JPH10500577A - 人間のラクトバチルス菌株、該株の組成物および該株の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、ラクトバチルス菌株および該菌株を含む薬剤組成物に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 人間のラクトバチルス菌株、該株の組成物および該株の使用 本発明はラクトバチルス（乳酸菌）の菌株および該菌株を含有する薬剤組成物 に関する。 更に詳しくは本発明は、ブタペスト条約に従って１９９４年１月１３日にイン スチチュート パスツールのＣＮＣＭコレクションに寄託されたコード番号ＣＮ ＣＭ Ｉ−１３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１およびＣＮＣＭ Ｉ−１３９２を 特徴とする新規な三種類の人間の非好酸性ラクトバチルス株、および１９９４年 ７月１３日に同インスチチュートに寄託された番号ＣＮＣＭ Ｉ−１４４７の新 規な人間の好菌性ラクトバチルス株に関する。 乳酸バクテリア製剤の治療的使用は、今世紀の始めにさかのぼりそして使用者 の健康条件におよぼす発酵ミルクの使用の効果的な影響を指摘した研究にさかの ほる、長期間のそして確立した伝統を有するものである。（文献１〜５）。 その後乳酸バクテリアは、医薬業界にて広く使用されており、そして病原体に よる腸疾患の治療用にそして抗生物質治療における補助薬剤として種々の配合物 の活性的主要剤を構成している（文献６〜９）。 過去数千年間にわたり科学者は、一般的に乳酸バクテリアそして特にラクトバ チルスに関する知識を深め、著しい量の情報を得た。 しかし現在市場にある製品は、最近の科学的研究結果を考慮していないようで ある（文献１０〜１１）。 …ラクトバチルスは乳酸および特定の抗バクテリア物質を生成して、ラクトバチ ルスは腸管のミクロ菌相（ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ）を制限する特異な役割をして いる（文献１２〜１６）。 …これらのバクテリアは腸内環境から発生するものである。「ホスト特定性」要 件を保証するために該バクテリアは次いで腸内にて再植されるであろう（例えば 人間に利用するために人間の腸内系から分離される）（文献１７）。 …ラクトバチルスは、良状態の健康の維持および種々の病理的条件の防止に特に 関連する、種々の代謝活性に関与する。特にニトロサミンの劣化、バクテリア毒 素の中和および抗発癌性活性が注目される（文献１８）。 …腸内上皮に対する付着能力は腸内バクテリアに極めて有利な特長である（種々 の病原性バクテリアは該粘膜に付着する能力を失うとその毒性を失うことが知ら れている）。従って上皮に集落する可能性は、病原性バクテリアの増殖に対する バリアーを提供するために、ラクトバチルスに関しても特に重要であり得る（文 献１０、１９）。 …腸から分離された菌株の系統学的分類は非常に改訂されてきている。この生態 系における新しいバクテリア種の存在、ならびに各種族内の特定の純型（ｂｉｏ ｔｙｐｅｓ）の区別が認識されてきた（文献２０）。 …菌株の技術的特性（第一に凍結保存処理に対する耐性）が、乳酸バクテリア株 の可能性のある開発の決定に特に重要である。事実、生体用の目的に現在まで使 用されているラクトバチルス株は、凍結乾燥条件に対して一般的に僅かに耐性で ある（文献２１）。付着特性は凍結乾燥後にも維持される必要がある（かならず しも適合しない要件である）。 腸内粘膜細胞に付着する高能力を有するラクトバチルス株を分離する試みにお いて特に、健康な個人の糞便等の相同の源からの分離法が報告されてきた。 例えば米国特許４８３９２８１号、欧州特許ＥＰ−Ａ−１９９５３５号および 米国特許５０３２３９９号に、成人から分離されそしてヒトの腸内粘膜細胞に付 着する多くのバクテリア細胞でありそして参考菌株と比較して強い付着特性を特 徴とする、好酸性ラクトバチルス株が記述されている。