JPH10502367A - 糖尿病を予防するためのｉｇｆ−ｉ又はその類似体の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、糖尿病の予防、糖尿病の臨床的発症の遅延に有効であり、糖尿病に対する防護効果も有する医薬の製造におけるＩＧＦ−１又はその類似体の使用に関する。本発明は、糖尿病にかかる危険が高い被験者のベータ細胞破壊を防止しＴ細胞を調節する医薬の製造におけるＩＧＦ−１又はその類似体の使用にも関する。本発明は、ＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の投与によって、糖尿病から防護し、糖尿病を予防し、糖尿病の臨床的発症を遅延させる方法にも関する。

Description

【発明の詳細な説明】 糖尿病を予防するためのＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の使用 本発明は、糖尿病の予防及び臨床的発症の遅延に有効であり、糖尿病に対する 防護効果も有する医薬の製造におけるＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の使用に関する 。前記医薬はベータ細胞破壊の防止及びＴ細胞の調節にも有用である。概要 インスリン様増殖因子Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）及びインスリンは構造相同体（ｓｔｒ ｕｃｔｕｒａｌ ｈｏｍｏｌｏｇｕｅ）であり、インスリン様効果及び増殖促進 効果を誘起する。またＩＧＦ−Ｉは、インスリンとは無関係に、胸腺細胞の複製 及び機能に大きく作用する。ベータ細胞破壊の自己免疫プロセスに対するＩＧＦ −Ｉの影響を評価するために、糖尿病供与者のＴ細胞を許容受容者に養子移入し 、１０μｇのｒｈＩＧＦ−Ｉを２回／日で皮下投与した。７×１０⁶個の自己反 応性Ｔ細胞の受容者を糖尿病の臨床的兆候について観察し、３週間の治療後に自 然位病変について調べた。その結果、糖尿病発生率は対照マウスの１２／２１（ ５７％）に対して６／２４（２５％）にすぎず、従ってｒｈＩＧＦ−Ｉの投与が 病気の臨床的発症を遅延さ せ、最終的移入成功率を低下させることが判明した。これらの効果はインスリン 炎の著しい軽減に関係していた。ｒｈＩＧＦ−Ｉで治療したマウスは完全な島（ ｉｓｌｅｔ）の割合がより高く（４８．６±１２％対１．６±１．１％、ｐ＝０ ．００１）、浸潤された島の割合がより低かった。しかしながら、一部のマウス はｒｈＩＧＦ−Ｉを投与したにもかかわらず糖尿病を発症し、著しく浸潤された 島を有していた。これは、移入したＴ細胞が、島を侵しベータ細胞破壊を生起す る能力を保持していたことを意味する。亜致死性照射及びＴ細胞接種の３週間後 、実験マウスの脾臓のＣＤ４⁺及びＣＤ８⁺Ｔ細胞の割合に変化は認められなかっ た。我々は更に、ｒｈＩＧＦ−Ｉが移入Ｔ細胞のホーミング（ｈｏｍｉｎｇ）に 影響し得るかどうかを明らかにすべく、糖尿病ＮＯＤ Ｔｈｙ−１，２マウス由 来のＴ細胞を共通遺伝子系ＮＯＤ Ｔｈｙ−１，１マウスに養子移入し、３週間 の治療後にリンパ系器官に存在するＴｈｙ−１，２⁺Ｔ細胞の数を調べた。ｒｈ ＩＧＦ−Ｉの投与は脾臓のＴｈｙ−１，２⁺Ｔ細胞の割合を著しく減少させ（１ ０．８±１．３％対１７．２±３．９％、ｐ＝０．００４）、胸腺では対照的な 結果（６８．４±７．９％対７２．