JPH10510046A

JPH10510046A - 組織造影及び治療を目的としたヌクレオシド類似体組成物の使用及び遺伝子トランスフェクション

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Publication number: JPH10510046A
Application number: JP8513558A
Authority: JP
Inventors: エドワードイークナウス; レナードアイウィーブ; ケヴィンモーリン
Original assignee: University of Alberta
Current assignee: University of Alberta
Priority date: 1994-10-21
Filing date: 1995-10-20
Publication date: 1998-09-29
Also published as: GB9421223D0; WO1996012508A2; AU715811B2; WO1996012508A3; CA2202891A1; AU3648695A; EP0784489A2

Abstract

(57)【要約】遺伝子治療技術と共に使用することができる、診断法、放射線療法及び化学療法、並びにこれらの方法を実施する際の特定の化合物の使用である。本方法は、外来遺伝子が導入された細胞集団に適用可能であり、これにより外来遺伝子は、好ましくは該細胞には天然には存在しないタンパク質を発現する。診断を目的とするか、もしくは放射線療法又は化学療法を目的とするかによって、この化合物は、外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用し、該細胞に捕捉されるか、該細胞に対し細胞毒性又は細胞分裂抑制性であるか、もしくはこれら両方であるような生成物を生成するように選択される。診断の用途においては、標識された生成物の捕捉は、該外来遺伝子によってタンパク質が発現される細胞に、この生成物の蓄積をもたらし、これによりこれらの細胞における標識生成物の検出が容易になる。放射線療法の用途においては、放射標識された化合物によって生じた放射性生成物の捕捉は、該外来遺伝子によってタンパク質が発現される細胞に、この生成物の蓄積をもたらし、これによりこれらの細胞における特異的放射線療法の効果の検出が容易になる。化学療法の用途においては、該化合物とタンパク質の相互作用は、該細胞に対し細胞毒性又は細胞分裂抑制性のいずれかを示し、このことにより、このタンパク質が発現されている細胞において、該生成物が捕捉されたかどうかを増強する。

Description

【発明の詳細な説明】組織造影及び治療を目的としたヌクレオシド類似体組成物の使用及び遺伝子トランスフェクション発明の属する技術分野本発明は、遺伝子治療技術と共に使用する、診断法、放射線療法及び化学療法、並びにこれらの方法を実施する際の特定の化合物の使用に関する。発明の背景組織及び細胞集団において異種タンパク質を発現するための遺伝子治療技術の利用が、それらの機能及び適応性について考察されている。これらの技術は、広範な生理的経過を研究しかつ治療するために、うまく使用されている。In vivo におけるトランスジェニック生成物の操作、及び遺伝物質の細胞特異的送達の達成における進歩は、これらの技術の価値並びにこれらによるヒト及び動物の疾患の治療の可能性の高まりを助長している。遺伝子治療のひとつの態様は、標的組織に感受性遺伝子を導入する転移を含んでいる。これは、標的組織にDNA を直接注入するか、リポソームを介して、又は該遺伝子を該標的組織に導入するウイルスベクターを介して、DNA を送達することで達成される。後者の場合、このウイルスベクターは、遺伝的に修飾され、そのゲノム中に新規の感受性遺伝子を有している。このようなベクターは、哺乳類細胞に“形質導入”することが可能であり、この新規遺伝子でコードされたタンパク質の発現をもたらす。この発現タンパク質は、標的組織に、発現タンパク質の基質である薬品に対する感受性をもたらす。この薬品によって誘発された酵素的プロセスが、該タンパク質を発現している標的組織細胞を死滅させる。形質導入されていない細胞中に存在するタンパク質は、該薬品に対して親和性が非常に低いので、この機序に関連した全身の毒性は、認められない。遺伝子転移は、レトロウイルスを介在して行うことができ、これはDNA を活発に合成する標的細胞においてのみ遺伝子組込みをもたらし、その結果、近隣の非増殖性正常標的組織又は細胞は、この遺伝子を獲得せず、かつ該薬品に対して非感受性であり続ける。全ての形質導入された標的細胞及びウイルスベクターが産生する細胞は、該薬品の投与及び／又は悪性細胞に生じる挿入型突然変異に対する可能性のある関連を減じる宿主の免疫応答によって死滅する。遺伝子治療は、in vivo における腫瘍ゲノムの遺伝子操作による悪性腫瘍の治療に使用されている。例えば、癌の遺伝子治療における、単純ヘルペスウイルスタイプ１チミジンキナーゼ(HSV-1 TK)遺伝子の“自殺ベクター”としての有効性が、公表されている（M.P.Short らの論文、J.Neurosci.Res．、27:427頁(1990) ；Y.Takamiyaらの論文、J.Neurosurg.、79:104頁(1993)）。最も確実な方法のひとつは、脳腫瘍へHSV-1 TK遺伝子を形質導入し、その後HSV-1 TKによる選択的リン酸化のために、形質導入された細胞に対し選択的毒性を示す、ガンシクロビル｛9-[1,3- ジヒドロキシ-2- プロポキシ）メチル］グアニン、GCV｝を静注することである（K.W.Culverらの論文、Science、256:1550頁(1992)）。GCV-一リン酸は、その後内因性の哺乳類のキナーゼ類により、ウイルスDNA ポリメラーゼの強力な阻害剤であるGCV-三リン酸へと転換される。この治療において、モロニーマウスレトロウイルスベクターの送達は、脳腫瘍塊への、マウスの繊維芽プロデューサー細胞の立体走性の移植(stereotactic implantation)を通じて達成されている。形質導入率及びその後の新生組織におけるHSV-1 TKの発現は様々であり、かつ最適の治療時間は現時点では不明である。しかし動物モデルにおいて、劇的な腫瘍退縮（又は治癒）が認められ、かつ全身毒性がなく、ヒトにおける臨床試験の開始が進められている（E.H.Oldfieldらの論文、Hum.Gene Ther.、4:60頁 (1993)；S.M.Freeman らの論文、Hum.Gene Ther.、3:242 頁(1992)）。別の研究も、癌治療における遺伝子治療技術の価値を指摘していて（F.L.Mool ten らの論文、J.Natl.Cancer Inst．、82:29 頁(1990)；S.Freeman らの論文、 Cancer Res．、53:5274 頁(1993)；D.Barba らの論文、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S ．A．、91:4348 頁(1994)）、これはヒトの肺癌（Y.Hasegawaらの論文、Am.J.Re sp.Cell and Mol.Biol.、8:655 頁(1993)）及び乳癌（Y.Manomeらの論文、Cance r Res．、54:5408 頁(1994)）のような種類の癌を含んでいる。癌細胞へのアデノウイルスHSV-TK遺伝子導入を用いる関連研究も、胸部（W.Roy Symtheらの論文、Cancer Res．、54:2055 頁(1994)）、脳（S.H.Chenらの論文、Proc.Natl.Acad . Sci.U.S.A.、91: 3054頁(1994)）、並びに頭部及び頚部（B.W.O'Malleyらの論文、Cancer Res．、55:1080 頁(1995)）で励みとなる結果を提供している。ブタ動脈においてHSV-TKをコードしているアデノウイルスベクターが、GCV 治療に対し感受性がある細胞を産生し、かつ動脈損傷に反応した平滑筋細胞の増殖を抑制する働きがあることも示唆されている（T.Ohnoらの論文、Science、265:781 頁(19 95)）。しかし、5-(チエン-2- イル)-及び5-(フラン-2- イル)-2'- デオキシウリジンは、HSV-TK遺伝子でトランスフェクションされたFM3A細胞に対しての方が、野生型FM3A/O細胞よりも、少なくとも100 倍以上細胞分裂を抑制すること、並びにHSV-1 TK遺伝子がトランスフェクションされた腫瘍細胞において発現したウイルスのTKは、活性酵素としてほとんど作用しないが、チミジル酸シンターゼが、これらの化合物の細胞分裂抑制作用の標的酵素として利用されることが示されている（C.Bohmanらの論文、J.Biol.Chem.、269:8036頁(1994)）。別のウイルス遺伝子は、選択されトランスフェクションされたウイルス遺伝子でコードされたタンパク質によって細胞毒性型へと生物転換されたプロドラッグ中の、抗ウイルス性ヌクレオシドと共に、遺伝子治療に同様に使用することができる。あらゆる遺伝子治療技術に関連した重要な限界点のひとつは、遺伝子導入が、腫瘍又は他の標的組織に限定されているかどうか、並びに骨髄細胞又は腸管上皮細胞のような、他の感受性分裂(sensitive dividing)細胞においても生じるかどうか定かではないことである。第二の重要な限界は、たとえ標的組織においてであっても、遺伝子導入は、必ずしもその遺伝子が実際に発現し、標的組織全域で活性タンパク質を産生することを意味するものではないことである。現在、形質導入された標的組織の生検標本を入手することが必要な侵襲的方法を用い、β- ガラクトシダーゼ染色法のようなin vitro法により、遺伝子導入の程度を決定している（Z.Ram らの論文、Cancer Res．、53: 83頁(1993)；R.G.Vileらの論文、 Cancer Res．、53: 962 頁(1993)）。ドップラーカラーフロー及び超音波造影のような他の方法は、腫瘍血管及び腫瘍容積の画像を提供するのみであるが、遺伝子導入率に関する情報はもたらさない（Z.Ram らの論文、J.Neurosurg、81: 256 頁(1994)）。コンピューター断層撮影法(CT)及び核磁気共鳴画像(MRI)のような形態学的造影法も、遺伝子導入率に関する情報を提供しない。従って、遺伝子治療技術と共に使用される、標的組織を含む細胞集団全域で、外来遺伝子の導入を追跡する診断法で、in vivo で非侵襲的に実施される方法が必要である。この診断法を実施する際には、使用に適した特異性を有する化合物を同定することも必要である。このような診断法、並びにこの診断法の実施におけるこのような化合物の使用は、遺伝子治療技術と共に同様の方法で用いられる放射線療法及び化学療法の必要条件を満足するようにも適合させ得る。発明の説明本発明は、遺伝子治療技術と共に用いることができる、診断法、放射線療法及び化学療法を提供する。本発明は更に、これらの方法を実施する際の、標識及び未標識化合物で、物理的及び化学的特性を有する標識及び非標識化合物の使用を提供する。本発明は、好ましくは該細胞内では天然には生じることがないタンパク質を発現する外来遺伝子が導入された細胞集団に、適用可能である。この化合物が、診断目的又は放射線療法又は化学療法の目的のいずれに使用されるかによって、化合物が、外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用し、該細胞内で捕捉されるか、該細胞に対し細胞毒性又は細胞分裂抑制性を示すか、もしくはこれらの両方であるかのような生成物を生成するように、化合物は選択される。