JPH10295391A - （ｓ）−１−（３−トリフルオロメチルフェニル）エタノールの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 医薬、農薬の中間体として有用な（Ｓ）−１
−（３−トリフルオロメチルフェニル）エタノールの工
業的有利な製造法を提供する。 【解決手段】 式（Ｉ）： 【化１】 で示される１−アセチル−３−トリフルオロメチルベン
ゼンのカルボニル基を立体特異的に還元する能力を有
し、キャンディダ属、ロドトルラ属、クリプトコッカス
属、ボトリオアスカス属、ピキア属、スポロボロマイセ
ス属、ロデロマイセス属、オーレオバシディウム属、又
はホルモネマ属に属することを特徴とする微生物の菌体
及び／又はそれらの調製物を、前記式（Ｉ）で示される
１−アセチル−３−トリフルオロメチルベンゼンに作用
させて、そのカルボニル基を立体特異的に還元すること
を特徴とする、式（ＩＩ）： 【化２】 で示される（Ｓ）−１−（３−トリフルオロメチルフェ
ニル）エタノールの製造方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は（Ｓ）−１−（３−
トリフルオロメチルフェニル）エタノールの製造法に関
し、詳しくは微生物を利用した、（Ｓ）−１−（３−ト
リフルオロメチルフェニル）エタノールの効率的な製造
方法に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】（Ｓ）
−１−（３−トリフルオロメチルフェニル）エタノール
は、種々の医薬品、農薬等に利用される光学活性化合物
あるいはこれらの合成中間体の合成原料として有用であ
る。従来、（Ｓ）−１−（３−トリフルオロメチルフェ
ニル）エタノールの製造方法としては、例えば、対応す
るスチレン体からパラジウムーホスフィン触媒を用いた
不斉ヒドロシリル化により得る方法（Chem.Pharm.Bull.
1995,43(6),p927）または、市販リパーゼを用いたアシ
ル化による光学分割法（Tetrahedron:Asymmetry 1995,6
(9),p2385およびTetrahedron:Asymmetry 1996,7(6),p15
81）などがある。これらの方法では、操作が煩雑、立体
選択性が十分でない、用いる触媒が高価であるなどの問
題点を有している。

【０００３】一方、微生物の菌体または酵素を用いて対
応するカルボニル化合物から不斉還元により光学活性フ
ェニルアルコールを得る方法については多数の報告があ
る（Monatsh.Chemie 1985,116,p1233、J.Org.Chem.198
8,53,p4405、特開平８−２６６２９２号公報、特開平６
−１７８６９１号公報、特開平５−２１９９６７号公
報、特開平５−１９９８８９号公報、特開平４−２１８
３８４号公報、特開平４−３１６４８９号公報、特開平
４−３３０２７８号公報、欧州特許第４４１１６０号公
報、特開平２−２９５９７０号公報、特開平８−８９２
６１号公報、特開昭６１−１０８３９４号公報など）。

【０００４】しかしながら、１−アセチル−３−トリフ
ルオロメチルベンゼンから、微生物を用いた不斉還元に
より光学活性な１−（３−トリフルオロメチルフェニ
ル）エタノールを製造した例は知られていない。本発明
は、上記観点からなされたものであり、簡便かつ安価な
方法で光学純度の高い（Ｓ）−１−（３−トリフルオロ
メチルフェニル）エタノールを製造する方法を提供する
ことを課題とする。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために、（Ｓ）−１−（３−トリフルオロメ
チルフェニル）エタノールの効率的な製造法を開発すべ
く鋭意研究を行ったところ、微生物の菌体及び／又はそ
れらの調製物を１−アセチル−３−トリフルオロメチル
ベンゼンに作用させることにより、（Ｓ）−１−（３−
トリフルオロメチルフェニル）エタノールが効率的に得
られることを見出し、本発明を完成するに至った。すな
わち本発明の要旨は、下記式（Ｉ）：