８７±６．２、ｐ＝０．３０６） が観察された。ｒｈＩＧＦ−Ｉが防護効果を有し、島細胞浸潤の前に作用すると いう発見は、ヒト１型糖尿病の将来の実験及び予防対策に関して新たな展望を開 くものである。前置き 非肥満型糖尿病（ＮＯＤ）マウスは、自己反応性Ｔ細胞による漸進的島浸潤及 びベータ細胞破壊に起因する、ヒト１型（インスリン依存性）糖尿病に類似した 自然発生糖尿病の実験モデルである（１、２）。この自然発生糖尿病モデルは、 ベータ細胞破壊プロセスに関与する自己反応性Ｔ細胞の研究、及び病気の臨床的 発症前の予防対策の決定に関して、無比の機会を提供してくれる。糖尿病動物の 脾臓内の移入Ｔ細胞の数（３）及びＴ細胞サブセットのそれぞれの関与（４）は 、非糖尿病同一遺伝子動物への養子Ｔ細胞移入時にｉｎ ｖｉｖｏで評価できる 。 インスリン様増殖因子Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）、即ち構造的にインスリンと類似して いるアミノ酸数７０のペプチドは通常、成長ホルモンの多くの作用を仲介する代 謝ホルモンとみなされる。糖尿病前症期のＮＯＤマウスの予防用インスリン処理 （５）、及び成熟Ｔ細胞移入時の自己反応性Ｔ細胞のＮＯＤ受容者のインスリン 処理（６）は、糖尿病の発症を予防及び／又は遅延さ せ、インスリン炎を緩和することが判明した。自然発生自己免疫性糖尿病の別の 動物モデルであるＢＢラットでも同様の結果が得られた（７、８）。インスリン はベータ細胞の主要抗原成分であるため、これらの実験からは、インスリンの防 護効果が免疫系の抗原特異的非応答性によって説明されるのか、Ｔ細胞機能に対 する直接的抑制効果によって説明されるのか、あるいはベータ細胞に対する直接 的効果によって説明されるのかは不明であった。 本発明の研究は、ｒｈＩＧＦ−ＩがＮＯＤマウスの自己免疫性糖尿病で防護効 果を示し得るかどうかを養子Ｔ細胞移入実験を用いて調べるために実施したもの である。発明の説明 本発明は、糖尿病の予防及び糖尿病の臨床的発症の遅延に有効な医薬の製造に おけるＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の使用に関する。 ＩＧＦ−Ｉは、糖尿病に対する防護効果を有しており、糖尿病にかかる危険が 高い被験者のベータ細胞破壊を防止し、糖尿病にかかる危険が高い被験者のＴ細 胞を調節することも判明した。 本発明は、ＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の投与によって、前述の問題を抱えた患 者を治療する方法に関する。 １日当たりの投薬量は２０〜５００μｇ／ｋｇ、好ましくは２０〜２５０μｇ ／ｋｇ、より好ましくは１００〜２００μｇ／ｋｇとし得る。 実験結果は添付図面、第１図〜第５図に示す。 第１図は４回の独立した実験におけるマウスの累積的糖尿病発生率を示してい る。 第２図はインスリン炎及び破壊性病変の程度を示している。 第３図は共通遺伝子系ＮＯＤ−Ｎ Ｔｈｙ−１，１マウスの島内のＴｈｙ−１ ，２⁺Ｔ細胞の免疫検出（ｉｍｍｕｎｏｄｅｔｅｃｔｉｏｎ）結果を示している 。 第４図は共通遺伝子系ＮＯＤ−Ｎ Ｔｈｙ−１，１マウスの脾臓内のＴｈｙ− １，２⁺Ｔ細胞のＦＡＣＳ分析を示している。 第５図は共通遺伝子系ＮＯＤ−Ｎ Ｔｈｙ−１，１マウスの胸腺内のＴｈｙ− １，２⁺Ｔ細胞のＦＡＣＳ分析を示している。マウス及び方法 １．