しかしこのような菌株の 系統学的な正確な分類は、米国特許局による出願の実体審査過程にて反論者自身 が実験データにもとづき該ラクトバチルスは非好酸性種に属すると主張したよう に（米国特許４８３９２８１号、１９８７年１０月３０日付の特許局通知に対す る回答第７頁末尾の記録）、疑わしいものである。 Ｒｅｎｉｅｒｏ他（文献２７）は二人の幼児の糞便からの二種類のラクトバチ ルス カセイ株の分離を報告している。糞便中の同一の菌株の数日間の存在によ って、著者はこれらの菌株が付着特性を有すると結論した。前記のような他の生 物学的または技術的特性については言及されなかった。なおこれらの事項は、本 発明にて請求しているラクトバチルス株の顕著な特長である。 事実ＣＮＣＭ Ｉ−１３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１、ＣＮＣＭ Ｉ−１３ ９２およびＣＮＣＭ Ｉ−１４４７菌株は、参考菌株よりも優れている場合の多 い腸内および口内の細胞に対する付着性のほかに、下記の特長も有するものであ った。 …人間の腸内病原体の生長を抑制する能力； …好気生活および嫌気生活の両者においておよび種々のｐＨ値における、多くの 条件下にて生長する能力；これらの特性は胃腸管中の移行間に遭遇する生理学的 および病理学的状態に適合する良好な能力を意味する； …多量の乳酸の生成； …胆汁に対する高抵抗性； …付着能力を損わない凍結乾燥抵抗性。 これらの菌株はラクトバチルス属に所属し、そして多くの病理の予防および処 理に特に興味のある一連の特質を特徴とする。 本発明によって、適当な賦形剤（ベヒクル）と混合した好ましくは凍結乾燥し た剤形にて、該ＣＮＣＭ Ｉ−１３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９２およびＣＮＣＭ Ｉ−１４４７菌株の少なくも一つを含有する医薬 用、獣医薬用または栄養用組成物が提供される。例えば腸内の異常細菌感染症、 種々の原因による下痢、潰瘍性大腸炎および関連する病理の場合のように、ラク トバチルスの投与が望ましい胃腸の病理の治療または予防用に、これらの組成物 を経口的に投与するかまたはミルク、ヨーグルトまたはミルク製品等の食品と混 合することができる。また本発明の組成物は、非病理的腸内バクテリアの菌相を 保持するために、抗生物質治療に関連して投与することもできる。 本発明の菌株の他の重要な特長は、該菌株が健康な新生児および離乳児の糞便 から分離されたことである。哺乳動物の胃腸管は出産時には無菌であることが事 実知られている。一般に該菌株は母親の膣および肛門周囲の菌相によって迅速に 増殖される。有用な微生物の移行に関するこの自然な経路は、帝王切開出産の子 供には存在しない。事実としてこのような子供は、好ましくない微生物の増殖を 受ける傾向がある。また好ましくない微生物による腸内増殖は未熟児にも観察さ れてきた。両者の場合にこの危険性は本発明の菌株の経口投与によって大幅に低 減され得る。更に母乳児と比較して人工乳児は、腸内にてクロストリジア、コリ ホルムスおよびエンテロコッカスの数を増加させる。またこの状態において、本 発明のラクトバチルスによる治療によって腸内の菌相の再均衡化が助長される。 また菌株は本発明の菌株の混合物単独としておよび／または補助的な特性すな わち異なる固有の性質を有する他の菌株と共に配合することができる。このよう な配合物の例として、多量のＬ−乳酸を生成する少なくも一種の菌株と組合わせ て強い付着特性を有する少なくも一種の菌株からなる混合物が例示できる。限定 する意図ではないが好ましい組成物は、例えば各菌株あたり１０⁶〜１０¹⁰個の 細胞の適当量の本発明のＣＮＣＭ Ｉ−１３９４株およびエントロコッカス フ アエシウムＳＦ６８株を、通常に使用される添加物または賦形剤と共に混合して 調製できる。 