【０００６】

【化３】

【０００７】で示される１−アセチル−３−トリフルオ
ロメチルベンゼンのカルボニル基を立体特異的に還元す
る能力を有する微生物の菌体及び／又はそれらの調製物
を、前記式（Ｉ）で示される１−アセチル−３−トリフ
ルオロメチルベンゼンに作用させて、そのカルボニル基
を立体特異的に還元することを特徴とする、下記式（Ｉ
Ｉ）：

【０００８】

【化４】

【０００９】で示される（Ｓ）−１−（３−トリフルオ
ロメチルフェニル）エタノールの製造方法に存する。本
発明の好ましい実施の形態としては、式（Ｉ）：

【００１０】

【化５】

【００１１】で示される１−アセチル−３−トリフルオ
ロメチルベンゼンのカルボニル基を立体特異的に還元す
る能力を有するキャンディダ属、ロドトルラ属、クリプ
トコッカス属、ボトリオアスカス属、ピキア属、スポロ
ボロマイセス属、ロデロマイセス属、オーレオバシディ
ウム属、又はホルモネマ属に属する微生物の菌体及び／
又はそれらの調製物を、前記式（Ｉ）で示される１−ア
セチル−３−トリフルオロメチルベンゼンに作用させ
て、そのカルボニル基を立体特異的に還元することを特
徴とする、式（ＩＩ）：

【００１２】

【化６】

【００１３】で示される（Ｓ）−１−（３−トリフルオ
ロメチルフェニル）エタノールの製造方法が挙げられ
る。

【００１４】

【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の製造方法では、原料として上記式（Ｉ）で示さ
れる１−アセチル−３−トリフルオロメチルベンゼンを
用い、これに微生物の菌体及び／又はそれらの調製物を
作用させて、上記式（ＩＩ）で示される（Ｓ）−１−
（３−トリフルオロメチルフェニル）エタノールを製造
する。

【００１５】本発明の製造方法に用いる微生物として
は、１−アセチル−３−トリフルオロメチルベンゼンの
カルボニル基に作用してこれを立体特異的に還元（不斉
還元）する能力を有するものであればいずれを用いても
よいが、キャンディダ(Candida)属、ロドトルラ(Rhodot
orula)属、クリプトコッカス(Cryptococcus)属、ボトリ
オアスカス(Botryoascus)属、ピキア(Pichia)属、スポ
ロボロマイセス(Sporobolomyces)、ロデロマイセス(Lod
deromyces)属、オーレオバシディウム(Aureobasidium)
属、およびホルモネマ(Hormonema)属に属するもの等を
挙げることができる。

【００１６】また、上記属に属する微生物のうち、好ま
しい種としては、キャンディダ・インターメディア(Can
dida intermedia)、キャンディダ・パラプシロシス(Ca
ndida parapsilosis)、キャンディダ・グロペンギエセ
リ(Candida gropengiesseri)、ロドトルラ・アウラン
ティアカ(Rhodotorula aurantiaca)、ロドトルラ・グ
ルティニス(Rhodotorula glutinis)、クリプトコッカ
ス・カルバタス(Cryptococcus curvatus)、ボトリオア
スカス・シンナエデンドラス(Botryoascus synnaedend
rus)、ピキア・ハプロフィラ(Pichia haplophila)、ス
ポロボロマイセス・サルモニコラ(Sporobolomyces sal
monicolor)、ロデロマイセス・エロンギスポラス(Lodde
romyces elongisporus)、オーレオバシディウム・プル
ランス(Aureobasidium pullulans)、およびホルモネマ
・プルノルム(Hormonema prunorum)などを挙げること
ができ、