診断に用いる場合は、標識された前記生成物の捕捉は、外来遺伝子によってタンパク質が発現される細胞における、該生成物の蓄積をもたらし、その結果このような細胞における標識生成物の検出が容易になる。放射線療法において利用する場合は、該化合物が放射標識された結果、放射性である生成物の捕捉は、該外来遺伝子によってタンパク質が発現される細胞における、該生成物の蓄積をもたらし、その結果このような細胞で特に指示された放射線療法の効果の検出が容易になる。化学療法において利用する場合は、この化合物と該タンパク質の相互作用は、細胞に対し細胞毒性又は細胞分裂抑制性を生じ、これは、該生成物が、該タンパク質が発現されている細胞中に捕捉されるならば、増強される。本発明の診断での利用に関連する第一の実施態様において、本発明は、細胞集団全域の外来遺伝子の導入を追跡する方法を含み、この方法は、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と標識化合物が選択的に相互作用し、標識生成物を生成するように、該標識化合物を有効量、該細胞に投与する工程、その後この標識生成物を検出する工程を含み、ここにおいて、該標識生成物が、該外来遺伝子によってタンパク質が発現された細胞内で捕捉されるために、この標識化合物は、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用するように選択される。この第一の実施態様において、本発明は、この診断法の実施における標識化合物の使用も含む。前述の外来遺伝子は、いずれかの真核細胞又は原核細胞由来のものか、もしくは単純ヘルペスウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、水痘帯状疱疹ヘルペスウイルス及びエプスタイン・バールウイルスからなるウイルス群から選択されたウイルスを含む、ウイルス由来のものから選択された遺伝子であってよい。好ましい外来遺伝子は、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼを発現する遺伝子である。前述の標識化合物は、好ましくは放射線標識されるが、その標識生成物の検出を容易にするいずれか他の標識の形も適している。外来遺伝子が、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼを発現する遺伝子である場合は、好ましい標識化合物は下記式を有するもの、又はその医薬として許容できる塩である：（式中、X は、放射性ハロゲン置換基で、R₁は、水素、ヒドロキシル又はフッ素置換基で、R₂は、水素又はフッ素置換基で、R₃は、水素、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクロカルボニル、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、3-7Cシクロアルキルカルボニル、及び炭素原子１〜８個の直鎖又は分枝した鎖のアルキルカルボニルからなる群から選択された置換基であり、並びにR₄は、水素、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクロカルボニル、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、3- 7Cシクロアルキルカルボニル、及び炭素原子１〜８個の直鎖又は分枝した鎖のアルキルカルボニルからなる群から選択された置換基である。）。好ましくは、R₃ 及びR₄の少なくとも一方は水素であり、最も好ましくはR₄は水素である。好ましいX は、¹²³I、¹²⁴I、¹³¹I、⁷⁵Br、⁷⁶Br及び¹⁸F からなる群から選択され、最も好ましくは¹²³Iである。前述の外来遺伝子で使用するために特に好ましいいくつかの標識化合物の置換基は、下記のものである：１．X ＝¹²³I、¹²⁴I、又は¹³¹I、最も好ましくは¹²³I R₁＝水素 R₂＝水素 R₃＝水素又は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル R₄＝水素２．X ＝¹²³I、¹²⁴I、又は¹³¹I、最も好ましくは¹²³I R₁＝水素 R₂＝フッ素 R₃＝水素又は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル R₄＝水素３．X ＝¹²³I、¹²⁴I、又は¹³¹I、最も好ましくは¹²³I R₁＝フッ素 R₂＝水素 R₃＝水素又は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル R₄＝水素４．X ＝¹²³I、¹²⁴I、又は¹³¹I、最も好ましくは¹²³I R₁＝ヒドロキシル R₂＝水素 R₃＝水素又は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル R₄＝水素である。本発明の放射線療法での利用に関連している第二の実施態様において、本発明は、外来遺伝子が導入されている細胞集団全域を用いる放射線療法を含み、この方法は、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と該放射標識化合物が選択的に相互作用し、放射標識生成物を生成するように、該放射標識化合物を放射線療法の有効量、該細胞に投与する工程を含み、ここにおいて、該放射標識生成物が、該外来遺伝子によってタンパク質が発現された細胞内で捕捉されるために、該放射標識化合物が、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用するように選択される。この第二の実施態様において、本発明は、この放射線療法を実施する際の放射標識化合物の使用も含む。本発明の放射線療法における使用のための外来遺伝子の選択のパラメーターは、本発明の診断法の場合と同じであり、好ましい外来遺伝子は、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼを発現する遺伝子である。この外来遺伝子が、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼを発現する場合は、好ましい放射標識化合物は、X が放射性ハロゲン置換基である以外は、本発明の診断法の一般式(I)と同じであり、好ましくは、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹Iからなる群から選択される。最も好ましいX は、¹³¹Iである。好ましくは、R₃及びR₄の少なくとも一方は水素であり、最も好ましくは、R₄は水素である。この外来遺伝子で使用するために特に好ましい放射標識化合物の置換基は、特定の放射標識された化合物のX が¹²³I、¹²⁵I、¹³¹Iからなる群から選択される以外は、本発明の診断法のものと同じである。本発明の化学療法での利用に関連している第三の実施態様において、本発明は、外来遺伝子が導入されている細胞集団全域で用いる化学療法を含み、この方法は、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と該化合物が選択的に相互作用し、生成物を生成するように、該化合物を化学療法の有効量、該細胞に投与する工程を含み、ここにおいて、該生成物が、該外来遺伝子によってタンパク質が発現された細胞に対し細胞毒性又は細胞分裂抑制性であるために、この化合物は、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用するように選択される。この第三の実施態様において、本発明は、この化学療法を実施する際の化合物の使用も含む。本発明の化学療法において使用するための外来遺伝子の選択のパラメーターは、本発明の診断法の場合と同じであり、好ましい外来遺伝子は、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼを発現する遺伝子である。この外来遺伝子が、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼを発現する場合は、好ましい化合物は、X がハロゲン置換基である以外は、本発明の診断法の一般式(I)と同じであり、好ましくは、ホウ素、塩素、フッ素及びヨウ素からなる群から選択される。最も好ましいX は、ホウ素、塩素又はヨウ素置換基のいずれかである。好ましくは、R₃及びR₄の少なくとも一方は水素であり、最も好ましくは、R₄は水素である。この外来遺伝子で使用するために特に好ましい化合物の置換基は、特定の好ましい化合物のX が一般にヨウ素置換基であり得る以外は、本発明の診断法のものと同じである。図面の簡単な説明本発明の実施態様は、添付図面を参照して説明される：図１は、実施例12の、KBALB-LNL 及びKBALB-STK 細胞における、[¹²⁵I]-IVDU の in vitroでの細胞取込みを示すグラフである；図２は、実施例12の、KBALB、KBALB-LNL 及びKBALB-STK 細胞における、[¹²⁵I]- IVFRUのin vitroでの細胞取込みを示すグラフである；図３は、実施例13の、マウスが形成するKBALB-STK 腫瘍における、[¹³¹I]-IVFRU のin vivo での生体分布を示すグラフである；図４は、実施例13の、マウスが形成するKBALB 腫瘍における、[¹³¹I]-IVFRUのin vivo での生体分布を示すグラフである；図５は、実施例13の、マウスが形成するKBALB 又はKBALB-STK 腫瘍における、in vivo での腫瘍対血液の比を示すグラフである；図６は、実施例14の、ガンシクロビル投与前の、[¹³¹I]-IVFRU注入８時間後、HS V-1 TKを発現しているKBALB -STKのシンチグラム像である；図７は、実施例14の、ガンシクロビル投与４日目の、[¹³¹I]-IVFRU注入８時間後、HSV-1 TKを発現しているKBALB -STKのシンチグラム像である。本発明実施の最良の態様本発明の第一の実施態様において、本発明は、標識化合物の診断的使用、及びこの化合物を用いる診断法からなる。この使用及び方法は、細胞集団全域で外来遺伝子の導入を追跡するためである。この方法は、最初に、下記の選択的相互作用により標識生成物を生成するために、標識化合物の有効量を該細胞に投与する工程、次にこの標識生成物を検出する工程からなる。この外来遺伝子は、細胞集団又は細胞集団の一部に、所望のように遺伝子治療技術により、意図的に導入され、形質導入され、もしくはトランスフェクションされることが好ましい。この外来遺伝子は、タンパク質の発現をコードしている。この導入された外来遺伝子を含む細胞に有効量の標識化合物が投与される場合は、この標識化合物は、この発現されたタンパク質と選択的に相互作用し、標識生成物を生成する。この外来遺伝子の細胞への導入は、特異的外来遺伝子が配列された細胞に導入された外来遺伝子全てが、タンパク質を活発に発現することを意味する必要はない。いくつかの外来遺伝子は、該タンパク質を活発に発現することができるが、他は休眠状態である。その結果、この標識生成物は、実際に該外来遺伝子によってタンパク質が発現している細胞においてのみ産生される。その後この標識生成物は、該細胞における外来遺伝子の導入を追跡するために、検出することができる。この標識化合物は、捕捉されかつその後その中に局在され、かつ該タンパク質を発現した細胞から容易に流出することのないような標識生成物を産生するために、該外来遺伝子によって発現された特異的タンパク質と選択的に相互作用するか、もしくはタンパク質により作用を受けるように選択される。