マウス ＮＯＤマウスは我々の設備で標準的条件下に飼育した。我々 のコロニーの自然発生糖尿病の発生率は雌の場合は３０週間までに８０％に達し たが、雄の場合は同じ期間で２０％にすぎなかった。ＮＯＤ／Ｌｔと糖尿病耐性 系統ＮＯＮ／Ｌｔとの交雑によって創り出された共通遺伝子系ＮＯＤ−Ｎ Ｔｈ ｙ−１，１マウスは、ミシガン州Ｂａｒ ＨａｒｂｏｒのＥｄ．Ｌｅｉｔｅｒか ら入手した（１０）。糖尿病の診断は、煩渇多飲症、体重減少、糖尿（Ｕｒｉｎ ｅ ｃｈｅｍｓｔｒｉｐｓ（尿ケミストリップ），ドイツＡｍｅｓ−ｂａｙｅｒ ）及び持続性高血糖症（Ｂｌｏｏｄ ｇｌｕｃｏｓｅ ｃｈｅｍｓｔｒｉｐｓ（ 血中グルコースケミストリップ），米国Ｌｉｆｅｓｃａｎ）に基づいて行った。 糖尿病ＮＯＤ雌マウスを自己反応性Ｔ細胞供与者として使用した。４６匹の雄受 容者及び２２匹の糖尿病雌マウスを用いて、四つの異なる糖尿病養子細胞移入実 験を実施した。２．細胞 糖尿病マウスの脾臓細胞をハンクス液（ＨＢＳＳ）中で分離し、２０〜２５％ の初期細胞調製物を溶離しながらナイロンウールカラムで濾過することにより高 密度（ｅｎｒｉｃｈｅｄ）Ｔ細胞集団を得た。最終細胞懸濁液の９０％以上はＴ ｈｙ−１， ２⁺表現型に由来するものであることがフローサイトメトリー分析で判明した。 計数及び生存能力の評価後、Ｗｉｃｋｅｒらの方法に従って（３）、照射した（ ７５０ｒａｄ）週齢８〜１０のＮＯＤ雄マウスに７．１０⁶個のＴ細胞を静脈注 射した。３．治療プロトコル 高速作用インスリン原液（デンマーク，コペンハーゲン，Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄ ｉｓｋ，Ａｃｔｒａｐｉｄ ＨＭ）を９‰ＮａＣｌ溶液を用いて最終濃度５Ｕ／ ｍｌで調製した。組換えヒトＩＧＦ−Ｉ（ｒｈＩＧＦ−Ｉ）をＤｒ．Ａｎｎａ Ｓｋｏｔｔｎｅｒ（スウェーデン，ストックホルム，Ｋａｂｉ Ｐｈａｒｍａｃ ｉａ）から入手し、最終濃度１００μｇ／ｍｌで分けた。養子細胞移入の翌日、 ０．５Ｕのインスリン、１０μｇのｒｈＩＧＦ−Ｉ又は生理食塩水のいずれかを 含む１００μｌをマウスに２回／日で皮下注射した。受容者マウスには、約３０ Ｕ／ｋｇ／日のインスリン及び０．６ｍｇ／ｋｇ／日のｒｈＩＧＦ−Ｉを３週間 にわたって投与した。糖尿の発生を１５日目から毎日観察した。４．組織学的操作 頸部を捻って総てのマウスを殺した。膵腺を切除し、ブアン アルコール溶液中で固定した後、一般的組織検査用に処理した。５μｍ断面を公 知のようにヘマトキシリン−エオシンで染色した（６）。インスリン炎の程度を 各試料毎に２５個以上の島について評価した。評価点は、目に見える炎症症状を 示さない島細胞を０、周辺にリンパ球を有する島、すなわち周囲インスリン炎を １、少し（＜４０％）浸潤された島を２、完全に浸潤された島を３とした。各カ テゴリーの島の割合を種々のマウスグループの間で比較した。ベータ細胞の数は 、１：５０で希釈した抗ヒトインスリンモノクローナル抗体（デンマーク，Ｂａ ｇｓｖａｅｒｄ，ＮｏｖｏＢｉｏｌａｂｓ，Ｎｏｖｏｃｌｏｎｅ ＨＵＩ０１８ ）と抗ヒトプロインスリンモノクローナル抗体（Ｎｏｖｏｃｌｏｎｅ ＨＰＵＩ ）とを用いて、固定断面に関する免疫組織化学によって測定した。ＦＩＴＣウサ ギ抗マウスＩｇＧ（米国Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，Ｄａｋｏ）１：５０希釈物を結 合体（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）として使用した。