JPH104811A - ヘメロカリス属植物の大量増殖方法 - Google Patents
ヘメロカリス属植物の大量増殖方法Info
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- JPH104811A JPH104811A JP8180019A JP18001996A JPH104811A JP H104811 A JPH104811 A JP H104811A JP 8180019 A JP8180019 A JP 8180019A JP 18001996 A JP18001996 A JP 18001996A JP H104811 A JPH104811 A JP H104811A
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Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 ヘメロカリス属植物を、遺伝的安定性を保ち
つつ短期間に大量増殖する方法を提供する。 【解決手段】 無菌的に分離したヘメロカリス属植物の
組織を不定芽形成培地で培養して不定芽を形成させ小植
物体を獲得する工程と、前記獲得した小植物体を多芽体
誘導培地で培養して多芽体を誘導する工程と、前記誘導
した多芽体を分割して植物体再生培地で培養して植物体
を再生する工程とを含むヘメロカリス属植物の大量増殖
方法。
つつ短期間に大量増殖する方法を提供する。 【解決手段】 無菌的に分離したヘメロカリス属植物の
組織を不定芽形成培地で培養して不定芽を形成させ小植
物体を獲得する工程と、前記獲得した小植物体を多芽体
誘導培地で培養して多芽体を誘導する工程と、前記誘導
した多芽体を分割して植物体再生培地で培養して植物体
を再生する工程とを含むヘメロカリス属植物の大量増殖
方法。
Description
【０００１】
【従来の技術】ヘメロカリス属はユリ科の１属で、日本
を含む東アジア各地に分布している。１８００年代から
今日にかけて、主にアメリカ合衆国で観賞用に品種改良
が行われてきた。ヘメロカリス属植物は耐寒性、耐乾燥
性に優れ、痩せ地での植栽が可能であり、園芸用植物な
らびに造園用植物として多く用いられている。
を含む東アジア各地に分布している。１８００年代から
今日にかけて、主にアメリカ合衆国で観賞用に品種改良
が行われてきた。ヘメロカリス属植物は耐寒性、耐乾燥
性に優れ、痩せ地での植栽が可能であり、園芸用植物な
らびに造園用植物として多く用いられている。
【０００２】従来、植物体の生長点や組織の切片を培地
上で無菌的に培養することにより、体細胞胚、不定芽、
カルスなどを誘導し、生育させることにより当該植物を
増殖させる植物の組織培養による増殖方法が、種々の植
物を対象に研究され、これまでに種々の技術が開発され
ている。しかしながら、組織培養の条件は植物種個々に
ついて詳細に検討しなければならず、全ての植物種で容
易に実施できるものではない。ヘメロカリス属植物の増
殖は実生または株分けで行っているのが実状である。
上で無菌的に培養することにより、体細胞胚、不定芽、
カルスなどを誘導し、生育させることにより当該植物を
増殖させる植物の組織培養による増殖方法が、種々の植
物を対象に研究され、これまでに種々の技術が開発され
ている。しかしながら、組織培養の条件は植物種個々に
ついて詳細に検討しなければならず、全ての植物種で容
易に実施できるものではない。ヘメロカリス属植物の増
殖は実生または株分けで行っているのが実状である。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、花卉
植物として有用なヘメロカリス属植物を遺伝的安定性を
保ちつつ短期間に安定して大量増殖する方法を提供する
ものである。
植物として有用なヘメロカリス属植物を遺伝的安定性を