従って外来遺伝子を有さないか、もしくは休眠状態の外来遺伝子を有する細胞と比較した場合に、この標識生成物の優先的蓄積又は局在又は選択的代謝捕捉が、このタンパク質を発現している細胞において生じる。この選択的捕捉は、該外来遺伝子を有する細胞及び該特異的タンパク質を発現している細胞の両方の特異的検出を可能にする。リン酸化のような標識化合物の修飾が、該タンパク質の存在下で生じ、これは該細胞内部での標識生成物の産生をもたらす。得られる標識生成物は、容易に細胞から離れることはなく、従って該細胞中に蓄積もしくは局在する。この細胞中に捕捉された標識生成物は、前述の必要条件を満たす相互作用の結果のいずれかの生成物であることができ、これは標識を、更にはこの標識単独で細胞中に選択的に捕捉されることが可能である場合にはこの標識自身を単離された形で含む。この診断での使用及び方法は、細胞集団全域の外来遺伝子の導入を追跡するために、in vivo 及びin vitroの両方で使用することができる。更に詳細に述べると、この方法は、該細胞全域の外来遺伝子の導入の局在又は部位、程度、及び反応速度論を決定しすること、プロドラッグを用いて哺乳類対象における化学療法の最適の開始時を決定すること、癌治療において遺伝子を形質導入された腫瘍を破壊すること、放射性医薬品を用いて特異的細胞集団を効果的に放射線療法すること、もしくは遺伝子の変調過程を研究することに有用である。更にこの診断法は、治療効果、並びに該細胞集団での再増殖の発生のような事象において反復治療が必要かどうかどうかを評価する臨床試験に使用することができる。従って、本発明の細胞集団は、in vitro又はin vivo での細胞集団、もしくはより大きい細胞集団の小さい特定部分のいずれかであることができる。好ましい実施態様において、この細胞集団は、例えばヒトのような哺乳類対象の特定の組織（例えば脳、肝、乳房など）、又は特定の組織中の癌性腫瘍のような組織の一部のいずれかである。このような細胞への前述の外来遺伝子の導入又は組込みにより、この診断法は、細胞増殖を生じるようなヒト疾患において認められるような、外来遺伝子の導入が追跡される細胞又は組織が、活発にDNA 合成している場合に、特に有用となる。このような細胞増殖性の疾患は、癌、及び動脈損傷に呼応する平滑筋細胞の増殖のような、損傷後の組織修復を含む。前述の導入された遺伝子は、あらゆる真核細胞又は原核細胞、もしくはあらゆるウイルスから選択されたいずれかの遺伝子であり得、これは外来遺伝子の導入が追跡される細胞集団によって容易に取り込まれることが好ましい。更にこの遺伝子は、好ましくはその細胞集団においては天然には存在しないタンパク質を、発現しなければならない。このためにこの導入された遺伝子は、外来遺伝子であることが好ましい。外来遺伝子は、外来遺伝子の導入が追跡される細胞集団において、そのままの形又は特異的形状で存在することがない、いずれかの遺伝子である。別の言い方をすると、外来遺伝子は、外来遺伝子によって発現されたタンパク質が、それらの細胞においては天然には発現されないような、それらの細胞中に全く存在しないか、もしくはその細胞中には異なる形状で存在するかのいずれかである。外来遺伝子によって発現されたタンパク質は、酵素であり得る。前述のように、外来遺伝子は、外来遺伝子が導入される細胞によって容易に取り込まれることが好ましい。このため、この外来遺伝子は、ウイルスから選択されることが好ましい。更にこの外来遺伝子は、単純ヘルペスウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、水痘帯状疱疹ヘルペスウイルス、及びエプスタイン・バールウイルスからなるウイルス群から選択されることが好ましい。これらのウイルスでは、単純ヘルペスウイルスが、遺伝子治療における使用のために選択された遺伝子として、現在一般的に使用されている。従って、診断法及び使用における好ましい実施態様において、外来遺伝子は、単純ヘルペスウイルスから、更に詳細に述べると単純ヘルペスウイルスタイプ１から選択される。好ましい実施態様の特異的外来遺伝子は、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ(HSV-TK)を発現する。しかし、前述のいずれかの外来遺伝子を、その外来遺伝子によって発現されたタンパク質が、適当な標識化合物と選択的に相互作用し、必要な標識生成物を産生することに適応する限りは、使用することができる。この化合物は、発現タンパク質との相互作用が細胞中で、好ましくは非侵襲的手段で検出可能な標識生成物を生じる限りは、いずれか適当な通常の手段で標識することができる。好ましい実施態様においては、この標識化合物は、放射標識され、かつこの放射標識化合物の発現タンパク質との選択的相互作用により、放射標識生成物が生成される。好ましい実施態様において、この放射標識生成物は、公知の核医学造影技術を用いて検出される。この化合物の放射標識に使用される特異的放射性標識は、得られる放射標識生成物の検出のために使用される造影技術の種類に関連して選択され、これは当業者に公知の選択的方法である。例えば、シングルフォトンエミッション断層撮影(SPECT)については、放射性同位元素¹²³I及び¹³¹Iの両方が標識として適しているが、臨床での使用においては¹²³I が好ましい。ポジトロン放出断層撮影(PET)に適した標識は、¹²⁴I、⁷⁵Br、⁷⁶Br 及び¹⁸F である。多くの外来遺伝子に関して、いずれか適当な標識ヌクレオシド又は核酸塩基を、前述の化合物として選択することができる。他の外来遺伝子に関しては、ヌクレオシド又は核酸塩基以外の化合物が適している。前述のように、導入された外来遺伝子によって発現されたタンパク質、及び標識ヌクレオシド又は核酸塩基は、タンパク質が発現された細胞内で捕捉される標識生成物を産生するために、選択的に相互作用しなければならないことが適当とみなされる。例えば、適切に標識されたヌクレオシド5-フルオロ-2'-デオキシウリジンは、遺伝子が発現しているチミジル酸シンターゼを有する細胞の検出に使用することができ、もしくはフルオロシトシンは、遺伝子が発現しているシトシン脱アミノ酵素を有する細胞に使用することができる。同様に別の化合物類は、異なる生体分布特性を示し、従って特定の化合物を特異的細胞集団（例えば脳、肺、乳房、卵巣、結腸、膵臓など）の検出及び造影により適したものにする、異なる効果又は別の特性を持ち得る。従って、化合物を選択する場合には、これらは外来遺伝子の導入が追跡される特異的細胞集団に関連があるので、具体的な化合物の特性も考慮しなければならない。導入された外来遺伝子が、HSV-TKを発現する好ましい実施態様において、下記式(1)を有する化合物、又はその医薬として許容できる塩が使用されることが好ましい：式(1)に関して、X は、該化合物の標識であり、これは前述のように放射標識であることが好ましい。この放射標識は、放射性ハロゲン置換基であることが好ましい。この放射性ハロゲン置換基は、前述のように、この放射標識生成物の検出に使用される核医学造影技術の種類に関連して選択される。適当な放射性ハロゲン置換基は、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、¹³¹I、⁷⁵Br、⁷⁶Br及び¹⁸F を含む。この群の中で、診断目的では¹²⁵Iが最も適さず、¹²⁴I及び¹³¹Iの方がより好ましく、一方臨床使用については¹²³Iが最も好ましい。従って好ましい実施態様において、式 (1)の化合物のX は、¹²³Iである。放射標識は、通常の方法で該化合物に組込まれる。 X が放射性ハロゲン置換基である場合は、式(1)の化合物は、高い比放射能の担体不添加の化合物であることが好ましい。別の言い方をすると、好ましい実施態様において、放射性¹²³Iの濃度は、比放射能を高めるために、該化合物に含まれたすべてのヨウ素又はヨウ素塩の源に比例してできるだけ高くなる。式(1)のR₁は、水素、ヒドロキシル又はフッ素置換基であり、かつR₂は、水素又はフッ素置換基である。糖残基のC-2'位に水素以外のR₁又はR₂置換基を有する式(1)の化合物は、ほとんどのC-2'未置換ピリミジンヌクレオシドのグリコシドC -N 結合を開裂するピリミジンホスホリラーゼに対しより安定であることがわかっている。例えば、グリコシド結合の開裂に抵抗性があり、失活をもたらす、2' - リボフルオロR₂- 置換基（J.R.Mercerらの論文、J.Med.Chem．、30:670頁(198 7)）、2'- アラビノフルオロR₁- 置換基（C.Lopez らの論文、Antimicrob．Agen ts Chemother．、17:803頁(1980)；J.A.Codereらの論文、J.Med.Chem．、26:114 9 頁(1983)）又は2'- アラビノヒドロキシルR₁- 置換基（M.J.Robinsらの論文、 J.Med.Chem．、34: 2275頁(1991)；N.K.Ayusi らの論文、Mol.Pharmacol.、31:4 22頁(1987)；T.C.Chouらの論文、Antimicrob.Agents Chemother.、31:1355頁(19 87)）が公知である。更に式(1)において、R₃は、水素、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクロカルボニル、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、3-7Cシクロアルキルカルボニル、及び炭素原子１〜８個の直鎖又は分枝した鎖のアルキルカルボニルからなる群から選択された置換基である。同様にR₄は、水素、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクロカルボニル、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、3-7Cシクロアルキルカルボニル、及び炭素原子１〜８個の直鎖又は分枝した鎖のアルキルカルボニルからなる群から選択された置換基である。R₃及びR₄が両方とも水素である場合、親化合物が形成される。R₃、R₄又は両方が水素以外である場合、誘導化合物が形成される。R₃及びR₄の少なくとも一方が水素であることが好ましく、下記の式(1)の好ましい実施態様において示されるようにR₄が水素であることが好ましい。式(1)のR₃が1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニルであり、かつR₄ が水素である場合は、R₃はケミカルデリバリーシステム(CDS)又はCDS 基とみなされ、より親油性の高い誘導化合物が形成される。CDS 誘導体は、血液- 脳関門 (BBB)の通過、並びに形質導入又はトランスフェクションされた脳細胞又は組織での局在化を増強する能力を有す。GCV のようなピリミジンヌクレオシド又は非環状ヌクレオシドは、その極性のために、BBB を容易には通過しない。式(1)のヌクレオシドの親油性の増加は、その抗ウイルス特性を維持したままで、脳での局在を増強する実行可能な方法である。親油性医薬品の設計に現在使用される比較的優れた方法のひとつは、ジヒドロピリジン←→ピリジニウム塩のケミカルデリバリーシステム(CDS)である（N.Bodor らの論文、Science、214:1370頁(1981) ）。この脳を標的とした概念は、親油性の1-メチル-1,4- ジヒドロピリジルプロドラッグ化基(promoiety)の、容易に加水分解されるエステル又はアミド結合を介しての、医薬分子への結合に関連している。