代表的にカプセル、溶液または可飲性サスペンジョン、包袋中の粉末；および 類似の形態の剤形にて、単一の各投与剤は、各菌株あたり１０⁶〜１０¹⁰個の細 胞を一般に含有する。 本発明のラクトバチルスは食品の栄養価を改善するのに非常に有用であること も実証された。特に好ましいものは、ミルクおよびその誘導物から得られる乳製 品である。 本発明の菌株の分離を該株の特性と共に下記する。例１ 菌株の分離および特性表示 誕生第１日から第６日の新生児から該菌株を分離した。また離乳期の他の幼児 からも試料を採取した。 採取は診療所にて一日二回対象者の糞便から行い、そして嫌気性菌条件下に無 菌の綿材（ｓｗａｂｓ）に保存した。該ラクトバチルスの選択的な最初の分離は ＬＢＳ^TM選択媒体（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ Ａｇａ ｒ，Ｏｘｏｉｄ）中で実施した。試料板を嫌気性菌条件（ガスパックシステム、 ＢＢＬ）下にて３７℃で４８時間培養した。このようにして得た集落（ｃｏｌｏ ｎｉｅｓ）を、ＭＲＳ液状媒体（ｄｅ Ｍａｎ−Ｒｏｇｏｓａ−Ｓｈａｒｐｅ ｂｒｏｔｈ，Ｏｘｏｉｄ）中で分離し、そして純粋な培養物を得るために一連の 再分離処理をした（選択用寒天媒体上に塗布しそして単一の集落を分離）。これ らの工程はＳｈａｒｐｅによって提案された方法にもとづく（文献２２）。分離 および精製の後に、該ラクトバチルス属に所属する株だけを選別するために該菌 株を更に特徴づけた。次いで下記の特性を試験した：形態（位相差顕微鏡による 光学的検査）；グラム染色の反応（すべてのラクトバチルスについて陽性）；カ タラーゼの存在（すべてのラクトバチルスについて陰性）；および、２４時間培 養後の各菌株の培養体中に存在する二種類の乳酸立体異性体の決定（Ｂｏｅｈｒ ｉｎｇｅｒのキットによる酵素的測定）。これらのテストの結果、該分離物は該 ラクトバチルス属に決定することが可能であった。次いで該菌株を凍結乾燥しそ して４℃にて保存した。 アルカリ性抽出後のプラスミドのプロフィルの分析（文献２３）を、次いでラ クトバチルスとして同定されたすべての菌株について実施した。この分析によっ て、分離した菌株の同定が可能であった（文献２４）。また可溶性細胞質の蛋白 質のプロフィル（文献２５）および抗生物の抵抗性のパターン（文献２６）も検 査した。 次いですべての分離物の代表的な菌株を、糖発酵パターン等の標準的な表現型 によって系統学的決定に関して分析した（ＡＰＩ ＣＨ ５０ ｇａｌｌｅｒｉ ｅｓ ｓｙｓｔｅｍ，Ｂｉｏｍｅｒｉｅｕｘ）。 本発明の菌株の系統および特性を下記のチャートに示す。 例２ 本発明の菌株を、種々の種類の細胞に付着する能力、種々のｐＨ値にて生長す る能力、種々の濃度の胆汁にて生長する能力、および種々の培養条件下にて生長 する能力、腸内病原体の生長に影響をおよぼす能力の持続性を評価するために、 参考用菌株と比較した。各評価前に、菌株の凍結乾燥試料を再水和し、そしてＭ ＲＳ培地中で培養した。 該参考試料を下記に示す： ラクトバチルス アシドフイルス ＡＴＣＣ ５３１０３ ラクトバチルス アシドフイルス ＡＴＣＣ ４３５７ ラクトバチルス デルブルエキイ ＡＴＣＣ ７９９４ サルモネラ エンテリチジス ＩＭＭ２ エスケリチア コリ ＡＴＣＣ ３５４０１人間の上皮細胞への付着 二種類の上皮細胞について付着テストを「イン ビトロ」で実施した： …分離したての人間の口内細胞；および …腸内細胞（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｏ Ｚｏｏｐｒｏｆｉｌａｔｔｉｃｏ Ｓｐｅ ｒｉｍｅｎｔａｌｅ ｉｎ Ｂｒｅｓｃｉａから得た、ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎｃ ｅｌｌ ｌｉｎｅ、Ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ４０７）。 健康な非喫煙者から口内細胞を分離した。