保ちつつ短期間に安定して大量増殖する方法を提供する
ものである。
【課題を解決するための手段】本発明の構成は、以下の
（１）〜（３）の技術的手段からなる。 （１）無菌的に分離したヘメロカリス属植物の組織を不
定芽形成培地で培養して不定芽を形成させ小植物体を獲
得する工程と、前記獲得した小植物体を多芽体誘導培地
で培養して多芽体を誘導する工程と、前記誘導した多芽
体を分割して植物体再生培地で培養して植物体を再生す
る工程とを含むヘメロカリス属植物の大量増殖方法。 （２）ヘメロカリス属植物の組織が花茎であることを特
徴とする（１）に記載のヘメロカリス属植物の大量増殖
方法。 （３）多芽体誘導培地および植物体再生培地が植物生長
調節物質を含有しない培地であることを特徴とする
（１）又は（２）に記載のヘメロカリス属植物の大量増
殖方法。
（１）〜（３）の技術的手段からなる。 （１）無菌的に分離したヘメロカリス属植物の組織を不
定芽形成培地で培養して不定芽を形成させ小植物体を獲
得する工程と、前記獲得した小植物体を多芽体誘導培地
で培養して多芽体を誘導する工程と、前記誘導した多芽
体を分割して植物体再生培地で培養して植物体を再生す
る工程とを含むヘメロカリス属植物の大量増殖方法。 （２）ヘメロカリス属植物の組織が花茎であることを特
徴とする（１）に記載のヘメロカリス属植物の大量増殖
方法。 （３）多芽体誘導培地および植物体再生培地が植物生長
調節物質を含有しない培地であることを特徴とする
（１）又は（２）に記載のヘメロカリス属植物の大量増
殖方法。
【０００４】
【発明の実施の形態】本発明に用いられるヘメロカリス
属植物は植物分類学上、ユリ科に属する植物で日本に生
育するものはもちろん、世界に生育する自然交配種およ
び人工交配種を含む。日本に自生する野生種を例示すれ
ば、ノカンゾウ、ハマカンゾウなどを挙げることができ
る。アメリカ合衆国においては、品種改良が盛んに行わ
れ、優れた園芸品種が多く作出されているが、これらも
本発明に用いることができる。欧米で一般にデイリリー
と呼ばれているものもヘメロカリス属植物に属する。
属植物は植物分類学上、ユリ科に属する植物で日本に生
育するものはもちろん、世界に生育する自然交配種およ
び人工交配種を含む。日本に自生する野生種を例示すれ
ば、ノカンゾウ、ハマカンゾウなどを挙げることができ
る。アメリカ合衆国においては、品種改良が盛んに行わ
れ、優れた園芸品種が多く作出されているが、これらも
本発明に用いることができる。欧米で一般にデイリリー
と呼ばれているものもヘメロカリス属植物に属する。
【０００５】これらヘメロカリス属植物の植物体の切
片、例えば、茎頂、花茎、茎、葉、根などは、必要に応
じてエタノール、次亜塩素酸ナトリウム、塩化ベンザル
コニウムなどの殺菌剤を用いて殺菌して用いられる。あ
るいは、消毒種子を無菌播種して発芽させた無菌幼苗な
ども利用することができる。特に、花茎は取扱いが容易
で殺菌作業上からも好適である。
片、例えば、茎頂、花茎、茎、葉、根などは、必要に応
じてエタノール、次亜塩素酸ナトリウム、塩化ベンザル
コニウムなどの殺菌剤を用いて殺菌して用いられる。あ
るいは、消毒種子を無菌播種して発芽させた無菌幼苗な
ども利用することができる。特に、花茎は取扱いが容易
で殺菌作業上からも好適である。
【０００６】本発明で用いる組織培養用培地には、不定
芽形成培地、多芽体誘導培地、植物体再生培地がある。
これらの具体例として、通常の植物の組織培養に一般に
用いられるムラシゲ−スクーグ（Ｍｕｒａｓｉｇｅ−Ｓ
ｋｏｏｇ）培地（以下、「ＭＳ培地」という。）、ガン
ボーグ−Ｂ５（Ｇａｍｂｏｒｇ−Ｂ５）培地などを挙げ
ることができる。また、通常は肥料として用いられてい
るハイポネックス（ハイポネックス・ジャパン社製商品
名）の水溶液なども用いることができる。これらの基本