５．Ｔ細胞サブセット分析 ３週間の治療後、抗Ｔｈｙ１，２（クローン３０Ｈ１２）、抗Ｌ３Ｔ４（クロ ーンＧＫ１，５）及び抗Ｌｙｔ２（クローン５３−６７）ラットモノクローナル 抗体と、ＦＩＴＣ結合抗ラ ットＩｇＧカッパ抗体（フランス，コンピェーニュ，Ｂｉｏｓｙｓ，ＭＡＲＫ− １）とを用いて、実験動物から得た脾臓をＴ細胞サブセット分析にかけた。自己 反応性Ｔ細胞のホーミングに対するｒｈＩＧＦ−Ｉ処理の影響を評価するために 、ＮＯＤ−Ｎ Ｔｈｙ−１，１受容者に注射したＴｈｙ−１，２⁺Ｔ細胞の割合 を、ＦＡＣＳ分析によりリンパ系器官で測定すると共に、膵臓断面の免疫組織化 学的操作により島浸潤物中で測定した。６．ｍＲＮＡ検査 実験マウスの膵臓内のインスリンに関するｍＲＮＡ転写体の数を調べるために 、全ての含有ＲＮＡを４Ｍグアニジンチオシアネート及び７．５Ｍグアニジンヒ ドロクロリド（ミズーリー州セントルイス，Ｓｉｇｍａ）溶液中に順次沈殿させ 、クロロホルム−ブタノール（１００／２４、ｖｏｌ／ｖｏｌ）中で抽出した。 ２．５〜２０μｇの４種類の異なる濃度のＡＲＮをナイロンメンブラン上でＰ３ ２標識ｃＤＮＡラットプロインスリンプローブ（フランス，マルセイユ，Ｃ．Ｄ ａｇｏｒｎから入手）にハイブリタイズさせた。２４時間露光した後、密度計走 査によってフィルムを分析した。７．統計的分析 Ｗｉｌｃｏｘｏｎ試験を用いて糖尿病伝達に対する治療効果を分析した。不対 試料のスチューデントのテストによってインスリン炎の評価点を比較した。結果 Ｔ細胞による糖尿病伝達に対するｒｈＩＧＦ−Ｉの作用 自己反応性Ｔ細胞の糖尿病伝達能力に対するホルモン治療の効果を評価するた めに、我々は注射プロトコルを養子Ｔ細胞移入の翌日に開始し、３週間にわたっ て続けた。血中グルコース濃度に対するｒｈＩＧＦ−Ｉの作用を別個の実験で調 べた。グルコース濃度は、１０μｇのｒｈＩＧＦ−Ｉを１回皮下注射してから３ ０分後に著しく低下し（８１．５±０．７ｍｇ／ｄｌ）、２時間後に正常値を越 え（１８１±１９．８ｍｇ／ｄｌ）、その後基線に戻った。治療期間の間、体重 に対するｒｈＩＧＦ−Ｉの影響を２日毎に調べた。ｒｈＩＧＦ−Ｉは、生理食塩 水及び／又はインスリン注射と対照的に、受容者マウスの体重を維持させること ができた（表Ｉ）。しかしながら、これらの効果は臨床的糖尿病の存在に大きく 依存する。 臨床的糖尿病の発生をｒｈＩＧＦ−Ｉ処理マウスについて調 べ、生理食塩水及びインスリン処理グループと比較した。糖尿病はｒｈＩＧＦ− Ｉ処理マウスでは２４匹中６匹（２５％）に検出されただけであったが、対照マ ウスでは１２／２１（６７％）、インスリン処理マウスでは６／１４（４２．８ ％）の割合で検出された。インスリン様増殖因子Ｉは第１図に示すように糖尿病 発生率を大幅に低下させ（ｐ＝０．０１６）、病気の臨床的発症を著しく遅延さ せた。また、インスリン処理マウス（ｐ−０．０１）も、対照マウスと比べて糖 尿病発生率が著しく低かった。移入前に７日間にわたってｒｈＩＧＦ−Ｉを糖尿 病ＮＯＤ雌マウスに２回／日投与して治療した場合には、実験動物の脾臓に含ま れる自己反応性Ｔ細胞の数及び活性度に変化は見られず、糖尿病発生率曲線は１ ケ月後も同じであった。組織学的検査 インスリン炎の程度を定量的に調べ、種々の実験動物グループの間で比較した 。