木製の舌用押圧具を用いて頬の内表 面をこすって細胞を集めた。次いで該口腔粘膜の細胞を、ＰＢＳ（リン酸塩緩衝 サリン）液を用いて洗った。 腸内細胞を、１０％の牛胎児の血清を含むＨａｎｋｓ ＢＳＳのＥａｇｌｅ’ ｓ Ｂａｓａｌ培地中にて生長するように調製し、そして５％ＣＯ₂の雰囲気下 で３７℃で４８時間培養した。得られた単層体（ｍｏｎｏｓｔｒａｔａ）を標準 の方法によってトリプシン処理した（生長媒体を除き、ＰＢＳ液で基体を洗い、 ０．２５％濃度のトリプシン−ベルセン２ｍｌを加える）。次に得られたサスペ ンジョンを１７００ｇにて１０分間遠心処理した。該細胞をＰＢＳ液で二度洗い 、そして次に１００細胞／ｍＬの濃度となるまでＰＢＳ液で希釈した。 ＰＢＳ液中の１０⁵個の上皮細胞（口内または腸内細胞）に、適当な条件下で 生長させた１０⁷個のバクテリアを加えて付着テストを行った。該混合物を連続 撹拌下に３７℃で３０分間培養した。その後に５μｍ径の細孔ポリカーボネート 膜（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）を通して該サスペンジョンを濾過して、付着しないバ クテリアを除いた。繰返して洗った後に付着した該バクテリアを検出するために 、該膜をガラスのスライド上に置き、空気中で乾燥し、メタノールにて固定し、 そしてクリスタル−バイオレットにて染色した。１個の細胞あたりの付着したバ クテリアの平均数（Ｘ）を、１００個の細胞に付着したバクテリアの個数を数え て測定した。 検査した菌株の付着を、参考用のＡＴＣＣ５３１０３株の付着数と下記の式を 用いて比較した。 これらの実験の結果を表１に示す。 上記の結果は、腸内および口内の粘膜の細胞に付着する本発明の菌株の優れた 能力を示す。参考用菌株よりもはるかに大きい結果を示した場合も存在する。種々のｐＨ値における生長 ｐＨ３（ＨＣｌを添加して得た）、ｐＨ５（培地の通常のｐＨ値）およびｐＨ ８（ＮａＯＨを添加して得た）にて、本発明のラクトバチルスはＭＲＳ（Ｏｘｏ ｉｄ）液培地中で生長した。 該試料を５％ＣＯ₂雰囲気下で３７℃にて培養し、そして種々の間隔（１２時 間、２４時間、４８時間）にてバクテリア細胞を数えた。これらの結果を表２に 示す。 数値はｌｏｇ ＣＦＵ／ｍＬにて表す。ＣＦＵ＝コロニイ形成里位。この結果 は、本発明の菌株が広範囲のｐＨ値で生長できることを示す。特に本発明の菌株 は、参考用菌株と同等またはより強い酸性のｐＨ値に対して耐性であることを示 す。胆汁に対する耐性 本発明の菌株および参考用のＡＴＣＣ ５３１０３株を、ＭＲＳ液状培地中で ４８時間培養した。スープ状の該培養物を、希釈（１０⁷ＣＦＵ／ｍＬ）し、そ して１．５ｇ／Ｌまたは３ｇ／Ｌの胆汁（Ｏｘｇａｌｌ ｐｏｗｄｅｒ，Ｓｉｇ ｍａ）を補充したＭＲＳ寒天培地で生長させた。嫌気性条件下３７℃で４８時間 培養した後に、該バクテリアの数を数えて胆汁に対する耐性を実証した。結果を 表３に示す。 上記の結果は本発明の新規な菌種が、高濃度の場合でも胆汁に対する良好な耐 性を有することを示す。胆汁のより高い濃度に対しても特に該ＣＮＣＭ Ｉ−１ ４４７株が耐性であることは予想外であった。嫌気性および好気性条件下の生長 ＭＲＳ液培地中で嫌気性および好気性条件下３７℃で、ラクトバチルスを一夜 培養しそして計数した。結果を表４に示す。 上記の結果は、本発明の菌株が嫌気性および好気性の両条件下で生長すること を示す。腸内病原体の生長に対する抑制 腸内病原体の生長を抑制する本発明の菌株の能力を、エスケリチア コリ（腸 内毒素発生性ＡＴＣＣ ３５４０１）そしてサルモネラ エンテリチジス（ＩＭ Ｍ２）を用いる共存培養実験で評価した。 第一の系列の実験においては、本発明の菌株および参考用菌株を一夜生長させ た。次いで二倍濃度のＭＲＳ液状培地および二倍濃度のＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｌ ｔｏｎ液状培地の１対１混合物からなる培養媒体中で、５％ＣＯ₂雰囲気下３７ ℃でこれらの菌株を病原体と共に培養した。