培地に必要に応じて適当量の炭素源、オーキシン、サイ
トカイニンなどの植物生長調節物質、ココナットウォー
ターなどの植物由来有機物などを添加して用いることが
できる。ここで、多芽体誘導培地と植物体再生培地に
は、植物体に変異が起こる確率を小さくするためにも植
物生長調節物質を加えないことが好ましい。
芽形成培地、多芽体誘導培地、植物体再生培地がある。
これらの具体例として、通常の植物の組織培養に一般に
用いられるムラシゲ−スクーグ（Ｍｕｒａｓｉｇｅ−Ｓ
ｋｏｏｇ）培地（以下、「ＭＳ培地」という。）、ガン
ボーグ−Ｂ５（Ｇａｍｂｏｒｇ−Ｂ５）培地などを挙げ
ることができる。また、通常は肥料として用いられてい
るハイポネックス（ハイポネックス・ジャパン社製商品
名）の水溶液なども用いることができる。これらの基本
培地に必要に応じて適当量の炭素源、オーキシン、サイ
トカイニンなどの植物生長調節物質、ココナットウォー
ターなどの植物由来有機物などを添加して用いることが
できる。ここで、多芽体誘導培地と植物体再生培地に
は、植物体に変異が起こる確率を小さくするためにも植
物生長調節物質を加えないことが好ましい。
【０００７】オーキシンとしては、２，４−ジクロロフ
ェノキシ酢酸（２，４−Ｄ）、α−ナフタレン酢酸（Ｎ
ＡＡ）、インドール酢酸（ＩＡＡ）などを使用すること
ができる。またサイトカイニンとしては、６−フルフリ
ルアミノプリン、６−ベンジルアミノプリン（ＢＡ
Ｐ）、ゼアチンなどを使用することができる。
ェノキシ酢酸（２，４−Ｄ）、α−ナフタレン酢酸（Ｎ
ＡＡ）、インドール酢酸（ＩＡＡ）などを使用すること
ができる。またサイトカイニンとしては、６−フルフリ
ルアミノプリン、６−ベンジルアミノプリン（ＢＡ
Ｐ）、ゼアチンなどを使用することができる。
【０００８】固体培地で培養を行う場合は、植物培養用
基材として、寒天、ジェランガムなどを０．２〜２．０
重量％程度添加して用いる。
基材として、寒天、ジェランガムなどを０．２〜２．０
重量％程度添加して用いる。
【０００９】本発明で用いる培養容器としては、その形
状に特に制限はなく、光を透過するガラス、ポリカーボ
ネート製などの容器であればよい。また培養容器は無菌
状態、湿度を保つため蓋や栓などで密閉されていること
が望ましい。
状に特に制限はなく、光を透過するガラス、ポリカーボ
ネート製などの容器であればよい。また培養容器は無菌
状態、湿度を保つため蓋や栓などで密閉されていること
が望ましい。
【００１０】再生植物体を得るまでの培養温度は、２０
〜３０℃、好ましくは２３〜２５℃である。また、光条
件としては、蛍光灯などを連続的または断続的に照射す
ることが望ましい。液体培地で培養を行う場合は、ロー
タリーシェーカーなどを用いて振盪培養してもよい。
〜３０℃、好ましくは２３〜２５℃である。また、光条
件としては、蛍光灯などを連続的または断続的に照射す
ることが望ましい。液体培地で培養を行う場合は、ロー
タリーシェーカーなどを用いて振盪培養してもよい。
【００１１】
（実施例１）本発明の一実施例を添付した図面を参照し
て以下に説明する。図１は、本発明の処理工程概略図で
ある。図中Ａが花茎組織を採取する工程、Ｂが不定芽を
形成させ小植物体を獲得する工程、Ｃが多芽体を誘導す
る工程、Ｄが植物体を再生する工程、Ｅが苗を馴化する
工程を示している。なお、全工程に要する日数は約６ヶ
月であった。
て以下に説明する。図１は、本発明の処理工程概略図で
ある。図中Ａが花茎組織を採取する工程、Ｂが不定芽を
形成させ小植物体を獲得する工程、Ｃが多芽体を誘導す
る工程、Ｄが植物体を再生する工程、Ｅが苗を馴化する
工程を示している。なお、全工程に要する日数は約６ヶ
月であった。
【００１２】花茎組織を採取する工程Ａにおいて、ヘメ
ロカリスの野生種であるノカンゾウ(Hemerocallis thun
