JPH10292000A - α−グルコシダーゼ阻害物質及びその混合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 α−グルコシダーゼの活性を有効に阻害でき
ると共に、人体に対する安全性も高く、食品等として摂
取することが可能なα−グルコシダーゼ阻害物質を提供
する。 【解決手段】 植物性タンパク質又は動物性タンパク質
を加水分解し、イオン交換樹脂により精製し、分子ふる
いゲル濾過して得られた、分子量２００〜１０００のペ
プチドはα−グルコシダーゼ阻害活性を有する。該ペプ
チドは単離しても、混合物でもα−グルコシダーゼ阻害
活性を有する。単離して得た特に阻害活性の高いペプチ
ドの構造式は次の５種である。 Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ … 式（１） Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ … 式（２） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ … 式（３） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ … 式（４） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ … 式（５）

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、α−グルコシダー
ゼの活性を阻害するペプチドからなるα−グルコシダー
ゼ阻害物質、或いは該ペプチド２種以上のα−グルコシ
ダーゼ阻害活性を有するペプチド混合物に関する。

【０００２】

【従来の技術】ヒトが摂取する炭水化物のうち最も割合
の多いのはデンプンとシュクロースであり、摂取される
炭水化物全体の８０〜９０％を占めると言われている。
デンプンは、食後、唾液中のα−アミラーゼにより、α
−デキストリンに分解され、胃、十二指腸に至り、膵臓
から分泌されるα−アミラーゼによりマルトデキストリ
ンを経てマルトース、イソマルトースにまで加水分解さ
れ小腸に至る。一方、シュクロースは途中の消化器官で
分解を受けずに小腸に達する。小腸に達したこれらの糖
類は、小腸の微繊毛に局在するα−グルコシダーゼによ
り、構成糖である単糖類に分解され吸収される。

【０００３】デンプンやシュクロースを摂取すると消化
吸収されて血糖値（血中グルコース濃度）が急激に上昇
する。健康な人であれば血糖値が上昇すると、インスリ
ンの分泌が刺激され、血液中のインスリン濃度が高ま
り、血糖値の調整が行われる。しかし、食べ過ぎや飲み
過ぎでデンプンやシュクロースの摂取が多すぎると血液
中のグルコース濃度及び量が増加し、インスリンの分泌
量が多くなる。この様な状態が長期間続くと膵臓の機能
が低下し、糖尿病発病の原因となるとされている。

【０００４】近年、α−グルコシダーゼ阻害物質を投与
するとα−グルコシダーゼ阻害物質が小腸の微絨毛に局
在するα−グルコシダーゼを阻害し、食後の血糖値の急
上昇とインスリンの分泌量増加を抑制することが知られ
ている（例えば、特開昭５２−１２２３４２号公報、DI
ABETIC MEDICINE, 1993;10:688-693,134-138, Am,J.Cli
n.Nutr.1992;55:318S-9S 、特開昭５７−２００３３５号
公報、Am, J.Clin.Nutr.1992;55:314S-7S 、 特開昭５７
−５９８１３号公報参照）。このようなα−グルコシダ
ーゼ阻害物質のうち、アカルボースはインスリン非依存
型糖尿病（略語：ＮＩＤＤＭ）用の経口糖尿病治療薬と
して用いられている。しかしながら、これらの物質は本
来生体に対して異物であって、安全性については懸念が
残されており、使用量について厳しい規定が定められて
いる。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】上記のように従来のα
−グルコシダーゼ阻害物質は、副作用等の安全性の点で
問題を有しているため、通常摂取する食品に含まれるよ
うな物質で安全性が高く、α−グルコシダーゼを阻害す
る物質の開発が望まれていた。

【０００６】そこで本発明は、上記のような事情を鑑み
なされたものであり、α−グルコシダーゼの活性を有効
に阻害できると共に、人体に対する安全性も高く、食品
等として摂取することが可能なα−グルコシダーゼ阻害
物質を提供することを目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、食品とし
て一般に摂取されている植物及び動物に由来する蛋白質
の加水分解物に注目し、それらの加水分解物にα−グル
コシダーゼ阻害作用があるかどうかについて検討した。
その結果、これらの蛋白質の加水分解物にα−グルコシ
ダーゼ阻害作用があることを見出し、さらにこの加水分
解物を精製して得たα−グルコシダーゼ阻害活性が高い
特別なペプチドを見出し、本発明を完成した。