２４時間および４８時間後に、検査 する病原体およびラクトバチルス株のバクテリア数を計数した。純粋な培養物と して生長させた病原体およびラクトバチルス株を、対照として用いた。これらの 実験の結果を表５および表６に示す。 他の系列の実験においては、本発明の菌株および参考用菌株を病原体と共に同 時に培養し、そして上記の条件下に共存して生長させた。２４時間および４８時 間の培養の後に、該病原体および該ラクトバチルス株のバクテリア数を計数した 。対照物は上記の通りであった。これらの実験の結果を表７および表８に示す。 ラクトバチルスとの共存培養における病原体の生長の実験結果によって、本発 明の菌株は有害な微生物の生長抑制に効果的であることが示される。 表５および表６に示すように実際に、エスケリチア コリおよびサルモネラ エンテリチジスの生長は、充分量のラクトバチルスを二種類の該病原体と共に培 養した際に強く抑制された（ｌｏｇ ＣＦＵ／ｍＬとして表された値＜３はすべ ての実験に認められた）。本発明の菌株は、同時に培養される場合においても該 病原体の生長を抑制し得る（表７および８）。特にサルモネラ エンテリチジス の場合、ラクトバチルスを一夜生長させそして次に培養した際に同等の抑制が認 められた（表８および表６を参照）。更に該ラクトバチルス株の生長は、病原体 を同時に存在させても影響されないことが興味深く注目される。すべての実験に おいて共存培養における該ラクトバチルスの生長に関するデータは、該ラクトバ チルスの純粋培養の生長のデータに相等するものであった。 他の系列の実験において、本発明のラクトバチルスの混合物をエスケリチア コリおよびサルモネラ エンテリチジスと共に培養して、このような混合物が病 原体菌株の生長抑制に相乗的効果を達成可能かどうかを評価した。同時に培養し たラクトバチルスを用いた共存培養における、腸内毒素発生性エスケリチア コ リＡＴＣＣ ３５４０１株にて得られた若干の結果を表９に示す。 これらのデータによって、該病原体の生長を２４時間および４８時間後の両時 点において該ラクトバチルス混合物は充分に抑制できたことが、明示される。更 に該ラクトバチルス混合物は、単一種類のラクトバチルス株よりも該病原体の生 長抑制に一そう効果的であった（表９を表７と比較のこと）。これらのデータは 、ラクトバチルスと同時に培養された病原体の場合にも得られた。またこれらの 実験において該ラクトバチルスの生長は、該病原体および他のラクトバチルス株 の 同時の存在によっても影響を受けなかった。同様の結果がサルモネラ エンテリ チジスの場合にも得られた。 本発明の菌株は、薬剤の調製に特に適合する一連の特長を有することが明らか である。本発明の菌株は人間の上皮細胞に付着する能力（増殖に重要な特性）を 有し、そして該菌株は胆汁に対する耐性がよくない場合に有用である。該菌株は 、酸性のｐＨ値にて耐性でありそして生長でき、そして嫌気性および好気性の両 条件下にて生長できる。更に本発明の菌株は、単独または該株の混合物として、 胃腸管内中の病原体の生長を抑制する優れた能力を示す。これらの特性は凍結乾 燥後にも維持される。 凍結乾燥に対する本発明の菌株の耐性は、４℃にて３ケ月後に３５％から６０ ％の範囲にて変化する。また該菌株は、高速度の生長性を有しそして溶菌素（ｌ ｙｓｏｇｅｎｙ）が不在である。 これらの特性によって該菌株は、汚染した食物および水による疾病の予防およ び治療に、ならびに抗生物質を用いる治療中または一般的なストレス状態下にお ける補助剤として特に適合する。また該菌株の安定性によって、旅行の多い人が 感染しやすい病理の予防および治療に使用するのが、特に有用である。本発明の 菌株は、好ましくない微生物による腸内増殖が生起し得るすべての状態の新生児 （例えば帝王切開誕生児、未熟児、人工乳児）の治療にも、特に適合する。最後 に該菌株はミルクおよび関連する食品の製造にて使用できる。