bergii var. logituba Miq.)、およびハマカンゾウ(Hem
erocallis aurantiaca var. littorea Makino)から花蕾
が緑色の未熟な花茎１を採取し、花蕾部を切除した後、
５ｃｍ程度の長さに切りそろえ、有効塩素濃度１％の次
亜塩素酸ナトリウムで表面を滅菌後、２〜３ｍｍの輪切
りにして花茎切片２を調製した。
ロカリスの野生種であるノカンゾウ(Hemerocallis thun
bergii var. logituba Miq.)、およびハマカンゾウ(Hem
erocallis aurantiaca var. littorea Makino)から花蕾
が緑色の未熟な花茎１を採取し、花蕾部を切除した後、
５ｃｍ程度の長さに切りそろえ、有効塩素濃度１％の次
亜塩素酸ナトリウムで表面を滅菌後、２〜３ｍｍの輪切
りにして花茎切片２を調製した。
【００１３】不定芽を形成させ小植物体を獲得する工程
Ｂにおいて、該切片２をα−ナフタレン酢酸（ＮＡＡ）
０．１ｍｇ／ｌ、６−ベンジルアミノプリン（ＢＡＰ）
０．１ｍｇ／ｌを含む１／２濃度のＭＳ固体培地（不定
芽形成培地３）へ着床し、２５℃、連続照明下（３６μ
ｍｏｌ／ｍ2／ｓ）で不定芽４を形成させた。形成され
た不定芽の数を表１に示す。
Ｂにおいて、該切片２をα−ナフタレン酢酸（ＮＡＡ）
０．１ｍｇ／ｌ、６−ベンジルアミノプリン（ＢＡＰ）
０．１ｍｇ／ｌを含む１／２濃度のＭＳ固体培地（不定
芽形成培地３）へ着床し、２５℃、連続照明下（３６μ
ｍｏｌ／ｍ2／ｓ）で不定芽４を形成させた。形成され
た不定芽の数を表１に示す。
【００１４】
【表１】
【００１５】ノカンゾウとハマカンゾウの不定芽形成効
率（不定芽を形成した切片数／置床切片数×１００）は
各々１９．０％と９．１％であった。成功率に種間差が
生じたが、これはそれぞれの種の遺伝子型の違いによる
ものであると考えられた。図２は、ノカンゾウの不定芽
を示す写真である。得られたノカンゾウの不定芽は、発
根して完全な小植物体となるまで培養を継続した。
率（不定芽を形成した切片数／置床切片数×１００）は
各々１９．０％と９．１％であった。成功率に種間差が
生じたが、これはそれぞれの種の遺伝子型の違いによる
ものであると考えられた。図２は、ノカンゾウの不定芽
を示す写真である。得られたノカンゾウの不定芽は、発
根して完全な小植物体となるまで培養を継続した。
【００１６】つづく多芽体を誘導する工程Ｃにおいて、
上記得られたノカンゾウの小植物体を、表２に示す各多
芽体誘導培地５へ移植し、２５℃、連続照明下（３６μ
ｍｏｌ／ｍ2／ｓ）でロータリーシェーカー（９０〜１
００ｒｐｍ）を用いて振盪培養を行い、多芽体６を誘導
した。
上記得られたノカンゾウの小植物体を、表２に示す各多
芽体誘導培地５へ移植し、２５℃、連続照明下（３６μ
ｍｏｌ／ｍ2／ｓ）でロータリーシェーカー（９０〜１
００ｒｐｍ）を用いて振盪培養を行い、多芽体６を誘導
した。
【００１７】
【表２】
【００１８】多芽体誘導培地５の最適条件は、ショ糖濃
度１０ｇ／ｌ、植物生長調節物質無添加、ココナットウ
ォーター無添加であり、該培地で２回の継代を行い、３
ヶ月培養した時点での多芽体誘導効率（多芽体を構成す
る芽条の合計数／培養植物体数×１００）は２７５．０
％であった。図３は、ノカンゾウの多芽体を示す写真で
ある。
度１０ｇ／ｌ、植物生長調節物質無添加、ココナットウ
ォーター無添加であり、該培地で２回の継代を行い、３
ヶ月培養した時点での多芽体誘導効率（多芽体を構成す
る芽条の合計数／培養植物体数×１００）は２７５．０
％であった。図３は、ノカンゾウの多芽体を示す写真で
ある。
【００１９】つづく植物体を再生する工程Ｄにおいて、
ノカンゾウの多芽体６を多芽体誘導培地５から表３に示
す各植物体再生培地７へ分割移植した。１〜２ヶ月の間