式(1)のR₃が3'-[O-(1- メチル-1, 4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル)]のケミカルデリバリーシステム(CDS)であり、かつR₄が水素である化合物は、さらに容易にBBB を通過し、その後脳組織において、NAD←→NADH酸化還元システムに類似した方法により酸化される。生じるピリジニウム塩は、非常に極性が高く、このことは大脳での捕捉において、脳組織中濃度の上昇及び飽和をもたらしている。末梢血のあらゆる酸化生成物は迅速に消失するので、血液からのクリアランスは容易である。捕捉されたピリジニウム塩のエステル結合は加水分解され、R₃及びR₄置換基が水素であり、かつR₁及びR₂置換基が上記に定義されたものであり、酸化されたプロドラッグ化基がトリゴネリンであるような、式(1)の親化合物を放出する。R₄が水素である式(1)の化合物は、代謝により捕捉され、喪失が阻止されるように選択された、形質導入された組織又は細胞において生成された、ウイルスによってコードされた酵素によって、選択的にリン酸化されて5'- 一リン酸誘導体となることが所望である、遊離の5'- ヒドロキシル基を有する。従って、R₃置換基としてCDS 基を含むヌクレオシドは、親油性が増大し、かつ細胞集団を浸潤する能力が強化される。同じくR₃置換基としてCDS 基を含むヌクレオシドは、前述の追加の極性による捕捉効果に加え、発現タンパク質と該化合物の選択的相互作用の結果選択的捕捉が生じるという利点がある。様々な他の基も、このヌクレオシドに付加することができ、親油性及び組織浸潤性を強化する。例えば、炭素原子７〜８個までのアルコキシ鎖のエステル化を用いることができる。前述の式(1)に含まれる様々な化合物において、外来遺伝子がHSV-TKを発現する場合には、下記の化合物が最も好ましいことがわかっている：IVDU、IVDU-CDS 、IVFRU、IVFRU-CDS、IVFAU、IVFAU-CDS、IVAU及びIVAU-CDSである。これらの好ましい化合物は全て、式(1)を有し、かつ下記の置換基を含んでいる。更に、これらの好ましい化合物は全て、診断及び造影において使用される場合は、前述のようにX はヨウ素であり、好ましくは¹²³Iである。好ましい化合物の他の置換基は各々、下記のものである： IVDUは、R₁は水素、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素； IVDU-CDSは、R₁は水素、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素； IVFRU は、R₁は水素、R₂はフッ素、R₃は水素、及びR₄は水素； IVFRU-CDS は、R₁は水素、R₂はフッ素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3 - カルボニル、及びR₄は水素； IVFAU は、R₁はフッ素、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素； IVFAU-CDS は、R₁はフッ素、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3 - カルボニル、及びR₄は水素； IVAUは、R₁はヒドロキシル、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素； IVAU-CDSは、R₁はヒドロキシル、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素である。これらの化合物において、より安定性の高い化合物が使用されることが好ましい。例えば親化合物において、IVDUは、 IVFRU、IVFAU 及びIVAUよりも安定でないことがわかっている。しかし、IVDUは、IVDU-CDSとして安定性を増すこともわかっている。 R₃はCDS である誘導化合物を除いた、R₄が水素であるような式(1)の親化合物及び誘導化合物は全て、不活性溶媒中における、式(2)の5'- ヨウ化ウラシルヌクレオシド：（式中、R₁、R₂及びR₃は、先に定義したものである。）を、式(3)の(E)-1-(トリ -n- ブチルスタンニル)-2-(トリメチルシリル)エテンと：好ましくは式(4)の適当な交差カップリング触媒の存在下で反応することによって調製し：［（Ｐｈ）₃Ｐ］₂Ｐｄ（II）Ｃｌ₂ 式(4) この反応はテトラヒドロフランのような不活性溶媒中で（通常50℃）反応が進行し、式(5)の(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)-2'- デオキシウリジン又は- アラビノウリジン化合物へと転換する：（式中、R₁、R₂及びR₃は、先に定義したものである。）。式(5)の化合物（式中、R₁、R₂及びR₃は、先に定義したものである。）の、求電子ハロゲン化は、式(6 )のハロゲン化試薬を用い：Ｘ−Ｙ式(6) （式中、X は先に定義したものであり、かつY は、ヨウ素、ホウ素、塩素、フッ素、アセトキシ及びトリフルオロメトキシからなる群から選択される。）、乾燥アセトニトリルのような不活性溶媒中で反応を進行し（通常25℃）、式(7)の生成物へと転換する：（式中、X、R₁、R₂及びR₃は、先に定義したものである。）。式(1)の誘導化合物（式中R₃はCDS で、R₄は水素）は、式(8)の化合物：（式中R₁及びR₂は先に定義したものである。）の、アセトンのような不活性溶媒中における（好ましくは灌流温度）、ヨードメタン又はブロモメタンによる四級化によって、式(9)の化合物：（式中R₁及びR₂は先に定義したものである。）に転換することで調製することができる。式(9)の化合物（式中R₁及びR₂は先に定義したものである。）の求電子ハロゲン化反応は、式(10)のハロゲン化試薬：Ｘ−Ｙ式(10) （式中、X は先に定義したものであり、かつY は、ヨウ素、ホウ素、塩素、フッ素からなる群から選択される。）を用いて、アセトニトリルのような不活性溶媒中で反応を進行し（通常25℃）、式(11)の化合物：（式中、X、R₁及びR₂は、先に定義したものである。）へと転換する。式(11)の化合物の還元は、適当な不活性２相溶媒系（好ましくは水- 酢酸エチル、1:1，v /v）の中、炭酸水素ナトリウムのような適当な塩基の存在下で、好ましくは亜ジチオン酸ナトリウムのような適当な還元剤を用い、好ましくは温度25℃で、式(1 2)の化合物：（式中、X、R₁及びR₂は、先に定義したものである。）へと転換する。式(1)の化合物調製の出発材料、即ち式(2)の5-ヨウ化ウラシルヌクレオシド、式(3)の(E)-1-(トリ-n- ブチルスタンニル)-2-(トリメチルシリル)エテン、式(4 )のビス（トリフェニルホスフィン）塩化パラジウム(II)、及び式(6)の求電子ハロゲン化試薬は、いずれも公知であるか、もしくはそれ自身公知である方法によって出発材料から都合よく調製される。式(1)の化合物は全て、非経口的に、好ましくは注射により、もしくは経口により投与することができる。液体担体として、例えば水、エチルアルコール又はポリエチレングリコールのような担体、リポソーム、もしくは他の医薬として許容できる溶媒又は分散液を、使用することができる。経口投与においては、固形又は液体の担体を使用することができる。一般的に使用される固形担体のひとつは、アラビアゴムであるが、他のものも適している。医学診断の熟練者は、同様の標識を有する他の化合物に関する経験を基に、ヒトでの使用を含む具体的な用途のための、前述の標識化合物の有効量を算出することができるであろう。しかし一般に、診断に使用する限りは、対象へのあらゆる毒性を避けるために、いずれの標識化合物も少量でなければならない。本発明の第二の実施態様において、本発明は、放射標識された化合物の放射線療法での使用、並びにこの放射標識化合物を使用する放射線療法の方法からなる。この方法及び使用は、タンパク質を発現する外来遺伝子が導入された細胞集団に関連している。この方法は、放射標識化合物が、該タンパク質と選択的に相互作用し、放射標識生成物を生成するために、この放射標識化合物の放射線療法の有効量を、該細胞に投与する工程からなる。この放射標識生成物は、所望の治療機能又は効果を達成もしくは執行する。この放射標識化合物は、該外来遺伝子によりタンパク質が発現された細胞内で、放射標識生成物が捕捉されるように、該タンパク質と、選択的に相互作用するように選択される。この放射線療法は、診断法又は化学療法と共に使用することができるか、もしくは個別に使用することができる。前述の診断の方法及び使用に関する、細胞集団、外来遺伝子、化合物及び生成物、並びに各好ましい実施態様について提供された、考察、パラメーター、特性、調製及び投与の方法、並びに他の特性は全て、下記に特記するものを除いて、放射線療法の方法及び使用において適用可能である。この放射線療法の方法及び使用の細胞集団は、診断の方法及び使用において示された細胞集団と同型であることができる。特に、細胞集団の少なくとも一部は、活発にDNA を合成していることが好ましい。従って放射線療法の方法及び使用に適用できるほとんどの細胞は、癌性細胞又は組織、もしくは他の細胞増殖状態である。この放射線療法の方法及び使用において、化合物及び生成物は、前述の診断法の好ましい実施態様と同じく、放射標識されている。従って、放射標識されている、式(1)のX 置換基も、いずれか適当な放射性ハロゲン置換基である。適した放射性ハロゲン置換基は、¹²³I、¹²⁵I及び¹³¹Iを含む。放射線療法のためには、これらの群の中で、¹³¹Iが最も好ましい。¹²⁴I、⁷⁵Br、⁷⁶Br及び¹⁸F は、放射線療法にはあまり適さないことがわかっている。従って、放射線療法の方法及び使用の好ましい実施態様において、式(1)の化合物のX は、¹³¹Iである。更に診断の方法及び使用と同じく、式(1)の化合物は、高い比放射能の担体不添加の化合物であることが好ましい。医学の放射線療法の方法及び使用の熟練者は、同様の放射標識を有する他の化合物に関する経験を基に、ヒト又はヒト以外に適した、前述の放射標識化合物の有効量を算出することができるであろう。しかし前述のように、この放射標識化合物を診断に使用する限りは、細胞集団又は周辺組織への毒性を最小にするために、できる限り少い用量でなければならない。放射線療法を目的として該化合物を用いる場合は、該放射標識化合物の放射線療法に有効な用量を使用しなければならない。典型的には、治療を目的とする放射標識化合物の用量は、所望の放射線治療効果を達成するために、診断を目的として使用される用量よりも多い。癌性細胞に使用する場合は、所望の放射線治療効果は、該外来遺伝子によってタンパク質が発現されている細胞の分解によるであろう。前述のように、細胞集団への外来遺伝子の導入法では、該細胞集団の少なくとも一部が、活発にDNA を合成している場合に、この放射線療法の方法及び使用は、特に有用である。非増殖性細胞又は周辺組織は、該外来遺伝子を獲得せず、従ってこの放射標識化合物に対して非感受性でありつづけるであろう。その結果、全身毒性は、この放射標識化合物の使用においては認められない。本発明の第三の実施態様において、本発明は、化合物の化学療法での使用、並びにこの化合物を使用する化学療法の方法からなる。この化学療法の方法及び使用も、同じくタンパク質を発現する外来遺伝子が導入された細胞集団に関連している。この化学療法は、化合物が、該タンパク質と選択的に相互作用し、生成物を生成するために、該化合物の化学療法の有効量を、該細胞に投与する工程からなる。この化合物は、生成された生成物が、該外来遺伝子によってタンパク質が発現されている細胞に対し、細胞毒性又は細胞分裂抑制性であるように、該タンパク質と選択的に相互作用するように選択される。この化学療法は、診断法又は放射線療法と共に使用することができるか、もしくは個別に使用することができる。