【０００８】すなわち、本発明は、植物性タンパク質又
は動物性タンパク質を加水分解し、イオン交換樹脂によ
り精製し、分子ふるいゲル濾過して得られた、α−グル
コシダーゼ阻害活性を有する分子量２００〜１０００の
ペプチドから選ばれたα−グルコシダーゼ阻害物質であ
る。

【０００９】また、本発明は、前記のα−グルコシダー
ゼ阻害活性を有する分子量２００〜１０００の各種ペプ
チドの混合物である。

【００１０】また、本発明は、ペプチドの分子量とα−
グルコシダーゼ活性の関係を調べ、特に高いα−グルコ
シダーゼ阻害活性を示す分子量の範囲、即ち、分子量２
００〜１０００を見出し、該分子量のペプチドの１種以
上を有効成分として、慣用的な製剤技術に従って各種の
剤型をなしたα−グルコシダーゼ阻害剤を構成したもの
である。

【００１１】また、本発明は、下記の式（１）〜式
（５）で示されるα−グルコシダーゼ阻害活性を有する
ペプチドから選ばれた何れか１種のα−グルコシダーゼ
阻害物質である。

【００１２】 Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ … 式（１） Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ … 式（２） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ … 式（３） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ … 式（４） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ … 式（５） また、本発明は、上記式（１）〜式（５）で示されるα
−グルコシダーゼ阻害活性を有するペプチドを２種以上
混合した状態の、α−グルコシダーゼ阻害活性を有する
ペプチド混合物であってもよい。

【００１３】上記式（１）〜式（５）のペプチドまたは
その混合物は、馬鈴薯から分離させた馬鈴薯タンパク質
をプロテアーゼにより加水分解して製造することができ
る。上記式（１）〜式（５）のペプチドは、公知の手法
に従い化学合成により製造してもよい。

【００１４】本発明のα−グルコシダーゼ阻害活性を有
するペプチド或いはペプチド混合物、及びα−グルコシ
ダーゼ阻害剤は、植物性タンパク質又は動物性タンパク
質を加水分解して得ることができ、また、それらのペプ
チドのうちアミノ酸構成の判明したペプチドを化学合成
により製造することができ、これらのペプチドは人体に
対して安全性が高いと言える。

【００１５】本発明のα−グルコシダーゼ阻害活性を有
するペプチド或いはペプチド混合物を、食品又は飼料に
添加したものを人又は動物が摂取することにより、或い
は医薬の有効成分として投与することにより、該α−グ
ルコシダーゼ阻害活性を有するペプチド或いはペプチド
混合物は、人または動物の小腸の微絨毛においてα−グ
ルコシダーゼを阻害し、食後の血糖値の急上昇及びそれ
に続くインスリン値の急上昇を抑制することが期待され
る。

【００１６】したがって、本発明のα−グルコシダーゼ
阻害活性を有するペプチド或いはペプチド混合物が添加
された食品は又は飼料は、健康食品、糖尿病疾患者用食
品、痩身用食品、家畜・ペット用のダイエットや糖尿病
予防飼料等に有用である。

【００１７】

【実施例】以下本発明の実施例について説明する。

【００１８】〔実施例１〕１．粗精製ペプチドの製造 馬鈴薯から分離された蛋白質（商品名：ポテトプロテイ
ン，ホクレン農業協同組合連合会製）に３倍量の２％水
酸化ナトリウム水溶液を加え、均一に分散後、濃塩酸を
加えてｐＨ７．０に調整した。得られた分散液の蛋白質
量に対して、豚膵臓由来の蛋白質分解酵素（商品名：パ
ンクレアチン，和光純薬株式会社製）と微生物由来の蛋
白質分解酵素（商品名：アマノＰ、天野製薬株式会社
製）をそれぞれ１重量％加え、４０℃で１２０分間反応
させた。

【００１９】得られた反応物を遠心分離して溶液画分と
沈澱画分に分離した。該沈澱画分を除去し、該溶液画分
を限外濾過膜により脱色後、イオン交換樹脂により精製
して粗精製液を得た。この粗精製液を逆浸透膜により脱
塩、濃縮し、得られた濃縮液を噴霧乾燥して粉末物を得
た。この粉末物を粗精製ペプチドとした。