に芽条が伸長し、容易に発根して再生植物体８を得た。
ノカンゾウの多芽体６を多芽体誘導培地５から表３に示
す各植物体再生培地７へ分割移植した。１〜２ヶ月の間
に芽条が伸長し、容易に発根して再生植物体８を得た。
【００２０】
【表３】
【００２１】植物体再生培地７の最適条件は、基本培地
として０．３％（ｗ／ｖ）ハイポネックス水溶液培地を
使用し、ショ糖濃度１０ｇ／ｌ、寒天濃度１４ｇ／ｌで
あった。ここで得られた、再生植物体８を、該最適条件
の培地に植え継いで培養を継続したところ、１ヶ月で高
さ１０ｃｍまで成長した。図４は多芽体を植物体再生培
地に移植することによって伸長したノカンゾウの芽条を
示す写真である。
として０．３％（ｗ／ｖ）ハイポネックス水溶液培地を
使用し、ショ糖濃度１０ｇ／ｌ、寒天濃度１４ｇ／ｌで
あった。ここで得られた、再生植物体８を、該最適条件
の培地に植え継いで培養を継続したところ、１ヶ月で高
さ１０ｃｍまで成長した。図４は多芽体を植物体再生培
地に移植することによって伸長したノカンゾウの芽条を
示す写真である。
【００２２】つづく苗を馴化する工程Ｅにおいて、再生
植物体８をバーミキュライトの苗床に移植し、外環境へ
の馴化を行った。図５は再生したノカンゾウ植物体の馴
化を示す写真である。
植物体８をバーミキュライトの苗床に移植し、外環境へ
の馴化を行った。図５は再生したノカンゾウ植物体の馴
化を示す写真である。
【００２３】
【発明の効果】本発明により、これまで実生、株分けな
どによっていたヘメロカリス属植物の増殖が、短期間
で、大量に、かつ遺伝的に均一に行えるようになる。
どによっていたヘメロカリス属植物の増殖が、短期間
で、大量に、かつ遺伝的に均一に行えるようになる。
【図１】本発明の一実施例である処理工程概略図であ
る。
る。
【図２】ノカンゾウの不定芽を示す写真である。
【図３】ノカンゾウの多芽体を示す写真である。
【図４】多芽体を植物体再生培地に移植することによっ
て伸長したノカンゾウの芽条を示す写真である。
て伸長したノカンゾウの芽条を示す写真である。
【図５】再生したノカンゾウ植物体の馴化を示す写真で
ある。
ある。
１ 花茎 ２ 花茎切片 ３ 不定芽形成培地 ４ 不定芽 ５ 多芽体誘導培地 ６ 多芽体 ７ 植物体再生培地 ８ 再生植物体 ９ 苗
Claims (3)
- 【請求項１】 無菌的に分離したヘメロカリス属植物の
組織を不定芽形成培地で培養して不定芽を形成させ小植
物体を獲得する工程と、前記獲得した小植物体を多芽体
誘導培地で培養して多芽体を誘導する工程と、前記誘導
した多芽体を分割して植物体再生培地で培養して植物体
を再生する工程とを含むヘメロカリス属植物の大量増殖
方法。 - 【請求項２】 ヘメロカリス属植物の組織が花茎である
ことを特徴とする請求項１に記載のヘメロカリス属植物
の大量増殖方法。 - 【請求項３】 多芽体誘導培地および植物体再生培地が
植物生長調節物質を含有しない培地であることを特徴と
する請求項１又は請求項２に記載のヘメロカリス属植物
の大量増殖方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8180019A JPH104811A (ja) | 1996-06-19 | 1996-06-19 | ヘメロカリス属植物の大量増殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8180019A JPH104811A (ja) | 1996-06-19 | 1996-06-19 | ヘメロカリス属植物の大量増殖方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH104811A true JPH104811A (ja) | 1998-01-13 |
Family
ID=16076046