前述の診断の方法及び使用に関する、細胞集団、外来遺伝子、化合物及び生成物、並びに各好ましい実施態様について提供された、考察、パラメーター、特性、調製及び投与の方法、並びに他の特性は全て、下記に特記するものを除いて、化学療法の方法及び使用において適用可能である。前述の診断法及び放射線療法のように、この細胞集団の少なくとも一部は、活発にDNA を合成している組織であることが好ましい。従って化学療法の方法及び使用に適用できるほとんどの細胞は、癌性細胞又は組織、もしくは他の細胞増殖状態である。前述のように、生成物は、細胞毒性、又は分裂細胞に対して細胞増殖抑制性である。この化学療法の方法及び使用において、化合物も生成物も標識される必要はない。従って、化学療法の方法及び使用において、式(1)のX 置換基は、いずれか適当なハロゲン置換基である。適したハロゲン置換基は、ヨウ素、ホウ素、塩素及びフッ素である。化学療法のためには、これらの群の中でフッ素が、最も適さないハロゲン置換基である。この化学療法の方法及び使用の好ましい実施態様において、単純ヘルペスウイルス遺伝子、特にHSV-TKを発現する遺伝子を使用するが、その遺伝子によって発現されたタンパク質が、適当な化合物と共に、該細胞に細胞毒性又は細胞増殖抑制性であるような必要な生成物を生成することに適応する限りは、他の遺伝子も化学療法の方法及び使用のために使用することができる。例えば、GCV をリン酸化するタンパク質をコードしているヒトサイトメガロウイルス(HCMV)UL97遺伝子は、HCMV感染症の治療の可能性を提唱されている（E.Littler らの論文、Nature 、358:160 頁(1992)；V.Sullivanらの論文、Nature、358:162 頁(1992)）。これに加え、真核生物又は原核生物由来のチミジル酸シンターゼ(TS)、ポリメラーゼ又はシトシン脱アミノ酵素をコードしている遺伝子類の導入を利用することができる。医学の化学療法の方法及び使用の熟練者は、同様の類似の化合物に関する経験を基に、ヒト又はヒト以外に適した、前述の化合物の有効量を算出することができるであろう。前述のように、外来遺伝子は、活発にDNA を合成している細胞に導入することが好ましく、その結果非増殖性細胞又は周辺組織は、この外来遺伝子を獲得せず、従って化学療法化合物に対して非感受性でありつづける。その結果、全身毒性は、この化学療法化合物の使用においては認められない。更にGCV のような抗ウイルス薬を使用し、効果的腫瘍崩壊を生じるためには、癌性細胞のわすかに約10％がHSV-TKで形質導入される必要があることは公知である。この重要な知見は、形質導入されない細胞も死滅するという第三者効果のためである。この効果の機序は、完全には解明されてはいないが、この現象を説明するものとして、(i)連続性のウイルス感染；(ii)有糸分裂時に組込まれたHSV-TK遺伝子の導入；(iii)ギャップ結合又はアポートシス小胞による毒性のあるGCV-三リン酸の導入；(iv)免疫に関連した作用が挙げられる（S.Freeman らの論文、Cancer R es．、53: 5274頁(1993)；W.Roy Symtheらの論文、Cancer REs．、54: 2055頁(1 994)）。下記の限定を意図しない実施例は、本発明の化合物の製造のためのいくつかの選択された方法、更にin vitroでの物理化学的及び生物学的特性並びにin vitro での生体分布を説明する比較データ、並びに本発明の化合物を説明している画像データを例示している。調製法実施例１ (E)-5-(2- ヨウ化ビニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジン(IVFRU) （下記の実施例を表す図参照）乾燥THF(5ml)を溶媒とする5-ヨウ化-2'-フルオロ-2'-デオキシウリジン溶液(1 97mg,0.53mmol)に、ビス(トリフェニルホスフィン)塩化パラジウム(II)(37mg,0. 053mmol)及び(E)-1-(トリ-n- ブチルスタンニル)-2-(トリメチルシリル)エテン( 412mg,1.06mmol)を、50℃で撹拌しながら添加した。この反応混合物を、アルゴン雰囲気中で50℃で16時間攪拌し、その後のTLC 分析により、この反応が完了したことを確認した。この溶媒を真空で除去し、かつ得られた残渣を、溶離液としてMeOH-CH₂Cl₂(1:25,v/v)を用い、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチルで再結晶後、(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジンの白色固体（146mg、収率80％）を得た； mp．164-165 ℃;¹ H NMR(DMSO-d₆): δ0.08(s,9H,SiMe₃),3.64(m,1H,J_gem=9.9Hz,H-5'),3．86(m,1H，H-5"),3.89(d,1 H,J_3',4'=8.8Hz,H-4'),4.21(m,1H,J_3'f=24.2Hz,H- 3'),5.04(dd,1H,J_2F=53.3Hz, J_2',3'=3.8Hz,H-2'),5.43(t,1H,J_OH,3'=6.6Hz,C-3'OH，重水と交換),5.92(d,1H, J_1'F=17.0Hz,H-1'),6.52及び6.59(2d,1H，各J_trans=19.8Hz,CH=CHSiMe₃),8.33(s ,1H,ウラシルH-6),11.51(s,1H,NH，重水と交換)； C₁₄H₂₁FN₂O₅Si の正確な質量計算値：344.1204、実測値(HRMS)：344.1208(M⁺,2.2％)； C₁₄H₂₁FN₂O₅Si の分析計算値：C,48.82;H,6.15;N,8.13 ；実測値：C,48.68;H,6.16;N,7.87 該白色固体を(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジン(40mg,0.116mmol)を、アセトニトリル(2ml)に溶解し、次に一塩化ヨウ素(19mg,0.116mmol)を、25℃で攪拌しながら添加した。この反応混合物を25℃で 30分間攪拌し、TLC 分析により、この反応が完了したことを確認した。この溶媒を真空で除去し、かつ得られた残渣を、溶離液としてMeOH-CH₂Cl₂(7:93,v/v)を用い、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、メタノールで再結晶後、(E)-5-(2- ヨウ化ビニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジン(IVFRU)の白色固体（36mg、収率78％）を得た。 mp．108-110 ℃、¹ H NMR(DMSO-d₆): δ3.65(d,1H,J_gem=12Hz,H-5'),3.82-3.96(m,2H,H-4',H-5"),4.20(dd,1H,J_3',F=2 3Hz,J_2',3'=6Hz,H-3'),5.06(dd,1H,J_2',F=54Hz,J_2',3'=6Hz,H-2'),5.47(brs,1H, C-5'OH,重水と交換),5.72(brs,1H,C-3'OH，重水と交換),5.92(d,1H,J_1'F=18Hz,H -1'),7.09(d,1H,J_trans=16Hz,CH=CHI),7.20(d,1H,J_trans=16Hz,CH =CHI),8.23(s ,1H,ウラシルH-6)，11.6(brs,1H,NH，重水と交換)； C₁₁H₁₂FIN₂O₅の正確な質量計算値：397.9775、実測値(HRMS)：397.9773(M⁺,3.6 ％)； C₁₁H₁₂FIN₂O₅の分析計算値：C,33.19;H,3.04;N,7.04 ；実測値：C,33.83;H,3.32;N,7.00。実施例１の図実施例２実施例１で使用した方法と類似の方法で、関連化合物(E)-5-(2- ヨウ化ビニル )-2'- フルオロ-2'-デオキシアラビノウリジン(IVFAU)、(E)-5-(2-ヨウ化ビニル )-アラビノウリジン(IVAU)、及び(E)-5-(2-ヨウ化ビニル)-2'- デオキシウリジン(IVDU)を調製し、下記の実施例２の図に示されたように、実施例１の(E)-5-ヨウ化-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジンの代わりに、式(2)の(E)-5-ヨウ化ウラシルヌクレオシドを等量を用いて、IVFAU、IVAU及びIVDUを得、融点は各々176-1 78 ℃、171-175 ℃及び166-170 ℃であった。実施例２の図実施例３ [¹³¹I]-(E)-5-(2-ヨウ化ビニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジン｛[¹³¹I]IV FRU｝の担体を添加した合成（下記の実施例を説明する図参照） 0.1N NaOH(5 μl)を溶媒とする[¹³¹I]-NaI(74MBq)溶液を、ウィートン(Wheato n)バイアルに入れ、かつ酢酸- アセトニトリル(1:4,v/v,10 μl)を溶媒とするIC I(124 μg,0.765 μmol)溶液を添加した。その後酢酸- アセトニトリル(1:4,v/v ,10 μl)を溶媒とする(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジン(500μg,1.53μmol)溶液を、先のウィートンバイアル内容物に添加し、かつ反応を25℃で15分間継続した。この生成物を、ワットマン・パーチシル(Partisil)M9 10/25 C8カラムを用いる分取逆相HPLCにより、無勾配の溶離液アセトニトリル- 水(70:30,V/V)を流速1.5ml ／分で流して、精製した。この生成物[¹³¹I]-IVFRUの保持時間はこの条件で11.76 分であったが、未反応の(E)-5- (2- トリメチルシリルビニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジンの保持時間は 24.19 分であった。この方法を用いて、[¹³¹I]-(E)-5-(2-ヨウ化ビニル)-2'-フルオロ-2'-デオキシウリジン（63Mbq、放射化学的収率85％、放射化学的純度＞9 8％、比放射能252GBq/mmol）が調製され、これは様々なクロマトグラフィー条件下で非標識IVFRU の基準試料について認められたクロマトグラフィー保持時間に対し、同等の値を示した。実施例３の図実施例４ [¹³¹I]-(E)-5-(2-ヨウ化ビニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジン｛[¹³¹I]IV FRU｝の担体を添加しない合成（下記の実施例を説明する図参照）ウィートンバイアル中の0.1N NaOH(5 μl)を溶媒とする[¹³¹I]-NaI(11.3MBq) 溶液に、酢酸- アセトニトリル(1:4,v/v,10 μl)を溶媒とする(E)-5-(2- トリメチルシリル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジン(100μg,0.306 μmol)溶液を添加した。その後酢酸- アセトニトリル(1:4,v/v,10 μl)を溶媒とするN-クロロスクシンイミド(100μg,0.749 μmol)溶液を添加し、かつ反応を25℃で30分間継続し、水(10 μl)を溶媒とするチオ硫酸ナトリウム(100μg,0.632 μmol)を添加して反応を停止した。