【００２０】２．精製ペプチドの製造 カラム容積が１５００ＣＣのゲル濾過クロマトグラフィ
ー用のカラム（東ソー株式会社製、トヨパールＨＷ−４
０ＣＯＵＲＳＥ）を使用し、前記１．の工程で得られた
粗精製ペプチドを分子ふるいゲル濾過クロマトグラフィ
ーにより、展開液は純水を使用し、流量が１００ｍｌ／
ｈｒになるようにして、各フラクションに１５ｍｌづつ
分画して、１〜２１０のフラクションを得た。

【００２１】分画された各フラクションを分光光度計で
公知の紫外部吸収法により２８０ｎｍ及び２２０ｎｍの
吸光度を測定した。その結果を図１に示す。また各フラ
クションを数個まとめた画分を凍結乾燥して得た粉末物
を各精製ペプチドとした。このようにして得られた各精
製ペプチドの量を計測した。その結果を下記の表１に示
す。

【００２２】

【表１】

【００２３】表１及び図１では、溶出時間の早いフラク
ションＮｏ．の小さい画分（３１〜６４）では高分子成
分が分画され、溶出時間の遅いフラクションＮｏ．の大
きい画分（７８〜１４０）では徐々に低分子のペプチド
が分画されている様子が示されている。

【００２４】３．α−グルコシダーゼ粗酵素液の調製 ラットの小腸粘膜を採取し、これに５ｍＭ ＥＤＴＡを
含む０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を加えてホモ
ジナイズし、遠心分離により沈澱物を回収した。この沈
澱物に少量の同緩衝液を加えて懸濁し、これに１％のＴ
ｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含む同緩衝液５倍量を加え、
５℃で低温室で６０分間攪拌し酵素を抽出した。遠心分
離により沈澱物を除去し、さらに０．０１Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ７．０）中で透析し、粗酵素液を得た。

【００２５】４．α−グルコシダーゼ阻害活性の測定 分子ふるいゲル濾過クロマトグラフィー精製前の粉末物
と、上記の精製ペプチドの製造で分画して得た各フラク
ションを数個まとめてなる画分を凍結乾燥して得られた
各粉末物について、α−グルコシダーゼ阻害活性を次の
ようにして測定した。

【００２６】基質として２０ｍＭシュクロース０．５ｍ
ｌを試験管にとり、各粉末物を０．２〜２．０重量％に
なるように０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）で希釈
したものを０〜０．４ｍｌ前記試験管に加え、さらに
０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を０．４〜０ｍｌ
加えた。すなわち、上記粉末物を含む０．１Ｍリン酸緩
衝液の全量がいずれも０．４ｍｌになるようにした。こ
れらの基質・α−グルコシダーゼ阻害物質含有溶液に２
０ｍＭシュクロース０．１ｍｌと、前記工程で得たラッ
ト小腸のα−グルコシダーゼ粗酵素液を適宜希釈した酵
素溶液を０．１ｍｌ加え、３７℃で３０分間反応させ
た。その後、２Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．
０）を２ｍｌ加えて反応を停止し、酵素反応で生じたグ
ルコース量をグルコースオキシダーゼを用いた酵素法に
より定量した。酵素阻害活性は、基質のみと粗酵素液に
よる反応を１００％とし、この値から基質に粉末物と粗
酵素液を加えた時の酵素活性を差し引いた値を阻害活性
とした。

【００２７】分子ふるいゲル濾過クロマトグラフィー精
製前の粉末物の酵素阻害活性の結果を図２に示す。図２
において、反応液中に添加した分子ふるいゲル濾過クロ
マトグラフィー精製前の粉末物の添加量を横軸に示し、
酵素阻害活性を縦軸にグラフとして示した。図２に示す
ように該粉末物の濃度を増加させるに従い、酵素活性は
低下する結果となった。このことから、分子ふるいゲル
濾過クロマトグラフィー精製前の粉末物にα−グルコシ
ダーゼの反応を阻害する活性があることが分かる。

【００２８】また、ゲル濾過クロマトグラフィーにより
得られた上記の精製ペプチドについてのα−グルコシダ
ーゼ阻害活性を上記の方法で測定した。その結果を下記
の表２に示す。なお、表２には、分子ふるいゲル濾過ク
ロマトグラフィー精製前の粉末物についてのα−グルコ
シダーゼ阻害活性も併せて示す（粗精製の欄）。

【００２９】

【表２】

【００３０】表２に示すとおり、分子ふるいゲル濾過精
製で溶出時間の遅い低分子量フラクション（フラクショ
ンＮｏ．８４以降）ほどα−グルコシダーゼの反応を阻
害することがわかる。