第２図に示すように、偽薬を注射したマウスと比較すると、ｒｈＩＧＦ−Ｉで 治療したマウスは正常（例えば浸潤されていない）島の割合が増加しており（４ ８．６±１２．１％対１．６２±１．１％、ｐ＝０．００１）、軽いインスリン 炎を有する島の割合（１５．８±５．１％対３１．５ ±２．８％、ｐ＝０．０１６）又は重いインスリン炎を有する島の割合（２２． ４３±８．８％対５９．８２±６．５％、ｐ＝０．００３）が減少していた。し かしながら、周囲インスリン炎の割合には大きな差は見られなかった（７±４． ５％対１３．１±５．８％、ｐ＝０．４２４）。 興味深いことに、ｒｈＩＧＦ−Ｉを投与した１２匹のマウスのうち４匹はリン パ球浸潤を示さなかったが、対照グループでは１１匹のマウス全部にリンパ球浸 潤が見られた。このように、ｒｈＩＧＦ−Ｉはインスリン炎の強さ及び罹患率の 両方を低下させた。インスリン合成に対するｒｈＩＧＦ−Ｉの作用 ｒｈＩＧＦ−Ｉ又は生理食塩水のいずれかで処理したマウスの治療期間の最後 には、完全ベータ細胞の数はｒｈＩＧＦ−Ｉ処理動物の方が多かったが、残留ベ ータ細胞の蛍光パターンの強さには差が認められなかった。また、ドットブロッ ト分析時の非糖尿病マウスのプロインスリンに関するｍＲＮＡ転写体のレベルは どちらの場合も同程度であった。これは、本発明の実験で使用した用量では、ｒ ｈＩＧＦ−Ｉがインスリン合成速度を大きく変えることはないことを意味する。Ｔ細胞ホーミングに対するｒｈＩＧＦ−Ｉの作用 インスリン炎はＴ細胞現象であるため、我々は、移入Ｔ細胞が膵臓に移動する 動作をｒｈＩＧＦ−Ｉが妨害するのではないかと考えた。共通遺伝子系ＮＯＤ− Ｎ Ｔｈｙ−１，１雄マウスに糖尿病ＮＯＤ Ｔｈｙ−１，２動物由来のＴ細胞 を養子移入した。生理食塩水で処理したマウスは３週間の処理後に３／６が糖尿 病を発生したが、ｒｈＩＧＦ−Ｉで処理したマウスの糖尿病発生率は０／６であ った。この明らかな防護効果は、３図に示すように、宿主Ｔ細胞の補充を含まな い供与者由来のＴ細胞だけからなる島細胞浸潤物の規模の低下にも関与していた 。個々のマウスで分析すると、Ｔｈｙ−１，２⁺Ｔ細胞の数は、脾臓ではｒｈＩ ＧＦ−Ｉ処理したマウスの方が対照マウスより遥かに少なかったが（表III及び 第４図）、胸腺では大きな差は認められなかった（第５図）。論考 ＮＯＤマウスへの養子Ｔ細胞移入は、ｉｎ ｖｉｖｏで自己反応性Ｔ細胞に、 破壊性病変を誘起し最終的に１型糖尿病を引き起こす能力を発揮させる。本発明 の研究で我々は、ｒｈＩＧＦ−Ｉが大量の移入Ｔ細胞の能力を低下させて、養子 Ｔ細胞移 入時にＮＯＤ島に侵入しないようにできることを明らかにした。これらの結果は 、ヒトインスリンについて既に報告されている結果と類似している（６）。しか しながら本発明の実験は、ｒｈＩＧＦ−Ｉが、糖尿病ラットにおいて類似の代謝 効果を与える濃度（１１）の１／１０の濃度で、インスリンより大きい糖尿病伝 達防止効力を有することを明らかに示している。多数の自己反応性Ｔ細胞を注射 したにもかかわらず、ｒｈＩＧＦ−Ｉは発症時期を遅延させ、臨床的糖尿病の最 大頻度を低下させることが判明した。更に、強力な組織学的証拠によって、ｒｈ ＩＧＦ−Ｉが大規模な島細胞浸潤を防止し、処理マウスの１／３を完全に防護す ることが明らかになった。 ＩＧＦ−Ｉによるベータ細胞破壊防止に関与し得るメカニズムは色々ある。第 一に、作用はベータ細胞に対して起こり得る。ベータ細胞表面上の特異的受容体 及び該増殖因子の局所的産生が確認された（１２）。