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8180019A Pending JPH104811A (ja) | 1996-06-19 | 1996-06-19 | ヘメロカリス属植物の大量増殖方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH104811A (ja) |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002238385A (ja) * | 2001-02-21 | 2002-08-27 | Sumitomo Forestry Co Ltd | ヌルデモドキのカルスからの植物体再生法 |
| CN101897297A (zh) * | 2010-07-16 | 2010-12-01 | 浙江清华长三角研究院生物技术与医药研究所 | 一种以幼嫩花梗为外植体的萱草组织培养两步成苗的快繁方法 |
| CN102668986A (zh) * | 2012-05-30 | 2012-09-19 | 唐山师范学院 | 大花萱草组培丛生苗直接生根的方法 |
| CN103430850A (zh) * | 2013-09-09 | 2013-12-11 | 中邦园林股份有限公司 | 一种多倍体大花萱草组培方法及培养基 |
| CN103461135A (zh) * | 2013-09-18 | 2013-12-25 | 宁波市农业科学研究院 | 一种大花萱草的繁殖方法 |
| CN103609444A (zh) * | 2013-11-17 | 2014-03-05 | 浙江大学 | 常绿萱草的组织培养法 |
| CN103704134A (zh) * | 2013-12-12 | 2014-04-09 | 北京林业大学 | 以花丝为外植体诱导萱草红朗姆愈伤组织的方法 |
| CN105706926A (zh) * | 2016-02-04 | 2016-06-29 | 河南农业大学 | 一种萱草生根培养方法 |
| CN109717075A (zh) * | 2017-10-27 | 2019-05-07 | 上海市农业科学院 | 一种通过诱导不定芽获得大花萱草再生植株的方法 |
| CN113170733A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-07-27 | 上海应用技术大学 | 萱草玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的培养基及方法 |
| CN113170732A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-07-27 | 上海应用技术大学 | 一种通过诱导成熟胚获得萱草愈伤组织的培养基及方法 |
| CN113491239A (zh) * | 2021-08-27 | 2021-10-12 | 黑龙江卉研农业发展有限公司 | 一种多倍体大花萱草组织培养及培养基 |
-
1996
- 1996-06-19 JP JP8180019A patent/JPH104811A/ja active Pending
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CN113491239A (zh) * | 2021-08-27 | 2021-10-12 | 黑龙江卉研农业发展有限公司 | 一种多倍体大花萱草组织培养及培养基 |
| CN113491239B (zh) * | 2021-08-27 | 2022-01-11 | 黑龙江卉研农业发展有限公司 | 一种多倍体大花萱草组织培养及培养基 |
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