【００３１】また、前記実験でα−グルコシダーゼ阻害
活性の高かったフラクションＮｏ．８４〜９５、フラク
ションＮｏ．９６〜１４０、フラクションＮｏ．１４１
〜１６３、フラクションＮｏ．１６４〜１８８、フラク
ションＮｏ．１９９〜２１０について、α−グルコシダ
ーゼ阻害率が５０％になるために必要なペプチドの濃度
ＩＣ₅₀を測定した。その結果を下記の表３に示す。

【００３２】

【表３】

【００３３】各フラクションを数個まとめた各画分の分
子量の測定は、ゲル濾過カラム（東ソー社製 ＴＳＫ
ｇｅｌ Ｇ２５００ｐｗ７．５×３００ｍｍ）を用いて
高速液体クロマトグラフィー（日立製作所製ＬＣ−６２
００）で常法により行った。分子量マーカーとしては、
血清アルブミン、チトローム−Ｃ、バシトラシン、Ｇｌ
ｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ
を用いた。その結果を下記の表４に示す。

【００３４】

【表４】

【００３５】上記表２及び表４によれば、分子量２００
〜１０００のペプチドにα−グルコシダーゼ活性が高い
ことが分かる。

【００３６】〔実施例２〕前記表１において特に精製量
が多く、且つ前記表２においてα−グルコシダーゼ阻害
活性の特に高かった画分（フラクションＮｏ．９６〜１
４０）を凍結乾燥させてなる粉末物を２ｍｌの蒸留水に
溶解した後、ＯＤＳカラム（ナカライテスク社製 ＣＯ
ＳＭＯＳＩＬ ５Ｃｌ８ＡＲ，１×２５ｃｍ）を用いて
高速液体クロマトグラフィー（日立製作所製ＬＣ−６２
００）でさらに分画を行った。

【００３７】ここで上記高速液体クロマトグラフィーに
よる分画方法は、０．１％ＴＦＡ水溶液（Ａ液）と０．
１％ＴＦＡを含む４０％アセトニトリル溶液（Ｂ液）と
を用い、当初１５分間は上記Ａ液だけを加え、１５．１
〜４５分の間で、上記Ａ液を１００〜０％に減少させる
一方、Ｂ液を０〜１００％増加させた後、４５．１〜６
０分の間はＢ液だけ流し分画を行った。なお、この時の
溶出液の流量は２ｍｌ／分、測定はＵＶ２２０ｎｍで行
った。図３〜図８にその分析結果として得られたチャー
トを示す。ピークが現れた図４、図５、図８、図６及び
図７によれば、３９．８分、４０．０分、４０．３分、
４０．６分、４１．０分にピークが示されている。

【００３８】このように分画した各画分のものについ
て、それぞれ蛋白量（ペプチド量）及びα−グルコシダ
ーゼ阻害活性を次のようにして測定した。

【００３９】ここで蛋白量の測定は、次のようにして行
った。即ち、公知のＬｏｗｒｙ−Ｆｏｌｉｎ法を用いて
行った。すなわち本実施例２においては、１０〜１００
μｇを含む試料０．１〜０．２ｍｌを試験管にとり、２
％Ｎａ₂ ＣＯ₃ を含む０．１Ｎ ＮａＯＨ溶液５０部と
０．５％ＣｕＳＯ₄ を含む１％クエン酸ナトリウム１部
で調製した試薬１ｍｌを加えてよく攪拌後、室温に１０
分間放置し、次いで酸濃度が１ＮのＦｏｌｉｎ−Ｃｉｏ
ｃａｌｔｅｕ試薬（市販品）１ｍｌをすばやく加えて１
時間後７５０ｎｍで比色定量した。あらかじめ牛血清ア
ルブミンで作成した標準曲線から蛋白量（ペプチド量）
を計算した。α−グルコシダーゼ阻害活性の測定は前記
実施例１と同様にして行った。

【００４０】更に、図４〜図８の各ピーク画分を再度上
記と同じ方法で高速液体クロマトグラフィーによる分取
精製を行い単一画分として精製した。次いで分画精製さ
れた４ピーク画分についてプロテインシーケンサー（ア
プライドバイオシステム社製４７７Ａ型）により、これ
らに含まれるペプチドの構造を特定した。この結果、こ
れらのペプチドは式（１）〜式（５）に示す構造式を有
するペプチドであることを確認した。

【００４１】 Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ 式（１） Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ 式（２） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ 式（３） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ 式（４） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ … 式（５） また、構造式（１）〜（５）の各ペプチドについてＩＣ
₅₀を測定した。その結果を表５に示す。