最近になって、部分的膵切 除後のラット膵臓再生で、ＩＧＦ−Ｉ遺伝子の発現促進が観察された（１３、１ ４）。しかしながら我々は、島内のインスリン及び／又はプロインスリン陽性細 胞の数に差を認めることはできなかった。しかしながら、インスリン産生ベータ 細胞の保存は島浸潤 の著しい軽減に関与していた。これは、ベータ細胞再生の寄与が必須ではないこ とを意味する。他方で、インスリン様増殖因子Ｉは生理学的濃度で阻害効果を示 すため、インスリン放出調節因子と見なすこともできる（１５）。初期の長期に わたるインスリン療法中に打ち立てられたベータ細胞残部の仮説（５）も排除し 得るが、ベータ細胞のインスリン染色の強さ及びプロインスリンに関するｍＲＮ Ａ転写体の数に差は認められなかった。 ｒｈＩＧＦ−Ｉ治療下でインスリン炎を起こさない膵臓が観察されるという事 実は、ベータ細胞破壊に必要な自己反応性Ｔ細胞の機能特性を除去又は不活化す ることにより、浸潤Ｔ細胞の後期活性化プロセスの前に生起する別のメカニズム を示唆する。組換えｒｈＩＧＦ−Ｉはこれらの効果をリンパ球に直接及ぼし得る 。なぜなら、コンカナバリンＡ又は同種の刺激に対するＴ細胞応答のｉｎ ｖｉ ｔｒｏ抑制が用量依存的に達成できるからである（１６）。免疫系に対する成長 ホルモンの多くの作用は、末梢白血球によっても産生されるＩＧＦ−Ｉに仲介さ れ得る（１７）。最近の観察では、活性化Ｔリンパ球がＩＧＦ−Ｉに対する受容 体を有することが示唆されている（１８−２ ０）。また、幾つかの報告によれば、ＩＧＦ−Ｉはｉｎ ｖｉｔｒｏで胸腺上皮 細胞機能に影響し得（２１）、ストレプトゾシン誘導糖尿病ラットの胸腺細胞の 複製及び分化を誘発し得る（２２）。４ｍｇ／ｋｇ／日のｒｈＩＧＦ−Ｉを投与 したマウスは脾臓及び胸腺の重量が増加していた。これは、これらの器官のリン パ球、特にＣＤ４表現型由来Ｔ細胞の増加に起因する（２２）。我々は、リンパ 系器官のＴ細胞数及び脾臓内のＴ細胞サブセットの相対的寄与の差は観察しなか った。これはおそらく、本発明の研究で使用したｒｈＩＧＦ−Ｉの用量がより少 なかったためであろう。また、糖尿病雌マウスをｒｈＩＧＦ−Ｉで処理でも、脾 臓細胞の病気伝達能力は低下しなかった。これは、自己反応性Ｔ細胞の数及び活 性度が変化しなかったことを示唆するものである。 作用は、島細胞浸潤に先立つＴ細胞接種後１０日の間に島内に移動するＴ細胞 のメカニズムに対するものでもあり得る（２３）。膵臓へのＴ細胞のホーミング 及び内皮−リンパ球相互作用は調節現象であり得る。Ｔｈｙ−１，２⁺Ｔ細胞を 有する照射した共通遺伝子系ＮＯＤ−Ｎ Ｔｈｙ−１，１受容者の胸腺の再構築 はｒｈＩＧＦ−Ｉに影響されなかった。脾臓で観察さ れた供与者由来Ｔ細胞数の大幅な減少は、養子Ｔ細胞移入時のＩＧＦ−Ｉの防護 効果に寄与し得る。自己反応性Ｔ細胞の数が減少し活性度が低下しないという現 象は、ｒｈＩＧＦ−Ｉ処理マウスが完全には防護されず、糖尿病が依然として発 生し得る理由を説明するものであり得る。 本発明の観察に基づけば、ｒｈＩＧＦ−Ｉは、ヒト１型糖尿病の糖尿病前症期 に臨床的結果をもたらし得る自己分泌及び内分泌作用を介して自己反応性Ｔ細胞 を調節する重要な物質であると見なすべきものである。図面の説明 第１図：１０μのｒｈＩＧＦ−Ｉを２回／日で注射した２４匹のマウス（黒丸 印）及び生理食塩水を注射した２１匹の対照マウス（白丸印）に関する、養子Ｔ 細胞移入後の４回の独立した実験における累積的糖尿病発生率。 