【００１７】上記の微生物の具体的な菌株としては、 キャンディダ・インターメディア(Candida intermedi
a)IFO0761 キャンディダ・パラプシロシス(Candida parapsilosi
s)IFO0708 キャンディダ・グロペンギエセリ(Candida gropengies
seri)IFO0659 ロドトルラ・アウランティアカ(Rhodotorula aurantia
ca)IFO0754 ロドトルラ・グルティニス(Rhodotorula glutinis)IFO
0415 クリプトコッカス・カルバタス(Cryptococcus curvatu
s)IFO1159 ボトリオアスカス・シンナエデンドラス(Botryoascus
synnaedendrus)IFO1604 ピキア・ハプロフィラ(Pichia haplophila)IFO0947 スポロボロマイセス・サルモニコラ(Sporobolomyces s
almonicolor)IFO0374 ロデロマイセス・エロンギスポラス(Lodderomyces elo
ngisporus)IFO1676 オーレオバシディウム・プルランス(Aureobasidium pu
llulans)ATCC34621 ホルモネマ・プルノルム(Hormonema prunorum)CBS933.
72 等の菌株を挙げることができる。

【００１８】上記微生物は、野生株、ＵＶ照射、Ｎ−メ
チル−Ｎ’−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）処理、エチ
ルメタンスルホネート（ＥＭＳ）処理、亜硝酸処理、ア
クリジン処理等による変異株、あるいは細胞融合もしく
は遺伝子組換え法などの遺伝学的手法により誘導される
組換え株などのいずれの株であってもよい。また、上記
の菌株は全て公知の菌株であり、それぞれ、(財)発酵研
究所(IFO)、アメリカンタイプカルチャーコレクション
(ATCC)、セントラルビューローフォーシュメルカルチャ
ーズ(CBS)、から容易に入手することができる。

【００１９】本発明の製造方法においては、上述した１
−アセチル−３−トリフルオロメチルベンゼンのカルボ
ニル基に作用してこれを立体特異的に還元（不斉還元）
する能力を有する微生物の１種あるいは２種以上が、菌
体及び／又はそれらの調製物のかたちで用いられる。具
体的には、上記微生物を培養して得られた菌体をそのま
ま、あるいは培養して得られた菌体をアセトン処理した
もの、凍結乾燥処理したもの、菌体を物理的又は酵素的
に破砕したもの等の調製物を用いることができる。ま
た、これらの菌体又は調製物から、上記式（Ｉ）で表さ
れる１−アセチル−３−トリフルオロメチルベンゼンの
カルボニル基に作用してこれを立体特異的に還元（不斉
還元）して式（ＩＩ）で表される（Ｓ）−１−（３−ト
リフルオロメチルフェニル）エタノールへ変換する能力
を有する酵素画分を粗製物あるいは精製物として取り出
して用いることも可能である。さらには、この様にして
得られた菌体、調製物、酵素画分等をポリアクリルアミ
ドゲル、アルギン酸ゲル、カラギーナンゲル等の担体に
固定化したもの等を用いることも可能である。そこで、
本明細書において「菌体及び／又はそれらの調製物」の
用語は、上述の菌体、調製物、酵素画分、及びそれらの
固定化物全てを含有する概念として用いられる。

【００２０】以下に、本発明の（Ｓ）−１−（３−トリ
フルオロメチルフェニル）エタノールの製造方法につい
て具体的に説明する。本発明の製造方法では、原料とし
て上記式（Ｉ）で表される１−アセチル−３−トリフル
オロメチルベンゼンを用い、これに上記記載の微生物の
菌体及び／又はそれらの調製物を作用させ、上記式（Ｉ
Ｉ）で表される（Ｓ）−１−（３−トリフルオロメチル
フェニル）エタノールを製造する。