この反応混合物を、実施例３の方法を用いて、HPLCで分離し、担体非添加の生成物として、[¹³¹I]-(E)-5-(2-ヨウ化ビニル)-2'- フルオロ-2 '-デオキシウリジン（8.0Mbq、放射化学的収率71％、放射化学的純度＞98％、比放射能5.29TBq/mmol）を得た。実施例４の図実施例５実施例３で使用した方法と類似の方法で、関連化合物[¹²³I]-、[¹²⁴I]-、[¹²⁵ I]- 及び[¹³¹I]- 標識されたIVFAU、IVAU及びIVDUを調製し、実施例３の(E)-5-( 2-トリメチルシリルビニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジンの代わりに、式 (5)の(E)-5-(2-トリメチルシリルビニル)-ウラシルヌクレオシドを等量を用いて、[¹²³I]-、[¹²⁴I]-、[¹²⁵I]- 及び[¹³¹I]- 標識されたIVFAU、IVAU及びIVDUを得た。例えば、この方法を用いて、[¹²⁵I]- IVDUを調製した（放射化学的収率59 ％、放射化学的純度＞98％、比放射能12.7Gbq/mmol）。実施例５の図実施例６ (E)-5-(2- ヨウ化ビニル)-3'-O-(1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジン(IVFUR-CDS) （下記の実施例を表す図参照）アセトン(3ml)を溶媒とする(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)-3'-O-(3-ピリジルカルボニル)-2'- フルオロ-2'-デオキシウリジン溶液(26mg,0.058mmol)に、ヨウ化メチル(165mg,1.16mmol)を添加し、かつこの反応混合物を、16時間灌流加熱した。この溶媒を真空で除去し、かつ得られた残渣をエーテルで摩砕し（３× 10ml）、(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)-3'-O-(1-メチルピリジニウム-3- カルボニル)-2'- フルオロ-2'-ヨウ化デオキシウリジンの黄色結晶(31mg,90％) を得た。 mp．172-174 ℃、¹ H NMR(DMSO-d₆): δ0.1(s,9H,SiMe₃),3.7-3.9(m,2H,H- 5'),4.44(brs,4H,NCH₃,H-4'),5.44(t,1H,J_OH,5' =3Hz,C-5'OH、重水と交換)，5.55-5.58(m,1H,H-3'),5.58-5.80(m,1H,H-2') ,6.12(dd,1H,J_1.F =17.0,J _1',2'=1.8Hz,H-1'),6.60(s,2H,CH=CHTMS),8.22(s,1H ，ウラシルH-6),8.29(dd,1H,J_4,5=7.6,J_5,6=5.0Hz,ピリジニウム,H-5)，9.06(d, 1H,J_4,5=7.6Hz,ピリジニウム,H- 4),9.23(d,1H,J_5,6=5.0Hz,ピリジニウム,H-6), 9.66(s,1H,ピリジニウム,H-2),11．62(s,1H,NH，重水と交換)； C₂₁H₂₇FIN₃O₆Si・1/2H₂Oの分析計算値：C,42.00;H,4.71;N,6.99 ；実測値：C,42.37;H,4.57;N,6.57。アセトニトリル(1ml)を溶媒とする(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)-3'-O- (1-メチルピリジニウム-3- カルボニル)-2'- フルオロ-2'-ヨウ化デオキシウリジン(6mg,0.0101mmol)溶液に、一塩化ヨウ素(1.7mg,0.01mmol)を添加し、前述の反応で調製した直後に、この反応混合物を、25℃で15分間攪拌した。この溶媒を真空で除去し、かつ黄色固形物の(E)-5-(2- ヨウ化ビニル)-3'-O-(1-メチルピリジニウム-3- カルボニル)-2'- フルオロ-2'-ヨウ化デオキシウリジンを得、これは更に精製すること無くその後の反応に用いた。この黄色固形物を、水- 酢酸エチル（各々1ml）の２相溶媒系に溶解し、亜ジオン酸ナトリウム(10mg,0.057mmol )及び炭酸水素ナトリウム(4mg,0.048mmol)を添加し、かつ反応を25℃で攪拌しながら、15分間行った。酢酸エチル分画を、水(1ml)で洗浄し、かつこの酢酸エチル溶液を乾燥した(Na₂SO₄)。この溶媒を真空で除去し、生成物を、短い中性酸化アルミニウムカラムを用いて、溶離液としてクロロホルム- メタノール(90:10,v /v)を用いて精製し、メタノールで再結晶した後、黄色固形物の(E)-5-(2- ヨウ化ビニル)-3'-O-(1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル)-2'- フルオロ- 2'- デオキシウリジン(IVFRU-CDS,3mg,59 ％)を得た。 m.p.131-133 ℃、¹ H NMR(CDCl₃): δ3.02(s,3H,NCH₃),3.11(brs,2H,ジヒドロピリジル,H-4),3.86及び4.10(2d,1H, 各々J_gem=12.5Hz,H-5'),4.27(d,1H,J_3',4'=7.5Hz,H-4'),4.87(dt,1H,J_5,6=8.0,J_4,5 =3.8Hz，ジヒドロピリジル，H-5),5.18(m,1H,J_2',F=51Hz，H-2'),5.32(m,1H, H-3'),5.68(d,1H,J_5,6=8.0Hz，ジヒドロピリジル，H-6),6.05（d,1H,J_1,F=16Hz, H-H-1'),7.06(d,1H,J_trans=15Hz,CH=CHI),7.11(s,1H，ジヒドロピリジル,H-2),7 .40(d,1H,J_trans=15Hz,CH=CHI),8.12(s,1H,ウラシルH-6)； C₁₈H₁₉FIN₃O₆・H₂O の分析計算値：C,40.24;H,3.94;N,7.82 ；実測値：C,40．52;H,4.09;N,7.61。実施例６の図実施例７関連化合物(E)-5-(2- ヨウ化ビニル)-3'-O-(1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル -3- カルボニル)-2'- フルオロ-2'- デオキシアラビノウリジン(IVFAU-CDS)及び (E)-5-(2- ヨウ化ビニル)-3'-O-(1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル)-2'- デオキシウリジン(IVDU-CDS)は、実施例６と類似の方法で、実施例６の (E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)-3'-O-(3-ピリジルカルボニル)-2'- フルオロ- 2'- デオキシウリジンの代わりに、式(9)の(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)ウラシルヌクレオシドを等量使用して調製し、各々融点が148-152 ℃及び1 65-168 ℃である、IVFAU-CDS 及びIVDU-CDSを得た。実施例７の図実施例８ [¹³¹I]-(E)-5-(2-ヨウ化ビニル)-3'-O-(1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル)-2'- フルオロ-2'- デオキシウリジン｛[¹³¹I]-IVFRU-CDS｝の担体を添加した合成（下記の実施例を表す図参照）アセトニトリル(100μl)を溶媒とする(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)-3' -O-(1-メチルピリジニウム-3- カルボニル)-2'- フルオロ-2'- ホウ化デオキシウリジン(1mg,0.00184mmol)溶液に、アセトニトリル(20 μl)を溶媒とするICI(3 0μg,0.185 μmol)及び[¹³¹I]-NaI(26.8Mbq)の攪拌溶液に一気に添加した。この反応を、25℃で15分間進行し、その溶媒を窒素ガス流上で蒸発させ、かつ得られた残渣を、脱気した水(200μl)及び酢酸エチル(200μl)に溶解した。亜ジチオン酸ナトリウム(4mg,0.0229mmol)及び炭酸水素ナトリウム(2mg,0.0238mmol)を添加し、かつ25℃で20分間攪拌して、反応を進行させた。次に酢酸エチル相を分離し、かつその溶媒を窒素流上で蒸発させた。得られた残渣を、メタノールに溶解し、かつワットマンパーチシルM9 10/25 C8 カラムを用いて、分取逆相HPKLC により精製した。アセトニトリル：水(60:40,v/v)の無勾配溶離液を、2.0ml ／分で流して、純粋な[¹³¹I]-(E)-5-(2-ヨウ化ビニル)-3'-O-(1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル)-2'- フルオロ- 2'- デオキシウリジン｛[¹³¹I]-IVFRU -CDS｝を得、これは、保持時間が19.54 分であり、分離された放射化学的収率が 14％(3.8Mbq)で、比放射能が4.3Gbq/mmol で、並びにHPCL精製後の放射化学的純度は98％以上であった。実施例８の図実施例９関連化合物[¹²³I]-、[¹²⁴I]-、[¹²⁵I]- 及び[¹³¹I]- 標識されたIVFAU-CDS、I VAU-CDS及びIVDU-CDSを、実施例８と類似の方法で、実施例８の(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル)-3'-O-(1-メチルピリジニウム-3- カルボニル)-2'- フルオロ- 2'- ホウ化デオキシウリジンの代わりに、式(10)の(E)-5-(2- トリメチルシリルビニル）ウラシルヌクレオシドを等量使用して調製し、[¹²³I]-、[¹²⁴I]-、 [¹²⁵I]- 及び[¹³¹I]- 標識されたIVFAU-CDS、IVAU-CDS及びIVDU-CDSを得た。例えば、[¹³¹I]- IVDU-CDSを、この方法で調製した（放射化学的収率59％、放射化学的純度が98％以上、比放射能が12.7Gbq/mmol）。実施例９の図本発明関連の生物学的評価実施例10 分配係数及び擬一次酸化速度定数被験化合物の分配を、n-オクタノール及び水の未飽和混合物(1:1,v/v)間で測定し、分配係数(log P)を計算した。分析方法は、これらの２相を遠心分離した後に、改良された浸透フラスコ法及び紫外線(UV)分光定量測定法を行った。分配前のオクタノール相の被験化合物濃度は、0.5mM であった。IVDU-CDS及びIVFRU- CDS の定量UV分析のために、ジヒドロピリジン発色団（λmax=360nm）を用い、結果を表１に示した。IVDU-CDS及びIVFRU-CDS のlog P 値は、IVDU(log P=1.10) 及びIVFRU(log P=1.21)の値よりも、有意に高かった。 IVDU-CDS及びIVFRU-CDS の酸化の擬一次速度定数及び半減期を、50％マウス血液、20％マウス脳ホモジネート及び20％マウス肝ホモジネートについて測定した。DMSO(10Mm)を溶媒とする被験化合物溶液を、各マトリックスに添加し、かつ37 ℃でインキュベートした。被験化合物添加後様々な時間経過で、アリコートを分取し、アセトニトリル(100μl)に添加した。これらの試料を、迅速に遠心分離し、かつその上清を定量的逆相HPLCで分析した。1-メチル-1,4- ジヒドロピリジン-C DSの消失速度は、360nm でのUV測定によって決定した。結果を表１に示し、これは、選択された生体組織及び体液において、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジンのプロドラッグ化基が、ピリジニウム塩へと容易に酸化されることを示している。