【手続補正書】特許法第１８４条の８ 【提出日】１９９６年４月１１日 【補正内容】 例えば米国特許４８３９２８１号、欧州特許ＥＰ−Ａ−１９９５３５号および 米国特許５０３２３９９号に、成人から分離されそしてヒトの腸内粘膜細胞に付 着する多くのバクテリア細胞でありそして参考菌株と比較して強い付着特性を特 徴とする、好酸性ラクトバチルス株が記述されている。しかしこのような菌株の 系統学的な正確な分類は、米国特許局による出願の実体審査過程にて反論者自身 が実験データに基づき該ラクトバチルスは非好酸性種に属すると主張したように （米国特許４８３９２８１号、１９８７年１０月３０日付の特許局通知に対する 回答第７頁末尾の記録）、疑わしいものである。 腸内細胞に付着することができる他のラクトバチルス株は欧州特許第５７７９ ０４号および米国特許第４，９４６，７９１号に開示されている。 Ｒｅｎｉｅｒｏ他（文献２７）は二人の幼児の糞便からの二種類のラクトバチ ルス カセイ株の分離を報告している。糞便中の同一の菌株の数日間の存在によ って、著者はこれらの菌株が付着特性を有すると結論した。前記のような他の生 物学的または技術的特性については言及されなかった。なおこれらの事項は、本 発明にて請求しているラクトバチルス株の顕著な特長である。 事実ＣＮＣＭ Ｉ−１３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１、ＣＮＣＭ Ｉ−１３ ９２およびＣＮＣＭ Ｉ−１４４７菌株は、参考菌株よりも優れている場合の多 い腸内および口内の細胞に対する付着性のほかに、下記の特長も有するものであ った。 …人間の腸内病原体の生長を抑制する能力； …好気生活および嫌気生活の両者においておよび種々のｐＨ値における、多くの 条件下にて生長する能力；これらの特性は胃腸管中の移行間に遭遇する生理学的 および病理学的状態に適合する良好な能力を意味する； …多量の乳酸の生成； …胆汁に対する高抵抗性； …付着能力を損わない凍結乾燥抵抗性。 補正された請求の範囲 １．インスティチュート パスツールのＣＮＣＭ寄託施設に寄託されそしてＩ− １３９０、Ｉ−１３９１、Ｉ−１３９２およびＩ−１４４７の番号を有する、ラ クトバチルス属菌株。 ２．共存性賦形剤との混合物中に、請求項１のラクトバチルス株ＣＮＣＭ Ｉ− １３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９２およびＣＮＣＭ Ｉ−１４４７の少なくも一種類を含む、医薬用、獣医薬用または栄養用の組成物 。 ３．補足的な特性を有する他の菌株との混合物中に、請求項１の一種類以上のラ クトバチルス株を含む、医薬用、獣医用または栄養用の組成物。 ４．少なくも一種類の該菌株が該ラクトバチルス好酸性種に属しそして少なくも 一種類の菌株が非好酸性種に属する、請求項２の医薬用、獣医用または栄養用の 組成物。 ５．ＣＮＣＭ Ｉ−１３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９ ２およびＣＮＣＭ Ｉ−１４４７のすべての菌株の混合物を含む、請求項２の組 成物。 ６．菌株ＣＮＣＭ Ｉ−１３９０および／またはＣＮＣＭ Ｉ−１３９１および ／またはＣＮＣＭ Ｉ−１３９２および／またはＣＮＣＭ Ｉ−１４４７が凍結 乾燥形態中に存在する、請求項２の組成物。 ７．カプセル、溶液または可飲性サスペンジョン、または包袋中の粉末の形態で ある、請求項２〜６のいずれか１項の組成物。 ８．単一の投与量あたり１０⁶ 個から１０¹⁰ 個の細胞の各個の菌株を含有する、 請求項２〜７のいずれかの組成物。 ９．ラクトバチルスの投与が望ましい胃腸病理の治療または予防に有用である薬 剤の調製への、請求項１記載のラクトバチルス菌株の使用法。 １０．腸内の異常細菌感染症、種々の原因による下痢または潰瘍性大腸炎の治療 または予防用の薬剤の調製用の、請求項９の使用法。 １１．