【００２１】本発明の製造方法において微生物は、通
常、培養して用いられるが、この培養については定法通
り行うことができる。培養に使用する培地としては、グ
ルコース、シュークロース、グリセリン、クエン酸等の
炭素源、硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウム等の無機窒
素源、酵母エキス、ペプトン、尿素、肉エキス、コーン
スティープリカー等の有機窒素源、マグネシウム、カリ
ウム等の無機塩類、リン酸等を適宜組み合わせて含有し
たものを用いればよい。また、これらの成分以外にも、
反応活性を促進するための物質として、無機塩類、微量
金属類、アミノ酸類、あるいはビタミン類を添加するこ
とも可能である。培養は、培地のｐＨを３〜１０の範囲
に調整し、温度１０〜４５℃で、１〜１０日の範囲で活
性が最大になるまで行うことが好ましい。

【００２２】本発明においては、この様に培養して得ら
れる微生物の菌体及び／又はその調製物と上記式（Ｉ）
で表される１−アセチル−３−トリフルオロメチルベン
ゼンとを水性媒体中で接触させて反応させ、反応生成物
として上記式（ＩＩ）で表される（Ｓ）−１−（３−ト
リフルオロメチルフェニル）エタノールを得る。ここで
用いられる水性媒体としては、水、緩衝液または培養液
等が挙げられるが、この水性媒体には、水溶性有機溶媒
または脂溶性有機溶媒を適宜含有させることも可能であ
る。また、反応に際して、反応液にグルコース、シュー
クロース、フルクトース、エタノール、メタノール等の
炭素源をエネルギー源として添加することにより収量が
向上することが明らかである。

【００２３】反応原料である１−アセチル−３−トリフ
ルオロメチルベンゼンの量はその反応液中の濃度が０．
０１〜５０重量％となる程度の量であり、反応液中で水
性媒体に必ずしも完全に溶解していなくてもよい。ま
た、反応に基質阻害が起こる場合には、反応が進むにつ
れて消費される１−アセチル−３−トリフルオロメチル
ベンゼンを消費された量だけ連続的にあるいは間歇的に
添加していくことにより生成物の蓄積量をより向上させ
ることが可能である。反応液に添加する微生物の菌体及
び／又はその調製物の量は、菌体を添加する場合は反応
液にその菌体濃度が０．０１〜２０重量％程度となるよ
うに添加し、酵素のような調製物を用いる場合には、酵
素の比活性を求め、添加したときに上記菌体濃度に相当
する酵素濃度になるような量を添加する。この反応にお
ける好ましい反応条件は、反応温度が氷点〜７０℃、好
ましくは１０〜４０℃、ｐＨが２〜１１、好ましくは５
〜８、反応時間が１〜１００時間程度である。

【００２４】上記反応終了後、反応液から目的生成物で
ある（Ｓ）−１−（３−トリフルオロメチルフェニル）
エタノールを単離する方法としては、遠心分離等にて菌
体及び／又はその調製物を除去した後、反応液よりクロ
ロホルム、酢酸エチル等の有機溶媒で（Ｓ）−１−（３
−トリフルオロメチルフェニル）エタノールを抽出し、
蒸留、カラムクロマトグラフィ等の公知の方法を利用し
て単離する等の方法を挙げることができる。

【００２５】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的
に説明するが、その要旨を越えない限り本発明の技術分
野における通常の変更をすることができる。

【００２６】

【実施例１】下記表１に示す各種微生物の菌体をそれぞ
れ、グルコ−ス２．０％、酵母エキス２．０％、コーン
スティープリカー０．５％を含み、ｐＨ６．０とした培
地の５０ｍｌずつに植菌し、２７℃で２４〜４８時間好
気的に振盪培養した。ついで培養液に１−アセチル−３
−トリフルオロメチルベンゼンを０．２５ｇ、グルコー
ス１．０ｇを添加し、さらに２７℃で２４時間振盪反応
を行った。