実施例11 ヘルペスウイルスに対するin vitroでの活性単純ヘルペスウイルスタイプ１(HSV-1)及び単純ヘルペスウイルスタイプ２(HS V-2)に対する選択されたいくつかの被験化合物の、in vitroにおける抗ウイルス活性を、培養したヒト包皮繊維芽細胞(HFF)を用いて、細胞変性効果(CPE)阻害アッセイで測定した。水痘帯状疱疹ヘルペスウイルス(VZV)に対する抗ウイルス活性は、プラーク減数アッセイで測定した。細胞毒性試験には、非感染HFF 細胞を用いる細胞増殖アッセイを行った。これらの結果は、本被験化合物が、２種のヘルペスウイルスに対する強力な抗ウイルス性化合物であること、並びにこれらの被験化合物の宿主細胞への毒性が非常に小さいことを示している。遺伝子治療の研究のためのKBALB 細胞モデル本試験に用いたKBALB 肉腫モデルは、野生型KBALB 細胞を、複製能のない同種指向性レトロウイルスを含むモロニーマウス白血病ウイルス(MMLV)のプロデューサー細胞の上澄みに暴露することによって得た。このKBALB-STK 細胞系を、HSV- 1 TK及びネオマイシン耐性遺伝子を有するベクターで形質導入した一方で、KBAL B-LNL 細胞を、ネオマイシン耐性遺伝子のみを有するベクターで形質導入した。これらの形質導入された細胞系を、抗生物質G-418 含有培地で培養し、ネオマイシン耐性遺伝子を発現した細胞のみを選択した。これらの易増殖性肉腫は、広く特徴づけられていて、複製能のあるレトロウイルス粒子は産生しない（S.Fr eeman らの論文、Cancer Res．、53:5274 頁(1993)）。実施例12 in vitroでの形質導入された又はされていない肉腫細胞系における放射性医薬品の細胞取込み KBALB-STK、KBALB-LNL 又は野生型KBALB 細胞を、24ウェルの培養プレートで密集するまで増殖した。[¹²⁵I]-IVDU（比放射能=12Gbq/mmol）、[¹²⁵I]-IVFRU（比放射能=11Gbq/mmol）、[¹³¹I]-IVDU-CDS（比放射能=2.8Gbq/mmol）又は[¹³¹I] -IVFRU-CDS（比放射能=4.3Gbq/mmol）を、生理食塩水溶液100 μl を含む各ウェルに添加し、37℃でインキュベートした。被験化合物への暴露後、様々な時点で、上澄みを除去し、細胞を生理食塩水で洗浄し、その後接着細胞を、トリプシン処理して除去した。細胞の取込みは、ベックマン8000γ線測定器を用いて、γ線を測定した。図１及び２に示された結果は、KBALB-LNL 又はKBALB 細胞と比較して、HSV-1 TKを発現しているKABALB-STK細胞において、[¹²⁵I]-IVDU 及び[¹²⁵I] -IVFRUの選択的取込みが生じたことを示した。実施例13 KBALB 又はKABALB-STK腫瘍形成マウスにおける[¹³¹I]-IVFRUの生体分布 KBALB 又はKABALB-STK細胞（1 ×10⁵細胞）を、雄のBalb-cマウスの側腹部に皮下注射した。注射後14日で、触知可能な腫瘍が形成された。腫瘍を有する各々のマウスに、[¹³¹I]-IVFRU(370KBq,比放射能59Gbq/mmol)を、尾静脈から注射した。各時間間隔で、動物３匹を屠殺し解剖した。興味深い選択された組織での放射能取込みを、ベックマン8000γ線測定器を用いて測定した。組織の取込みは、時間に対する組織g 当たりの投与用量の百分率で表し、図３及び４に示した。両方の腫瘍モデルについて、腫瘍対血液の比を算出し、図５に示した。HSV-1 TKを発現している腫瘍における優先的腫瘍取込みが明らかであり、注射の８時間後には、KBALB-STK 腫瘍形成動物では、腫瘍／血液の最大比が約３倍であった。対照的に、野生型KBALB 腫瘍形成動物では、あらゆる時点でKBALB-STK 腫瘍と比べて、腫瘍の放射能は有意に低く、かつ腫瘍／血液比も非常に低いことが認められた。実施例14 KBALB-STK 腫瘍のシンチグラフィー造影 KBALB-STLK細胞（1 ×10⁵細胞）を、12匹のBalb-cマウスの側腹部に皮下注射した。14日目に、注射した全動物において、造影に適した、触知可能な腫瘍が形成され、この時点で腫瘍の直径は、約10mmであった。[¹³¹I]-IVFRU 3.7Mbq（比放射能=252Gbq/mmol）を尾静脈から注射した後、静止画像(static image)を得た。Searleγカメラ（シンチビュー(Scintiview)社）を用い、ピンホールコリメーターの下側に、動物をうつ伏せにし、データーをADACコンピューター(DPS3300) で処理した。画像は、15分間にわたって、256 ×256 マトリックスを用いて得た。最初の画像を得た後、動物群(n=6)に、腹腔内注射(ip)により、ガンシクロビル(100mg/kg)を、１日１回、７日間連続して投与した。対照群(n=6)には、毎日生理食塩水を注射した。４日後、これらの動物に、[¹³¹I]-IVFRUを前述の方法で投与し、かつ前述のものと同一の獲得(acquisition)プロトコールを用いて、造影を行った。投与群の腫瘍の大きさは、平均5mm 未満に縮小したことが注目された。７日間のガンシクロビル投与後、KBALB-STK 腫瘍は、投与した動物全てにおいて、完全に退縮していた。生理食塩水を投与した対照動物の腫瘍は、実験終了時まで増殖を続けた。図６のシンチグラムは、ガンシクロビル投与前、[¹³¹I]-I VFRU投与後８時間の画像で、[¹³¹I]-IVFRUが、HSV-1 TKを発現しているKABALB-S TK腫瘍に選択的に取り込まれたことを示している。図７のシンチグラムは、同じ動物の、ガンシクロビルを４日間投与した後の、[¹³¹I]-IVFRU投与後８時間の画像である。図７に示されたシンチグラム像では、放射能の大部分が、膀胱に存在し、これは、退縮した腫瘍残部は、放射能を比較的失っているが、マウスからは排泄されていないためである。独占的所有権又は特権が請求された本発明の実施態様は下記のものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩ // Ａ６１Ｋ 38/45 Ａ６１Ｋ 49/02 Ｃ 48/00 37/52 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ウィーブレナードアイカナダアルバータティ６ジー０ダブリュー６エドモントン 85 アベニュー 11022 (72)発明者モーリンケヴィンカナダアルバータティ５エル１イー４エドモントン 128 ストリート 12815

Claims

【特許請求の範囲】１．細胞集団全域の外来遺伝子導入を追跡するために、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と標識化合物が選択的に相互作用し、標識生成物を生成し、かつその後この標識生成物を検出するように、有効量の標識化合物を細胞に投与することによる、該標識化合物の使用であり、ここにおいて、該標識生成物が、該外来遺伝子によってタンパク質が発現された細胞内で捕捉されるために、この標識化合物が、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用するように選択される使用。２．下記の工程を含む、細胞集団全域の外来遺伝子の導入の追跡法： (a) 標識化合物が、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用し、標識生成物を生成するように、有効量の標識化合物を細胞に投与する工程；及び (b) 前記標識生成物を検出する工程であり；ここにおいて、該標識生成物が、該外来遺伝子によってタンパク質が発現された細胞内で捕捉されるように、該標識化合物が、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用するように選択された方法。３．前記外来遺伝子によって発現されたタンパク質が、該細胞内には天然には生じない、請求項２記載の方法。４．前記標識化合物が、核医学造影法を用い検出することができる放射標識生成物を生成するために、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と相互作用する、放射標識化合物である、請求項３記載の方法。５．前記外来遺伝子が、真核又は原核細胞から選択された遺伝子である、請求項４記載の方法。６．前記外来遺伝子が、ウイルスから選択される、請求項４記載の方法。７．前記外来遺伝子が、単純ヘルペスウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、水痘帯状疱疹ヘルペスウイルス及びエプスタイン・バールウイルスからなるウイルス群から選択される、請求項６記載の方法。８．前記外来遺伝子が、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼを発現する遺伝子である、請求項７記載の方法。９．前記放射標識化合物が、下記式を有する化合物又はその医薬として許容できる塩である、請求項８記載の方法：式（式中、X は、放射性ハロゲン置換基で、R₁は、水素、ヒドロキシル又はフッ素置換基で、R₂は、水素又はフッ素置換基で、R₃は、水素、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクロカルボニル、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、3-7Cシクロアルキルカルボニル、及び炭素原子１〜８個の直鎖又は分枝した鎖のアルキルカルボニルからなる群から選択された置換基であり、並びにR₄は、水素、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクロカルボニル、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、 3-7Cシクロアルキルカルボニル、及び炭素原子１〜８個の直鎖又は分枝した鎖のアルキルカルボニルからなる群から選択された置換基である。）。 10．前記X が、¹²³I、¹²⁴I、¹³¹I、⁷⁵Br、⁷⁶Br及び¹⁸F から選択された放射性ハロゲン置換基である、請求項９記載の方法。 11．前記X が¹²³Iである、請求項10記載の方法。 12．前記X が、¹²³I、¹²⁴I、及び¹³¹Iからなる群から選択された放射性ハロゲン置換基である、請求項９記載の方法。 13．前記R₁は水素、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項12記載の方法。 14．前記X が¹²³Iである、請求項13記載の方法。 15．前記R₁は水素、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素である、請求項12記載の方法。 16．前記X が、¹²³Iである、請求項15記載の方法。 17．前記R₁は水素、R₂はフッ素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項12記載の方法。 18．前記X が¹²³Iである、請求項17記載の方法。 19．前記R₁は水素、R₂はフッ素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素である、請求項12記載の方法。 20．前記X が¹²³Iである、請求項19記載の方法。 21．前記R₁はフッ素、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項12記載の方法。 