−ＮＭＲスペクト
ルを示す。

【図４】Ｑ３３１６０−Ａ物質の¹³Ｃ−ＮＭＲスペクト
ルを示す。

【図５】Ｑ３３１６０−Ｂ物質の紫外部吸収スペクトル
を示す。

【図６】Ｑ３３１６０−Ｂ物質の赤外部吸収スペクトル
を示す。

【図７】Ｑ３３１６０−Ｂ物質の¹Ｈ−ＮＭＲスペクト
ルを示す。

【図８】Ｑ３３１６０−Ｂ物質の¹³Ｃ−ＮＭＲスペクト
ルを示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者小山謙一茨城県つくば市二の宮３−13−１−321 (72)発明者鷲崎清司埼玉県上尾市富士見１−11−30

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式（Ｉ）で示される２−（２−ヘプ
テニル）−３−メチル−４（１Ｈ）−キノロンを有効成
分とする抗ヘリコバクター・ピロリ剤。【化１】
【請求項２】下記式（ＩＩ）で示される２−（２−ｃ
ｉｓ−ヘプテニル）−３−メチル−４（１Ｈ）−キノロ
ンを有効成分とする抗ヘリコバクター・ピロリ剤。【化２】
【請求項３】下記式（ＩＩＩ）で示される２−（２−
ｔｒａｎｓ−ヘプテニル）−３−メチル−４（１Ｈ）−
キノロンを有効成分とする抗ヘリコバクター・ピロリ
剤。【化３】
【請求項４】２−（２−ｃｉｓ−ヘプテニル）−３−
メチル−４（１Ｈ）−キノロン又はその塩。