【００４２】

【表５】

【００４３】表５によれば、上記構造式（１）〜（５）
で示されるペプチドは、α−グルコシダーゼに対して有
効に阻害することがわかる。

【００４４】

【発明の効果】本発明の植物性或いは動物性タンパク質
を加水分解し、分子ふるいゲル濾過して得られた分子量
２００〜１０００のペプチドから選ばれたα−グルコシ
ダーゼ阻害物質又はそれらのペプチド混合物、或いは前
記式（１）〜式（５）で特定されたペプチド又は式
（１）〜式（５）の２種以上のペプチドからなるα−グ
ルコシダーゼ阻害を有するペプチド混合物は、α−グル
コシダーゼを有効に阻害する。本発明のα−グルコシダ
ーゼ阻害物質又はα−グルコシダーゼ阻害活性を有する
ペプチド混合物は、植物性或いは動物性タンパク質から
得たものであるので、食品、飼料、或いは医薬等とし
て、摂取或いは投与する場合に安全性が高いものと言
え、有用である。

【図面の簡単な説明】

【図１】馬鈴薯蛋白質の蛋白酵素分解物の分子ふるいゲ
ル濾過クロマトグラフィーの分画精製の結果を示すグラ
フ（検出ＵＶ２８０ｎｍ及びＵＶ２２０ｎｍ）である。

【図２】馬鈴薯蛋白質の蛋白酵素分解物がラット小腸起
源の消化酵素α−グルコシダーゼを阻害する作用を示す
グラフである。

【図３】α−グルコシダーゼ阻害活性の高かった画分
（フラクションＮｏ．９６〜１４０）を凍結乾燥させて
なる粉末物を高速液体クロマトグラフィーした結果を示
すチュートである。

【図４】高速液体クロマトグラフィーにおける３９．８
分の位置にピークが現れたチャートである。

【図５】高速液体クロマトグラフィーにおける４０．０
分の位置にピークが現れたチャートである。

【図６】高速液体クロマトグラフィーにおける４０．６
分の位置にピークが現れたチャートである。

【図７】高速液体クロマトグラフィーにおける４１．０
分の位置にピークが現れたチャートである。

【図８】高速液体クロマトグラフィーにおける４０．３
分の位置にピークが現れたチャートである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｎ 9/99 // Ａ６１Ｋ 38/55 ＡＤＰ Ａ６１Ｋ 37/64 ＡＤＰ (72)発明者 塩見 ▲徳▼夫 北海道札幌市厚別区上野幌２条４丁目１− 29 (72)発明者 小野寺 秀一 北海道札幌市白石区平和通１丁目北７−23 アサヒ平和ビル303

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 植物性タンパク質又は動物性タンパク質
   を加水分解し、イオン交換樹脂により精製し、分子ふる
   いゲル濾過して得られた、α−グルコシダーゼ阻害活性
   を有する分子量２００〜１０００のペプチドから選ばれ
   たα−グルコシダーゼ阻害物質。
2. 【請求項２】 植物性タンパク質又は動物性タンパク質
   を加水分解し、イオン交換樹脂により精製し、分子ふる
   いゲル濾過して得られた、分子量２００〜１０００のα
   −グルコシダーゼ阻害活性を有するペプチド混合物。
3. 【請求項３】 分子量２００〜１０００のペプチドの１
   種以上を有効成分とするα−グルコシダーゼ阻害剤。
4. 【請求項４】 下記の式（１）で示されるα−グルコシ
   ダーゼ阻害物質。 Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ … 式（１）
5. 【請求項５】 下記の式（２）で示されるα−グルコシ
   ダーゼ阻害物質。 Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ … 式（２）
6. 【請求項６】 下記の式（３）で示されるα−グルコシ
   ダーゼ阻害物質。 Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ … 式（３）
7. 【請求項７】 下記の式（４）で示されるα−グルコシ
   ダーゼ阻害物質。 Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ … 式（４）
8. 【請求項８】 下記の式（５）で示されるα−グルコシ
   ダーゼ阻害物質。 Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ … 式（５）
9. 【請求項９】 下記の式（１）〜式（５）で示されるペ
   プチドから選ばれた２種以上のペプチドを混合した状態
   のα−グルコシダーゼ阻害活性を有するペプチド混合
   物。 Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ … 式（１） Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ … 式（２） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ … 式（３） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ … 式（４） Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｌａ … 式（５）