22．前記X が¹²³Iである、請求項21記載の方法。 23．前記R₁はフッ素、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素である、請求項12記載の方法。 24．前記X が¹²³Iである、請求項23記載の方法。 25．前記R₁はヒドロキシル、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項 12記載の方法。 26．前記X が¹²³Iである、請求項25記載の方法。 27．前記R₁はヒドロキシル、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3 - カルボニル、及びR₄は水素である、請求項12記載の方法。 28．前記X が¹²³Iである、請求項27記載の方法。 29．前記R₃及びR₄の少なくとも一方が水素である、請求項９記載の方法。 30．前記R₄が水素である、請求項９記載の方法。 31．外来遺伝子が導入される細胞集団に関連している放射線療法における放射標識化合物の使用で、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と該放射標識化合物が選択的に相互作用し、放射標識生成物を生成するように、放射線療法の有効量の放射標識化合物を細胞に投与することによる使用で、ここにおいて、該放射標識生成物が、該外来遺伝子によってタンパク質が発現された細胞内で捕捉されるために、この放射標識化合物が、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用するよう選択される使用。 32．外来遺伝子が導入された細胞集団で使用するための放射線療法で、放射標識化合物が、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用し、放射標識生成物を生成するように、放射線療法の有効量の放射標識化合物を細胞に投与する工程を含み、ここにおいて、該放射標識生成物が、該外来遺伝子によってタンパク質が発現された細胞内で捕捉されるように、該放射標識化合物が、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用するように選択された方法。 33．前記外来遺伝子によって発現されたタンパク質が、該細胞内には天然には生じない、請求項32記載の方法。 34．前記外来遺伝子が、真核又は原核細胞から選択された遺伝子である、請求項 33記載の方法。 35．前記外来遺伝子が、ウイルスから選択される、請求項33記載の方法。 36．前記外来遺伝子が、単純ヘルペスウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、水痘帯状疱疹ヘルペスウイルス及びエプスタイン・バールウイルスからなるウイルス群から選択される、請求項35記載の方法。 37．前記外来遺伝子が、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼを発現する遺伝子である、請求項36記載の方法。 38．前記放射標識化合物が、下記式を有する化合物又はその医薬として許容できる塩である、請求項37記載の方法：式（式中、X は、放射性ハロゲン置換基で、R₁は、水素、ヒドロキシル又はフッ素置換基で、R₂は、水素又はフッ素置換基で、R₃は、水素、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクロカルボニル、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、3-7Cシクロアルキルカルボニル、及び炭素原子１〜８個の直鎖又は分枝した鎖のアルキルカルボニルからなる群から選択された置換基であり、並びにR₄は、水素、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクロカルボニル、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、 3-7Cシクロアルキルカルボニル、及び炭素原子１〜８個の直鎖又は分枝した鎖のアルキルカルボニルからなる群から選択された置換基である。）。 39．前記X が、¹²³I、¹²⁵I及び¹³¹Iからなる群から選択された放射性ハロゲン置換基である、請求項38記載の方法。 40．前記X が¹³¹Iである、請求項39記載の方法。 41．前記R₁は水素、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項39記載の方法。 42．前記X が¹³¹Iである、請求項41記載の方法。 43．前記R₁は水素、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素である、請求項39記載の方法。 44．前記X が、¹³¹Iである、請求項43記載の方法。 45．前記R₁は水素、R₂はフッ素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項39記載の方法。 46．前記X が¹³¹Iである、請求項45記載の方法。 47．前記R₁は水素、R₂はフッ素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素である、請求項39記載の方法。 48．前記X が¹³¹Iである、請求項47記載の方法。 49．前記R₁はフッ素、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項39記載の方法。 50．前記X が¹³¹Iである、請求項49記載の方法。 51．前記R₁はフッ素、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素である、請求項39記載の方法。 52．前記X が¹³¹Iである、請求項51記載の方法。 53．前記R₁はヒドロキシル、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項 39記載の方法。 54．前記X が¹³¹Iである、請求項53記載の方法。 55．前記R₁はヒドロキシル、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3 - カルボニル、及びR₄は水素である、請求項39記載の方法。 56．前記X が¹³¹Iである、請求項55記載の方法。 57．前記R₃及びR₄の少なくとも一方は水素である、請求項38記載の方法。 58．前記R₄は水素である、請求項38記載の方法。 59．外来遺伝子が導入される細胞集団に関連している化学療法における化合物の使用で、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と化合物が選択的に相互作用し、生成物を生成するように、化学療法の有効量の化合物を細胞に投与することによる使用で、ここにおいて、該生成物が、該外来遺伝子によってタンパク質が発現された細胞に対して細胞毒性又は細胞分裂抑制性であるために、この化合物が、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用するよう選択される使用。 60．外来遺伝子が導入された細胞集団で使用するための化学療法で、前述の化合物が、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用し、生成物を生成するように、化学療法の有効量の化合物を細胞に投与する工程を含み、ここにおいて、該生成物が、該外来遺伝子によってタンパク質が発現された細胞に対し細胞毒性又は細胞分裂抑制性であるために、該化合物が、該外来遺伝子によって発現されたタンパク質と選択的に相互作用するように選択された方法。 61．前記外来遺伝子によって発現されたタンパク質が、該細胞内には天然には生じない、請求項60記載の方法。 62．前記外来遺伝子が、真核又は原核細胞から選択された遺伝子である、請求項 61記載の方法。 63．前記外来遺伝子が、ウイルスから選択される、請求項61記載の方法。 64．前記外来遺伝子が、単純ヘルペスウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、水痘帯状疱疹ヘルペスウイルス及びエプスタイン・バールウイルスからなる群から選択される、請求項63記載の方法。 65．前記外来遺伝子が、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼを発現する遺伝子である、請求項64記載の方法。 66．前記化合物が、下記式を有する化合物又はその医薬として許容できる塩である、請求項65記載の方法：式（式中、X は、ハロゲン置換基で、R₁は、水素、ヒドロキシル又はフッ素置換基で、R₂は、水素又はフッ素置換基で、R₃は、水素、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクロカルボニル、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、3-7Cシクロアルキルカルボニル、及び炭素原子１〜８個の直鎖又は分枝した鎖のアルキルカルボニルからなる群から選択された置換基であり、並びにR₄は、水素、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクロカルボニル、1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、3-7Cシクロアルキルカルボニル、及び炭素原子１〜８個の直鎖又は分枝した鎖のアルキルカルボニルからなる群から選択された置換基である。）。 67．前記X が、ホウ素、塩素、フッ素及びヨウ素から選択されたハロゲン置換基である、請求項66記載の方法。 68．前記X がホウ素置換基である、請求項67記載の方法。 69．前記X が塩素置換基である、請求項67記載の方法。 70．前記X がヨウ素置換基である、請求項67記載の方法。 71．前記R₁は水素、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項70記載の方法。 72．前記R₁は水素、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素である、請求項70記載の方法。 73．前記R₁は水素、R₂はフッ素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項70記載の方法。 74．前記R₁は水素、R₂はフッ素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素である、請求項70記載の方法。 75．前記R₁はフッ素、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項70記載の方法。 76．前記R₁はフッ素、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3- カルボニル、及びR₄は水素である、請求項70記載の方法。 77．前記R₁はヒドロキシル、R₂は水素、R₃は水素、及びR₄は水素である、請求項 70記載の方法。 78．前記R₁はヒドロキシル、R₂は水素、R₃は1-メチル-1,4- ジヒドロピリジル-3 - カルボニル、及びR₄は水素である、請求項70記載の方法。 79．前記R₃及びR₄の少なくとも一方は水素である、請求項66記載の方法。 80．前記R₄は水素である、請求項66記載の方法。