胃腸管の好ましくない菌の増殖のすべての状態における新生児の治療に有 用である薬剤の調製への、請求項１記載のラクトバチルス菌株の使用法。 １２．乳製食品の製造への、請求項１記載のラクトバチルス菌株の使用法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:225） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)， ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，Ｃ Ｈ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ， ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，Ｍ Ｘ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＥ，ＳＧ ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ， ＶＮ (72)発明者 デ アエン，クリストフ イタリア国 20134 ミラノ，ヴィア エ. フォッリ 50

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．インスティチュート パスツールのＣＮＣＭ寄託施設に寄託されそしてＩ− １３９０、Ｉ−１３９１、Ｉ−１３９２およびＩ−１４４７の番号を有する、ラ クトバチルス属菌株。 ２．共存性賦形剤との混合物中に、請求項１のラクトバチルス株ＣＮＣＭ Ｉ− １３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９２およびＣＮＣＭＩ −１４４７の少なくも一種類を含む、医薬用、獣医薬用または栄養用の組成物。 ３．補足的な特性を有する他の菌株との混合物中に、請求項２の一種類以上のラ クトバチルス株を含む、医薬用、獣医用または栄養用の組成物。 ４．少なくも一種類の該菌株が該ラクトバチルス好酸性種に属しそして少なくも 一種類の菌株が非好酸性種に属する、請求項２または３の医薬用、獣医用または 栄養用の組成物。 ５．ＣＮＣＭ Ｉ−１３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９ ２およびＣＮＣＭ Ｉ−１４４７のすべての菌株の混合物を含む、請求項２の組 成物。 ６．菌株ＣＮＣＭ Ｉ−１３９０および／またはＣＮＣＭ Ｉ−１３９１および ／またはＣＮＣＭ Ｉ−１３９２および／またはＣＮＣＭ Ｉ−１４４７が凍結 乾燥形態中に存在する、請求項２の組成物。 ７．カプセル、溶液または可飲性サスペンジョン、または包袋中の粉末の形態で ある、請求項２〜６のいずれか１項の組成物。 ８．単一の投与量あたり１０６個から１０１０個の細胞の各個の菌株を含有する 、請求項２〜７のいずれかの組成物。 ９．ラクトバチルスの投与が望ましい胃腸病理の治療または予防に有用である薬 剤の調製への、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９２およびＣＮＣＭ Ｉ−１４４７のラクトバチルス菌株の少なくも一 種類を使用法。 １０．腸内の異常細菌感染症、種々の原因による下痢または潰瘍性大腸炎の治療 または予防用の薬剤の調製用の、請求項９の使用法。 １１．胃腸管の好ましくない菌の増殖のすべての状態における新生児の治療に有 用である薬剤の調製への、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１、 ＣＮＣＭ Ｉ−１３９２およびＣＮＣＭ Ｉ−１４４７ ラクトバチルス菌株の 少なくも一種類への使用。 １２．乳製食品の製造へのＣＮＣＭ Ｉ−１３９０、ＣＮＣＭ Ｉ−１３９１、 ＣＮＣＭ Ｉ−１３９２およびＣＮＣＭ Ｉ−１４４７ ラクトバチルス菌株の 少なくも一種類への使用法。