第２図：生理食塩水処理（黒い棒）又はｒｈＩＧＦ−Ｉ処理（白い棒）した受 容者マウスのインスリン炎及び破壊性病変の度合い。結果は２回の独立した実験 で２４匹のマウスについて得られた値の平均％±ＳＥで示されている。^* ：ｐ＜０．０５、^**：ｐ＜０．０１。 第３図：ＮＯＤ Ｔｈｙ−１，２糖尿病供与者由来Ｔ細胞を７×１０⁶個使用 して養子細胞移入により糖尿病を伝達してから３週間後の共通遺伝子系ＮＯＤ− Ｎ Ｔｈｙ−１，１マウスの島内でのＴｈｙ−１，２⁺Ｔ細胞の免疫検出。写真 Ａは対照マウスの重度のインスリン炎を示している。写真ＢはｒｈＩＧＦ−Ｉで 処理したマウスの周囲インスリン炎を示している。 第４図：亜致死性照射及び糖尿病供与者由来Ｔｈｙ−１，２⁺Ｔ細胞の接種か ら３週間後の、共通遺伝子系ＮＯＤ−ＮＴｈｙ−１，１マウスの脾臓内のＴｈｙ −１，２⁺Ｔ細胞のＦＡＣＳ分析。グラフＡは対照ＮＯＤ−Ｎ Ｔｈｙ−１，１ マウスに関する結果を表す。インスリン様増殖因子Ｉ（グラフＢ）は生理食塩水 （グラフＣ）と比べて脾臓内のＴｈｙ−１，２⁺Ｔ細胞数を著しく減少させた。 第５図：亜致死性照射及び糖尿病供与者由来Ｔｈｙ−１，２⁺Ｔ細胞の接種か ら３週間後の、共通遺伝子系ＮＯＤ−ＮＴｈｙ−１，１マウスの胸腺内のＴｈｙ −１，２⁺Ｔ細胞のＦＡＣＳ分析。グラフＡは対照ＮＯＤ−Ｎ Ｔｈｙ−１，１ マウスに関する結果を表す。Ｔ細胞移入後の胸腺再構築に対するｒｈＩＧＦ−Ｉ の効果がグラフＢに示されており、生理食塩水を注射したマウスの場合（グラフ Ｃ）と比較される。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 糖尿病の予防に有効な医薬の製造におけるＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の使 用。 ２． 糖尿病の臨床的発症の遅延に有効な医薬の製造におけるＩＧＦ−Ｉ又はそ の類似体の使用。 ３． 糖尿病に対する防護効果を有する医薬の製造におけるＩＧＦ−Ｉ又はその 類似体の使用。 ４． 糖尿病にかかる危険が高い被験者のベータ細胞破壊を防止する医薬の製造 におけるＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の使用。 ５． 糖尿病にかかる危険が高い被験者のＴ細胞を調節する医薬の製造における ＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の使用。 ６． ＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の投与によって糖尿病を予防する方法。 ７． ＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の投与によって糖尿病の臨床的発症を遅延させ る方法。 ８． ＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の投与によって糖尿病から防護する方法。 ９． ＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の投与によって、糖尿病にか かる危険が高い被験者のベータ細胞破壊を防止する方法。 １０． ＩＧＦ−Ｉ又はその類似体の投与によって、糖尿病にかかる危険が高い 被験者のＴ細胞を調節する方法。