【００２７】反応終了後、各反応液から遠心分離により
菌体を除去し、この反応上清の逆相ＨＰＬＣ分析を行
い、上記反応で生成した（Ｓ）−１−（３−トリフルオ
ロメチルフェニル）エタノールの反応収率を求めた。ま
た、各反応上清に酢酸エチルを５０ｍｌずつ添加し抽出
を行い、濃縮後イソプロパノールに溶解して光学分割Ｈ
ＰＬＣ分析［カラム；ダイセルＣＨＩＲＡＬＣＥＬ Ｏ
Ｊ、溶離液；ヘキサン／イソプロパノール＝９８／２、
流速；０．７ｍｌ／分、検出；ＵＶ２１０ｎｍ］により
光学純度測定を行うと共に絶対配置を求めた。得られた
結果を表１に示す。

【００２８】

【表１】 表１ ─────────────────────────────────── 反応収率 光学純度 絶対配置 微生物 [%] [%e.e.] ─────────────────────────────────── キャンディダ・インターメディアIFO0761 90 93.8 S キャンディダ・パラプシロシスIFO0708 96 99.0 S キャンディダ・グロペンギエセリIFO0659 85 79.7 S ロドトルラ・アウランティアカIFO0754 60 93.7 S ロドトルラ・グルティニスIFO0415 85 98.0 S クリプトコッカス・カルバタスIFO1159 55 93.5 S ボトリオアスカス・シンナエデンドラスIFO1604 89 65.7 S ピキア・ハプロフィラIFO0947 88 82.4 S スポロボロマイセス・サルモニコラIFO0374 85 80.1 S ロデロマイセス・エロンギスポラスIFO1676 90 94.4 S オーレオバシディウム・プルランスATCC34621 85 92.0 S ホルモネマ・プルノルムCBS933.72 70 88.0 S ────────────────────────────────────

【００２９】

【実施例２】実施例１に示した組成の培地５００ｍＬを
１Ｌ容ジャーファーメンタに調製し、これへ同じ培地で
前培養２４時間行ったキャンディダ・パラプシロシスIF
O0708を植菌し、２７℃、５００ｒｐｍ、１ｖｖｍ、２
４時間、通気攪拌培養を行った。培養終了後、遠心分離
により菌体を集め、リン酸緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ６．
５）にて洗浄した後、培養液と同じ菌体濃度になるよう
に、グルコース２．０％を含む同緩衝液５００ｍｌに懸
濁させた。この菌体懸濁液に１−アセチル−３−トリフ
ルオロメチルベンゼンを２．０ｇ添加して、２７℃で２
４時間の攪拌反応を実施した。反応終了後、遠心分離に
より菌体を除去した反応上清を酢酸エチル５００ｍＬで
抽出し、減圧濃縮乾燥後、（Ｓ）−１−（３−トリフル
オロメチルフェニル）エタノールの油状物１．７ｇを得
た。光学純度は９８．６%e.e.(Ｓ)体であった。

【００３０】

【発明の効果】本発明の製造方法によれば、特定の微生
物を１−アセチル−３−トリフルオロメチルベンゼンに
作用させることにより光学活性な（Ｓ）−１−（３−ト
リフルオロメチルフェニル）エタノールを効率的に製造
することが可能であり、工業的に極めて有利である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ (Ｃ１２Ｐ 7/22 Ｃ１２Ｒ 1:84）

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式（Ｉ）： 【化１】 で示される１−アセチル−３−トリフルオロメチルベン
   ゼンのカルボニル基を立体特異的に還元する能力を有
   し、キャンディダ属、ロドトルラ属、クリプトコッカス
   属、ボトリオアスカス属、ピキア属、スポロボロマイセ
   ス属、ロデロマイセス属、オーレオバシディウム属、又
   はホルモネマ属に属することを特徴とする微生物の菌体
   及び／又はそれらの調製物を、前記式（Ｉ）で示される
   １−アセチル−３−トリフルオロメチルベンゼンに作用
   させて、そのカルボニル基を立体特異的に還元すること
   を特徴とする、式（ＩＩ）： 【化２】 で示される（Ｓ）−１−（３−トリフルオロメチルフェ
   ニル）エタノールの製造方法。